Các quá trình và thiết bị công nghệ sinh học công nghiệp part 10 pdf

319 Dáy chuưn bao gäưm bäü âënh lỉåüng sn pháøm tỉû âäüng 1, cå cáúu cáúp liãûu mng mng 2, bäü tảo äúng 3, mạy hn mäúi dc ca äúng 4, cọ cå cáúu càng äúng 5, mạy hn âạy v nàõp gọi 6, cå cáúu càõt tụi 7, cáưu chuøn âãø ti häüp räùng 8, cå cáúu âãø âàût gọi thnh pháøm vo häüp 9, cå cáúu nẹn âäi cạc tụi vo cạc häüp 10,11, mạy tỉû âäüng ghẹp nàõp 12, bäü âo häüp 13 v mạy dạn nhn 14. Nhåì cå cáúu cáúp liãûu mng mng m bàng polietylen cọ rulä chuøn âãún bäü tảo äúng räưi bao ph láúy äúng. Vç bãư räüng ca bàng låïn hån chu vi ca äúng 20 mm cho nãn pháưn cháûp âỉåü c tảo thnh âãø hn mäúi dc ca gọi. Âãø lm càng mng theo äúng, måí cå cáúu thạo dåỵ rulä âãø âm bo mng khäng bë âỉït. Sau âọ tiãún hnh hn cạc mäúi bàòng m càûp dc, khi hn m càûp ẹp vo mng äúng. Âäưng thåìi gọi bë ẹp lải båíi hai m kẻp ca cå cáúu hn. Sau âọ dng dao trãn ca cå cáúu càõt âãø càõt tụi dỉåïi. Dng phỉång phạp xung lỉåüng nhiãût âãø hn. Hçnh 14.12. Så âäư ca dáy chuưn tỉû âäüng âënh lỉåüng phán chia bao gọi Nảp sn pháøm vo äúng lm bàòng mng polyetylen â âỉåüc hn tỉì bäü âënh lỉåüng 1. Sau khi kãút thục hn m càûp dc nh ra. ÄÚng âỉåüc hn cng sn pháøm hả xúng dỉåïi nhåì cạc bàng ti kẹo ca cå cáúu hả äúng 5 xúng mäüt khong bàòng chiãưu di ca gọi, sau 320 õoù haỡn goùi, cừt goùi dổồùi, naỷp saớn phỏứm cho goùi tióỳp theo. Goùi õổỷng õỏửy saớn phỏứm rồi xuọỳng họỹp kim loaỷi qua phóựu nhỏỷn nũm trong bng taới xung cuớa cồ cỏỳu xóỳp. Naỷp caùc họỹp kim loaỷi rọựng tồùi bng taới xung õổồỹc tióỳn haỡnh bũng phổồng phaùp gaỷt họỹp qua cỏửu chuyóứn. Tổỡ bng taới xung cuớa cồ cỏỳu xóỳp họỹp, caùc goùi õổồỹc chuyóứn õóỳn bng taới kióứu tỏỳm cuớa maùy gheùp mờ tổỷ õọỹng õóứ gheùp õaùy vaỡ chuyóứn õóỳn maùy daùn nhaợn qua maùy lỏỷt họỹp. Họỹp õổồỹc õổa vaỡo maùy daùn nhaợn ồớ vở trờ nũm ngang rọửi daùn voỡng troỡn vaỡ taới họỹp tồùi maùng nghióng cuớa maùy daù n nhaợn. Sau õoù họỹp theo bng taới vaỡo kho thaỡnh phỏứm. ỷc tờnh kyợ thuỏỷt cuớa dỏy chuyóửn tổỷ õọỹng õởnh lổồỹng phỏn chia bao goùi: Nng suỏỳt, goùi/h : 480 Khọỳi lổồỹng mọỹt lỏửn õởnh lổồỹng, kg: 0,4 ữ 0,5 Phổồng phaùp õởnh lổồỹng: cỏn ọỹ chờnh xaùc õởnh lổồỹng, %: 1 so vồùi lióửu lổồỹng õởnh mổùc Cọng suỏỳt thióỳt kóỳ cuớa õọỹng cồ, kW: 9,16 Kờch thổồùc cồ baớn, mm: 6820ì2370ì3210 Khọỳi lổồỹng, kg: 4850. 