thí nghiệm sinh học đại cươngh01212 báo cáo cuối kì

● Bàibáocáothínghiệmsinhhọcnàyđượcthựchiệnnhằmmụcđíchbáocáolạikếtquảhọcsaucácbuổithựchành.Chothấyviệcnắmrõcácthaotác,cáchthựchiện,ýnghĩaquytrình,nguyênnhânlàmthínghiệm.Nộidungbáocáobaogồ

Tóm tắt 1

1.Giớithiệu 1

2 Tiêu đề chính 1

2.1.Tiêuđềphụ 1

2.1.1.Tiêuđềphụphụ 1

2.2.Hình,Bảng,vàSơđồ 2

3.Fontchữvàcỡchữ 3

4 Kết luận 3

Tríchdẫn 3

● Thínghiệm6:Quansátvàgiảithíchhiệntượngconguyênsinhvàphảnconguyênsinh.

● Thínghiệm7:PhânlậpDNAquathínghiệm Xácđịnhđộtinhkhiếtcủamẫu,kiểmtraxem

mẫucóbịnhiễmproteinhayhợpchấthữucơkhác

● Thínghiệm8:PhânlậpRNAquathínghiệm

3.1.Giớithiệu

● Sinh học là khoa học tự nhiên nghiên cứu sựsốngvàcáccơthểsống,baogồmcấutrúcvậtlý,thành phần hóa học, chức năng, sựpháttriểnvàtiếnhóacủachúngbắtđầutừcấpđộtếbàođến cấp độ giảiphẫu.Vàphòngthínghiệmmangđếnchochúngtamộtcơhộihoànhảođềxâydựngdựatrênnhữngkiếnthứccơbảnđượcdạytrênlớp

DungdịchCuSO41% 10mLNướccất 100mLDỤNGCỤ

4

Ốngnghiệm 5ốngKhayđựngốngnghiệm 1cáiPipettethủytinh10mL 1cáiỐngbópcaosu 1cáiMicropipettep1000 1cáiHộpđầutipsp1000 1hộp

+ Quansátmàusắccácốngnghiệm

3.3 Kếtquả

Hình3.1: DungdịchCuSO41%đãđượcphaloãngtrongeppendorfvàốngnghiệm

3.4.Thảoluậnvàgiảithíchkếtquả

6

5.3.2 Quansáttếbàolálẻbạn

5.3.3 Quansáttếbàongười

Hình5.5:Hìnhảnhtếbàoniêmmạcmiệngquakínhhiểnvi10X

18

HCL1N 1lọNướccất 1bìnhPhẩmnhuộmCarmin 1lọGlycerin 1lọDỤNGCỤ

GiấythấmLamkínhvàlamen 1bộKimmũigiáo 1cáiDĩanhôm 1cáiỐngnhỏgiọt 1cáiKínhhiểnviquanghọc 1cái

6.3 Kếtquả

28

+ Kìsau:cácnhiễmsắctửtáchnhauravàdichuyểntrênthoiphânbàovềhaicựccủatếbào.

+ Kìcuối:cácNSTdầndãnxoắn,màngnhânvànhâncondầnxuấthiện

6.4 Thảoluậnvàgiảithíchkếtquả

30

● Kếtquả:quansátvànhậnbiếtcáckìnguyênphânquacácđặcđiểmcủacáckì.Cóthểnhận

thấyrõkìtrunggian,kìđầu,kìgiữa,kìsau,kìcuối

+ Protein:lànhữngphântửcócấutrúcrấtlinhhoạtđượctìmthấytrongtấtcảcácdạngsống

Proteinđượctạothànhtừcácaxitamin,mỗiaxitamincómộtnhómamin(—NH2),mộtnhómcacboxyl(axit)(—COOH)vàmộtchuỗibênthayđổi(—R)

+ Lipid: baogồmnhiềuloạiphântửhòatantrongdungmôikhôngphâncựcnhưether,axeton,

methanolhoặcethanol,nhưngkhônghòatantrongdungmôiphâncựcnhưnước.Triglyceride(fat)làchấtbéodồidàođượctạothànhtừglycerolvàbaaxitbéo

