1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên

91 866 3

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 91
Dung lượng 1,77 MB

Nội dung

Thông thường người ta chọn gà dò 2-3 tháng tuổi ñể gây nhiễm bằng cách tiêm bắp hoặc dưới da, với ñiều kiện biết chính xác gà chưa ñược sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle và có nguồn gố

Trang 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO

TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

-

TRƯƠNG LAN OANH

NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH NEWCASTLE VÀ THỰC TRẠNG SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH Ở CÁC ðÀN GÀ NUÔI TẬP TRUNG TRÊN ðỊA BÀN HUYỆN PHÚ LƯƠNG, TỈNH THÁI NGUYÊN

LUẬN VĂN THẠC SĨ

HÀ NỘI, 2013

Trang 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO

TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

-

TRƯƠNG LAN OANH

NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH NEWCASTLE VÀ THỰC TRẠNG SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH Ở CÁC ðÀN GÀ NUÔI TẬP TRUNG TRÊN ðỊA BÀN HUYỆN PHÚ LƯƠNG, TỈNH THÁI NGUYÊN

Trang 3

LỜI CAM ðOAN

Tôi xin cam ñoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa từng ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào Tôi xin cam ñoan rằng, mọi sự giúp ñỡ cho việc hoàn thành luận văn này ñã ñược cảm ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc

Hà Nội, tháng 1 năm 2014

Tác giả luận văn

Trương Lan Oanh

Trang 4

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc:

- Trước hết tới TS Phạm Hồng Ngân - Người Thầy hướng dẫn khoa học trực tiếp ñã tận tình chỉ bảo và ñóng góp nhiều ý kiến quan trọng từ bước ñầu ñề xuất ñề cương nghiên cứu, ñến quá trình triển khai ñề tài, thu thập thông tin, xử lý, tổng hợp số liệu, viết và hoàn chỉnh luận văn

- Các thầy cô Bộ môn Thú y Cộng ñồng, các thầy cô và các ñồng nghiệp Phòng thí nghiệm Trọng ñiểm công nghệ sinh học Thú y, cùng các thầy cô giáo Khoa Thú y, Ban quản lý ñào tạo Sau ñại học Trường ðại học Nông nghiêp Hà Nội ñã giúp ñỡ và tạo ñiều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn này

- Sự ñộng viên của bạn bè, ñặc biệt là gia ñình ñã tạo mọi ñiều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong quá trình học tập và thực hiện Luận văn

Hà Nội, ngày 20 tháng 1 năm 2014

Tác giả

Trương Lan Oanh

Trang 5

MỤC LỤC

Trang

LỜI CAM ðOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC BẢNG v

DANH MỤC HÌNH, HÌNH ẢNH vi

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii

MỞ ðẦU 1

1 ðặt vấn ñề 1

2 Mục tiêu nghiên cứu 1

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài 2

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 VIRUS NEWCASTLE VÀ BỆNH DO CHÚNG GÂY RA 3

1.1.1 Virus Newcastle 3

1.1.2 Bệnh Newcastle 10

1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU BỆNH NEWCASTLE TRÊN THẾ GIỚI VÀ TRONG NƯỚC 22

1.2.1 Trên thế giới 22

1.2.2 Trong nước 25

CHƯƠNG 2 NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30

2.1 NỘI DUNG 30

2.1.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ của bệnh Newcastle 30

2.1.2 Thực trạng tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle 30

2.2 NGUYÊN LIỆU 30

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31

2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 36

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37

3.1 MỘT SỖ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH NEWCASTLE 38

3.1.1 Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà 38

3.1.2 Tỷ lệ gà chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi 39

Trang 6

3.1.3 Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên

cứu 46

3.1.4 Kết quả mổ khám kiểm tra bệnh tích Newcastle ở gà trong ñàn xảy ra bệnh 49

3.1.5 Kết quả gây nhiễm phôi gà bằng huyễn dịch não của gà trong ñàn xảy ra bệnh ñể xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle 58

3.2 THỰC TRẠNG TÌNH HÌNH SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH NEWCASTLE 61

3.2.1 Các loại vacxin Newcastle sử dụng , lịch phòng, ñường ñưa vacxin và liên quan giữa chúng với tỷ lệ ñàn bị bệnh, tỷ lệ gà chết khi bệnh xảy ra 62

3.2.2 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh của gà ở những ñàn xảy ra bệnh 71

KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 74

1 Kết luận 74

2 ðề nghị 75

TÀI LIỆU THAM KHẢO 76

Trang 7

DANH MỤC BẢNG

Bảng 3.1 Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà nuôi tập trung

trong các gia ñình tại huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên 38

Bảng 3.2a: Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống

gà thịt nuôi công nghiệp 40

Bảng 3.2b Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống

Bảng 3.6a Lịch sử dụng, ñường ñưa vacxin liên quan với tỷ lệ ñàn bị

bệnh và tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ñối với các ñàn gà thịt nuôi công nghiệp 64

Bảng 3.6b Lịch sử dụng, ñường ñưa vacxin liên quan với tỷ lệ ñàn bị

bệnh và tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ñối với các ñàn gà thả vườn 67

Bảng 3.6c Lịch sử dụng, ñường ñưa vacxin liên quan với tỷ lệ ñàn bị

bệnh và tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ñối với các ñàn gà trứng thương phẩm 70

Bảng 3.7 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết

thanh của gà ở những ñàn xảy ra bệnh 71

Trang 8

DANH MỤC HÌNH, HÌNH ẢNH

Hình 3.1 Phân bố ổ dịch Newcastle xảy ra ở các tháng nghiên cứu 49

Hình 3.2 Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến 53

Hình 3.3 Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến 53

Hình 3.4 Loét niêm mạc dạ dày tuyến, phần tiếp giáp dạ dày cơ 54

Hình 3.5 Loét niêm mạc dạ dày tuyến, phần tiếp giáp dạ dày cơ 54

Hình 3.6 Loét niêm mạc dạ dày cơ 55

Hình 3.7 Loét niêm mạc dạ dày cơ 55

Hình 3.8 Xuất huyết niêm mạc ruột non 56

Hình 3.9 Xuất huyết, loét nang lympho bề mặt ruột non 56

Hình 3.10 Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng 57

Hình 3.11 Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng 57

Trang 9

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

- CRD: Chronic Respiratory Disease – Bệnh ñường hô hấp mạn tính

- EID50: Embryo Infective Dose – Liều gây nhiễm 50% phôi gà

- ELD50: Embryo Lethal Dose – Liều gây chết 50% phôi gà

- FAO: Food Agriculture Organisation – Tổ chức nông lương thế giới

- HA: Haemagglutination Test – Phản ứng ngưng kết hồng cầu

- HI: Haemagglutination Inhibition Test – Phản ứng ngăn trở ngưng kết

hồng cầu

- IVPI: Intra Venous Pathogenicity Index – Chỉ số gây bệnh khi tiêm virus

vào tĩnh mạch của gà 6 tuần tuổi

- LD50: Lethal Dose - Liều gây chết 50%

- MDT: Mean Death Time – Thời gian gây chết phôi trung bình

- NAVETCO: National Veterinary Company – Công ty thuốc thú y Trung ương 2

- TCN: Tiêu chuẩn ngành

- VETVACO: Central Company of Veterinary Vaccine and Drug – Xí nghiệp

Thuốc thú y Trung ương -ICPI: Intra Cerebral Pathogenicity Index - Chỉ số gây bệnh khi tiêm virus

vào não gà con 1 ngày tuổi

Trang 10

Huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên cĩ nhiều điều kiện thuận lợi để phát triển chăn nuơi gà Hiện tại trên địa bàn huyện cĩ hàng chục gia đình nuơi gà thịt tập trung theo hướng cơng nghiệp, gà thả vườn và gà trứng thương phẩm với số lượng lớn Nguồn cung cấp con giống rất phong phú: từ các Cơng ty phát triển chăn nuơi gà gia cơng, các Cơng ty liên doanh với nước ngồi và các cơ sở chăn nuơi tư nhân Qua tìm hiểu được biết, tại đây cĩ rất nhiều lịch hướng dẫn sử dụng vacxin phịng bệnh Newcastle cho đàn gà với nhiều loại vacxin khác nhau: đa giá, đơn giá, nhược độc, vơ hoạt, nhập từ nước ngồi hoặc sản xuất trong nước Tuy nhiên, ở một số gia đình, mặc dù đàn gà đã được sử dụng vacxin theo đúng hướng dẫn của nhà sản xuất nhưng bệnh Newcastle vẫn xảy ra Diễn biến bệnh phức tạp, khơng điển hình, nhiều trường hợp triệu chứng, bệnh tích khơng đặc trưng, khĩ chẩn đốn phát hiện, chủ gia trại, trang trại tìm mọi biện pháp để can thiệp, chi phí khá tốn kém nhưng khơng hiệu quả

Xuất phát từ thực tế trên, chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu một số

đặc điểm dịch tễ của bệnh Newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phịng bệnh ở các đàn gà nuơi tập trung trên địa bàn huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên”

2 Mục tiêu nghiên cứu

- Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ của bệnh Newcastle ở các đàn gà nuơi tập trung trong các gia đình tại Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên

- Tìm hiểu tình hình sử dụng vacxin phịng bệnh Newcastle cho gà nuơi tại

Trang 11

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài

- Góp phần làm rõ thêm ñặc ñiểm dịch tễ của bệnh Newcastle và chỉ ra cho chủ cơ sở chăn nuôi tại ñịa bàn nghiên cứu thấy những tồn tại, những thiếu sót trong việc sử dụng vacxin phòng bệnh dẫn ñến tình trạng bệnh Newcastle ở các ñàn gà nuôi

- Trên cơ sở kết quả nghiên cứu, ñề xuất biện pháp khắc phục và lịch sử dụng vacxin phòng bệnh phù hợp cho gà, giúp chăn nuôi ổn ñịnh và phát triển

Trang 12

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

Năm 1926, tại ngoại ô thành phố Newcastle, nước Anh xảy ra một số ổ dịch ở gà rất giống Bệnh dịch tả gà cổ ựiển ựã có từ trước ựó rất lâu, nhưng kết quả nghiên cứu huyết thanh học thì thấy căn bệnh hoàn toàn khác Bệnh xảy ra ở nước này, theo tài liệu ghi chép có liên quan ựến một con tầu vận chuyển thịt ựông lạnh có mang theo gà giống ựể nuôi, xuất phát từ ựảo Java, Indonesia, thuộc

châu Á ựến cảng của thành phố Newcastle Sau ựó một thời gian ngắn, tại một số

nước như Hà Lan, Ấn độ, Nhật BảnẦ cũng ựã thông báo xuất hiện những ổ dịch bệnh như thế (Alexander, 1988) để kỷ niệm nơi ựầu tiên phát sinh ra bệnh mới này ở gà vào năm 1926, người ta ựặt tên bệnh là Newcastle Về sau, ựể phân biệt với Bệnh dịch tả gà, người ta gọi bệnh Newcastle là Bệnh dịch tả gà châu Á (vì bệnh có nguồn gốc từ châu Á), Bệnh dịch tả gà giả Còn Bệnh dịch tả gà ựã biết trước ựó ựược gọi là Dịch tả gà cổ ựiển, Dịch tả gà châu Âu hay Dịch tả gà thật

