TỔNG QUAN
TỔNG QUAN VỀ BÀI THUỐC NGỌC BÌNH PHONG TÁN
1.1.1 Bài thuốc Ngọc bình phong tán
Ngọc bình phong tán (NBPT) là một bài thuốc cổ truyền có lịch sử sử dụng hơn 800 năm Nguồn gốc của bài thuốc này được cho là từ cuốn y thư Đan khê tâm pháp (Dan Xi Xin Fa) của Zhu Danxi, được biên soạn dưới triều đại nhà Nguyên (1279 – 1368).
Bài thuốc này lần đầu tiên được ghi nhận trong cuốn Cứu nguyên phương (Jiu yuan fang) từ thời nhà Minh, có niên đại năm 1213, tuy nhiên, tài liệu này hiện đã bị thất lạc Đây có thể là nguồn gốc ban đầu của bài thuốc này.
Bài thuốc NBPT gồm 3 vị thuốc (theo Cứu nguyên phương):
Nhiều tài liệu y học Trung Quốc ghi nhận các bài thuốc có thành phần gồm Hoàng kỳ (HK), Bạch truật (BT) và Phòng phong (PP) Tuy nhiên, không phải tất cả các bài thuốc đều giữ nguyên tên gốc và liều lượng các vị thuốc cũng khác nhau Trong cuốn Cứu nguyên phương, tỷ lệ của các vị thuốc là 2:2:1, trong khi bài NBPT trong Đan Khê tâm pháp sử dụng tỷ lệ 1:2:1 Bài thuốc Bạch truật phòng phong tán trong cuốn Đông y Bảo giám (Dongui Bogam) ghi nhận tỷ lệ 1:1:2.
Bài thuốc bao gồm các thành phần được tán thành bột mịn và trộn lẫn, liều dùng hàng ngày là 12 g chia làm 2 lần Ngoài ra, thuốc cũng có thể được sắc từ 9 g thành phần cùng với 3 lát Sinh khương và 1 miếng Đại táo trong 1,5 bát nước lớn; liều lượng có thể điều chỉnh theo nhu cầu.
Việc sử dụng thuốc NBPT có nhiều tác dụng hữu ích, chính among them là khí kiện tỳ và cố biểu, giúp cải thiện trường hợp bị hầm hủa và vệ khí không ổn định Nó cũng có thể giúp tăng cường sức khỏe đối với những người có xu hướng bị cảm mạo [6] (Note: I have rewritten the given content into a coherent paragraph while retaining its original meaning This version emphasizes the benefits of NBPT, including improving conditions of feeling sluggish and stabilizing one's energy, and also mentions its positive effects on people prone to feeling cold.)
Trong lâm sàng, NBPT được sử dụng để điều trị nhiều tình trạng như cảm lạnh, nhiễm khuẩn đường hô hấp, viêm mũi dị ứng, mồ hôi tự ra, và hen phế quản Nó đã được chứng minh có tác dụng điều hoá miễn dịch, giúp ngăn ngừa nhiễm khuẩn và virus, bao gồm virus cúm và virus SARS.
Trong bài thuốc NBPT, HK được sử dụng với liều cao để ích khí, cố biểu và chỉ hãn, đóng vai trò chủ dược BT hỗ trợ HK trong việc kiện tỳ và ích khí để chỉ hãn, trong khi PP giúp khu phong và chống lại phong tà ở biểu Sự phối hợp giữa HK và PP giúp dẫn HK ra ngoài biểu, kiểm soát phong tà, đồng thời tránh được sự lưu giữ ngoại tà và trạng thái phát biểu quá mức Bài thuốc này thể hiện nguyên tắc “trong bổ có tán, trong tán có bổ”.
Trong Dược điển Trung Quốc 2015, bài thuốc NBPT được mô tả qua 4 dạng bào chế khác nhau, bao gồm túi trà (Yupingfeng Tea Bags), viên nang (Yupingfeng Capsules), cốm (Yupingfeng Granules) và hợp dịch (Yupingfeng Mixture).
Các chế phẩm của bài thuốc NBPT được định tính bằng các phép thử:
– Định tính HK: Phương pháp sắc ký lớp mỏng (SKLM), so sánh với HK chuẩn hoặc astrgalosid IV chuẩn [7]
– Định tính BT: Phương pháp SKLM, so sánh với BT chuẩn [7]
– Định tính PP: Phương pháp SKLM, so sánh với PP chuẩn hoặc prim-O- glucosylcimifugin chuẩn và 5-O-methylvisamminosid chuẩn [7] b Định lượng
Dược điển Trung Quốc 2015 quy định hàm lượng astragalosid IV là tiêu chí định lượng cho các chế phẩm của bài thuốc NBPT Phương pháp HPLC được sử dụng để xác định hàm lượng astragalosid IV.
– Trong túi trà: không thấp hơn 0,96 mg astragalosid IV/túi 5 g [7]
– Trong viên nang: không thấp hơn 0,60 mg astrgalosid IV/viên [7]
– Trong cốm: không thấp hơn 3,5 mg astragalosid IV/gói 3,5 g [7]
– Trong hợp dịch: không thấp hơn 0,12 mg astragalosid IV/ml [7]
1.1.2 Thông tin về các vị thuốc
Dược liệu Hoàng kỳ, hay còn gọi là Radix Astragali, là rễ phơi hoặc sấy khô của cây Hoàng kỳ Mạc Giáp, thuộc loài Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.
Hoàng kỳ Mông Cổ [Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge var mongholicus (Bge.) Hsiao], họ Đậu (Fabaceae) [8, 9] a Đặc điểm thực vật và phân bố của cây
Hoàng kỳ Mông Cổ có đặc điểm tương tự với loại khác, nhưng khác biệt ở chỗ lá chét nhỏ hơn (dài từ 4 đến 9 mm), có từ 25 đến 37 lá chét, tràng hoa dài hơn và quả rộng hơn (1,1 đến 1,5 cm), không có lông.
HK là cây ưa ánh sáng và độ ẩm, thích hợp với đất cát thoát nước tốt, phát triển tốt trong khí hậu ôn đới ẩm với nhiệt độ trung bình khoảng 15°C Cây chủ yếu phân bố ở các tỉnh Đông Bắc, Bắc và Tây Bắc Trung Quốc, cũng như ở Mông Cổ và Hàn Quốc Tại Việt Nam, HK đã được trồng thử nghiệm và phát triển, nhưng chưa được trồng rộng rãi.
Hà thủ ô (HK) thường được thu hoạch sau 3 năm trồng, với chất lượng tốt hơn sau 6 – 7 năm Rễ của hà thủ ô thường được đào vào đầu mùa xuân hoặc cuối mùa thu, sau đó được rửa sạch đất cát, cắt bỏ đầu rễ và rễ con để chế biến.
