Vũ Thị Châu Trang 5 AE Biến cố bất lợi Adverse Event °C Độ C ALT Alanine Aminotransferase BARDA Cơ quan quản lý nghiên cứu phát triển y sinh học tiên tiến, thuộc Bộ Y tế và Dịch vụ
TỔNG QUAN
Thực trạng Cúm gia cầm trên thế giới và ở Việt Nam
Bệnh cúm: Là một bệnh truyền nhiễm đường hô hấp do vi rút cúm type
A, B gây ra (vi rút cúm type C và D cũng được báo cáo, nhưng cho đến nay mới có một vài trường hợp lẻ tẻ được ghi nhận nhưng với triệu chứng lâm sàng nhẹ) Các triệu chứng liên quan đến nhiễm vi rút cúm thay đổi từ một bệnh hô hấp nhẹ (giới hạn ở đường hô hấp trên và đặc trưng bởi sốt, đau họng, chảy nước mũi, ho, nhức đầu, đau cơ và mệt mỏi) đến nặng và trong một số trường hợp, viêm phổi gây tử vong do vi rút cúm hoặc dẫn đến nhiễm khuẩn thứ phát của đường hô hấp dưới đã được ghi nhận [5,6,7,15,78]
Từ thế kỷ 16, đại dịch cúm đã trở thành một trong những mối đe dọa sức khỏe chính của loài người, gây ra tác động nghiêm trọng hàng năm từ các bệnh cúm mùa và cúm đại dịch toàn cầu Sự lây lan của virus cúm A/H5N1 trong gia cầm, khả năng lây truyền từ động vật sang người, cùng với sự xuất hiện gần đây của cúm A/H7N9 và A/H10N8 tại Trung Quốc, cho thấy sự biến đổi khó lường của virus cúm.
Con người có thể bị nhiễm các loại vi rút cúm gia cầm như A/H5N1, A/H7N9 và cúm lợn A/H3N2 Những vi rút này thường lây lan từ động vật gần gũi với con người và có khả năng lây truyền sang người thông qua tiếp xúc trực tiếp với động vật hoặc người đã nhiễm vi rút.
Để ngăn ngừa hiệu quả nhiễm cúm gia cầm A/H5N1 và các hậu quả nghiêm trọng của bệnh cúm, cần tuân thủ nguyên tắc dự phòng khoanh vùng, ngăn chặn nguồn lây và tiêm vắc xin phòng bệnh Việc thực hiện những biện pháp này sẽ giúp bảo vệ sức khỏe cộng đồng và giảm thiểu nguy cơ lây lan dịch bệnh.
Luận án Y tế cộng đồng nhấn mạnh tầm quan trọng của việc bảo vệ các đối tượng nguy cơ cao và những người chăm sóc bệnh nhân cúm Đến nay, Việt Nam vẫn chưa có vắc xin phòng cúm A/H5N1 được cấp phép, trong khi nhu cầu vắc xin có thể tăng cao nếu dịch cúm bùng phát Tình hình dịch cúm gia cầm hiện tại vẫn diễn biến phức tạp, tạo ra nguy cơ lớn cho việc bùng phát dịch cúm gia cầm tại Việt Nam.
1.1.1.1 Phân loại, hình thái vi rút cúm A/H5N1
Hình 1.1 Ảnh chụp kính hiển vi điện tử: (A) Vi rút cúm A; (B) Cấu trúc hạt vi rút cúm A; (C) Phức hợp ribonucleoprotein RNP
(Nguồn: © Paul Digard, Dept Pathology, University of Cambridge)
Vi rút cúm thuộc họ Orthomyxoviridae, bao gồm bốn chi: Influenza A, Influenza B, Influenza C và Thogotovirus Trong đó, cúm do ba loại A, B và C gây bệnh với mức độ khác nhau Hình thái vi rút cúm thường là hình cầu hoặc dạng sợi, có kích thước từ 80-100mm Vật liệu di truyền của vi rút là ARN sợi đơn âm dài 10-15kb, bao gồm tám phân đoạn gen mã hóa cho 11 protein Capsid của vi rút được cấu thành từ các capsome sắp xếp theo kiểu đối xứng xoắn, trong khi lớp vỏ ngoài là một lớp lipid có nguồn gốc từ tế bào chủ Bề mặt vi rút có hai loại glycoprotein tạo thành các gai nhú, đóng vai trò là hai kháng nguyên đặc trưng quan trọng.