321 Chỉång 15 MẠY ÂIÃÛN DI Mạy âiãûn di dng âãø phạt hiãûn v xạc âënh ADN trong tãú bo vi sinh váût, thỉûc váût v âäüng váût. 15.1. AXIT DEOXYRIBONUCLEIC (ADN) V NGUN TÀÕC XẠC ÂËNH Gen l âån vë di truưn cå bn. Nọ l mäüt âoản ADN (âäi khi ARN) m hoạ thäng tin cho viãûc täøng håüp sn pháøm sinh hc xạc âënh (ch úu l protein). Nhỉỵng nghiãn cỉïu hiãûn âải vãư cáúu trục v chỉïc nàng ca ngun sinh cháút â måí ra nhỉỵng hiãøu biãút måïi vãư cáúu tảo v chỉïc nàng hoảt âäüng ca tãú bo. Cáúu trục ADN cho phẹp gii thêch tải sao lải cọ kh nàng tng trỉỵ v di truưn thäng tin tỉì thãú hãû ny sang thãú hãû khạc mäüt cạch äøn âënh v bàòng cạch no nọ thäng tin di tuưn åí dảng thỉï tỉû sàõp xãúp cạc gäúc nucleotit lải chuøn hoạ thnh phán tỉí protein chỉïc nàng. Näüi dung nãu trãn liãn quan âãún giạo l trung tám ca di truưn phán tỉí gäưm 3 âiãøm chênh: sao chẹp thäng tin di truưn tỉì ADN bäú mẻ sang ADN con cại, chuøn âäøi m di truưn tỉì ADN sang ARN - quạ trçnh phiãn m (transcription) v dëch m di truưn (translation) - thäng tin di truưn tỉì mARN âỉåüc chuøn sang trçnh tỉû sàõp xãúp âàûc hiãûu ca axit amin trong phán tỉí protein. Cäng nghãû ADN tại täø håüp - hiãûn l nãưn tng cho sỉû phạt triãøn nhỉ v bo ca ngnh cäng nghãû sinh hc hiãûn âải. Cạc phỉång phạp phán têch v täøng håüp hiãûn âải l tạch DNA, xạc âënh thỉï tỉû, täøng håüp, gàõn xen nọ vo vë trê nháút âënh bãn trong såüi ADN khạc âãø nhán lãn, v räưi lải tạch ra. Hiãûn nay hon ton cọ thãø nháûn biãút chênh xạc nhỉỵng âoản ADN âàûc hiãûu qua cháøn âoạn cạc bãûnh âàûc biãût. Âäúi våïi cạc bãûnh khi cạc gel chỉa âỉåüc xạc âënh thç viãûc cháøn âoạn kẹm chênh xạc. Mäüt bäü d tçm âån gin chè l mäüt khục ADN (hồûc ARN) cọ thãø tçm khục bäø sung våïi nọ bàòng cạch lai (hybridization). Cọ thãø phạt hiãûn sỉû bàõt càûp ny bàòng nhiãưu cạch, nhỉng phäø biãún nháút l sỉí dủng phỉång phạp tỉû chủp phọng xả våïi bäü d tçm cọ 32p (hçnh 15.1). 322 Viãûc lai bäü d tçm ADN våïi âoản ADN tạch råìi gi l Southern Blotting âỉåüc mä t trãn hçnh 15.1. Cạc âoản ADN hçnh thnh sau khi ADN bë endonucleaza restrictaza càõt s âỉåüc tạch råìi ra bàòng phỉång phạp âiãûn di trãn gel agaroza. Khong cạch di chuøn phủ thüc vo kêch thỉåïc âoản. Cng nh chảy cng nhanh. Sau khi â tạch råìi, ngỉåìi ta dng kiãưm âãø lm biãún tênh cạc âoản âọ v chuøn chụng lãn mng nylon. Táúm mng ny âỉåüc våïi dung dëch cọ cháút d tçm cháút phọng xả, nọ chè lai våïi cạc âoản ADN no chỉïa thỉï tỉû bäø sung. Viãûc xạc âënh thỉï tỉû ARN (vê dủ mARN) cng cọ thãø theo trçnh tỉû tạch bàòng âiãûn di ARN trãn gel, chuøn lãn mng nylon v cho lai våïi ADN probe âàûc hiãûu. Phỉång pha ïp ny gi l Northern Blotting. Hçnh 