NGHIÊN cứu THÀNH PHẦN hóa học cây NIỆT GIÓ

Sự tăng cường thu mua niệt gió với số lượng lớn của các thương gia Trung Quốc (ước tính hàng vài chục tấn mặc dù đây chỉ là loài cây mọc hoang) khiến ta đặt ra câu hỏi tại sao? Niệt gió (Wikstroemia indica C.A.Mey.) thuộc họ Trầm (Thymelaeaceae) mọc hoang khắp nơi ở các vùng rừng núi nước ta. Trong dân gian, người ta sử dụng vỏ rễ và vỏ thân để chữa tuyến lâm ba kết hạch, hen suyễn, ho gà, viêm amidan, viêm tuyến mang tai; lá tươi đắp chữa đinh nhọt, sưng tấy, vết thương, rắn cắn 6, 9. Cho đến nay thế giới đã có một số công trình nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của niệt gió và phát hiện khả năng kháng HIVI, viêm gan B, chống sốt rét và ung thư

ĐẶT VẤN ĐỀ Điều kiện tự nhiên ưu đãi cho đất nước và con người Việt Nam một hệ sinh thái phong phú và đa dạng, có tiềm năng to lớn về tài nguyên cây thuốc. Theo ước đoán hệ thực vật ở Việt Nam có khoảng 12.000 loài, trong đó có 3.948 loài thực vật bậc cao, bậc thấp và nấm lớn được dùng làm thuốc [10]. Đó là nguồn tài nguyên quý chưa được khai thác hết tiềm năng. Cùng với đó, xu hướng sử dụng thuốc có nguồn gốc từ cây cỏ đã đặt ra yêu cầu cần phải đẩy mạnh nghiên cứu để tiêu chuẩn hóa nguồn dược liệu, bào chế các dạng thuốc mới từ thảo mộc đáp ứng nhu cầu chăm sóc sức khỏe của nhân dân. Sự tăng cường thu mua niệt gió với số lượng lớn của các thương gia Trung Quốc (ước tính hàng vài chục tấn mặc dù đây chỉ là loài cây mọc hoang) khiến ta đặt ra câu hỏi tại sao? Niệt gió (Wikstroemia indica C.A.Mey.) thuộc họ Trầm (Thymelaeaceae) mọc hoang khắp nơi ở các vùng rừng núi nước ta. Trong dân gian, người ta sử dụng vỏ rễ và vỏ thân để chữa tuyến lâm ba kết hạch, hen suyễn, ho gà, viêm amidan, viêm tuyến mang tai; lá tươi đắp chữa đinh nhọt, sưng tấy, vết thương, rắn cắn [6], [9]. Cho đến nay thế giới đã có một số công trình nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của niệt gió và phát hiện khả năng kháng HIV-I, viêm gan B, chống sốt rét và ung thư [5], [19], [33]. Mặc dù vậy ở nước ta có rất ít nghiên cứu về loài này. Do đó cần có những nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học của các bộ phận của cây niệt gió. Bước đầu, chúng tôi thực hiện đề tài: “Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học cây niệt gió (Wikstroemia indica C.A.Mey)”. Kết quả nghiên cứu này sẽ là cơ sở khoa học, tiền đề tạo ra chế phẩm thuốc hoặc thực phẩm chức năng hỗ trợ điều trị viêm đường hô hấp, lao, ung thư để đưa vào ứng dụng một nguồn dược liệu sẵn có ở nước ta Mục tiêu của đề tài: -Phân lập 3-5 chất từ cây niệt gió -Đào tạo cán bộ nghiên cứu mới -Đào tạo sinh viên đại học - Viết 1 bài báo trên tạp chí chuyên ngành Nội dung nghiên cứu: -Phân tính định tính các lớp chất - Chiết tách, phân lập các chất - Xác định cấu trúc hóa học các chất phân lập được 2 Chương 1. TỔNG QUAN 1.1 . THỰC VẬT HỌC 1.1.1. Vị trí phân loại Theo