Ở Việt Nam, bệnh ựã có từ lâu, lan truyền suốt từ Bắc ựến Nam Bằng chẩn ựoán thắ nghiệm, năm 1949, Jacotot ựã chứng minh bệnh Newcastle ở Việt Nam Năm 1956, Nguyễn Lương và Trần Quang Nhiên ựã khẳng ựịnh lại sự có

mặt của bệnh ở các tỉnh phắa Bắc nước ta (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1978)

Năm 1984-1985 bệnh Newcastle xảy ra ở ựàn gà nuôi tại Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thụy Phương - Viện chăn nuôi, tổng số gà chết và phải tiêu hủy 18.000

con Năm 1986, trại gà Phúc Thịnh - đông Anh, Hà Nội, tiêu hủy 56.000 con

Các xắ nghiệp chăn nuôi gà lớn ở miền Bắc như Nhân Lễ - Gia Lâm, Hà Nội; Tam đảo - Vĩnh Phúc; Lương Mỹ - Hà Tây (cũ) cũng ựã ắt nhất ựôi lần xảy ra bệnh Newcastle (Lê Văn Năm, 2004)

1.1 VIRUS NEWCASTLE VÀ BỆNH DO CHÚNG GÂY RA

1.1.1 Virus Newcastle

Bệnh Newcastle gây ra bởi virus Paramyxo type 1 (APMV-1), thuộc giống Avulavirus, họ Paramyxoviridae Có 9 Serotyp của các virus Paramyxo, ựược ựặt tên từ APMV-1 ựến APMV-9 (Alexander và Senne, 2008)

Trang 13

1.1.1.1 Hình thái và cấu trúc

Virus Newcastle có hệ gen là chuỗi ñơn ARN ñể truyền thông tin ARN và mật mã di truyền các protein Virus Newcastle có cấu tạo xoắn, có thể là hình tròn, hình trụ hay hình sợi Virus có vỏ bọc lipit nên rất mẫn cảm với các chất làm tan mỡ như ete, cloroform…

Kích thước virion (hạt virus) từ 150-400 nm Virus có cấu trúc nucleocapsit dạng xoắn ốc dài 1000 nm, ñường kính 17-18 nm Vỏ bọc ñược bao

phủ bởi các gai glycoprotein dài 8-12 nm (Dubois, 1984) Trọng lượng phân tử

của virus Newcastle khoảng 500 x 106 dalton Phân tử virus chứa khoảng 20-

25% lipid, 6% hydrocacbon (Alexander và Senne, 2008)

- Fusion protein (F) là những thụ thể nhỏ nằm trên bề mặt của hạt virus, có tác dụng liên hợp các tế bào bị nhiễm virus với nhau thành các tế bào khổng lồ ña nhân

- Nucleo protein (N), giống như Hístin, là một protein bảo vệ ARN

- Matrix protein (M) có tác dụng gắn ARN của virus với vỏ bọc

- Nucleo protein phospho (NP) có tác dụng gắn kết các Nucleocapsit với nhau

- Large protein (L) là men polymeraza liên kết trực tiếp ARN với nucleocapsid

Các protein cấu trúc sắp xếp quanh một trục theo hình xoắn ốc, rỗng giữa, bên trong là axit nucleic quyết ñịnh hình dạng của virus Trình tự các protein cấu trúc trong bộ gen của virus là 3 N-P-M-F-HN- L5

Virus Newcastle có khả năng gây ngưng kết hồng cầu của gà, bò, người, chuột bạch và chuột lang nhưng không gây ngưng kết hồng cầu ngựa ðây là ñặc

Trang 14

ñiểm ñể phân biệt với virus dịch tả gà (virus dịch tả gà có gây ngưng kết hồng cầu ngựa) Hiện tượng ngưng kết hồng cầu là do hồng cầu liên kết với ñiểm

quyết ñịnh kháng nguyên trên bề mặt của virus Newcastle (Rott, 1964) Quá trình

ngưng kết hồng cầu xảy ra qua 2 giai ñoạn (Trần Minh Châu, 1988):

- Giai ñoạn 1: Virus tìm ñến ñiểm thụ cảm trên bề mặt của hồng cầu - Haemagglutinin làm ngưng kết hồng cầu

- Giai ñoạn 2: Virus tách khỏi bề mặt tế bào do men Neuraminidaza phá hủy ñiểm thụ cảm trên bề mặt hồng cầu

Theo Schell và Choppin (1973) hoạt ñộng của Haemagglutinin là do virus bám vào tế bào qua glycoprotein của virus với ñiểm tiếp nhận (ðiểm thụ cảm) trên bề mặt tế hồng cầu Do ñó có thể xác ñịnh số lượng virus thông qua việc xác ñịnh hoạt tính ngưng kết hồng cầu của virus Một ñơn vị ngưng kết hồng cầu xấp

xỉ 100.000 ñơn vị gây nhiễm

Hoạt tính ngưng kết hồng cầu của từng chủng virus có khác nhau, không nhất thiết bị vô hoạt cùng thời gian với hoạt tính gây nhiễm Một vài chủng khi

xử lý ở nhiệt ñộ 560C trong 5 phút, hoạt tính ngưng kết hồng cầu bị phá hủy nhưng vẫn còn khả năng gây nhiễm phôi hoặc vật chủ khác Ngược lại, có một số chủng ñược xử lý 560C với thời gian 25 phút vẫn còn khả năng gây nhiễm và gây

ngưng kết hồng cầu (Hanson, 1975) ðặc tính này dùng ñể phân biệt giữa các

chủng virus Newcastle với nhau và cũng chính là ñiểm khác biệt giữa virus Newcastle và virus gây bệnh dịch tả gà thật

1.1.1.3 ðặc tính nuôi cấy (ðặc tính gây nhiễm)

a Gây nhiễm cho gà

Gà là ñộng vật thường xuyên và hiệu quả nhất trong việc nuôi cấy (gây nhiễm) virus Newcastle Thông thường người ta chọn gà dò 2-3 tháng tuổi ñể gây nhiễm bằng cách tiêm bắp hoặc dưới da, với ñiều kiện biết chính xác gà chưa ñược sử dụng vacxin phòng bệnh Newcastle và có nguồn gốc từ những ñàn chắc chắn không bị bệnh Newcastle ñể trong huyết thanh của chúng không có kháng thể Virus sẽ phát triển và gây bệnh cho gà với những triệu chứng và bệnh tích

Trang 15

giống như ở gà mắc bệnh ngoài tự nhiên (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1978) Ngoài ra, có thể gây nhiễm cho bồ câu, chim sẻ, chim cút

b Gây nhiễm cho phôi thai gà

Tất cả các chủng virus Newcastle ñều nhân lên trong phôi thai gà ñang phát triển Thời gian và khả năng gây chết phôi thai phụ thuộc vào ñộc lực của chủng virus Newcastle Gây nhiễm virus vào xoang niệu mô của phôi thai gà ấp 10-12 ngày thì các chủng có ñộc lực cao và vừa thường gây chết phôi trong vòng

60 giờ, các chủng có ñộc lực thấp phải trên 100 giờ Kiểm tra thấy bệnh tích trên phôi chủ yếu là xuất huyết ñiểm ở da vùng ñầu và cánh, có trường hợp xuất huyết khắp phôi thai Phôi càng non thì khả năng gây nhiễm và thời gian gây chết phôi càng nhanh và tỷ lệ phôi chết càng cao (Nguyễn Như Thanh và cs, 2001; Nguyễn Như Thanh và cs, 2006)

ðường gây nhiễm vào phôi cũng ảnh hưởng rất lớn ñến sự phát triển của virus Newcastle Nếu gây nhiễm vào túi lòng ñỏ sẽ gây chết phôi nhanh hơn gây nhiễm vào xoang niệu

c Gây nhiễm vào môi trường tế bào

Virus Newcastle có thể nhân lên trong nhiều loại môi trường tế bào khác nhau Lancaster (1966) ñã liệt kê tới 18 loại tế bào sơ cấp và 11 loại tế bào dòng mẫn cảm với virus Newcastle Từ ñó ñến nay ñã có rất nhiều loại tế bào khác nữa

ñã ñược bổ xung vào danh sách những tế bào mẫn cảm với virus Newcastle

Theo Beach (1984) một số loại môi trường tế bào thường dùng là môi

trường tế bào xơ thai gà và môi trường tế bào thận gà một lớp Theo Nguyễn Như Thanh và cs (2006), có thể nuôi cấy virus Newcastle vào môi trường tế bào thận lợn, thận khỉ hoặc tế bào xơ thai gà một lớp Sau 24-72 giờ gây nhiễm, virus gây hủy hoại tế bào (bệnh tích tế bào), làm cho tế bào bị biến ñổi hình thái, tế bào co tròn lại hoặc vỡ ra hoặc tạo thành các tế bào khổng lồ

Virus Newcastle có khả năng gây bệnh tích tế bào trong quá trình nhân lên trong môi trường tế bào nuôi Bệnh tích tế bào là sự tập hợp các tế bào chết Bệnh tích tế bào có liên quan mật thiết với ñộc lực của chủng virus Sự hình thành bệnh tích tế bào ở môi trường tế bào xơ thai gà một lớp rất hạn chế ñối với

Trang 16

các chủng virus thuộc nhóm Velogenic trừ khi xử lý bề mặt chai nuôi cấy bằng ion Mg2+ và diethylaminoethyl dextran hoặc tr ypsin (Beach, 1984)

Chandra và Kumar (1972) ñã gây nhiễm virus Newcastle vào môi trường

tế bào xơ thai gà một lớp Kết quả thấy lúc ñầu xuất hiện hiện tượng kết dính, sau 1-2 giờ tế bào co lại, ñến 48 giờ tế bào bị thoái hóa và cuối cùng tế bào một lớp

bị phá hủy hoàn toàn Như vậy, khi tế bào vật chủ hấp phụ virus thì màng virus hòa hợp với màng tế bào và nucleotid rồi chui vào tế bào Virus nhân lên trong tế bào chất, ñạt tối ña sau 5-6 giờ gây nhiễm

1.1.1.4 Tính gây bệnh và phân loại virus Newcastle

a Tính gây bệnh

- Trong tự nhiên:

Virus Newcastle có thể gây bệnh cho gà mọi giống, mọi lứa tuổi Ngoài ra chúng còn gây bệnh cho các loài gà tây, bồ câu, chim sẻ, chim cút, sáo, vẹt Bệnh không thấy ở thủy cầm như ngan, vịt, ngỗng nhưng chúng lại mang mầm bệnh ñể rồi lây lan sang gà và hoang cầm (Lê Văn Năm, 2004) Người có thể bị nhiễm virus Newcasctle, thời gian nung bệnh 1- 4 ngày, dấu hiệu rõ nhất là viêm kết mạc mắt, sốt và nhức ñầu (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1978; Nguyễn Như Thanh

và cs, 2001)

