Phân lập xanthon từ phân đoạn 6, cao etyl acetat của cành cây bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN QUÁCH THANH TÂM PHÂN LẬP XANTHON TỪ PHÂN ĐOẠN 6, CAO ETYL ACETAT CỦA CÀNH CÂY BỨA LÁ TRÒN DÀI (Garcinia oblongifolia) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỮU CƠ Mã số: 60 44 27 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS. NGUYỄN DIỆU LIÊN HOA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2012 LỜI CẢM ƠN Qua quá trình thực hiện luận văn này, tôi xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến: PGS. TS. Nguyễn Diệu Liên Hoa, đã luôn nhiệt tình hướng dẫn và tạo mọi điều kiện tốt nhất cho tôi hoàn thành luận văn này. Các thầy cô trong Bộ môn Hóa Hữu cơ đã tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức cho chúng tôi trong suốt quá trình học tập. Các anh chị Phòng Thí nghiệm Hợp chất Tự nhiên và Hóa dược cùng các anh chị cao học, các bạn cùng khóa, các em sinh viên cùng gia đình tôi đã hỗ trợ, giúp đỡ tôi trong suốt thời gian qua. Quách Thanh Tâm MỤC LỤC Trang 1. MỞ ĐẦU 1 2. TỔNG QUAN 2 2.1. Giới thiệu về họ Măng cụt 2 2.2. Giới thiệu về chi Garcinia 2 2.2.1. Đặc điểm thực vật 2 2.2.2. Công dụng 2 2.2.3. Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học 3 2.3. Bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia) 12 2.3.1. Đặc điểm thực vật 12 2.3.2. Công dụng 13 2.3.3. Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học 13 3. NGHIÊN CỨU 16 3.1. Giới thiệu chung 16 3.2. Kết quả và bàn luận 16 3.2.1. Cowanin (69) 16 3.2.2. Oblongixanthon D (70) 19 3.2.3. Oblongixanthon C (65) 23 3.2.4. Oblongixanthon E (71) 27 3.2.5. Isocowanin (72) 30 3.2.6. 6-O-Demetyloliverixanthon (73) 33 3.2.7. Oblongixanthon F (74) 35 3.2.8. Oblongixanthon G (75) 39 3.3. Thực nghiệm 42 3.3.1. Thu hái mẫu và điều chế cao 42 3.3.2. Phân lập chất 42 4. KẾT LUẬN 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 PHỤ LỤC PHỔ CÁC CHỮ VIẾT TẮT s: singlet, mũi đơn d: doublet, mũi đôi t: triplet, mũi ba q: quartet, mũi bốn sext: sextet, mũi sáu sept: septet, mũi bảy m: multiplet, mũi đa br: broad, rộng sh: shouldder (trong phổ UV) SKC: Sắc kí cột SKBM: Sắc kí bản mỏng RP: Reversed Phase, pha đảo UV: Ultra Violet, tử ngoại NMR: Nuclear Magnetic Resonance, cộng hưởng từ hạt nhân HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation HRESIMS: High Resolution Electron Impact Mass Spectroscopy DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Số liệu phổ 1 H (500 MHz) và 13 C NMR (125 MHz) của Trang cowanin (69) trong CDCl 3 18 Bảng 3.2 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của oblongixanthon D (70) trong CDCl 3 22 Bảng 3.3 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của oblongixanthon C (65) trong aceton-d 6 26 Bảng 3.4 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của oblongixanthon E (71) trong aceton-d 6 29 Bảng 3.5 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của isocowanin (72) trong aceton-d 6 32 Bảng 3.6 Số liệu phổ 1 H (500 MHz) và 13 C NMR (125 MHz) của 6-O- demetyloliverixanthon (73) trong CDCl 3 . 34 Bảng 3.7 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của oblongixanthon F (74) trong CDCl 3 . 38 Bảng 3.8 Số liệu phổ 1 H (500 MHz), 13 C NMR (125 MHz) và t ươ ng quan HMBC của oblongixanthon G (75) trong CDCl 3 . 