các tài liệu [4], [7], [10], cây niệt gió có vị trí phân loại như sau: Ngành: Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Bộ: Trầm (Thymelaeales) Họ: Trầm (Thymelaeaceae) Chi: Wikstroemia Endl. Loài: W. indica 1.1.2. Họ Trầm (Thymelaeaceae)  Đặc điểm thực vật: Cây bụi hoặc gỗ, ít khi là bụi nhỏ hay cỏ. Lá đơn, mọc cách hay đối, không có lá kèm, cuống lá thường phân đốt. Hoa lưỡng tính, không hiếm khi thành cụm hoa hình đầu, không có cánh hoa. Đặc trưng bởi lá đài thường hợp thành ống và thường có phần phụ (dạng cánh hoa hay dạng vảy) ở gần cọng đài. Nhị đẳng số (45) và đối diện với lá đài, nhưng thường thì chúng gấp đôi và xếp thành 2 vòng ở 2 mức khác nhau; đôi khi có triền tuyến mật quanh nhụy. Bộ nhụy gồm 2 -12 lá noãn, hợp thành bầu thượng 1 hoặc 2-5 (12) ô, mỗi ô chứa 1 noãn treo. Quả dạng mọng hay hạch đôi khi là quả nang [4].  Phân bố Có 50 chi / 650 loài ở hầu khắp thế giới trừ Bắc cực. Ở Việt Nam có 7 chi: Aquilaria, Daphne (Eriosolena), Edgeworthia, Enkleia, Linostoma, Rhamnoneuron, Wikstroemia và hơn 15 loài [4]. 1.1.3. Chi Wikstroemia Endl. Wikstroemia Endl. là một chi nhỏ gồm 55-70 loài cây bụi có hoa và cây nhỏ trong họ Thymelaeaceae. Ở Việt Nam, chi này có 7 loài: W. androsaemifolia, W. cochinchinensis, W. indica, W. dolichantha, W. meyeniana, W. nutans, W.poilanei [6]. 1.1.4. Cây niệt gió (Wikstroemia indica) Còn gọi là: Dó niết Ấn, dó cành, gió niệt, gió cánh, gió miết, gió tin thảo, sơn miên bì, địa ba ma, độc ngư đằng, gió cảnh. Tên khoa học: Wikstroemia indica (L.) C. A. Mey 3 Tên khác: Daphne cannabina Lour, Wikstroemia viridiflora Meisn., Wikstroemia indica var viridiflora Hook.f. [6], [7], [10].  Đặc điểm thực vật: Theo các tài liệu: [7], [39], [10], [6]: Niệt gió là cây bụi, mọc sum sê, quanh năm xanh tươi, cao 0,3-0,6m (1m), mang nhiều cành gầy, màu đỏ nhạt, nhiều khi mọc đối, có những sẹo lá nổ rõ lên. Lá mọc đối, phiến lá mỏng, hình trứng thuôn, dài 3-4cm, rộng 1- 2 cm, hai đầu tù hay hơi nhọn, hai mặt nhẵn, mặt trên màu lục sẫm, mặt dưới nhạt; cuống rất ngắn. Hoa màu vàng lục mọc thành chùm ở đầu cành hay thành bông rất ngắn (0,5-1cm). Cuống hoa dài 1-2mm. Đài màu xanh lá, hình ống hơi phình ở họng, chia 4 răng dài ngắn không đều; tràng 0; nhị 8, xếp thành 2 hàng dọc trên ống đài, chỉ nhị rất ngắn; bầu có 1 ô, có ít lông ở đỉnh. Quả mọng khi chín có màu đỏ tươi hình trứng, kèm theo vết tích của bao hoa, phần cơm hơi dầy. Hạt có vỏ mỏng và mềm, vỏ trong cứng và đen nhạt. Mùa hoa: tháng 5-9. Mùa quả: tháng 6-12.  Phân bố: Việt Nam: Mọc hoang khắp nơi núi rừng, bụi bờ nước ta, từ vùng núi thấp đến các tỉnh Trung du Bắc Bộ và Bắc Trung Bộ [7]. Thế giới: Mọc nhiều ở ngọn đồi, núi đá dốc, nơi có nhiều cây bụi, độ cao dưới 1500 m. Phân bố chủ yếu ở Phúc Kiến, Quảng Đông, Quảng Tây, Quý Châu, Hải Nam, Hồ Nam, Tứ Xuyên, Đài Loan, Vân Nam, Chiết Giang, Ấn Độ, Malaysia, Myanma, Philippin, Thái Lan, Việt Nam, Úc, quần đảo phía đông, nam Thái Bình Dương, Mauritius, Sri Lanka [39]. 