1990, gây nhiễm chủng virus Newcastle thuộc nhóm Velogen cho gà không có miễn dịch, thấy rằng có thể phân lập ñược virus từ các cơ quan tổ chức của cơ thể.. Trong nước cũng ựã có nhiều n
Trang 1bộ giáo dục và đào tạo Trường đại học nông nghiệp hà nội
Nguyễn thị quanh
NGHIấN CỨU MỘT SỐ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH NEWCASTLE VÀ TèNH HèNH SỬ DỤNG VACXIN PHềNG BỆNH Ở GÀ NUễI TẬP TRUNG TẠI HUYỆN ðỒNG HỶ,
Trang 2LỜI CAM ðOAN
Tôi xin cam ñoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và hoàn toàn chưa hề ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào
Tôi cam ñoan rằng, mọi sự giúp ñỡ ñể thực hiện luận văn này ñã ñược cảm
ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc
Hà Nội, ngày 15 tháng 10 năm 2013
Tác giả
Nguyễn Thị Quanh
Trang 3LỜI CẢM ƠN
Trước hết tôi xin cảm ơn tới các Thầy cô giáo trường ðại học Nông nghiệp
Hà Nội nói chung và các Thầy cô trong Khoa Thú Y nói riêng ñã giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn này
ðặc biệt, tôi xin cảm ơn PGS.TS Trương Quang - Thầy ñã tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ tôi trong quá trình thực tập và hoàn thành luận văn này
ðồng thời tôi cũng xin cảm ơn ñến các thầy cô Bộ môn Vi sinh vật –Truyền nhiễm, Khoa Thú Y trường ðại học nông nghiệp Hà Nội ñã nhiệt tình giúp ñỡ và tạo ñiều kiện thuận lợi nhất ñể tôi thực hiện ñề tài của mình
Tôi xin cảm ơn chân thành nhất tới gia ñình, anh em, bạn bè và ñồng nghiệp
ñã ñộng viên, giúp ñỡ và tạo ñiều kiện tốt nhất cho tôi hoàn thành luận văn này
Hà Nội, ngày 15 tháng 10 năm 2013
Tác giả
Nguyễn Thị Quanh
Trang 4MỤC LỤC
Lời cam đoan i
Lời cảm ơn ii
Mục lục iii
Danh mục bảng vi
Danh mục chữ viết tắt vii
MỞ ðẦU 1
1.1 ðặt vấn đề 1
1.2 Mục tiêu nghiên cứu 2
1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 2
CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3
1 Lịch sử và tình hình nghiên cứu bệnh Newcastle 3
1.1 Lịch sử bệnh 3
1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh Newcastle trên thế giới và trong nước 4
1.2.1 Trên thế giới 4
1.2.2 Trong nước 7
2.1 Virus Newcastle và bệnh do chúng gây ra 10
2.1.1 Virus Newcastle 10
2.2 Bệnh Newcastle 15
2.2.1 Lồi vật mắc bệnh 15
2.2.2 ðường truyền lây của virus 15
2.2.3 Cơ chế sinh bệnh 17
2.2.4 Các thể bệnh Newcastle 17
2.2.5 Bài xuất virus 18
2.2.6 Triệu chứng 18
2.2.7 Bệnh tích 20
2.2.8 Chẩn đốn 21
2.2.9 Miễn dịch đối với bệnh Newcastle 22
2.2.10 Phịng bệnh 25
Trang 5CHƯƠNG 2 NỘI DUNG – VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN
CỨU 29
2 Nội dung 29
2.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ học bệnh Newcastle 29
2.1.1 Tỷ lệ chết ở các giống gà nuôi trên ñịa bàn nghiên cứu 29
2.1.2 Tỷ lệ chết ở gà các lứa tuổi 29
2.1.3 Các tháng xảy ra bệnh 29
2.1.4 Một số bệnh tích ñặc trưng của bệnh Newcastle 29
2.1.5 Xác ñịnh sự có mặt của virus trong bệnh phẩm (óc gà) nghi mắc bệnh Newcastle 29
2.2 Tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle 29
2.2.1 Lịch sử dụng vacxin cho các ñàn gà thịt, gà trứng 29
2.2.2 Kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết của gà ở các ñàn gà xảy ra bệnh 29
2.3 Nguyên liệu 29
2.4 Phương pháp nghiên cứu 30
2.4.1 Lập phiếu ñiều tra ñể chủ ñộng thu thập thông tin liên quan 30
2.4.2 Phương pháp xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong nước trứng sau khi gây nhiễm huyễn dịch não gà nghi bệnh 30
2.5 Phương pháp kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh của gà ở ñàn xảy ra bệnh 33
2.6 Phương pháp xử lý số liệu 35
CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36
3.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ của bệnh Newcastle 36
3.1.1 Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà nuôi tại huyện ðồng Hỷ, Thái Nguyên 36
3.1.2 Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi 38
3.1.3 Phân bố ổ dịch Newcastle ở các ñàn gà trong các tháng nghiên cứu tại huyện ðồng Hỷ, Thái Nguyên 42
3.1.4 Kết quả mổ khám kiểm tra bệnh tích ở gà trong ñàn ñang xảy ra bệnh Newcastle 45
Trang 63.1.5 Kết quả gây nhiễm phôi gà bằng huyễn dịch não của gà trong ñàn
ñang xảy ra bệnh Newcastle 48
3.2 Tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle cho những ñàn gà nuôi tập trung tại huyện ðồng Hỷ, Thái Nguyên 51
3.2.1 ðối với các ñàn gà thịt 52
3.2.2 ðối với các ñàn gà trứng thương phẩm 54
3.2.3 Kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh của gà ở các ñàn xảy ra bệnh 59
KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 61
1 Kết luận 61
2 ðề nghị 62
TÀI LIỆU THAM KHẢO 63
Trang 7DANH MỤC BẢNG
Bảng 3.1 Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà nuôitại huyện ðồng
Hỷ, Thái Nguyên 37 Bảng 3.2a.Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của giống gà thịt
nuôi công nghiệp 39 Bảng 3.2b.Tỷ lệ chết do bệnh Newcastleở gà các lứa tuổi của giống gà thả
vườn 40 Bảng 3.2c Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của giống gà
trứng thương phẩm 41 Bảng 3.3 Phân bố ổ dịch Newcastle xảy ra ở các ñàn gà trong các tháng
nghiên cứu 43 Bảng 3.4 Kết quả mổ khám kiểm tra bệnh tích ở gà trong ñàn ñang xảy ra
bệnh Newcastle 46 Bảng 3.5 Kết quả gây nhiễm phôi gà bằng huyễn dịch não của gà trong ñàn
ñang xảy ra bệnh Newcastle 49 Bảng 3.6a Lịch sử dụng vacxin và ñường ñưa vacxin ñối với các ñàn gà thịt 53 Bảng 3.6b Liên quan giữa việc sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastlevới tỷ
lệ ñàn bị bệnh và tỷ lệ gà chết do bệnh ñối với gà thịt 54 Bảng 3.6c Lịch sử dụng vacxin và ñường ñưa vacxin ñối với gà trứng 55 Bảng 3.6d Liên quan giữa việc sử dụng vacxin phòng bệnhNewcastle với tỷ
lệ ñàn bị bệnh và tỷ lệ gà chết do bệnh ñối vớicác ñàn gà trứng 57 Bảng 3.7 Kết quả kiểm tra hiệu gía kháng thể Newcastle trong huyết thanh
của gà trong ñàn xảy ra bệnh 59
Trang 8DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
ILT : Infectious Laryngo Tracheitis – Viêm thanh khí quản truyền nhiễm ICPI : Intracerebral pathogenicity Index- Chỉ số gây bệnh khi tiêm não gà con 1 ngày tuổi
IVPI : Intravenous pathogenicity Index- Chỉ số gây bệnh khi tiêm
tĩnh mạch gà 6 tuần tuổi
HA : Heamagglutination Test – Phản ứng ngưng kết hồng cầu
HI : Heamagglutination Inhibition Test – Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu
MDT : Mean Death Time – Thời gian trung bình gây chết phôi
(ñơn vị tính bằng giờ) với liều tối thiểu gây chết 100% phôi
IB : Infectious Bronchitis – Bệnh viêm phế quản truyền nhiễm
Trang 9MỞ đẦU
1.1 đặt vấn ựề
để nâng cao ựời sống cho nhân dân phát triển nông lâm nghiệp, phát triển
xã hội, đảng và nhà nước ựã có nhiều chắnh sách khuyến khắch nông nghiệp phát triển như: giao ựất, giao rừng, khuyến khắch nông dân làm kinh tế VAC, VACR Nhờ vậy mà nông nghiệp ựã ựạt ựược nhiều thành tựu to lớn Ngành chăn nuôi nói chung và chăn nuôi gia cầm nói riêng ựã chiếm một vị trắ hết sức quan trọng trong nền kinh tế quốc dân Chăn nuôi gia cầm là nguồn cung cấp thực phẩm cho con người và cung cấp nguyên liệu cho ngành chế biến
Trong những năm gần ựây, bên cạnh những giống gà ựịa phương hiện có như: gà Mắa, gà đông Tảo, gà Hồ, gà RiẦngười dân ựã tiếp nhận nuôi một số giống
gà cao sản theo phương thức công nghiệp như: Hubbard, Ros308, ISA-Brown,
Ầcho năng xuất và hiệu quả kinh tế cao
Huyện đồng Hỷ, tỉnh Thái Nguyên là một huyện có nhiều ựiều kiện thuận lợi
ựể phát triển chăn nuôi gà Trong những năm qua, nhiều gia trại, trang trại ựược ựầu
tư với quy mô lớn nuôi hàng trăm con Chăn nuôi gà ựã góp phần quan trọng trong việc xóa ựói giảm nghèo cho người dân trong huyện Nhiều hộ gia ựình ựã vươn lên làm giàu từ chăn nuôi gà
