Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học của cây ban (hypericum hookerianum wight arn )thu hái tại sapa, lào cai

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ LAN ANH TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BAN (HYPERICUM HOOKERIANUM WIGHT & ARN.) THU HÁI TẠI SAPA, LÀO CAI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2018 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ LAN ANH Mã sinh viên: 1301006 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BAN (HYPERICUM HOOKERIANUM WIGHT & ARN.) THU HÁI TẠI SAPA, LÀO CAI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển HVCH Nguyễn Thị Hải Nơi thực hiện: Bộ môn Dƣợc học cổ truyền Viện Dƣợc liệu HÀ NỘI - 2018 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực hồn thành khóa luận, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển- Trưởng môn Dược học cổ truyền, Trường Đại học Dược Hà Nội, DS Nguyễn Thị Hải học viên cao học CH21, tận tình hướng dẫn, bảo ban, truyền đạt lại kiến thức quý báu để em hoàn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới PGS.TS Phƣơng Thiện Thƣơng- Trưởng Khoa hóa phân tích tiêu chuẩn, Viện dược liệu, NCS Vũ Duy Hồng anh chị, bạn công tác làm đề tài Viện dược liệu, thầy cô công tác môn Dược học cổ truyển giúp đỡ, tạo điều kiện tốt để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, người bên cạnh, động viên giúp đỡ em thời gian qua Hà Nội, ngày 15 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Hoàng Thị Lan Anh MỤC LỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT DANH SÁCH CÁC BẢNG DANH SÁCH CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I TỒNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI HYPERICUM 1.1.1 Thực vật học 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng sinh học 1.1.4 Công dụng 1.2 TỔNG QUAN VỀ HYPERICUM HOOKERIANUM WIGHT & ARN 10 1.2.1 Thực vật học 10 1.2.2 Thành phần hóa học 12 1.2.3 Tác dụng sinh học 14 1.2.4 Công dụng 16 CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 ĐỐI TƢỢNG 17 2.2 THIẾT BỊ, DUNG MƠI, HĨA CHẤT 17 2.2.1 Thiết bị 17 2.2.2 Dung mơi hóa chất 18 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 CHƢƠNG III: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN 20 3.1 KẾT QUẢ 20 3.1.1 Chiết xuất: 20 3.1.2 Phân lập thành phần hóa học 20 3.2 BÀN LUẬN 32 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 KẾT LUẬN 35 KIẾN NGHỊ 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT Kí hiệu brs CD3OD Chú thích Broad singlet Methanol – d4 (dung môi NMR) d Doublet dd Double of doublet ddd Double of double of doublet DEPT DMSO-d6 Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Dimethyl sulfosid – d6 - (CD3)2SO ESI-MS Phổ khối lượng ion hóa tia điện EtOAc Ethyl acetat EtOH Ethanol HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence Hz Hezt IC50 Inhibitory concentration 50% m m/z Multiplet Khối lượng/diện tích MeOH Methanol NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân s Singlet TT Thuốc thử v/v Tỉ lệ thể tích/ thể tích DANH SÁCH CÁC BẢNG Tên bảng ảng 3.1: i u ph hất Trang v qu r tin th o t i i u th m h o ảng 3.2: 25 i u ph hất v 3- - ru o quini i th o t i i u th m h o ảng 3.3 h o i u ph 27 hất C v hyperin th o t i i u th m 30 DANH SÁCH CÁC HÌNH Tên hình Trang Hình 1.1 Bụi cây, hoa qu H hookerianum 11 Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân đoạn 20 ý đồ cắn ethyl acetat (h III) điều ki n quan sát 21 Hình 3.