- Trong phòng thí nghiệm:

Gây bệnh thí nghiệm cho gà dò 2-3 tháng tuổi Sau khi tiêm truyền virus Newcastle, gà sẽ bị bệnh và có triệu chứng, bệnh tích giống như gà bị bệnh ở ngoài tự nhiên

Cũng có thể gây bệnh cho bồ câu bằng cách tiêm bắp huyễn dịch bệnh phẩm là não, gan, lách của gà bệnh Sau 6-8 ngày, bồ câu xuất hiện triệu chứng liệt và chết sau 15-16 ngày (Nguyễn Như Thanh và cs, 2006)

b Phân loại virus Newcastle

Theo Nguyễn Như Thanh và cs (2001): virus Newcastle có nhiều chủng, mỗi chủng có khả năng gây bệnh khác nhau cho gà và cho ñộng vật thí nghiệm

Có nhiều cách phân loại virus:

Trang 17

* Phân loại dựa vào tính kháng nguyên của virus

- Phản ứng trung hịa và phản ứng kết tủa khuyếch tán trong thạch xác định được rất ít sự biến đổi về tính kháng nguyên của các chủng virus khác nhau nhưng cĩ y nghĩa trong chẩn đốn để xác định mầm bệnh

- Kỹ thuật kháng thể đơn dịng được sử dụng để chứng minh sự khác nhau về tính kháng nguyên giữa các chủng virus Newcastle Kỹ thuật này cĩ thể phát hiện những biến đổi nhỏ nhất của kháng nguyên như là sự thay đổi trình tự các axit amin trên các epitop của kháng nguyên gắn với kháng thể Vì vậy bằng kỹ thuật này người ta khơng chỉ phát hiện được sự khác nhau giữa các chủng virus mà cịn phát hiện sự khác nhau giữa các quần thể virus khác nhau của cùng một chủng

Russell và Alexander (1983) đã sử dụng kỹ thuật kháng thể đơn dịng để

phân loại chủng virus Newcastle Các tác giả đã phân các chủng virus Newcastle thành các nhĩm khác nhau dựa vào kết quả phản ứng với các kháng thể đơn dịng khác nhau Các chủng cĩ phản ứng dương tính với cùng một kháng thể đơn dịng

sẽ cĩ cùng một đặc tính sinh học và gây bệnh cĩ cùng đặc điểm dịch tễ học

* Phân loại dựa vào độc lực và tính gây bệnh của virus

Hiện nay, Tổ chức dịch tễ thế giới (OIE, 2008) phân các chủng virus

Newcastle thành 5 nhĩm dựa trên những triệu chứng lâm sàng cơ bản được phát hiện ở gà bị bệnh do các chủng virus cĩ độc lực khác nhau gây nên, đĩ là:

- Nhĩm Viscerotropic velogenic: Gồm những chủng virus cĩ độc lực cao, gây bệnh cho gà mọi giống, mọi lứa tuổi, hướng nội tạng, gây bệnh tích chủ yếu

là xuất huyết đường tiêu hĩa

- Nhĩm Neurotonic velogenic: Gồm những chủng virus cĩ độc lực cao, hướng thần kinh, gây bệnh với những triệu chứng hơ hấp và thần kinh

- Nhĩm Mesogenic: Gồm những chủng virus cĩ độc lực vừa, gây bệnh với các triệu chứng hơ hấp, đơi khi cĩ triệu chứng thần kinh nhưng tỷ lệ chết thấp Các chủng của nhĩm này chỉ cĩ khả năng gây bệnh cho gà dưới 2 tháng tuổi ðại diện của nhĩm này là chủng Mukteswar, Herforshire Hai chủng này nếu tiêm

Trang 18

vào xoang niệu của phôi thai gà 10-12 ngày, sẽ làm chết phôi và gây xuất huyết t phôi thai

- Nhóm Lentogenic: Gồm những chủng virus có ñộc lực thấp, hoặc không

có ñộc lực ðại diện cho nhóm này là chủng Lasota, chủng B1, chủng F Các chủng này không có khả năng gây bệnh cho gà bất cứ lứa tuổi nào, với gà con mới nở chỉ gây sổ mũi, hắt hơi nhưng sau vài giờ là hết

- Nhóm Asymptomatic enteric: Gồm những chủng virus có ñộc lực thấp, gây bệnh với các triệu chứng ñường tiêu hóa không ñiển hình

Theo FAO (Food Agriculture Organisation – Tổ chức nông lương thế giới) ñể ñánh giá ñộc lực của virus Newcastle cần căn cứ vào các chỉ số sau ñây:

- MDT (Mean Death Time) – Thời gian trung bình gây chết phôi

- EID50 (Embryo Infective Dose) – Liều gây nhiễm 50% phôi gà

- ICPI (Intra Cerebral Pathogeniicity Index) – Chỉ số gây bệnh khi tiêm virus vào não gà con 1 ngày tuổi

- IVPI (Intra Venous Pathogenicity Index) – Chỉ số gây bệnh khi tiêm virus vào tĩnh mạch của gà 6 tuần tuổi

* Phân loại dựa vào ñặc tính bộ gen của virus

Do công nghệ gen phát triển, trình tự gen của các chủng virus Newcastle ñã ñược giải mã và lưu ngân hàng dữ liệu gen và là cơ sở ñể phân loại các chủng virus Newcastle

1.1.1.5 Sức ñề kháng của virus

Theo Nguyễn Như Thanh và cs (2001) do virus Newcastle có vỏ bọc

là lipit nên rất dễ bị tiêu diệt, làm mất khả năng gây nhiễm bởi ete, cloroform, phenon và focmon nhưng không làm ảnh hưởng ñến tính sinh miễn dịch của virus

Khả năng chịu nhiệt của các chủng virus Newcastle có khác nhau, ñây là một ñặc tính di truyền của chúng Ở nhiệt ñộ 1000C virus bị diệt trong vòng 1 phút, ở 600C trong 30 phút Ở nhiệt ñộ âm, virus tồn tại hàng năm

Trang 19

pH của môi trường ảnh hưởng rất lớn ñến sự tồn tại của virus Newcastle Môi trường có pH < 2 hoặc pH >10 thì virus mất khả năng gây nhiễm

1.1.2 Bệnh Newcastle

1.1.2.1 Loài vật cảm nhiễm và bị bệnh

Gà là loài ñộng vật cảm thụ nhất với virus Newcastlee, tiếp ñến là gà tây

Gà mọi giống, mọi lứa tuổi ñều có thể bị bệnh Tuổi gà càng tăng thì khả năng cảm thụ bệnh càng giảm

Ngoài gà và gà tây thì chim cút, bồ câu, chim sẻ, sáo, vẹt và một số loại chim khác cũng cảm nhiễm và bị bệnh Newcastle (Nguyễn Vĩnh Phước và cs 1978; Lê Văn Năm, 2004)

Trong phòng thí nghiệm có thể gây nhiễm virus Newcastle cho gà dò 2-3 tháng tuổi, phôi thai gà 10-12 ngày, hoặc bồ câu

1.1.2.2 ðường xâm nhập và truyền lây mầm bệnh

Virus Newcastle xâm nhập vào cơ thể chủ yếu qua ñường tiêu hóa do thức

ăn, nước uống có nhiễm virus từ phân và các chất bài xuất, bài tiết của gà bệnh Trong chăn nuôi gà tập trung, nhất là nuôi công nghiệp với số lượng lớn, mật ñộ cao thì ngoài ñường tiêu hóa, gà khỏe còn có thể bị lây bệnh qua ñường hô hấp

do hít phải những giọt nước nhỏ có chứa virus từ gà bệnh hắt hơi, vẩy mỏ bắn ra (Beard và Hanson,1984)

Theo Alexander (1988) mức ñộ truyền lây phụ thuộc vào ñộc lực của chủng virus, ñường xâm nhập, liều lây nhiễm và sức ñề kháng của gà

Bệnh chỉ truyền ngang từ gà sang gà mà không truyền dọc từ mẹ sang con qua lòng ñỏ trứng (Lê Văn Năm, 2004)

Thời gian lây lan qua ñường tiêu hóa chậm hơn ñường hô hấp Gà bị bệnh Newcastle thải virus qua phân ra ngoài và bệnh xuất hiện sau khi gà ăn, uống phải thức ăn, nước uống có nhiễm virus ðường truyền lây này thường xảy ra ñối

với những chủng virus có có ñộc lực thấp, hướng nội tạng (Alexander, 1988)

Gà mái ñẻ nhiễm chủng virus Newcastle có ñộc lực cao thuộc nhóm Velogen có thể ngừng ñẻ nhưng nhiễm những chủng có ñộc lực thấp thuộc nhóm

Trang 20

Lentogen thì vẫn tiếp tục ñẻ bình thường và có miễn dịch Phôi thai gà bị nhiễm các chủng virus Newcastle có ñộc lực cao và vừa thì thường bị chết trước khi nở

(French và cs, 1967)

1.1.2.3 Cơ chế sinh bệnh

Virus Newcastle xâm nhập vào cơ thể gà qua ñường tiêu hóa Từ niêm mạc hầu họng, virus vào máu gây nhiễm trùng máu Theo máu, virus ñến hầu hết các cơ quan tổ chức và gây viêm hoại tử, nhất là niêm mạc ñường tiêu hóa Ở hệ thống tuần hoàn, virus phá hủy thành mạch quản gây xuất huyết và thấm dịch thẩm xuất vào các xoang (xoang bụng, xoang bao tim) của cơ thể Mầm bệnh không trực tiếp gây viêm phổi nhưng gà bị bệnh Newcastle thường có triệu chứng khó thở nghiêm trọng Nguyên nhân chính là do virus tác ñộng gây rối loạn hệ tuần hoàn và trung khu hô hấp của hệ thần kinh trung ương Phần lớn gà

bị bệnh ở thể cấp tính Một số ít, bệnh tiến triển ở thể mạn tính do virus về sống ở

hệ thần kinh làm cho con vật có những triệu chứng thần kinh ñặc trưng (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1978; Lê Văn Năm, 2004)

Chỉ sau 5-6 giờ gây nhiễm, virus Newcastle ñã nhân lên trong nguyên sinh chất tế bào vật chủ ở mức tối ña Vì thế ngay sau 3-4 giờ gây nhiễm, bằng phản ứng kết hợp bổ thể hay phản ứng miễn dịch huỳnh quang ñã có thể phát hiện ñược kháng nguyên ñặc hiệu của virus Newcastle

Virus vào cơ thể, sau khi nhân lên, gây tổn thương thực thể tế bào rồi bị thải ra ngoài qua phân Vì thế có thể phát hiện virus trong phân của gà bệnh vào ngày thứ 3-5 sau khi nhiễm (Nguyễn Vĩnh Phước va cs, 1978)

1.1.2.4 Các thể bệnh Newcastle

Căn cứ vào ñặc tính sinh học và khả năng gây bệnh khác nhau của các chủng virus, bệnh Newcastle ñược chia thành 5 thể sau ñây (Beard và Hanson, 1984):

