nghiên cứu ứng dụng tỷ số albumincreatinin trong chẩn đoán biến chứng thận ở bệnh nhân đtđ type 2

Trong thời gian gần đây, đã có nhiều nghiên cứu nhằm phát hiện sớm biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ.Trong các nghiên cứu nói trên, xét nghiệm... Qua các nghiên cứu này một điều quan trọng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI

§¸I TH¸O §¦êNG TYPE 2

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN Y KHOA

KHÓA 2009-2013

HÀ NỘI - 2013

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI

§¸I TH¸O §¦êNG TYPE 2

Chuyên ngành: Hóa Sinh

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN Y KHOA

KHÓA 2009-2013

Người hướng dẫn khoa học:

PGS TS Đặng Ngọc Dung

HÀ NỘI - 2013

giúp đỡ của nhiều cá nhân và tập thể Nhân dịp hoàn thành khóa luận, với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, tôi xin được bày tỏ lời cảm ơn tới:

Đảng ủy, ban giám hiệu, phòng quản lý đào tạo đại học,bộ môn Hóa sinh trường đại học Y Hà Nội

PGS.TS.Đặng Ngọc Dung giảng viên bộ môn Hóa Sinh trường Đại học

y Hà Nội - người thầy đã hết lòng dạy dỗ tôi trong học tập và trực tiếp hướng dẫn tôi thực hiện khóa luận tốt nghiệp này

Toàn thể các bác sĩkhoa Nội tiết ĐTĐ Bệnh viện Lão Khoa trung ương, các anh, chị nhân viên trung tâm kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm trường Đại học Y Hà Nội, khoa xét nghiệm Hóa sinh bệnh viện Bạch Maiđã tạo điều kiện giúp đỡ tôi trong quá trình làm khóa luận này

Xin trân trọng cảm ơn các thày, cô trong hội đồng chấm khóa luận đã đánh giá khóa luận của tôi một cách công minh Các ý kiến đóng góp của các thầy cô sẽ là bài học cho tôi trên con đường nghiên cứu sau này

Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến bố mẹ, anh chị, bạn bènhững người luôn theo sát bên tôi động viên, khích lệ và tạo cho tôi mọi điều kiên tốt nhất trong suốt 4 năm học vừa qua và trong suốt quá trình làm khóa luận này

Hà Nội, ngày , tháng ,năm 2013

Sinh viên

Trần Thị Hải

LỜI CAM ĐOAN

Kính gửi: Phòng quản lý đào tạo đại học trường Đại học Y Hà Nội

Hội đồng chấm khóa luận tốt nghiệp – Bộ môn Hóa

Các kết quả và số liệu trong bản khóa luận này là do chính bản thân tôi thu được trong quá trình nghiên cứu và không trùng lặp với bất kỳ một nghiên cứu nào khác

Hà Nội, ngày , tháng , năm 2013

Sinh viênTrần Thị Hải

TÀI LIỆU THAM KHẢO

ĐTĐ : Đái tháo đường

ĐẶT VẤN ĐỀ

Bệnh đái tháo đường là bệnh rối loạn chuyển hóa glucid mạn tính khá phổ biến trên thế giới.Tỷ lệ bệnh có xu hướng ngày càng tăng, đặc biệt ở các nước đang phát triển như khu vực châu Á - Thái Bình Dương, trong đó có Việt Nam

Theo thống kê của tổ chức y tế thế giới số bệnh nhân ĐTĐ trên thế giới vào năm 1997 là 124 triệu người, năm 2000 là 151 triệu người, năm 2006 là 246 triệu, năm 2011 là 336 triệu người và dự báo con số này sẽ lên tới 552 triệu người trong vòng 20 năm nữa, trong đó ĐTĐ type 2 chiếm 80 -90% [1], [2], [3]

Bệnh ĐTĐ gây ra nhiều biến chứng nguy hiểm Các biến chứng này không chỉ để lại nhiều di chứng nặng nề mà còn là một trong những nguyên nhân chính gây tử vong cho người bệnh ĐTĐ đặc biệt là ĐTĐ type 2 do bệnh thường phát hiện muộn