Trên thị trường có rất nhiều giống gà bán ra nhưng không rõ nguồn gốc cơ sở sản xuất Trong quá trình chăn nuôi, một tỷ lệ nhất ựịnh một số bệnh truyền nhiễm, trong ựó có bệnh Newcastle Mặc dù gà ựã ựược phòng bệnh bằng các loại vacxin theo ựúng hướng dẫn của nhà sản xuất nhưng bệnh vẫn rải rác xảy ra đàn gà bị bệnh nhưng triệu chứng, bệnh tắch không ựặc trưng, khó chẩn ựoán đây chắnh là một trong những nguyên nhân quan trọng gây thiệt hại cho người chăn nuôi
Vì thế ựể góp phần làm rõ thực trạng tình hình bệnh và tìm ra những tồn tại, thiếu sót trong quá trình chăm sóc nuôi dưỡng, phòng chống bệnh Newcastle cho gà
ở ựịa phương, chúng tôi tiến hành ựề tài :ỘNghiên cứu một số ựặc ựiểm dịch tễ của bệnh Newcastle và tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh ở gà nuôi tập trung tại huyện đồng Hỷ, tỉnh Thái Nguyên.Ợ
Trang 101.2 Mục tiêu nghiên cứu
Nghiên cứu ñặc ñiểm dịch tễ học của bệnh Newcastle ở gà nuôi tập trung
Tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh cho gà nuôi tại ñại phương
1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài
Góp phần làm rõ thêm ñặc ñiểm dịch tễ học và những tồn tại, thiếu sót trong việc sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle ở các ñàn gà nuôi tập trung trong các gia ñình trên ñịa bàn huyện ðồng Hỷ, tỉnh Thái Nguyên
Trên cơ sở kết quả nghiên cứu, giúp người chăn nuôi hiểu rõ hơn về bệnh Newcastle và khắc phục những tồn tại, những thiếu sót trong việc chăm sóc, nuôi dưỡng và phòng bệnh ñể chăn nuôi ổn ñịnh, phát triển
Trang 11CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1 Lịch sử và tình hình nghiên cứu bệnh Newcastle
1.1 Lịch sử bệnh
Bệnh ở gà tại nước Anh xảy ra năm 1926 theo tài liệu ghi chép có liên quan ựến một con tàu vận chuyển thịt ựông lạnh mang theo gà nuôi, di chuyển từ Indonesia, Châu Á ựến cảng của Newcastle (Alexander, 1988) Sau một khoảng thời gian ngắn, bệnh không chỉ xảy ra ở Anh mà còn xuất hiện ở các nước khác như, Hàn Quốc, Ấn độ, Nhật Bản do chủng virus có ựộc lực cao
Bệnh Newcastle có thể ựã có từ lâu nhưng chưa ựược nghiên cứu Cho ựến năm 1926, Kraneveld ựã có thông báo ựầu tiên về một bệnh truyền nhiễm của gà lây lan mạnh, tỷ lệ chết cao xảy ra ở Java, Indonesia Cùng năm này tại thành phố Newcastle của nước Anh một ổ dịch ở gà tương tự ựã xảy ra (Doyle,1927) Ông
ựã phân lập ựược mầm bệnh và cũng là người ựầu tiên bằng phản ứng huyết thanh học ựã chứng minh mầm bệnh có tắnh kháng nguyên khác với virus dịch tả gà trước ựó để kỷ niệm nơi ựã xảy ra bệnh và phân lập ựầu tiên ựược mầm bệnh, người ta ựã gọi bệnh này là bệnh Newcastle
Năm 1951, bệnh lan tới Hawaii, Canada và tiếp tục lan rộng sang Châu Âu
và nhiều vùng khác nhau của Châu Phi
Theo Bankowski (1964), trong cùng thời gian ựó, các thể bệnh không ựiển hình cũng ựược phát hiện ở nhiều nơi trên thế giới
Năm 1971, bệnh xảy ra ở California gây thiệt hại lớn về kinh tế Tắnh chất bệnh nghiêm trọng hơn ở Châu Âu và Trung đông Các chuyên gia thú y ở Mỹ ựặt tên bệnh: ỘVelogen Viscerotropic Newcastle DiseaseỢ
Năm 1977, hội nghị gia cầm thế giới tổ chức tại Atlanta (Mỹ) ựã làm rõ tắnh chất bệnh và kết luận: Tất cả các chủng virus phân lập ựược ở California, Trung đông và Châu Âu có cùng serotype
Năm 1980, tại hội thảo về bệnh Newcastle có sự tham gia của nhiều nhà nghiên cứu, theo Hanson (1980) virus Newcastle vẫn tồn tại với bản chất của nó
Trang 12nhưng dưới dạng một số chủng khác nhau, và gây ra những biểu hiện lâm sàng không giống nhau
Ngày nay cùng với sự phát triển của ngành chăn nuôi gia cầm, ñặc biệt là chăn nuôi gà công nghiệp, sự lưu thông hàng hóa giữa các nước trên thế giới mở rộng nên bệnh có nhiều cơ hội lây lan Hiện tại bệnh Newcastle ở gà vẫn là mối ñe dọa lớn cho ngành chăn nuôi gà trên thế giới nói chung và Việt Nam nói riêng
1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh Newcastle trên thế giới và trong nước
1.2.1 Trên thế giới
Chim hoang dã có khả năng mẫn cảm với bệnh Newcastle và là một trong những nguồn lây lan dịch bệnh, do vậy trong thời gian dài, chim hoang dã là ñối tượng ñược nghiên cứu rộng rãi ở khắp các nước trên thế giới Qua nhiều năm nghiên cứu, (Luthgen, 1981), ñã lập một danh sách gồm 117 loài lông vũ, trong ñó
có 17 loài bị nhiễm vius Newcastle và thấy phần lớn là do chim tiếp xúc với gà ñã nhiễm bệnh
Jumaily, 1989, dùng phản ứng HI kiểm tra 341 mẫu huyết thanh của 5 loài chim hoang dã ñã phát hiện có kháng thể kháng virus Newcastle ở một tỷ lệ mẫu với hiệu giá từ 1/2 - 1/128, trong ñó nhóm chim Columbalivia chiếm 8.0%, nhóm Strepiopelia Decasoto chiếm 2.5%
Vindevolgel (1997), nghiên cứu bệnh Newcastle ở chim hoang dã thấy virus nhiễm ở chim bồ câu hầu hết có tính hướng hệ hô hấp, chim có hoặc không có triệu chứng bệnh Tác giả cho rằng những chim di cư bị nhiễm tự nhiên trong quá trình sinh sản cũng truyền kháng thể cho ñời sau qua lòng ñỏ trứng
Estudillo (1972), ñã mô tả ổ dịch ở Mehico cho thấy gà lôi Nhật, vẹt, công, chim yến có khả năng mẫn cảm với bệnh và có triệu chứng thần kinh do lây nhiễm virus Newcastle từ gà bệnh
Năm 1987, Pearson J.E, và cộng sự , báo cáo kết quả nghiên cứu chủng vius PMV – 1 phân lập từ chim bồ câu có triệu chứng liệt, vẹo cổ, run rẩy, mất thăng bằng, và chết Tác giả ñã dùng kháng thể ñơn dòng ñể xác ñịnh vius gây bệnh Chủng phân lập ñược dùng gây bệnh cho bồ câu bằng ñường tiêm tĩnh mạch, thấy chim bồ câu có biểu hiện bệnh như ngoài tự nhiên Nhưng gây bệnh bằng ñường
Trang 13mũi chỉ có một bồ câu có biểu hiện bệnh; thời gian chết khoảng từ 4 Ờ 25 ngày, virus bài xuất ựến 20 ngày, có bệnh tắch viêm ruột dạ dày và hoại tử tuyến tụy Nếu gây bệnh cho gà qua lỗ huyệt, mũi hoặc tiêm vào túi khắ ở ựốt ngực thì gà vẫn khoẻ mạnh; tiêm vào não gà con chúng có ICPI giống như ở nhóm Velogen và 4 trong 6 chủng virus phân lập có khả năng gây có tác ựộng tới thần kinh ở gà 6 tuần tuổi Theo Alaxander (1986), tỉ lệ mắc bệnh Newcastle ở chim bồ câu chiếm từ 30-70%, tỉ lệ chết thấp, dưới 10% nhưng cũng có trường hợp tới 40%
Theo Sharaway (1994), chim cút ắt mẫn cảm với virus Newcastle hơn gà, thời gian ủ bệnh từ 2-15 ngày, trung bình 5-6 ngày Triệu chứng bệnh thay ựổi tuỳ theo ựộc lực của chủng gây bệnh Nếu nhiễm virus có ựộc lực cao, chim cút có biểu hiện
ủ rũ, khó thở, bệnh kéo dài vài ngày rồi chết Quan sát thấy chim cút có thể bị sưng mắt và cổ, ỉa phân xanh ựôi khi có máu, run rẩy, liệt chân, ựôi khi liệt cánh Tỷ lệ chết có thể tới 90% ở chim cút hậu bị và 50% ở chim cút trưởng thành
Bệnh ắt nghiêm trọng, với triệu chứng chủ yếu là hô hấp và thần kinh Bệnh làm giảm năng xuất trứng, trứng có vỏ mềm, và chất lượng trứng giảm Bồ câu có
thể liệt 1 hoặc cả 2 chân Trong ổ dịch quá cấp, tỷ lệ chết cao (Gray,1954)
Gà là loài mẫn cảm nhất với bệnh Newcastle
Tại Newzealand, (Tisdal D.J., 1988) phát hiện ựược kháng thể ngăn cản sự ngưng kết với virus Newcastle ở gà, gà lôi và công
Ở đài Loan, (LuY.S,1986) cho rằng các yếu tố nghi ngờ gây ra ổ dịch Newcastl từ tháng 2 Ờ tháng 5 /1984 là do gà bị lây nhiễm virus IBD gây suy giảm miễn dịch và do dùng vacxin không thắch hợp ựã làm tăng tắnh gây bệnh của chúng Bell J.G.(1988), ựã nghiên cứu sự lưu hành virus Newcastle ở 3 vùng có trại
gà chăn nuôi theo hướng công nghiệp và 3 vùng không có trại gà công nghiệp tại Moroco vào mùa ựông năm 1986-1987, bằng cách thu thập mẫu huyết thanh và dịch khắ quản từ 100 gà ở mỗi vùng ựể kiểm tra Kết quả cho thấy sự lưu hành virus ở các vùng phụ thuộc vào phương thức chăn nuôi tập trung hoặc chăn thả
Ở Nigeria, (Okoye JOA, 1989) xảy ra 2 ổ dịch Newcastle không ựiển hình,
gà không có triệu chứng thần kinh, chỉ có các dấu hiệu ủ rũ, ỉa phân xanh, tỷ lệ chết