– Hoàng kỳ phiến: Loại bỏ tạp chất, phân loại to, nhỏ, rửa sạch, ủ mềm, thái phiến dày, phơi khô [9]
TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP BÀO CHẾ BỘT CAO KHÔ
1.2.1 Định nghĩa và phân loại cao thuốc
Cao thuốc được chia thành 3 loại:
Cao lỏng là một dạng chất lỏng hơi sánh, mang mùi vị đặc trưng của dược liệu được sử dụng, trong đó cồn và nước là hai dung môi chính Theo quy ước, nếu không có chỉ dẫn khác, 1 mL cao lỏng tương ứng với 1 g dược liệu được dùng để chế biến cao thuốc.
– Cao đặc: là khối đặc quánh; hàm lượng dung môi sử dụng còn lại trong cao không quá 20% [9]
– Cao khô: là khối hoặc bột khô, đồng nhất nhưng rất dễ hút ẩm Cao khô không được có độ ẩm lớn hơn 5% [9]
1.2.2 Các phương pháp chiết xuất
1.2.2.1 Khái niệm về chiết xuất và phân loại
Chiết xuất là quá trình sử dụng dung môi thích hợp để hòa tan và tách các hoạt chất có tác dụng điều trị từ dược liệu, loại bỏ phần không tan Sản phẩm chiết xuất có thể ở ba dạng chính: dịch chiết toàn phần (như cao thuốc, cồn thuốc), các nhóm hoạt chất chọn lọc (như alcaloid, flavonoid, phenolic, anthraquinon), hoặc các hợp chất tinh khiết được phân lập (như Rutin, berberin, rotundin, artemisinin) Tùy thuộc vào mục đích sử dụng, quá trình chiết xuất sẽ tạo ra các sản phẩm phù hợp với một trong ba dạng này.
Hiện nay, trong phòng thí nghiệm có nhiều phương pháp chiết xuất được phân loại theo nhiều cách khác nhau Phương pháp chiết xuất thông thường bằng dung môi dựa trên sự lựa chọn dung môi kết hợp với nhiệt độ và khuấy trộn Các phương pháp này được chia thành hai loại chính: phương pháp chiết lạnh, bao gồm ngâm lạnh và ngấm kiệt, và phương pháp chiết nóng, với các kỹ thuật như sắc, hầm, hãm và chiết soxhlet.
Ngoài các kỹ thuật chiết xuất truyền thống, hiện nay nhiều phương pháp mới đã được áp dụng rộng rãi, mang lại hiệu quả cao trong việc chiết xuất các hợp chất tự nhiên cho nhiều ngành công nghiệp như dược phẩm, mỹ phẩm, thực phẩm và công nghệ hóa học Một số phương pháp tiên tiến bao gồm chiết xuất hỗ trợ sóng siêu âm, chiết xuất vi sóng, chiết xuất lỏng siêu tới hạn và chiết xuất bằng dung môi dưới áp lực cao.
1.2.2.2 Một số phương pháp chiết xuất hiện đại
Chiết xuất có tác động của siêu âm (Ultrasonication Assisted Extraction) là phương pháp cải tiến sử dụng sóng siêu âm tần số cao để tăng cường hiệu quả chiết xuất Sóng siêu âm hoạt động trong khoảng tần số từ 18 kHz đến 100 MHz, với nhiều ứng dụng trong công nghiệp như làm sạch, tăng cường phản ứng hóa học, nhũ hóa, khử khuẩn, đồng nhất hóa, và cải thiện khả năng hòa tan Phương pháp này cũng giúp phá vỡ tế bào sinh học, hỗ trợ trong các quy trình như chiết xuất, làm khô, lọc, kết tinh và đông khô.
Chiết xuất bằng vi sóng (Microwave-assisted Extraction) là một phương pháp mới, vượt trội hơn so với các phương pháp chiết truyền thống Phương pháp này nổi bật nhờ tốc độ chiết xuất nhanh, lượng dung môi sử dụng ít, chi phí thấp và tính thân thiện với môi trường.
Phương pháp chiết xuất lỏng siêu tới hạn là một kỹ thuật chiết xuất sử dụng dung môi ở trạng thái siêu tới hạn, khi hợp chất đạt nhiệt độ và áp suất cao hơn giá trị tới hạn Ở trạng thái này, hợp chất không còn ở thể lỏng nhưng cũng chưa chuyển thành thể khí, cho phép tối ưu hóa quá trình chiết xuất.
1.2.3 Phương pháp bào chế bột cao khô
Để hiện đại hóa các dạng bào chế từ dược liệu, nghiên cứu này chuyển đổi bài thuốc NBPT từ dạng bột tán hoặc nước sắc sang dạng cao khô Việc này nhằm tăng cường độ ổn định, tiện lợi trong sử dụng, dễ dàng phân liều và thuận tiện hơn trong bảo quản và vận chuyển Dạng cao khô sẽ được sử dụng làm nguyên liệu bán thành phẩm cho các nghiên cứu bào chế viên nang hoặc viên nén trong tương lai.
Các phương pháp tạo bột cao khô bao gồm sấy chân không, sấy tĩnh, phun sấy và sấy vi sóng Trong số này, phun sấy và sấy vi sóng là hai phương pháp hiện đại với nhiều ưu điểm vượt trội Tuy nhiên, với điều kiện phòng thí nghiệm hiện tại, phương pháp phun sấy được lựa chọn làm phương pháp chính để tạo bột cao khô.
* Phương pháp phun sấy tạo bột cao khô
Quá trình phun sấy thường gồm các giai đoạn chính sau [35]:
Trước khi phun sấy, nguyên liệu thường được cô đặc đến nồng độ thích hợp để đảm bảo chất lượng sản phẩm và tiết kiệm năng lượng, thời gian Nồng độ nguyên liệu thích hợp có ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả sản phẩm cũng như hiệu suất của quá trình phun sấy Do đó, bước chuẩn bị này là rất quan trọng và không thể bỏ qua.
Giọt chất lỏng từ đầu phun tiếp xúc với không khí nóng, có thể theo cùng chiều, ngược chiều hoặc kết hợp Không khí khô được đưa vào từ bên ngoài qua quạt cấp khí, sau đó đi qua bộ lọc và thiết bị làm nóng, dẫn đến việc bốc hơi hơn 95% lượng dung môi trong các giọt chỉ trong vài giây.
Quá trình làm khô giọt diễn ra qua hai giai đoạn: giai đoạn đầu, độ ẩm bên trong giọt đủ để thay thế lượng chất lỏng đã bốc hơi ở bề mặt, dẫn đến bốc hơi với tỷ lệ ổn định; giai đoạn hai bắt đầu khi độ ẩm không còn đủ để duy trì điều kiện bão hòa, gây khô bề mặt giọt Sau đó, quá trình bốc hơi phụ thuộc vào sự khuếch tán của dung môi qua lớp vỏ khô, lớp này sẽ dày lên theo thời gian.
NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU
– Dược liệu: Các thành phần trong bài thuốc NBPT được cung cấp bởi Công ty
Cổ phần Dược phẩm Trung ương Mediplantex, cụ thể như sau:
Bảng 2.1 Dược liệu sử dụng trong nghiên cứu
STT Thành phần bài thuốc
Bộ phận dùng Tên khoa học Tiêu chuẩn
1 Hoàng kỳ Rễ Radix Astragali membranacei DĐVN V
2 Bạch truật Thân rễ Rhizoma Atractylodis macrocephalae DĐVN V
3 Phòng phong Rễ Radix Saposhnikoviae divaricatae DĐVN V
– Hoá chất, dung môi dùng cho nguyên cứu được tổng hợp trong Bảng 2.2
Bảng 2.2 Hoá chất, dung môi sử dụng trong nghiên cứu
STT Hoá chất, dung môi Xuất xứ Tiêu chuẩn
Số lô: AGN21-537083-1 Hàm lượng: 98% Mã: AG004ZSE
Số lô: PRF21060444 Hàm lượng: 98%
Số lô: PRF10010701 Hàm lượng: 98%
4 Malto dextrin Trung Quốc BP 2014
7 Acid acetic băng Trung Quốc BP 2009
8 Acid percloric Trung Quốc BP 2009
9 n-Butanol Trung Quốc Tinh khiết phân tích
10 Ethyl acetat Trung Quốc Tinh khiết phân tích
12 Methanol Merck, Đức Tinh khiết phân tích
13 Cloroform Merck, Đức Tinh khiết phân tích
14 Nước cất 2 lần Việt Nam DĐVN V
2.1.2 Thiết bị và dụng cụ
– Cân kỹ thuật GB1302 (Mettler Toledo, Thuỵ Sĩ)
– Cân phân tích ML204 (Mettler Toledo, Thuỵ Sĩ)
– Bể siêu âm Elmasonic S100H (Elma, Đức)
– Máy cô quay chân không EYELA N-1200B (Eyela, Nhật Bản)
– Máy quang phổ Jasco V-730 (Jasco, Nhật Bản)
– Máy đo hàm ẩm Adam AMB 310 (Adam, Mỹ)
– Hệ thống phun sấy LPG5 (Trung Quốc)
– Các dụng cụ thí nghiệm khác như: ống nghiệm, ống đong, cốc có mỏ, phễu lọc, giấy lọc, pipet,…
Nội dung nghiên cứu chính của đề tài được thực hiện tại Trung tâm Nghiên cứu Ứng dụng và Sản xuất Thuốc thuộc Học viện Quân y, cùng với Viện Đào tạo Dược của Học viện Quân y.
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1 Nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng saponin toàn phần trong nguyên liệu, dịch chiết và bột cao khô của bài thuốc Ngọc bình phong tán bằng quang phổ UV-Vis
Bài thuốc NBPT kết hợp ba vị thuốc HK, BT, PP mang lại hiệu quả điều trị chứng hư lao Thành phần saponin trong dược liệu HK, đặc biệt là astragalosid IV (AG IV), đã được nghiên cứu và công nhận với tác dụng hỗ trợ điều trị bệnh này Nhóm hoạt chất này cũng được xác định có hàm lượng lớn trong bài thuốc.
Nhóm nghiên cứu xác định rằng thành phần saponin là yếu tố quan trọng nhất trong bài thuốc, với lượng lớn dược liệu Do đó, saponin được coi là nhóm chất chỉ điểm để tiếp tục các nghiên cứu về các yếu tố chiết xuất, bào chế cao khô và xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm Từ các tài liệu tham khảo, nhóm đã phát triển phương pháp định lượng saponin toàn phần trong nguyên liệu, các phân đoạn dịch chiết và bột cao khô của bài thuốc NBPT bằng quang phổ UV-Vis.
– Các phân đoạn dịch chiết của bài thuốc NBPT
– Bột cao khô Vệ khí khang bào chế từ bài thuốc NBPT
2.2.1.2 Chuẩn bị dung dịch thử và dung dịch chuẩn a Dung dịch chuẩn
Cân chính xác 100 mg AG IV chuẩn và hòa tan trong 100 mL methanol để thu được dung dịch chuẩn gốc với nồng độ 1000 μg/mL Từ dung dịch chuẩn gốc, tiến hành hút chính xác các lượng xác định và pha loãng bằng methanol để tạo ra các dung dịch chuẩn làm việc có nồng độ từ 100 đến 600 μg/mL.
Để chiết xuất mẫu dược liệu, cần cân chính xác khoảng 2,50 g bột bài thuốc NBPT, sau đó thêm 50 mL methanol và thực hiện chiết hồi lưu trong 1 giờ ở nhiệt độ sôi, lặp lại quy trình chiết 3 lần Sau khi thu được toàn bộ dịch chiết, tiến hành cô thu hồi dung môi dưới áp suất giảm và định mức bằng methanol đến thể tích yêu cầu.
Để thực hiện quy trình chiết xuất, đầu tiên, lấy 50 mL dung dịch và hút chính xác 5 mL Đun bốc hơi dung môi cho đến khi còn khoảng 1 mL, sau đó thêm 10 mL nước và lắc đều Chuyển hỗn hợp vào bình chiết, tiếp theo thêm 15 mL n-butanol và lắc đều trong 5 phút Cuối cùng, để yên và gạn lấy phần dung dịch n-butanol, trong khi phần dung dịch nước sẽ tiếp tục được lắc thêm.
Gộp 10 mL và 5 mL n-butanol, sau đó cô đặc hỗn hợp Hòa tan cắn trong ethanol 50%, chuyển vào bình định mức 50 mL và bổ sung ethanol 50% đến vạch Lọc qua giấy lọc, loại bỏ 10 mL dịch lọc đầu và sử dụng phần dịch lọc còn lại để thực hiện phản ứng đo quang.
Mẫu dịch chiết là sản phẩm thu được từ quá trình chiết xuất, trong đó dung môi được cô đặc dưới áp suất giảm và điều chỉnh đến thể tích phù hợp, tương tự như quy trình xử lý mẫu dược liệu.
– Mẫu bột cao khô Vệ khí khang: Cân chính xác khoảng 0,5 g bột cao khô, thêm
100 mL ethanol 50%, chiết siêu âm ở 70°C trong 30 phút Sau đó tiến hành tương tự như mẫu dược liệu
2.2.1.3 Thực hiện phản ứng Rosenthaler
Hút chính xác 1 mL dung dịch thử hoặc dung dịch chuẩn vào ống nghiệm và cô đến cắn Thêm 0,2 mL dung dịch vanilin 5%/acid acetic và 1,2 mL acid percloric 72% vào ống nghiệm chứa cắn Đậy kín ống nghiệm và ủ trong parafin lỏng ở 70°C.
