Khảo sát thành phần hóa học cao cloroform và etyl acetat của cây an điền hedyotis linleyana hook , họ cà phê rubiaceae

ền Lindley Hedyotis lindleyana Hook, họ ỉ sáu oleanolic acid (LC1), ursolic acid (LC2), teneoside D (LC3), Sodium salt of deacetylasperulosidic acid (LC4), Sodium salt of 6-O-methyldeacetylasperulosidic acid (LC5) 6β-Hydroxygeniposide (LC6) Hedyotis tiên hi n di n H lindleyana Ngoài ra, h p ch t LC5 h p ch t C u trúc hóa học h p ch ịnh bằ ổ nghi m hi ại so sánh với d li u phổ NMR tài li u tham khảo ABSTRACT From the whole plant of Hedyotis lindleyana Hook, collected at Gia Hiep, Di Linh district, Lam Dong Province, six compounds were isolated including: oleanolic acid (LC1), ursolic acid (LC2), teneoside D (LC3), Sodium salt of deacetylasperulosidic acid (LC4), Sodium salt of 6-O-methyldeacetylasperulosidic acid (LC5) and 6βHydroxygeniposide (LC6) Although these compounds were already known in some species of Hedyotis genus, but this is the first time they were confirmed in Hedyotis lindleyana Moreover, LC5 is a new compound The chemical structure of these compounds was elucidated by spectroscopic methods as well as comparison of their NMR data with the published ones in the literature TÓ TẮT DANH Á TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU DANH Á H NH NH N I U U HƯ N HƯ N T N TH UAN Hedyotis Hedyotis N HIỆ 18 18 2.1.1 18 18 18 cao 19 22 U 25 LC1 25 LC …… 27 3.3 LC3… 30 3.4 LC4… 32 3.5 LC5…… 35 3.6 LC6… 38 KẾT LU N 45 nh 47 hương N HI N hương ng TÀI IỆU THA H ng KH U VÀ KẾT c A điền Lindley Hedyotis lindleyana ook ex ar …… o i ro B ng 1.1 c i Hedyotis…………………………… r điề c r c c c i c m t s thu c thu c chi Hedyotis……… o c c o i cao c c Hedyotis lindleyana………… 20 cao c oro or ………………… 21 Thành phần hóa h c m t s Hedyotis đư c công b ………… đư c so với cao methanol B ng 2.1 Kh i ng thu su t lo i cao ba đầu……………………………………………………………… 19 i c i LC2 o i LC3 o LC1 o ới acid oleanolic …… 26 ới acid ursolic ………………… 28 với teneoside D………………… 31 i LC4 so sánh ới i a ri deacetylasperulosidic acid …………………………………………… 34 B ng 3.5 i B ng 3.6 i ph LC5………………………………………… 37 NMR LC6 So sánh với 6β-Hydroxygeniposide …… 39 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU s: mũi đơn (singlet) d: mũi đôi (doublet) dd: mũi đôi đôi (doublet-doublet) t: mũi ba (triplet) m: mũi đa (multiplet) brs: mũi đơn rộng br d: mũi đôi rộng (broad doublet) br s: mũi đơn rộng (broad singlet) J: số ghép spin NMR: phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarization Transfer COSY: phổ tương quan 1H -1H (H-H Correlation Spectroscopy) HSQC: tương quan 1H -13C qua nối (Heteronuclear Single Quantum Correlation) HMBC: tương quan 1H -13C qua 2, nối (Heteronuclear Multiple Bond