Biến chứng thận là một trong những biến chứng xuất hiện sớm và rất nghiêm trọng đối với bệnh nhân ĐTĐ Theo báo cáo năm 2000 thì ĐTĐ chiếm gần một nửa trong số các nguyên nhân gây suy thận giai đoạn cuối tại Singapore [33] Tại Việt Nam theo nghiên cứu của Thái Hồng Quang trên 120 bệnh nhân ĐTĐ tại viện Quân y 103 (1989) thì tỷ lệ biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ type 2 là 42,85% [4] Bệnh ĐTĐ với biến chứng thận đã và đang làm ảnh hưởng đáng kể đến sự chăm sóc sức khỏe trên toàn thế giới Hàng năm việc chăm sóc và điều trị cho bệnh nhân ĐTĐ tiêu tốn một lượng ngân sách lớn tại nhiều quốc gia Biến chứng thận sẽ nhanh chóng chuyển sang suy thận giai đoạn cuối và tiên lượng xấu nếu không có khả năng lọc máu và ghép thận Hai phương pháp này đều gây khá nhiều biến chứng và rất tốn kém Do

đó một vấn đề cấp thiết được đặt ra là làm thế nào để phát hiện sớm và ngăn ngừa tiến triển biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ

Trong thời gian gần đây, đã có nhiều nghiên cứu nhằm phát hiện sớm biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ.Trong các nghiên cứu nói trên, xét nghiệm

Microalbumin niệu (MAU) được nhiều nhà nghiên cứu nhận định là một yếu tố đánh giá sớm biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ Các tác giả nhận thấy khi có MAU chứng tỏ bệnh nhân bắt đầu bị biến chứng thận Qua các nghiên cứu này một điều quan trọng được các tác giả nhấn mạnh là phải chẩn đoán sớm được tình trạng này càng sớm càng tốt để áp dụng các biện pháp điều trị thích hợp vào các thời điểm còn có thể cải thiện tiến triển của bệnh lý ĐTĐ.

Microalbumin là một thuật ngữ được sử dụng để chỉ một lượng rất nhỏ albumin trong nước tiểu Có tổn thương cầu thận khi MAU từ 30-300 mg/24h Xét nghiệm định lượng MAU 24h được coi là tiêu chuẩn vàng trong đánh giá microalbumin niệu Tuy nhiên do giá thành còn cao và điều kiện thu mẫu nước tiểu 24h rất bất tiện và có thể thu thập không đầy đủ đối với bệnh nhân ngoại trú nên xét nghiệm định lượng MAU 24h chưa được áp dụng phổ biến trong sàng lọc phát hiện biến chứng thận ở bệnh nhân đái tháo đường Chính

vì vậy để giảm chi phí, thuận tiện trong thu thập mẫu và có thể sàng lọc sớm,

rộng rãi cho bệnh nhân ĐTĐ chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên

cứu ứng dụng tỷ số Albumin/Creatinin trong chẩn đoán biến chứng thận ở bệnh nhân ĐTĐ type 2”trên máy phân tích nước tiểu tự động UX2000 với

mục tiêu sau:

1. Hoàn thiện kỹ thuật bán định lượng một số chỉ số xét nghiệm nước

tiểu trên hệ thống máy phân tích nước tiểu tự động UX2000.

2. Bước đầu phân tích khả năng chẩn đoán biến chứng thận ở bệnh

nhân đái tháo đường bằng tỷ số Albumin/Creatinin.

Chương 1 TỔNG QUAN

1.1 Đại cương về bệnh ĐTĐ

1.1.1 Định nghĩa

ĐTĐ là bệnh rối loạn chuyển hóa glucid mạn tính, được đặc trưng bởi tình trạng tăng glucose máu và các rối loạn chuyển hóa glucid, lipid, protid, thường kết hợp giảm tuyệt đối hay tương đối về tác dụng và sự bài tiết insulin [3]

1.1.2 Dịch tễ học bệnh ĐTĐ

♦ Trên thế giới

Trong những năm gần đây, số lượng bệnh nhân ĐTĐ đang gia tăng mạnh đặc biệt là ĐTĐ type 2 Năm 1995 trên toàn thế giới có 118,4 triệu người mắc ĐTĐ, trong đó ĐTĐ type 2 là 114,9 triệu người Khu vực có tỷ lệ bệnh tăng mạnh nhất là Châu Á và Châu Phi Ở Châu Á năm 1995 có 62,8 triệu BN mắc ĐTĐ, dự báo 2025 sẽ có 300 triệu người (chiếm 5,4% dân số thế giới) theo Kinh H Aubert, Herman W, 1998