Ngâm ống nghiệm trong nước đá trong 20 phút, sau đó chuyển dung dịch vào bình định mức 10 mL Tiếp theo, bổ sung ethyl acetat đến vạch cần thiết để thu được dung dịch, rồi tiến hành đo mật độ quang.
Xây dựng đường hồi quy tuyến tính giúp biểu diễn mối quan hệ giữa mật độ quang và nồng độ của dung dịch AG IV chuẩn (μg/mL) thông qua phương trình y = ax + b.
Bằng cách sử dụng phương trình hồi quy tuyến tính cùng với mật độ quang đo của các mẫu thử, chúng ta có thể xác định nồng độ và hàm lượng saponin toàn phần trong các mẫu này.
2.2.2 Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết xuất bài thuốc Ngọc bình phong tán
2.2.2.1 Tiêu chuẩn hoá nguyên liệu
– Về tiêu chuẩn chất lượng: Các dược liệu (HK, BT và PP) đạt tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam V
Các dược liệu được sấy ở nhiệt độ 60°C cho đến khi độ ẩm giảm dưới 10%, sau đó được nghiền thành bột thô Bột dược liệu tiếp tục được sấy ở 60°C trong 2 giờ Cuối cùng, bột nguyên liệu được đóng gói trong túi PE kín 2 lớp và bảo quản ở nhiệt độ phòng cho đến khi sử dụng.
2.2.2.2 Phương pháp điều chế dịch chiết
Các dược liệu được cân theo tỷ lệ và trộn đều trước khi tiến hành điều chế dịch chiết bài thuốc NBPT Đầu tiên, cân 7,50 g bột bài thuốc và chuyển vào bình chiết, sau đó thêm dung môi chiết và thực hiện quá trình chiết trong thời gian xác định Sau khi chiết xong, lọc để thu lấy phần dịch chiết Nếu chiết hai lần, sau lần chiết đầu tiên, cần ép kiệt bã, thêm dung môi và tiếp tục chiết, rồi lọc để thu dịch chiết Cuối cùng, gộp các phần dịch chiết lại, cô thu hồi dung môi dưới áp suất giảm và định mức bằng dung môi chiết trong bình định mức 50 mL.
2.2.2.3 Các thông số khảo sát để xây dựng quy trình chiết xuất
Trong quá trình điều chế dịch chiết, tiến hành khảo sát các thông số sau:
– Phương pháp chiết xuất: chiết hồi lưu, chiết Soxhlet, chiết siêu âm, ngâm lạnh – Loại dung môi chiết xuất: nước, ethanol 30%, ethanol 50%, ethanol 70% và ethanol 96%
– Số lần chiết xuất: 1 lần, 2 lần, 3 lần, 4 lần
2.2.2.4 Căn cứ để khảo sát lựa chọn thông số quy trình
Trong quá trình điều chế dịch chiết, thông số quy trình được lựa chọn dựa vào hiệu suất chiết xuất saponin toàn phần trong dịch chiết
Hiệu suất chiết xuất saponin toàn phần được tính theo công thức:
H sp tp (%) = HL sp tt
Trong đó: H sp tp : Hiệu suất chiết xuất saponin toàn phần
HL sp tt : Hàm lượng saponin trong dịch chiết (μg/mL)
HL sp lt : Hàm lượng saponin trong dược liệu (μg/mL)
2.2.3 Nghiên cứu xây dựng quy trình bào chế bột cao khô Vệ khí khang từ bài thuốc Ngọc bình phong tán bằng phương pháp phun sấy
2.2.3.1 Chuẩn bị dịch phun sấy
Sau khi khảo sát quy trình chiết xuất, tiến hành chiết xuất theo quy trình đã xây dựng Dịch chiết được cô đặc bằng cách thu hồi dung môi dưới áp suất giảm cho đến khi thu được cao lỏng Cao lỏng NBPT sau đó được thêm tá dược và nước để tạo ra dịch phun với hàm lượng chất rắn và tỷ lệ tá dược theo các điều kiện khảo sát.
2.2.3.2 Các thông số khảo sát để xây dựng quy trình phun sấy
Trong quá trình phun sấy, tiến hành khảo sát các thông số sau:
– Loại tá dược hỗ trợ phun sấy: malto dextrin (MD) và aerosil (AE)
– Nhiệt độ phun sấy và tốc độ cấp dịch
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN
Xác định bước sóng hấp thụ quang cực đại
Kết quả quét phổ hấp thụ của dung dịch AG IV chuẩn sau khi thực hiện phản ứng Rosenthaler được thể hiện ở Hình 3.1
Hình 3.1 Bước sóng hấp thụ quang cực đại của dung dịch AG IV sau phản ứng Rosenthaler
Bước sóng hấp thụ cực đại của dung dịch AG IV chuẩn sau phản ứng Rosenthaler được xác định là 591 nm, cho thấy sự lựa chọn bước sóng này là phù hợp cho các phân tích tiếp theo.
591 nm để định lượng saponin toàn phần trong bài thuốc NBPT.
Thẩm định phương pháp phân tích
3.1.2.1 Khoảng tuyến tính và đường chuẩn
Tiến hành xây dựng đường chuẩn với dãy dung dịch AG IV chuẩn có nồng độ trong khoảng 100 – 600 μg/ml Kết quả được thể hiện ở Bảng 3.11 và Hình 3.2
Bảng 3.1 Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang theo nồng độ của AG IV
STT Nồng độ (μg/mL) Độ hấp thụ quang
Hình 3.2 Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang theo nồng độ của AG IV
Trong nghiên cứu, Hình 3.2 chỉ ra rằng độ hấp thụ quang trong khoảng nồng độ từ 100 – 600 μg/mL của AG IV có mối quan hệ tuyến tính, với phương trình hồi quy y = 0,0019x + 0,0065 và hệ số R² = 0,9993 Điều này cho phép áp dụng phương pháp quang phổ UV-Vis tại bước sóng 591 nm để định lượng saponin toàn phần trong dược liệu, dịch chiết và cao khô của bài thuốc NBPT.
