Đang tải... (xem toàn văn)
Thẩm định quy trình định lượng Sitagliptin, Metformin hydrochlorid và xác định giới hạn tạp chất 1Cyanoguanidin trong viên nén bao phim Sitagliptinmetformin 50500 bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao báo cáo nghiên cứu khoa học Trình bày phương pháp nghiên cứu xây dựng và thẩm định quy trình định lượng hoạt chất metformin hydrochlorid và sitagliptin trong viên nén bao phim AGLIPTINMETFORMIN 50500; Xây dựng và thẩm định quy trình kiểm giới hạn tạp 1Cyanoguanidin trong viên nén bao phim SITAGLIPTINMETFORMIN 50500.
TRƢỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƢỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG SITAGLIPTIN, METFORMIN HYDROCHLORID VÀ XÁC ĐỊNH GIỚI HẠN TẠP CHẤT 1-CYANOGUANIDIN TRONG VIÊN NÉN BAO PHIM SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO NGÔ THỊ NGỌC NHƢ ĐỒNG NAI, THÁNG 07/2022 TRƢỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƢỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG SITAGLIPTIN, METFORMIN HYDROCHLORID VÀ XÁC ĐỊNH GIỚI HẠN TẠP CHẤT 1-CYANOGUANIDIN TRONG VIÊN NÉN BAO PHIM SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Sinh viên thực hiện: NGÔ THỊ NGỌC NHƢ Giảng viên hƣớng dẫn: ThS Nguyễn Việt Đức ĐỒNG NAI, THÁNG 07/2022 i TÓM TẮT Đặt vấn đề Đái tháo đƣờng nhóm bệnh rối loạn chuyển hóa, tăng đƣờng huyết dai dẳng thiếu insulin tiết đề kháng với hoạt động insulin Điều dẫn đến bất thƣờng carbohydrat, chất béo protein chuyển hóa đặc trƣng bệnh đái tháo đƣờng Liệu pháp hỗ trợ điều trị có hiệu an tồn cần thiết: Sitagliptinmetformin kết hợp viên nhất, liều cố định sitagliptin ức chế dipeptidyl peptidase-4 metformin biguanid chống tăng đƣờng huyết đạt đƣợc cải thiện lớn việc kiểm soát đƣờng huyết so với hai thành phần bệnh nhân đái tháo đƣờng týp Chính việc kiểm sốt đánh giá chất lƣợng thuốc quan trọng Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: Viên nén bao phim Sitagliptin-Metformin 50/500 Phương pháp nghiên cứu: Thẩm định quy trình định lƣợng metformin hydrochlorid, sitagliptin xác định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin viên nén bao phim Sitagliptin-Metformin 50/500 Kết Định lượng: - Tính tƣơng thích hệ thống + Metfomin: RSD% = 0,16% diện tích pic RSD = 0,06% thời gian lƣu + Sitagliptin: RSD% = 0,26% diện tích pic RSD = 0,17% thời gian lƣu - Tính đặc hiệu - Độ lặp lại: RSD% = 0,57% metformin RSD% = 0,63% sitagliptin ii - Độ xác trung gian: + Metformin: Ftn = 2,472 < F0,05 = 5,050 + Sitaliptin: Ftn = 2,625 < F0,05 = 5,050 → Sự khác biệt kết thu đƣợc kiểm nghiệm viên ngày khác khơng có ý nghĩa mặt thống kê - Độ với tỷ lệ hồi phục: + Metformin hydrochlorid: 100,61 – 101,35% + Sitagliptin: 98,45 – 99,42% - Phƣơng trình hồi quy tuyến tính: + Metformin có dạng ŷ = 153987x, R2 = 0,9997 khoảng tuyến tính 60,64 – 141,48 μg/ml + Sitagliptin có dạng ŷ = 59203x, R2 = 0,9994 khoảng tuyến tính 5,73 – 13,36 μg/ml Tạp 1-cyanoguanidin: - Giới hạn phát hiện: Tại nồng độ LOD có nồng độ - cyanoguanidin 0,02 μg/ml, pic - cyanoguanidin thấy rõ ràng tách biệt khỏi S/N = 12 > Đề nghị - Xây dựng thẩm định quy trình giới hạn tạp khác liên quan đến metformin hydrochlorid - Xây dựng thẩm định quy trình tap chất liên quan sitagliptin iii MỤC LỤC TÓM TẮT i MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ix LỜI CẢM ƠN xi CHƢƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 ĐẠI CƢƠNG VỀ ĐÁI THÁO ĐƢỜNG .3 2.1.1 Định nghĩa đái tháo đƣờng 2.1.2 Phân loại đái tháo đƣờng 2.1.3 Đái tháo đƣờng týp 2.2 ĐIỀU TRỊ ĐÁI THÁO ĐƢỜNG TÝP .4 2.2.1 Mục tiêu điều trị 2.2.2 Các thuốc điều trị đái tháo đƣờng týp 2.3 GIỚI THIỆU VỀ METFORMIN HYDROCHLORID, SITAGLIPTIN, 1CYANOGUANIDIN VÀ CÁC NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN 12 2.3.1 Metformin hydrochlorid 12 2.3.2 Sitagliptin 14 2.3.3 Tạp 1-cyanoguanin 15 2.3.4 Các cơng trình nghiên cứu ngồi nƣớc .15 2.4 Thẩm định quy trình phân tích 18 2.4.1 Định nghĩa .18 2.4.2 Mục đích 18 2.4.3 Phạm vi thẩm định, thẩm định lại 18 2.4.4 Phân loại 19 2.4.5 Các yếu tố cần đƣợc thẩm định QTPT 20 CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 iv 3.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 27 3.1.1 Chất chuẩn .27 3.1.2 Mẫu thẩm định 27 3.2 NGUYÊN VẬT LIỆU – TRANG THIẾT BỊ 28 3.2.1 Nguyên vật liệu .28 3.2.2 Trang thiết bị 29 3.