1.2. THÀNH PHẦN HÓA HỌC Các nghiên cứu gần đây chỉ ra rằng W. indica có chứa các thành phần có hoạt tính sinh học phong phú bao gồm cả flavonoid, biflavonoid, coumarin, lignan, acid béo và polysaccharid. Trong đó thành phần hóa học đặc trưng của cây này là biflavonoid. 1.2.1. Flavonoid Chín flavonoid đã được phân lập từ W. indica và được xác định là: kaempferol-3- O-β-D-glucosid (1) [23]; 5,7,4'-trihydroxy-3',5'-dimethoxyflavon (2); 5-hydroxy-7, 4'- dimethoxyflavon (3) [27]; nicotiflorin (4); D-primeversyl genkwanin (5); quercitrin (6) [14]; thevetiaflavon (7) [23]; genkwanin (8); wikstroemin (9) [28] (hình 1.1), tricin (9a) [5] 4 R 1 R 2 R 3 R 4 R 5 R 6 R 7 (1) 3-O-β-D-glucosid OH OCH 3 H OH H H (2) H OH OH OCH 3 OH OCH 3 H (3) H OH OCH 3 H OCH 3 H H (4) 6-deoxy-α-L- manopyranosyl(1→6) -β-D-glucose OH OH H OH H H (5) H O-β-D-xylose (1→6)-β-D- glucose OCH 3 H OH H H (6) 6-deoxy- α -L-manopyranosyl OH OCH 3 H OH H H (7) H OCH 3 OH H OH H H (8) H OH OCH 3 H OH H H (9) H O-β-D-glucose (1→6)-β-D- glucose OCH 3 H OH H H (9a) H OH H OCH 3 OH OCH 3 OH Hình 1.1. Một số flavonoid phân lập từ niệt gió 1.2.2. Biflavonoid Biflavonoid là thành phần đặc trưng của W. indica. Các biflavonoid đã được phân lập từ W. indica là: sikokianin B (10); sikokianin A (10b), sikokianin C (11); Sikokianin D (11b) (từ dịch chiết n-buthanol của rễ W. indica) [15, 37]; wikstrol A (12); wikstrol B (13); genkwanol A (14); daphnodorin B (15) [7]. Gần đây các nhà khoa học đã phát hiện thêm ba biflavonoid là: 4'-methoxydaphnodorin E (16) [36]; 4'- methoxydaphnodorin D1 (17) và 4'-methoxydaphnodorin D2 (18) [35]. 5 10 11 10b 11b 12 13 14 15 Hình 1.2. Một số biflavonoid phân lập từ niệt gió 1. 2.3. Coumarin 6 Theo các tài liệu đã công bố, một số coumarin đã được phân lập ra từ W. indica bao gồm: umbelliferon (19); daphnoretin (20); daphnoretin-7-O-β-D-glucosid (21); 6'-hydroxy, 7-O-7'-dicoumarin (22) [13, 15, 4] và wikstrosin (23) [24]. Me H.K. cùng cộng sự (2007) cũng đã tìm thấy edgeworin (24), và daphnogitin (25) [20] có trong W. indica. R 1 R 2 R 3 R 4 (20) O-7- pyranocoumarin OCH 3 OH H (21) O-7- pyranocoumarin OCH 3 O-β-D-glucosid H (22) H H O-7-(6-OH)- Pyranocoumarin H (23) H H OH 6-(O-7-OH)- pyranocoumarin (24) O-7- pyranocoumarin H OH H (25) H O-7- pyranocoumarin OH H Hình 1.3. Một số coumarin phân lập từ niệt gió Trong đó, daphnoretin (20) được xem như thành phần chính trong tác dụng ức chế khối u và kháng virus của W. indica [28, 29]. 