Luận văn trình bày đánh giá được tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase in vitro của bài thuốc Minh Não Vintong; Đánh giá được tác dụng tăng cường khả năng học tập và ghi nhớ của bài thuốc trên mô hình mê cung nước (Morris water maze) và trên mô hình mê lộ nhiều chữ T (Multiple T maze) của bài thuốc Minh Não Vintong.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM NGUYỄN HẢI PHƢỢNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYM ACETYLCHOLINESTERASE VÀ TÁC DỤNG TĂNG CƢỜNG KHẢ NĂNG HỌC TẬP VÀ GHI NHỚ CỦA BÀI THUỐC MINH NÃO VINTONG TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC HÀ NỘI, NĂM 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM NGUYỄN HẢI PHƢỢNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYM ACETYLCHOLINESTERASE VÀ TÁC DỤNG TĂNG CƢỜNG KHẢ NĂNG HỌC TẬP VÀ GHI NHỚ CỦA BÀI THUỐC MINH NÃO VINTONG TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Chuyên ngành: Y học cổ truyền Mã số: 8720115 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS ĐẬU XUÂN CẢNH HÀ NỘI, NĂM 2020 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực luận văn này, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ động viên quý báu từ thầy cô, đồng nghiệp, gia đình bạn bè Bằng tất kính trọng tình cảm chân thành nhất, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới PGS.TS Đậu Xuân Cảnh, giám đốc Học viện Y dược học Cổ truyền Việt Nam, người thầy hết lòng quan tâm giúp đỡ, tận tình bảo, trực tiếp hướng dẫn từ ngày đầu làm luận văn Xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Hoàng Ngân tồn thể thầy cơ, đồng nghiệp anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược lý thuộc Học viện Quân Y gần gũi, động viên, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi q trình học tập, nghiên cứu môn Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo Sau đại học - Học viện Y dược học Cổ truyền Việt Nam giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập thực luận văn Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới bố mẹ tơi, gia đình, bạn bè người thân tôi, người bên cạnh động viên, ủng hộ, giúp đỡ cho tôi, sát cánh bên tơi vượt qua khó khăn suốt thời gian học tập, nghiên cứu sống Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 30 tháng 09 năm 2020 Học viên Nguyễn Hải Phƣợng LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Hải Phượng, học viên cao học khóa 11 Học viện Y dược học Cổ truyền Việt Nam, chuyên ngành Y học Cổ truyền, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Đậu Xn Cảnh Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm cam kết Hà Nội, ngày 30 tháng 09 năm 2020 Tác giả Nguyễn Hải Phƣợng MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hội chứng sa sút trí tuệ theo y học đại 1.1.1 Khái niệm sa sút trí tuệ 1.1.2 Biểu lâm sàng sa sút trí tuệ 1.1.3 Nguyên nhân gây sa sút tí tuệ 1.1.4 Sơ lƣợc bệnh Alzheimer 1.1.5 Điều trị theo y học đại 13 1.2 Sa sút trí tuệ theo y học cổ truyền 15 1.2.1 Bệnh nguyên, bệnh 15 1.2.2 Phân thể lâm sàng điều trị 16 1.3 Tình hình nghiên cứu tác dụng ức chế emzym Acetylcholinesterase 20 1.3.1 Một số nghiên cứu giới 20 1.3.2 Một số nghiên cứu Việt Nam 21 1.3.3 Một số phƣơng pháp thƣờng dùng nghiên cứu tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase in vitro 21 1.3.4 Một số mơ hình đánh giá tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ động vật thực nghiệm 24 1.4 Tổng quan thuốc Minh não Vintong 29 1.4.1 Thành phần thuốc 29 1.4.2 Phân tích tác dụng thuốc 29 CHƢƠNG 2: 32 CHẤT LIỆU, ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Chất liệu nghiên cứu .32 2.1.1 Bài thuốc nghiên cứu 32 2.1.2 Hóa chất dùng nghiên cứu 33 2.1.3 Dụng cụ trang thiết bị nghiên cứu 33 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu 33 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu: 34 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu: 34 2.4.1 Nghiên cứu tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase in vitro thuốc Minh Não Vintong 34 2.4.2 Đánh giá tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong tập mê cung nƣớc 38 2.4.3 Đánh giá tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong mơ hình mê lộ nhiều chữ T 39 2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 40 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ 41 3.1 Đánh giá tác dụng ức chế emzym Acetylcholinesterase thuốc Minh não Vintong 41 3.2 Tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong tập mê cung nƣớc 41 3.3 Tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong mô hình mê lộ nhiều chữ T 44 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 49 4.1 Bàn luận tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase thuốc Minh Não Vintong .49 4.1.1 Bàn luận phƣơng pháp in vitro 49 4.1.2 Bàn luận kết đánh giá tác dụng ức chế AchE thuốc Minh não Vintong .50 4.2 Bàn luận tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong .50 4.2.1 Bàn luận tập mê cung nƣớc 50 4.2.2 Bàn luận mơ hình mê lộ nhiều chữ T .53 4.2.3 Bàn luận thuốc Minh não Vintong 54 KẾT LUẬN 58 KIẾN NGHỊ .59 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng Việt Tiếng Anh AD Bệnh Alzheimer Alzheimer’s disease ACh Acetylcholine AChE Acetylcholinesterase ATCI Acetylthiocholin iodid Aβ Mảng beta amyloid ChEls Thuốc ức chế Acetylcholinesterase DTNB Cholinesterase inhibitors 5,5‟ - dithiobis - nitrobenzoic acid IC50 Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử Half maximal inhibitory concentration MWM Mê cung nước Morris Morris water maze MTM Mơ hình mê lộ nhiều chữ T Multiple T maze NMDA RNSG N-Methyl-D-Aspartate Flavonol Glycoside phân lập từ Radix Notoginseng flavonol rễ Tam thất glycoside SSTT Sa sút trí tuệ Dementia WHO Tổ chức Y tế Thế giới World Health Organization DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Biểu lâm sàng điển hình bệnh Alzheimer phân loại theo mức độ nặng vừa nhẹ Bảng 1.2 Nhóm thuốc ức chế Acetylcholinesterase 13 Bảng 2.1 Thành phần thuốc Minh não Vintong 32 Bảng 3.1 Giá trị IC50 thuốc Minh não Vingtong Berberin clorid 41 Bảng 3.2 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến thời gian chuột 42 tìm thấy bến đỗ Bảng 3.3 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến quãng đường 43 chuột tìm thấy bến đỗ Bảng 3.4 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến tỉ lệ phần trăm 44 thời gian chuột bơi 1/4 bể trước đặt bến đỗ (ngày 6) Bảng 3.5 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến thời gian chuột 45 tìm thấy khoang đích Bảng 3.6 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến qng đường 46 tìm thấy khoang đích Bảng 3.7 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến thời gian tìm 47 thấy khoang đích ngày Bảng 3.8 Ảnh hưởng thuốc Minh não Vintong đến qng đường 48 tìm thấy khoang đích ngày DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Hình ảnh não người bình thường não người bị bệnh Alzheimer Hình 1.2 Đám rối Protein TAU (tangle of TAU protein) 10 Hình 1.3 Mảng protein dạng bột Amyloid bám quanh tế bào thần 11 kinh Hình 1.4 Cấu tạo tác dụng enzym Acetylcholinesterase 11 Hình 1.5 Cấu tạo mơ hình mê cung nước (Morris water maze) 27 Hình 1.6 Cấu tạo mơ hình mê lộ nhiều chữ T (Multiple T maze) 28 Hình 2.1 Chuột nhắt trắng dịng Swiss trưởng thành dùng nghiên 33 cứu Hình 2.2 Sơ đồ tóm tắt nội dung nghiên cứu 34 Hình 2.3 Quá trình phản ứng diễn phương pháp đo quang sử 35 dụng thuốc thử Ellman Hình 2.4 Sơ đồ quy trình thử nghiệm tác dụng ức chế AchE in vitro 37 ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM NGUYỄN HẢI PHƢỢNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYM ACETYLCHOLINESTERASE VÀ TÁC DỤNG TĂNG CƢỜNG KHẢ NĂNG HỌC TẬP VÀ GHI NHỚ CỦA BÀI THUỐC... acetylcholinesterase tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong thực nghiệm? ?? với mục tiêu: Đánh giá tác dụng ức chế enzym Acetylcholinesterase in vitro thuốc Minh Não Vintong Đánh giá tác dụng. .. Vintong 41 3.2 Tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong tập mê cung nƣớc 41 3.3 Tác dụng tăng cƣờng khả học tập ghi nhớ thuốc Minh Não Vintong mô hình mê lộ