NGHIÊN cứu ỨNG DỤNG kỹ THUẬT BOBS TRONG CHẨN đoán TRƯỚC SINH một số hội CHỨNG bất THƯỜNG NHIỄM sắc THỂ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ VÂN ANH NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT BOBS TRONG CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH MỘT SỐ HỘI CHỨNG BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP BÁC SĨ NỘI TRÚ HÀ NỘI – 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ VÂN ANH NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT BOBS TRONG CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH MỘT SỐ HỘI CHỨNG BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ Chuyên ngành: Y sinh học - Di Truyền Mã số: NT 62726201 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP BÁC SĨ NỘI TRÚ Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Hoàng Thị Ngọc Lan HÀ NỘI – 2015 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ADN Acid Deoxyribonucleic AFP Alpha fetoprotein AS Angelman Syndrome BoBs Bacterial artificial chromosome – on – beads CGH Microarray – based comparative genomic hybridization DGS DiGeorge Syndrome FISH Fluorescent in stitu hybridization LGS Langer – Giedion Syndrome MDS Miller – Dieker Syndrome MLPA Multiplex ligation-dependent probe amplification NST Nhiễm sắc thể PAPP – A Pregnancy – associated plasma protein A PCR Polymerase chain reaction PWS Prader – Willi Syndrome QF – PCR Quantitative fluorescent - polymerase chain reaction SMS Smith – Magenis Syndrome uE3 Unconjugate Estriol WBS William – Beuren Syndrome WHS Wolf – Hirschhorn Syndrome βhCG Beta – Human chronic gonadotropin MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Dị tật bẩm sinh số nguyên nhân hàng đầu gây chết sơ sinh vấn đề quan tâm xã hội Vì vậy, đời phương pháp chẩn đoán trước sinh nhu cầu vô cấp thiết Trước kia, siêu âm lập karyotype từ tế bào thai nhi nước ối hai phương pháp truyền thống sử dụng rộng rãi toàn giới Tuy nhiên, độ nhạy độ đặc hiệu phương pháp siêu âm phụ thuộc nhiều vào máy móc kinh nghiệm người làm Nhiều dị tật phát từ thời kỳ bào thai khơng giải thích chế di truyền, từ người bác sĩ gặp khó khăn việc đưa lời khuyên di truyền Khiếm khuyết phương pháp siêu âm giải kết hợp với phương pháp di truyền tế bào vấp phải số vấn đề: thời gian xét nghiệm kéo dài gây căng thẳng, lo âu cho thai phụ, cần nguồn nhân lực lớn, gặp thất bại q trình ni cấy khơng thành cơng Ngày nay, với phát triển ngành di truyền phân tử, nhà khoa học thiết kế nhiều kỹ thuật chẩn đoán trước sinh mức độ phân tử kỹ thuật lai chỗ huỳnh quang (FISH), QF – PCR MLPA đem lại nhiều thành tựu cơng tác chẩn đốn trước sinh, góp phần nâng cao chất lượng dân số Mặc dù vậy, kỹ thuật nói nhiều hạn chế nên thực tế lâm sàng ứng dụng chúng dừng lại mức độ chẩn đoán đột biến dạng lệch bội nhiễm sắc thể 13, 18, 21 nhiễm sắc thể giới tính Một số hội chứng đột biến đoạn lặp đoạn với kích thước nhỏ mức quan sát kính hiển vi quang học bị bỏ sót Hậu đột biến vi đoạn vô nặng nề, hầu hết hệ quan quan trọng thần kinh, tim mạch, xương khớp bị ảnh hưởng nghiêm trọng