1.2.4. Lignan 7 (19) Lignan là một nhóm các hợp chất chuyển hóa thứ cấp thực vật. Từ phân đoạn ethyl acetat của W. indica, các nhà khoa học đã phân lập và xác định cấu trúc của bốn lignan epoxy là: matairesinol (26), wikstromol (27), arctigenin (28) và pinoresinol (29) [23]. Ngoài ra, các đồng phân: (+)-arctigenin, (+)-medioresinol (30) [20, 28] (+)-lariciresinol (31), (-)-secoisolariciresinol (32) [4] cũng đã được phân lập. 1.2.5. Acid béo Sử dụng phương pháp cất kéo hơi nước để chưng cất kết hợp với phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC-MS), các nhà khoa học đã xác định được dầu từ W. indica bao gồm 37 hợp chất với thành phần cấu tạo chủ yếu là acid hexadecanoic, acid 9-octadecenoic, acid 9,12-octadecadienoic, acid 9-hexadecenoic, acid pentadecanoic, acid dodecanoic và acid decanoic với tỉ lệ khối lượng tương ứng là 60,44%; 7,13%; 5,48%; 2,42%; 1,21%; 0,76% và 0,51% [17]. 1. 2.6. Các thành phần khác Ngoài các thành phần đã được nêu ở trên, nhiều thành phần khác cũng đã được phân lập từ W. indica đó là: +Sesquiterpen: Indecanon dưới dạng dầu không màu (33) [28], + Phytosterol: 7-oxo-β-sitosterol (34) [26], stigmastan-3,7-diol (35), stigmast-5 en- 3β,7α-diol (36), daucosterol (37) [13], + Anthraquinon: physcion (38), + Các chất nhóm acetanilid: asperglaucid (42) và anabellamid (43) [26] được phân lập từ phân đoạn ether dầu, + Polysaccharid: Các polysaccharid có trong W. indica cấu tạo từ glucose, arabinose, acid galacturonic, galactose và xylose [9], + Các chất khác: docosyl-3-methoxy-4-hydroxyferulat (39), hexacosoic-α-glycerid acid (40) và 4-(l,2,3-trihydroxypropyl)-2,6-dimethoxyphenyl-l-O-β-D-glucopyranosid (41) [13]. 8 26 28 27 29 38 36 37 Hình 1.4. Một số hợp chất khác phân lập từ niệt gió 1. 3. TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ TÁC DỤNG TRÊN LÂM SÀNG W.indica đã được chứng minh có nhiều tác dụng dược lý như kháng khuẩn, kháng virus, kháng viêm, ức chế khối u, chống sốt rét và chống dị ứng. 1.3.1. Tác dụng kháng khuẩn Nước sắc W. indica có hoạt tính kháng khuẩn phụ thuộc vào nồng độ, kháng lại 4 loại vi khuẩn thử nghiệm là Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Sarcina lutea với giá trị MIC tương ứng là 156, 78, 78 và 39 (mg/ml); giá trị MBC tương ứng là 312, 156, 156 và 78 (mg/ml) [28]. Khả năng kháng khuẩn của W. indica cũng được thể hiện rõ rệt ở chế phẩm chứa 4,01g bột thô [12]. 1.3.2. Tác dụng kháng virus 9 W. indica có tác dụng ức chế đáng kể trên một số virus như virus cúm, virus viêm gan B và HIV-1 [15], cao chiết từ W. indica có khả năng ức chế trực tiếp lên virus cúm (type 1) [25]. Arctigenin (28), và daphnoretin (20) trong niệt gió cho thấy tác dụng ức chế hoạt động của virus HIV-1 [15, 25]. Năm 1996, Chen và cộng sự đã chứng minh daphnoretin là chất hoạt hóa protein kinase C và có tác dụng ức chế mạnh lên virus hepatitis B (HBV) trong tế bào gan của người [11]. Các hợp chất 4'- methoxydaphnodorin E (16) và daphnoretin (20) có khả năng ức chế mạnh virus hợp bào hô hấp (RSV) với giá trị IC 50 tương ứng là 2,8 μg/ml [36] và 5,87 μg/ml [34]. 