Trang 14từ 50-83,6% Mổ khám thấy dịch thẩm xuất ở niêm mạc khí quản, không xuất huyết
dạ dày tuyến, lách teo, manh tràng xuất huyết có dấu hiệu hoại tử, các tế bào lympho giảm và ñã phân lập ñược virus Newcastle từ bệnh phẩm
Arzay G (1990), nghiên cứu vê cơ chế lây truyền của bệnh Newcastle cho thấy có vai trò của chim hoang dã, bồ câu, thịt gà, con người, chim cảnh, ruồi, nội ngoại ký sinh trùng và loài gậm nhấm, thịt gà ñông lạnh
Flanagan M (1990), gây nhiễm chủng virus Newcastle thuộc nhóm Velogen cho gà không có miễn dịch, thấy rằng có thể phân lập ñược virus từ các cơ quan tổ chức của cơ thể Ở những gà có kháng thể, virus thường phân lập ñược từ dạ dày tuyến, nang lympho manh tràng, não, gà có biểu hiện lâm sàng nhẹ hoặc không và virus vẫn ñược nhân lên ñến ngày thứ 19 sau khi công cường ñộc
Năm 1985, ở Canada (Ide P.R,1987), lần ñầu tiên phân lập ñược virus Newcastle trong 6 ñàn bồ câu vùng Otario, Alberta và British Columbia
Suarez – Hernandez M, (1987) khảo sát kháng thể kháng virus Newcastle ở những công nhân chăn nuôi gà Kết quả cho thấy 26,3% (73/277) người làm việc trực tiếp ở trại gà và ở 47,8% (110/230) người làm việc gián tiếp, trong huyết thanh
có kháng thể kháng virus Newcastle
Papacella V và cộng sự (1987) theo dõi ảnh hưởng của bệnh ñường hô hấp gia cầm ñối với sức khoẻ của người thấy rằng: không chỉ bệnh cúm gà ảnh hưởng ñến người mà bệnh Newcastle cũng có thể gây bệnh cho người, ñầu tiên ở mắt, sau
ñó có thể lan sang các tổ chức khác
Bastami M.A và cộng sự (1986) ñã thí nghiệm so sánh ñáp ứng miễn dịch của
gà ñược tiêm các loại vacxin khác nhau: 180 gà ñược nhỏ mắt bằng vacxin B1 lúc 7 ngày tuổi Sau ñó khi gà ñược 21 ngày tuổi thì chia thành 5 lô, lô 1 uống vacxin B1, lô
2 uống Lasota, lô 3 uống B1 hấp phụ aluminium hydroxide (AH), lô 4 uốngt Komarrov
và lô 5 tiêm vacxin vô hoạt có bổ trợ dầu Toàn bộ số gà này ñược công cường ñộc lúc
7 tuần tuổi Kết quả khả năng bảo hộ của vacxin B1 là 87%, vacxin vô hoạt bổ trợ dầu 83%, B1 hấp phụ AH 73%, Lasota 63% và Komarov 60%
Bassiouni A.A và cộng sự (1987), nghiên cứu các nhân tố ảnh hưởng ñến ñáp ứng miễn dịch ở gà ñối với virus Newcastle: gà 1 ngày tuổi ñược dung vacxin
Trang 15Herpes (vacxin Marek) chủng gà tây, 7 ngày sau dung vacxin B1 hoặc Lasota Sau
21 ngày chuẩn ựộ hiệu giá kháng thể thấy thấp hơn gà không dùng chủng Herpes virus gà tây
Zheng H.J và cs (1987), dùng vacxin Mukteswar nhỏ mắt hoặc cho gà uống lúc 16 ngày tuổi, sau 1 tháng ựược dùng nhắc lại và công cường ựộc lúc gà 75 ngày tuổi, kết quả gà có miễn dịch chắc chắn
Blazin V (1988), chuẩn ựộ kháng thể HI ở 8 ựàn gà trước và sau khi miễn dịch bằng khắ dung với vacxin B1 và Lasota lúc 4 ngày tuổi và nhắc lại lúc gà 10 hoặc 21 ngày tuổi thì thấy, ở gà 10- 21 ngày tuổi, kháng thể HI không ựủ bảo hộ chống lại các chủng thuộc nhóm Velogen
Guler E (1989), kiểm tra kháng thể trong lòng ựỏ trứng và huyết thanh của
20 gà 5 tháng tuổi ựã ựược 4-5 lần chủng vacxin B1 và Lasota phòng bệnh Newcastle Kết quả thấy kháng thể HI trong lòng ựỏ trứng do những gà mẹ ựã phòng vacxin ựẻ ra có dao ựộng lên xuống, trong khi ựó chuẩn ựộ huyết thanh vẫn
ổn ựịnh và nói chung HI trong lòng ựỏ trứng thấp hơn HI trong huyết thanh
Ở Malaysia, Ibrahim A.L (1987), thử nghiệm vacxin V4 phòng bệnh Newcastle cho gà nuôi tại 15 làng, với 2 liều vacxin trong 3 tuần, 60% số gà ựược
sử dụng vacxin ựược bảo hộ khi công thử thách virus cường ựộc Không có trường hợp mắc bệnh Newcastle ở ựàn gà ựã ựược uống vacxin trong 1 năm sau ựó
1.2.2 Trong nước
Năm 1933 bệnh Newcastle ựã ựược Phạm Văn Huyến phát hiện, gọi là bệnh dịch tả gà đông Dương vào năm 1938 Một vụ dịch xảy ra ở gà tại các tỉnh Nam Bộ ựược Vitor mô tả có triệu chứng giống bệnh Newcastle ựã ựề cập
Năm 1949 tại Nha Trang, Jacottot và Lelouet phân lập ựược virus Newcastle,
ựã dùng chủng này ựể gây bệnh cho gà và tiêm truyền cho phôi thai gà Bằng phản ứng ngưng kết hồng cầu và ức chế ngưng kết hồng cầu, tác giả ựã xác ựịnh sự có mặt của virus Newcastle trong bệnh phẩm lấy từ ổ dịch
Năm 1956, ở Sài Gòn, Nottre và cộng sự ựã phân lập ựược chủng virus Newcastle Từ 1955-1957 qua ựiều tra tình hình dịch bệnh ở 20 tình thành, kiểm tra
189 bệnh phẩm, các tác giả thấy có 58 mẫu có virus Newcastle
Trang 16Trần đình Từ và cộng sự (1979-1984), xác ựịnh ựộc lực của các chủng virus vacxin Newcastle ựang sử dụng ở Việt Nam bằng phương pháp ựã chuẩn hóa của FAO độc lực ựược xác ựịnh dựa trên 3 chỉ số MDT, ICPI và IVPI Kết quả thấy 3 chủng virus Newcastle ựang sử dụng hiện nay có ựộc lực ổn ựịnh Chủng hệ I thuộc nhóm Mesogen, cùng loại với chủng H nhưng có ựộc lực cao hơn và ựặc tắnh gây bệnh khác với chủng H, do ựó Hệ 1 có thể có nguồn gốc từ chủng Mukteswar
Phan Văn Lục và cộng sự (1996), theo dõi 6 cơ sở nuôi gà ở các tỉnh phắa Bắc, từ năm 1980-1991 Tác giả ựã ựề xuất lịch sử dụng vacxin thắch hợp là: 7 ngày, 21- 28 ngày, 50- 58 ngày và 133 -140 ngày; vacxin sử dụng là Lasota và Hệ I, bằng phương pháp nhỏ mũi và tiêm dưới da tùy từng loại vacxin đồng thời tác giả cùng cộng sự, ựã nghiên cứu mối tương quan giữa hàm lượng kháng thể lưu hành và khả năng bảo hộ chống lại virus cường ựộc Newcastle Kết quả cho thấy: hàm lượng kháng thể lưu hành nhỏ hơn 2log2 thì gà không có khả năng bảo hộ, do ựó cần tiêm chủng lại Hàm lượng kháng thể lớn hơn 2log2 và nhỏ hơn 3 log2 thì 1 tháng sau khi kiểm tra lại kháng thể, nếu hàm lượng kháng thể giữ nguyên hoặc giảm ựi thì ựàn gà phải ựược dùng lại vacxin Hàm lượng kháng thể lớn hơn 3log2, tỷ lệ chuyển dương 90% thì gà có khả năng chống virus cường ựộc
Trong nước cũng ựã có nhiều nhà khoa học nghiên cứu về vacxin: theo Nguyễn Thu Hồng (1993), nếu uống vacxin Lasota ựể phòng bệnh Newcastle với liều 10-3, từ 3Ờ 4 ml/con lúc gà 1 tuần tuổi thì ựến 2 tháng rưỡi tuổi còn khả năng bảo hộ là 63%, nếu cho uống lúc 2 tuần tuổi thì ựến 2 tháng rưỡi tuổi vẫn còn bảo
Nguyễn Tiến Dũng và cộng sự (1993), ựã nghiên cứu biến chủng của Lasota
có tắnh chịu nhiệt cao, gây miễn dịch tốt, bảo quản đýợc ở nhiệt ựộ 37oC
Vũ đạt và cộng sự (1989) nghiên cứu những tác nhân gây ảnh hưởng ựến quá trình ựáp ứng miễn dịch chống bệnh Newcastle ,cho thấy kháng thể thụ ựộng và kháng sinh dùng trước hoặc sau khi sử dụng vacxin ựều ảnh hưởng ựến quá trình
Trang 17hình thành kháng thể
Trần đình Từ và cộng sự (1994-1995), ựã công bố kết quả nghiên cứu vacxin chịu nhiệt chủng V4 có tên HR-NDV: vacxin thắch hợp cho gà chăn thả Vacxin có hiệu lực miễn dịch ắt nhất là ngang với vacxin Lasota
Phạm Xuân Tý và cộng sự (2000) ựã nghiên cứu sản xuất chế phẩm sinh học phòng, trị bênh Gumboro và Newcastle cho gà, trong ựó:hiệu giá kháng thể kháng Gumboro (ELISA) trung bình 1/11.755,1 +965,12, hiệu giá kháng thể kháng Newcastle trung bình 10,37log2+0,69 Chế phẩm ựã ựược ựưa vào sử dụng trong sản xuất, bước ựầu cho kết quả tốt
Nguyễn Thu Hà (2000), bằng phản ứng HI ựã xác ựịnh tỷ lệ nhiễm virus Newcastle ở ựàn chim cút ựã tưng có bệnh là 60%, chưa từng có bệnh là 1,7% và phương pháp dự báo ựã xác ựịnh tỷ lệ nhiễm virus Newcastle thực tế của ựàn chim cút kiểm tra là 2,13%
Chủng virus Newcastle phân lập trên chim cút (CT2) và trên gà (VN91) ựều gây bệnh giống nhau ở chim cút
Có thể dùng vacxin Lasota phòng bệnh cho chim cút bước ựầu cho kết quả tốt
Trần Thị Lan Hương (2001), nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng ựến ựáp ứng miễn dịch chống bệnh Newcastle của ựàn gà công nghiệp Tác giả nhận thấy, liều lượng vacxin có ảnh hưởng ựến ựáp ứng miễn dịch chống bệnh Newcastle Lượng virus trong vacxin thấp thì hàm lượng kháng thể sinh ra thấp và thời gian bảo hộ ngắn