Coherence) HR-MS: khối phổ độ phân giải cao (High Resolution - Mass Spectroscopy) DMSO: DiMethyl SulfOxide MỞ ĐẦU Ngày nay, với tiến vượt bậc ngành khoa học kĩ thuật nói chung, ngành hóa học góp phần không nhỏ vào phát triển nhằm phục vụ đời sống người tốt Các nhà hóa học tổng hợp nhiều loại hợp chất chữa trị nhiều loài bệnh khác Tuy nhiên, loại thuốc thường đắt tiền số chúng có tác dụng phụ, u hướng quay với y học cổ truyền, sử dụng thảo mộc làm thuốc trị bệnh iệt am có nguồn thực vật đa dạng phong phú ưu lớn nhà nghiên cứu hóa học hợp chất thiên nhiên Hiện nay, nhân dân ta dùng số thuộc chi Hedyotis, họ Cà phê (Rubiaceae) làm thuốc chữa rắn cắn, suy nhược thần kinh, đau dày, ương cốt, bệnh viêm nhiễm, trị ung thư … Các nghiên cứu hóa học cho thấy thuộc chi thường chứa sterol, triterpen, anthraquinone, iridoid … hợp chất có iên quan đến dược tính trình bày Cây An điền Lindley Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn loài thuộc chi Hedyotis, nhiên, chưa có công trình công bố dược tính thành phần hóa học Chính thế, việc tìm hiểu nghiên cứu thành phần hóa học dược tính Hedyotis lindleyana s àm tăng giá trị ứng dụng vào thực tế sống góp phần àm phong phú hiểu biết hóa thực vật, dược tính thuộc chi Hedyotis qu Hedyotis lindleyana H 1.1 T n qu n v NG T NG QU N Hedyotis Chi Hedyotis có khoảng 150 loài, chủ yếu mọc vùng có khí hậu nhiệt đới ấm áp Chúng thường có thân thảo, vuông, cao từ 30-85 cm Lá nhỏ, phiến hẹp, có gân giữa, gân phụ không rõ Hoa màu trắng hay vàng, mọc thành cụm nách hay đỉnh nhánh Các loài thuộc chi Hedyotis thường mọc sân vườn, bình nguyên Việt Nam, chủ yếu Hedyotis diffusa Willd, Hedyotis corymbosa (L.) Lam, Hedyotis nigricans L [1] 1.1.1 M t t v t Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn gọi n n lindley[2] thuộc chi Hedyotis, họ Cà phê (Rubiaceae) Cỏ đa niên b , có r mắt; thân có c nh tr n, có lông theo hàng Lá có phiến oan, nhọn hay tà hai đ u, gân phụ c p l i m t dưới, cu n ngắn, bẹ nhọn Chụm dày nách, hoa ch 4, vành tai nhọn, ng có lông cổ ế tr n Cây mọc phân b rộng r i từ mi n ắc đến Huế, vùng đ ng b ng H n 1.1 Hình n n Lindley Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn qu Hedyotis lindleyana Hedyotis biflora (L.) Hedyotis corymbosa (L.) Lam Hedyotis diffusa Willd Hedyotis caerulea (L.) Hook Hedyotis centranthoides Hedyotis coriacea Sm Hedyotis crassifolia L Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth H n 1.2 Hình ảnh s loài chi Hedyotis qu Hedyotis lindleyana 1.2 N n uv tn o dư c tính n n Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn chưa đư c nghiên c u nên ph n này, dư c tính s loài chi Hedyotis s đư c trình bày Bảng 1.1 B ng 1.1 Ho t tính sinh học s thu c thuộc chi Hedyotis Loà ây Hedyotis H auricularia L.