Tiến hành khảo sát độ lặp lại của phương pháp với 6 mẫu thử có cùng điều kiện chiết Kết quả được thể hiện ở Bảng 3.2 y = 0,0019x + 0,0065 R² = 0,9993
Nồng độ AG IV (μg/mL)
Bảng 3.2 Kết quả khảo sát độ lặp lại của phương pháp
STT Khối lượng bài thuốc (g) Mật độ quang Hàm lượng saponin (mg/g)
Bảng 3.2 cho thấy: Phương pháp có độ lặp lại cao với giá trị độ lệch chuẩn tương đối RSD < 2% của hàm lượng saponin ngoại suy từ đường chuẩn
Tiến hành khảo sát độ đúng của phương pháp bằng cách thêm chính xác 1 lượng
AG IV chuẩn đã biết hàm lượng saponin toàn phần và xác định độ thu hổi Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp được thể hiện ở Bảng 3.3
Bảng 3.3 Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp
STT Lượng chuẩn thêm vào (μg) Độ hấp thụ quang Lượng chuẩn tìm lại (μg) Độ thu hồi (%)
Phương pháp phân tích được trình bày trong Bảng 3.3 cho thấy độ thu hồi đạt từ 97,4% đến 101,7%, với độ lệch chuẩn tương đối RSD dưới 2% Điều này chứng tỏ rằng phương pháp phân tích này đáp ứng yêu cầu về độ chính xác.
KẾT QUẢ KHẢO SÁT XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT
3.2.1 Kết quả đánh giá một số chỉ tiêu của nguyên liệu đầu vào
3.2.1.1 Kết quả xác định hàm ẩm dược liệu
Các dược liệu HK, BT, PP được trộn theo tỷ lệ cụ thể trong bài thuốc Để xác định hàm ẩm của hỗn hợp dược liệu, sử dụng máy đo hàm ẩm tự động Adam AMB 310, cân khoảng 2 – 4 g dược liệu và sấy ở nhiệt độ 105°C trong 3 giờ Quá trình này được thực hiện trên 5 mẫu và giá trị trung bình được ghi nhận Kết quả chi tiết được trình bày trong Bảng 3.4.
Bảng 3.4 Kết quả xác định hàm ẩm của dược liệu (n =5)
Mẫu Khối lượng hỗn hợp dược liệu (g) Độ ẩm (%)
Kết quả Bảng 3.4 cho thấy: Hàm ẩm của bột bài thuốc NBPT là 8,72%
3.2.1.2 Kết quả định lượng saponin toàn phần trong bài thuốc Ngọc bình phong tán Định lượng saponin toàn phần trong bài thuốc NBPT bằng phương pháp quang phổ UV-Vis như đã mô tả ở mục 2.2.2 cho kết quả được trình bày ở Bảng 3.5
Bảng 3.5 Hàm lượng saponin toàn phần trong bài thuốc NBPT
Mẫu Khối lượng bài thuốc (g)
V (mL) Mật độ quang k Hàm lượng saponin (mg/g)
Mẫu Khối lượng bài thuốc (g)
V (mL) Mật độ quang k Hàm lượng saponin (mg/g)
Ghi chú: k là hệ số pha loãng
Bảng 3.5 cho thấy: Hàm lượng saponin toàn phần tính theo AG IV trong bài thuốc NBPT là 55,37 ± 0,94 mg/g tính theo dược liệu khô kiệt
3.2.2 Kết quả khảo sát lựa chọn phương pháp chiết xuất
Chiết xuất bài thuốc NBPT có thể thực hiện qua nhiều phương pháp khác nhau như chiết hồi lưu, chiết siêu âm, chiết Soxhlet và ngâm lạnh Các điều kiện và kết quả của quá trình chiết xuất được thể hiện chi tiết trong Bảng 3.6.
Bảng 3.6 Ảnh hưởng của phương pháp đến hiệu suất chiết xuất saponin
Nước 10/1 100°C 1 giờ 27,15 ± 1,13 49,03 ± 2,04 Nước 10/1 100°C 3 giờ 31,07 ± 0,90 56,11 ± 1,62 Siêu âm Nước 10/1 80°C 1 giờ 31,34 ± 0,99 56,60 ± 1,78 Soxhlet
Ngâm lạnh Nước 10/1 Nhiệt độ phòng 48 giờ 23,00 ± 0,55 41,54 ± 1,00
Phương pháp chiết siêu âm với tỷ lệ DM/DL 10/1 ở 80°C trong 1 giờ đạt hiệu suất chiết saponin cao nhất là 56,60%, gần tương đương với phương pháp chiết hồi lưu trong 3 giờ (56,11%) và vượt trội hơn so với phương pháp Soxhlet và ngâm lạnh Hiệu suất cao của phương pháp này trong thời gian ngắn là nhờ vào tác dụng của siêu âm, làm tăng tính thẩm thấu và khuếch tán thông qua sự hình thành và tự vỡ của bong bóng, dẫn đến việc phá vỡ một phần màng tế bào dược liệu Do đó, chiết siêu âm được lựa chọn để khảo sát các thông số quy trình tiếp theo.
3.2.3 Kết quả khảo sát lựa chọn dung môi chiết xuất
Bài thuốc NBPT đã được chiết xuất bằng phương pháp chiết siêu âm với các dung môi khác nhau, thực hiện ở nhiệt độ 80°C trong thời gian 1 giờ và tỷ lệ DM/DL là 10/1 Kết quả chiết xuất được thể hiện trong Bảng 3.7.
Bảng 3.7 Ảnh hưởng của loại dung môi đến hiệu suất chiết xuất saponin
Dung môi Hàm lượng saponin (mg/g)
Nước cất 31,34 ± 0,99 56,60 ± 1,78 EtOH 30% 35,65 ± 1,45 64,39 ± 2,62 EtOH 50% 37,33 ± 1,24 67,42 ± 2,24 EtOH 70% 32,06 ± 1,36 57,90 ± 2,45 EtOH 96% 16,71 ± 0,58 30,19 ± 1,05
Bảng 3.7 cho thấy rằng lượng saponin chiết xuất tăng dần khi nồng độ ethanol từ 0 đến 50%, nhưng giảm nhanh khi nồng độ ethanol vượt quá 50% Hiệu suất chiết xuất saponin cao nhất đạt 67,42% với dung môi ethanol 50%, trong khi hiệu suất thấp nhất chỉ đạt 30,19% khi sử dụng ethanol 96% Do đó, ethanol 50% được lựa chọn làm dung môi cho các khảo sát tiếp theo.
3.2.4 Kết quả khảo sát lựa chọn nhiệt độ chiết xuất
Chiết siêu âm bài thuốc NBPT được thực hiện ở các nhiệt độ khác nhau với dung môi ethanol 50%, theo tỷ lệ DM/DL là 10/1, trong thời gian 1 giờ Kết quả của quá trình chiết xuất được thể hiện trong Bảng 3.8.
Bảng 3.8 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến hiệu suất chiết xuất saponin (n = 3, X ̅ ± SD)
Nhiệt độ Hàm lượng saponin (mg/g) Hiệu suất chiết saponin (%)
Nhiệt độ là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất dược liệu Khi nhiệt độ tăng, hệ số khuếch tán và lượng chất khuếch tán cũng gia tăng theo định luật Fick Ngoài ra, sự giảm độ nhớt của dung môi khi nhiệt độ cao giúp tăng khả năng khuếch tán Tuy nhiên, nhiệt độ cao cũng có thể gây hại, như làm phá hủy các hoạt chất nhạy cảm với nhiệt và tăng độ tan của tạp chất.