Chậm phát triển vận động, tâm thần, khiếm khuyết trí tuệ biến dạng vùng đầu mặt cổ tình trạng thường quan sát thấy bệnh nhân mắc hội chứng vi đoạn Hơn nữa, kiểu hình chúng lâm sàng đa dạng, mức độ biểu biến thiên từ nhẹ đến nặng khơng giống hồn tồn bệnh nhân Cho đến chưa có biện pháp điều trị triệt để bệnh, tật di truyền nói chung hội chứng vi đoạn nói riêng, việc phát sớm từ thời kỳ bào thai để giảm bớt gánh nặng cho gia đình xã hội việc làm cần thiết Vì vậy, vấn đề đặt cần phương pháp chẩn đốn trước sinh xác định tồn dạng bất thường nhiễm sắc thể thường gặp thời gian ngắn với độ xác cao giá thành hợp lý Trong năm gần đây, đời kỹ thuật BACs – on – bead (BoBs) đáp ứng nhu cầu Kỹ thuật BoBs khơng phát xác đột biến lệch bội tương tự kỹ thuật khác thịnh hành mà cho phép chẩn đốn tình trạng đoạn nhiễm sắc thể với kích thước nhỏ nằm ngồi khả quan sát kính hiển vi điện tử Chín hội chứng vi đoạn có tỷ lệ mắc cao lựa chọn là: Wolf – Hirschhorn, Cri – du Chat, Smith – Magenis, DiGeorge, William – Beuren, Langer – Giedion, Prader – Willi/Angelman Miller – Dieker Ưu điểm phương pháp có khả đánh giá đồng thời toàn bất thường nhiễm sắc thể với nhiều mẫu bệnh nhân lần xét nghiệm Do đó, giúp giảm thiểu thời gian, nhân cơng chi phí so với phương pháp khác Trên giới có nhiều phòng di truyền tiến hành thử nghiệm đưa kỹ thuật BoBs vào ứng dụng chẩn đoán lâm sàng với kết đầy khả quan Trái lại, Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu tương tự thực Vì vậy, để góp phần tìm hiểu kỹ thuật BoBs tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số hội chứng bất thường nhiễm sắc thể” với hai mục tiêu: Hồn chỉnh quy trình BoBs để chẩn đoán số bất thường nhiễm sắc thể Đánh giá giá trị kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tầm quan trọng chẩn đoán trước sinh Bất thường bẩm sinh (BTBS) hay gọi dị tật bẩm sinh rối loạn bẩm sinh khiếm khuyết lúc sinh, theo Tổ chức Y Tế Thế Giới (TCYTTG), tất bất thường cấu trúc, chức sinh hóa xảy phơi, thai tử cung, chẩn đoán giai đoạn thai nghén thời điểm đứa trẻ sinh hay giai đoạn sau sống Trong giới có nhiều nghiên cứu với quy mơ lớn BTBS cho thấy tỷ lệ BTBS 1,73% tương đương với triệu trẻ năm Việt Nam chưa có điều tra tồn quốc BTBS Tuy nhiên, có số thống kê BTBS số vùng miền bệnh viện Phan Thị Hoan (2001) điều tra phát tần số dị tật đồng sông Hồng với cỡ mẫu n=36978 cho thấy có tới 19,63‰ trẻ sơ sinh có dị tật Theo Trịnh Văn Bảo Nguyễn Việt Hùng từ năm 1999 đến năm 2003 tỷ lệ BTBS khoa sản Bệnh viện Bạch Mai 1,31% Nghiên cứu với cỡ mẫu tương đối lớn gần Nguyễn Đức Vy đối tượng tất bà mẹ mang thai đến khám sinh Bệnh viện Phụ sản Trung ương thời gian từ 1/1/2001 đến 31/12/2003 cho thấy số 33816 phụ nữ mang thai có 933 trường hợp có dị tật bẩm sinh, chiếm 2,7% Từ số liệu thống kê quốc tế nước, ước tính tỷ lệ dị tật bẩm sinh Việt Nam 1,5% - 2% số trẻ sinh hàng năm tương đương 22.000 đến 30.000 trẻ đẻ có BTBS Với số lượng trẻ có BTBS lớn để lại hậu gánh nặng lớn cho gia đình trẻ nói riêng xã hội nói chung Theo thống kê TCYTTG, tổng số 2,761 