41 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1 Hình cây, hoa và quả bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia Champ.) 12 Hình 3.1 Tương quan HMBC trong oblongixanthon D (70) 20 Hình 3.2 Tương quan HMBC trong trong oblongixanthon C (65) 24 Hình 3.3 Tương quan HMBC trong oblongixanthon E (71) 28 Hình 3.4 Tương quan HMBC trong isocowanin (72) 31 Hình 3.5 Tương quan HMBC trong oblongixanthon F (74) 36 Hình 3.6 Tương quan HMBC trong oblongixanthon G (75) 40 Hình 3.7 Sơ đồ phân lập 65, 70-72 và 74 từ phân đoạn LTD6.5 43 Hình 3.8 Sơ đồ phân lập 73 và 75 từ phân đoạn LTD6.8 44 Hình 3.9 Sơ đồ phân lập 69 từ phân đoạn LTD6.9 44 DANH MỤC PHỤ LỤC PHỔ Phụ lục 1. Phổ 1 H NMR của cowanin (69) Phụ lục 2. Phổ 13 C NMR của cowanin (69) Phụ lục 3. Phổ UV của oblongixanthon D (70) Phụ lục 4. Phổ HREISMS của oblongixanthon D (70) Phụ lục 5. Phổ 1 H NMR của oblongixanthon D (70) Phụ lục 6. Phổ 13 C NMR của oblongixanthon D (70) Phụ lục 7. Phổ HSQC của oblongixanthon D (70) Phụ lục 8. Phổ HMBC của oblongixanthon D (70) Phụ lục 9. Phổ 1 H NMR của oblongixanthon C (65) Phụ lục 10. Phổ 13 C NMR của oblongixanthon C (65) Phụ lục 11. Phổ HSQC của oblongixanthon C (65) Phụ lục 12. Phổ HMBC của oblongixanthon C (65) Phụ lục 13. Phổ UV của oblongixanthon E (71) Phụ lục 14. Phổ HREISMS của oblongixanthon E (71) Phụ lục 15. Phổ 1 H NMR của oblongixanthon E (71) Phụ lục 16. Phổ 13 C NMR của oblongixanthon E (71) Phụ lục 17. Phổ HSQC của oblongixanthon E (71) Phụ lục 18. Phổ HMBC của oblongixanthon E (71) Phụ lục 19. Phổ 1 H NMR của isocowanin (72) Phụ lục 20. Phổ 13 C NMR của isocowanin (72) Phụ lục 21. Phổ HSQC của isocowanin (72) Phụ lục 22. Phổ HMBC của isocowanin (72) Phụ lục 23. Phổ 1 H NMR của 6-O-demetyloliverixanthon (73) Phụ lục 24. Phổ 13 C NMR của 6-O-demetyloliverixanthon (73) Phụ lục 25. Phổ UV của oblongixanthon F (74) Phụ lục 26. Phổ HREISMS của oblongixanthon F (74) Phụ lục 27. Phổ 1 H NMR của oblongixanthon F (74) Phụ lục 28. Phổ 13 C NMR của oblongixanthon F (74) Phụ lục 29. Phổ HSQC của oblongixanthon F (74) Phụ lục 30. Phổ HMBC của oblongixanthon F (74) Phụ lục 31. Phổ UV của oblongixanthon G (75) Phụ lục 32. Phổ HREISMS của oblongixanthon G (75) Phụ lục 33. Phổ 1 H NMR của oblongixanthon G (75) Phụ lục 34. Phổ 13 C NMR của oblongixanthon G (75) Phụ lục 35. Phổ HSQC của oblongixanthon G (75) Phụ lục 36. Phổ HMBC của oblongixanthon G (75) 1. MỞ ĐẦU Việc phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất từ nguồn tự nhiên, đặc biệt từ thảo dược, là giai đoạn đầu tiên quan trọng trong quá trình tìm kiếm hoạt chất để chữa bệnh. Họ Măng cụt (Guttiferae) là một họ thực vật lớn được tìm thấy phổ biến ở các nước miền nhiệt đới, trong đó có Việt Nam. Cây bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia) là một loài thuộc chi Garcinia, là chi lớn nhất của họ Măng cụt, được sử dụng trong dân gian để trị nhiều loại bệnh [1, 2]. Trong đề tài này chúng tôi phân lập và xác định cấu trúc cá hợp chất tự nhiên có trong cành cây bứa lá tròn dài (G. oblongifolia) nhằm khảo sát thành phần hóa thực vật của cây này và cung cấp mẫu chất cho các nghiên cứu về hoạt tính sinh học sau này. 2. TỔNG QUAN 2.1. Giới thiệu về họ Măng cụt Họ Măng cụt còn gọi là họ Bứa (Guttiferae hay Clusiaceae) gồm khoảng 50 chi với hơn 1350 loài. Ngoại trừ chi Hypericum được tìm thấy ở các vùng ôn đới, các chi khác được tìm thấy ở vùng nhiệt đới nóng và ẩm như Nam Á và Đông Nam Á, một số ít mọc ở Nam Mỹ và Châu Phi. Chúng có thể là đại mộc, tiểu mộc hay bụi nhỏ, có đặc điểm là thường tiết ra chất nhựa màu vàng hay màu trắng [3]. Theo GS. Phạm Hoàng Hộ, ở Việt Nam có khoảng 62 loài phân bố rải rác khắp đất nước [1]. 