Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 176 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
176
Dung lượng
5,89 MB
Nội dung
Công ty Vắcxin và Sinh phẩm số 1 Báo cáo tổng kết đề tài: NghiêncứuxâydựngquytrìnhcôngnghệsảnxuấtvắcxindạitrênnuôicấytếbàoVeroởquymôphòngThínghiệm Cnđt: Đỗ Tuấn Đạt 8514 Hà nội 2010 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ABLV Lyssavirus dơi Úc (Australian Bat Lyssavirus) BPL Β-propiolactone CVS Chủng virút thử thách (Challenge Virus Standard) EBLV Lyssavirus dơi châu Âu (European Bat Lyssavirus) EP Dược điển châu Âu (European Pharmacopoeia) IU Đơn vị quốc tế (International unit) LAL Thử nghiệm xác định nội độc tố theo phương pháp LAL (Limulus amoebocyte lysate) LD 50 Liều lượng gây chết 50% (Lethal Dose) MEM Môi trường dinh dưỡng tối thiểu (Minimum Essential medium) MNA Tếbào nguyên bào thần kinh chuột (Murine Neuroblastoma cell) MOI Multiplicity of Infection MSV Chủng vi rút giống gốc (Master seed virus) NIH Viện Sức khỏe Quốc gia Hoa Kỳ (National Institute of Health) NMR Cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear magnetic resonance) PM Chủng Pitman-Moore PPLO Pleuropneumonia - like organism PV Chủng Pasteur Virus RFFIT Thử nghiệm ức chế điểm huỳnh quang nhanh (Rapid fluorescent focus inhibition test) SDS-PAGE Điện di trên gel acrylamide (Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis) TCYTTG Tổ chức Y tế thế giới (WHO) VABIOTECH Công ty Vắcxin và sinh phẩm số 1 VVSDT Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương WCB Ngân hàng tếbàosảnxuất (Working cell bank) WSV Chủng vi rút giống sảnxuất (Working seed virus) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng số Tên bảng Trang 1.1. Các loại vắcxindại thế hệ thứ nhất được sử dụng cho người và thú y 14 1.2. Các loại vắcxindạitrênnuôicấytếbào và quytrìnhsảnxuất 21 2.1. Số lượng tếbàoVero thu được qua các đời cấy chuyển trong quá trình nhân nuôitrên chai nuôicấy một lớp 49 2.2. Kết quả nuôicấy virút dại với các liều gây nhiễm khác nhau 51 2.3. Kết quả nuôicấy virút dại theo ngày sau gây nhiễm virút vào tếbào 66 2.4. Kết quả nuôicấy virút dại theo thời điểm thay môi trường duy trì tếbào khác nhau 69 2.5. Kết quả nuôicấy virút dạitrên các dạng chai nuôicấy khác nhau 72 2.6. Kết quả tinh sạch hỗn dịch virút bằng các loại màng lọc khác nhau 75 2.7. Kết quả bất hoạt virút dại bằng các phương pháp bất hoạt khác nhau 76 2.8. Kết quả cô đặc hỗn dịch virút dại theo các tỷ lệ khác nhau 78 2.9. Kết quả kiểm tra chất gây sốt trong bán thành phẩm vắcxindại 91 3.1. Kết quả nhân nuôitếbàoVero của các loạt sảnxuất thử nghiệm 95 3.2. Kết quả gây nhiễm virút dại của các loạt sảnxuất thử nghiệm 96 3.3. Kết quả nuôicấy virút dại và thu hoạch nước nổi loạt 0109 97 3.4. Kết quả nuôicấy virút dại và thu hoạch nước nổi loạt 0209 98 3.5. Kết quả nuôicấy virút dại và thu hoạch nước nổi loạt 0309 99 3.6. Kết quả tinh sạch hỗn dịch virút của các loạt sảnxuất thử nghiệm 100 3.7. Kết quả bất hoạt virút của các loạt sảnxuất thử nghiệm 101 3.8. Kết quả cô