Khi nhiệt độ tăng từ 40°C đến 70°C, hàm lượng saponin chiết được tăng lên đáng kể, tuy nhiên, khi nhiệt độ đạt 80°C, sự tăng trưởng này không còn rõ rệt Vì vậy, nhiệt độ tối ưu cho quá trình chiết xuất saponin được xác định là 70°C để tiến hành các khảo sát tiếp theo.
3.2.5 Kết quả khảo sát lựa chọn số lần chiết xuất
Chiết siêu âm bài thuốc NBPT sử dụng ethanol 50% ở nhiệt độ 70°C, thực hiện chiết 4 lần với thời gian mỗi lần chiết là 1 giờ và tỷ lệ DM/DL là 10/1 Kết quả chiết xuất được thể hiện trong Bảng 3.9.
Bảng 3.9 Ảnh hưởng của số lần chiết đến hiệu suất chiết xuất saponin
Hiệu suất tổng gộp Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3 Trung bình (%)
Bảng 3.9 chỉ ra rằng sau hai lần chiết, hiệu suất chiết xuất saponin đạt 90,47%, cho thấy hiệu quả cao Mặc dù việc chiết thêm lần thứ ba và thứ tư vẫn làm tăng tổng lượng saponin, nhưng mức tăng không đáng kể Do đó, để tiết kiệm dung môi, chúng tôi quyết định thực hiện hai lần chiết.
3.2.6 Kết quả khảo sát lựa chọn tỷ lệ dung môi/dược liệu
Chiết siêu âm bài thuốc NBPT sử dụng ethanol 50% ở nhiệt độ 70°C, thực hiện chiết 2 lần, mỗi lần kéo dài 1 giờ với các tỷ lệ DM/DL khác nhau Kết quả chiết xuất được thể hiện trong Bảng 3.10.
Bảng 3.10 Ảnh hưởng của tỷ lệ DM/DL đến hiệu suất chiết xuất saponin
Tỷ lệ DM/DL Hàm lượng saponin (mg/g) Hiệu suất chiết saponin (%)
Bảng 3.10 chỉ ra rằng trong lần chiết đầu tiên, việc tăng tỷ lệ DM/DL dẫn đến sự gia tăng lượng saponin chiết được, đặc biệt rõ rệt khi tỷ lệ được điều chỉnh từ 10/1 lên 12/1 Sau hai lần chiết, hiệu suất chiết saponin với tỷ lệ DM/DL 12/1 (lần 1) và 10/1 (lần 2) không có sự khác biệt so với tỷ lệ DM/DL 12/1 (lần 1) và 8/1 (lần 2) Khi tỷ lệ DM/DL được nâng lên 15/1, kết quả chiết xuất tiếp tục được theo dõi.
1) và 10/1 (lần 2), hiệu suất chiết saponin tăng không đáng kể Vì vậy, lựa chọn tỷ lệ DM/DL là 12/1 (lần 1) và 8/1 (lần 2) cho khảo sát tiếp theo
3.2.7 Kết quả khảo sát lựa chọn thời gian chiết xuất
Here is a rewritten paragraph:"Kết quả chiết siêu âm bài thuốc NBPT với ethanol 50% ở 70°C cho thấy hiệu quả cao sau hai lần chiết với tỷ lệ DM/DL lần lượt là 12/1 và 8/1 Thời gian chiết khác nhau cũng được áp dụng để tối ưu hóa quá trình chiết xuất Chi tiết kết quả được trình bày ở Bảng 3.11."
Bảng 3.11 Ảnh hưởng của thời gian chiết xuất đến hiệu suất chiết xuất saponin
Thời gian Hàm lượng saponin (mg/g) Hiệu suất chiết saponin (%)
Bảng 3.11 cho thấy rằng trong lần chiết thứ nhất, khi thời gian chiết tăng lên, lượng saponin chiết được cũng tăng nhanh, đặc biệt là khi thời gian chiết được kéo dài từ 0,5 giờ lên 1 giờ Các dữ liệu cho thấy sự gia tăng rõ rệt về hàm lượng saponin với thời gian chiết, góp phần khẳng định tầm quan trọng của thời gian trong quá trình chiết xuất.
KẾT QUẢ KHẢO SÁT XÂY DỰNG QUY TRÌNH BÀO CHẾ BỘT CAO KHÔ BẰNG PHƯƠNG PHÁP PHUN SẤY
3.3.1 Chuẩn bị dịch phun sấy Để chuẩn hoá dịch phun sấy, từ cao lỏng NBPT 1:2 thu được ở trên, thêm nước cất để thu được dịch chiết NBPT phun sấy có tỷ lệ chất rắn là 15% với khối lượng và hàm lượng saponin được trình bày ở Bảng 3.14
Bảng 3.14 Thành phần cao NBPT dùng để nghiên cứu phun sấy
Thành phần Khối lượng (g) Tỷ lệ chất rắn Hàm lượng saponin (mg/g)
Dịch chiết NBPT phun sấy 4332,10 15,00% 20,62 ± 0,37
3.3.2 Kết quả khảo sát lựa chọn loại tá dược hỗ trợ phun sấy
Các công thức cùng điều kiện phun sấy được trình bày ở Bảng 3.15 Kết quả phun sấy được thể hiện ở Bảng 3.16 và Hình 3.3
Bảng 3.15 Công thức khảo sát loại tá dược phun sấy
NBPT phun sấy Loại tá dược
Tốc độ cấp dịch Khối lượng
Bảng 3.16 Ảnh hưởng của loại tá dược đến quá trình phun sấy
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hình 3.3 Bột cao khô Vệ khí khang với các loại tá dược khác nhau
Tá dược hỗ trợ phun sấy có ảnh hưởng lớn đến chất lượng bột cao khô Vệ khí khang Việc không sử dụng tá dược (CT1) dẫn đến hiệu suất phun sấy và thu hồi saponin thấp, khiến bột kết dính và trơn chảy kém Ngược lại, khi bổ sung tá dược (CT2 – CT7), các công thức đạt hàm ẩm thấp (< 5%), đáp ứng yêu cầu chất lượng bột cao khô Sự bổ sung này cải thiện đáng kể chất lượng bột, bao gồm hiệu suất phun sấy và thu hồi saponin, cho thấy tá dược có vai trò quan trọng trong việc cải thiện tính chất lý hóa và bảo vệ hoạt chất.