15.1. Lai “bäü d tçm” våïi âoản ADN, tạch ra bàòng âiãûn di v chuøn sang táúm nylon (Southern blotting) 15.2. CÁÚU TRỤC CA MẠY ÂIÃÛN DI Mạy âiãûn di gäưm ba bäü pháûn cå bn: khay váûn hnh (hçnh 15.2), nàõp cọ âiãûn thãú cao v bưng gim xäúc. N hỉỵng âoản ADN s au khi càõt bàòng endonucleasa Tạch âiãûn di trãn gel agarosa B iãún tênh bàòng kiãưm âãø tạch såüi trung ho Cạc âoản AD N tạch ra theo kêch thỉåïc Vë trê âoản ADN chỉïa thỉ tỉû tỉång âäưng probe nhán dng  ënh vë A DN bàòng tia UV U Í vãût cọ ADN nhán dng såüi âån v cọ gàõn p họng xả R ỉía v s ỉû chủp p họng xảû P h bàòng mng nylon 323 Khay váûn hnh bao gäưm khn âục gel, khay di âäüng trong sút v bt âãûm bàòng caosu. Chøn bë khn gel nhỉ sau: lọt miãúng bt âãûm vo âạy khay di âäüng v sau âọ áún mảnh miãúng âãûm vo cảnh khay (ẹp cho âạy khay di âäüng lt hon ton vo khay khn trỉåïc khi hn kên vo miãúng bt). Trãn nàõp cọ âáưu ra ca m mu, âỉåüc näúi våïi ngưn âiãûn qua âiãûn cỉûc trãn âãú mạy (hçnh 15.3). Bưng gim xäúc cọ äúng näúi âiãûn cỉûc, bủc di chuøn v läù nảp etylen glycol / nỉåïc våïi t lãû 50/50 (hçnh 15.4). Ä Ú ng näúi âiãûn cỉûc B ủc di chuøn (häù tråü khay váûn hnh) N åi (läù) nảp 50/50 etylen g lycol / nỉåïc vo H çnh 15.4. B ưng gim xäúc H çnh 15.2. Khay váûn hnh UV khay di âäüng trong sút Miãúng bt âãûm K hn âục ge l M mu âáưu ra näúi âiãûn cỉûc trãn âãú mạy våïi ngưn âiãûn N àõp thiãút bë H çnh 15.3. Nàõp cọ âiãûn thãú cao 324 15.3. CU TRUẽC VN HAèNH 15.3.1. Chuỏứn bở dung dởch - Chuỏứn bở 250 ml dung dởch õóỷm. Hai dung dởch õóỷm õổồỹc sổớ duỷng phọứ bióỳn cho õióỷn di ADN õổồỹc chuỏứn bở theo cọng thổùc pha chóỳ dổồùi õỏy. 1. 10X Tris- borate-EDTA. Nguọửn cung cỏỳp chỏỳt õóỷm: (0,89 M tris; 0,89 M axit boric; 20 mM EDTA; pH- 8,2; 1000 ml) Tris base(FW 121.1): 0,89 M 108, 0g Axit boric (FW61.8): 0,89M 55,0 g Dung dởch EDTA: (0,5M; pH 8,0) 0,02M 40,0 ml Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 1000,0 ml pH luọn luọn giổợ ồớ 8,2 Trổồùc khi sổớ duỷng vồùi dung dởch loaợng 0,5 X vồùi 45 mM base tris; 45 mM axit boric vaỡ 1 mM EDTA thổồỡng duỡng pha loaợng bồới vỗ nổồùc coù nhióỷt õọỹ thỏỳp 1X vồùi 89 mM base tris; 89 mM axit boric vaỡ 2 mM EDTA. 2. 