Tiểu luận môn học một số chương chọn lọc trong hóa học các hợp chất thiên nhiên chủ Đề meso dihydroguaiaretic

DANH MỤC CÁC HÌNH, CÁC BẢHình 1: Cấu trúc hoá học của meso-dihydroguaiaretic acid...2 Hình 2: Phổ 1H-NMR của acid meso-dihydroguaiaretic [Chemdraw]...2 Hình 3: Phổ 13C-NMR của acid meso-

BỘ GIÁO DỤC

VÀ ĐÀO TẠO

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC

VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Phùng Thị Tình

TIỂU LUẬN MÔN HỌC

MỘT SỐ CHƯƠNG CHỌN LỌC TRONG HÓA HỌC CÁC HỢP

CHẤT THIÊN NHIÊN

CHỦ ĐỀ: MESO-DIHYDROGUAIARETIC

Hà Nội, tháng 11 năm 2023

BỘ GIÁO DỤC

VÀ ĐÀO TẠO

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC

VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Phùng Thị Tình

Lớp: Hóa hữu cơ – 2022B – Hà Nội, Khóa: 2022B

TIỂU LUẬN MÔN HỌC

MỘT SỐ CHƯƠNG CHỌN LỌC TRONG HÓA HỌC CÁC HỢP

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

1 Cấu trúc hoá học và các dữ liệu liên quan 2

2 Các tính chất hoá lý 3

3 Các nguồn thực vật có chứa hoạt chất này 4

3.1 Myristica fragrans 4

3.2 Machilus thunbergii 5

3.3 Larrea tridentata 6

3.4 Saururus chinensis 7

4 Phương pháp chiết xuất, phân lập và tinh chế 8

5 Các hoạt tính sinh học đã được nghiên cứu và công bố 9

5.1 Lignan chống oxy hóa từ Machilus thunbergii Bảo vệ các tế bào nuôi cấy sơ cấp bị tổn thương CCl4 của tế bào gan chuột [20] 9

5.2 Hoạt tính ức chế kép COX-2/5-LOX và thuốc kháng histamine [26] 12

5.3 Hoạt tính tăng cường hấp thu glucose bằng acid meso-dihydroguaiaretic thông qua điều chỉnh tăng GLUT4 trong tế bào mỡ 3T3-L1 [31] 15

5.4 Đặc tính chống viêm của acid meso-dihydroguaiaretic trong đại thực bào do lipopolysacarit gây ra [39] 19

5.5 Hoạt tính gây độc tế bào và chống khối u của lignan từ hạt nhục đậu khấu Myristica Fragrans Việt Nam [46] 23

5.6 Hoạt tính chống tế bào ung thư vú thông qua kích hoạt Protein Kinase được kích hoạt AMP [47] 25

TÀI LIỆU THAM KHẢO 26

DANH MỤC CÁC HÌNH, CÁC BẢ

Hình 1: Cấu trúc hoá học của meso-dihydroguaiaretic acid 2

Hình 2: Phổ 1H-NMR của acid meso-dihydroguaiaretic [Chemdraw] 2

Hình 3: Phổ 13C-NMR của acid meso-dihydroguaiaretic [Chemdraw] 2

Hình 5: Hình ảnh về cây Nhục Đậu Khấu thuộc họ Myristica fragrans 5

Hình 6: Hình ảnh về cây thuộc họ Machilus thunbergii 6

Hình 7: Hình ảnh về cây thuộc họ Larrea tridentata 7

Hình 8: Hình ảnh về cây thuộc học Saururus chinenis 8

Hình 9: Ảnh hưởng của các hợp chất 1–11 đến hoạt động của glutamic pyruvic transaminase được giải phóng từ nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương CCl4 10

Hình 10: Tác dụng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiaretic đối với hoạt động của transaminase glutamic pyruvic giải phóng từ nuôi cấy tế bào gan nguyên phát bị tổn thương CCl4 10

Hình 11: Ảnh hưởng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiaretic lên nồng độ glutathione trong môi trường nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương bởi CCl4 11