Nguyễn Huy Phương (2001), nghiên cứu lịch sử dụng vacxin cho ựàn gà thịt
ựã khuyến cáo người chăn nuôi nên sử dụng vacxin 3 lần vào các ngày 7, 21, 35 ngày tuổi
Trương Quang và cộng sự (2005) cho biết những năm gần ựây bệnh Newcastle xảy ra ở các ựàn gà nuôi tập trung trong các hộ gia ựình thường ở thể không ựiển hình Các nguyên nhân dẫn ựến tình trạng bệnh trên là do:
-Lịch sử dụng vacxin không thắch hợp
-Một tỉ lệ nhất ựịnh (7,59 -13,15%) gà sau khi uống vacxin có hàm lượng kháng thể thấp ( <3log2)
Trang 18-Con giống không rõ nguồn gốc
-ðồng thời tác giả khuyến cáo những ñàn gà nuôi trên ba tháng tuổi nên cho uống vacxin Lasota 3 lần lúc gà 7,21 và 35 ngày tuổi sẽ an toàn bệnh Newcastle Nguyễn Hồng Minh (2012) ñã nghiên cứu sản xuất và thử nghiệm vacxin nhược ñộc ñông khô ña giá phòng ba bệnh Newcastle, Gumboro và viêm phế quản truyền nhiễm ở gà Kết quả cho biết gà sau khi tiêm vacxin vào lúc 7 và 14 ngày tuổi ñều có hiệu giá kháng thể ñạt tiêu chuẩn bảo hộ cả ba bệnh theo tiêu chuẩn ngành và khuyến cáo của OIE, 2008
Vũ Văn Mong (2012), nghiên cứu thực trạng bệnh Newcastle và tình hình sử dụng vacxin ở ñàn gà nuôi tại Vụ Bản , Nam ðịnh Kết quả cho biết tỷ lệ chết do bệnh Newcastle các ñàn gà mua con giống từ các cơ sở sản xuất tư nhân luôn cao hơn so với các ñàn mua con giống từ các cơ sở tập trung
2.1 Virus Newcastle và bệnh do chúng gây ra
2.1.1 Virus Newcastle
2.1.1.1 Hình thái và cấu trúc
Virus Newcastle thuộc họ Paramyxoviridae, phân nhóm PMV – 1 (Tumova, 1979), là virus ARN ña hình thái: hình tròn, hình trụ, hình sợi Virus có vỏ bọc lipit, kích thước virion từ 100 – 300nm Virus có cấu trúc nucleocapsid dạng xoắn ốc dài 1000mm, ñường kính 17 – 18nm Vỏ bọc ñược phủ các gai glycoprotein (HN – F) dài 8 – 12nm
Hệ gen của virus Newcastle là chuỗi ñơn ARN có 15.186 Nucleotit ñể truyền thông tin ARN và mật mã di truyền các protein của virus Virus có trọng lượng phân
tử ARN nặng 5,2 – 5,7 x106 dalton, khoảng 15 kilobase (Kb) (Kolakofsky, 1974) Mật mã di truyền của ARN virus chứa 6 gen mã hóa các thông tin di truyền tổng hợp các protein cấu trúc:
-Haemagglutinin – Neuraminidase (HN) gây ngưng kết hồng cầu có ñặc tính của enzym Neuraminidase, tạo các gai trên bề mặt virus
-Fusion protein (F) liên kết các tế bào bị nhiễm tạo thành hợp bào Xincitium, tạo các gai trên bề mặt hạt virus
-Nucleoprotein (N) (giống Histin) là một protein kiềm bảo vệ ARN của virus
Trang 19-Matriprotein (M) có tác dụng gắn ARN virus với vỏ bọc
-Large protein (L) là một ARN polymerazase liên kết với Nucleocapsid -Protein P gốc phosphoryl hóa liên kết với nucleocapsid
Trong số những protein này, có 2 protein tham gia vào hoạt ựộng của virus, liên quan ựến vỏ bọc lipit, ựó là: Haemagglutinin protein gây ngưng kết hồng cầu, men Neuraminidaza cắt ựứt thụ thể hồng cầu và Fusion protein gây liên kết các tế bào bị nhiễm virus thành tế bào ựa nhân khổng lồ Những protein này liên quan ựến hoạt ựộng của virus ựối với tế bào và trung hòa kháng thể (Spradbrow P.B và cộng
sự, 1988)
2.1.1.2 đặc tắnh sinh học
Virus Newcastle là virus có vỏ bọc, có hoạt tắnh bề mặt nên nó có một số ựặc tắnh sinh học ựặc trưng
* Khả năng ngưng kết hồng cầu
Burnet (1942), là người ựầu tiên phát hiện ựặc tắnh của virut Newcastle ựó là:
Có khả năng làm ngưng kết hồng cầu một số loài như gà, người, chuột lang, chuột bạch
Chỉ một vài chủng virus làm ngưng kết hồng cầu bò, dê, cừu, lợn và ngựa Hồng cầu loài lưỡng thê, bò sát và loài chim bị ngưng kết bởi virus Newcastle ở các mức ựộ khác nhau
Hiện tượng ngưng kết hồng cầu là do hồng cầu gắn kết với ựiểm quyết ựịnh kháng trên bề mặt của virus (Rott, 1964) Quá trình ngưng kết xảy ra qua 2 giai ựoạn (Trần Minh Châu và Hồ đình Chúc, 1988):
Giai ựoạn1: Virus tìm ựiểm thụ cảm trên bề mặt của hồng cầu Haemagglutinin làm ngưng kết hồng cầu
Giai ựoạn1: Virus tách khỏi bề mặt tế bào do men Neuraminidaza phá hủy thể thụ cảm trên bề mặt hồng cầu
Theo Tolba và Eskarous (1962), hoạt tắnh ngưng kết hồng cầu tùy vào từng chủng virus, không nhất thiết bị vô hoạt cùng thời gian với hoạt tắnh gây nhiễm Một vài chủng virus khi xử lý ở nhiệt ựộ 560C trong 5 phút thì hoạt tắnh ngưng kết hồng
Trang 20cầu bị phá hủy nhưng vẫn còn khả năng gây nhiễm phôi hoặc vật chủ khác Ngược lại có một số chủng ñược xử lý 560C với thời gian 25 phút vẫn còn khả năng gây nhiễm và gây ngưng kết hồng cầu (Hanson R.P.Spalatin.J,1978)
ðặc tính này dùng ñể phân biệt giữa các chủng virus Newcastle với nhau và cũng là ñiểm khác nhau giữa virus Newcastle với virus cúm
* Hoạt tính men Neuraminidaza:
Men Neuraminidaza có ñặc tính phá hủy ñiểm thụ cảm và làm virus tách khỏi
bề mặt tế bào Theo Samsom (1988), những thụ thể có men Neuraminidaza khi hoạt ñộng ñược giải phóng khỏi bề mặt của virion, sẽ phá hủy thể thụ cảm và tách khỏi
sự ngưng kết hồng cầu, ngăn cản virion khỏi sự hút bám ñể thành một dạng khác ( ñám, cụm) Tùy từng chủng virut mà thời gian phá hủy liên kết khác nhau từ 30 phút ñến 24 giờ (Hanson, 1980)
* Dung giải hồng cầu:
Virus Newcastle có khả năng dung giải hồng cầu ngưng kết bằng cách hình thành dung huyết tố ðặc tính này bị ảnh hưởng bởi nhiệt ñộ, nồng ñộ muối của dung dịch hoặc khi làm ñông tan, siêu âm, chiết rút sẽ làm hoạt tính dung huyết tăng lên (Brandly C.A, Hanson R.P, 1965)
* Ức chế ngưng kết hồng cầu (Haemagglutination Inhibiton)
Virus Newcastle bị trung hòa bởi huyết thanh dương tính Newcastle Khi bị trung hòa, virus không còn khả năng gây ngưng kết hồng cầu Bằng phản ứng HI sẽ phát hiện ñược kháng thể gây ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà Dựa vào ñặc tính này
ñể phát hiện gián tiếp sự nhiễm virus Newcastle ñàn gà, xác ñịnh mức ñộ ñáp ứng miễn dịch chống Newcastle sau khi gà ñược sử dụng vacxin và ñể phân biệt các chủng virus Newcastle Sự khác nhau giữa các chủng virus phụ thuộc vào nguồn
gốc phát sinh bệnh
Phản ứng ngưng kết hồng cầu gà (HA) và phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu
gà (HI) ñược sử dụng ñể phát hiện kháng nguyên và kháng thể Newcastle Phản ứng có thể ñược thực hiện trong ống nghiệm hoặc khay ngưng kết 96 lỗ có ñáy chữ U
* Hấp phụ hồng cầu lên tế bào ( Hemadsorption)
Hiện tượng những tế bào bị nhiễm virus Newcastle có thể hấp thụ hông cầu
Trang 21gà trên bề mặt tế bào gọi là Hemadsorption Khả năng hấp phụ hồng cầu ñược ñánh giá bằng số lượng hồng cầu hấp thụ trên tế bào Thời gian xuất hiện hiện tượng hấp phụ hồng cầu khoảng 4 giờ sau khi virus nhiễm vào tế bào Bankowski (1964), ñã chứng minh ở những chủng virus ñộc lực cao, việc hấp phụ hồng cầu sẽ xuất hiện sớm hơn trên tế bào
*Hiện tượng cản nhiễm (Interference)
Virus Newcastle có khả năng cản trở sự nhân lên của virus khác hoặc ngược lại bị một số virus khác cản trở sự nhân lên của chúng trong cơ thể vật chủ, như virus viêm phế quản truyền nhiễm (Infection bronchitis virus) Cho nên khi gà bị nhiễm virus Newcastle kết hợp với các loại virus khác, bệnh không biểu hiện rõ rệt, ñồng thời làm giảm phản ứng miễn dịch (Hanson R.P, 1972)
2.1.1.3 Nuôi cấy virus Newcastle
* Gây nhiễm cho phôi gà
Virus Newcastle có thể nhân lên trong xoang niệu mô của trứng gà ấp 9-10 ngày tuổi ðặc tính này ñược ứng dụng ñể nuôi cấy và phân lập virus từ bệnh phẩm Khi nuôi cấy trong phôi gà, những củng virus Newcastle có ñộc lực mạnh gây chết phôi từ 20-48 giờ kể từ khi gây nhiễm, những chủng ñộc lực trung bình và yếu thời gian gây chết phôi trên 60 giờ Mổ khám những phôi chết thấy bệnh tích xuất huyết dưới da, nhất là da vùng ñầu, ngực, bụng và chân
Khả năng gây chết phôi của virus Newcastle còn phụ thuộc vào lượng kháng thể Newcastle có trong lòng ñỏ trứng do mẹ truyền qua