10X Tris- acetate -EDTA Cung cỏỳp cho chỏỳt õóỷm (0,4 M tris; 0,2 M axit axetic; 10 mM EDTA; pH- 8,4; 1000 ml) Tris base(FW 121.1): 0,40 M 48,8 g Axit axetic (99,5%): 0,20 M 114,1 ml Dung dởch EDTA (0,5M; pH 0,8): 0,01M 20,0 ml Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 1000,0 ml Khuỏỳy õóửu õổỡng laỡm giaớm pH. Pha loaợng tồùi 1X trổồùc khi sổớ duỷng tồùi 40 mM base tris; 20 mM axit axetic vaỡ 1 mM EDTA. 3. Dung dởch EDTA (etylen diamin tetraaxetic axit): (0,5M; pH 8,0; 100 ml) Na 2 EDTA.2H 2 O; (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 70,0 ml NaOH (10M) tồùi pH 8,0 5,0 ml Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 100,0 ml - Chuỏứn bở bọỹ õóỷm taới mỏựu. óứ chuỏứn bở bọỹ õóỷm mỏựu cỏửn chuỏứn bở mỏựu õóỷm thổớ (dung dởch mỏựu) vaỡ bọỹ lổồỹc coù dung tờch khaùc nhau. Mỏựu õóỷm thổớ Dung dởch mỏựu (5X; 25% ficoll 400; 25% phenol bromua xanh; 10 ml) 325 Nỉåïc â âỉåüc khỉí ion hoạ: 7,0 ml Ficoll 400: 2,5 mg Phenol bromua xanh (F 691,9): 25,0 mg Nỉåïc â âỉåüc khỉí ion hoạ: 10,0 ml Chụ 1: Sucroza v glyxerol cọ thãø sỉí dủng âãø thay thãú cho ficoll 400. Chụ 2: Xylen cyanol (0,25 %) m di chuøn cháûm hån phenol bromua xanh, thç cọ thãø tàng thãm mäüt lỉåüng nãúu mong mún, sỉû cä cản dung dëch agaroza âỉåüc xạc âënh khi thãm vo cọ liãn quan âãún polynucleotit. Thãø têch bãøø Bng 15.1. Nhỉỵng loải lỉåüc M säú lỉåüc Bãư dy, mm Âäü räüng, mm Dung têch Âäü sáu 80 - 6051 - 88 1 prep/2 ref 1,0 44/6 44/6 * 80 - 6052 - 07 1 prep/2 ref 1,5 44/6 66/9 * 80 - 6051 - 50 8 1,0 6,5 6,5 80 - 6051 - 69 8 1,5 6,5 9,7 80 - 6050 - 74 12 1,0 3,9 3,9 80 - 6050 - 93 12 1,5 3,9 5,8 80 - 6051 - 12 16 1,0 2,6 2,6 80 - 6050 - 31 16 1,5 2,6 3,9 - Chøn bë khong 7 ml dung dëch agaroza ỉïng våïi mäùi mililit chiãưu dy gel (vê dủ 1 gel 3 mm cáưn 0,3×7×10 = 21 ml). Ho tan agaroza trong dung dëch âãûm , âiãưu chènh nhiãût âäü häùn håüp. Cho phẹp lm mạt dung dëch âãún 50 0 C trỉåïc khi rọt vo khn. Âãø quan sạt sỉû phán ly trong hiãûn tỉåüng âiãûn chuøn thỉåìng thãm 0,5 mg/ml etydi bromua vo dung dëch gel. 15.3.2. Âục gel - Thiãút bë âàût khay di âäüng: Mäüt tay giỉỵ chàût khn âục, tay kia âàût âáưu khay di âäüng ạp vo miãûng bt âãûm v sau âọ hả tháúp räưi âàût lãn âoản cúi ca khn âục. Âàût âáưu cn lải ca khay ạp sạt miãûng bt âãûm. - Chøn bë lỉåüc: Làõp hai rnh trong lỉåüc vo giỉỵa nhỉỵng âáưu äúc v màût sau lỉåüc. Siãút chàût äúc. Âàût lỉåüc vo mẹp khn v chènh pháưn cúi ca lỉåüc âãø cạch khay di âäüng khong 1 mm. Siãút chàût äúc âãø giỉỵ chàõc lỉåüc. - Di chuøn lỉåüc: Âàût khn làõp rạp lãn màût phàóng nàòm ngang. Âàût äúng nivä lãn khay di âäüng, nọ nhỉ thiãút bë kiãøm tra xem khn cọ âụng vë trê nàòm ngang khäng. 