Hình 12: Tác dụng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiaretic đối với hoạt động của các enzyme chống oxy hóa ở gan trong môi trường nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương bởi CCl4 11

Hình 13: Ảnh hưởng của MDGA đến việc tạo ra PGD2 phụ thuộc COX-2 (A) và biểu hiện protein COX-2 (B) 13

Hình 14: Ảnh hưởng của MDGA đến việc tạo ra LTC4 14

Hình 15: Tác dụng của MDGA đối với việc giải phóng β–hexosaminidase 15

Hình 16: Tác dụng kích thích của MDGA đối với sự biệt hóa tế bào mỡ (A) Cấu trúc hóa học của MDGA; (B) Các tế bào tiền mỡ 3T3-L1 được kích thích bằng hỗn hợp các chất cảm ứng tạo mỡ chứa 0,1 µg/mL insulin, 0,5 mM IBMX và 1 µM dexamethasone 16

Hình 17: Tăng ảnh hưởng của MDGA đối với các yếu tố PPARγ và C/EBPα 17

Hình 18: Tăng cường tác dụng của MDGA đối với sự hấp thu glucose ở tế bào mỡ .18 Hình 19: Cơ chế đề xuất của MDGA để tăng cường hấp thu glucose 19

Hình 20: Ảnh hưởng của MDGA đến việc sản xuất NO do LPS gây ra trong các tế

bào RAW 264,7 20

Hình 21: Ảnh hưởng của MDGA đến khả năng tồn tại của tế bào Raw 264,7 21 Hình 22: Ảnh hưởng của MDGA đến sự biểu hiện LPS của iNOS, TNF-α và IL-1β

trong các tế bào Raw 264,7 22

Hình 23: Hoạt tính gây độc tế bào của các hợp chất 1–4 phân lập từ hạt nhục đậu khấu

Việt Nam 23

Hình 24: Tác dụng chống khối u và kéo dài tuổi thọ của DHGA ở chuột mang khối u

Sarcoma 180 (A) – Ức chế thể tích khối u bằng DHGA, (B) – Thay đổi tỷ lệ sống sótbằng điều trị bằng DHGA 24

Y

Bảng 1 Dữ liệu phổ 1H, 13C-NMR của hợp chất acid meso-dihydroguaiaretic[Chemdraw] 3

MỞ ĐẦU

Lignan là lớp chất thuộc nhóm các hợp chất phenolic, được tìm thấy trong hầuhết các loại thực vật giàu chất xơ, bao gồm các loại ngũ cốc như lúa mì, lúa mạch vàyến mạch; các loại đậu như nhục đậu khấu, đậu lăng, hay đậu nành và các loại rau nhưmăng tây, tỏi, bông cải xanh, cà rốt,… Lignan là dime của hai hay nhiều đơn vịphenylpropanoid C6 – C3, từ acid cinnamic, trong đó các đơn vị phenylpropane đượcliên kết bởi carbon trung tâm (C8) của chuỗi bên của chúng Các phối tử khác nhauđáng kể về mức độ oxy hóa, kiểu thay thế và cấu trúc hóa học của khung carbon cơbản của chúng Ngoài sự đa dạng về cấu trúc, lignan còn thể hiện sự đa dạng đáng kể

về thành phần đối hình, sinh tổng hợp và phân bố phát sinh gen

Meso-dihydroguaiaretic acid là hợp chất thuộc lớp chất lignan, được phân lập

từ nhiều loại thực vật đa dạng như Myristica fragrans (họ Myristicaceae), Machilus thunbergii (họ Lauracea), Larrea tridentata (họ Zygophyllaceae), Saururus chinensis,

… Phân bố rộng rãi ở nhiều nơi trên thế giới, trong y học cổ truyền cũng như nghiêncứu hiện đại, meso-dihydroguaiaretic có nhiều tác dụng dược lý quan trọng, thể hiệnhoạt tính sinh học mạnh và có ý nghĩa rất lớn trong y học, dược học Chính vì thể hiệnđược các đặc tính sinh học như vậy, trong bài nghiên cứu này tôi tiến hành nghiên cứu,tổng hợp các công trình nghiên cứu về meso-dihydroguaiaretic thể hiện qua một số nộidung chính như sau:

