Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan của cao toàn phần lá đắng Vernonia amygdalina Delile trên chuột nhắt trắng gây độc bởi paracetamol Trình bày quy tình thu hái và chiết xuất cao toàn phần lá cây lá đắng; nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan của cao toàn phần lá đắng trên chuột nhắt trắng gây độc bằng paracetamol; xác định chức năng gan; đánh giá đại thể gan
TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ TỔN THƯƠNG GAN CỦA CAO TOÀN PHẦN LÁ ĐẮNG VERNONIA AMYGDALINA DELILE TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG GÂY ĐỘC BỞI PARACETAMOL HỒ HỒNG THƯƠNG ĐỒNG NAI, THÁNG 8/2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ TỔN THƯƠNG GAN CỦA CAO TOÀN PHẦN LÁ ĐẮNG VERNONIA AMYGDALINA DELILE TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG GÂY ĐỘC BỞI PARACETAMOL Sinh viên thực hiện: HỒ HỒNG THƯƠNG Giảng viên hướng dẫn: ThS ĐOÀN VĂN VIÊN ĐỒNG NAI, THÁNG 8/2021 i MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC HÌNH v LỜI CẢM ƠN viii Chương ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY LÁ ĐẮNG .3 2.1.1 Danh pháp 2.1.2 Mô tả thực vật 2.1.3 Phân bố, sinh thái loài Vernonia amygdalina Del 2.1.4 Thành phần hóa học .4 2.1.5 Tác dụng dược lý 11 2.1.6 Công dụng y học dân gian 14 2.2 TỔNG QUAN VỀ GAN 14 2.2.1 Giải phẫu mô học gan 14 2.2.2 Chức hoạt động sinh lý gan 15 2.3 MỘT SỐ DẠNG BỆNH LÝ THƯỜNG GẶP CỦA GAN 18 2.3.1 Rối loạn chức gan 18 2.3.2 Suy gan 19 2.3.3 Một số xét nghiệm thường dùng đánh giá tổn thương gan 20 2.3.4 Các thuốc có tác dụng bảo vệ gan .22 2.4 Paracetamol 22 2.4.1 Cấu trúc hóa học 22 ii 2.4.2 Tác dụng dược lý 22 2.4.3 Độc tính 23 2.5 Silymarin 23 2.5.1 Cấu trúc hóa học 23 2.5.2 Tác dụng dược lý 24 2.6 MỘT SỐ MƠ HÌNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG PHỤC HỒI TỔN THƯƠNG GAN 24 2.6.1 Mơ hình tổn thương gan cấp tính 24 2.6.2 Mơ hình tổn thương gan mạn tính 25 Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 26 3.1.1 Nguyên liệu động vật thử nghiệm 26 3.1.2 Hóa chất thuốc thử 26 3.1.3 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 26 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 3.2.1 Chiết xuất cao toàn phần .27 3.2.2 Đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 27 3.2.3 Nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng mơ hình gây độc gan chuột paracetamol 28 3.2.4 Xác định chức gan .29 3.2.5 Đánh giá đại thể gan .31 3.2.6 Phương pháp phân tích kết 32 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 33 4.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 33 iii 4.1.1 Kết chiết xuất cao toàn phần Lá đắng 33 4.1.2 Kết đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 34 4.1.3 Kết nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao tồn phần Lá đắng mơ hình gây độc gan chuột paracetamol 43 4.2 BÀN LUẬN 52 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 55 5.1 KẾT LUẬN 55 5.2 ĐỀ NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng anh Tiếng việt ADH Antidiuretic hormone Hormon chống niệu ALP Alkaline phosphatase Phosphatase kiềm ALT Alanine-aminotransferase AST Aspartate-aminotransferase COX Cyclooxygenase Cyclooxygenase CVD Cardiovascular disease Bệnh tim mạch DNA Deoxyribonucleic acid DPPH 2,2 - diphenyl - - - picrylhydrazyl ER Estrogen receptor Thụ thể estrogen HDL High Density Lipoprotein Lipoprotein tỷ trọng cao IC50 The half maximal inhibitory 50 % nồng độ ức chế tối đa concentration LC50 Lethal concentration 50 LDH Lactate dehydrogenase MIC Minimum inhibitory concentration Nồng độ ức chế tối thiểu NSAID Non-steroid anti-inflammatory drug Thuốc kháng viêm Nồng độ gây chết 50 % không steroid v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Vị trí phân loại Lá đắng Vernonia amygdalina theo hệ thống phân loại Takhtajan (2009) Hình 2.2 Đặc điểm hình thái Vernonia amygdalina Hình 2.3 Gan tiểu thùy gan 15 Hình 2.4 Cấu trúc paracetamol 22 Hình 2.5 Cấu trúc hóa học silbyna A, silbyna B, isosilbyna A isosilbyna B 23 Hình 3.1 Quy trình chiết cao toàn