đặc hỗn dịch virút của các loạt sảnxuất thử nghiệm 101 3.9. Kết quả tinh chế virút của các loạt sảnxuất thử nghiệm 102 3.10. Kết quả pha bán thành phẩm cuối cùng của các loạt sảnxuất thử nghiệm 105 3.11. Kết quả sảnxuấtvắcxin thành phẩm của các loạt sảnxuất thử nghiệm 105 3.12. Kết quả kiểm tra chất lượng vắcxin thành phẩm tại cơ sở của các loạt sảnxuất thử nghiệmvắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero dạng đông khô (VERAPVAX) 106 3.13. Kết quả kiểm tra chất lượng vắcxin thành phẩm tại cơ sở của các loạt sảnxuất thử nghiệmvắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero dạng lỏng (VERALVAX) 107 4.1. Tiêu chuẩn cơ sở cho vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero (dạng lỏng hấp phụ nhôm) 141 4.2. Tiêu chuẩn cơ sở cho vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero (dạng đông khô) 142 5.1. Kết quả kiểm tra an toàn đặc hiệu của vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 153 5.2. Kết quả kiểm tra tính an toàn chung của vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 153 5.3. Kết quả kiểm tra chất gây sốt của vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero dạng lỏng (VERALVAX) 154 5.4. So sánh đáp ứng miễn dịch của vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero do VABIOTECH sảnxuất với vắcxin Verorab 155 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình số Tên hình Trang 1.1. Cấu trúc hạt virút dại 6 1.2. Nguồn gốc của các chủng dại cố định được sử dụng trong sảnxuấtvắcxintrênnuôicấytếbào 18 2.1. Tóm tắt quytrìnhcôngnghệsảnxuấtvắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 39 2.2. Hình ảnh tếbàoVero qua các đời cấy chuyển 41 2.3. Hình ảnh chuột liệt do chủng virút dại cố định PV 56 2.4. Hình ảnh nhiễm virút dại vào tếbàoVero dưới kính hiển vi huỳnh quang 60 2.5. Kết quả siêu ly tâm phân vùng bằng rotor zonal tinh chế virút dại 85 2.6. Hình ảnh điện di sản phẩm sau khi tinh chế virút dại theo phương pháp siêu ly tâm phân cùng bằng rotor zonal 86 2.7. Hình ảnh siêu ly tâm phân vùng bằng rotor góc cố định tinh chế virút dại 86 2.8. Hình ảnh điện di các phân đoạn sau khi tinh chế virút dại theo phương pháp siêu ly tâm phân cùng bằng rotor góc cố định 87 2.9. Phương pháp lai điểm xác định hàm lượng ADN tếbào tồn dư trong các sản phẩm của quá trìnhsảnxuấtvắcxindại 88 3.1. Xác định hàm lượng ADN tếbào tồn dư trong các sản phẩm của loạt sảnxuấtvắcxindại 0209 102 3.2. Xác định hàm lượng ADN tếbào tồn dư trong các sản phẩm của loạt sảnxuấtvắcxindại 0109 và 0309 103 3.3. Hình ảnh chạy điện di trên gel SDS-PAGE các sản phẩm của loạt sảnxuấtvắcxindại 0109 103 3.4. Hình ảnh chạy điện di trên gel SDS-PAGE các sản phẩm của loạt sảnxuấtvắcxindại 0209 và 0309 104 5.1. Sơ đồ gây miễn dịch và lấy máu chuột 146 MỤC LỤC NỘI DUNG Trang MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG 1-TỔNG QUAN 5 1.1. TỔNG QUAN VỀ BỆNH DẠI 5 1.1.1. Tác nhân gây bệnh và đặc điểm bệnh lý 5 1.1.2. Đáp ứng miễn dịch với virút dại 7 1.1.3. Tác động của bệnh dại đối với sức khỏe cộng đồng 8 1.1.4. Các khuyến cáo về tiêm phòng bệnh dại hiện nay 9 1.2. TỔNG QUAN VỀ VẮCXINDẠI 13 1.2.1. Các vắcxin thế hệ thứ nhất 13 1.2.2. Các vắcxin thế hệ thứ hai 17 1.3. QUYTRÌNHSẢNXUẤT VÀ KIỂM TRA CHẤT LƢỢNG VẮCXINDẠITRÊNNUÔICẤYTẾBÀO 20 1.3.1. Quytrìnhsảnxuấtvắcxindạitrênnuôicấytếbào 20 1.3.2. Kiểm tra chất lƣợng vắcxindạitrênnuôicấytếbào 24 1.4. ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC, TÌNH HÌNH NGHIÊNCỨU VÀ SẢNXUẤTVẮCXINDẠI TẠI VIỆT NAM 31 CHƯƠNG 2-XÂY DỰNGQUYTRÌNHCÔNGNGHỆSẢNXUẤTVẮCXINDẠITRÊNNUÔICẤYTẾBÀOỞQUYMÔPHÒNGTHÍNGHIỆM 36 2.1. QUYTRÌNHNUÔICẤY VÀ CHUẨN BỊ TẾBÀOVERO 39 2.1.1. Các thử nghiệm kiểm tra nƣớc nổi nuôicấytếbào 43 2.1.2. Thử nghiệm kiểm tra các virút hấp phụ hồng cầu 47 2.1.3. Kết quả quytrìnhnuôicấytếbàoVerotrên chai tếbào một lớp 48 2.2. QUYTRÌNH GÂY NHIỄM VIRÚT DẠI VÀO TẾBÀOVERO 49 2.3. QUYTRÌNHNUÔICẤY VIRÚT VÀ THU HOẠCH NƢỚC NỔI 53 2.3.1. Các phƣơng pháp xác định hiệu giá virút dại 54 2.3.2. Kết quả nuôicấy virút dại theo các điều kiện nhân nuôi khác nhau 65 2.4. QUYTRÌNH TINH SẠCH HỖN DỊCH VIRÚT 74 2.5. QUYTRÌNH BẤT HOẠT VIRÚT 76 2.6. QUYTRÌNH CÔ ĐẶC HỖN DỊCH VIRÚT 77 2.7. QUYTRÌNH TINH CHẾ VIRÚT 79 2.7.1. Thử nghiệm phát hiện ADN tếbàoVero tồn dƣ trong các sản phẩm của quytrình tinh chế vắcxindại bằng phƣơng pháp lai điểm 79 2.7.2. Các phƣơng pháp tinh chế virút dại 84 2.8. QUYTRÌNH PHA BÁN THÀNH PHẨM CUỐI CÙNG 89 2.9. QUYTRÌNHSẢNXUẤTVẮCXIN THÀNH PHẨM 92 CHƯƠNG 3-SẢN XUẤT THỬ NGHIỆMVẮCXINDẠIỞQUYMÔPHÒNGTHÍNGHIỆM 94 3.1. KẾT QUẢ NUÔICẤY VÀ CHUẨN BỊ TẾBÀOVERO 94 3.2. KẾT QUẢ GÂY NHIỄM VIRÚT DẠI VÀO TẾBÀOVERO 95 3.3. KẾT QUẢ NUÔICẤY VIRÚT VÀ THU HOẠCH NƢỚC NỔI 96 3.4. KẾT QUẢ TINH SẠCH HỖN DỊCH VIRÚT 100 3.5. KẾT QUẢ BẤT HOẠT VIRÚT 100 3.6. KẾT QUẢ CÔ ĐẶC HỖN DỊCH VIRÚT 101 3.7. KẾT QUẢ TINH CHẾ VIRÚT 101 3.8. KẾT QUẢ PHA BÁN THÀNH PHẨM CUỐI CÙNG 104 3.9. KẾT QUẢ SẢNXUẤTVẮCXIN THÀNH PHẨM 105 3.10. KẾT QUẢ KIỂM TRA CHẤT LƢỢNG VẮCXIN THÀNH PHẨM TẠI CƠ SỞ 105 CHƯƠNG 4 - XÂYDỰNGQUYTRÌNH KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG VÀ TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CHO VẮCXINVẮCXINDẠITRÊNNUÔICẤYTẾBÀO 109 4.1. CÁC PHƢƠNG PHÁP KIỂM TRA SINH HỌC 110 4.1.1. Phƣơng pháp kiểm tra vô khuẩn 110 4.1.2. Phƣơng pháp kiểm tra an toàn chung 113 4.1.3. Phƣơng pháp kiểm tra chất gây sốt 116 4.1.4. Phƣơng pháp kiểm tra an toàn đặc hiệu 119 4.1.5. Phƣơng pháp kiểm tra công hiệu 121 4.1.6. Thử nghiệm nhận dạng 125 4.2. CÁC PHƢƠNG PHÁP KIỂM TRA HÓA LÝ 126 4.2.1. Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng protein tổng số 126 4.2.2. Xác định pH trong vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 130 4.2.3. Định lƣợng thimerosal trong vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 131 4.2.4. Định lƣợng nhôm trong vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero dạng lỏng 134 4.2.5. Xác định độ ẩm tồn dƣ trong vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero dạng đông khô 136 4.2.6. Kiểm tra tính chất vật lý vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVero 139 