326 Hçnh 15.5. Màût sau lỉåüc, làõp trãn vnh ca khn âục, vë trê lỉåüc trong gel. Hai äúc hiãûu chènh lỉåüc. Âãø tảo hai rnh, âàût lỉåüc thỉï hai vo giỉỵa gel - Âäø dung dëch agaroza (âỉåüc lm lảnh âãún 50 0 C) vo khn âục. Âënh hỉåïng lỉåüc âãø cạc bãư màût lỉåüc gáưn miãúng âãûm bt nháút v âàût nọ lãn cảnh khay. Lỉåüc ln ln åí vo vë trê thàóng âỉïng âãø trạnh sỉû vàûn vẻo hçnh dảng. Âãø chảy lỉåüng máùu gáúp 2 láưn, âàût lỉåüc thỉï hai vo chênh giỉỵa khay. Cho phẹp thåìi gian täúi thiãøu âãø gel âàûc lải l 30 phụt. - Khi gel â kãút lải, láưn lỉåüt thạo lỉåüc cáøn tháûn. Nháúc mäüt pháưn v nghiãng nhẻ mäüt âáưu ca lỉåüc, sau âọ rụt tỉì tỉì ra khi gel (kẹo thàóng lỉåüc, tảo ra mäüt khong khäng âãø cọ thãø nháúc gel ra khi khay). - Thạo khay di âäüng v gel bàòng cạch nàõm láúy tay cáưm ca khay, áún âáưu ạp vo miãúng bt âãûm. Khi khay â sảch âãûm thç nháúc ra. Chuøn khay v gel tåïi chäù mạt. 15.3.3. Váûn hnh âiãûn di 1. Lm lảnh nãưn trỉåïc khi tiãún hnh, âàûc biãût khi dng âiãûn ạp cao hån hồûc khi sỉû phán ly quy âënh trãn 30 phụt. Chụ ï: Âãø tiãún hnh phán ly, hồûc l thãm 0,5 mg/ml etydi bromua vo dung dëch âãûm hồûc thãm 50 mg/ml etydi bromua vo bäü âãûm máùu. Âãø quan sạt, hy càõt âiãûn, thạo pháưn nàõp v giỉỵ ân cỉûc têm gáưn gel. Thãm tỉì tỉì etydi bromua vo dung dëch âãûm hay âãûm máùu. Phạt hiãûn bàòng phỉång phạp ny khäng nhảy bàòng cạch nhüm mu v nhçn qua thiãút bë soi. 2. Âäø dung dëch vo cạc khoang sao cho âãún khi âãûm cao hån gel khong 1 mm (khong 220 ml). 3. Nảp máù u. Thãm máùu vo 5X bäü âãûm ti máùu v träün (1/5 thãø têch l âãûm nảp vo). Sỉí dủng micropipet âãø nảp máùu, chụ trạnh âám thng hồûc tảo nãn nhiãưu bong bọng. 4. Âàût nàõp âãø catot (−, dáy âen) åí âoản cúi gáưn máùu nháút. (Máùu axit nucleic di chuøn vãư phêa anät, +, dáy â). Näúi cạc dáy mu (â våïi â, âen våïi âen) tåïi cạc ngưn âiãûn, nhỉ l ESP 2A200. Âàût mỉïc âiãûn ạp v thiãút bë báúm giåì (nãúu cọ sàơn) theo mỉïc âäü phán ly. Màût sau lỉåüc ÄÚc (2) L ỉåüc 327 Nhanh, âiãûn ạp cao Nhỉỵng ỉïng dủng no âọ, nhỉ l kiãøm tra cạc máùu, cọ thãø thỉûc hiãûn nhanh dỉåïi âiãưu kiãûn âiãûn ạp cao. Lm lảnh (−20 0 C ) v giåïi hản thåìi gian váûn hnh 5 phụt hồûc êt hån åí âiãûn ạp 500 V. Cháûm hån, âiãûn ạp cao hån Mäüt gradient âiãûn ạp 12V/cm (150V) trong 30 ÷ 40 phụt (sỉí dủng dung dëch âãûm 1% gel agaroza v 0,5 X TBE) càõt Hind III ca lamda ADN thnh cạc âoản 0,1 ÷ 23 kb. Hồûc, dng dung dëch nhỉ váûy, máùu ny cọ thãø chảy åí 24 V/cm (300V) thç cọ thãø phán càõt trong 20 ÷ 30 phụt. Lm lảnh thiãút bë trỉåïc khi tiãún hnh. Chụ : - Nãúu khäng âäø thãm mu vo cháút lng lm ngüi thç âàût trãn