* Gây nhiễm vào môi trường tế bào xơ phôi gà một lớp:
Những chủng virus Newcastle ñều phát triển trong môi trường tế bào và gây hiện tượng bệnh lý tế bào (CPE- Cyto Pathogen Effective) Hệ thống tế bào thường dùng ñể chế môi trường là tế bào xơ phôi gà, tế bào thận gà một lớp (Beach, 1984) Trong môi trường tế bào nuôi cấy, sau 24-72 giờ, virus gây hủy hoại tế bào, làm cho
tế bào bị biến ñổi hình thái, tế bào co lại hoặc vỡ ra tạo thành tế bào khổng lồ (Nguyễn Như Thanh, 1997)
* Gây nhiễm cho gà:
Có thể dùng gà giò 2-3 tháng tuổi ñể tiêm truyền, virus sẽ phát triển và gây
Trang 22bệnh cho gà giống như gà mắc bệnh tự nhiên Với ñiều kiện bắt buộc là gà chưa ñược 1 lần sử dụng vacxin phòng bệnh và không nằm trong ổ dịch Newcastle
2.1.1.4 Sức ñề kháng của virus
Virus Newcastle và các Avian Paramyxovirus khác có thể bị phá hủy bởi các tác nhân vật lý, hóa học như nhiệt ñộ, ánh sáng (ánh sáng mặt trời và tia cực tím), sự oxy hóa, ñộ pH và các hóa chất Mức ñộ ảnh hưởng tùy thuộc vào chủng virus
Do virus có cấu tạo vỏ bọc ngoài là lipit nên rất mẫn cảm với các chất hóa học như ether, chloroform, formol và phenol Các chất này làm mất khả năng gây nhiễm nhưng không ảnh hưởng tới khả năng sinh miễn dịch của virus Virus bị tiêu diệt ở 600C trong 30 phút, 1000C trong 1 phút Ở 4-200C virus có thể tồn tại hàng tháng.Ở nhiệt
ñộ âm virus tồn tại hàng năm pH < 2 hoặc pH > 10 làm virus mất khả năng gây nhiễm Virus dễ bị tiêu diệt bởi tia tử ngoại Dung dịch glyxerin 50% có thể giữ virus trong 7 ngày ở 370C
Khả năng chịu nhiệt của virus mang ñặc tính di truyền, cá biệt có chủng chịu ñược nhiệt ñộ 560C trong 6 giờ mà vẫn còn khả năng gây nhiễm Có thể ứng dụng ñặc tính này của virus ñể chế vacxin chịu nhiệt (chủng V4 phân lập từ Úc)
2.1.1.5 ðộc lực của virus
Virus Newcastle ñược phân lập ở nhiều nước trên thế giới, chủng có mức ñộ ñộc lực và tính gây bệnh khác nhau ðể thống nhất cách ñánh giá ñộc lực của các chủng virus phân lập, tổ chức FAO (Allan H, Lancaster JE và Toth B, 1978), ñã chuẩn hóa cách ñánh giá theo mức ñộ ñộc lực và phân virus thành 3 nhóm:
Trang 23Phân nhóm ñộc lực của virus Newcastle
Khả năng gây bệnh cho gà của virus Newcastle tùy thuộc vào chủng virus, ñường xâm nhập, số lượng virus, ñiều kiện môi trường Thường gà con mắc bệnh cấp tính hơn gà trưởng thành
Người và một số ñộng vật có vú như chó, chuột cũng có thể mắc bệnh Quá trình viêm chỉ có tính nhất thời, giác mạc ít khi bị ảnh hưởng Ngoài ra, người bệnh còn có biểu hiện sốt, ñau ñầu, cảm giác ớn lạnh Các bằng chứng cho thấy các chủng virus có ñộc lực cho gà và cả chủng virus vacxin ñều có thể gây bệnh cho người Người mắc bệnh do tiếp xúc trực tiếp với virus như bị bắn virus vào mắt khi tiêm gây bệnh cho phôi gà trong phòng thí nghiệm, dụi tay vào mắt sau khi bắt gà
ốm và chết vì bệnh, hoặc bị nhiễm trong quá trình sử dụng vacxin bằng khí dung Bệnh không lây từ người sang người (Nguyễn Bá Hiên và cộng sự 2011)
2.2.2 ðường truyền lây của virus
Theo Alexander (1988) virus Newcastle có trong thức ăn, nước uống, phân theo ñường tiêu hóa (miệng, hầu, thực quản) hoặc qua không khí theo ñường hô hấp
Trang 24khi gà hít thở sẽ xâm nhập vào cơ thể và gây bệnh
Mức ñộ truyền lây phụ thuộc vào ñộc lực của virus, ñường xâm nhập, liều lượng lây nhiễm và sức ñề kháng của gà
Việc lây lan bệnh còn qua ñường vận chuyển các sản phẩm chế biến từ gà, xác chết, phân, chất thải, thức ăn thừa hoặc qua tiếp xúc giữa gà nuôi với chim hoang dã
Ở gà công nghiệp, ñường truyền lây chủ yếu là ñường hô hấp (mũi, miệng)
và niêm mạc mắt (Beard và Hanson, 1984) Virus Newcastle cư trú tại niêm mạc ñường hô hấp của gà cảm nhiễm, khi phát bệnh, virus ñược thải ra ngoài qua hơi thở của gà vào không khí, vì vậy gà thường mắc thể hô hấp (Beard và Easterday, 1967) Khi gà bị bệnh có triệu chứng ho và hắt hơi, vẩy mỏ thì bệnh lây lan càng nhanh
Thời gian lây bệnh qua ñường tiêu hóa chậm hơn ñường hô hấp Gà nhiễm bệnh sẽ thải virus qua phân và bệnh xuất hiện khi gà ăn phải mầm bệnh ðường truyền lây này thường xảy ra ñối với những chủng có ñộc lực thấp hướng nội tạng (Alexander, 1988)
Khả năng truyền dọc từ trứng nhiễm mầm bệnh ở ñường sinh dục gà mẹ chưa
rõ ràng (Beard và Hanson, 1984) Gà mái nhiễm virus Newcastle các chủng thuộc nhóm Velogen có thể ngừng ñẻ nhưng nhiễm các chủng thuộc nhóm Lentogen sẽ
có miễn dịch và vẫn tiếp tục ñẻ Phôi nhiễm virus trước khi nở thường bị chết, nhưng vẫn có thể nở khi virus không có ñộc lực (French và cộng sự, 1967)
Trên bề mặt vỏ trứng bị nhiễm virus Newcastle từ phân thì sau khi nở, gà có thể mắc bệnh do virus trong phân bám vào vỏ trứng và sống trong thời gian ấp trứng
Phôi gà chết do nhiễm mầm bệnh là môi trường tốt cho virus tồn tại Virus Newcastle có thể tồn tại trong nước trứng ở nhiệt ñộ 370C trên 3 tháng (Lancaster, 1966)
Ngoại ký sinh trùng có thể làm lây lan virus Newcastle nhưng không quan trọng (Lancaster,1966) Muỗi cũng có thể truyền virus Newcastle (Beard và Hanson, 1984)
Trang 252.2.3 Cơ chế sinh bệnh
Virus có thể xâm nhập vào cơ thể qua ñường tiêu hóa, qua niêm mạc hầu, họng sau ñó vào máu gây nhiễm trùng huyết và gây viêm hoại tử nội mô huyết quản, gây xuất huyết do thành huyết quản bị phá hủy và xuất dịch vào các xoang trong cơ thể
Virus không tác ñộng trục tiếp lên phổi nhưng thường gây khó thở do tác ñộng của virus làm rối loạn hệ thống tuần hoàn và trung khu hô hấp của hệ thần kinh trung ương
Theo Hanson (1975), sau khoảng 24 giờ virus bắt ñầu nhân lên tại vị trí xâm nhập rồi ñi vào máu trong khoảng thời gian 36 giờ Ít giờ sau, virus xâm nhập vào
hệ thống thần kinh trung ương và một số tế bào có nguồn gốc tế bào ngoại mô và tế bào lưới nội mô
Virus vào cơ thể sau khi ñược nhân lên sẽ gây tổn thương thực thể tế bào rồi
bị thải ra ngoài và ñược phát hiện trong phân vào ngày thứ 3-5 sau khi nhiễm bệnh (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978; Nguyễn Thát, 1976)
2.2.4 Các thể bệnh Newcastle
* Dựa vào ñặc tính sinh học và ñặc ñiểm gây bệnh của mỗi chủng, bệnh ñược chia thành 5 thể khác nhau (Beard and Hanson, 1984)
-Thể Doyle (Viscertropic Velogen): Là thể ñược Doyle nhận biết ñầu tiên vào
năm 1927, gây ra bởi các chủng virus thuộc nhóm Velogen Bệnh tiến triển ở thể cấp tính, tỷ lệ chết cao 90-100% Bệnh xảy ra ở gà mọi lứa tuổi Bệnh tích ñặc trưng
là xuất huyết niêm mạc ñường tiêu hóa
-Thể Beach (Neurotropic Velogenic): Là thể bệnh ñược Beach mô tả vào năm
1942, gây ra bởi chủng virus thuộc nhóm Velogen Bệnh tiến triển ở thể cấp tính, gây chết nhanh gà mọi lứa tuổi, gây bệnh tích ở bộ máy hô hấp và thần kinh mà không gây bệnh tích ở hệ tiêu hóa Thể bệnh này ñược gọi là bệnh hô hấp thần kinh hoặc Pneumoencephatitis
-Thể Beaudette (Mesogenic): Là thể bệnh ñược Beaudette mô tả vào năm
1948 Bệnh biểu hiện triệu chứng hô hấp cấp tính, triệu chứng thần kinh ñối với gà con và gây chết, nhưng ít gây chết ñối với gà trưởng thành Virus gây ra thể bệnh
Trang 26này thuộc nhóm Mesogen Có thể dùng các chủng thuộc nhóm này làm giống gốc ñể chế vacxin phòng bệnh
-Thể Hitchner (Respiratory): Bệnh gây ra bởi các chủng virus thuộc nhóm
Lentogen như chủng B1, F, Lasota Thể bệnh ñược Hitchner mô tả năm 1984, không biểu hiện rõ triệu chứng hô hấp
-Thể nội tạng (Asymptomatic enteric): Gà bị bệnh thường không biểu hiện
triệu chứng bên ngoài và bệnh tích bên trong Virus có thể phân lập từ phân, dạ dày của gà bệnh (French và cộng sự, 1967) ðây là các chủng có ñộc lực thấp như Lister 2C, V4 nên có thể dùng các chủng này làm giống gốc ñể chế vacxin
2.2.5 Bài xuất virus