triệu trẻ chết giai đoạn sơ sinh năm 2013 tồn giới có tới 276.000 BTBS Riêng Việt Nam, theo công bố TCYTTG năm 2013 tỷ lệ chết sơ sinh BTBS 16% Con số cao số trẻ sơ sinh chết nhiễm trùng đường hô hấp (7,1%) chết nhiễm trùng máu loại nhiễm trùng khác (11,8%) Một nghiên cứu gánh nặng bệnh tật toàn cầu đưa 10 nguyên nhân hàng đầu gây tử vong nhiều nước khu vực tồn giới, có BTBS Thêm vào đó, theo báo cáo CDC (Trung tâm kiểm soát phòng ngừa bệnh tật Mỹ) năm 2004, 2,6 tỷ la Mỹ số hàng năm phủ Mỹ cho 139.000 bệnh viện tồn nước Mỹ cho việc chăm sóc điều trị trẻ có BTBS, đó, ngân sách cho việc điều trị dị tật tim bẩm sinh 1,4 tỷ đô la Mỹ Chi phí điều trị cho trẻ mắc tật nứt đốt sống bẩm sinh bang Florida 21.900 đô la Mỹ kết nghiên cứu dựa sở liệu bang vào năm 2012 Cũng theo quan này, trẻ bị Down Mỹ cần số tiền gấp 12 đến 13 lần so với đứa trẻ không mắc phải hội chứng Từ số liệu thấy đằng sau BTBS thiệt hại vật chất tinh thần khơng cho gia đình mà xã hội Mặt khác, hầu hết BTBS chưa có biện pháp điều trị triệt để, phần lớn dừng lại mức điều trị triệu chứng, trẻ sinh với BTBS thường phát triển thể lực trí tuệ, giảm khả lao động, khả tự chăm sóc hòa nhập với cộng đồng Sinh đứa trẻ khỏe mạnh thể chất trí tuệ nguyện vọng phụ nữ mang thai, niềm phúc riêng thân họ gia đình Tuy nhiên, nhiều nguyên nhân khác nhau, có tỷ lệ trẻ sinh mang khiếm khuyết bẩm sinh Chính vậy, đời phương pháp chẩn đoán trước sinh nhu cầu có tính cấp thiết nhằm mục đích phát sớm trường hợp thai dị tật từ tử cung, qua trực tiếp làm giảm gánh nặng bệnh tật cho gia đình xã hội Chẩn đoán trước sinh bao gồm nhiều kỹ thuật đặc hiệu khác thực thời gian mang thai để chẩn đốn xác định tình trạng bất thường thai nhi trường hợp nghi ngờ mắc bệnh thông qua sàng lọc Nếu công việc thực tốt kim nam cho cặp vợ chồng chuyên gia y tế quản lý thai nghén Từ phân tích trên, thấy rõ ràng chẩn đốn trước sinh có vai trò quan trọng thật cần thiết góp phần nâng cao chất lượng dân số cải thiện chất lượng giống nòi 1.2 Đối tượng cần làm chẩn đoán trước sinh Với nhiều lợi ích chẩn đốn trước sinh điều kiện lý tưởng 100% phụ nữ mang thai tiến hành chẩn đoán trước sinh Tuy nhiên, với điều kiện nay, nguồn kinh phí hạn chế, nhận thức người dân chưa đồng đều, kỹ thuật phức tạp đòi hỏi trình độ chun mơn cao nhiều trang thiết bị nên khó để đưa chương trình chẩn đốn trước sinh tới thai phụ Thay vào đó, biện pháp sàng lọc thực để xác định đối tượng có nguy cao mang thai dị tật, nhóm ưu tiên thực kỹ thuật chẩn đốn trước sinh Nhóm cặp vợ chồng mang yếu tố sau xác định đối tượng có nguy cao: (1) Mẹ lớn tuổi Đây yếu tố nguy hay gặp định phổ biến chẩn đoán trước sinh Từ lâu nhiều nghiên cứu giới nước chứng minh tần số thai mang nhiễm sắc thể bất thường tăng lên tuổi mẹ tăng, đặc biệt sau 35 tuổi Các nghiên cứu khả điều chỉnh q trình sinh học sai lệch, có q trình sinh trứng, dẫn tới khơng phân ly nhiễm sắc thể giảm phân II, kết tạo giao tử lệch bội Về mặt lý thuyết, tượng khơng phân ly xảy cặp nhiễm sắc thể toàn bộ nhiễm sắc thể, nhiên, thực tế người ta hay gặp trường