- Cấu trúc hoá học và một số dữ liệu liên quan

- Các tính chất hoá lý

- Các nguồn thực vật có chứa meso-dihydroguaiaretic acid

- Phương pháp chiết xuất, phân lập và tinh chế

- Các hoạt tính sinh học đã được nghiên cứu và công bố

1 Cấu trúc hoá học và các dữ liệu liên quan

HO O

Hình 1: Cấu trúc hoá học của meso-dihydroguaiaretic acid

- Công thức phân tử: C20H26O4

- Tên thường: Meso-dihydroguaiaretic acid.

- Tên IUPAC: 4,4'-(2,3-dimethylbutane-1,4-diyl)bis(2-methoxyphenol).

- Khối lượng phân tử: 330.42 g/mol.

0 2

4 6

8 10

PPM

Hình 2: Phổ 1H-NMR của acid meso-dihydroguaiaretic [Chemdraw]

- Phổ 13 C-NMR

0 20

40 60

80 100

120 140

160

PPM

Hình 3: Phổ 13C-NMR của acid meso-dihydroguaiaretic [Chemdraw]

Bảng 1 Dữ liệu phổ 1H, 13C-NMR của hợp chất acid meso-dihydroguaiaretic

phát triển tốt ở các tỉnh Quảng Đông – Quảng Tây và Vân Nam Ở Việt Nam,được trồng rộng rãi ở miền Nam Việt Nam và có tên tiếng địa phương là “Nhục ĐậuKhấu” [2][Loi, D.T 1999 Vietnamese medicinal plants and remedies, 406–408.Hanoi: Medicinal Publishing House] Hạt của loại cây này, được gọi là hạt nhục đậukhấu hoặc quả chùy, thường được sử dụng làm gia vị và thành phần mỹ phẩm, đồngthời được sử dụng như một phương thuốc truyền thống chữa bệnh tiêu chảy, chán ăn

và rối loạn tiêu hóa [1] Một số nghiên cứu đã báo cáo về thành phần hóa học của hạtnhục đậu khấu (chủ yếu là các sản phẩm của Indonesia và Ấn Độ) rằng hạt chứakhoảng 30% chất béo, 5–15% dầu dễ bay hơi và lignan [3-5] Hạt nhục đậu khấu vàcác thành phần lignan của nó đã được báo cáo là có tác dụng chống vi khuẩn, chốngviêm, chống ung thư, chống tiểu đường và bảo vệ gan, bảo vệ thần kinh [6], gần đây,

nó cũng đã được chứng minh là có tác dụng ức chế protein tyrosine phosphatase 1B[7] Đặc biệt, axit dihydroguaiaretic (DHGA), một trong những lignan ở M Fragrans,

đã được chứng minh là có hoạt tính gây độc tế bào chống lại tế bào ung thư biểu môphổi A549 [8]

Mô tả: Cây Nhục đậu khấu thân gỗ, độ cao khoảng 8 – 10 m, cây nhỏ, cànhmảnh, toàn thân cây nhẵn Lá cây mọc so le, phiến lá mác, hình elip, đỉnh lá ngắn, gốc

lá rộng, mép lá nguyên, có 8 – 10 gân lá đối xứng 2 bên Cuống lá dài khoảng 7 – 10

mm Hoa thường có màu vàng trắng, mọc thành xim ở các kẽ lá Cụm hoa dài 1 – 3

cm, nhẵn Các thùy hoa có hình bầu dục hoặc hình tam giác, bên ngoài màu nâu Quảhạch, hình cầu hoặc hình quả lê, đường kính khoảng 5 – 8 cm Quả thường mọc đơn,

có cuống ngắn hoặc cuống dài quả buông thõng xuống Khi chín, đáy quả sẽ nở ra theochiều dọc thành 2 mảnh lộ ra phần hạt bên trong Hạt Nhục đậu khấu có vỏ dày vàđược bao bọc bởi một lớp áo màu hồng [9]