Vi rút cúm được phân loại dựa trên hai glycoprotein bề mặt chính là kháng nguyên ngưng kết (hemagglutinin - HA) và kháng nguyên có hoạt tính enzym (neuraminidase - NA) Các loại vi rút cúm gia cầm đều thuộc nhóm A, cho thấy sự đa dạng và tính chất kháng nguyên của chúng trong lĩnh vực y tế cộng đồng.
1.1.1.2 Kháng nguyên ở phần vỏ ngoài của vi rút a) Kháng nguyên ngưng kết (H)
Kháng nguyên H, hay còn gọi là yếu tố ngưng kết hồng cầu (NKHC), là một thành phần quan trọng giúp virus bám vào tế bào niêm mạc đường hô hấp và xâm nhập vào bên trong tế bào Nghiên cứu cho thấy kháng nguyên này có khả năng gắn kết với màng hồng cầu của người nhóm 0, dẫn đến hiện tượng ngưng kết hồng cầu trong ống nghiệm Kháng thể tương ứng, được gọi là kháng thể ngăn ngưng kết hồng cầu (NNKHC), đóng vai trò bảo vệ cơ thể Ngoài ra, kháng nguyên còn có hoạt tính enzyme, được ký hiệu là N (neuraminidase).
Kháng nguyên N có hoạt tính enzyme giúp làm loãng chất nhầy ở đường hô hấp, tạo điều kiện cho virus tiếp xúc với tế bào niêm mạc dễ dàng hơn Ngoài ra, kháng nguyên này còn hỗ trợ virus xâm nhập vào tế bào, thúc đẩy quá trình lắp ráp các thành phần của virus và thoát ra khỏi tế bào Đồng thời, kháng thể tương ứng với kháng nguyên N cũng đóng vai trò bảo vệ cơ thể khỏi sự xâm nhập của virus.
Kháng nguyên H và N đóng vai trò quan trọng trong khả năng gây bệnh của vi rút cúm và có tính đặc hiệu theo từng loại Tuy nhiên, các cấu trúc H và N có thể biến đổi thành các dạng mới Hiện tại, đã xác định được 13 cấu trúc kháng nguyên H, được ký hiệu từ H1 đến H13, và 9 cấu trúc kháng nguyên N, ký hiệu từ N1 đến N9.
Phần vỏ bao ngoài của vi rút, nó bao gồm các kháng nguyên đặc hiệu nhóm và các kháng nguyên đặc hiệu phân type Các kháng nguyên đặc hiệu
Luận án Y tế cộng đồng phân loại virus cúm dựa trên kháng nguyên nucleoprotein (NP) và protein màng (M1) Hội nghị quốc tế năm 1953 đã phân loại các type huyết thanh vi rút cúm thành A, B, C dựa trên cấu trúc của kháng nguyên NP Hai kháng nguyên quan trọng nhất của vi rút là kháng nguyên ngưng kết H, giúp vi rút bám vào tế bào, và kháng nguyên N, có hoạt tính enzyme, hỗ trợ vi rút xâm nhập vào tế bào vật chủ.
Phần lõi của vi rút cúm bao gồm ARN và protein, tương ứng với kháng nguyên S (Soluble) Dù chứa toàn bộ mã di truyền của vi rút, kháng nguyên này không đóng vai trò quan trọng trong cơ chế miễn dịch bảo vệ của cơ thể.