hợp thai trisomy 13, 18, 21 cặp nhiễm sắc thể giới tính (2) Mẹ có tiền sử sảy thai, thai chết lưu liên tiếp nhiều lần (≥3 lần) Nguyên nhân sảy thai liên tiếp xuất phát từ nhiều phía, ví dụ rối loạn miễn dịch, thiểu nội tiết tố, mẹ có bất thường giải phẫu tử cung hay rối loạn di truyền Theo Gardner Sutherland (1996) khoảng nửa trường hợp sảy thai liên tiếp bất thường nhiễm sắc thể, số có 2% thai mang chuyển đoạn khơng cân (3) Có tiền sử sinh dị tật (4) Tiền sử gia đình hai bên bố mẹ hai có người mắc bệnh, tật rối loạn di truyền Nếu bệnh, tật xác định di truyền đơn gen, đa gen hay đa nhân tố xuất tiền sử gia đình cặp vợ chồng có nguy lần mang thai người phụ nữ bị ảnh hưởng Phân tích gia hệ thường phương pháp cần thiết để đánh giá nguy thai, bên cạnh kỹ thuật di truyền đóng vai trò chìa khóa chẩn đốn trước sinh (5) Bản thân bố mẹ hai xác định người có rối loạn cấu trúc NST di truyền Bố mẹ người mắc bệnh di truyền mang đột biến chuyển đoạn, đảo đoạn với kiểu hình hồn tồn bình thường đột biến di truyền cho có biểu bất thường Ví dụ bệnh loạn dưỡng Duchenne tuân theo chế di truyền lặn liên kết nhiễm sắc thể giới tính X, mẹ mang gen bệnh có 50% khả sinh gái mang gen bệnh 50% khả sinh trai mắc bệnh (6) Kết sàng lọc huyết mẹ xác định có nguy cao sinh dị tật Hình 2.3 Màn hình hiển thị kết kỹ thuật BoBs 2.7 Phương pháp xử lý số liệu - Số liệu xử lý theo phương pháp thống kê y học chương trình SPSS 16.0 - Các biến định lượng trình bày theo giá trị trung bình độ lệch chuẩn - Các biến định tính trình bày theo tỷ lệ phần trăm (%) - So sánh giá trị trung bình hai nhóm độc lập: kiểm định T – test - So sánh tỷ lệ hai nhóm độc lập: kiểm định χ2 2.8 Đạo đức nghiên cứu - Nghiên cứu tiến hành sau phép Hội đồng đạo đức trường Đại học Y Hà Nội Ban lãnh đạo nhà trường Bệnh viện Phụ sản Trung ương - Cam kết tiến hành nghiên cứu với tinh thần trung thực, số liệu nghiên cứu chưa công bố hình thức - Mọi thơng tin thai phụ nghiên cứu giữ bí mật tuyệt đối - Các thông tin thu thập thai phụ nhằm mục đích nghiên cứu, khơng nhằm mục đích khác - Kết có ích cho việc tư vấn di truyền cho thai phụ gia đình CHƯƠNG DỰ KIẾN KẾT QUẢ 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 3.1.1 Tuổi thai phụ tuổi thai Bảng 3.1 Tuổi trung bình thai phụ Tuổi mẹ Nhóm ± SD p Thai phụ (n = ) Bất thường (n=) Nhận xét: Bảng 3.2 Phân bố thai phụ theo tuổi Nhóm tuổi ≤ 19 20 – 24 25 – 29 30 – 34 35 – 39 ≥ 40 Tổng n Tỷ lệ % Min: Max: ± SD: 100 Nhận xét: Bảng 3.3 Bảng phân bố thai phụ theo tuổi thai Tuổi thai (tuần) n Thai phụ Tỷ lệ Min: Nhóm bất thường n Tỷ lệ Min: (%) 17 17 – 18 18 – 19 19 – 20 ≥20 Tổng (%) Max: ± SD: 100 Max: ± SD: 100 Nhận xét: 3.1.2 Số lần mang thai Bảng 3.4 Phân bố thai phụ theo số lần mang thai Số lần mang thai n Tỷ lệ % Lần Lần ≥ lần Tổng Nhận xét: 100 3.1.3 Đặc điểm bất thường kết chẩn đoán hình ảnh thai nhi Bảng 3.5 Phân bố thai phụ theo kết chẩn đốn hình ảnh Thai phụ n Tỷ lệ(%) Đặc điểm Dị tật tim Dị tật não Dị tật vùng đầu mặt Dị tật chi Dị tật hệ thận – tiết niệu Tăng khoảng sáng sau gáy Đa ối Tổng 100 