Các bộ phận của Nhục đậu khấu được ứng dụng làm dược liệu bao gồm:

- Nhục đậu khấu: Là phần nhân phơi hoặc sấy khô

- Nhục ngọc quả: Là phần áo (vỏ giả màu hồng của hạt) của hạt Nhục đậu khấu

đã được phơi hoặc sấy khô [10]

Hình 4: Hình ảnh về cây Nhục Đậu Khấu thuộc họ Myristica fragrans

3.2 Machilus thunbergii

Tên tiếng Việt: Kháo vàng

Tên khoa học: Machilus thunbergii Sieb et Zucc – Persea thunbergii (Sieb et

Machilus thunbergii là một loại cây xanh có tán cành rộng Lá có nhiều lông

màu xanh đậm, có hình trứng ngược với toàn bộ mép, dài tới 12 cm và rộng 6 cm Lámới của nó mọc lên màu đỏ tươi vào mùa xuân Thân cây của nó có thể đạt đườngkính lên tới 130 cm Vỏ màu xám/nâu của nó có vảy và rụng thành từng mảng Hoa

hình ngôi sao màu xanh chanh của nó mọc thành cụm hình cầu Quả màu xanh/đen của

là cây bụi creosote và cây mỡ, chaparral là một loại dược thảo và gobernadora [12]

Larrea tridentata là một loại cây bụi thường xanh cao tới 1 đến 3 m, hiếm khi

cao tới 4 m Thân màu xám nhạt, cây có các lá màu xanh đậm, nhựa, có hai lá chéthình mác đối diện nối với nhau ở gốc, mỗi lá chét dài 7 đến 18 mm và 4 đến rộng 8,5

mm Những bông hoa có đường kính lên tới 25 mm, với năm cánh hoa màu vàng

Larrea tridentata là một loài nổi bật ở các sa mạc Mojave, Sonoran và Chihuahuan ở

phía tây Bắc Mỹ, và phạm vi của nó bao gồm những loài đó và các khu vực khác ở cácphần phía đông nam California, Arizona, miền nam Nevada, tây nam Utah, NewMexico và Texas ở Hoa Kỳ Các bang và Chihuahua, Sonora, Coahuila, Nuevo León,Zacatecas, Durango và San Luis Potosì ở Mexico [13]

Hình 6: Hình ảnh về cây thuộc họ Larrea tridentata

3.4 Saururus chinensis

Cây hàm ếch có tên khoa học là Saururus chinensis, là một loại thảo mộc mọc ở

những vùng ẩm ướt như ven các kênh mương, bờ sông, bờ suối, bìa rừng Nó được tìmthấy ở nhiều nước châu Á như Việt Nam, Ấn Độ, Trung Quốc, Hàn Quốc, Nhật Bản

và Philippines, …

Thành phần: Cây hàm ếch có chứa hàm lượng chất béo khoảng 2,1%, protein8,8%, chất xơ 54,7%

Trong y học cổ truyền, Saururus chinensis đã được sử dụng để điều trị chứng

viêm [14] trong các tình trạng khác nhau như phù nề, lậu và hen suyễn [15, 16]

Trong nhiều nghiên cứu trên thế giới, đã báo cáo rằng chiết xuất ethanol của S chinensis Baill (SC-E) có thể làm giảm tình trạng viêm bằng cách ức chế oxit nitric nội

bào, prostaglandin E2 và các cytokine gây viêm khác nhau được giải phóng do kích

thích lipopolysacarit của đại thực bào RAW 264,7 [15, 17, 18] Saururus chinensis

cũng điều chỉnh mức độ lipid trong máu ở mô hình động vật và ức chế hoạt động củaα-glucosidase để có tác dụng chống tiểu đường [15, 19]

