Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae)

Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae) Nghiên cứu hóa học lá cây đậu khấu myristica guatterifolia a dc (myristicaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC ĐÀ LẠT  BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC ĐÀ LẠT VÕ THỊ NGỌC THU NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC LÁ CÂY ĐẬU KHẤU Myristica guatterifolia A.DC (Myriticaceae) Chuyên ngành: Mã số: Hóa phân tích 604429 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Hữu Toàn Phan Đà Lạt, tháng 12 – 2011 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, tơi bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến: Tiến sỹ Nguyễn Hữu Tồn Phan, Trưởng phịng Hóa học hợp chất thiên nhiên – Viện Sinh học Tây Nguyên tận tình giúp đỡ tơi suốt q trình thực luận văn Ban giám hiệu, quý thầy cô khoa đào tạo sau đại học trường Đại học Đà Lạt giảng dạy tạo điều kiện giúp đỡ chúng tơi suốt khóa học Bà Lê Thị Châu, Viện trưởng Viện Sinh học Tây Nguyên Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên Hà Nội Viện Hóa học Các thầy làm việc phịng Hóa học hợp chất thiên nhiên – Viện Sinh học Tây Nguyên Gia đình, bạn bè, đồng nghiệp hết lòng động viên giúp đỡ LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Những kết số liệu Luận văn chưa cơng bố hình thức Tơi hồn tồn chịu trách nhiệm trước nhà trường cam đoan Đà Lạt, tháng 12 năm 2011 Tác giả Võ Thị Ngọc Thu MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN LỜI CẢM ĐOAN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ CÁI VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY ĐẬU KHẤU Myristica guatterifolia A DC (Myristicaceae) 1.1.1 Giới thiệu Vườn Quốc gia Bidoup- Núi Bà 1.1.2 Giới thiệu Đậu Khấu Myristica guatterifolia 1.2 HỢP CHẤT FLAVONOID 1.3 HỢP CHẤT STEROID 1.3.1 Giới thiệu chung 1.3.2 Một số hợp chất steroid 1.4 HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA 11 1.5 CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP CHẤT HỮU CƠ 12 1.5.1 Phương pháp chiết xuất 12 1.5.2 Phương pháp tách sắc ký 14 1.6 CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 20 1.6.1 Phương pháp phổ tử ngoại ( UV-VIS) 20 1.6.2 Phương pháp phổ hồng ngoại (IR) 21 1.6.3 Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 22 1.6.4 Phương pháp phổ khối lượng (MS) 24 CHƯƠNG II: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 26 2.2 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT, TÁCH 26 2.2.1 Phương pháp chiết 26 2.2.2 Phương pháp sắc ký cột 26 2.2.3 Phương pháp sắc ký mỏng (TLC) 27 2.2.4 Phương pháp sắc ký lớp mỏng điều chế 27 2.2.5 Phương pháp sắc ký lỏng cao áp bán điều chế (Pre-HPLC) 28 2.2.6 Phương pháp tinh chế sản phẩm 28 2.3 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 28 2.4 PHƯƠNG PHÁP THỬ NGHIỆM CHỐNG OXY HÓA TRONG HỆ DPPH - ANTIOXYDANT 29 2.5 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 29 CHƯƠNG III: THỰC NGHIỆM 3.1 ĐỘ ẨM NGUYÊN LIỆU 30 3.2 ĐIỀU CHẾ CÁC DỊCH CHIẾT TỪ Myristica guatterifolia 30 3.3 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TRONG HỆ DPPH – ANTIOXYDANT 30 3.3.1 Đối với dịch chiết MeOH toàn phần 30 3.3.2 Đối với dịch chiết phân đoạn 31 3.5 NGHIÊN CỨU HÓA HỌC CỦA CÂY ĐẬU KHẤU Myristica guatterifolia 31 3.5.1 Quy trình phân lập: 31 3.5.2 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập được: 32 CHƯƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TRONG HỆ DPPH - ANTIOXYDANT 35 4.2 TÁCH, TINH CHẾ VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 