Nhóm bất thường n Tỷ lệ (%) 100 Nhận xét: 3.1.4 Đặc điểm kết sàng lọc trước sinh huyết thai phụ Bảng 3.6 Bảng phân bố thai phụ theo kết sàng lọc trước sinh huyết Cao Nguy Down Trisomy 18 Dị tật ống thần kinh Thấp Tổng n Tỷ lệ (%) 100 Nhận xét: 3.2 Hoàn chỉnh kỹ thuật BoBs Theo khuyến cáo hãng PerkinELmer, ADN nên tách chiết từ mẫu dịch ối kit QIAamp DNA Mini hãng QIAGEN Tuy nhiên, tiến hành tách chiết ADN kit khác (Promega) có giá thành rẻ với thời gian tương đương so sánh hiệu hai kit dựa vào tỷ lệ số mẫu ADN đạt tiêu chuẩn kit Bảng 3.7 Bảng so sánh kết tách chiết hai kit QIAGEN Promega QIAGEN Promega Thời gian (phút) Tỷ lệ mẫu đạt chuẩn (%) Tỷ lệ mẫu thành công kỹ thuật BoBs (%) Giá thành Nhận xét: Kỹ thuật BoBs thực theo hướng dẫn hãng PerkinELmer trình bày Mặc dù vậy, kỹ thuật BoBs chưa tiến hành Việt Nam nên trình thực chúng tơi có vài điều chỉnh bước quy trình trang thiết bị hóa chất cho phù hợp với điều kiện thực tế mà đảm bảo tính hiệu Cuối cùng, dựa vào kết đầu kỹ thuật BoBs, chúng tơi đánh giá hiệu tồn quy trình theo tỷ lệ số mẫu thành cơng tổng số mẫu tiến hành 3.3 Đánh giá giá trị kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể số hội chứng vi đoạn Bảng 3.8 Bảng kết chẩn đoán lệch bội nhiễm sắc thể kỹ thuật BoBs Kết Trisomy 13 Bất thường Trisomy 18 Trisomy 21 NST giới tính X NST giới tính Y Bình thường Tổng n Tỷ lệ (%) 100 Nhận xét: Bảng 3.9 Kết chẩn đoán vi đoạn nhiễm sắc thể kỹ thuật BoBs Bất thường Kết HC Wolf – Hirschhorn HC Cri du Chat HC Williams – Beuren HC Langer - Giedion HC Prader – Willi/Angelman HC Miller - Dieker HC Smith - Magenis HC DiGeore Bình thường Tổng n Tỷ lệ (%) 100 Nhận xét: Bảng 3.10 Kết phân tích karyotype theo phương pháp di truyền tế bào Kết Trisomy 13 Bất thường Trisomy 18 Trisomy 21 NST giới tính X NST giới tính Y Mất đoạn n Tỷ lệ (%) Bình thường Tổng 100 Nhận xét: Bảng 3.11 So sánh kết kỹ thuật BoBs với kết di truyền tế bào Kết BoBs Kiểu NST Số mẫu (n) Tỷ lệ (%) Kết di truyền tế bào Số mẫu Tỷ lệ (n) (%) Độ xác (%) Trisomy 13 Trisomy 18 Trisomy 21 45,X 47,XYY 47,XXY 46,XX/46,XY Bình thường Nhận xét: CHƯƠNG DỰ KIẾN BÀN LUẬN 4.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 4.1.1 Tuổi thai phụ tuổi thai 4.1.2 Số lần mang thai 4.1.3 Đặc điểm bất thường kết chẩn đốn hình ảnh thai nhi 4.1.4 Đặc điểm kết sàng lọc trước sinh huyết thai phụ 4.2 Hoàn chỉnh quy trình kỹ thuật BoBs 4.3 Đánh giá giá trị kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số hội chứng bất thường nhiễm sắc thể số hội chứng đoạn nhỏ DỰ KIẾN KẾT LUẬN Hoàn chỉnh quy trình kỹ thuật BoBs 1.1 Quy trình áp dụng kỹ thuật BoBs - Tách ADN: sử dụng kit khác có giá thành rẻ với thời gian tách ADN tương đương thay cho kit QIAamp DNA Mini hãng QIAGEN mà đảm bảo cho thành công kết BoBs - Một số thay đổi quy trình so với hướng dẫn hãng: 1.2 Kết chẩn đoán trước sinh kỹ thuật BoBs - Tỷ lệ trisomy 13: - Tỷ lệ trisomy 18: - Tỷ lệ trisomy 21: - Tỷ lệ bất thường số lượng NST giới tính: - Số trường hợp vi đoạn phát được: Đánh giá giá trị kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể số hội chứng đoạn nhỏ nhiễm sắc thể - - Tính phù hợp kết di truyền tế bào học kỹ thuật BoBs: • Tỷ lệ phát trisomy 13: • Tỷ lệ phát trisomy 18: • Tỷ lệ phát trisomy 21: • Tỷ lệ phát bất thường số lượng NST giới tính: Phát hiện….trường hợp đoạn nhỏ mà phương pháp di truyền tế bào không phát - Kỹ thuật BoBs không phát trường hợp tái cấu trúc chuyển đoạn cân đảo đoạn - DỰ KIẾN KIẾN NGHỊ Có thể dùng kit tách chiết ADN khác thay sử dụng kit hãng QIAGEN Nên đưa kỹ thuật BoBs vào chẩn đoán trước sinh thay cho kỹ thuật QF – PCR TÀI LIỆU THAM KHẢO Chung CS and Myrianthopoulos NC (1975) Factors affecting risks of congenital malformations II Effect of maternal diabetes Birth Defects Series, XI(10) D W Bianchi, J M Williams, L M Sullivan et al (1997) PCR quantitation of fetal cells in maternal blood in normal and aneuploid pregnancies Am J Hum Genet, 61 (4), 822-829 H Hamada, T Arinami, T Kubo et al (1993) Fetal nucleated cells in maternal peripheral blood: frequency and relationship to gestational age Hum Genet, 91 (5), 427-432 Y M Lo, N Corbetta, P F Chamberlain et al (1997) Presence of fetal DNA in maternal plasma and serum Lancet, 350 (9076), 485-487 C F Wright and H Burton (2009) The use of cell-free fetal nucleic acids in maternal blood for non-invasive prenatal diagnosis Hum Reprod Update, 15 (1), 139-151 Y K Tong, S Jin, R W Chiu et al (2010) Noninvasive prenatal detection of trisomy 21 by an epigenetic-genetic chromosome-dosage approach Clin Chem, 56 (1), 90-98 N B Tsui, R Akolekar, R W Chiu et al (2010) Synergy of total PLAC4 RNA concentration and measurement of the RNA singlenucleotide polymorphism allelic ratio for the noninvasive prenatal detection of trisomy 21 Clin Chem, 56 (1), 73-81 J Tepperberg, M J Pettenati, P N Rao et al (2001) Prenatal diagnosis using interphase fluorescence in situ hybridization (FISH): 2-year multicenter retrospective study and review of the literature Prenat Diagn, 21 (4), 293-301 L J Levett, S Liddle and R Meredith (2001) A large-scale evaluation of amnio-PCR for the rapid prenatal diagnosis of fetal trisomy Ultrasound Obstet Gynecol, 17 (2), 115-118 10 V Cirigliano, M Ejarque, M P Canadas et al (2001) Clinical application of multiplex quantitative fluorescent polymerase chain reaction (QF-PCR) for the rapid prenatal detection of common chromosome aneuploidies Mol Hum Reprod, (10), 1001-1006 11 D J Allingham-Hawkins, D Chitayat, V Cirigliano et al (2011) Prospective validation of quantitative fluorescent polymerase chain reaction for rapid detection of common aneuploidies Genet Med, 13 (2), 140-147 12 V Cirigliano, G Voglino, E Ordonez et al (2009) Rapid prenatal diagnosis of common chromosome aneuploidies by QF-PCR, results of years of clinical experience Prenat Diagn, 29 (1), 40-49 13 U Nicolini, F Lalatta, F Natacci et al (2004) The introduction of QFPCR in prenatal diagnosis of fetal aneuploidies: time for reconsideration Hum Reprod Update, 10 (6), 541-548 14 R Hochstenbach, J Meijer, J van de Brug et al (2005) Rapid detection