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn ethyl acetat c a 23 Hình 3.2 Sắ lồi ban (H hookerianum Wight & Arn.) Hình 3.4 Sắ ý đồ chất A chất B so với cắn EtOAc 24 Hình 3.5 Sắ ý đồ chất C so với cắn EtOAc 24 Hình 3.6 Chất A 25 Hình 3.7 Cấu trúc hóa học ph NMR c a chất A 26 Hình 3.8 Chất B 27 Hình 3.9 Acid ferulic 28 Hình 3.10 Acid quinic 28 Hình 3.11 Cấu trúc hóa học ph NMR c a chất B 29 Hình 3.12 Chất C 30 Hình 3.13 Cấu trúc hóa học ph NMR c a chất C 31 ĐẶT VẤN ĐỀ Chi Hypericum chi lớn với 469 loài [48] Ở Việt Nam ghi nhận 17 loài Các loài thuộc chi Hypericum sử dụng rộng rãi y học dân gian làm thuốc chữa thuốc chống virus, trị bệnh gan, thuốc chống viêm, kháng khuẩn, rắn cắn, hồng đản, tiêu hóa kém, đầy bụng, ho, [1], [3],[24] Theo tài liệu công bố trước đây, thành phần hóa học chủ yếu chi Hypericum naphthodianthron, bianthraquinon, phloroglucinol, xanthon, flavonoid hợp chất khác [26] Các loài thuộc chi nghiên cứu, đánh giá nhiều tác dụng sinh học đáng ý tác dụng chống trầm cảm [26], tác dụng kháng khuẩn [25], tác dụng chống oxy hóa [36],… Lồi ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn.) thuộc chi Hypericum phân bố chủ yếu Trung Quốc, Ấn Độ, Thái Lan phía Bắc Việt Nam [48] Ở Trung Quốc, lồi H hookerianum Wight &Arn dùng để điều trị viêm bàng quang [5], Ấn Độ dùng để điều trị vết bỏng, làm lành vết thương [39], điều trị trầm cảm, kích thích thần kinh trung ương [12] Tại Việt Nam, đồng bào miền núi thường lấy H hookerianum vò ngâm nước, để lắng lấy dịch rửa mắt cho gia cầm đau mắt [3] nhiên loài chưa sử dụng rộng rãi y học cổ truyền nước ta Trên giới, có số nghiên cứu cơng bố thành phần hóa học số tác dụng sinh học loài ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn.) tác dụng chống oxy hóa bảo vệ gan [19], tác dụng chống virus [37], tác dụng kháng khuẩn [38], tác dụng chống ung thư [44],… Trong nước, nghiên cứu Nguyễn Thị Hải (2017) loài Hypericum hookerianum Wight & Arn bước đầu nghiên cứu đặc điểm thực vật, giám định tên khoa học, phân lập hợp chất epicatechin, piceatanol, 3,8’’-biapigenin [4] Nghiên cứu Đỗ Thị Thu (2017) tiếp tục phân lập thành phần hóa học lồi ban (H hookerianum) phân lập thêm hợp chất astilbin quercitrin [7] Dựa vào sở trên, nhằm nghiên cứu sâu thành phần hóa học loài ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn.), đề tài “Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn.) thu hái Sapa, Lào Cai” thực với mục tiêu sau: 1 Tiếp tục phân lập số hợp chất từ phần mặt đất loài ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn) Xác định cấu trúc hợp chất phân lập Phổ khối ESI-MS Inten.(x1,000,000) 5.0 523 368 4.0 551 454 3.0 2.0 391 495 651 1.0 343 279 0.0 200 250 427 467 577 311 300 350 400 450 500 550 633 600 650 695 669 m/z Phổ UV-VIS: 1.762 1.500 Abs 1.000 0.500 0.000 -0.157 200.00 300.00 400.00 nm 500.00 600.00 PHỤ LỤC DỮ LIỆU PHỔ CỦA HỢP CHẤT C Phổ cộng hưởng từ hạt nhân(1H-NMR, 13C-NMR, HMBC) Phổ khối (ESI-MS) Phổ UV-VIS Phổ ESI-MS: Inten.(x10,000,000) 111 1.50 1.25 1.00 195 0.75 463 209 561 0.50 0.25 331 0.00 100 200 300 400 500 600 700 m/z 600 700 m/z Inten.(x10,000,000) 2.0 465 1.5 115 303 1.0 0.5 143 0.0 100 212 200 338 300 391 552 400 500 Phổ UV-VIS: 3.771 3.000 Abs 2.000 1.000 0.000 -0.341 200.00 300.00 400.00 nm 500.00 600.00 ... lồi ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn. ), đề tài Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học ban (Hypericum hookerianum Wight & Arn. ) thu hái Sapa, Lào Cai thực với mục tiêu sau: 1 Tiếp tục. .. TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ LAN ANH Mã sinh viên: 1301006 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BAN (HYPERICUM HOOKERIANUM WIGHT & ARN. ) THU HÁI TẠI SAPA, LÀO CAI KHÓA LUẬN TỐT... ban hooker, phân bố Sapa (Lào Cai) [3], [5] Hình 1.1 ụi â , ho v qu H hoo ri num Wight & Arn 11 1.2.2 Thành phần hóa học  Trên giới Thành phần hóa học H hookerianum Wight & Arn chưa nghiên cứu