1.3.3. Tác dụng chống sốt rét Trong khảo sát in vitro sàng lọc các thảo dược có tác dụng chống sốt rét, cao chiết n- butanol từ rễ của W. indica cho thấy có tác dụng ức chế đáng kể ký sinh trùng sốt rét. Trong đó, hai biflavonoid là sikokianin B (10) và sikokianin C (11) có khả năng kháng lại các chủng Plasmodium falciparum kháng chloroquin với giá trị IC 50 tương ứng là 0,54 µg/ml và 0,56 µg/ml [15]. 1.3.4. Tác dụng chống viêm Nhiều nghiên cứu đã chứng minh W. indica có khả năng kháng viêm. Tác dụng này chủ yếu do sự có mặt của wikstroemin (9). Wikstroemin có thể ức chế rõ rệt sự phù nề và sưng tấy ở chuột. Khả năng kháng viêm của W. indica được thể hiện ở cả giai đoạn đầu và giai đoạn tăng sinh của quá trình viêm. Hơn nữa, wikstroemin cũng có thể làm giảm sản xuất acid acetic, chất gây ra phản ứng đau nhức ở chuột, mà không gây nghiện như các thuốc giảm đau thông thường [27]. W. indica dạng viên cho thấy có tác dụng chống viêm rõ rệt trên chuột cống ở liều 3,6 g/kg và 7,2 g/kg trọng lượng cơ thể, và trên chuột nhắt ở liều 15,0 g/kg trọng lượng cơ thể [12]. 1.3.5. Tác dụng ức chế khối u và tế bào ung thư Chen và cộng sự đã sử dụng dịch chiết nước, các phân đoạn khác nhau của dịch chiết ethanol 95% của W. indica, khảo nghiệm in vitro trên ba dòng tế bào ung thư (Hela, SGC- 7901, Bel-7402) để sàng lọc tác dụng ức chế khối u của W. indica. Kết quả cho thấy dịch chiết ethanol 95% có tác dụng ức chế mạnh mẽ trên các dòng tế bào ung thư. Trong đó, các phân đoạn ether dầu, chloroform và ethyl acetat của W. indica được xác định là có tác dụng gây độc tế bào [10]. Trong quá trình nghiên cứu sàng lọc, daphnoretin (20) được phát hiện là nhân tố chính trong tác dụng ức chế khối u của W. indica. Chất này cho thấy tác 10 dụng ức chế sự tăng trưởng của khối u và di căn. Thử nghiệm trên các dòng tế bào ung thư là AGZY-83-a, Hep2 và HepG2 daphnoretin từ W. indica có tác dụng ức chế khối u rõ rệt với giá trị IC 50 tương ứng là 8,73; 9,71 và 31,34 μg/ml. Quan sát dưới kính hiển vi cho thấy tỉ lệ sống sót của ba loại tế bào ung thư này giảm rõ rệt sau khi được điều trị bằng daphnoretin (10,30 μg/ml trong 72 giờ), đồng thời nồng độ canxi trong tế bào tăng lên rõ rệt (P <0,05). Sự ức chế của daphnoretin có thể liên quan đến quá tải canxi trong tế bào [29]. Nước sắc W. indica cho thấy tác dụng ức chế mạnh trên khối u sarcoma lymphotic (L- 1) dạng cổ trướng và khối u cổ trướng Ehrlich ở chuột với tỷ lệ tương ứng 45,4% và 97%. Dịch nước sắc này cũng ức chế rõ rệt tế bào ung thư cổ tử cung và ung thư bạch cầu trên chuột [18]. Các thành phần có hoạt tính sinh học như wikstroemin (9), matairesinol (26) và arctigenin (28) có tác dụng chống ung thư bạch cầu. Đồng thời, các flavonoid từ W. indica cũng có khả năng chống ung thư bạch cầu hiệu quả [15]. Các polysaccharid có trong W. indica có tác dụng kích thích rõ ràng đến tế bào tạo máu ở cả hai loại bình thường và mang khối u của chuột (làm tăng số lượng tủy xương GM-CFU-C). Ngoài ra, polysaccharid từ W. indica còn có tác dụng ngăn ngừa tác hại của tia bức xạ [9]. 