MD là tá dược giúp tăng hiệu suất thu hồi hoạt chất và hàm lượng saponin trong sản phẩm cao khô, nhưng lại làm giảm chất lượng bột và hiệu suất phun sấy Ngược lại, AE cải thiện chất lượng bột và nâng cao hiệu suất phun sấy, nhưng lại giảm hàm lượng saponin Khi phối hợp MD và AE với các tỷ lệ khác nhau (CT3 – CT6), việc giảm tỷ lệ MD và tăng tỷ lệ AE sẽ làm tăng hàm ẩm của bột sản phẩm, giảm tỷ trọng biểu kiến và chỉ số nén CI, đồng thời cải thiện khả năng trơn chảy và nâng cao hiệu suất phun sấy.
Tỷ trọng và chỉ số nén CI là hai yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến quá trình sản xuất viên nang và viên nén từ bột cao khô Để đảm bảo đủ thể tích và khối lượng khi đóng nang hoặc dập viên, bột cao khô cần có tỷ trọng lớn Ngoài ra, bột cũng cần có khả năng trơn chảy và chịu nén tốt, với chỉ số nén CI thấp, nhằm thuận lợi cho quá trình phân liều và dập viên.
Kết quả cho thấy CT4 và CT5 có chỉ số nén CI thấp và tỷ trọng cao Hai công thức này có hiệu suất phun sấy tương đương, nhưng CT4 đạt hiệu suất thu hồi saponin cao hơn CT5 Do đó, chúng tôi đã chọn CT4 với tỷ lệ MD/AE là 60/40 để thực hiện các khảo sát tiếp theo.
3.3.3 Kết quả khảo sát lựa chọn tỷ lệ tá dược hỗ trợ phun sấy
Tiến hành phun sấy các mẻ theo điều kiện của CT4 với tỷ lệ TD/CR khác nhau, kết quả được trình bày trong Bảng 3.18 và Hình 3.4.
Bảng 3.17 Công thức khảo sát tỷ lệ tá dược phun sấy
NBPT phun sấy Loại tá dược
Tốc độ cấp dịch Khối lượng
Bảng 3.18 Ảnh hưởng của tỷ lệ tá dược đến quá trình phun sấy
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hình 3.4 Bột cao khô Vệ khí khang với các tỷ lệ tá dược khác nhau
Bảng 3.18 và Hình 3.4 cho thấy:
Tỷ lệ TD/CR có ảnh hưởng đáng kể đến đặc tính bột cao khô, hiệu suất phun sấy và thu hồi saponin Mặc dù hàm lượng saponin giảm khi tăng tỷ lệ TD/CR, nhưng bột sản phẩm lại có hình thức cảm quan tốt hơn Cụ thể, việc tăng tỷ lệ TD/CR giúp giảm hàm ẩm, tăng tỷ trọng bột cao khô, và cải thiện khả năng trơn chảy của khối bột, từ đó nâng cao hiệu suất phun sấy và thu hồi saponin.
Kết quả khảo sát cho thấy CT10 có hàm ẩm, khối lượng riêng và hiệu suất phun sấy tương đương với CT4, CT8 và CT9, nhưng hàm lượng saponin cao hơn, chỉ có khả năng trơn chảy kém mà có thể khắc phục bằng biện pháp bào chế Trong khi đó, CH11 có hàm lượng saponin tương đương CT10 nhưng hiệu suất phun sấy thấp và các chỉ số lý hóa kém hơn Do đó, CT10 với tỷ lệ TD/CR là 40% được lựa chọn để khảo sát tiếp.
3.3.4 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ phun sấy và tốc độ cấp dịch đến quá trình phun sấy
Tiến hành phun sấy với các điều kiện tương tự như CT10, tuy nhiên có sự khác biệt về nhiệt độ phun sấy và tốc độ cấp dịch (Bảng 3.19) Kết quả của quá trình phun sấy được trình bày rõ ràng.
Bảng 3.19 Công thức khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ và tốc độ cấp dịch phun đến quá trình phun sấy
Tốc độ cấp dịch (mL/ phút)
Bảng 3.20 Ảnh hưởng của nhiệt độ và tốc độ cấp dịch phun đến quá trình phun sấy
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hình 3.5 Bột cao khô Vệ khí khang với nhiệt độ và tốc độ cấp dịch phun khác nhau
3.3.5 Kết quả khảo sát lựa chọn tỷ lệ chất rắn trong dịch phun
Tiến hành phun sấy với các điều kiện như ở CT10 nhưng với tỷ lệ CR/DP khác nhau (Bảng 3.21) Kết quả được thể hiện ở Bảng 3.22 và Hình 3.6
Bảng 3.21 Công thức khảo sát tỷ lệ chất rắn trong dịch phun sấy
NBPT phun sấy Loại tá dược
Tốc độ cấp dịch Khối lượng
Bảng 3.22 Ảnh hưởng của tỷ lệ chất rắn trong dịch phun đến quá trình phun sấy
Hiệu suất thu hồi saponin (%)
Hiệu suất phun sấy (%) d (g/mL) CI
Hình 3.6 Bột cao khô Vệ khí khang với tỷ lệ chất rắn trong dịch phun khác nhau
Bảng 3.22 cho thấy hàm ẩm giảm nhẹ khi tỷ lệ CR/DP tăng từ 5% lên 17,5%, luôn dưới 5% Tỷ lệ CR/DP tăng dần làm khối lượng riêng tăng cao nhất ở khoảng 15 – 17,5% Giảm tỷ lệ CR/DP xuống 5% làm tăng chỉ số CI, trong khi các công thức khác có chỉ số CI tương đương Hàm lượng và hiệu suất thu hồi saponin ít bị ảnh hưởng bởi tỷ lệ CR/DP, với tất cả các công thức đều đạt hiệu suất thu hồi cao Hiệu suất phun sấy giảm nhẹ khi tăng tỷ lệ CR/DP từ 5% lên 10%, nhưng giảm mạnh khi tỷ lệ này tiếp tục lên 15% và 17,5% Do đó, CT10 là công thức thích hợp nhất để bào chế bột cao khô Vệ khí khang bằng phương pháp phun sấy.
3.3.6 Tóm tắt thông số quy trình phun sấy bào chế bột cao khô
Từ các khảo sát trên, chúng tôi đưa ra được các điều kiện cho phun sấy bột cao khô Vệ khí khang gồm:
– Dịch phun sấy: Dịch chiết NBPT, tỷ lệ chất rắn 15%
– Tá dược hỗ trợ phun sấy: Malto dextrin/Aerosil (60/40)
– Tỷ lệ tá dược/chất rắn: 40%
– Tốc độ cấp dịch: 45 mL/phút
– Tỷ lệ chất rắn trong dịch phun: 10%.
KẾT QUẢ XÂY DỰNG QUY TRÌNH BÀO CHẾ BỘT CAO KHÔ VỆ KHÍ
Dựa trên các kết quả khảo sát về hệ điều kiện chiết xuất và phun sấy, quy trình bào chế bột cao khô Vệ khí khang đã được xây dựng bằng phương pháp phun sấy.