Trong cơ thể gà bị bệnh, hầu hết các cơ quan phủ tạng ñều chứa virus Thường 24 giờ sau khi nhiễm có thể tìm thấy virus ở thận, lách, túi Fabricius, ñường
hô hấp, tụy và não Máu chứa virus nhưng không thường xuyên
Virus ñược bài xuất ra ngoài qua phân, nước mắt, nước mũi Gà bị bệnh bài xuất virus bắt ñầu từ 20-24 giờ trước khi xuất hiện triệu chứng lâm sàng và kéo dài suốt thời kỳ bệnh cho ñến khi khỏi hoặc chết Gà lành bệnh trở thành vật mang trùng và bài xuất virus ra môi trường xung quanh trong khoảng 2 tuần, có khi kéo dài ñến 5 tuần (Lancaster, 1966)
2.2.6 Triệu chứng
(Nguyễn Bá Hiên và cộng sự 2011).Thời gian nung bệnh: dao ñộng từ 2-15
ngày (trung bình từ 5-6 ngày) sau khi nhiễm bệnh tự nhiên Thời gian nung bệnh dài hay ngắn phụ thuộc vào chủng virus, lứa tuổi và sức ñề kháng của cơ thể, ngoài ra còn phụ thuộc vào hiện tượng nhiễm trùng kế phát, ñiều kiện môi trường, ñường xâm nhập, số lượng virus xâm nhập
Bệnh thường tiến triển theo ba thể chính: thể quá cấp tính, thể cấp tính và thể mạn tính
-Thể quá cấp tính: Do chủng virus có ñộc lực rất cao gây ra.Thường chỉ xuất hiện ở ñầu ổ dịch, bệnh tiến triển rất nhanh, con vật ủ rũ cao ñộ, sau vài giờ thì chết
mà chưa biểu hiện triệu chứng lâm sàng
-Thể cấp tính: ðây là thể bệnh phổ biến Trong ñàn gà xuất hiện một số con ủ
Trang 27rũ, kém hoạt ñộng, bỏ ăn, lông xù, cánh sã như khoác áo tơi Gà con chậm chạp, thường ñứng tụ lại thành ñám; gà lớn tách ñàn thích ñứng một mình, con trống thôi gáy, con mái ngừng ñẻ Trên nền chuồng thấy xuất hiện nhiều bãi phân trắng như phân cò Gà bệnh thường sốt cao 42,5 – 43°C
Sau khi xuất hiện các triệu chứng ñầu tiên, gà lờ ñờ rồi trở nên khó thở trầm trọng Từ mũi chảy ra một chất nhớt màu ñỏ nhạt hoặc trắng xám hơi nhớt Gà bệnh hắt hơi, vảy mỏ liên tục, thường kêu thành tiếng “toác toác” Bệnh nặng, gà không thở ñược bằng mũi; do có nhiều fibrin màu xám xẫm ở niêm mạc miệng, hầu, họng, xoang mũi cho nên gà phải vươn cổ, há mỏ ra ñể thở Xung quanh mắt và ñầu thường bị phù thũng
Gà bệnh bị rối loạn tiêu hoá trầm trọng: gà bỏ ăn, uống nước nhiều Thức ăn
ở diều không tiêu, nhão ra do lên men, sờ tay vào diều như sờ vào túi bột Khi cầm chân gà dốc ngược lên thì từ miệng sẽ chảy ra một chất nước nhớt, mùi chua khắm Bệnh kéo dài vài ngày thì sinh ỉa chảy: phân lúc ñầu còn ñặc, có thể lẫn máu, màu nâu sẫm; sau loãng dần có màu trắng xám do chứa nhiều muối urat Lông ñuôi gà bẩn, dính bết phân Niêm mạc hậu môn xuất huyết thành những tia máu ñỏ
Mào, yếm của gà bị ứ máu màu tím bầm trong thời gian khó thở, sau chuyển màu tái dần do mất máu
Gà bị run cơ, cổ ngoẹo, liệt chân và cánh, biểu hiện tư thế opisthotonus Ở thể bệnh này, gà thường chết sau vài ba ngày do bại huyết Với những ñàn gà mẫn cảm, tỷ lệ chết có thể lên ñến 100%
-Thể mạn tính: thường xuất hiện ở cuối ổ dịch với các bệnh biến do rối loạn
hệ thần kinh trung ương Do tổn thương tiểu não, gà bệnh có những chuyển ñộng bất bình thường: vặn ñầu ra sau, ñang ñi bỗng dừng lại, ñi giật lùi, ñi vòng tròn Có khi
gà mổ nhiều lần vẫn không trúng ñược thức ăn Khi bị kích thích nếu có tiếng ñộng mạnh hay sự va chạm ñột nhiên gà ngã lăn ra ñất, lên cơn ñộng kinh co giật Các cơn ñộng kinh này thường mãnh liệt vào lúc sáng sớm khi mới mở cửa chuồng
Gà ñẻ, tỷ lệ ñẻ giảm và kéo dài trong vài tuần Bệnh mạn tính thường kéo dài vài tuần Gà chết do ñói và kiệt sức Nếu ñược chăm sóc, gà có thể qua khỏi nhưng ñể lại di chứng thần kinh trong một thời gian dài Gà lành bệnh ñược miễn dịch suốt ñời
Trang 28Bệnh tích ñiển hình thường tập trung ở ñường tiêu hoá: niêm mạc dạ dày tuyến xuất huyết thành những chấm màu ñỏ tròn to bằng ñầu ñinh ghim, mỗi ñiểm tương ứng với một lỗ ñổ ra của tuyến tiêu hoá Nhiều trường hợp (nhất là bệnh nặng hoặc kéo dài) hiện tượng xuất huyết không thành ñiểm mà tập trung thành dải, thành vệt trên niêm mạc ở ñầu và cuối cuống mề (chặn trước và chặn sau của dạ dày tuyến) Dạ dày cơ: dưới lớp sừng keratin cũng bị xuất huyết, thâm nhiễm dịch thẩm xuất kiểu gelatin Niêm mạc ruột non xuất huyết, viêm cata trong giai ñoạn ñầu Giai ñoạn sau các nang lympho bị viêm loét, rõ nhất là ở các mảng Payer Vết loét
có thể nhìn thấy từ mặt ngoài, có hình tròn, hình trứng hay hình hạt ñậu có màu mận chín Mổ ra thấy vết loét phủ lớp bựa màu nâu dày cộm lên trên bề mặt niêm mạc,
dễ bóc Một số trường hợp vết loét hình cúc áo giống như nốt loét trong bệnh dịch tả lợn Trên niêm mạc, bên cạnh vết loét là những ñám xuất huyết (trường hợp bệnh nặng có thể lan xuống tận ruột già gần hậu môn)
Lách gà không sưng, bị hoại tử Gan xuất huyết, có một số ñám thoái hoá mỡ màu vàng nhạt Thận hơi sưng, trên bề mặt có sọc trắng do tích nhiều muối urat Dịch hoàn, buồng trứng bị xuất huyết thành từng vệt, từng ñám, nhiều trường hợp buồng trứng dính chặt với ống dẫn trứng, trứng non bị vỡ, lòng ñỏ chứa ñầy xoang bụng Xuất huyết ở các màng thanh dịch như bao tim, xoang ngực, bề mặt trong xương ức Não viêm, xuất huyết Những biến ñổi bệnh lý của hệ thần kinh trung -ương không quan sát ñược bằng mắt thường (Nguyễn Bá Hiên và cộng sự 2011)
Trang 292.2.8 Chẩn đốn
*Chẩn đốn lâm sàng
Cĩ thể chẩn đốn bệnh Newcastle dựa vào các đặc điểm dịch tễ học và triệu chứng, bệnh tích như đã nêu
*Chẩn đốn phân biệt
Cần chẩn đốn phân biệt bệnh Newcastle với một số bệnh dễ nhầm lẫn
*Chẩn đốn virus học
Lấy bệnh phẩm là phân, chất chứa đường tiêu hĩa hoặc dịch ngốy ổ nhớp, dịch ngốy khí quản đối với gà sống Lấy bệnh phẩm là não, gan, lách, phổi của gà bệnh mới chết Bệnh phẩm được nghiền với nước sinh lý thành huyễn dịch 1/10, xử
lý kháng sinh, để kháng sinh tác động ở nhiệt độ phịng trong 1 – 2 giờ, ly tâm 1000 vịng/ phút / 10 phút và lấy nước trong ở trên
Gây bệnh cho gà: yêu cầu gà khỏe mạnh, khơng nằm trong vùng cĩ dịch và chưa tiêm vacxin phịng bệnh Newcastle Tiêm 1 ml vào dưới da hay bắp thịt Mỗi mẫu đem tiêm cho 2 – 3 gà Sau 3 – 5 ngày xuất hiện các dấu hiệu đầu tiên của bệnh Sau 7 - 10 ngày gà chết mổ khám thấy bệnh tích giống như của gà mắc bệnh ngồi tự nhiên
Gây nhiễm cho phơi: dùng phơi gà 9 – 11 ngày tuổi, tốt nhất lấy phơi gà của đàn gà SPF (specific pathogen free) hoặc gà khơng cĩ kháng thể Newcastle Mỗi mẫu tiêm 0,2ml/phơi/5 phơi; tiêm vào xoang niệu mơ Phơi chết sau 4 -7 ngày, để lạnh ở 40C rồi thu hoạch lấy nước trứng, kiểm tra bằng phản ứng ngưng kết hồng cầu (Hemagglutinin test – HA), nếu bệnh phẩm cĩ virus, phản ứng HA dương tính Kiểm tra bệnh tích của phơi
Gây nhiễm vào mơi trường tế bào: cĩ thể sử dụng nhiều loại mơi trường tế bào nhưng phương pháp gây nhiễm vào mơi trường tế bào xơ phơi gà một lớp được
sử dụng phổ biến Nếu bệnh phẩm cĩ virus, sau 72 giờ gây nhiễm, virus gây bệnh tích tế bào Căn cứ vào các chỉ số để xác định độc lực của virus Lấy dịch nuơi cấy
tế bào làm phản ứng HA sẽ cho kết quả dương tính
*Chẩn đốn huyết thanh học
Cĩ thể sử dụng nhiều phản ứng khác nhau như: phản ứng kết tủa khuyếch tán
Trang 30trong thạch, ELISA (enzyme linked immunosorbent assays), phản ứng trung hịa; nhưng phổ biến nhất là phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI) để phát hiện kháng thể cĩ trong huyết thanh
Ngồi ra kỹ thuật RT – PCR (Reverse transcription polymerase chain reaction) cũng được sử dụng để chẩn đốn bệnh.( Nguyễn Bá Hiên và cộng sự, 2011)
2.2.9 Miễn dịch đối với bệnh Newcastle
Về lý thuyết nĩi chung, khi kháng nguyên (virus, vi trùng…) xâm nhập vào
cơ thể, sẽ kích thích cơ thể sản sinh đáp ứng miễn dịch đặc hiệu để chống lại chúng Miễn dịch đặc hiệu chia làm 2 loại: miễn dịch dịch thể và miễn dịch qua trung gian tế bào