Hình 7: Hình ảnh về cây thuộc học Saururus chinenis

4 Phương pháp chiết xuất, phân lập và tinh chế

Acid meso-dihydroguaiaretic được phân lập từ nhiều loài thực vật khác nhau,

do vậy đối với mỗi loại thực vật, hay từng bộ phận cũng có những cách chiết xuất,phân lập hay tinh chế sẽ nhiều điểm giống hay khác nhau

Meso-dihydroguaiaretic acid phân lập từ họ Machilus thunbergii, vỏ khô của

M thunbergii (7,5 kg) được nghiền thành bột và chiết với CH3OH 80% bằng phươngpháp đồng nhất siêu âm Dịch chiết CH3OH (800 g) được tạo huyền phù trong nướccất và được chiết bằng CH2Cl2 Phần cao chiết CH2Cl2 (90 g) thể hiện hoạt tính bảo vệgan đáng kể được phân tách nhiều lần bằng gradient, tách bằng sắc ký cột silica gelchân không Mười một lignan đã được phân lập và xác định bằng cách so sánh với dữliệu quang phổ được báo cáo trước đó [20]

Meso-dihydroguaiaretic acid phân lập từ họ Myristica fragrans Hạt M Fragrans được thu thập ở miền Nam Việt Nam và được xác định về mặt thực vật học.

Sau khi thu hái, hạt được cắt lát, phơi khô và để ở nơi khô ráo Năm kg mẫu được chiếthai lần bằng etanol 96 % ở nhiệt độ phòng trong 2 tuần và dung môi gộp lại được làmbay hơi để thu được dịch chiết khô (680 g) Dịch chiết được tạo huyền phù trong H2O

và chiết hai lần bằng n-hexan, etyl axetat và loại bỏ triệt để các dung môi thu được cácphần n-hexan (16 g) và EtOAc (460 g) Phần EtOAc được cho đi qua cột silica gel (20

± 30 cm) và được rửa giải bằng gradient n-hexan–EtOAc để thu được 5 phân đoạn(F.1, 194 g; F.2, 107 g; F 3, 56 g; F.4, 48 g; và F.5, 55 g) Một phần của phần F.3 (1g) được tách bằng HPLC sử dụng hệ thống Gilson, cột RP-18 (2 x 9 150 mm, cỡ hạt 5

lm, Nhật Bản), pha động: MeOH trong H2O (0–40 phút: 75  80 %, 40–80 phút: 80

 100 %), máy đo UV (ở 205 nm và ở 280 nm) phân lập được các hợp chất 1 (250

mg, tR 43 phút) và 2 (76 mg, tR 72 phút) Phần F.4 (1,1 g) cũng được được phân táchbằng HPLC sử dụng điều kiện tương tự (pha động: MeOH trong H2O, 0–60 phút: 59

 65 %, 60–65 phút: 65  100 %) dẫn đến sự phân lập 3 (21 mg, tR 52 phút) và 4 (37

mg, tR 59 phút) Các hợp chất phân lập được xác định là trên 95 % tinh khiết Các hợp

chất này được xác định là DHGA (1), macelignan (2), fragransin A2 (3) và nectandrin

B (4) bằng cách so sánh dữ liệu MS và NMR với dữ liệu trong tài liệu [7, 21, 22] Một

báo cáo khác về việc phân lập acid meso-dihydroguaiaretic từ họ Machilus thunbergii.

Vỏ thân khô (500 g) của M thunbergii được cắt nhỏ và chiết ba lần bằng metanol

100% (1 l × 3) trong 7 ngày ở nhiệt độ phòng Dịch chiết metanol gộp lại được côtrong chân không để tạo ra keo màu nâu (11,3 g) Dịch chiết metanol được tạo huyềnphù trong H2O (500 ml), sau đó được phân chia lần lượt bằng n-Hexane, CHCl3 vàBuOH (mỗi loại 3×500 ml) để thu được dịch chiết n-Hexane (1,8 g), dịch chiết CHCl3(3,5 g), và Chiết xuất BuOH (1,5 g) Dịch chiết hòa tan CHCl3 là sắc ký cột silica gel(230-400 mesh) sử dụng hỗn hợp CHCl3/Axeton (100:1→1:1) để thu được bảy phân