* Thể Doyle (Viscerotropic Velogenic):

Thể này ñược Doyle nói ñến ñầu tiên vào năm 1927, do các chủng thuộc

Trang 21

có thể bị bệnh và tỷ lệ chết cao, 90-100% Gà bệnh thường chết nhanh với bệnh tích ñăc trưng là xuất huyết niêm mạc ñường tiêu hóa

* Thể Beach (Neurotropic Velogenic):

Beach là người ñầu tiên miêu tả bệnh vào năm 1942, bệnh do các chủng virus thuộc nhóm Velogen gây ra Gà mọi lứa tuổi ñều có thể bị bệnh Bệnh thường tiến triển ở thể cấp tính, gà bị bệnh thường chết nhanh Bệnh tích ñặc trưng tập trung ở bộ máy hô hấp và thần kinh Vì thế bệnh ñược mang một tên riêng là Bệnh hô hấp - thần kinh hay Pneumoencephatitis

* Thể Beaudette:

Beaudette là thể bệnh do các chủng thuộc nhóm Mesogenic gây ra, ñược Beaudette mô tả vào năm 1948 Bệnh thường tiến triển ở thể cấp tính, gà bị bệnh thường có triệu chứng hô hấp nặng Gà con thường chết nhiều với triệu chứng thần kinh ñiển hình

* Thể Hitchner (Respiratory):

Bệnh gây ra do các chủng thuộc nhóm Lentogen Hitchner mô tả bệnh vào năm 1948 Bệnh thường nhẹ, không rõ triệu chứng hô hấp

* Thể nội tạng (Asymptomatic enteric):

Thể bệnh ñường tiêu hóa do các chủng có ñộc lực thấp gây ra, không thể hiện triệu chứng lâm sàng Có thể phân lập ñược virus từ phân và dạ dầy của gà

bị bệnh (French và cs, 1967)

1.1.2.5 Chất chứa và bài thải virus

Trong cơ thể gà bệnh: não, lách, gan và hầu hết các phủ tạng có chứa virus Vì vậy trong thực tế người ta vẫn lấy não, lách hoặc gan của gà bị bệnh

ñể phân lập virus Gà bệnh thải virus ra ngoài theo phân, nước mắt, nước mũi, nước dãi

Virus ñược bài xuất bắt ñầu từ 20-24 giờ trước khi xuất hiện triệu chứng

và kéo dài suốt quá trình bệnh cho ñến sau khi gà khỏi bệnh một thời gian hoặc

bị chết Những con ñược cho là khỏi bệnh nhưng trở thành con mang trùng và bài thải thường xuyên mầm bệnh ra môi trường (Lancaster,1966)

Trang 22

1.1.2.6 Triệu chứng

Tùy theo lứa tuổi gà, trạng thái miễn dịch của gà, ñường xâm nhập, liều gây nhiễm, ñộc lực của chủng virus gây bệnh và sư bội nhiễm của các vi sinh vật gây bệnh khác mà triệu chứng lâm sàng của bệnh Newcastle có khác nhau

Gà bị bệnh do các chủng có ñộc lực cao, thường bệnh xảy ra ñột ngôt, một

số con chết nhanh có khi chưa xuất hiện triệu chứng Gà bệnh có cả triệu chứng

hô hấp và tiêu hóa Trên nền chuồng có nhiều bãi phân trắng, nhớt Gà ủ rũ, lông

xù xơ xác, cánh sã, không muốn vận ñộng, mào yếm tím tái Nhiều con mắt lim dim nửa nhắm nửa mở

Sau vài ngày thấy một số con có triệu chứng thở khó rất rõ: vươn cổ, há miệng, vẩy mỏ ñể bắn dịch nhớt trong xoang miệng ra cho dễ thở Tiếng ho hen phát ra liên tục kèm theo tiếng rít mạnh, ñôi khi nghe rõ tiếng tooc, tooc (Lê Văn Năm, 2004) Nếu bắt gà bị bệnh, cầm hai chân, dốc ngược ñầu xuống thì thấy từ miệng chảy nước nhớt chua, khắm Sờ nắn vào diều thấy phần dưới mềm như sờ vào túi bột nhão, phần trên căng phồng, ñầy hơi do thức ăn không tiêu, tích lại lên men

Dùng tay mở miệng gà ra có thể thấy trên niêm mạc miệng có những nốt hoại tử nhỏ phủ bựa màu trắng xám Gà bệnh bị rối loạn tiêu hóa nghiêm trọng, không ăn, uống nước nhiều, ỉa chảy phân trắng loãng có khi có cả những vết máu Niêm mạc hậu môn có những vệt, những sọc xuất huyết

Những gà có sức ñề kháng cao thường chống ñỡ ñược bệnh trong thời gian ñầu, gà không bị chết và chuyển sang thể mạn tính Ở thể này gà có triệu chứng thần kinh do virus tác ñộng vào hệ thần kinh trung ương Gà bị rối loạn vận ñộng: ñi ñứng không vững, loạng choạng, ñi vòng tròn, ñi giật lùi, ñang ñi thì dừng lại ðầu và cổ thõng xuống hoặc ngẹo về một bên hoặc vặn lên phía lưng

Gà mổ không ñúng hạt thức ăn Nếu xua ñuổi hoặc ñụng chạm ñến thì gà ngã lăn

ra, lên cơn ñộng kinh, co giật Những gà không bị chết thường ñể lại di chứng thần kinh lâu dàì

Trang 23

- Niêm mạc miệng có thể có những nốt hoại tử phủ lớp bựa màu trắng xám

- Niêm mạc thực quản: Xuất huyết ựiểm hoặc tập trung từng ựám hoặc từng vệt trên bề mặt

- Niêm mạc dạ dầy tuyến: Bệnh tắch ựặc trưng là ựiểm xuất huyết lấm tẩm màu ựỏ bằng ựầu ựinh ghim hoặc bằng ựầu tăm Các ựiểm xuất huyết nằm ngay trên miệng lỗ ựổ ra của tuyến tiêu hóa Có trường hợp hình thành những mảng, những ựám xuất huyết nằm trên bề mặt niêm mạc dạ dầy tuyến ở phần tiếp giáp với thực quản và/ hoặc ở phần tiếp giáp với dạ dày cơ

- Dạ dầy cơ: Loét niêm mạc dạ dầy cơ Ngay khi chưa lột lớp sừng hóa (Keratin) ựã thấy một số chỗ bị loét làm thủng lớp sừng hóa Nếu lột lớp sừng hóa thì thấy bề mặt dạ dầy cơ bị xuất huyết hoặc loét, rõ nhất ở phần giáp với dạ dầy tuyến

- Ruột: Xuất huyết niêm mạc ruột non ở giai ựoạn ựầu khi gà bị bệnh Những ngày sau, tại những nang lympho, ựặc biệt là nang lympho manh tràng hình thành những nốt loét Các nốt loét này có thể nhìn thấy từ phắa ngoài (Tương mạc) có hình tròn, hình trứng hoặc bầu dục, màu tắm Nếu rọc ruột ra thấy nốt loét có phủ một lớp bựa bẩn, mầu nâu xám Dùng dao, kéo gạt lớp bựa trên bề mặt nốt loét ựi thì thấy ựáy ựỏ do xuất huyết

Gà mái bị bệnh còn có dấu hiệu xuất huyết buồng trứng, có khi trứng vỡ tắch lại trong xoang bụng Nhiều trứng non bị thoái hóa, màu xám

1.1.2.8 Chẩn ựoán

a Dựa vào ựặc ựiểm dịch tễ học và triệu chứng, bệnh tắch

- Bệnh xảy ra rải rác ở các tháng trong năm, không phụ thuộc vào thời tiết nhưng thường tập trung nhiều vào các tháng của vụ đông Xuân (Lê Văn Năm, 2004)

Trang 24

- Bệnh cúm gia cầm (Avian Influenza) là bệnh truyền nhiễm cấp tính của loài chim, kể cả gia cầm, thủy cầm, dã cầm (Chim hoang dã) Bệnh do các subtyp khác nhau thuộc nhóm virus cúm A (Influenza virus A genus), họ Orthomyxoviridae gây ra

Bệnh xuất hiện ñột ngột, tiến triển nhanh, luôn ở thể quá cấp tính và cấp tính, tỷ lệ chết, tỷ lệ tử vong rất cao, có khi 100% trong vài ngày Mào, tích thâm tím có khi xuất huyết Gà khó thở, vươn cổ, há miệng, vẩy mỏ ñể bắn ñờm dãi trong miệng ra cho dễ thở ðờm thường ñặc quánh, mũi chảy dịch nhớt màu hồng do viêm thành các xoang vùng mặt Một số con có triệu chứng thần kinh: ñầu giật rung liên tục, lắc lư hoặc ngẹo về một bên, nhảy lên dẫy dụa xoay tròn rồi chết Những vùng da không lông, nhất là ở cẳng chân và kẽ các ngón xuất huyết ñiễm hoặc vệt

Mào, yếm sưng, tím bầm Mí mắt phù

Xuất huyết nặng ở nhiều cơ quan nội tạng:

- Xuất huyết ñiểm hoặc lan tràn trên bề mặt dạ dầy tuyến

- Xuất huyết màng thanh mạc (Mặt ngoài xoang bao tim, mặt ngoài dạ dầy tuyến, dạ dầy cơ, ruột, màng treo ruột )

- Xuất huyết mỡ thành bụng, mỡ vành tim, mỡ dính trên màng treo ruột

- Tụy dòn, các ñiểm xuất huyết và các ñiểm hoại tử nhỏ, trắng trên bề mặt tuyến tụy

- Xuất huyết, hoại tử bề mặt lách

- Xuất huyết rất nặng niêm mạc ruột, nhất là niêm mạc ruột non

Trang 25

- Gà, vịt ñẻ: xuất huyết buồng trứng, tế bào trứng thoái hóa, xuất huyết niêm mạc tử cung, trứng vỡ tích lại trong xoang bụng

+ Bệnh hen ở gà do Mycoplasma: Không chỉ gà mà nhiều loài gia cầm

khác cũng cảm nhiễm và bị bệnh Gia cầm mọi lứa tuổi ñều có thể bị bệnh nhưng nặng nhất ở gia cầm từ 3 tuần ñến 3 tháng tuổi Bệnh lại phát mạnh ở gà ñang trong giai ñoạn ñẻ cao nhất Bệnh xảy ra khi có các yếu tố môi trường bất lợi, bầu tiểu khí hậu chuồng nuôi có nhiều khí ñộc Bệnh thường tiến triển ở thể mạn tính

và rất thường ghép với E.coli Triệu chứng, bệnh tích ñiển hình tập trung ở bộ máy hô hấp: viêm túi khí, viêm niêm mạc xoang mũi, xoang mắt, phế quản Mầm bệnh không chỉ truyền ngang mà nguy hiểm hơn chúng còn truyền dọc từ mẹ sang con qua lòng ñỏ trứng

b Gây bệnh thí nghiệm - phân lập virus

Theo Nguyễn Như Thanh và cs (2006):