[4] D tn Thanh nhiệt, giải độc, làm giảm đau, … Ứn ụn (đ u trị) Cảm m o, phát s t, đau họng, viêm ruột, viêm mủ da, mụn nhọt, rắn rết cắn, H biflora (L.) Lam.[4],[17] Vị đắng, tính mát, nhiệt, giải độc, Rắn cắn, đau bao tử, … H capitellata var mollis Pierre e Pit.[3] Vị ngọt, nhiệt, giải độc, tiêu viêm, Lở loét miệng lưỡi, loét d dày, tá tràng, viêm họng, vết thương nhanh lên da non, H corymbosa (L.) Lam[5],[8] Thanh nhiệt, tiêu viêm, l i tiểu, tiêu sưng, Rắn cắn, sởi, s t, th n kinh suy c, bệnh gan, giun, viêm phế quản, đau nh c ương c t, thấp khớp, mụn nhọt, H diffusa Willd[20],[21],[22] Kháng sinh, kháng ung thư, kháng protease HIV-1 Viêm đường tiểu, đường ruột, d dày, tá tràng, s t, sởi, thủy đậu, sỏi thận, ung thư (gan, cổ tử cung, phổi), … H hedyotidea ( C) Hand Marr.[4] Kháng ung thư Cảm l nh, viêm nhi m, … H herbacea L.[4] Thanh nhiệt, tiêu viêm, … Viêm ruột thừa, viêm gan, rắn cắn, amidal, s t, s t rét, tê thấp, hen suy n, lao phổi, … H heynii R r.[11] Thanh nhiệt, giải độc, … Viêm gan, viêm đường tiết niệu, rắn độc cắn, ung thư, ban, trái, mẩn ng a, … H pinifolia Wall ex G Don.[6] Tiêu sưng, giảm đau, … Đau nh c, tổn thương da, … H scandens Roxb.[6] Giảm đau, kháng viêm, … Đau mắt, bong gân, r i lo n sau sinh con, viêm khí quản, viêm phổi, phổi kết h ch, viêm oang miệng, … qu Hedyotis lindleyana 1.3 N n uv tr n m t s ây t u Hedyotis Tương tự, nay, chưa có nghiên c u v thành ph n hóa học n n Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn Chính thế, thành ph n hóa học s loài chi Hedyotis s đư c trình bày ảng 1.2 loài chi có đ c tính Hóa thực vật n 1.2 Thành ph n hóa học s Hedyotis đ đư c công b Loà ây Hedyotis H acutangula [4] Champ e enth H affinni.[4] H T àn p ần Stigmasterol ( ), β-sitosterol (4), ursolic acid ( 4), oleanolic acid (24), olean-12-en-3,28,29-triol (25), tara erol (40) Serotonin ( 04) auricularia L.[3],[23] , 4, Stigmasterol 3-O-β- -glucopyranoside (6), ( 4), (25), naringenin (65), 3,7,2’,4’-tetrametho y-5-hydro yflavone (69), auricularin ( 0), ethyl 1-O-β- -galactopyranoside ( 3), 6’-O1’- (1-hydroxymethyl-2-hydroxy-1-methoxy)ethyl desoxyglucopyranoside (116), 2-formyl-5-hydro ymethylfuran ( 23) H biflora (L.) Lam[7] Stigmast-3,5,6-triol glucopyranoside (5), (3), (6), (4), -sitosterol γ-sitosterol (9), 3-O-- ( 4), (24), sumaresinolic acid (27), spergulacin (41), 1,5,6-trimethoxy-2hydroxyantraquinone (53), philonotisflavone 7-O-[4’’’’-O-β- galactopyranosyl]-β- -glucopyranoside (64), quercetin (68), rutin (75), protopin ( ), 1-ethoxy-2-L-arabinopyranosyl-3- D-glucopyranosylpropan (118) H capitellata mollis Pierre var e Hedyocapitin ( 05), capitellin ( 06), (–)-isocyclocapitellin ( 07), (+)-cyclocapitellin ( 08), isochrisotricin ( 09) Pit.