of chromosomal aneuploidies in uncultured amniocytes by multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) Prenat Diagn, 25 (11), 1032-1039 15 D Van Opstal, M Boter, D de Jong et al (2009) Rapid aneuploidy detection with multiplex ligation-dependent probe amplification: a prospective study of 4000 amniotic fluid samples Eur J Hum Genet, 17 (1), 112-121 16 H R Slater, D L Bruno, H Ren et al (2003) Rapid, high throughput prenatal detection of aneuploidy using a novel quantitative method (MLPA), J Med Genet Dec;40(12):907-12., 17 P Stankiewicz, J R Lupski (2010) Structural variation in the human genome and its role in disease Annu Rev Med, 61, 437-455 18 N Craddock, M E Hurles, N Cardin et al (2010) Genome-wide association study of CNVs in 16,000 cases of eight common diseases and 3,000 shared controls Nature, 464 (7289), 713-720 19 F Zhang, W Gu, M E Hurles et al (2009) Copy number variation in human health, disease, and evolution Annu Rev Genomics Hum Genet, 10, 451-481 20 S J Gross, K Bajaj, D Garry et al (2011) Rapid and novel prenatal molecular assay for detecting aneuploidies and microdeletion syndromes Prenat Diagn, 31 (3), 259-266 21 J R Vermeesch, H Fiegler, N de Leeuw et al (2007) Guidelines for molecular karyotyping in constitutional genetic diagnosis Eur J Hum Genet, 15 (11), 1105-1114 22 F Vialard, G Simoni, A Aboura et al (2011) Prenatal BACs-on-Beads : a new technology for rapid detection of aneuploidies and microdeletions in prenatal diagnosis Prenat Diagn, 31 (5), 500-508 23 K W Choy, Y K Kwok, Y K Cheng et al (2014) Diagnostic accuracy of the BACs-on-Beads assay versus karyotyping for prenatal detection of chromosomal abnormalities: a retrospective consecutive case series Bjog, 121 (10), 1245-1252 24 S Garcia-Herrero, I Campos-Galindo, J A Martinez-Conejero et al (2014) BACs-on-Beads technology: a reliable test for rapid detection of aneuploidies and microdeletions in prenatal diagnosis Biomed Res Int, 2014, 590298 25 L G Shaffer, J Coppinger, S A Morton et al (2011) The development of a rapid assay for prenatal testing of common aneuploidies and microdeletion syndromes Prenat Diagn, 31 (8), 778-787 26 K L Sheath, L Duffy, P Asquith et al (2013) Bacterial artificial chromosomes (BACs)-on-Beads as a diagnostic platform for the rapid aneuploidy screening of products of conception Mol Med Rep, (2), 650-654 27 F Vialard, G Simoni, D M Gomes et al (2012) Prenatal BACs-onBeads: the prospective experience of five prenatal diagnosis laboratories Prenat Diagn, 32 (4), 329-335 28 B B Wang, C H Rubin and J Williams, 3rd (1993) Mosaicism in chorionic villus sampling: an analysis of incidence and chromosomes involved in 2612 consecutive cases Prenat Diagn, 13 (3), 179-190 29 Y K Cheng, C Wong, H K Wong et al (2013) The detection of mosaicism by prenatal BoBs Prenat Diagn, 33 (1), 42-49 30 L Boghosian-Sell, R Mewar, W Harrison et al (1994) Molecular mapping of the Edwards syndrome phenotype to two noncontiguous regions on chromosome 18 Am J Hum Genet, 55 (3), 476-483 31 