Bệnh phẩm ñể gây bệnh thí nghiệm, xác ñịnh sự có mặt của virus là não, lách, tủy xương, gan của gà sắp chết hoặc vừa mới chết nghi bệnh Newcastle gây bệnh cho gà (hoặc bồ câu); Phôi thai gà 10-12 ngày; Môi trường tế bào xơ thai gà một lớp

• Gây bệnh cho gà

Mục ñích của việc gây bệnh thí nghiệm là lặp lại bệnh tự nhiên trong thí nghiệm Thông thường dùng gà dò 2-3 tháng tuổi, với ñiều kiện bắt buộc là gà không nằm trong ổ dịch và chưa ñược sử dùng vacxin lần nào ñể phòng bệnh Newcastle Mỗi mẫu bệnh phẩm tiêm cho 3 con Tiêm 0,5-1 ml huyễn dịch bệnh phẩm vào dưới da hay bắp thịt cho mỗi gà

* Gây nhiễm cho phôi thai gà ñang phát triển

Dùng huyễn dịch bệnh phẩm ở trên tiêm 0,1-0,2 ml vào xoang niệu của phôi thai gà 10-12 ngày Tùy theo ñộc lực của từng chủng Newcastle, phôi gà bị chết sau khi gây nhễm từ 24 – 48 giờ, có khi tới 72 giờ Phôi còi cọc, phát triển kém Các ñiểm xuất huyết nhỏ li ti hoặc tập trung lại thành ñám ở vùng ñầu, dưới bụng ðem nước trứng làm phản ứng ngưng kết hồng cầu gà Kết quả dương tính

Trang 26

chứng tỏ virus Newcastle cĩ mặt trong huyễn dịch bệnh phẩm đã nhân lên trong phơi thai gà 10-12 ngày và giết chết phơi

* Gây nhiễm vào mơi trường tế bào

ðem huyễn dịch bệnh phẩm trên gây nhiễm vào mơi trường tế bào xơ thai

gà một lớp (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1978) Mang dịch nuơi cấy tế bào cho tác động với hồng cầu gà Kết quả dương tính thì một lần nữa khẳng định virus Newcastle đã nhân lên trong mơi trường tế bào xơ thai gà một lớp và gây bệnh tích tế bào trong quá trình nuơi

c Chẩn đốn huyết thanh học

Thí nghiệm trung hịa:

Nguyên l y của phản ứng: virus Newcastle sẽ mất khả năng gây bệnh khi bị kháng thể Newcastle đặc hiệu tác động Nếu đem hỗn hợp này:

- Tiêm cho gà dị 2-3 tháng tuổi chưa một lần được sử dụng vacxin

- Hoặc gây nhiễm cho phơi thai gà 10-12 ngày

- Hoặc gây nhiễm vào mơi trường tế bào xơ thai gà một lớp

Kết quả cả 3 thí nghiệm trên: gà khơng bị bệnh, phơi thai gà khơng chết và khơng gây bệnh tích tế bào trong mơi trường tế bào nuơi

1.1.2.9 Miễn dịch chống bệnh Newcastle

a Miễn dịch thụ động

Gà mái cũng như gia cầm mái nĩi chung, nếu được miễn dịch thì kháng thể đặc hiệu cĩ thể truyền từ mẹ sang con qua lịng đỏ trứng Theo Nguyễn Vĩnh Phước và cs (1978) gà con nở ra từ trứng của gà mẹ khỏi bệnh Newcastle hoặc từ

gà mẹ cĩ miễn dịch đối với bệnh Newcastle thường cĩ khả năng đề kháng bệnh trong vài tuần tuổi đầu Tuy nhiên, lượng kháng thể thụ động này ở gà con nhiều hay ít, mức độ miễn dịch cao hay thấp và thời gian miễn dịch dài hay ngắn phụ thuộc hồn tồn vào lượng kháng thể chủ động cĩ trong huyết thanh của gà mẹ

Theo Allan và cs(1978), lượng kháng thể thụ động kháng virus Newcastle

ở gà con 4-5 ngày tuổi chỉ cịn một nửa so với ngày tuổi đầu tiên Theo Rao và cs (1987) kháng thể thụ động ở gà con chỉ kéo dài 15-24 ngày tuổi đầu

Trang 27

Lượng kháng thể thụ ựộng trong cơ thể gà con giảm dần và ựến tuần tuổi thứ 4 hầu như không còn phát hiện ựược nữa (Heller và Nathan, 1977) Việc giảm kháng thể thụ ựộng trong cơ thể gà con, ựược truyền từ mẹ, cứ khoảng 4-5 ngày giảm 1 bậc với ựộ pha loãng bậc 2 (Alexander, 1997)

b Miễn dịch chủ ựộng

Kháng nguyên virus Newcastle sau khi xâm nhập vào cơ thể sẽ kắch thắch

cơ thể ựáp ứng miễn dịch ựặc hiệu chống lại chúng Miễn dịch ựặc hiệu có 2 loại: miễn dịch qua trung gian tế bào và miễn dịch dịch thể Trong cơ thể, có 2 nhóm

tế bào lympho chủ yếu tham gia vào quá trình ựáp ứng miễn dịch Các tế bào này

có chức năng khác nhau, ựó là:

- Nhóm tế bào lympho T: Nhóm tế bào phụ thuộc tuyến ức

- Nhóm tế bào lympho B: Nhóm tế bào phụ thuộc Bursa Fabricius

Túi Fabricius ở gia cầm là cơ quan quan trọng ựóng vai trò như cơ quan lympho trung ương, biệt hóa dòng lympho B Trong ựáp ứng miễn dịch dịch thể, vai trò chắnh là tế bào lympho B, nhưng phải có sự tham gia của tế bào lympho

- Tiếp theo, lympho bào B chưa chắn sẽ biệt hóa thành lympho bào B chắn với sự xuất hiện SIgM và SIgD (globulin miễn dịch bề mặt) Lympho bào B chắn chưa phải là tế bào sản sinh kháng thể mà các phần tử SIg hoạt ựộng như những thụ thể bề mặt tiếp nhận kháng nguyên Sau khi biệt hóa thành tế bào lympho B chắn, chúng sẽ rời trung tâm túi Fabricius, di chuyển tới các cơ quan lympho ngoại vi như máu, láchẦTại ựây chúng mới làm nhiệm vụ tổng hợp kháng thể

* đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào

Trang 28

Là ựáp ứng miễn dịch ựầu tiên, sớm nhất của gà ựối với virus Newcastle Miễn dịch này xuất hiện 2-3 ngày sau khi cơ thể tiếp xúc với virus vacxin sống

(Timms và Alexander 1997) điều này ựã giải thắch khả năng bảo vệ sớm của cơ thể chống lại virus Newcastle trước khi kháng thể dịch thể ựược xác ựịnh Theo

Timms và Alexander (1997) ựáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào của gà ựối với virus Newcastle không rõ nét bằng ựáp ứng miễn dịch dịch thể

* đáp ứng miễn dịch dịch thể

Theo Russell và cs (1983) kháng thể ức chế ngưng kết hồng cầu là kháng thể trực tiếp chống lại kháng nguyên bề mặt và có thể trung hòa virus Newcastle Theo Allan và cs (1978) kháng thể không sản sinh ra ngay sau khi kháng nguyên xâm nhập mà thường phải sau 7-10 ngày Lượng kháng thể tăng dần và ựạt mức cao nhất sau 3-4 tuần, sau ựó giảm dần và mất hết sau một thời gian Thời gian tồn tại của kháng thể dài hay ngắn, mức ựộ nhiều hay ắt phụ thuộc vào chủng virus Nếu gà bị nhiễm chủng virus Newcastle có ựộc lực cao mà khỏi bệnh thì lượng kháng thể tồn tại rất lâu có khi tới 1 năm, còn khi nhiễm các chủng có ựộc lực thấp, thắ dụ các chủng thuộc nhóm Lentogen thì thời gian tồn tại kháng thể rất ngắn Nếu cơ thể bị tái nhiễm hoăc ựược tiêm vacxin nhắc lại thì ựáp ứng miễn dịch lần 2 nhanh hơn, mạnh hơn và chắc chắn hơn lần ựầu đường ựưa vacxin có ảnh hưởng ựến ựáp ứng miễn dịch: nếu gà ựược uống vacxin thì kháng thể thu ựược thường không ựồng ựều Nếu phun sương và khắ dung với những hạt vacxin thắch hợp thì gà cho ựáp ứng miễn dịch cao (Willegas, 1977;

Westbury, 1984)

1.1.2.10 Phòng bệnh

Bệnh Newcastle là một trong những bệnh có trong Danh mục ựối tượng kiểm dịch ựộng vật, sản phẩm ựộng vật, theo Quyết ựịnh của Bộ nông nghiệp và phát triển nông thôn, số 45, ban hành ngày 25 tháng 7 năm 2005 Vì thế, không phân biệt nuôi với số lượng nhiều hay ắt, người chủ cơ sở chăn nuôi gà phải coi việc phòng chống bệnh Newcastle là biện pháp bắt buộc

định kỳ phòng bệnh cho ựàn gà bằng vacxin Newcastle ựể tạo miễn dịch

Trang 29

vacxin và lịch sử dụng vcxin phụ thuộc vào tuổi gà và hướng sản xuất: nuôi thịt, sản xuất trứng giống hay trứng thương phẩm

* Các loại vacxin

-Vacxin nhược ñộc:

Các chủng virus nhóm Lentogen ñược sử dụng ñể sản xuất vacxin thường

là Lasota, B1, F, V4 Vacxin ñược ñưa vào cơ thể gà bằng cách nhỏ mắt, nhỏ mũi, phun sương hoặc pha nước uống Thời gian miễn dịch ñối với gà dưới 4 tuần tuổi từ 1-2 tháng, gà trên 4 tuần tuổi là 3 tháng (Allan và cs, 1978), nhưng vacxin này sử dụng cho bồ câu thì ñộ dài miễn dịch không quá 2 tháng (Vindevolgel H, 1988)

Các chủng virus nhóm Mesogen thường ñược sử dụng làm giống gốc ñể sản xuất vacxin, bao gồm: Roakin, Komarov, Herforshire (H), Mukteswar Vacxin gây ñáp ứng miễn dịch mạnh, có khả năng bảo hộ tốt, nhưng có thể gây bệnh cho gà dưới 8 tuần tuổi và gà chưa ñược miễn dịch bằng vacxin sản xuất từ

các chủng virus nhóm Lentogen (Allan và cs, 1978) Vacxin sản xuất từ virus

nhóm Mesogen chỉ ñược dùng cho gà trên 2 tháng tuổi hoặc gà dưới 2 tháng tuổi nhưng ñã ñược sử dụng vacxin Lasota, B1 (Allan và cs, 1978)

- Vacxin vô hoạt

Vacxin ñược sản xuất từ các chủng virus ñã ñược vô hoạt bằng Formalin hay Betapropiolacton, sau ñó bổ sung chất bổ trợ ñể làm tăng tính miễn dịch của vacxin Vacxin vô hoạt có thể ñược tiêm cho gà các lứa tuổi khác nhau