ðối với bệnh Newcastle, khi virus xâm nhập vào cơ thể sẽ kích thích cơ thể sản sinh đáp ứng miễn dịch dịch thể Burnet (1942) là người đầu tiên phát hiện ra tính gây ngưng kết của virus Newcastle và kháng thể đặc hiệu gây ức chế hiện tượng này
Trong cơ thể, cĩ hai nhĩm tế bào lympho chủ yếu tham gia vào quá trình đáp ứng miễn dịch, các tế bào này cĩ chức năng khác nhau
-Nhĩm tế bào lympho T: nhĩm tế bào phụ thuộc tuyến ức
-Nhĩm tế bào lympho B: nhĩm tế bào phụ thuộc túi Fabricius
Túi Fabricius chỉ cĩ ở lồi chim, nằm phiá trên trực tràng, sát hậu mơn, là một cơ quan cĩ vai trị như dạng lympho trung ương, làm biệt hĩa dịng tế bào lympho B Trong đáp ứng miễn dịch dịch thể, vai trị chính là tế bào lympho B, nhưng phải cĩ sự tham gia của tế bào T hỗ trợ và đại thực bào
Ở gia cầm trong quá trình sản sinh kháng thể, tế bào lympho B phải qua quá trình biệt hĩa như sau: các tế bào gốc từ tủy xương đi tới túi Fabricius, ở đĩ xảy ra quá trình biệt hĩa mà khơng cần sự hỗ trợ của lympho T Tế bào nguồn được biệt hĩa thành tiền lympho B, nhưng chưa cĩ dấu ấn bề mặt (SIg) mà chỉ cĩ IgM trong bào tương Sau khi tiền lympho B biệt hĩa thành lympho bào B chưa chín, các tế bào này đã cĩ SIgM
Giai đoạn tiếp theo, lympho bào B chưa chín sẽ biệt hĩa thành lympho bào B chín với sự xuất hiện SIgM và SIgD (globulin miễn dịch bề mặt) Lympho bào B
Trang 31chắn chưa phải là tế bào sản sinh kháng thể mà các phân tử SIg hoạt ựộng như những thụ thể bề mặt tiếp nhận kháng nguyên, sau khi biệt hóa thành tế bào lympho
B chắn, chúng sẽ rời trung tâm túi Fabricius, di chuyển tới các cơ quan lympho ngoại vi như máu, lách, nang lympho
Ở hạch, tế bào B nằm ở tâm ựiểm mầm và vùng tủy, chúng ựược biệt hóa ựể biến thành tế bào plasma sản sinh kháng thể Quá trình này phụ thuộc vào sự kắch thắch của kháng nguyên và sự hỗ trợ của lympho T
*Miễn dịch thụ ựộng
Ở gà con cũng như gia cầm non, hệ thống miễn dịch chưa phát triển hoàn thiện
Vì vậy ngay từ khi mới nở, cơ thể của chúng hoàn toàn không có khả năng chống lại các tác nhân gây bệnh một cách chủ ựộng và ựặc hiệu Theo Heller và Nathan (1977) trạng thái miễn dịch ựặc hiệu ở gà con chỉ có thể có ựược khi cơ thể mẹ có miễn dịch chống bệnh Newcastle và truyền kháng thể ựặc hiệu cho con qua lòng ựỏ trứng đây là kháng thể thụ ựộng, là cơ sở tạo nên miễn dịch thụ ựộng ở gà con
Hàm lượng kháng thể thụ ựộng ở gà con có liên quan ựến hàm lượng kháng thể có trong lòng ựỏ trứng và trong huyết thanh của gà mẹ Hàm lượng kháng thể thụ ựộng cao hay thấp khác nhau ở gà con 1 ngày tuổi có ý nghĩa quan trọng ựối với gà con trong tuần
lễ ựầu Lượng kháng thể này chỉ tồn tại trong một thời gian ngắn nên không có khả năng bảo hộ lâu dài cho gà con Vì vậy, việc kiểm tra kháng thể thụ ựộng của gà con là cần thiết ựể xác ựịnh thời ựiểm ựưa vacxin lần ựầu Tuy nhiên khi dùng vacxin tạo miễn dịch chủ ựộng cho gà thì kháng thể thụ ựộng sẽ trung hòa một số lượng virus vacxin khi sử dụng vacxin lần ựầu (Alexander, D.J 1991)
*Miễn dịch chủ ựộng
Khi một kháng nguyên xâm nhập vào cơ thể, cơ thể sẽ ựáp ứng lại trước hết bằng ựáp ứng miễn dịch không ựặc hiệu, sau ựó bằng ựáp ứng miễn dịch ựặc hiệu đáp ứng miễn dịch ựặc hiệu có thể là ựáp ứng miễn dịch dịch thể, tạo ra kháng thể dịch thể, là các lớp globulin miễn dịch (Ig) hoặc ựáp ứng miễn dịch trung gian tế bào tạo ra các lympho T mẫn cảm hoặc là cả hai đây là các kháng thể chủ ựộng, là cơ sở tạo ra miễn dịch chủ ựộng cho cơ thể
Theo Timms và cs (1997), ựối với virus Newcastle, khi vào cơ thể gà sẽ kắch thắch cơ thể gà sinh ra ựáp ứng miễn dịch dịch thể là chủ yếu Virus Newcastle
Trang 32nhược ñộc vào cơ thể, chỉ sau 2 - 3 ngày ñáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào ñã xuất hiện Chính nhờ có quá trình ñáp ứng miễn dịch này, ta có thể giải thích ñược khả năng bảo hộ của gà có ñược trước khi kháng thể dịch thể xuất hiện
Quá trình ñáp ứng miễn dịch dịch thể ñối với virus Newcastle, sự hình thành kháng thể cũng tuân theo quy luật chung Khi virus Newcastle vào cơ thể, kháng thể dịch thể không sinh ra ngay lập tức mà phải có thời gian tiềm tàng từ 4 - 5 ngày, kháng thể dịch thể mới xuất hiện, lượng kháng thể tăng dần, ñạt mức cao nhất khoảng 3 - 4 tuần Nếu không nhận ñược kích thích lại của kháng nguyên thì kháng thể trong máu giảm dần và biến mất sau một thời gian Thời gian tồn tại của kháng thể dài hay ngắn, lượng kháng thể ñược sản sinh ra nhiều hay ít còn phụ thuộc vào chủng virus Kháng thể ngăn trở ngưng kết hồng cầu tồn tại một năm sau khi gà khỏi bệnh, do chủng virus Newcastle thuộc nhóm Mesogen, còn nếu sử dụng vacxin phải sau nhiều lần tiêm nhắc lại Kháng thể Newcastle chỉ tồn tại trong cơ thể một thời gian rồi bị ñào thải, nên khi lượng kháng thể giảm phải tiêm nhắc lại tạo trạng thái miễn dịch cao cho cơ thể ðường ñưa vacxin có ảnh hưởng trực tiếp ñến ñáp ứng miễn dịch Nếu ñưa vacxin bằng cách cho uống không thu ñược kháng thể ñồng
ñều và cao (Allan, 1978)
Trong quá trình ñáp ứng miễn dịch dịch thể ở gia cầm, thành phần của kháng thể dịch thể gồm có 4 lớp globulin miễn dịch: IgG, IgM, IgA và IgD
Ở bệnh Newcastle, virus vào cơ thể lần ñầu sẽ gây ra ñáp ứng miễn dịch sơ cấp Trong quá trình ñáp ứng miễn dịch này, lớp kháng thể tạo ra ban ñầu chủ yếu là IgM, sau ñó là lớp IgG tạo ra yếu hay trung bình Khi virus vào lần sau sẽ gây ra ñáp ứng miễn dịch thứ cấp Trong quá trình ñáp ứng miễn dịch này, lớp kháng thể ñược tạo ra chủ yếu là IgG, còn IgM chỉ có lượng rất ít
Cùng với các lớp globulin miễn dịch có trong huyết thanh, do tương bào của lách sản xuất ra, còn có vai trò quan trọng của các lớp globulin miễn dịch cục bộ Lớp globumin này do các tương bào của tổ chức lympho dưới niêm mạc tiết ra, ñổ vào màng lớp nhầy ñệm ở ñường hô hấp trên và ñường tiêu hóa của gà, tạo miễn dịch cục bộ cho cơ thể Thành phần của lớp globulin miễn dịch này chủ yếu là lớp IgA, ngoài ra còn có một ít của lớp IgG Những gà sống sót sau khi bị bệnh
Trang 33Newcastle, cơ thể của chúng ñược miễn dịch, miễn dịch này là miễn dịch chủ ñộng Dựa trên cơ sở ñó người ta ñã tạo miễn dịch chủ ñộng cho gà chống bệnh Newcastle bằng việc tiêm vacxin
2.2.10 Phòng bệnh
*Vệ sinh phòng bệnh
-Khi dịch chưa xảy ra: hạn chế người qua lại khu vực chăn nuôi nhất là ở những nơi chăn nuôi lớn, tập trung Người ra vào, công nhân chăn nuôi phải sát trùng kỹ tay chân, quần áo Công tác kiểm dịch vận chuyển gà và trứng gà cần phải thực hiện nghiêm ngặt Trứng ấp phải lấy từ những nơi có nguồn gốc rõ ràng Không lấy trứng từ những nơi nghi có bệnh Gà nhập về phải nuôi cách ly ít nhất 10 ngày ñể theo dõi, nếu không có biểu hiện bệnh mới ñược ñưa vào nuôi
-Khi dịch ñã xảy ra: ñể dập tắt dịch nhanh, tốt nhất nên tiêu diệt toàn bộ gà
bị bệnh và nghi nhiễm bệnh Tiêm phòng vacxin, cách ly số còn lại Tổng tẩy uế tiêu ñộc chuồng trại và khu vực xung quanh Gà chết phải ñược chôn sâu, lấp kỹ Không mang gà bệnh và sản phẩm của chúng ra khỏi vùng ñang có dịch.(Nguyễn Bá Hiên
và cộng sự 2011)
*Vacxin phòng bệnh
Dựa vào ñặc tính của virus Newcastle, khi xâm nhập vào cơ thể sẽ kích thích
cơ thể sản sinh ra kháng thể, tạo miễn dịch chủ ñộng chống lại bệnh một cách ñặc hiệu, Allan và cs (1978), ñã ñề cập ñến các loại vacxin Newcastle và việc sử dụng vacxin ñể phòng bệnh:
Có 2 loại vacxin ñể phòng bệnh Newcastle là vacxin sống và vacxin vô hoạt -Vacxin sống
Năm 1955, tổ chức dịch tể thế giới (O.I.E) ñã ñề cập ñến việc sử dụng các chủng virus sống Newcastle không ñộc hoặc các chủng ñộc ñược giảm ñộc tố ñể chế vacxin Hầu hết các chủng virus dùng làm giống gốc ñể sản xuất vacxin là chủng virus Newcastle nhóm Lentogen hoặc Mesogen Vacxin ñược ñưa vào cơ thể theo ñường thích hợp, virus ñược nhân lên và kích thích cơ thể sản sinh kháng thể Kháng thể xuất hiện trong huyết thanh sau 6-10 ngày hoặc sớm hơn sau khi ñưa vacxin vào cơ thể