5.3. XÂYDỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CHO VẮCXINDẠITRÊNNUÔICẤYTẾBÀOVERO 140 CHƯƠNG 5- ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TOÀN VÀ HIỆU LỰC VẮCXINTRÊN ĐỘNG VẬT THÍNGHIỆM 143 5.1. CÁC PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TOÀN VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA VẮCXINTRÊN ĐỘNG VẬT THÍNGHIỆM 144 5.1.1. Các phƣơng pháp đánh giá tính an toàn của vắcxintrên động vật thínghiệm 144 5.1.2. Các phƣơng pháp đánh giá đáp ứng miễn dịch của vắcxintrên chuột 144 5.2. KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TOÀN VÀ HIỆU LỰC CỦA VẮCXINTRÊN ĐỘNG VẬT THÍNGHIỆM 152 5.2.1. Tính an toàn của vắcxindạitrênnuôicấytếbàotrên động vật thínghiệm 152 5.2.2. Đáp ứng miễn dịch của vắcxindạitrênnuôicấytếbàoVerotrên động vật thínghiệm 154 KẾT LUẬN 157 KIẾN NGHỊ 160 TÀI LIỆU THAM KHẢO 161 PHỤ LỤC 1 MỞ ĐẦU Tại trên 100 nước và vùng lãnh thổ, dại là một bệnh gây dịch trên động vật. Bệnh dạiở chó là nguồn lây nhiễm chiếm đến 99% sang cho người và là nguy cơ đe dọa tính mạng trên 3,3 tỷ người, chủ yếu tại các nước châu Á và châu Phi. Cùng với chó nuôi tại nhà, nhiều giống thú ăn thịt và dơi cũng có thể làm lây truyền bệnh dại sang cho người. Khi đã có biểu hiện trên lâm sàng, phần lớn các ca bệnh dại đều tử vong do vậy việc tiêm phòng là biện pháp phòng bệnh cũng như điều trị bệnh dại cho hiệu quả cao nhất. Gần 10 triệu người được tiêm phòng sau khi phơi nhiễm hàng năm chủ yếu tại các nước châu Á. Tiêm phòngdại sau khi phơi nhiễm đã tránh được trên 300.000 ca tử vong hàng năm tại châu Á và châu Phi. Chi phí toàn cầu hàng năm cho phòng bệnh dại ước tính khoảng trên 1 tỷ đô la Mỹ. Chi phí này cũng như tỷ lệ đi tiêm phòng sau khi phơi nhiễm dự tính sẽ tăng lên một cách đáng kể khi tất cả các nước thay thế vắcxinsảnxuất từ mô thần kinh bằng vắcxintrênnuôicấytế bào. Trên 100 năm trước đây, Louis Pasteur và cộng sự đã phát triển vắcxindại thô đầu tiên để tiêm phòng sau khi phơi nhiễm dựa trên việc bất hoạt virút trênmô thần kinh. Từ đó trở đi một số loại vắcxin đã được phát triển và sử dụngtrên thế giới. Các vắcxin thế hệ thứ nhất đều sử dụngmô động vật để có được hỗn dịch chứa virút. Các vắcxin này đã được sử dụng rộng rãi để phòng bệnh cho cả người và động vật. Tuy nhiên, các vắcxin này có rất nhiều nhược điểm như còn virút sống tồn dư, hay gặp các phản ứng não tủy sau khi tiêm vắcxin và hàm lượng kháng nguyên cho một liều tiêm thấp đòi hỏi phải có một liệu trình điều trị kéo dài với một số lượng lớn các mũi tiêm. Dù đã có những cải tiến bằng cách nhân nuôi virút trên não các động vật sơ sinh trước 2 khi myelin phát triển, các vắcxin bất hoạt sảnxuấttrên não động vật chưa dứt sữa vẫn có thể gây ra các phản ứng thần kinh không mong muốn. Do vậy, các vắcxin thế hệ thứ hai sảnxuấttrênnuôicấytếbào đã ra đời nhằm khắc phục các nhược điểm của các dạng vắcxin cổ điển. Vắcxin này có tính an toàn và công hiệu cao do đó được các nước phát triển lựa chọn để tiêm phòng cho người trước và sau khi phơi nhiễm với virút. Đáp ứng miễn dịch và hiệu lực