phần 27 Hình 4.1 Mẫu dược liệu Lá đắng trước đem xay 33 Hình 4.2 Quy trình chiết xuất Lá đắng 33 Hình 4.3 Đồ thị biểu diễn khối lượng chuột thử nghiệm đánh giá mô hình gây độc tính gan chuột paracetamol .34 Hình 4.4 Đồ thị biểu diễn số AST huyết chuột thử nghiệm đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 36 Hình 4.5 Đồ thị biểu diễn số ALT huyết chuột thử nghiệm đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 38 Hình 4.6 Đồ thị biểu diễn nồng độ creatinin huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) đánh giá mô hình gây độc tính gan chuột paracetamol .39 Hình 4.7 Đồ thị biểu diễn nồng độ protein tồn phần huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 40 Hình 4.8 Gan lơ sinh lý .42 Hình 4.9 Gan lô bệnh 42 Hình 4.10 Gan lơ silymarin 42 Hình 4.11 Đồ thị biểu diễn khối lượng chuột thử nghiệm nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắngError! Bookmark not defined vi Hình 4.12 Đồ thị biểu diễn số AST thử nghiệm nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 45 Hình 4.13 Đồ thị biểu diễn số ALT thử nghiệm nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 47 Hình 4.14 Đồ thị biểu diễn nồng độ creatinin cuối thử nghiệm (ngày 29) nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 48 Hình 4.15 Đồ thị biểu diễn nồng độ protein toàn phần cuối thử nghiệm (ngày 29) nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 49 Hình 4.16 Gan lơ sinh lý .51 Hình 4.17 Gan lô bệnh 51 Hình 4.18 Gan lơ silymarin 51 Hình 4.19 Gan lơ Lá đắng 51 vii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần hóa học Vernonia amygdalina Bảng 2.2 Hoạt tính sinh học chất phân lập từ Vernonia amygdalina chứng minh tác dụng dược lý Bảng 2.3 Những sesquiterpen lacton phân lập từ Vernonia amygdalina Bảng 2.4 Những flavonoid phân lập từ Vernonia amygdalina Bảng 2.5 Những steroid glucosid phân lập từ Vernonia amygdalina 10 Bảng 4.1 Chỉ số AST huyết chuột thử nghiệm đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 35 Bảng 4.2 Chỉ số ALT huyết chuột thử nghiệm đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 37 Bảng 4.3 Nồng độ creatinin huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) đánh giá mô hình gây độc tính gan chuột paracetamol 40 Bảng 4.4 Nồng độ protein toàn phần huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 41 Bảng 4.5 Tỷ lệ khối lượng gan/chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) đánh giá mơ hình gây độc tính gan chuột paracetamol 43 Bảng 4.6 Chỉ số AST huyết chuột thử nghiệm nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 44 Bảng 4.7 Chỉ số ALT huyết chuột thử nghiệm nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 46 Bảng 4.8 Nồng độ creatinin huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 48 Bảng 4.9 Nồng độ protein toàn phần huyết chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 49 Bảng 4.10 Tỷ lệ khối lượng gan/chuột cuối thử nghiệm (ngày 29) nghiên cứu tác dụng điều trị tổn thương gan cao toàn phần Lá đắng 52 viii LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin gửi lơi cam ơn chân thành đến thầy ThS Đồn Văn Viên Thầy ln tận tình bao, ln kiên nhẫn, dành hết tâm huyết truyền đạt cho em kiến thức kinh nghiệm vô quý báu Thầy nhiệt tình dìu dắt, động viên, giúp đơ, khích lệ, truyền động lực cho em suốt quãng thơi gian em học tập hoàn thành nghiên cứu khoa học môn Em xin gửi lơi cam ơn chân thành đến quý thầy, cô, anh chị, bạn mơn dược liệu, mơn hóa sinh, mơn bào chế giúp đơ, bao cho em nhiều kinh nghiệm làm việc, hướng dẫn em sử dụng thiết bị máy móc, tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành cơng việc thơi gian đạt kết qua mong muốn Cam ơn tất ca bạn đợt làm khóa luận năm anh chị làm khóa luận năm trước chia sẻ kiến thức bổ ích, kỉ niệm đẹp ngày tháng căng thẳng, áp lực thật đáng nhớ, đáng trân trọng khoang thơi gian làm khóa luận Cuối cùng, xin gửi lơi cam ơn đến gia đình, bố mẹ yêu thương, hy sinh, chia sẻ động viên Đó thực chỗ dựa tinh thần nguồn cổ vũ lớn lao để hồn thành khóa luận