32

Dung dịch giá ( giã 10 cọng giávào10mlnướccất)

3ml

Dungdịchhạtđậuxanh( giã 10 hạt đậu xanh đã ngâmnướcmộtgiờvào10ml)

3ml

Dungdịchglucose1% 3ml

Dungdịchtinhbột 3mlHOÁCHẤT

DungdịchFehling’s:trộndungdịchAvàB

Dung dịch A: Hoà tan 7gCuSO 7H4 2O trong 100 ml nướccất

DungdịchB:hoàtan24gKOH

và 34,6g potassium sodiumtartratetrong100mlnướccất

1lọ

DỤNGCỤ

Ốngnghiệm 5ốngGiáốngnghiệm 1cáiPipettenhựa 1cáiBểcáchthuỷ

● Thaotác:

34

chấtnitơ.Cácaxitaminchứavòngbenzennhưphenylalaninkhôngchokếtquảdươngtínhvớithửnghiệmnàyvìnhómphenyltrongphenylalaninrấtbền,khôngphảnứngvớiaxitnitric

trongcácđiềukiệncủathửnghiệmnày.Tuynhiên,phenylalanincóthểchokếtquảdươngtínhsaumộtthờigianđunnóng

● Mẫu,hóachất,dụngcụ

Bảng7.2.3MẪU

Lòngtrắngtrứng(đãđánh,lọcquagiấylọc)

2mlMậtong 2mlNướccất 2mlĐậuxanh(giã10hạtcho

nướccấtvàorồilọc)

2mlNướcđậutrắng1% 2mlHOÁCHẤT

NitricacidHNO3đậmđặc 2mlNaOH30% 1mlDỤNGCỤ

Ốngnghiệm 5ốngGiáốngnghiệm 1cáiKẹpốngnghiệm 1cáiĐèncồn 1cáiỐngnhựabóp 1cái

Dungdịchđậuphộng(giã10hạtđậuphộngtrong10mlnướccất)

1ml

Mậtong 1mlDầuthựcvật 1mlNướccất 1mlHOÁCHẤT

SudanIII 2mlDỤNGCỤ

Ốngnghiệm 5cáiGiáốngnghiệm 1cái

36

1mlDungdịchớt (giã1

tráiớtvào10mlnướclọc)

1mlHOÁCHẤT

Phađộng(trộnpetroleumether:acetonetỉlệ9:1)

2mlDỤNGCỤ

Giấysắcký 1tờPasteurpipette 1bộCốcthuỷtinh 1cái

7.3.2 Quytrình2:PhảnứngXanthoproteoic

Hình7.2:Lòngtrắngtrứng–nướccất–dungdịchđậutrắng–dungdịchđậuxanh–mậtong

(thứtựtừtráisangphải)

Nướccất Màutrắng MàuđỏnhạtsaukhithêmSudanIIIDầuthựcvật Lớpmỡởtrên,nướcởdưới.

(dodầukhôngtantrongnước) SudanIIItantronglipidnênlớpdầuphíaPhầnnướcởdướicómàuđỏnhạt,

trêncómàuđỏđậm

40

7.3.4 Quytrình4:Sắckýgiấyxácđịnhthànhphầnsắctốquanghợp

Hình7.4:Ớtchuôngđỏ-ớtchuôngxanh(thứtựtừtráisangphải)

Củhànhtím 1củHOÁCHẤT

KNO 5%3 1lọNướccất 1bìnhDỤNGCỤ

Ốngnhỏgiọt 2cáiLamkínhhiểnvivàlamen 3bộKínhhiểnvi 1cáiGiấythấm 1cái

Quansátthấymàuđỏkhôngđồngđều

Lúcnàyđãthêmnướcvàotếbàonêntếbàochấtlạicăngrakhớpvớithànhtếbào.Quansátthấymàuđỏđồngđềuxuấthiệnlại

vikhuẩnE coli,nếuđược xâura,sẽdàikhoảng1mm.(Bằngcáchtươngtự,nếuvikhuẩncó

kích thước bằng một quả bưởi, thì DNAcủanósẽdàihơn80km.)KhảnăngđónggóilượngDNAnàyvàomộttếbàonhỏlàrấtấn tượng,đặcbiệtlàvìDNAlàmộtphântửkhábền