Hiện tại trên thị trường có rất nhiều loại vacxin, sản xuất trong nước hoặc nhập từ nước ngoài, ñơn giá có, ña giá có và với rất nhiều lịch hướng dẫn sử dụng khác nhau (Nguyễn Hồng Minh, 2012)

* Vacxin sản xuất trong nước:

- Xí nghiệp thuốc thú y trung ương ñã và thường xuyên sản xuất:

+ Vacxin Lasota nhược ñộc, ñông khô, dùng cho gà dưới 2 tháng tuổi, bằng cách nhỏ mắt, mũi hoặc cho uống

+ Vacxin Newcastle nhược ñộc, ñông khô, chủng Mukteswar, tiêm bắp hoặc dưới da cho gà từ 2 tháng tuổi trở lên

Trang 30

- Công ty TNHH một thành viên thuốc thú y trung ương (Navetco) hiện tại sản xuất 4 loại vacxin phòng bệnh Newcastle cho gà:

+ Vacxin Newcastle ñông khô, chủng F, nhược ñộc:

ðược chế từ chủng “Asplin” F (hệ 2) ñược nhân lên trong xoang niêụ mô phôi gà ấp 9-10 ngày Thường nhỏ mắt hoặc mũi cho gà từ 1 ngày tuổi trở lên, tạo miễn dịch yếu và không bền, ñộ dài miễn dịch khoảng 1 tháng

+ Vacxin Newcastle ñông khô, chủng Lasota, nhược ñộc:

Chế từ chủng Lasota, ñược nhân lên trong xoang niệu của phôi gà ấp 9-10 ngày Vacxin gây miễn dịch mạnh và bền hơn vacxin chủng F Dùng cho gà từ 2 tuần tuổi trở lên, cho gà uống hoặc nhỏ mắt Miễn dịch kéo dài 2-4 tháng tùy thuộc lứa tuổi và sức khỏe của gà

+ Vacxin Newcastle chịu nhiệt:

ðược sản xuất từ chủng V4, tạo miễn dịch tương tự chủng Lasota nhưng

có tính chịu nhiệt cao hơn, có khả năng truyền ngang mạnh Vacxin ñược sử dụng thay thế cho Vacxin chủng F và vacxin Lasota ở những nơi không có phương tiện bảo quản vacxin trong ñiều kiện lạnh Nhỏ mắt, cho uống hoặc trộn vào thức ăn cho gà ðộ dài miễn dịch ít nhất 6 tháng

+ Vacxin Newcastle ñông khô, chủng Mukteswar

Vacxin tạo miễn dịch mạnh và bền, kéo dài Tiêm dưới da sau cổ, mặt trong ñùi hoặc cơ ức cho gà trên 2 tháng tuổi ñược sử dụng lần ñầu, tái chủng cho

gà dưới 2 tháng tuổi ñã ñược sử dụng một trong các vacxin chủng Lasota, vacxin chủng F, vacxin chịu nhiệt

* Vacxin nhập từ nước ngoài:

Theo Nguyễn Hồng Minh (2012) trong Danh mục vacxin, chế phẩm sinh học, vi sinh vật, hóa chất dùng trong thú y ñược phép lưu hành tại Việt Nam năm

2010, có 16 Công ty nước ngoài và 128 sản phẩm sử dụng ñể phòng 3 bệnh Newcastle, Gumboro và Viêm phế quản truyền nhiễm ở gà Một lọ vacxin có chứa hai, ba, bốn có khi tới năm thành phần kháng nguyên

Trang 31

- Vacxin ñơn giá, nhược ñộc:

Nobilis ND Hichner của Công ty Intervet Hà Lan; Newcastle B1 Type La Sota strain, Newcastle Disease B1 Type strain của Công ty Ford Doge animal health – Mỹ ; Cevac New L của Công ty Ceva – Phylaxia veteinary biologicals

Co Ltd – Hungary

- Vacxin ña giá, nhược ñộc:

Nobilis IB-ND của Công ty Intervet Hà Lan; Newcastle La Sota-Bron Mass của Công ty Ford Dodge animal health – Mỹ; Newcastle Bronchitis vaccine, B1 Type của Công ty Ford Dodge animal health – Mỹ

- Vacxin ñơn giá, vô hoạt:

New- Vac K của Công ty Ford Doge animal health – Mỹ

- Vacxin ña giá, vô hoạt:

Nobilis IB-G-ND; Nobilis IB multi – G – ND của Công ty Intervet Hà Lan; Meivac ND – IB – IBD Emulsion của Công ty P.T MEDION – Indonexia; Cevac ND - IB – BD K của Công ty CEVACSANTE ANIMALE- Pháp

* Hướng dẫn lịch sử dụng vacxin

Theo Lancaster (1966), Lombardi (1974) cần quan tâm ñến mức ñộ miễn

dịch thụ ñộng của gà con ñể xác ñịnh ngày tuổi ñưa mũi vacxin ñầu tiên vào cơ thể chúng; vùng ñang nuôi gà ñược xem là an toàn dịch bệnh Newcastle hay thường xuyên bị dịch ñe dọa; chủng virus Newcastle thường gây bệnh cho gà tại ñịa phương; loại vacxin ñã thường xuyên ñược sử dụng trước ñó cho gà

1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU BỆNH NEWCASTLE TRÊN THẾ GIỚI

VÀ TRONG NƯỚC

1.2.1 Trên thế giới

Theo Luthgen (1981) bệnh Newcastle là bệnh truyền nhiễm của loài cầm

Vì thế loài chim hoang dã cũng có thể cảm nhiễm và là nguồn lây lan dịch bệnh Các thể bệnh ở chim hoang dã không khác gì các thể bệnh ở gà Theo tác giả, trong số 117 loài chim hoang dã mà ông ñã nghiên cứu thì có 17 loài bị nhiễm virus Newcastle và khẳng ñịnh phần lớn trong số chúng ñã tiếp xúc với gà ñã nhiễm bệnh

Trang 32

Tại Mehico, Estudillo (1972) ñã mô tả một ổ dịch Newcastle ở gà mà gà lôi, gà Nhật, công, vẹt và chim yến cũng bị lây bệnh và có triệu chứng thần kinh Mousa và cs (1988), tại vùng Assout, ñã chứng minh chim hoang dã có vai trò truyền lây virus Newcastle cho gà Kiểm tra kháng thể Newcastle trong huyết thanh của 180 chim bồ câu, 6 chim ñầu rìu, 5 chim cú và 12 chim chìa vôi bẫy ñược thấy có 46 con có kháng thể và phân lập ñược 6 chủng Newcastle, trong ñó 4 chủng gây bệnh nhẹ cho gà, 1 chủng gây bệnh trung bình và 1 chủng gây bệnh nặng, gây chết gà

Tại Baghda, kết quả phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà của

Jumaily và cs (1989) cho thấy trong số 341 mẫu huyết thanh của 5 loài chim

hoang dã ñược kiểm tra, một tỷ lệ nhất ñịnh có hiệu giá kháng thể dao ñộng từ 1/2 ñến 1/128

Năm 1990, tại Su ðăng, Kalafalla ñã gây nhiễm chủng virus Newcastle hướng nội tạng cho 5 loài chim trời Kết quả: tỷ lệ chết của loài chim Durra và chim Rosyfire là 100%, của chim sẻ là 62,5 %, chim Weaver là 12,5% Bệnh tích ñặc trưng ở những loài chim này là xuất huyết dạ dày tuyến

Vindevolgel (1997) khảo sát 236 loài chim hoang dã nhiễm bệnh Newcastle tự nhiên hay gây bệnh thí nghiệm, thấy rằng bệnh biểu hiện nghiêm trọng ở ñường tiêu hóa, có hoặc không có triệu chứng thần kinh ðồng thời tác giả cũng ñã chứng minh ñược chim di cư bị bệnh tự nhiên, trong quá trình sinh sản cũng ñã truyền kháng thể cho ñời con của chúng qua lòng ñỏ trứng

Năm 1987, ở Canada, Ide P.R lần ñầu tiên phân lập ñược virus Newcastle

từ 6 ñàn bồ câu vùng Ontario, Alberta và British Colombia Ông ñem chủng này tiêm truyền liên tục 4 lần cho gà 4-6 tuần tuổi nhưng không thể hiện triệu chứng của bệnh và xác ñịnh chủng này thuộc nhóm Lentogen

Cũng vào năm 1987, Pearson J.E và cs ñã sử dụng kháng thể ñơn dòng ñể xác ñịnh chủng virus phân lập từ bồ câu bị liệt, vẹo cổ, mất thăng bằng trong lúc vận ñộng và bị chết Ông dùng chủng virus này tiêm vào não gà con và xác ñịnh ñược chỉ số ICPI của chủng virus này nằm trong nhóm Velogen Trong số 6

Trang 33

chủng phân lập ñựơc có 4 chủng tác ñộng gây bệnh cho gà 6 tuần tuổi theo hướng thần kinh

Kết quả nghiên cứu bệnh Newcastle ở chim bồ câu của Alexander và cs

(1986), Estudillo (1972): Tỷ lệ mắc bệnh 30-70% nhưng tỷ lệ chết không cao, tối

ña 10% Thời gian nung bệnh ngắn, thường từ vài ngày ñến vài tuần Các triệu chứng thần kinh (run rẩy, ngẹo cổ, vận ñộng mất thăng bằng) là rõ nhất Nhiều trường hợp bồ câu bị ỉa chảy, một số trường hợp thể hiện triệu chứng hô hấp, viêm mũi, viêm kết mạc mắt

Theo Duchatel (1985), Vindevolgel (1988) có thể dùng vacxin chủng Lasota, B1 nhỏ mắt, nhỏ mũi hoặc phun sương ñể phòng bệnh cho bồ câu nhưng

ñộ dài miễn dịch không quá 2 tháng

So với gà, chim cút ít mẫn cảm với virus Newcastle hơn Nếu bị nhiễm chủng virus có ñộc lực cao thì chim cút thể hiện rõ triệu chứng thở khó, liệt chân, liệt cánh, sưng mí mắt, ỉa chảy phân xanh, ñôi khi lẫn máu Tỷ lệ chết rất cao:

chim cút hậu bị có thể tới 90%, chim cút trưởng thành 50% (Sharaway, 1994)

Flanagan M (1990) gây nhiễm chủng virus Newcastle thể nội tạng cho gà

không có kháng thể trong huyết thanh và ñã phân lập lại ñược virus từ các cơ quan tổ chức Nhưng vẫn chủng virus này, nếu gây nhiễm cho gà có kháng thể trong huyết thanh thì thường chỉ phân lập lại ñược virus từ dạ dầy tuyến, nang lympho manh tràng, túi fabricius và não

Theo Arzey G (1990), người chăn nuôi, người buôn bán gà sống, thịt gà, trứng gà và rất nhiều ñộng vật: chim hoang dã, bồ câu, chim cảnh, côn trùng, ngoại k y sinh trùng, loài gặm nhấm ñóng vai trò là nhân tố trung gian truyền bệnh Newcastle