2.2. Giới thiệu về chi Garcinia 2.2.1. Đặc điểm thực vật Chi Garcinia gồm các cây thân mộc hoặc thân bụi, thường có mủ màu vàng. Lá mọc đối hiếm khi mọc vòng, lá nhẵn thường không có lông; gân lá phụ thường nhô lên, có thể nhiều hoặc ít, không đối xứng thẳng góc với gân lá chính; các gân lá nhỏ hơn tạo thành hình mạng lưới với mạch dẫn nhựa màu nâu ở mặt trên hướng về trục lá và mặt dưới lá; cuốn lá thường có dạng bẹ; hoa mọc thành chùm hoặc riêng lẻ [4]. Garcinia là chi lớn nhất của họ Bứa (Guttiferae) với khoảng 450 loài, hầu như chỉ phân bố ở vùng xích đạo Châu Phi, Madagascar, vùng nhiệt đới Châu Á, Đông Bắc nước Úc, miền Tây của Polynesia, vùng nhiệt đới của Châu Mỹ; ở Trung Quốc có 20 loài (13 loài đặc hữu, các loài còn lại là ngoại lai) [4]. Theo GS. Phạm Hoàng Hộ, chi Garcinia ở Việt Nam cũng là chi lớn nhất với 29 loài [1]. 2.2.2. Công dụng Một số loài được sử dụng trong các bài thuốc dân gian giúp trị bón, ăn không tiêu, nhiễm khuẩn ngoài da, tiêu chảy, kiết lị. Lá của một số loài có vị chua chua như tai chua (G. cowa) có thể dùng nấu canh chua. Bứa đồng (G. schomburgkiana) trị ho và rối loạn kinh nguyệt. Mủ cây vàng nghệ (G. handburyi) dùng nhuộm vàng. Đặc biệt là [...]... học cao etyl acetat của cành cây bứa lá tròn dài G oblongifolia Champ thu hái ở Lâm trường Sông Kôn Bằng phương pháp SKC, chúng tôi đã phân lập được tám hợp chất từ phân đoạn 6 của cao etyl acetat Dựa vào các kết quả phân tích phổ nghiệm, chúng tôi xác định được các hợp chất này là cowanin (69), oblongixanthon D (70), oblongixanthon C (65), oblongixanthon E (71), isocowanin (72), 6-O-demetyloliverixanthon... Cuống lá dài 1 cm Hoa đơn tính khác gốc, hoa đực mọc thành cụm 3-4 hoa ở nách lá, hoa cái mọc ở nách lá hoặc đầu cành Quả mập hình cầu, đường kính 3 cm, khi chín màu vàng Mùa hoa tháng 3, quả chín tháng 6-7 [1,2] Hình 2.1 Hình cây, hoa và quả bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia Champ.) 2.3.2 Công dụng Vỏ, rễ, lá cây bứa lá tròn dài được dùng trong y học cổ truyền để trị loét dạ dày, tá tràng Dùng ngoài... (51-54) từ lá cây G brevipedicellata vào năm 2008 [20] Nhóm hợp chất này trước đây chỉ được tìm thấy trong địa y và nấm nhưng các despsidon trong chi Garcinia có kiểu mẫu oxygen hóa tương tự xanthon tìm thấy trong chi Garcinia và thường xuất hiện thêm các đơn vị C 5 O O R O O OH OCH3 51 R = OH 52 R = H O O HO O O HO O O OH OCH3 O 53 OH OCH3 HO 54 2.3 Bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia) Bứa lá tròn dài. .. chuyển hóa học của C-8a (δC 112.3) carbon duy nhất còn lại trong phân tử (δC 149.0) là C-10a Vậy hợp chất này là (E)-1,5,6-trihydroxy-3-metoxy-4-(3,7-dimetyl-2,6-octadienyl)8-(3-metyl-2-butenyl )xanthon hay oblongixanthon C (65), đã được phân lập trước đây từ vỏ cây G oblongifolia