35 4.2.1 Quy trình phân lập 35 4.2.2 Xác định cấu trúc hợp chất 36 CHƯƠNG V: KẾT LUẬN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ CÁI VIẾT TẮT 13 C- NMR: 13C-Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ Cacbon) H- NMR: 1H-Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ proton) CHCl3: Chloroform COSY: Correcttion Spectroscopy (Tương quan chuyển dịch hạt nhân đồng proton) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarization Transfer DPPH: 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl EtOAc: etyl axetat HMBC: Heteronuclear Multiple – Bond Correlation (Chuyển dịch dị hạt nhân qua nhiều liên kết) HMQC: Heteronuclear Multiple – Quantum Coherence (Chuyển dịch dị hạt nhân qua nhiều liên kết) HPLC: Phương pháp sắc ký lỏng cao áp IR: Infrared Spectroscopy (Phương pháp phổ hồng ngoại ) MeOH: Methanol MS: Mass Spectroscopy (Phương pháp phổ khối lượng) NMR: Nuclear Magnetic Resonance (Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân) Pre-HPLC: Phương pháp sắc ký lỏng cao áp bán điều chế TLC: Phương pháp sắc ký mỏng UV-Vis: Phương pháp phổ tử ngoại DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Trang Bảng 3.1 Hoạt tính chống oxy hóa mẫu chiết MeOH 30 Bảng 3.2 Hoạt tính chống oxy hóa mẫu chiết phân đoạn 31 Bảng 4.1 Kết phổ NMR MG-02 43 Bảng 4.2 Kết phổ NMR hợp chất MG-03 46 Bảng 4.3 Giá trị phổ NMR hợp chất MG-04 51 Bảng 4.4 Kết phổ NMR hợp chất MG-05 57 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Lá Đậu khấu Myristica guatterifolia Hình 4.1 Sơ đồ phân lập số hợp chất từ Myristica guatterifolia 36 Hình 4.2 Phổ HR-MS hợp chất MG-01 37 Hình 4.3 Phổ 1H-NMR hợp chất MG-01 37 13 38 39 13 Hình 4.6 Phổ C-NMR (CDCl3, 125 MHz) MG-02 39 Hình 4.7 Phổ DEPT MG-02 40 Hình 4.8 Phổ H-H COSY MG-02 41 Hình 4.9 Phổ HMQC MG-02 41 Hình 4.10 Phổ HMBC MG-02 42 Hình 4.11 Phổ ESI MG-02 42 Hình 4.12 Cấu trúc hố học MG-02 43 Hình 4.13 Phổ 1H-NMR (MeOD, 500 MHz) hợp chất MG-03 44 Hình 4.14 Phổ DEPT hợp chất MG-03 45 Hình 4.15 Phổ 13C-NMR (MeOD, 125 MHz) hợp chất MG-03 45 Hình 4.16 Phổ ESI-MS hợp chất MG-03 47 Hình 4.17 Cấu trúc hóa học hợp chất MG-03 47 Hình 4.18 Phổ khối phân giải cao hợp chất MG-04 48 Hình 4.4 Phổ C-NMR hợp chất MG-01 Hình 4.5 Phổ H-NMR (CDCl3, 500 MHz) MG-02 49 13 Hình 4.20 Phổ C-NMR(CDCl3, 125 MHz) hợp chất MG-04 50 Hình 4.21 Phổ DEPT (CDCl3, 125 MHz) hợp chất MG-04 50 Hình 4.22 Cấu trúc hợp chất MG-04 52 Hình 4.23 Phổ 1H-NMR hợp chất MG-05 53 Hình 4.24 Phổ DEPT hợp chất MG-05 54 Hình 4.25 Phổ 13C-NMR hơp chất MG-05 54 Hình 4.26 Phổ ESI-MS positive hợp chất MG-05 55 Hình 4.27 Phổ ESI-MS negative hợp chất MG-05 56 Hình 4.28 Cấu trúc hóa học hợp chất MG-05 56 Hình 4.19 Phổ H-NMR (CDCl3, 500 MHz) hợp chất MG-04 80 Hình PL18 Phổ ESI-MS hợp chất MG-03 81 Hình PL19.Phổ khối phân giải cao hợp chất MG-04 82 Hình PL20.Phổ1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) hợp chất MG-04 83 Hình PL21.Phổ1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) giãn hợp chất MG-04 84 Hình PL22 Phổ 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) giãn hợp chất MG-04 85 Hình PL23.Phổ 13C-NMR(CDCl3, 125 MHz) hợp chất MG-04 86 Phổ 13C-NMR(CDCl3, 125 MHz) giãn hợp chất MG-04 Hình PL24 87 Phổ DEPT (CDCl3, 125 MHz) hợp chất MG-04 Hình PL2 88 Hình PL2 Phổ DEPT (CDCl3, 125 MHz) giãn hợp chất MG-04 89 Hình PL27.Phổ 1H-NMR hợp chất MG-05 90 Hình PL28.Phổ DEPT hợp chất MG-05 91 Hình PL29 Phổ 13C-NMR hơp chất MG-05 92 HìnhPL30 PhổESI-MS hợp chất MG-05 93 Hình PL31 PhổESI-MS hợp chất MG-05 94