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 3.3.1 Thẩm định quy trình định lƣợng Metformin hydrochlorid Sitagliptin phƣơng pháp HPLC 30 3.3.2 Thẩm định quy trình xác định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin phƣơng pháp HPLC 37 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .41 4.1 KẾT QUẢ 41 4.1.1 Kết thẩm định quy trình định lƣợng metformin hydrochlorid sitagliptin 41 4.1.2 Kết thẩm định quy trình xác định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin .68 4.1.3 Giới hạn phát (LOD) .72 4.2 BÀN LUẬN .73 4.2.1 Định lƣợng metformin hydrochorid sitagliptin viên nén bao phim SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 73 4.2.2 Xác định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin viên nén bao phim SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 73 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 75 5.1 KẾT LUẬN 75 5.1.1 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng metformin hydrochorid sitagliptin viên nén bao phim SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 75 5.1.2 Xây dựng thẩm định quy trình xác định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin viên nén bao phim SITAGLIPTIN-METFORMIN 50/500 76 5.2 ĐỀ NGHỊ 76 v TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ nguyên ACN Acetonitril ATP Adenosin triphosphat BN Bệnh nhân Cmax Nghĩa Phân tử mang lƣợng Nồng độ thuốc tối đa huyết tƣơng DĐVN V Dƣợc điển Việt Nam V ĐTĐ Đái tháo đƣờng HDL HPLC HPMC LADA LDL High Density Lipoprotein Cholesterol lipoprotein tỉ trọng cao Cholesterol High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao Hydroxypropyl methylcellulose Tá dƣợc dính Latent Autoimmune Diabetes of Đái tháo đƣờng tự miễn diễn tiến Adulthood Low Density Lipoprotein Cholesterol chậm Cholesterol lipoprotein tỉ trọng thấp Giới hạn phát LOD Limit of detection MeOH Methanol NPH Neutral Protamin Hagedorn Insulin tác dụng trung bình PDA Diode Array Dải diod quang PEG Polyethylen glycol QTPT RSD Quy trình phân tích Relative standard deviation SKĐ UV-Vis Độ lệch chuẩn tƣơng đối Sắc ký đồ Ultra Violet - Visible Quan phổ tử ngoại khả kiến vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Tóm tắt ƣu nhƣợc điểm thuốc viên hạ glucose máu đƣờng uống thuốc tiêm không thuộc nhóm insulin [4] Bảng 2.2 Một số cơng trình nghiên cứu liên quan đến metformin hydrochlorid 15 Bảng 3.1 Mẫu thẩm định định lƣợng .27 Bảng 3.2 Mẫu thẩm định giới hạn tạp 1-cyanoguanidin 28 Bảng 3.3 Danh mục dung mơi hóa chất sử dụng phân tích định lƣợng .29 Bảng 3.4 Danh mục dung mơi hóa chất sử dụng phân tích giới hạn tạp chất .29 Bảng 3.5 Danh mục thiết bị sử dụng phân tích định lƣợng 29 Bảng 3.6 Danh mục thiết bị sử dụng phân tích giới hạn tạp chất .30 Bảng 3.7 Nồng độ pha loãng metformin hydrochlorid sitagliptin 34 Bảng 3.8 Tỉ lệ pha động 37 Bảng 4.1 Kết thử tính tƣơng thích hệ thống metformin hydrochlorid 41 Bảng 4.2 Kết thử tính tƣơng thích hệ thống sitagliptin 42 Bảng 4.3 Kết tính tuyến tính metformin hydrochlorid sitagliptin phosphat 47 Bảng 4.4 Kết độ metformin hydrochlorid 49 Bảng 4.5 Kết độ sitagliptinphosphat 50 Bảng 4.6 Kết độ lặp lại metformin hydrochlorid sitagliptin 52 Bảng 4.7 Kết độ xác trung gian định lƣợng metformin hydrochlorid .53 Bảng 4.8 Kết độ xác trung gian định lƣợng sitaliptin 54 Bảng 4.9 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử thay đổi tốc độ dòng 0,54 ml/phút metformin hydrochlorid .56 Bảng 4.10 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử thay đổi tốc độ dòng 0,66 ml/phút metformin hydrochlorid 58 Bảng 4.11 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử thay đổi tốc độ dòng 0,66 ml/phút sitagliptin 59 Bảng 4.12 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử sử dụng dung dịch đệm pH 5,3 metformin hydrochlorid 61 viii Bảng 4.13 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử sử dụng dung dịch đệm pH 5,3 sitaglitin 62 Bảng 4.14 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử sử dụng dung dịch đệm pH 5,7 metformin hydrochlorid 63 Bảng 4.15 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử sử dụng dung dịch đệm pH 5,7 sitagliptin 64 Bảng 4.16 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử thay đổi cột sắc ký metformin hydrochlorid 65 Bảng 4.17 Kết thực nghiệm lần tiêm lặp lại dung dịch chuẩn, thử thay đổi cột sắc ký sitagliptin 66 Bảng 4.18 Kết thử tính tƣơng thích hệ thống 1-cyanoguanidin 68 Bảng 4.19 Kết giới hạn phát 1-cyanoguanidin 72