Tại khu vực Tây Thái Bình Dương theo ước đoán hiện nay có khoảng

30 triệu người mắc bệnh ĐTĐ, dự báo con số này sẽ tăng gấp đôi vào năm

2025 Đây là khu vực có tỷ lệ bệnh gia tăng rất nhanh Hiện có 12 quốc gia có

tỷ lệ ĐTĐ trên 8% đặc biệt nơi có tỷ lệ cao nhất lên đến trên 40% [5]

Theo dự đoán của các chuyên gia y tế thế giới trong vòng 20 năm tới bệnh sẽ tăng 42% ở các nước công nghiệp phát triển, ở nhiều nước đang phát triển tỷ lệ bệnh sẽ tăng tới 170% [5]

Năm 1993, Mai Thế Trạch và cộng sự điều tra trên 5416 người ở Thành phố Hồ Chí Minh thấy tỷ lệ mắc ĐTĐ ở nội thành là 2,5% [6].

Năm 1996, Trần Hữu Đàng điều tra trên 4980 người từ 15 tuổi trở lên tại Huế phát hiện tỷ lệ mắc ĐTĐ là 0.96% [7]

Theo điều tra quốc gia về tình hình bệnh ĐTĐ và yếu tố nguy cơ được tiến hành trong cả nước năm 2002 - 2003, kết quả cho thấy tỷ lệ ĐTĐ trong toàn quốc là 2,7%, ở khu vực thành phố là 4,4%, ở miền núi và trung du là 2,1% và đồng bằng là 2,7% [2], [3]

1.1.3 Phân loại ĐTĐ nguyên phát

♦ĐTĐ type 1(Đái đường phụ thuộc insulin)

- Xảy ra ở người trẻ (≤35 tuổi)

- Có xu hướng hôn mê toan huyết

- Thường ở người có HLADR3 và/hoặc HLADR4

- Có kháng thể kháng tiểu đảo Langerhans

- Sự bài tiết insulin có thể còn ở giai đoạn đầu chẩn đoán, sau đó giảm dần đến cạn kiệt ít năm sau

- Bệnh nhân cần tiêm insulin để duy trì sự sống

♦ĐTĐ type 2 (Đái đường không phụ thuộc insulin)

- Thường xảy ra ở người trên 35 tuổi

- Thường ở người có triệu chứng nhẹ, được chẩn đoán tình cờ

- BN thường béo

- Không có xu hướng hôn mê toan huyết

- Sự tiết insulin thấp tương đối, có sự kháng tác dụng insulin của tổ chức ngoại biên và gan

- Có thể kiểm soát được đường máu bằng chế độ ăn, luyện tập và/hoặc thuốc viên

- Hôn mê nhiễm toan ceton

- Hôn mê do tăng áp lực thẩm thấu

- Hôn mê do nhiễm toan acid lactic

120 BN ĐTĐ điều trị tại viện quân y 103 thấy rằng biến chứng thận ở BN ĐTĐ type 1 là 57,14%, BN ĐTĐ type 2 là 42,85% trong đó có 14,2% BN có biến chứng suy thận nặng [4] Tác giả Nguyễn Khoa Diệu Vân (1999) nghiên cứu trên 40 BN bằng định lượng Microalbumin niệu thấy rằng tỷ lệ sinh thiết thận và MAU (+) ở BN type 1 là 33,1% và type 2 là 34,6% [8].

1.2.2 Cấu trúc và chức năng thận

Thận là cơ quan đóng vai trò rất quan trọng trong cơ thể Thận tham gia điều hòa chuyển hóa muối nước, điện giải, điều hòa huyết áp, bài xuất các chất độc nội sinh và ngoại sinh khỏi cơ thể Đơn vị chức năng của thận là nephron Mỗi thận có khoảng 1- 2 triệu nephron Mỗi nephron gồm một tiểu cầu thận và hệ thống ống thận Cầu thận gồm 1 lưới mao mạch nhận máu từ các tiểu ĐM đến và đưa máu ra khỏi cầu thận qua tiểu ĐM đi Thành mao mạch cầu thận đóng vai trò hàng rào lọc hữu hiệu, nhờ màng lọc này dưới tác động của các áp lực lọc, cầu thận lọc tách các tế bào máu và các phân tử lớn khỏi nước và các phân tử nhỏ Chức năng này được gọi là siêu lọc của cầu thận, được đánh giá bằng MLCT trên lâm sàng MLCT thường biến đổi trong khoảng 80 – 120 ml/phút [9], [10]