[24] H Asperulosidic acid (79), asperuloside (81), deacetylasperuloside chrysotricha.[25],[26],[27] (82), deacetylasperulosidic acid (85), asperulosidic acid ethyl ester (87), acetylscandosic acid methyl ester (88), scandosic acid methyl ester (89), hedyoside (99), 6’-acetylasperuloside (100), qu Hedyotis lindleyana 6’-acetyldeacetylasperuloside (101) H corymbosa (L.) [6],[28],[29] Lam (1), (9), (14), (24), (79), 6-Hydroxygeniposide (80), (81), (82), 10-O-benzoylasperulosidic acid methyl ester (84), (85), geniposide 86), (89), 10-O-benzoylscandosic acid methyl ester (90), 10-O-p-hydroxybenzoylscandosic acid methyl ester (94), 10-O-p-coumaroylscandosic acid methyl ester (95) H crassifolia [9] C (5), 3,13β- ihydro yurs-11-en-28-oic acid ( 7), 3β- hydro yurs-11-en-28(13)-lactone (20) and (27) H dichotoma Koen (22E)-5-Stigmasta-7,22-dien-3β-ol (2), (22E)-5α-stigmasta- E Roth.[10],[30] 7,22-dien-3-O-β- -glucopyranoside 7, (22E)-5α-poriferasta- 7,22-dien-3-O-β- -glucopyranoside 3-O-[-L- (8), rhamnopyranosyl-(1→4)-- -glucopyranosyl-(1→3)--Larabinopyranosyl]-30-norolean-12,20(29)-dien-28-oic acid (38), 1,4-dihydro y-2,3-dimetho yanthraquinone (47), 9-hydro y-2,3dimetho y-1,4-anthraquinone benzoquinone (56), (55), 2,5-dimetho y-1,4- -(+)-pinitol ( 5), (6R,9S)-roseoside ( 9), 4-hydro y-3-metho ybenzoic acid ( 27) ( ), H diffusa Willd.[4] (4), (5), (9), methylanthraquinone ( 4), (24), (45), metho yanthraquinone 2,3- imetho y-6- 3-hydro y-2-methyl-1- (46), kaempferol 3-O-[β- - galactopyranosyl-(1→6)-β- -glucopyranoside] (74), quercetin 3O-[β- -galactopyranosyl-(1→6)-β- -glucopyranoside] (76), quercetin 3-O-[(6-O-E-feruloyl)-β- -glucopyranosyl-(1→6)]-β-glucopyranoside 77, quercetin 3-O-[(6-O-E-feruloyl)-β- galactopyranosyl-(1→6)]-β- -glucopyranoside (78), (82), 6-O-pcoumaroylscandosic acid methyl ester (9 ), 6-O-(p- meto ycinamoyl)scandosic acid methyl ester (92), 6-O-Eferuloylscadosic acid methyl ester (93) H hedyotidea ( C.) Hand Marr.[31] H herbacea L.[32] (79), (80), (8 ), (82), Hedyotoside (98) α- myrin ( 2), ( 4), hydro ymethylanthraquinone (24), (47), (48), 1,4-dihydro y-210-hydro y-2- Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 84 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 85 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 86 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 87 ~ [M+H]+ C17H23O11Na M = 426.1138 [M+Na]+ Appendix 5a: The HR-ESI-MS spectrum of LC5 Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 88 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 89 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 90 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 91 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 92 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 93 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 94 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 95 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 96 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 97 ~ Hedyotis lindleyana Hook ex Appendix ~ 98 ~ [...]