1.1.1.3 Sức đề kháng của vi rút
Các yếu tố vật lý như nhiệt độ có ảnh hưởng lớn đến hoạt tính và khả năng nhân lên của vi rút Nghiên cứu cho thấy vi rút cúm A/H5N1 tồn tại hơn 100 ngày ở 4°C, nhưng bị bất hoạt sau 24 giờ ở 28°C và 30 phút ở 56°C Vi rút này hoàn toàn bất hoạt trong 30 phút khi tiếp xúc với ánh nắng mặt trời ở nhiệt độ 32°C đến 35°C, mặc dù vẫn giữ khả năng lây nhiễm sau 4 ngày trong bóng râm ở 25°C đến 32°C Vi rút cũng có thể bị bất hoạt ở 70°C trong 3 phút Ở 4°C, vi rút vẫn có thể lây nhiễm sau 35 ngày, nhưng chỉ còn 2 ngày ở 25°C Họ Orthomyxoviridae nhạy cảm với môi trường có pH axit; vi rút cúm A/H5N1 mất khả năng lây nhiễm ở pH dưới 5 nhưng vẫn tồn tại sau 18 giờ ở pH 5 Do đó, vi rút cúm A/H5N1 có thể bị bất hoạt bằng nhiệt độ cao (từ 56°C trở lên) hoặc pH axit.
Luận án Y tế cộng đồng thấp khoảng dưới 5 hoặc cao với pH trên 10 của vật liệu khử trùng [17,54,60,73,799]
Vi rút cúm có khả năng lây lan nhanh chóng giữa người và nhiều loài động vật máu nóng Khi bệnh nhân cúm ho, hắt hơi hoặc nói, vi rút sẽ phát tán vào không khí trong bán kính 1-2 mét Vi rút này sau đó được người khỏe mạnh hít vào, bám vào các tế bào niêm mạc, và nhân lên mạnh mẽ, dẫn đến sự hủy hoại tế bào Sự phát triển nhanh chóng của vi rút cùng với độc tính của chúng gây ra tình trạng nhiễm trùng nhiễm độc toàn thân, biểu hiện qua sốt, mệt mỏi, nhức đầu, đau cơ, và các triệu chứng hô hấp cấp như viêm họng, viêm phế quản hoặc viêm phổi.
Thời gian nung bệnh của vi rút cúm thường diễn ra rất nhanh, chỉ trong vài giờ hoặc tối đa là 48 giờ Trong trường hợp nặng, vi rút có thể gây ra viêm phổi nguyên phát và làm giảm sức đề kháng của cơ thể, dẫn đến giảm số lượng bạch cầu và tạo điều kiện cho các tạp khuẩn bội nhiễm, gây ra các biến chứng thứ phát như viêm phổi - phế quản, viêm xoang Đặc biệt, ở trẻ em, vi rút cúm có thể gây ra các biến chứng nghiêm trọng như viêm phổi, viêm cơ tim hoặc viêm não, dẫn đến nguy cơ tử vong cao.
Nhu cầu nghiên cứu sản xuất vắc xin Cúm
1.2.1 Nhu cầu nghiên cứu sản xuất vắc xin trên thế giới
Cúm là bệnh hô hấp cấp tính do vi rút cúm loại A hoặc B gây ra, ảnh hưởng đến đường hô hấp trên hoặc dưới Vi rút cúm thường xuyên lưu hành, gây dịch bệnh theo mùa ở vùng ôn đới và quanh năm ở một số khu vực nhiệt đới Đặc điểm của vi rút cúm liên tục thay đổi, dẫn đến việc cần điều chỉnh chủng vắc xin để phù hợp với vi rút đang lưu hành Đặc biệt, vi rút cúm A có khả năng gây ra đại dịch với sự lây lan nhanh chóng của một chủng vi rút mới mà hệ miễn dịch hiện tại không có khả năng bảo vệ.
Luận án Y tế cộng đồng
Tiêm vắc xin cúm là biện pháp y tế công cộng quan trọng nhất để phòng ngừa nhiễm vi rút cúm Hiện nay, có nhiều loại vắc xin cúm mùa đã được cấp phép sử dụng, trong đó một số đã được Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) tiền thẩm định Điều này tạo cơ sở để Liên hợp quốc đặt mua và hỗ trợ chiến lược bao phủ vắc xin cúm, góp phần dự phòng đại dịch cúm hiệu quả.
Việc sử dụng vắc xin cúm là một biện pháp quan trọng để kiểm soát dịch cúm mùa và cúm đại dịch, nhằm bảo vệ sức khỏe cộng đồng Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) coi việc phát triển vắc xin chống vi rút cúm có khả năng gây đại dịch, cùng với vắc xin cúm mùa, là ưu tiên hàng đầu, nhằm đảm bảo đáp ứng miễn dịch rộng và bảo vệ lâu dài.