Khảo sát kháng thể Newcastle ở người, Suarez- Hernander M (1987) cho biết 26,3% số người trực tiếp và 47,8% số người gián tiếp chăn nuôi có kết quả dương tính Người thường bị viêm kết mạc mắt, viêm các hạch lympho ngoại biên, trường hợp nặng có thể gây khó thở Trẻ em có thể bị viêm não và màng não

Bệnh Newcastle có thể lây từ gà sang người, virus lúc ñầu xâm nhập vào mắt sau ñó lan sang các cơ quan khác (Paparella V và cs 1987)

Trang 34

Tại Bangladesh, Saifuddin M.D và cs (1990) dùng phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu kiểm tra ựáp ứng miễn dịch của gà ựược phòng bệnh Newcastle bằng các loại vacxin Kết quả: Gà con 1 ngày tuổi cho uống vacxin B1, sau 1 tuần ựã có kháng thể trong huyết thanh, lượng kháng thể tăng dần ựến 3 tuần tuổi, sau ựó giảm dần và không còn khi gà 9 tuần tuổi Nếu phòng cho gà lần 2 khi gà ựược 5, 7 hay 8 tuần tuổi bằng vacxin chủng Kamarov thì sau 3 tuần hiệu giá kháng thể ựạt rất cao (80-640) và gà ựược bảo hộ khi công cường ựộc

Gà 1 ngày tuổi tiêm vacxin Marek, 7 ngày sau cho uống vacxin B1 hoặc Lasota Sau 21 ngày kiểm tra thấy hiệu giá kháng thể thấp hơn so với ở gà không ựược tiêm vacxin Marek lúc 1 ngày tuổi (Bassiouni A.A và cs 1987)

Guler E, (1989) khảo sát hiệu giá kháng thể trong huyết thanh và trong lòng ựỏ trứng của 20 gà ựẻ sau khi ựã ựược uống 4-5 lần vacxin Lasota và B1, kết quả cho thấy hiệu giá kháng thể trong lòng ựỏ trứng có dao ựộng và luôn thấp hơn kháng thể trong huyêt thanh, trong khi hiệu giá kháng thể trong huyết thanh vẫn ổn ựịnh ở mức cao

Tại Malaysia, Ibrahim A.L, và cs (1987) trộn vacxin V4 vào thức ăn

và cho gà ăn 2 lần trong 3 tuần Sau ựó thử thách bằng chủng virus Newcastle cường ựộc, kết quả 60% số gà ựược bảo hộ Trong suốt cả năm sau, gà con của những ựàn ựã ựược phòng bằng vacxin V4 không có trường hợp nào bị bệnh

Tại Australia, Spradbrow (1987) kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết

thanh của gà sau khi ăn viên thức ăn có chứa vacxin V4, liên tục 2 tuần, thấy hiệu giá kháng thể rất cao Kiểm tra huyết thanh của những gà tiếp xúc với ựàn gà ựược ăn thức ăn có chứa vacxin V4 trong 2 tuần ựã phát hiện ựược kháng thể Newcastle điều này khẳng ựịnh virus vacxin V4 có khả năng truyền ngang

1.2.2 Trong nước

Nguyễn Bá Huệ và cs (1980) ựã phân lập ựược các chủng virus Newcastle gây các ổ dịch lớn cho gà nuôi tại xắ nghiệp gà Cầu Diễn, An Khánh, Thành Tô, đông Anh Từ kết quả gây nhiễm cho gà và cho phôi gà, tác giả kết

Trang 35

luận các chủng virus có ựộc lực mạnh, liều gây chết 50% phôi gà (ELD50) 8-8,2, Liều gây chết 50% gà thắ nghiệm (LD50) 7,2-7,6

Trong những năm từ 1979- 1984, bằng phương pháp ựã chuẩn hóa theo quy ựịnh của FAO, Trần đình Từ (1985) kiểm tra ựộc lực của các chủng virus ựang sử dụng làm giống gốc sản xuất vacxin Hệ 1 Kết quả: Thời gian trung bình gây chết phôi (MDT); Chỉ số gây bệnh cho gà 1 ngày tuổi khi tiêm vào não (ICPI) và chỉ số gây bệnh khi tiêm vào tĩnh mạch cho gà 6 tuần tuổi (ICPI) ựều rất ổn ựịnh, tuy nhiên chủng Mukteswar có ựộc lực cao hơn so với chủng Herforshire

Nguyễn Thu Hồng (2000), từ 1985-1989 ựã nghiên cứu lịch phòng bệnh Newcastle cho gà sản xuất con giống nuôi trong các cơ sở tập trung Tác giả khuyến cáo tùy tình hình dịch mà lịch sử dụng vacxin cho từng cơ sở có khác nhau Tại các cơ sở an toàn dịch nên cho gà uống vacxin lần 1 lúc gà 10-15 ngày tuổi, uống lần 2 lúc gà 30 ngày tuổi và tiêm Hệ1 lúc gà 45-50 ngày tuổi Cơ sở thường hay có dịch, gà cần ựược uống vacxin Lasota lần 1 rất sớm (lúc gà 3 ngày tuổi), 18 ngày tuổi cho uống lần 2 và 35 ngày tuổi tiêm Hệ1 Các cơ sở bị dịch ựe dọa, cho gà uống vacxin Lasota lần 1 lúc 7 ngày tuổi, lần 2 lúc gà 20-30 ngày tuổi và tiêm Hệ1 lúc gà 45 ngày tuổi

Nguyễn Thu Hồng (1993) nghiên cứu về ựộ dài miễn dịch của gà sau khi ựược phòng vacxin: Nếu cho gà uống vacxin Lasota với ựộ pha loãng 10- 3, liều 3-4 ml/con lúc 1 tuần tuổi thì ựến 2 tháng rưỡi tuổi tỷ lệ bảo hộ 63% Nếu cho gà uống lúc 2 tuần tuổi thì ựến 2 tháng rưỡi tuổi, tỷ lệ bảo hộ ựạt 100%

Cũng năm 1993, Nguyễn Thu Hồng và cs thử nghiệm vacxin V4 chịu nhiệt phòng bệnh cho gà ở các trại nuôi công nghiệp: Gà ựược nhỏ mũi, cho uống ựều rất an toàn và ựược miễn dịch tốt Hiệu giá HI 4,2 - 5,8 Tỷ lệ bảo hộ 90-100% Virus vacxin có khả năng truyền ngang trong ựàn qua tiếp xúc trực tiếp Gà tiếp xúc với tỷ lệ 25%, có khả năng ựáp ứng miễn dịch tốt, HI 5,2-5,6; Tỷ lệ bảo hộ 80-100% Gà ựược uống vacxin V4 với liều 107 EID50 ựược miễn dịch chắc chắn Gà ựược uống 1 lần, tỷ lệ bảo hộ 80% Uống 2-3 lần tỷ lệ bảo hộ 100%

Trang 36

Kết quả xác ựịnh các chủng virus Newcastle bằng kháng thể ựơn dòng 4D6, 5A1, 8C11 và 7D4 của Nguyễn Tiến Dũng và cs (1995): Các chủng Lasota,

F và M ựều có ngưng kết với 4 kháng thể trên; Các chủng thuộc nhóm Mesogen

và VN91 ựều không ngưng kết với 5A1, 7D4; Chủng VL88 phân lập từ Viên Chăn, Lào chỉ ngưng kết với 4D6 Các chỉ số ựộc lực của chủng VL91 thường ựươc dùng ựể công cường ựộc trong kiểm nghiệm vcxin: MDT= 57 giờ; IPCI = 1,77; IVPI = 2,67; ELD50 = 9,41g/ml; LD50 = 7,91g/ml

Nguyễn Tiến Dũng và cs (1991) nghiên cứu cấu trúc kháng nguyên HN của virus Newcastle và ảnh hưởng của chúng ựến phản ứng HA và HI Tác giả khuyến cáo trước khi tiến hành phản ứng cần chuẩn hóa kháng nguyên và các thành phần tham gia phản ứng Bằng phản ứng HI xác ựịnh ựộ dài miễn dịch của

gà sau khi ựược sử dụng vacxin và xác ựịnh sự lưu hành của virus Newcastle, kết quả cho thấy nếu hiệu giá kháng thể HI cao trên 6log2 với số mẫu >10% thì có thể khẳng ựịnh gà nuôi trong trại ựã bị nhiễm virus cường ựộc Newcastle

Nghiên cứu về ựáp ứng miễn dịch của gà ựược sử dụng vacxin chịu nhiệt V4, Trần đình Từ (1995) cho biết vacxin này thắch hợp cho gà nuôi thả vườn Nếu cho ăn thì gà có ựáp ứng miễn dịch chậm và yếu nhưng có tỷ lệ bảo hộ tương ựương với phương pháp nhỏ mắt, nhỏ mũi và cho uống Vacxin có hiệu lực miễn dịch ắt nhất là ngang với vacxin Lasota

Trong những năm từ 1980-1991, Phan Lục và cs (1996) ựã theo dõi tình hình bệnh Newcastle ở 6 cơ sở nuôi gà sản xuất con giống tại các tỉnh phắa Bắc Theo tác giả, mặc dù các cơ sở này ựều ựạt tiêu chuẩn vệ sinh thú y, quy trình chăn nuôi nhưng ựã xảy ra 5 vụ dịch Newcastle ở gà các lứa tuổi khác nhau và mùa vụ khác nhau Tác giả ựã xây dựng và thử nghiệm lịch phòng bệnh: lúc gà 7 ngày tuổi và 21-28 ngày tuổi cho uống vacxin Lasota; tiêm vacxin Hệ1 lúc gà 50-

58 ngày tuổi và 133-140 ngày tuổi , kết quả rất tốt

Nghiên cứu về mối tương quan giữa hàm lượng kháng thể lưu hành trong máu và khả năng bảo hộ chống lại virus cường ựộc Newcastle, Phan Lục và cs (1996) cho biết:

Trang 37

- Nếu HI > 2log2 nhưng < 3log2 thì 1 tháng sau kiểm tra lại, nếu HI vẫn khơng đổi thì phải tiêm nhắc lại

- Nếu HI > 3log2 và tỷ lệ chuyển dương 90% thì gà cĩ khả năng bảo hộ Phạm Hùng và cs (2000) nghiên cứu đáp ứng miễn dịch chống virus Newcastle ở gà đã bị bệnh Gumboro nhận thấy: Nếu gà bị bệnh Gumboro ngay lúc 1 hoặc 7 ngày tuổi thì khả năng đáp ứng miễn dịch chống bệnh Newcastle bị suy giảm; nếu gà bị bệnh Gumboro lúc 14 hoặc 21 ngày tuổi thì sự suy giảm này khơng rõ ràng

Nguyễn Thị Thu Hà (2000) nghiên cứu bệnh Newcastle ở chim cút: 65% chim cút bị liệt khi bị bệnh Newcastle; bệnh tích ở đường tiêu hĩa nhẹ hơn ở gà; 100% số chim cút bị liệt đều cĩ tổn thương ở não Cĩ thể sử dụng vacxin Lasota cho chim cút uống, nhỏ mắt, mũi để phịng bệnh Chim cút sau khi được sử dụng vacxin, nếu HI > 3log2 thì tỷ lệ bảo hộ 100%