1.3.6. Ảnh hưởng trên hệ sinh dục Các este diterpen từ Thymelaeaceae được đánh giá là có khả năng gây sảy thai [28]. Dịch chiết ether dầu từ rễ W.indica có tác dụng trên cơ quan sinh sản khi thí nghiệm trên chuột, chó và khỉ. Liều có tác dụng tương ứng là từ 50-100; 0,5 và 0,05-0,06 mg/kg. Không có thay đổi bất thường nào được phát hiện trong trọng lượng cơ thể, mức thẩm thấu hồng cầu cũng như chức năng gan, thận của các động vật được thí nghiệm. Cũng theo thí nghiệm trên, stigmast-5-en-3β,7α-diol (36) được xác định là thành phần có thể gây sảy thai khi mang thai trong ba tháng giữa của thai kỳ [32]. 1.3.7. Thúc đẩy ung thư Mặc dù nhiều thành phần trong W. indica có hoạt tính ức chế khối u, một số chất lại có khả năng thúc đẩy sự phát triển của khối u. Dịch chiết ether của W. indica gây cảm ứng trên kháng nguyên sớm của virus Epstein-Barr (EB) và thúc đẩy sự đột biến các tế bào lympho gây ra bởi virus EB [31]. Dịch chiết nước cũng có tác dụng thúc đẩy ung thư biểu 11 [...]... Anh Tuấn, Nguyễn Văn Tuyến, Bùi Kim Anh (2006), “Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học cây niệt gió (Wikstroemia indica (L.) C.A.Mey, Thymelaeceae) ”, Tạp chí Hóa học, tập 45, số 3/2007, tr 310-314 5 Trần Văn Thùy, Dương Anh Tuấn, Nguyễn Văn Tuyến, Bùi Kim Anh (2006), Nghiên cứu tác dụng sinh học của một số chất phân lập được từ cây niệt gió (Wikstroemia indica (L.) C.A.Mey Thymelaeceae) của Việt... những tác dụng sinh học rất đáng quan tâm là khả năng kháng HIV-I, viêm gan B, chống sốt rét và ung thư Tuy nhiên, ở một khía cạnh khác, có nghiên cứu chỉ ra rằng niệt gió làm thúc đẩy ung thư Vì vậy, việc nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học và tác dụng sinh học của các bộ phận trong cây niệt gió ở Việt Nam là một việc làm cần thiết để làm sáng tỏ tiềm năng và giá trị làm thuốc của cây thuốc quý này... TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ 2.1.1 Nguyên liệu 13 - Mẫu nghiên cứu là thân rễ của cây niệt gió được thu hái vào tháng 5/2011 tại Bắc Giang Mẫu cây được lưu tiêu bản tại Khoa Tài nguyên dược liệu – Viện dược liệu và đã được ThS Nguyễn Quỳnh Nga thẩm định và kết luận tên khoa học là Wikstroemia indica C.A Mey thuộc họ Trầm (Thymelaeaceae) - Thân cây niệt gió được phơi khô,... thân rễ niệt gió 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Bằng phản ứng hóa học ta đã xác định trong thân rễ cây niệt gió có flavonoid, coumarin, acid hữu cơ, đường khử, acid amin, anthranoid, polysaccharid, hợp chất steroid, không chứa alcaloid, glycosid tim, saponin, tannin, chất béo Đã điều chế các phần chiết từ thân rễ cây niệt gió theo độ phân cực của dung môi như, nhexan (WIH) với hiệu suất là 0,59%; phần chiết... 