vào năm 2009 [23] Tương quan HMBC của 65 được biểu diễn trong Hình 3.2 Số liệu phổ 1H, NMR và tương quan HMBC của 65 được trình... [21] 2.3.3 Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học Các nghiên cứu trước đây cho thấy cây bứa lá tròn dài chứa chủ yếu xanthon và benzophenon Ngoài ra còn có một số hợp chất phenol khác [21-23] Năm 20 06, Hamed và cộng sự khảo sát thành phần hóa học của vỏ cây thu hái tại huyện Như Xuân, Thanh Hóa, Việt Nam Nhóm đã phân lập được 7 hợp chất trong đó có 4 benzophenon polyisoprenyl hóa mới là oblongifolin... O OH 13 12 Năm 2010, Zhao và cộng sự phát hiện một dẫn xuất xanthon có hoạt tính kháng oxy hóa là 1,3,6-trihydroxy-2,5-bis(3-metylbut-2-enyl)-6′,6′-dimetyl-4′,5′- dihydropyrano[2′,3′:7,8 ]xanthon (14) từ vỏ trái măng cụt [9] O OH O HO O OH 14 Ba xanthon là polyanxanthon A (15), B (16) và C (17) được Louh và cộng sự tìm thấy từ cao metanol gỗ cây G polyantha vào năm 2008 [10] O O O O O O O O O 15 O 16... metyl gắn vào C-18 xuất hiện ở vùng từ trường cao (δC 16.5, C-24) cho thấy nối đôi C-17/C-18 trong nhóm geranyl có cấu hình E (Nếu nối đôi này có cấu hình Z, độ dịch chuyển hóa học của C-24 là δC ~25-26) Vậy hợp chất trên là (E)-1,3 ,6,7 -tetrahydroxy-2,8-di(3-metyl-2-butenyl)-5-(3,7dimetyl-2,6-octadienyl )xanthon (70) Đây là một hợp chất mới và chúng tôi đặt tên là oblongixanthon D Tương quan HMBC của. .. Champ., thuộc họ Măng cụt hay họ Bứa (Guttiferae hay Clusiaceae) 2.3.1 Đặc điểm thực vật Cây gỗ nhỏ cao 8-10 m, đường kính 20-25 cm Vỏ nâu đen, nhẵn Tán hình tháp, cành thường thẳng góc với thân chính, cành non xanh lục, thường vuông, không phủ lông Lá đơn mọc đối, hình trái xoan dài 5-7 cm, rộng 1-2 cm, đầu và đuôi nhọn; phiến lá dày, nhẵn, không rõ gân, có vị chua Cuống lá dài 1 cm Hoa đơn tính khác gốc,... (32-35) được tìm thấy từ lá cây G paucinervis [15] OH HO O R O 1 R 2 32 O OH 33 O R1 Me OH Me R 2 H OH HO OH O HO O O O O O O O O 35 34 OH OH Biflavonoid Flavonoid ít gặp nhưng biflavonoid khá phổ biến Từ lá cây G spicata, Gunatilaka và cộng sự phân lập được ba garcinia biflavonoid là GB-1 (36), GB-1a (37) và GB-2a (38) [16] Ngoài ra, manniflavanon (39) cũng được tìm thấy trong vỏ cây G mannii [17] OH... kháng HIV Mười hai dẫn xuất xanthon gồm β-mangostin (2), α-mangostin (3), 9hydroxycalabaxanthon (4), mangostanol (5), garcinon D (6), γ-mangostin (7), cudraxanthon (8), 8-deoxygartanin (9), gartanin (10), smeathxanthon A (11), mangostenon F (12) và mangostenon G (13) đã được phân lập từ vỏ trái măng cụt (G mangostana) Các hợp chất này có hoạt tính ức chế neuraminidase với smeathxanthon A (11), γ-mangostin . MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN QUÁCH THANH TÂM PHÂN LẬP XANTHON TỪ PHÂN ĐOẠN 6, CAO ETYL ACETAT CỦA CÀNH CÂY BỨA LÁ TRÒN DÀI (Garcinia oblongifolia) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH:. G (75) 40 Hình 3.7 Sơ đồ phân lập 65, 70-72 và 74 từ phân đoạn LTD6.5 43 Hình 3.8 Sơ đồ phân lập 73 và 75 từ phân đoạn LTD6.8 44 Hình 3.9 Sơ đồ phân lập 69 từ phân đoạn LTD6.9 44 DANH MỤC. OCH 3 HO 54 2.3. Bứa lá tròn dài (Garcinia oblongifolia) Bứa lá tròn dài có tên khoa học là Garcinia oblongifolia Champ., thuộc họ Măng cụt hay họ Bứa (Guttiferae hay Clusiaceae). 2.3.1. Đặc điểm thực vật Cây