TÌM HIỂU PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ

PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ Tiểu luận nhóm 3: BỐ CỤC THUYẾT TRÌNH Lược sử phương pháp sắc kí 1 Phân loại 2 Các đại lượng ảnh hưởng 3 Những kĩ thuật sắc kí phổ biến 4 Lược sử phương pháp sắc kí • Nhà thực vật học người Nga Mikhai Tswett (1872- 1919) • Phát minh ra kĩ thuật sắc kí vào năm 1903 khi ông đang nghiên cứu về chlorophyll Định nghĩa Sắc ký: Sắc ký là một phương pháp tách hỗn hợp dựa vào sự phân bố khác nhau của chúng giữa hai pha động và tĩnh thành các thành phần để phân tích, nhận biết, tinh chế hoặc định lượng hỗn hợp hay các thành phần. tách • phân tích • nhận biết • tinh chế • định lượng Các thành phân cấu thành Hỗn hợp Phương pháp sắc ký dựa vào: -Sự phân bố khác nhau của các chất giữa hai pha động và tĩnh. -Có nhiều nguyên nhân đưa đến sự phân bố khác nhau của các chất, chính sự lặp đi lặp lại hiện tượng hấp phụ - phản hấp phụ của các chất khi dòng pha động chuyển động qua pha tĩnh là nguyên nhân chủ yếu của việc tách sắc ký. Hệ quả là các chất có ái lực lớn với pha tĩnh sẽ chuyển động chậm hơn qua hệ thống sắc ký so với các chất tương tác yếu hơn pha này. Nhờ đặc điểm này mà người ta có thể tách các chất qua quá trình sắc ký. Nguyên tắc hoạt động chung Ví dụ: Sắc Ký Giấy [...]... sự phân tán của cấu tử trong hai pha Những kĩ thuật sắc ký phổ biến A .Sắc lý lỏng (Liquid Chromatography-LC) B .Sắc ký khí (Gas Chromatography- GC) C .Sắc ký bản mỏng (Thin Layer Chromatography-TLC) D .Sắc ký giấy ( Paper Chromatography) E .Sắc ký trao đổi ion (Ion exchange chromatography) A .Sắc lý lỏng (Liquid Chromatography-LC) Định nghĩa sơ lược • Sắc kí lỏng là quá trình tách do ái lực khác nhau của... tải tới bộ phận ghi đo • 1 số dạng đầu dò như: Đầu dò UV Đầu dò huỳnh quang Kỹ Thuật Sắc Ký Lỏng Cao Áp (HPLC) • HPLC là một sắc ký cột đi kèm với một detector nhạy để có thể phát hiện được các chất tách ra trong quá trình chạy sắc ký • Với những tiến bộ kỹ thuật về cột, detector đã chuyển sắc ký cột thành phương pháp phân tích có tốc độ nhanh và hiệu suất cao • Loại này cần phải có hệ thống bơm cao... đó hai mũi sẽ nhọn hơn , cách này tiết kiệm • được thời gian phân tích và cho kết quả tốt hơn PHƯƠNG TRÌNH VAN DEEMTER • Phương trình Van Deemter ra đời bổ sung cho ,một số điểm của quá trình sắc ký theo lý thuyết đĩa chưa lột tả được các vấn đề ảnh hưởng bên trong cũng như bên ngoài của quá trình sắc ký • Phương trình Van Deemter sẽ mô tả ảnh hưởng của các quá trình này như sau: B H = H A + H B + H...Các đại lượng ảnh hưởng HỆ SỐ PHÂN BỐ • Trong phương pháp sắc kí,sự chuyển nồng độ chất phân tích X giữa pha động và pha tĩnh Cân bằng của một cấu tử trong hệ sắc kí có thể mô tả bằng phương trình đơn giản sau đây: Apha động Apha tĩnh • Hằng số cân bằng (1) còn được gọi là hằng số phân bố được tính như sau: C( • CS:nồng... lượngdung lượng ) số quan ' = t R − t Mgọi số chứa hệ số là một thông Hệ trọng được sử dụng trong sắc ký , được ký hiệu là K’ C S VS VS tR − tM K'= =K = C M VM • K tùy thuộc vào bản chất chất VM , pha t M và pha động.K’ còn tan tĩnh tùy thuộc vào các đặc tính của cột • tR và tM là các giá trị nhận được từ sắc ký đồ HỆ SỐ LỌC • Hệ số chọn lọc là một đại lượng đặc trưng cho khả năng tách của các cấu khác... môi có hằng số điện môi càng cao sẽ giải hấp càng kém Mô hình hệ thống máy sắc ký lỏng 1.Bộ phận tiêm mẫu • Dùng để đưa mẫu từ ngòai vào cột bằng kim bơm • Loop có tác dụng khi lấy mẫu đảm bảo lượng mẫu chuẩn và mẫu thật được đưa vào cột như nhau  Loop cần được tráng bằng chính dung dịch sắp phân tích 2.Cột sắc ký • Cột sắc kí có thể làm bằng vật liệu nhựa hoặc thép, chiều dài 20 cm, đường kính... Trong đó: N :Số đĩa lý thuyết của cột L:chiều dài của lớp chất nhồi trong cột H:chiều cao của đĩa lý thuyết W:bề rộng đáy mũi sắc ký W1/2:bề rộng đáy mũi sắc ký 1/2     2 α ĐỘ PHÂN GIẢI • Độ phân giải là đại lượng đặc trưng cho quá trình tách của các • chất ra khỏi nhau , ký hiệu là RS RS = t R2 − t R1 W1 + W2 2 • Mối liên hệ giữa RS , K’,N và qua công thức như sau : 1  α − 1  K 2  RS =  ... vấn đề này chúng ta suy ra rằng luôn lớn hơn 1 • Hệ số chọn lọc phụ thuộc vào bản chất của A,B,pha động và pha tĩnh LÝ THUYẾT ĐĨA MARTIN VÀ SYNGE • Được áp dụng cho quá trình sắc ký vào năm 1942.theo lý thuyết này ,cột sắc ký được xem như gồm nhiều phần nhỏ gọi là đĩa.trong mỗi đĩa ,cân bằng vật chất được thiết lập nhanh giữa pha động và pha tĩnh • Số đĩa được biểu diễn bởi hệ thức sau: 2 • • • •... hấp phụ bao gồm lực Van de Walls, lực cảm ứng, lực liên kết hóa học và lực liên kết hydrogen • Sắc ký lỏng xác định được rất nhiều loại cấu tử đặc biệt là các chất có khối lượng phân tử lớn Sắc kí lỏng hấp phụ được trên lí thuyết hấp phụ từ dung dịch Khái quát các yếu tố ảnh hưởng • Pha tĩnh : Pha tĩnh trong sắc kí lỏng thường ở thể rắn, có nhiều loại pha tĩnh khác nhau, tuỳ theo nhu cầu mà người ta... 4.Bộ phận tiêm mẫu 5.Cột sắc ký 6.Đầu dò 7 Bộ phận ghi tín hiệu và in kết quả: Bình đựng dung môi: • Tất cả các dung môi dùng cho HPLC đều phải là dung môi tinh khiết và có ghi rõ trên nhãn là dùng cho HPLC hay dung môi tinh khiết phân tích • Tất cả các hóa chất dùng để pha mẫu và pha hệ đệm phải được sử dụng là hóa chất tinh khiết phân tích Nhằm mục đích tránh hỏng cột sắc ký hay nhiễu đường nền, tạo . PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ Tiểu luận nhóm 3: BỐ CỤC THUYẾT TRÌNH Lược sử phương pháp sắc kí 1 Phân loại 2 Các đại lượng ảnh hưởng 3 Những kĩ thuật sắc kí phổ biến 4 Lược sử phương pháp sắc kí • Nhà. thuật sắc ký phổ biến A .Sắc lý lỏng (Liquid Chromatography-LC) B .Sắc ký khí (Gas Chromatography- GC) C .Sắc ký bản mỏng (Thin Layer Chromatography-TLC) D .Sắc ký giấy ( Paper Chromatography) E .Sắc. trình sắc ký. Nguyên tắc hoạt động chung Ví dụ: Sắc Ký Giấy