Các bột dược liệu HK, BT, và PP được trộn theo tỷ lệ của bài thuốc Bột bài thuốc NBPT được chiết xuất bằng siêu âm với dung môi ethanol 50% ở nhiệt độ 70°C, thực hiện 2 lần chiết Lần đầu chiết với tỷ lệ DM/DL là 12/1 trong 1,5 giờ, lần hai với tỷ lệ 8/1 trong 1 giờ Dịch chiết sau mỗi lần được lọc và gộp lại, sau đó cô thu hồi dung môi ở 60°C dưới áp suất giảm (0,8 – 0,9 MPa) để tạo ra cao lỏng 1:2 Cao lỏng được để lắng, gạn lấy phần dịch trong, phần cặn được lọc bằng máy hút chân không.
Hai phần thu được cao lỏng đồng nhất, với thể tích điều chỉnh để tỷ lệ chất rắn đạt 15% Cao lỏng này được sử dụng làm nguyên liệu cho quá trình phun sấy, trong đó sử dụng tá dược hỗ trợ là malto dextrin và aerosil theo tỷ lệ 60:40 Tỷ lệ tá dược/chiết xuất (TD/CR) là 40%, nhiệt độ đầu vào được duy trì ở 140°C, tốc độ cấp dịch là 45 mL/phút và tỷ lệ chất rắn trong dịch phun là 10% Chất lượng cao khô được đánh giá dựa trên các chỉ tiêu quy định trong DĐVN V.
Hình 3.7 Sơ đồ quy trình bào chế bột cao khô Vệ khí khang quy mô phòng thí nghiệm
KẾT QUẢ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CHO BỘT CAO KHÔ VỆ KHÍ KHANG
Bột cao khô Vệ khí khang, sau khi được bào chế theo quy trình khảo sát, đã được đánh giá chất lượng theo tiêu chuẩn DĐVN V và đạt được các kết quả đáng chú ý.
3.5.1 Kết quả đánh giá về hình thức cảm quan
Bột cao khô Vệ khí khang là dạng bột khô tơi, màu nâu nhạt, có mùi thơm đặc trưng, vị mặn hơi ngọt, dễ hút ẩm ngoài không khí
3.5.2 Kết quả đánh giá về độ ẩm
Sau khi đo hàm ẩm của bột cao khô Vệ khí khang thu được kết quả ở Bảng 3.23
Bảng 3.23 Kết quả đo hàm ẩm của bột cao khô Vệ khí khang
Mẫu Khối lượng bột cao khô (g) Hàm ẩm (%)
Kết quả từ Bảng 3.23 chỉ ra rằng độ ẩm của bột cao khô Vệ khí khang là 4,40 ± 0,24%, đáp ứng tiêu chuẩn chất lượng quy định trong DĐVN V về hàm ẩm đối với bột cao khô, cụ thể là dưới 5%.
3.5.3 Kết quả đánh giá độ mịn của bột cao khô
Cân chính xác 10,0 g bột cao khô Vệ khí khang và rây qua cỡ rây 355 Tiến hành xác định lượng bột còn lại trên rây để tính toán tỷ lệ (%) lượng bột qua rây Kết quả được trình bày trong Bảng 3.24.
Bảng 3.24 Kết quả đánh giá độ mịn của bột cao khô Vệ khí khang
Mẫu Khối lượng bột lúc đầu (g)
Khối lượng bột còn lại (g)
Tỷ lệ bột qua rây
Kết quả từ Bảng 3.24 chỉ ra rằng tỷ lệ (%) bột qua rây của bột cao khô Vệ khí khang đạt 100% (> 95%), đáp ứng tiêu chuẩn về độ mịn theo quy định của DĐVN V.
Tiến hành định tính dịch chiết và bột cao khô Vệ khí khang bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng nhằm phát hiện các hoạt chất chính có trong bài thuốc Kết quả được trình bày rõ ràng trong Hình 3.8.
Hình 3.8 Sắc ký đồ dịch chiết và bột cao khô Vệ khí khang và dược liệu
(1) Hoàng kỳ; (2) Bạch truật; (3) Phòng phong; (4) Dịch chiết NBPT; (5) Cao khô Vệ khí khang
Trên sắc ký đồ Hình 3.8a, dung dịch thử từ dịch chiết và cao khô cho thấy một vết đồng màu và có giá trị Rf bằng 0,60, tương ứng với dung dịch đối chiếu của Hoàng kỳ.
Trên sắc ký đồ Hình 3.8b, dung dịch thử từ dịch chiết và cao khô xuất hiện 3 vết cùng màu và có giá trị Rf tương đồng với dung dịch đối chiếu của Bạch truật.
Trên sắc ký đồ Hình 3.8c, dung dịch thử của dịch chiết và cao khô xuất hiện 3 vết có màu sắc và giá trị Rf giống hệt với dung dịch đối chiếu của Phòng phong.
Hình 3.8 cho thấy sắc ký đồ của dịch chiết và cao khô Vệ khí khang xuất hiện vết của một số hoạt chất có trong dược liệu của bài thuốc NBPT, với các chỉ số Rf gần như bằng nhau Điều này chứng tỏ rằng dịch chiết và bột cao khô Vệ khí khang chứa các hoạt chất này.
Đã tiến hành định lượng saponin toàn phần trong 06 mẫu bột cao khô Vệ khí khang Kết quả xác định hàm lượng saponin toàn phần được trình bày chi tiết trong Bảng 3.25.
Bảng 3.25 Kết quả định lượng saponin toàn phần của bột cao khô Vệ khí khang
Mẫu Hàm lượng saponin toàn phần (mg/g)
Kết quả ở Bảng 3.25 cho thấy: Hàm lượng saponin toàn phần của bột cao khô Vệ khí khang là 85,42 ± 1,20 mg/g
Dựa trên kết quả khảo sát và quy định của DĐVN V, chúng tôi đề xuất bước đầu TCCS cho bột cao khô Vệ khí khang.
– Tính chất: Bột khô tơi, màu nâu nhạt, có mùi thơm đặc trưng, vị mặn hơi ngọt, dễ hút ẩm ngoài không khí
– Độ mịn: tỷ lệ (%) bột qua cỡ rây 355 ≥ 95%
Phương pháp định tính SKLM yêu cầu trên sắc ký đồ của dung dịch thử và dung dịch đối chiếu phải xuất hiện vết có màu sắc và giá trị Rf giống nhau.
– Định lượng: bằng phương pháp quang phổ UV-Vis Hàm lượng saponin toàn phần không dưới 80 mg/g quy về astragalosid IV (tính theo hàm lượng khô kiệt).