Hàng rào mao mạch cầu thận chủ yếu gồm lớp lát trong là các tế bào nội mô, màng đáy và lớp bên ngoài là các tế bào biểu mô Tổ chức nâng đỡ hay còn gọi là vùng gian mạch bình thường không tham gia vào hàng rào mao mạch song có thể tác động đến chức năng lọc khi thành phần này tăng lên như trong biến chứng thận do ĐTĐ Các biến đổi bệnh lý trong cấu trúc và chức năng của hàng rào lọc được phản ánh bằng tình trạng biến đổi trong thành phần sinh hóa của dịch lọc qua cầu thận và một trong các thành phần quan trọng nhất trên lâm sàng là protein, đặc biệt là albumin Khi thành mao mạch cầu thận không bị tổn thương các phân tử albumin không có trong dịch siêu

lọc và nước tiểu Đo mức bài xuất albumin được coi là một chỉ số hữu ích đánh giá tình trạng tổn thương của hàng rào cầu thận [10], [11].

1.2.3 Tiêu chuẩn chẩn đoán biến chứng thận do ĐTĐ và các giai đoạn

1.2.3.4 Tiêu chuẩn chẩn đoán

♦Biểu hiện lâm sàng

Bệnh thận ĐTĐ khi đã có đầy đủ các triệu chứng: protein niệu, phù, tăng huyết áp, suy thận thì tổn thương thận đã ở giai đoạn nặng nề Lúc này biểu hiện thường kết hợp với giảm albumin máu và rối loạn lipid máu trong những thể nặng, tạo thành hội chứng thận hư điển hình hội chứng Kimmelstiel - Willson Vì vậy điều quan trọng nhất là phải tìm được MAU để

Ngoài ra một tiêu chuẩn đang được khuyến cáo áp dụng hiện nay là dựa vào tỷ số Albumin/Creatinin (A/C), kết quả dương tính khi A/C > 30mg/g (3 mg/mmol) ở nữ và A/C >25mg/g ( > 2.5 mg/mmol) ở nam A/C trong khoảng 25-300 mg/g ( 2.5 -30mg/mmol) ở nam và 30 -300mg/g (3.0- 30 mg/mmol) ở

nữ tương ứng với MAU [3]

Bảng1.1.Tiêu chuẩn xác định giai đoạn tổn thương thận ĐTĐ

Bình thường MAU Bệnh thận lâm sàngNồng độ Alb niệu <20 mg/l 20- 300 mg/l >300 mg/l

Mẫu qua đêm <20 µg/min 20-199 µg/min ≥ 200 µg/min

>30 mg/mmol

> 300 mg/g

Tiêu chuẩn đánh giá tổn thương theo StesphenC.Jones 2004 [3]

♦ Quá trình tiến triển biến chứng thận do ĐTĐ

Theo Mogensen và Hasslacher được phân chia thành 5 giai đoạn [45], [30] Giai đoạn 1: Phì đại thận với tăng lưu lượng lọc cầu thận và có thể xuất hiện MAU từng lúc, xuất hiện trong vòng 2 năm đầu bị bệnh ĐTĐ

Giai đoạn 2: Tổn thương cầu thận với MAU nhẹ xuất hiện trong giai đoạn kém kiểm soát chuyển hóa hay khi có gắng sức thể lực, thường gặp sau thời gian mắc bệnh ĐTĐ từ 2 - 5 năm

Giai đoạn 3: BCT tiềm tàng với MAU tồn tại kéo dài, có thể đi kèm với tăng huyết áp nhẹ Giai đoạn này thường xuất hiện sau 1 thời gian mắc bệnh 5 - 10 năm

Giai đoạn 4: BCT có biểu hiện rõ ràng trên lâm sàng với protein niệu thường xuyên, có thể phát hiện được bằng các xét nghiệm thường quy (macroalbumin) THA được thấy trong 60% trường hợp và có kèm bệnh lý võng mạc Giai đoạn này thường xuất hiện sau thời gian mắc bệnh 10 – 25 năm

Giai đoạn 5: Suy thận giai đoạn cuối với giảm lưu lượng lọc cầu thận

có hội chứng ure máu cao, tăng HA trong hầu hết các trường hợp và bệnh nhân có chỉ định lọc máu hay ghép thận để duy trì cuộc sống

Khi xem xét khả năng phục hồi nhờ điều trị với tình trạng BCT theo 5 giai đoạn kể trên, các tác giả nhấn mạnh là: trong giai đoạn 1 BN có thể phục hồi hoàn toàn khi được điều trị hợp lý, giai đoạn 2 vẫn còn có khả năng phục

hồi hoặc làm ngừng tiến triển của tổn thương cầu thận Ở giai đoạn 3, khi BCT tiềm tàng đã xuất hiện thì chỉ còn khả năng cải thiện 1 phần tiến triển của bệnh mà không thể làm hồi phục bệnh Đến giai đoạn 4 chỉ còn khả năng làm chậm tiến triển suy thận giai đoạn cuối.