của vắcxintrênnuôicấytếbào đã được chứng minh trên động vật thínghiệm và thực địa lâm sàng trên người. Ở cả phương pháp tiêm phòng trước và sau khi phơi nhiễm, các vắcxin này đều tạo được đáp ứng kháng thể ởtrên 99% người được tiêm. Sử dụng các vắcxin thế hệ mới kết hợp với xử lý vết cắn đúng cách và tiêm phòng globulin miễn dịch kháng dại đã tạo ra hiệu quả phòng bệnh dại là 100% thậm chí cả với những trường hợp bị cắn có nguy cơ mắc bệnh cao. Do vậy việc nghiên cứu, phát triển, sảnxuất và tiến tới đưa ra sử dụng rộng rãi vắcxindạitrênnuôicấytếbào là cần thiết. Các quốc gia trên thế giới cần sớm có các chiến lược để sử dụng và triển khai rộng khắp loại vắcxin tiên tiến và cho hiệu quả cao này. Tại Việt Nam, trong những năm 1991-1995, bệnh dại là vấn đề y tếnghiêm trọng gây ảnh hưởng lớn đến sức khỏe, tính mạng và kinh tế của người dân. Bệnh xảy ra quanh năm, lưu hành ở hầu hết các tỉnh, thành phố trên cả nước. Nếu tính một người tiêm vắcxindại phí tổn 300.000 đồng (gồm tiền thuốc, công lao động, tiền đi lại…) thì trong năm 1995 cả nước tốn gần 100 tỷ đồng. Thêm vào đó, mỗi năm có trên dưới 500 người thiệt mạng do bệnh dại. Trước tình hình nghiêm trọng của bệnh dại, năm 1996, Chính phủ đã ban hành chỉ thị về việc tăng cường phòng chống bệnh dại và Bộ Y tế đã thành lập ban chỉ đạo Phòng chống bệnh dại Quốc gia. Thành công của Chương trình là đến năm 2006 số ca tử vong do bệnh dại đã giảm 81% so với năm 1995. Tuy nhiên, trong năm 2007, số ca tử vong do bệnh dại đã lại tăng [...]... phòng Hoa kỳ (CDC) trong việc cung cấp các chủng giống sảnxuấtvắcxin dại, nhóm nghiêncứu đã tiến hành các nghiêncứuở cấp cơ sở và lựa chọn ra được chủng virút PV (Pasteur Virus) và môi trường nuôicấy không huyết thanh đạt các yêu cầu cho sảnxuấtvắcxin Từ những thành công này, nhóm nghiêncứu bắt đầu tiến hành xây dựngquytrìnhcôngnghệ sản xuấtvắcxindạitrên nuôi cấytếbào Vero ởquy mô. .. 16 1.2.2 Các vắcxin thế hệ thứ hai Đây là các vắcxin được sảnxuấttrênnuôicấytếbàoVắcxin chứa virút bất hoạt sau khi nhân nuôitrên các dòng tếbào như tếbào lưỡng bội người, tếbào thận khỉ phôi thai, tếbào thận chuột đất vàng tiên phát, tếbào Vero, tếbào phôi gà… Các vắcxin này sử dụng tiêm phòng trước và sau phơi nhiễm [22], [34] Vắcxinsảnxuấttrêntếbào lưỡng bội người là vắcxin được... cấytếbào Do vậy việc nghiên cứu, phát triển, sảnxuất và tiến tới đưa ra sử dụng rộng rãi vắcxindạitrênnuôicấytếbào là cần thiết, các nước cần sớm có các chiến lược để sử dụng và triển khai rộng khắp để tiêm phòng loại vắcxin tiên tiến và có hiệu quả cao này [22], [55] 1.3 QUYTRÌNHSẢNXUẤT VÀ KIỂM TRA CHẤT LƢỢNG VẮC XIN DẠITRÊNNUÔICẤYTẾBÀO 1.3.1 Quytrìnhsảnxuấtvắcxindạitrênnuôi cấy. .. nguyên phát; FBKC: Tếbào thận bào thai bê nguyên phát; PCEC: Tếbào phôi gà nguyên phát; TNBP: Tri(n)-butyl-phosphate Các bước chính của quytrìnhsảnxuấtvắcxindạitrênnuôicấytếbàobao gồm: - Nhân nuôitế bào: Chai nuôicấytếbào một lớp hoặc hệ thống lăn chai (roller bottle) là một trong những giải pháp được sử dụng để nhân nuôitếbào Để tăng hiệu suất và mở