... 10187 (phòng Phân tích Trung tâm, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Tp HCM) 2.2 Cây tươi được thu hái ở ia Hiệp, huyện Di inh, Tỉnh âm Đồng vào tháng 09 năm 2012 Tên khoa học của cây được ác định là cây An điền Lindley Hedyotis lindleyana Hook ex H Arn, Họ cà phê Rubiaceae, bởi cố dược sĩ Phan Đức Bình, Phó Tổng biên tập Bán nguyệt san Thuốc và Sức khỏe 18 Hedyotis lindleyana Cây được lưu mẫu trong quyển... lớp mỏng, khối lượng thu được của các cao chiết cùng với các nghiên cứu trước đây, chúng tôi chọn lựa nghiên cứu thành phần hóa học của cao cloroform trước, các cao còn lại sẽ khảo sát sau Tiến hành sắc k cột trên cao cloroform (134.7 g ), giải ly với hệ dung môi phân cực tăng dần, bắt đầu từ n-hexan etyl acetat (7:3 đến 0: 10) và etyl acetat – methanol (10: 0 đến 0: 10 ), thu được 12 phân đoạn, kí hiệu... (dihydroxymethylmethyloxy)]propyl--L-rhamnopyranose (117) H pressa Pierre e [3] mentoflavone (63 ), kaempferol (67 ), kaempferol 3-O-- glucopyranoside (70) H retrorsa (4 ), (5 ), Hederagenin (26) oiss.[13 ],[ 33] H rudis Pierre Pit.[15] e (4 ), (14 ), 3β-O-Acetylursolic acid (22 ), 3β-O-acetylbetulinic acid (42 ), (1S,4S,4aR,5R,7aR)-5-ethoxy-1-β-D-glucopyranosyl-4- hydroxy-7- hydroxymethyl- 1,3 , 4,4 a, 5,7 a- hexahydrocyclopenta[c]pyran (102 ), (1S,4S,4aR,7aR)-1-β-D-... glucopyranosyl-4-hydroxy-7-hydroxymethyl- 1,3 , 4,4 a, 5,7 ahexahydrocyclopenta[c]pyran (103 ), 1-O-ethyl- 3,6 -di-O-(2- hydroxy-1-hydroxymethylethyl)--D-glucopyranose (120) H symplociformis (Pit.) (1 ), (4 ), (5 ), (14 ), (17 ), (24 ), Kaempferol 3,7 -O-di(-LPhamhoang).[16] rhamnopyranoside) (73 ), (114 ), ethyl (19Z,22Z)-heptacosa-1 9,2 2dienoate (121 ), triacontanol (122 ), vanilin (126) H lume.[17] tenelliflora (5 ), Squalene... OR O 67 3,5 , 7,4 ’-OH : Kaempferol 68 3,5 , 7,3 ,4 ’-OH : Quercetin 69 3,7 ,2 ,4 ’-OMe; 5-OH : 3,7 ,2 ,4 ’-Tetrametho y-5-hydro yflavone 70 3-O-Glc; 5,7 ,4 ’-OH : Kaempferol 3-O-- -glucopyranoside 71 3-O- ra; 5,7 ,4 ’-OH : Kaempferol 3-O--L-arabinopyranoside 72 3-O-Rha(1→6)Glc; 5,7 ,4 ’-OH : Kaempferol 3-O-rutinoside 73 3,7 -O-Rha; 5,4 ’-OH : Kaempferol 3,7 -O-di(-L-rhamnopyranoside) 74 3-O-Gal(1→6)Glc; 5,7 ,4 ’-OH :... galactopyranosyl-(1→3)--L-arabinopyranosyl]-30-norolean1 2,2 0(29)-dien-28-oate (39) H pinifolia Wall e G on [6] (1 ), (4 ), (5 ), Phytol (10 ), (14 ), (24 ), 2 ,3 ,2 3-trihydroxyolean12-en (29 ), 1,6 -dihydroxy-7-methoxy-2-methylanthraquinone 6 qu Hedyotis lindleyana (49 ), 3,6 -dihydroxy-2-methylanthraquinone (50 ), 1,6 -dihydroxy2-methylanthraquinone methylanthraquinone (51 ), (52 ), 1,3 ,6 -trihydroxy-24-O-[3-hydroxy-2- (dihydroxymethylmethyloxy)]propyl--L-rhamnopyranose... y- 1,4 -anthraquinone O OMe 1 2 5 4 MeO O 2,5 - imetho y- 1,4 -benzoquinone 56 O OH 1' 1 6 15' 3' 2 7' 11' 14' 5 4 3 O 3,5 ,6 -Trimethyl-2-(3-hydroxy-3 ,7 ,1 1 ,1 4’-tetramethyl)pentadecylbenzoquinone 57 FL VONE 3' 4' 2' 8 O 1 7 1' 6 4 5' 2 6' 3 5 O 58 5-OH : Primuletin 59 5,7 -OH : Chrysin 60 5,7 ,3 ,4 ’-OH : Luteolin 61 5,6 , 7,8 ,3 ,4 ’-OMe : 5,6 , 7,8 ,3 ,4 ’-He ametho yflavone 62 5,6 , 7,3 ,5 ’-OMe; 4’-OH : 4’-Hydro y- 5,6 , 7,3 ,5 ’-pentametho... 1,2 ,3 -OMe : 1,2 ,3 -Trimetho y- 9,1 0-anthraquinone 45 2,3 -OMe; 6-Me : 2,3 - imetho y-6-methyl- 9,1 0-anthraquinone 46 1-OMe; 2-Me; 3-OH : 3-Hydro y-2-methyl-1-metho y- 9,1 0-anthraquinone 47 1,4 -OH; 2,3 -OMe : 1,4 - ihydro y- 2,3 -dimetho y- 9,1 0-anthraquinone 48 1,4 -OH; 2-CH2OH : 1,4 - ihydro y-2-hydro ymethyl- 9,1 0-anthraquinone 49 1,6 -OH; 2-Me : 1,6 -Dihydroxy-2-methyl- 9,1 0-anthraquinone 50 2-Me; 3,6 -OH : 3,6 -Dihydroxy-2-methyl- 9,1 0-anthraquinone... 100 6’-Acetylasperuloside EtO H 5 6 7 HOH2 C O 4a 7a 101 6’-Acetyldeacetylasperuloside OH 4 1 H 5 3 2 6 7 O H HOH2C OGlc 4a 7a OH 4 1 3 2 O H OGlc 102 (1S,4S,4aR,5R,7aR)-5-Ethoxy-1-β-D- 103 (1S,4S,4aR,7aR)-1-β-D-Glucopyranosyl-4- glucopyranosyl-4-hydroxy-7-hydroxymethyl- hydroxy-7-hydroxymetyl- 1,3 , 4,4 a, 5,7 a- 1,3 , 4,4 a, 5,7 a-hexahydrocyclopenta[c]pyran hexahydrocyclopenta[c]pyran 128 6-O-Methyldeacetylasperulosidic... 3,6 -Dihydroxy-2-methyl- 9,1 0-anthraquinone 10 qu Hedyotis lindleyana 51 1,6 -OH; 2-Me; 7-OMe : 1,6 -Dihydroxy-7-methoxy-2-methyl- 9,1 0-anthraquinone 52 1,3 ,6 -OH; 2-Me : 1,3 ,6 -Trihydroxy-2-methyl- 9,1 0-anthraquinone 53 1,5 ,6 -OMe; 2-OH : 1,5 ,6 -Trimethoxy-2-hydroxy- 9,1 0-anthraquinone O 5 10 6 7 11 14 12 13 8 4 3 2 1 9 O 54 2-CH2OH; 10-OH : 10-Hydro y-2-hydro ymethyl- 1,4 -anthraquinone 55 2,3 -OMe; 9-OH : 9-Hydro y- 2,3 -dimetho y- 1,4 -anthraquinone ... 47.2 - - 1, 3, 4, 6, 8, 9, 2.96 (ddd, 7. 4, 4. 7, 11 1.1) 5, 6, 8, 9, 10 1, 4, 5, 6, 7, 110.8 45.6 4.54 (dt, 4. 7, 1.9) 82.2 5.80 (t, 1.9) 130.1 - 147.5 3.03 (br t, 6.9) 47.1 4.37 (br d, 15.5) 10... 5-OH : Primuletin 59 5,7 -OH : Chrysin 60 5,7 ,3 ,4 ’-OH : Luteolin 61 5,6 , 7,8 ,3 ,4 ’-OMe : 5,6 , 7,8 ,3 ,4 ’-He ametho yflavone 62 5,6 , 7,3 ,5 ’-OMe; 4’-OH : 4’-Hydro y- 5,6 , 7,3 ,5 ’-pentametho yflavone... (2009 ), Khảo sát thành phần hóa học An điền hoa nhỏ Hedyotis tenelliflora Blume, họ Cà phê (Rubiaceae) Luậ vă Th h , Trườ g [9] ùi Ch h , K TN, Qu ữu, Ngu ễ Ki sĩ Kho h gi T CM Phi Phụ g (2007),