Như vậy chỉ nỗ lực phát hiện BCT do ĐTD ở vào giai đoạn còn khả năng hồi phục (giai đoạn 1 và 2) mới có hy vọng cải thiện tiên lượng cho BN ĐTĐ [31], [32]

1.2.4 Microalbumin niệu và biến chứng thận do ĐTĐ

♦ Sinh lý bài xuất albumin trong nước tiểu và microalbumin niệu

Sinh lý bài xuất albumin trong nước tiểu: một lượng nhỏ albumin huyết tương được lọc qua cầu thận và được tái hấp thu trên 95% tại các ống thận Albumin có đi qua được cầu thận hay không một phần phụ thuộc vào gradient áp lực tồn tại giữa buồng cầu thận và các mao mạch, mặt khác là bản thân màng lọc: bề mặt, kích thước các lỗ, điện tích Bình thường lượng albumin được bài xuất trong nước tiểu < 10mg/ngày

Tổn thương màng lọc cầu thận sẽ làm cho lượng albumin xuất hiện nhiều hơn trong nước tiểu Bằng các phương pháp thông thường người ta chỉ đánh giá được khi có protein niệu ≥300 mg/24h Năm 1963 Keen và Chlouverakis là người đầu tiên sáng chế ra thử nghiệm miễn dịch phóng xạ cho phép phát hiện thấy các nồng độ nhỏ albumin trong nước tiểu Thuật ngữ microalbumin niệu (MAU) được sử dụng kể từ năm 1982

♦ Vai trò của Microalbumin niệu

MAU được xác được định bằng tốc độ bài xuất albumin qua nước tiểu khoảng 20-200 µg/phút hoặc 30-300 mg/24h Nó được coi là công cụ chẩn đoán sớm biến chứng thận [4]

MAU thường xuyên thường phát hiện sau 1 năm chẩn đoán ĐTĐ type

1 và cũng có thể phát hiện được thấy ngay khi chẩn đoán bệnh ĐTĐ type 2 Ý nghĩa của sự xuất hiện MAU trong thời gian ngắn chưa rõ nhưng ở 1 số bệnh

nhân thời gian phát hiện bệnh ≥ 5 năm có MAU được xem là có tổn thương thận Một khi MAU được xác nhận thì bài xuất albumin theo nước tiểu có chiều hướng tăng theo thời gian, tốc độ trung bình khoảng 25% hàng năm.

♦ Tỷ số Albumin/Creatinin (A/C) với mẫu nước tiểu ngẫu nhiên

Xét nghiệm định lượng MAU 24h là tiêu chuẩn vàng trong đánh giá microalbumin niệu, xong việc thu thập mẫu nước tiểu 24h là rất khó khăn, bất tiện đối với bệnh nhân và có thể thu thập không đầy đủ đặc biệt là đối với bệnh nhân ngoại trú Hơn nữa sự bài tiết albumin niệu là thay đổi trong ngày, biến đổi từ mẫu này sang mẫu khác, phụ thuộc vào nhiều yếu tố trong khi tỷ

số A/C gần như là không thay đổi Do đó, một tiêu chuẩn được NKF (National Kidney Foundation)khuyến cáo áp dụng hiện nay là dựa vào tỷ số A/C với mẫu nước tiểu ngẫu nhiên để gián tiếp đánh giá sự bài tiết albumin niệu 24h Nhiều nghiên cứu đã chứng minh có mối tương quan chặt chẽ giữa

tỷ số A/C với mẫu nước tiểu ngẫu nhiên và albumin niệu 24h Đo tỷ số A/C sử dụng mẫu nước tiểu ngẫu nhiên rất thuận tiện cho BN và có giá trị trong chẩn đoán biến chứng thận ở BN ĐTĐ