nãưn täúi âãø quan sạt dãù dng hån. - Âàût thiãút bë cn nọng lãn nãưn âỉåüc lm lảnh cọ thãø nh hỉåíng âãún nhiãût âäü xung quanh. Nãúu sỉû quạ nhiãût khäng âỉåü c kiãøm soạt, gel s tan hồûc thiãút bë s cong. - Etydi bromua l cháút àn da mảnh, nãn cáưn mang bao tay. - Âeo kênh chàõn tia UV v bo vãû da khi sỉí dủng ân UV. - Tênh gradient âiãûn ạp, chia âiãûn ạp âàût vo cho khong cạch giỉỵa cạc cỉûc 12,7 cm. Bng 15.2. Âiãûn ạp âàût vo v thåìi gian âãư nghë (1) Âiãûn ạp, V Gradient, V/cm Thåìi gian, phụt 500 40 5 (1) 400 31 10 (1) 300 24 20 (1) 200 16 30 ÷ 40 150 12 30 ÷ 60 Ghi chụ: (1) Âãø thåìi gian chảy êt hån hồûc bàòng 20 phụt, sỉí dủng 0,5X TBE v lm lảnh nãưn âãún −20 0 C trỉåïc khi sỉí dủng. Sau khi phán ly 1- Ngàõt âiãûn, thạo dáy dáùn, thạo nàõp. 2- Nãúu khäng thãm etydi bromua vo gel hồûc máùu trỉåïc khi chảy, nhüm gel trong dung dëch 0,5 ÷ 1 mg/ml etydi bromua trong nỉåïc hồûc âãûm. 3- Lm sảch thiãút bë. 328 Váûn hnh Cạc loải gel agaroza âỉåüc chøn bë láưn âáưu trong khn âục gel. Nhỉỵng máùu âỉåüc nảp vo trong cạc bãø chỉïa v âỉåüc phán ly. Thúc nhüm hunh quang C 12 H 20 BrN 3 cọ thãø âỉåüc thãm vo cháút âãûm âiãûn di hồûc gel hồûc c hai âãø tçm ra dáúu hiãûu ca quạ trçnh phán ly. Sau khi âiãûn di, gel cọ thãø cho mu, ghi lải mu, tháúm mu thãm hồûc sáúy tỉû âäüng. - Âäø âáưy läù våïi cháút ti lảnh. D khäng lm lảnh âi nỉỵa thç âiãưu quan trng l phi âäø âáưy läù våïi dung dëch lm lảnh âàûc trỉng trỉåïc khi sỉí dủng vç dung dëch cung cáúp ngưn nhiãût cáưn thiãút. Chøn bë 600 ml våïi 50/50 C 2 H 2 (OH) 2 /H 2 O - Âãø giụp xem cạc bãø chỉïa âỉåüc r rng hån trong khi nảp máùu, thãm 1 hồûc 2 git thúc nhüm ho tan hồûc mu thỉûc pháøm vo dung dëch lm lảnh. Tçm ra hai läù hng nảp nỉåïc åí pháưn trãn ca läù. Âäø âáưy läù hng âãún mỉïc cọ thãø nhỉ cháút lm lảnh bàòng äúng phun hồûc mạy båm våïi 50 ml. Báúm nụt caosu mu náu vo mäùi läù. - Sàõp xãúp dung dëch â chøn bë trong thng âạ hồûc bãn trong mạy lảnh hồûc t lảnh âãø khäng dỉåïi 20 0 C trong khong 1 giåì trỉåïc khi sỉí dủng (hoạ cháút âỉåüc dỉû trỉỵ trong phng lảnh hay t lảnh). Chụ : - Khäng âäø âáưy läù våïi cháút chäúng âäng thỉång mải, dung mäi hỉỵu cå hồûc nỉåïc cáút. - Khäng cáưn thiãút thay thãú cháút lm lảnh. 15.3.4. Tênh kãút qu Hiãûn tỉåüng âiãûn di cháút gel cọ thãø sỉí dủng nhỉỵng mnh nh ADN khong 0,1 kb hay nh hån loải gel polyacrylamit thỉåìng sỉí dủng nhỉỵng mnh nh hån 1 kb. Tênh âiãûn di ca ADN. Näưng âäü agaroza qui âënh cho quạ trçnh phán ly thnh nhỉỵng mnh våỵ våïi nhỉỵng kêch thỉåïc khạc nhau âỉåüc cho trong bng 15.3. Bng 15.3. Näưng âäü âãø âiãûn di ca cạc mnh våỵ ADN âäúi våïi cạc loải cháút khạc Âiãûn di, % Hiãûu qu ca nhỉỵng âoản thàóng âäúi våïi sỉû phán gii 0,5 1,0 ÷ 3,0 0,7 0,8 ÷ 12 1,0 0,5 ÷ 10 1,2 0,4 ÷ 7 1,5 0,2 ÷ 3 [...]