60 81,69 Ở Việt Nam, niệt gió là loài cây mọc hoang khắp nơi núi rừng, bụi bờ nước ta, từ vùng núi thấp đến trung du các tỉnh Trung du Bắc Bộ và Trung Bộ [3] Tuy vậy, loài cây này vẫn chưa được quan tâm nghiên cứu nhiều Trên thế giới, tác dụng của niệt gió đã được nghiên cứu, chứng minh và áp dụng trong điều trị nhiều loại bệnh khác nhau Một số chất và nhóm chất có trong niệt gió như flavonoid, biflavonoid,... phân lập từ thân rễ niệt gió Sẽ tiếp tục phân lập các phần chiết khác của cây niệt gió (ethyl acetat, n-butanol), nhận dạng cấu trúc các chất phân lập được, hướng dẫn sinh viên làm khóa luận tốt nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO 1 Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, NXB KHKT, tr 875 2 Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam II, NXB Trẻ Hồ Chí Minh, tr 36-4 3 Đỗ Tất Lợi (1999), Cây thuốc và vị thuốc... dương tính rõ, (+++) dương tính rất rõ Nhận xét: Kết quả định tính bằng phản ứng hóa học ta thấy thân cây Niệt gió có chứa flavonoid, coumarin, acid hữu cơ, đường khử, acid amin, anthranoid, polysaccharid, hợp chất steroid và không chứa alcaloid, glycosid tim, saponin, tannin, chất béo 3.2 Điều chế các phần chiết từ cây niệt gió 3 kg dược liệu khô được ngâm với cồn 90% ở nhiệt độ phòng (3 lần, mỗi lần... tách được từ thân cây niệt gió: Sử dụng các phương pháp phân tích phổ thích hợp, kết hợp với tham khảo cơ sở dữ liệu phổ đã công bố: - Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, phổ DEPT, kết hợp với các phổ hai chiều HMBC, HSQC - Phổ IR - So sánh SKLM với chất đối chiếu trong cùng điều kiện 15 Chương 3 THỰC NGHIỆM 3.1 Định tính các nhóm chất hữu cơ bằng phản ứng hóa học Thân cây niệt gió được chiết... công thức máu sau khi cho uống thuốc viên với W indica 18,1 g/kg và 36,2 g/kg trong 30 ngày [19] 1.3.9 Ứng dụng lâm sàng Theo YHCT: Niệt gió có vị đắng, cay, tính hơi lạnh; có tác dụng tán kết tiêu sưng, thanh nhiệt giải độc, tán ứ trục thuỷ Cây có độc [1, 3] Cây niệt gió đã được sử dụng ở nhiều nước phương Đông như Việt Nam, Ấn Độ, đặc biệt là ở Trung Quốc… [1, 6, 28] để điều trị một số bệnh như:... ứng mở đóng vòng lacton, phản ứng Diazo hóa - Định tính tanin: Phản ứng với dd FeCl3 5%, chì acetat 10%, dung dịch gelatin1% - Định tính anthranoid: Phản ứng Borntrager - Và định tính một số nhóm chất khác: Acid hữu cơ, đường khử, chất béo, hợp chất steroid, acid amin Bảng 3.1 Kết quả định tính các nhóm chất hữu cơ trong thân cây niệt gió bằng phản ứng hóa học TT Nhóm chất Phản ứng định tính Kết quả . nghiên cứu về loài này. Do đó cần có những nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học của các bộ phận của cây niệt gió. Bước đầu, chúng tôi thực hiện đề tài: “Bước đầu nghiên. chúng tôi thực hiện đề tài: “Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học cây niệt gió (Wikstroemia indica C.A.Mey)”. Kết quả nghiên cứu này sẽ là cơ sở khoa học, tiền đề tạo ra chế phẩm thuốc hoặc thực. trình nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của niệt gió và phát hiện khả năng kháng HIV-I, viêm gan B, chống sốt rét và ung thư [5], [19], [33]. Mặc dù vậy ở nước ta có rất ít nghiên