1.3 Phương pháp xác định Albumin, Creatinin và lập tỷ số A/C

1.3.1 Phương pháp định lượng

Nguyên lý kỹ thuật định lượng albumin, creatinin niệu và lập tỷ số A/C

♦ Định lượng albumin niệu

Xét nghiệm được thực hiện trên máy phân tích hóa sinh tự động Cobas6000 c501,dựa trên phương pháp miễn dịch đo độ đục (immunoturbidimetry)

Nguyên lý của phương pháp: Kháng thể kháng albumin người kết hợp với kháng nguyên (albumin) có trong mẫu bệnh phẩm nước tiểu hình thành phức hợp kháng nguyên - kháng thể Tiến hành đo ngưng kết bằng phương pháp đo độ đục ở bước sóng 340nm Toàn bộ quy trình xét nghiệm được tóm tắt trong hình sau:

Hình 1.1: Sơ đồ quy trình xét nghiệm MAU bằng đo độ đục miễn dịch

♦ Định lượng creatinin niệu

Xét nghiệm được tiến hành trên máy Modular dựa trên phương pháp

so màu động học

Nguyên lý: creatinin phản ứng với acid picric trong môi trường kiềm tạo hợp chất picrat - creatinin có màu vàng cam (phản ứng Jaffé) Đậm độ màu tỷ lệ thuận với nồng độ creatinin được đo ở bước sóng 520nm

♦

Lập tỷ số A/C

Albumin/Creatinin

Albumin (mg/L)Creatinin(mmol/dL)

Phương pháp bán định lượng:trong nghiên cứu này chúng tôi sử dụng phương pháp phản xạ bước sóng kép, thực hiện với que thử MEDITAPE II

10 K, trên máy phân tích nước tiểu tự động UX2000 (Symex)

♦ Nguyên lý phân tích các chất hóa học trong nước tiểu

Khoanh giấy được tẩm thuốc thử và thuốc thử sẽ phản ứng màu với các chất phân tích khác nhau trong nước tiểu Khi ánh sáng chiếu vào khoanh giấy thử, một số ánh sáng được hấp thụ, phần ánh sáng còn lại phản xạ lại Ánh sáng phản xạ từ khoanh giấy thử giảm theo tỷ lệ tương ứng với cường độ màu được tạo ra bởi nồng độ của chất xét nghiệm Mức độ thay đổi màu của khoanh giấy liên quan trực tiếp đến nồng độ của các thành phần cụ thể trong nước tiểu

Hình 1.4 : Mức độ thay đổi màu của khoanh giấy

Hình 1.5 : Nguyên lýđo sóng phản xạ Albumin: Dựa vào sự kết hợp của albumin với thuốc thử 4,5,6,7-

Tetrachloro-2,4,5,7- Tetraiodofluorescein disodium salt Sự hiện diện của albumin làm cho khoanh giấy chuyển sang màu đỏ

Creatinin: Dựa vào sựkết hợp của creatinin với thuốc thử 2,6-

Dichioro-4- hydroxy-3,3- dimethyl-3 suifofuchsone-5,5-dicarboxylic acid, trisodium salt Sự hiện diện của creatinin làm cho khoanh giấy chuyển sang màu vàng

Albumin/Creatinin

Albumin (mg/L)

×1000Creatinin (mg/dL)

Đánh giá kết quả: Chỉ số A /C < 30 mg/g được coi là âm tính, A/C trong khoảng [30-300] mg/g được coi là MAU, A/C >300 mg/g được coi là macroalbumin niệu Nếu tuân thủ đúng kỹ thuật sử dụng, độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp này được coi là thích hợp, cho phép phát hiện MAU trong những lần khám định kỳ cho bệnh nhân.

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng nghiên cứu

Đối tượng lựa chọn vào nghiên cứu là những bệnh nhân được chẩn đoán ĐTĐ type 2 khám và điều trị ngoại trú tại Bệnh viện Lão khoa trung ương từ 11/2012 đến 4/2013

2.1.1Tiêu chuẩn chọn đối tượng nghiên cứu

♦ Bệnh nhân được chẩn đoán ĐTĐ theo tiêu chuẩn của tổ chức y tế thế giới 2003 có ít nhất 1 trong 3 tiêu chuẩn sau:

+ Đường máu TM lúc đói (sau ăn 8h) ≥7,0 mmol/l (làm XN 2 lần)