... vạng Lm sảch bàòng phỉång phạp sinh hc Lm sảch bàòng phỉång phạp sinh hc dỉûa trãn kh nàng ca cạc vi sinh váût táûn dủng cạc cháút hỉỵu cå cọ trong nỉåïc thi, thỉûc cháút l ngưn cacbon Ngoi ngưn cacbon cho hoảt âäüng säúng ca vi sinh váût cáưn cọ nhỉỵng ngưn khạc nhỉ nitå, phospho, kali Chụng thỉåìng âỉåüc bäø sung åí dảng múi khoạng Tiãún hnh lm sảch bàòng phỉång phạp sinh hoạ hồûc l åí trong cạc âiãưu... TÄØNG QUẠT VÃƯ AN TON LAO ÂÄÜNG TRONG NH MẠY CÄNG NGHIÃÛP VI SINH An ton lao âäüng giåïi thiãûu cạc hãû thäúng vàn bn vãư lût v nhỉỵng biãûn phạp tỉång ỉïng våïi chụng nhàòm âm bo an ton, bo vãû sỉïc kho v kh nàng lm viãûc ca con ngỉåìi trong quạ trçnh lao âäüng, kinh tãú - x häüi, k thût, vãû sinh v täø chỉïc Cạc axit, kiãưm, múi v cạc loải vi sinh váût âỉåüc sỉí dủng räüng ri trong cạc xê nghiãûp âãø... bäü lnh âảo âãún cạc vàn bn tiãu chøn trong lénh vỉûc an ton lao âäüng v phng chäúng chạy 332 Thäng giọ v chiãúu sạng Trong cạc lût an ton âãø sn xút trong cäng nghiãûp vi sinh, váún âãư thäng giọ v chiãúu sạng â âỉåüc thãø hiãûn mäüt cạch r rng Thäng giọ trong sn xút l biãûn phạp quan trong nháút âãø tảo ra nhỉỵng âiãưu kiãûn vãû sinh phng bãûnh bçnh thỉåìng trong cạc xê nghiãûp vi sinh ÅÍ trong táút... mäùi báûc nẹn trong cạc âoản âun nọng khäng âỉåüc quạ 180 C Thiãút bë cọ nàng sút låïn hån 10 m3/ph âỉåüc trang bë mạy lảnh v mạy tạch áøm 0 Cạc mạy nẹn khäng khê cọ nàng sút dỉåïi 10 m3/ph våïi ạp sút dỉåïi 0,8 MPa cọ thãø âàût åí cạc táưng dỉåïi ca nh nhiãưu táưng, nhỉng khäng âỉåüc âàût dỉåïi cạc phng sinh hoảt, vàn phng v cạc phng tỉång tỉû Trong trỉåìng håüp ny chụng cáưn phi tạch biãût khi cạc khu... sinh hc cọ liãn quan våïi sỉí dủng cạc vi sinh váût khạc nhau trong sn xút Phán têch cạc phãú thi ca nhiãưu xê nghiãûp vi sinh â khàóng âënh ràòng: khäng khê v nỉåïc thi vo mäi trỉåìng xung quanh cáưn phi tiãún hnh vä trng Hãû thäúng bo vãû mäi trỉåìng xung quanh bao gäưm cạc thiãút bë lm sảch khäng khê thi, nỉåïc rỉía v nỉåïc thi Lm sảch khäng khê thi Trong nhiãưu xê nghiãûp thüc cäng nghiãûp vi sinh, ... VI SINH Khi täø chỉïc mäüt hoảt âäüng sn xút báút k no trong cäng nghiãûp vi sinh cng cáưn phi tênh âãún táút c cạc nhán täú lao âäüng trong táút c cạc