rộng quymôsản xuất, các chai khuấy... tài 1 Xâydựng được qui trìnhcôngnghệ ổn định sảnxuấtvắcxindạitrênnuôicấytếbàoVeroở qui môphòngthínghiệm 2 Sảnxuất được các loạt vắcxindại có chất lượng đạt yêu cầu của Tổ chức Y tế thế giới và tương đương với các vắcxin cùng loại của nước ngoài như vắcxin Verorab của Aventis Pasteur 4 CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ BỆNH DẠI 1.1.1 Tác nhân gây bệnh và đặc điểm bệnh lý Virút dại. .. môphòngthínghiệm Với kinh nghiệmtrên 30 năm sảnxuất và kiểm định chất lượng vắcxindạisảnxuấttrên não chuột ổ, cùng với những kinh nghiệm và thành công trong việc phát triển các vắcxin mới, VABIOTECH đưa ra các mục tiêu và nội dung trong Đề tài nghiêncứu này với mong muốn sớm có được sản phẩm vắcxindạitrênnuôicấytếbào đạt tiêu chuẩn được sảnxuất tại Việt Nam Các mục tiêu nghiên cứu. .. triển [30] Các vắcxintrênnuôicấytếbào đều sử dụng các virút cố định thuộc genotype 1 [36] Nguồn gốc của các chủng virút dại cố định chính được sử dụng để sảnxuấtvắcxintrên nuôi cấytếbào được trình bày trong Hình 1.2 Đáp ứng miễn dịch và hiệu quả cả vắcxintrên nuôi cấytếbào được chứng minh qua các nghiêncứutrên động vật thínghiệm và các đánh giá lâm sàng trên người Đối với cả phòng trước... nhà sảnxuất tùy thuộc vào sản phẩm, tếbào và chủng virút Kiểm tra chất lượng quá trìnhsảnxuấtvắcxin Kiểm tra nuôi cấytếbào Các thử nghiệm kiểm tra nuôicấytếbàobao gồm: - Thử nghiệm về virút hấp phụ hồng cầu - Thử nghiệm về tác nhân ngoại lai trong dung dịch nuôicấytếbào - Thử nghiệm nhận dạng (dòng tế bào) Kiểm tra mẻ gặt virút đơn và bán thành phẩm tinh chế - Thử nghiệm vô khuẩn trên. .. Dạiở chó Dạiở người > 1500 lần cấy chuyển Não thỏ Não thỏ Não chuột Não gà Argentina Pháp (Paris) 1965 Tếbào thận chuột đất vàng Mỹ - K.Habel 1940 Não thỏ Não thỏ NuôicấytếbàoVeroNuôicấytếbàoVero Phôi gà Phôi gà Nuôicấytếbào phôi gà Nuôicấytếbào thận chuột đất vàng SAD PV PM Beijing-31 Vnukovo-32 Flury HEP/LEP Hình 1.2 Nguồn gốc của các chủng dại cố định đƣợc sử dụng để sảnxuất vắcxin. .. vắcxintrênnuôicấytếbào 18 Kinh nghiệm 20 năm (1985-2005) sử dụng một trong các vắcxindạitrênnuôicấytế bào, vắcxin Verorab, đã cho thấy vắcxin an toàn và cho hiệu quả phòng bệnh dại cao [45] Trên 40 triệu liều vắcxin Verorab đã được tiêm tại trên 100 quốc gia Không có phản ứng không mong muốn nghiêm trọng nào do vắcxin Verorab được báo cáo trong thử nghiệm lâm sàng trên 3937 đối tượng và vắcxin . NGHIÊN CỨU VÀ SẢN XUẤT VẮCXIN DẠI TẠI VIỆT NAM 31 CHƯƠNG 2-XÂY DỰNG QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VẮCXIN DẠI TRÊN NUÔI CẤY TẾ BÀO Ở QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM 36 2.1. QUY TRÌNH NUÔI CẤY. thành công này, nhóm nghiên cứu bắt đầu tiến hành xây dựng quy trình công nghệ sản xuất vắcxin dại trên nuôi cấy tế bào Vero ở quy mô phòng thí nghiệm. Với kinh nghiệm trên 30 năm sản xuất và. Công ty Vắcxin và Sinh phẩm số 1 Báo cáo tổng kết đề tài: Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất vắcxin dại trên nuôi cấy tế bào Vero ở quy mô phòng Thí nghiệm