số phụ (D1-D7) Phân đoạn D1 (900 mg) được áp dụng cho sắc ký cột silica gel

(230-400 Mesh) với n-Hexane/ EtOAc (49:1→1:1) để thu được mười bốn phân đoạn phụ(E1-E14) Phân đoạn phụ E6 được xử lý bằng sắc ký cột silica gel (230-400 lưới) với

n-Hexane/EtOAc (49:1→9:1) để thu được hợp chất 1 (21 mg) và 2 (20 mg) [23]

5 Các hoạt tính sinh học đã được nghiên cứu và công bố

5.1 Lignan chống oxy hóa từ Machilus thunbergii Bảo vệ các tế bào nuôi cấy sơ cấp bị tổn thương CCl 4 của tế bào gan chuột [20]

Hoạt tính bảo vệ gan của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid dihydroguaiaretic đối với độc tính do CCl4 gây ra Để đánh giá hoạt động bảo vệ gancủa 11 lignan, các hợp chất có nồng độ 50 mM đã được thêm vào giai đoạn nuôi cấy

meso-sơ cấp tế bào gan chuột với sự có mặt của CCl4 (Hình 9) Trong số 11 hợp chất đượcthử nghiệm, chỉ có (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiaretic,làm giảm đáng kể mức độ giải phóng glutamic pyruvic transaminase được sinh ra từgiai đoạn nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương CCl4 vào môi trường ở nồng

độ từ 10 đến 100 mM (Hình 10) Hoạt tính của glutamic pyruvic transaminase trongmôi trường nuôi cấy được xác định bằng phương pháp của Reitman & Frankel (1957)[24]

Hình 8: Ảnh hưởng của các hợp chất 1–11 đến hoạt động của glutamic pyruvic

transaminase được giải phóng từ nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương CCl4

(Nuôi cấy tế bào gan chuột lần đầu được tiếp xúc với 5 mM CCl 4 có hoặc không có một trong các hợp chất 1–11 (50 mM) Giá trị glutamic pyruvic transaminase của mẫu đối chứng và CCl 4 bị tổn thương lần lượt là 24,98 ± 3,42 và 109,62 ± 10,34 Silybin (100 mM) được sử dụng làm đối chứng dương.

Hình 9: Tác dụng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiaretic

đối với hoạt động của transaminase glutamic pyruvic giải phóng từ nuôi cấy tế bào gannguyên phát bị tổn thương CCl4

Ảnh hưởng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiareticđến hàm lượng GSH/GSSG Nồng độ glutathione toàn phần và glutathione khử giảm ởcác tế bào gan bị tổn thương CCl4, nhưng được phục hồi một phần bằng cách điều trị

đồng thời với (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin hoặc acid meso-dihydroguaiaretic, ởnồng độ 50 mM.

Hình 10: Ảnh hưởng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid

meso-dihydroguaiaretic lên nồng độ glutathione trong môi trường nuôi cấy sơ cấp tế bào ganchuột bị tổn thương bởi CCl4

Tác dụng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid meso-dihydroguaiareticđối với enzyme chống oxy hóa và peroxid hóa lipid Điều trị bằng (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin hoặc acid meso-dihydroguaiaretic ở nồng độ 50 mM bảo tồn đáng kể hoạtđộng của superoxide dismutase và catalase trong môi trường nuôi cấy sơ cấp tế bàogan chuột bị tổn thương bằng CCl4 Hoạt tính của glutathione peroxidase được bảotoàn bằng acid meso-dihydroguaiaretic, nhưng không phải bằng (–)-acuminatin hoặc(–)-isoguaiacin Cả ba lignan đều làm giảm đáng kể việc sản xuất malondialdehyd,một chỉ số về quá trình peroxid hóa lipid (Hình 12)