giai âoản sn xút Cạc âiãưu kiãûn lao âäüng ca cäng nhán âãưu phủ thüc vo chụng Nhỉỵng váún âãư bao gäưm bo häü lao âäüng, k thût an ton, vãû sinh sn xút, bäü lût lao âäüng âãưu tho ra cạc biãûn phạp qui âënh båíi cạc lût an ton trong cäng nghiãûp vi sinh, ... tỉû nhiãn hồûc l trong cạc âiãưu kiãûn nhán tảo Cạc bãø lc sinh hc â âỉåüc ỉïng dủng räüng ri trong cäng nghiãûp âãø lm sảch nỉåïc thi bàòng phỉång phạp sinh hc Bãø lc sinh hc (hçnh 16.3) l bãø chỉïa 1 cọ hai lä v ba phng hçnh chỉỵ nháût våïi bãư sáu 3 ÷ 6 m v cạc vạch ngàn dc cạch âạy âãø chuøn âo liãn tủc trong cạc khoang 6, 7, 8 Bãn trong bãø sinh hc cọ cạc äúng dáùn giọ 2 våïi cạc bäü thäng giọ åí... Ngoi ra khi näưng âäü bủi hỉỵu cå cao hån 8 ÷ 10 g/m3 thç s gáy nguy hiãøm dáùn âãún hiãûn tỉåüng näø Chênh vç váûy cạc thiãút bë âãø ni cáúy canh trỉåìng cáưn phi lm kên v cå khê hoạ Lm sảch nỉåïc thi Quạ trçnh cäng nghãû thu nháûn cạc sn pháøm vi sinh täøng håüp âi hi phi sỉí dủng mäüt lỉåüng låïn nỉåïc, chênh lỉåüng nỉåïc ny bë nhiãùm báøn båíi cạc sinh váût âäüc hải, båíi cạc múi khoạng v cạc cáúu... hnh kãút ta sinh hc v kãút bäng cạc cháút hỉỵu cå åí dảng lå lỉíng trong nỉåïc thi, thỉåìng sỉí dủng thiãút bë cọ quạ trçnh kãút ta sinh hc v kãút bäng do nảp bn hoảt tênh v khäng khê Thiãút bë l mäüt cại bãø hçnh chỉỵ nháût, sỉïc chỉïa ca nọ phủ thüc vo lỉåüng nỉåïc thi chy vo v thåìi gian cọ màût ca nọ Thåìi gian cọ màût ca nỉåïc thi trong thiãút bë khi nảp mảnh khäng khê dao âäüng tỉì 10 âãún 20... sn xút thüc lénh vỉûc cäng nghiãûp vi sinh ráút chụ âãún hoảt âäüng ca thiãút bë âiãûn k thût, âãún cạc biãûn phạp chäúng chạy, cạc phỉång tiãûn bo vãû cạ nhán, phng khê Lnh âảo xê nghiãûp phi cọ trạch nhiãûm trong viãûc phạ våỵ cạc quy lût an ton cng nhỉ trạch nhiãûm hon thnh cạc biãûn phạp â nãu trong cạc vàn bn 16.2 K THÛT AN TON TRONG NH MẠY CÄNG NGHIÃÛP VI SINH K thût an ton - hãû thäúng cạc biãûn . pha chóỳ dổồùi õỏy. 1. 10X Tris- borate-EDTA. Nguọửn cung cỏỳp chỏỳt õóỷm: (0,89 M tris; 0,89 M axit boric; 20 mM EDTA; pH- 8,2; 100 0 ml) Tris base(FW 121.1): 0,89 M 108 , 0g Axit boric (FW61.8):. base tris; 89 mM axit boric vaỡ 2 mM EDTA. 2. 10X Tris- acetate -EDTA Cung cỏỳp cho chỏỳt õóỷm (0,4 M tris; 0,2 M axit axetic; 10 mM EDTA; pH- 8,4; 100 0 ml) Tris base(FW 121.1): 0,40 M 48,8 g. axit): (0,5M; pH 8,0; 100 ml) Na 2 EDTA.2H 2 O; (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 70,0 ml NaOH (10M) tồùi pH 8,0 5,0 ml Nổồùc õaợ õổồỹc khổớ ion hoaù: 100 ,0 ml - Chuỏứn