Theo Trương Quang (1999), Salmonellosis gây ảnh hưởng xấu đến đáp ứng miễn dịch chống Newcastle của gà Gà bị Salmonellosis, sử dụng vacxin để

phịng bệnh đều cĩ HI thấp (82-89), tỷ lệ bảo hộ 83-94% Nếu gà bị nhiễm CRD

thì đáp ứng miễn dịch chống Newcastle kém: Hiệu giá HI bình quân thấp từ 72-

81, tỷ lệ bảo hộ chỉ đạt 80-89%

Phạm Xuân T y và cs (2000) sản xuất chế phẩm sinh học phịng trị bệnh Gumboro và Newcastle ở gà cho kết quả tốt, trong đĩ hiệu giá kháng thể kháng Gumboro là 1/11.755, hiệu giá kháng thể kháng Newcastle trung bình đạt 10,37log2

Nguyễn Huy Phương (2001) nghiên cứu bệnh Newcastle ở gà nuơi với số lượng lớn trong các gia đình tại Phúc Thọ, Hà Tây (cũ) và khuyến cáo với gà thịt nuơi cơng nghiệp thời gian nuơi trên 2 tháng nên cho uống 3 lần vacxin lúc gà

10, 21 và 35 ngày tuổi

Theo Trương Quang và cs (2005) tại một số địa phương, gà nuơi tập trung trong các gia đình mặc dù đã được sử dụng vacxin phịng bệnh Newcastle, nhưng bệnh vẫn xảy ra ở thể khơng điển hình, khĩ chẩn đốn khi dựa vào triệu chứng và bệnh tích Theo tác giả, đàn gà bị bệnh là do: Lịch sử dụng vacxin khơng thích

Trang 38

hợp; một tỷ lệ nhất ñịnh gà sau khi uống vacxin có hiệu giá kháng thể thấp (< 3log2) và con giống mua về nuôi không rõ nguồn gốc

Nguyễn Hồng Minh (2012) ñã nghiên cứu, sản xuất và thử nghiệm vacxin nhược ñộc ña giá, tiêm một mũi vacxin ñồng thời phòng ba bệnh Newcastle, Gumboro và Viêm phế quản truyền nhiễm ở gà Kết quả khẳng ñịnh gà ñược sử dụng vacxin ña giá lúc 7 và 14 ngày tuổi ñều rất an toàn và hiệu giá kháng thể ñều ñạt tiêu chuẩn bảo hộ theo Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 181-93; 10TCN 195-

94 và khuyến cáo của OIE

Tại Vụ Bản, Nam ðịnh, Vũ Văn Mong (2012) ñã nghiên cứu thực trạng bệnh Newcastle và tình hình sử dụng vacxin phòng bệnh ở các ñàn gà nuôi tập trung trong các gia ñình Kết quả cho biết các ñàn gà mua con giống từ các cơ sở chăn nuôi tư nhân có tỷ lệ chết do bệnh Newcastle cao hơn so với con giống mua

từ các cơ sở tập trung Không phân biệt giống và hướng chăn nuôi, gà con 1-21 ngày tuổi bị chết nhiều hơn so với lứa tuổi 22 ngày ñến xuất chuồng

Trang 39

CHƯƠNG 2 NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Công việc nghiên cứu ñặc ñiểm dịch tễ, quan sát triệu chứng, mổ khám kiểm tra bệnh tích bệnh Newcastle và thực trạng tình tình sử dụng vacxin phòng bệnh ñược tiến hành trực tiếp tại ñịa phương (Huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên)

Các thí nghiệm xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong huyễn dịch bệnh phẩm là não gà nghi bệnh và kiểm tra hiệu giá kháng thể Newcastle trong huyết thanh của gà ở các ñàn xảy ra bệnh ñược tiến hành tại Bộ môn Thú y cộng ñồng và Phòng thí nghiệm trọng ñiểm công nghệ sinh học Thú y- Khoa Thú y, Trường ðHNN Hà Nội

2.1 NỘI DUNG

2.1.1 Một số ñặc ñiểm dịch tễ của bệnh Newcastle

2.1.1.1 Tỷ lệ chết ở các giống gà nuôi trên ñịa bàn nghiên cứu

2.1.1.2 Tỷ lệ chết ở gà các lứa tuổi

a/Ở các ñàn gà thịt

b/Ở các ñàn gà trứng thương phẩm

2.1.1.3 Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên cứu

2.1.1.4 Bệnh tích ñặc trưng của bệnh Newcastle ở gà trong ñàn xảy ra bệnh 2.1.1.5 Xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong bệnh phẩm (não gà) nghi bệnh

Trang 40

- Bộ dụng cụ ñể tiến hành:

+ Phản ứng HA xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle

+ Phản ứng HI xác ñịnh hiệu giá kháng thể Newcastle

- Máy móc, thiết bị: tủ ấm, tủ sấy, máy ly tâm, buồng vô trùng…và các dụng cụ cần thiết khác ñể tiến hành thí nghiệm

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Lập phiếu ñiều tra ñể chủ ñộng thu thập thông tin liên quan ñến các nội dung nghiên cứu dịch tễ học (Nguyễn Như Thanh và cs, 2011)

2.3.2 Phương pháp xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong bệnh phẩm (não gà) nghi bệnh

- Bước 1: Gây nhiễm huyễn dịch não của gà trong ñàn nghi bệnh vào xoang niệu của phôi gà 10-12 ngày ñang phát triển

Lấy não của gà trong ñàn xảy ra bệnh Newcastle nghiền và pha với nước sinh lý theo tỷ lệ 1/10 Khử tạp khuẩn bằng kháng sinh rồi tiêm vào phôi thai gà

10 – 12 ngày, tiêm 0,2 ml cho mỗi phôi vào xoang niệu, ấp tiếp ở 370C 2- 4 ngày Hàng ngày soi trứng ñể phát hiện phôi chết và ghi lại thời gian gây chết phôi Những phôi gà chết, lấy ra ñể ở tủ lạnh 0- 40C/6h cho mạch máu co lại và nước trứng trong Sau ñó mổ trứng thu nước trứng và kiểm tra bệnh tích trên phôi Thử vô trùng nước trứng bằng cách cấy vào các môi trường nước thịt, thạch thường, thạch máu Bảo quản nước trứng trong tủ lạnh âm

- Bước 2: Tiến hành phản ứng ngưng kết hồng cầu HA (Haemagglutintion Test) xác ñịnh sự có mặt của virus Newcastle trong nước trứng sau khi gây nhiễm huyễn dịch não của gà trong ñàn nghi bệnh (Nguyễn

+ Nước sinh lý vô trùng

+ Bơm tiêm, kim tiêm ñể hút nước trứng

Ngày đăng: 24/10/2014, 11:50

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Bảng 3. 1. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà nuôi tập trung trong  cỏc gia ủỡnh tại huyện Phỳ Lương, tỉnh Thỏi Nguyờn - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3. 1. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở các giống gà nuôi tập trung trong cỏc gia ủỡnh tại huyện Phỳ Lương, tỉnh Thỏi Nguyờn (Trang 47)
Bảng 3.2a: Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà  thịt nuôi công nghiệp - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.2a Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà thịt nuôi công nghiệp (Trang 49)
Bảng 3.2b. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà  thả vườn - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.2b. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà thả vườn (Trang 51)
Bảng 3.2c. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà  trứng thương phẩm - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.2c. Tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ở gà các lứa tuổi của các giống gà trứng thương phẩm (Trang 52)
Bảng 3.3. Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên cứu - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.3. Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên cứu (Trang 57)
Hình 3.1. Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên cứu  3.1.4. Kết quả mổ khỏm kiểm tra bệnh tớch Newcastle ở gà trong ủàn xảy - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.1. Phân bố ổ dịch Newcastle ở các tháng trong thời gian nghiên cứu 3.1.4. Kết quả mổ khỏm kiểm tra bệnh tớch Newcastle ở gà trong ủàn xảy (Trang 58)
Bảng 3.4. Kết quả mổ khỏm kiểm tra bệnh tớch Newcastle ở gà trong ủàn xảy ra bệnh   Bệnh tớch ủặc trưng - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.4. Kết quả mổ khỏm kiểm tra bệnh tớch Newcastle ở gà trong ủàn xảy ra bệnh Bệnh tớch ủặc trưng (Trang 59)
Hình 3.2. Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.2. Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến (Trang 62)
Hình 3.3. Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.3. Xuất huyết niêm mạc dạ dày tuyến (Trang 62)
Hình 3.4.  Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày tuyến  Loét niêm mạc dạ dày cơ - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.4. Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày tuyến Loét niêm mạc dạ dày cơ (Trang 63)
Hình 3.5. Loét niêm mạc dạ dày tuyến, phần tiếp giáp  dạ dày cơ - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.5. Loét niêm mạc dạ dày tuyến, phần tiếp giáp dạ dày cơ (Trang 63)
Hình 3.6. Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày cơ - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.6. Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày cơ (Trang 64)
Hình 3.7. Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày cơ - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.7. Xuất huyết, loét niêm mạc dạ dày cơ (Trang 64)
Hình 3.8. Xuất huyết niêm mạc ruột non - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.8. Xuất huyết niêm mạc ruột non (Trang 65)
Hình 3.9. Xuất huyết, loét nang lympho trên bề mặt ruột non - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.9. Xuất huyết, loét nang lympho trên bề mặt ruột non (Trang 65)
Hình 3.10. Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.10. Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng (Trang 66)
Hình 3.11. Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Hình 3.11. Xuất huyết, loét nang lympho manh tràng (Trang 66)
Bảng 3.5. Kết quả gõy nhiễm phụi gà bằng huyễn dịch nóo của gà trong ủàn xảy ra bệnh Newcastle  Kết quả gây chết phôi sau khi tiêm - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.5. Kết quả gõy nhiễm phụi gà bằng huyễn dịch nóo của gà trong ủàn xảy ra bệnh Newcastle Kết quả gây chết phôi sau khi tiêm (Trang 68)
Bảng 3.6a. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh, tỷ lệ gà  chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà thịt nuụi cụng nghiệp - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.6a. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh, tỷ lệ gà chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà thịt nuụi cụng nghiệp (Trang 73)
Bảng 3.6b. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin  và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh và tỷ lệ  chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà thả vườn - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.6b. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh và tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà thả vườn (Trang 76)
Bảng 3.6c. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh, tỷ lệ  chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà trứng thương phẩm - Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh newcastle và thực trạng sử dụng vacxin phòng bệnh ở các đàn gà nuôi tập trung trên địa bàn huyện phú lương, tỉnh thái nguyên
Bảng 3.6c. Cỏc loại vacxin sử dụng, lịch phũng, ủường ủưa vacxin và liờn quan giữa chỳng với tỷ lệ ủàn bị bệnh, tỷ lệ chết do bệnh Newcastle ủối với cỏc ủàn gà trứng thương phẩm (Trang 79)

TRÍCH ĐOẠN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w