M D Donaldson, E J Gault, K W Tan et al (2006) Optimising management in Turner syndrome: from infancy to adult transfer Arch Dis Child, 91 (6), 513-520 32 T J Wright, D O Ricke, K Denison et al (1997) A transcript map of the newly defined 165 kb Wolf-Hirschhorn syndrome critical region Hum Mol Genet, (2), 317-324 33 P C Mainardi, C Perfumo, A Cali et al (2001) Clinical and molecular characterisation of 80 patients with 5p deletion: genotype-phenotype correlation J Med Genet, 38 (3), 151-158 34 S Riedl, A Giedion, K Schweitzer et al (2004) Pronounced short stature in a girl with tricho-rhino-phalangeal syndrome II (TRPS II, Langer-Giedion syndrome) and growth hormone deficiency Am J Med Genet A, 131 (2), 200-203 35 C Mignon-Ravix, P Cacciagli, B El-Waly et al (2010) Deletion of YWHAE in a patient with periventricular heterotopias and pronounced corpus callosum hypoplasia J Med Genet, 47 (2), 132-136 36 A C Smith, L McGavran, J Robinson et al (1986) Interstitial deletion of (17)(p11.2p11.2) in nine patients Am J Med Genet, 24 (3), 393-414 37 E A Edelman, S Girirajan, B Finucane et al (2007) Gender, genotype, and phenotype differences in Smith-Magenis syndrome: a meta-analysis of 105 cases Clin Genet, 71 (6), 540-550 38 S Girirajan, C N Vlangos, B B Szomju et al (2006) Genotypephenotype correlation in Smith-Magenis syndrome: evidence that multiple genes in 17p11.2 contribute to the clinical spectrum Genet Med, (7), 417-427 39 A B Fomin, A C Pastorino, C A Kim et al (2010) DiGeorge Syndrome: a not so rare disease Clinics, 65 (9), 865-869 40 E Goldmuntz, D A Driscoll, B S Emanuel et al (2009) Evaluation of potential modifiers of the cardiac phenotype in the 22q11.2 deletion syndrome Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 85 (2), 125-129 41 A S Bassett, E W Chow, J Husted et al (2005) Clinical features of 78 adults with 22q11 Deletion Syndrome Am J Med Genet A, 138 (4), 307313 42 H Kawame, M Adachi, K Tachibana et al (2001) Graves' disease in patients with 22q11.2 deletion J Pediatr, 139 (6), 892-895 43 N Carelle-Calmels, P Saugier-Veber, F Girard-Lemaire et al (2009) Genetic compensation in a human genomic disorder N Engl J Med, 360 (12), 1211-1216 44 M Delio, T Guo, D M McDonald-McGinn et al (2013) Enhanced maternal origin of the 22q11.2 deletion in velocardiofacial and DiGeorge syndromes Am J Hum Genet, 92 (3), 439-447 ... đề tài: Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số hội chứng bất thường nhiễm sắc thể với hai mục tiêu: Hồn chỉnh quy trình BoBs để chẩn đốn số bất thường nhiễm sắc thể Đánh... HÀ NỘI NGUYỄN THỊ VÂN ANH NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT BOBS TRONG CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH MỘT SỐ HỘI CHỨNG BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ Chuyên ngành: Y sinh học - Di Truyền Mã số: NT 62726201 ĐỀ CƯƠNG... trị kỹ thuật BoBs chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tầm quan trọng chẩn đoán trước sinh Bất thường bẩm sinh (BTBS) hay gọi dị tật bẩm sinh rối loạn bẩm sinh