+ Đường máu TM tại 1 thời điểm bất kỳ ≥11,1 mmol/l

+ Đường máu TM sau 2h làm nghiệm pháp dung nạp glucose đường uống ≥11,1 mmol/l

♦ Bệnh nhân được chẩn đoán ĐTĐ type 2 theo một số tiêu chuẩn của

tổ chức y tế thế giới trên cơ sở vận dụng phù hợp với Việt Nam:

+ Người > 35 tuổi

+ Thể trạng thường béo (BMI ≥ 23)

+ Triệu chứng lâm sàng không rầm rộ

+ Không có biến chứng nhiễm toan ceton

+ Điều trị lâu dài có hiệu quả bằng chế độ ăn, luyện tập, và/ hoặc thuốc viên

♦ Tiêu chuẩn loại trừ khỏi nghiên cứu

Tất cả các bệnh nhân không thỏa mãn các điều kiện trên:

+ Bệnh nhân mắc các bệnh thận như: nhiễm khuẩn tiết niệu hay bị các bệnh thận khác

+ Bệnh nhân mắc ĐTĐ type 1, ĐTĐ thai kỳ

+ Các BN ĐTĐ thứ phát sau sử dụng 1 số thuốc: corticoid, thiazid, hormon tuyến giáp hoặc ĐTĐ do bệnh tụy tạng

+ Đái máu (vi thể hoặc đại thể), sỏi thận

+ Bệnh nhân đang trong đợt mất bù của suy tim, suy gan

+ Bệnh nhân có các biến chứng nặng, cấp tính như hôn mê, nhiễm toan ceton, hôn mê tăng áp lực thẩm thấu

+ Tăng HA chưa điều trị tốt (HA > 140/95)

2.2 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

- Thời gian nghiên cứu: từ tháng 11/2012 đến tháng 4/2013

- Địa điểm nghiên cứu: Khoa khám bệnh Bệnh viện Lão khoa trung ương, Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm Trường Đại học Y Hà Nội, Khoa Xét nghiệm Hóa Sinh Bệnh viện Bạch Mai

2.3 Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu được thực hiện theo phương pháp mô tả cắt ngang

2.4 Vật liệu nhiên cứu

2.4.1 Máy phân tích nước tiểu tự động UX2000 (Symex)

Thiết bị này phân tích kết hợp:phân tích các thông số hóa sinh nước tiểu qua test thử MEDITAPE 10K (CHM) và phân tích các hạt trong nước tiểu (FCM)

Khả năng phân tích của máy: phân tích cả FCM và CHM là 150 mẫu/h, chỉ có CHM là 200 mẫu/h, chỉ FCM là 100 mẫu/h

Thể tích mẫu yêu cầu tối thiểu: đối với CHM là 2ml, với FCM là 4ml,

cả CHM và FCM là 5ml

Các thông số phân tích hóa sinh nước tiểu của máy: glucose, protein, albumin, creatinin, urobilinogen, bilirubin, PH, ketone, nitrite, leucocyte, P/C, A/C

♦ Quy trình hoạt động của máy UX2000

Test thử được xếp vào vị trí hộp chứa test trong máy Chúng sẽ được di chuyển đến vị trí thả mẫu Tại vị trí thả mẫu, kim hút sẽ hút mẫu thử thả xuống mỗi khoanh giấy trên test thử Sau đó que thử được di chuyển đến khu

vực đo Trong khu vực này, nguồn sáng sẽ phát ra 2 bước sóng chiếu vào khoanh giấy thử (sự kết hợp của các bước sóng phát ra là khác nhau đối với mỗi thông số phân tích) Ánh sáng phản xạ từ khoanh giấy thử được thu bởi một thiết bị cảm biến.

Những phản ứng của que thử, sự đổi màu, ánh sáng phản xạ của nó được đo trong khoảng 60s

Sau khi hoàn thành phân tích test thử được bỏ vào hộp chất thải

Bước sóng phân tích cho mỗi thông số:

Thông số Bước sóng phân tích (nm) Bước sóng tham chiếu (nm)

Bật công tắc mở máy Cài đặt và chuẩn bị cho phân tích

Thực hiện QC Phân tích mẫu

Hình 2.1 Sơ đồ quy trình chạy máy phân tích nước tiểu UX2000 -Bật máy:

+ Kiểm tra nguồn điện vào máy XN, máy in

+ Kiểm tra nguồn nước vào

+ Bật máy tính, đăng nhập IPU

+ Bật nguồn trên máy UX