Hình 11: Tác dụng của (–)-acuminatin, (–)-isoguaiacin và acid

meso-dihydroguaiaretic đối với hoạt động của các enzyme chống oxy hóa ở gan trong môitrường nuôi cấy sơ cấp tế bào gan chuột bị tổn thương bởi CCl4

Nhìn chung, glutathione hiện diện với nồng độ lớn trong gan, đóng vai trò chínhtrong việc loại bỏ một số lượng lớn chất độc nucleophilic như các gốc oxy hóa Trongcác tế bào bình thường, nồng độ glutathione bị giảm bởi các gốc oxy hóa nhưng nhanhchóng được phục hồi về mức bình thường Mặt khác, việc đưa CCl4 vào tế bào nhanhchóng và liên tục sẽ làm giảm nồng độ glutathione trong tế bào và làm bất hoạt nhiềuenzyme chống oxy hóa có liên quan bao gồm superoxide dismutase, catalase vàglutathione peroxidase Do đó, nồng độ O2- và H2O2 được giữ ở mức cao để đáp ứng.Điều này làm tăng quá trình peroxid hóa lipid dẫn đến thoái hóa màng tế bào, rối loạn

chức năng tế bào và hoại tử tế bào [25] Ở nồng độ 50 mM acid dihydroguaiaretic không chỉ bảo toàn đáng kể tổng glutathione và tỷ lệ GSH/GSSG màcòn duy trì mức superoxide dismutase, catalase và glutathione peroxidase Ức chếmạnh mẽ quá trình peroxid hóa lipid bằng việc giảm sản xuất malondialdehyd Vì balignan bảo quản glutathione, dẫn đến việc loại bỏ các gốc tự do mạnh và duy trì hoạtđộng của superoxide dismutase, catalase và glutathione peroxidase bằng cách giữ mức

meso-O2- thấp và ức chế peroxid hóa lipid Acid meso-dihydroguaiaretic bảo vệ tế bào gankhỏi CCl4 bằng cách kích hoạt các enzyme chống oxy hóa và ức chế quá trình peroxidhóa lipid Khi so sánh hoạt tính bảo vệ gan của dibenzylbutane lignan, hoạt tính củamachilin A, có hai gốc methylenedioxy, kết quả cho thấy cả hai hợp lignan đều thấphơn so với acid meso-dihydroguaiaretic 34%

5.2 Hoạt tính ức chế kép COX-2/5-LOX và thuốc kháng histamine [26]

Axit Meso-dihydroguaiaretic (MDGA) là một sản phẩm thảo dược được phân

lập từ các bộ phận trên mặt đất của Saururus chinensis có tác dụng ức chế giai đoạn

cyclooxygenase-2 (COX-2) của quá trình tạo ra prostaglandin D2 (PGD2) trong tế bàomast có nguồn gốc từ tủy xương (BMMC) (IC50 9,8M) Tuy nhiên, hợp chất nàykhông ức chế sự biểu hiện protein COX-2 trong BMMC ở nồng độ lên tới 30 M, màMDGA ức chế trực tiếp hoạt động của COX-2 Ngoài ra, hợp chất này còn ức chế liêntục việc sản xuất leukotriene C4 (IC50 1,3 M) Những kết quả này chứng minh rằngMDGA ức chế cả COX-2 và 5-lipoxygenase Hơn nữa, hợp chất này ức chế mạnh mẽphản ứng phân hủy hạt trong BMMC (IC50 11,4 M) Do đó, hợp chất này có thể tạo

cơ sở cho việc phát triển thuốc chống viêm mới

MDGA có khả năng ức chế mạnh (IC50 9,8 M) giai đoạn COX-2 của thế hệPGD2 sau khi kích hoạt BMMC với sự kết hợp của KL, IL-10 và LPS (Hình 13A).MDGA có thể ức chế việc tạo PGD2 bằng cách điều chỉnh giảm COX-2 Tuy nhiên,MDGA không ảnh hưởng đến sự biểu hiện protein COX-2 (Hình 13B), chứng tỏ rằng

sự ức chế PGD2 là do ức chế COX-2 hoặc PGD2 synthase cuối cùng