Vacxin sản xuất từ các chủng thuộc nhóm Lentogen:
Trang 34Thường sử dụng các chủng có nguồn gốc tự nhiên ñể làm giống gốc sản xuất vacxin như chủng Lasota (Winterfiel, 1957) B1(Hitchner), F(Asplin, 1952), V4 (Arthur Webster, 1966) Vacxin ñược ñưa vào cơ thể bằng cách nhỏ mắt, mũi, phun sương hoặc pha nước uống sẽ gây miễn dịch nhanh
Liều sử dụng thích hợp cho gà từ 106.5 – 107 EID50 Thời gian miễn dịch cho
gà dưới 4 tuần thường từ 1-2 tháng, gà trên 4 tuần thường ñến 3 tháng (Allan và cộng sự, 1978)
*Vacxin sản xuất từ các chủng thuộc nhóm Mesogen
Thường sử dụng một số chủng sau ñây ñể làm giống gốc sản xuất vacxin Roakin (Beaudette, 1949), Komarov (Komarov và Golsmit,1946), Herforshire (H) (Iyer và Dobson, 1940), Mukteswar (Hoddow và Idnan, 1946),
Vacxin ñược chế từ các chủng thuộc nhóm Mesogen ñược dùng ở những vùng thường xuyên có dịch với liều thích hợp cho gà là 105 EID50 Vacxin chỉ dùng cho gà trên 8 tuần tuổi ñã ñược sử dụng vacxin Lasota hay B1 Vacxin sống ñông khô có thể bảo quản ở nhiệt ñộ 40C ñược 1 năm Tiêm vacxin dưới da cánh của gà, thời gian miễn dịch kéo dài 3-6 tháng
Một số chủng virus vacxin sống
*Vacxin vô hoạt:
Vacxin vô hoạt ñược ñược sản xuất từ những chủng virus sống cường ñộc và ñược xử lý bởi Formalin hoặc Betapropiolactone, sau ñó bổ xung thêm chất bổ trợ
ñể làm tăng them tính miễn dịch của vacxin
Trang 35Chất bổ trợ miễn dịch có thể ở dạng nước như aluminium hyñroxyt, aluminium muối hoặc ở dạng dầu như dầu mỏ, dầu thực vật cho dạng vacxin nhũ hóa (dạng nhũ hóa ñơn hoặc kép tùy thuộc vào công thức của chúng)
Vacxin vô hoạt ñược ñưa vào cơ thể gà bằng ñường tiêm dưới da hoặc tiêm bắp Vacxin vô hoạt dễ bảo quản hơn vacxin sống Do không bị ảnh hưởng bởi kháng thể thụ ñộng nên có thể dùng ngay cho gà từ lúc 1 ngày tuổi Vacxin ít có phản ứng phụ, hiệu giá kháng thể hình thành cao và ñộ dài miễn dịch dài.Tuy nhiên, chi phí sản sản xuất và sử dụng cao, việc kiểm soát chất lượng vacxin khó
Miễn dịch của vacxin nhũ dầu kéo dài ít nhất một năm Vacxin ñược bảo quản ở nhiệt ñộ 4-80C
Ở Việt Nam hiện nay, vacxin phòng bệnh Newcastle cho gà có thể ñược sản xuất trong nước hay nhập khẩu từ nước ngoài và có nhiều chủng loại khác nhau Vacxin sản xuất trong nước chủ yếu là vacxin nhược ñộc và ở dạng ñơn giá
*Công ty thuốc thú y Trung ương 2 (NAVETCO) ñã và ñang sản xuất”
Vacxin Newcastle ñông khô, chủng F phòng bệnh Newcastle cho gà từ 1 ngày tuổi Vacxin ñược ñưa vào cơ thể gà bằng cách: nhỏ mắt, mũi với liều 0,2ml/con
Vacxin Newcastle ñông khô, chủng Lasota phòng bệnh cho gà từ 2 tuần tuổi trở lên ðường ñưa vacxin: nhỏ mắt, mũi với liều 0,1- 0,2ml/con, cho uống với liều 3ml/con
Vacxin Newcastle ñông khô, chủng Mukteswar phòng bệnh cho gà trên 2 tháng tuổi, tiêm bắp, tiêm dưới da liều 0,5ml /con
Vacxin Newcastle chịu nhiệt phòng bệnh cho gà mọi lứa tuổi bằng cách nhỏ mắt,mũi cho uống, cho ăn
*Phân viện thú y Miền trung – Trực thuộc Viện thú y Quốc gia sản xuất:
-Vacxin Lasota phòng bệnh Newcastle cho gà 10 ngày tuổi bằng cách nhỏ mắt, mũi với liều 0,2ml/con
-Vacxin Lasota chịu nhiệt phòng bệnh Newcastle cho gà mọi lứa tuổi bằng cách nhỏ mắt, mũi, cho uống, cho ăn
*Xí nghiệp thuốc thú y Trung ương (VETVACO) ñã và ñang thường xuyên cung cấp cho người chăn nuôi nhiều loại vacxin phòng bệnh Newcastle :
Trang 36Vacxin nhược ñộc ñông khô ñược chế từ chủng Mukteswar ñể phòng bệnh cho gà trên 2 tháng tuổi Vacxin ñược tiêm bắp hoặc dưới da với liều 0,1- 02ml/con Vacxin Lasota nhược ñộc ñông khô phòng bệnh Newcastle cho gà dưới 2 tháng tuổi ðường ñưa vacxin vào cơ thể gà bằng cách: nhỏ mắt, mũi với liều 0,1- 0,2ml/con, cho uống với liều 3-5ml/con
Tại Việt Nam, hiện nay các vacxin nhập khẩu phòng bệnh Newcastle ñang lưu hành rất ña dạng và phong phú cả về số lượng và chủng loại và ñược ñóng gói ở nhiều hình thức khác nhau Vacxin có thể ở dạng ñơn giá, nhược ñộc như:
Vacxin ND Emulsion của công ty P.T Me dion – Indonexia phòng bệnh cho
gà bằng cách tiêm bắp hoặc dưới da với liều 0,5ml/con
Có thể là vacxin ña giá kết hợp của hai, ba thành phần kháng nguyên như: Nobilis ND + IB của công ty Intervet – Hà Lan
Newcastle Lasota+Bron Mass của công ty Ford dodge animal health – Mỹ
Có một số công ty sản xuất vacxin ở dạng vô hoạt dùng ñể tiêm bắp hoặc dưới da cho gà:
Nobilis IB+G+ND, Nobilis IB multi + G +ND của công ty Intervet – Hà Lan Medivac ND+IB+IBD Emusion của công ty P.T Medion– Indonexia
Ceva ND+IB +IBD K của công ty Cevasante Animal –Pháp
Trang 37CHƯƠNG 2 NỘI DUNG – VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Công việc nghiên cứu ñặc ñiểm dịch tễ học, quan sát triệu chứng, mổ khám kiểm tra bệnh tích bệnh Newcastle và thực trạng tình tình sử dụng vacxin phòng bệnh ñược tiến hành trực tiếp tại các ñàn gà nuôi trong các gia ñình trên ñịa bàn huyện ðồng Hỷ, tỉnh Thái Nguyên
Các thí nghiệm xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong huyễn dịch bệnh phẩm là óc gà nghi bệnh và kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của
gà trong ñàn bị bệnh ñược tiến hành tại Bộ môn VSV- TN, Khoa Thú y, Trường ðHNN Hà Nội
2.1.4 Một số bệnh tích ñặc trưng của bệnh Newcastle
2.1.5 Xác ñịnh sự có mặt của virus trong bệnh phẩm (óc gà) nghi mắc bệnh Newcastle
- Hồng cầu gà 1%
-Huyết thanh của gà trong ñàn xảy ra bệnh Newcastle ñể kiểm tra hiệu giá kháng thể
Trang 38- Bộ dụng cụ ñể tiến hành:
+ Phản ứng HA xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle
+ Phản ứng HI xác ñịnh hiệu giá kháng thể
- Nước sinh lí 0,85% vô trùng
- Bơm tiêm, kim tiêm ñể lấy máu gà
- Máy móc, thiết bị: tủ ấm, tủ sấy, máy ly tâm, buồng vô trùng…và các dụng
cụ cần thiết khác ñể tiến hành thí nghiệm
2.4 Phương pháp nghiên cứu
2.4.1 Lập phiếu ñiều tra ñể chủ ñộng thu thập thông tin liên quan
2.4.2 Phương pháp xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong nước trứng sau khi gây nhiễm huyễn dịch não gà nghi bệnh
Tiến hành phản ứng ngưng kết hồng cầu gà HA (Haemagglutination test) - Nguyên liệu:
Hồng cầu gà 1%
Nước trứng có chứa virus sau khi gây nhiễm huyễn dịch óc gà nghi bệnh Nước sinh lý vô trùng
Bơm tiêm, kim tiêm ñể tiêm trứng
Các dụng cụ, thiết bị (tủ ấm, tủ sấy…), hóa chất (Xitrat Natri, cồn-Iod) dùng cho phản ứng
Lấy hồng cầu ñặc pha với nước sinh lý thành hỗn dịch 1%
- Chuẩn bị nước trứng chứa virus: Lấy óc của gà trong ñàn ñang xảy ra bệnh Newcastle nghiền và pha với nước sinh lý theo tỷ lệ 1/10 Khử tạp khuẩn bằng kháng sinh rồi tiêm vào phôi thai gà 10 ngày tuổi, tiêm 0,2 ml vào xoang niệu mô,
ấp tiếp ở 370C sau 2- 4 ngày, những phôi gà chết, lấy ra ñể ở tủ lạnh 0- 40C/6h Sau
Trang 39ñó mổ trứng thu nước trứng, thử vô trùng bằng cách cấy trên các môi trường Nước trứng này ñược giữ ở tủ lạnh âm
+Tiến hành phản ứng:
Phản ứng có thể tiến hành trên ống nghiệm, trên tấm nhựa vi ngưng kết (Microplates) có 96 lỗ ñáy chữ U hoặc ñáy chữ V
Cho các thành phần vào dãy phản ứng theo sơ ñồ:
-Dùng micropipet nhỏ vào tất cả các giếng, mỗi giếng 50µl nước sinh lý Sau
ñó cho vào giếng thứ nhất 50µl nước trứng chứa virus Trộn ñều rồi hút sang giếng thứ hai 50µl Tiếp tục làm như vậy cho hết giếng thứ 10 thì hút bỏ ñi 50µl
Như vậy ñộ pha loãng nước trứng từ giếng 1 ñến giếng 10 theo thứ tự lần lượt từ 1/2; 1/4; 1/8…1/1024
-Nhỏ 50µl hồng cầu 1% vào tất cả các giếng
- Lắc ñều, ñể tấm nhựa ở nhiệt ñộ phòng, sau 20 phút ñọc kết quả
-Phản ứng dương tính: hồng cầu ngưng kết nằm rải ñều ở ñáy giếng như hình cái dù lộn ngược
-Phản ứng âm tính: hồng cầu lắng xuống ñáy thành cục tròn ñỏ, giống ñối chứng âm