● TáchchiếtDNAlàcầnthiếtchomộtloạtcác ứng dụng sinh học phân tử như định

danh loài, tầm soát bệnh di truyền, tầmsoátđộtbiến,xácđịnhtácnhângâybệnh

+ Độ hấp thụ tia cực tím có thể được sử dụng đểđánhgiáđộtinhkhiếtcủaDNAchiết

xuất Đối với mộtmẫuDNAtinhkhiết,tỷsốgiữađộhấpthụởbướcsóng260nmvà

độhấpthụởbướcsóng280 nm(A260/A280)là1,8.Tỷlệ<1,8cho thấy mẫu bị

nhiễmproteinhoặcdungmôihữucơnhư phenol,thường được sử dụng trong quá

trình chiết xuất Chất lượng DNA có thể được đánh giá bằng hình ảnh trên gel

agarose

+ Để phânlậpDNAvikhuẩn,tếbàovikhuẩnđượcnuôicấytrongmôitrườnglỏngcho

đếnkhichúng đạtmậtđộtốiđa2-3x109tếbào/ml,sauđóđượcthuhoạch.Cáctếbào

thu thập được sẽ được ly giải, thườngđượcthựchiệnbằngphươngpháphóahọc,sử

dụng các dung dịch như lysozyme, EDTA, và các chất tẩy khác, v.v Sau đó, cácthành phần tếbàođượcloạibỏ.BướccuốicùnglàkếttủaDNA đểthuđượcDNA

tinh khiết ở nồng độ cao Quytrìnhnàycóthểđượcápdụngchonhiềuloạivi khuẩn

46

+ Các bước cơbảnliênquanđếnviệctáchchiếtDNAtừtếbàovàmôđộngvậtcũng

giống như đối với vi sinh vật Tuy nhiên, nuôi cấyvàchuẩnbịtếbàođộngvật

thường rất khác so vớitếbàovisinhvật Tếbàođộngvậtkhôngcóthànhtếbàonhư

tếbàovisinhvật,dođó,dễdànglygiảihơn.Vìvậy, chúngcó thể được tách ra chỉ

bằng cách sử dụng chất tẩy.Tuynhiên,khitếbàolàmộtphầncủamô độngvật

nguyên vẹn, trước tiên mô cần được đồng nhấtcơhọchoặcxửlýbằngcácenzymđể

ly giải Quá trình lygiảitếbàođượctheosaubởisựphânlậpvàtinhchếDNAtừcác

thànhphầnkhác củatếbào

9.2.Quytrình:

9.2.1 Vậtliệu,hóachất,thiếtbị

Bảng9.2.1MẪU

GanbòHOÁCHẤT

Dungdịchlygiải 5mlNaCl1M

Tris100mMpH8.0EDTA25mMpH8.0SDS0.5%

DungdịchProteinaseK 1lọDungdịchphenol/

chloroform/isoamylalcohol(

25:24:1)

1lọ

100%Isopropanol 1lọ70%Ethanol 1lọTE(Tris–EDTA):Tris0,1

M+EDTA0,001M

1lọDỤNGCỤ

Chàycối 1bộEppendorf 2cái

Micropipette 1cáiĐầutíp 1hộpMáylytâm

MáylắcnhiệtBểcáchthuỷ

Lárau 1mlHOÁCHẤT

DungdịchTE(Tris–EDTA):Tris0,1M+EDTA0,001M

1lọDungdịchTRIzol 1lọChloroform 1lọIsopropanol 1lọEthanol70% 1lọNướccất 1bìnhDỤNGCỤ

Chàycối 1bộEppendorf 2cái

50

Micropipette 1cáiĐầutíp 1hộpMáylytâm

● Ứngdụngnghiêncứu,thínghiệmnằmtrongbốicảnhpháttriểntầmquantrọngcủamộtquốcgia.Nghiêncứugópphầnnângcaokiếnthứcbằngcáchkhámphánhữnghiểubiếtmớithông