Luận án Y tế cộng đồng
Bảng 1.1 Một số loại vắc xin phòng cúm A/H5N1 được cấp phép [36,83]:
STT Hãng sản xuất (Quốc gia) Tên/ tên thương mại
1 Seqirus Inc (Australia) Influenza A (H5N1) Monovalent
2 Baxter (Austria) Pandemic Influenza Vaccine H5N1
4 Biken (Japan) Adsorbed Influenza Vaccine
5 Denka Seiken (Japan) Adsorbed Influenza Vaccine
6 Kitasato Institute (Japan) Adsorbed Pandemic Influenza
7 Kaketsuken (Japan) Adsorbed Pandemic Influenza
12 GSK Biologicals (Belgium) Adjupanrix / Qpan
Luận án Y tế cộng đồng
STT Hãng sản xuất (Quốc gia) Tên/ tên thương mại
17 Sanofi Pasteur (USA) Sanofi Pasteur Influenza Virus
19 Novartis V&D (Italy) Prepandemic influenza vaccine
1.2.2 Nhu cầu nghiên cứu sản xuất vắc xin ở Việt Nam:
Kế hoạch Hành động Toàn cầu (GAP) của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) là một sáng kiến quan trọng nhằm phát triển vắc xin cúm mới, thúc đẩy nhu cầu sử dụng vắc xin cúm mùa và nâng cao năng lực sản xuất vắc xin cúm, đặc biệt là vắc xin phòng đại dịch Được hỗ trợ bởi các nhà tài trợ quốc tế, bao gồm Bộ Y tế và Dịch vụ con người Hoa Kỳ, WHO đã triển khai chương trình hỗ trợ các nhà sản xuất vắc xin tại các nước đang phát triển, nhằm tăng cường khả năng sản xuất và tiếp cận vắc xin toàn cầu Trong giai đoạn đầu, WHO đã cung cấp hỗ trợ tài chính và kỹ thuật cho 6 nước, trong đó có Việt Nam, để xây dựng năng lực sản xuất vắc xin cúm.
Từ năm 2005, sau khi dịch cúm A/H5N1 bùng phát, các cơ sở nghiên cứu và sản xuất trong nước đã bắt đầu phát triển vắc xin cúm đại dịch bằng nhiều công nghệ khác nhau Trong số đó, Công ty vắc xin và Sinh phẩm số 1 đã nghiên cứu và sản xuất thành công vắc xin cúm A/H5N1 sử dụng công nghệ nuôi cấy trên tế bào thận khỉ.
* Các dạng vắc xin cúm A/H5N1 mà thế giới sản xuất:
- Vắc xin sống giảm độc lực (LAIV)
- Vắc xin tái tổ hợp
- Vắc xin có bổ sung tá chất
Từ năm 2008, Viện Vắc xin và Sinh phẩm Y tế (IVAC) đã hợp tác với WHO và PATH để sản xuất vắc xin cúm lần đầu tiên tại Việt Nam Đến tháng 1 năm 2011, IVAC đã thành công trong việc sản xuất vắc xin cúm A/H5N1 đơn giá, toàn hạt vi rút, bất hoạt với tá chất nhôm Viện cũng đã thiết lập và chuẩn hóa quy trình sản xuất vắc xin theo hướng dẫn thực hành sản xuất tốt (GMP) và hoàn tất các quy định liên quan đến kiểm định vắc xin cùng các thử nghiệm tiền lâm sàng.
Luận án Y tế cộng đồng đã tiến hành các nghiên cứu tiền lâm sàng nghiêm ngặt tại các phòng thí nghiệm trong và ngoài nước, bao gồm thử nghiệm miễn dịch và độc tính trên mô hình động vật Kết quả cho thấy các lô vắc xin cúm A/H5N1 do IVAC sản xuất đạt tiêu chuẩn quốc gia và quốc tế, được các cơ quan quản lý cho phép thử nghiệm trên người Vắc xin A/H5N1 đơn giá, toàn hạt vi rút, bất hoạt với tá chất nhôm cần được tiến hành thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 3 nhằm đánh giá tính an toàn và tính sinh miễn dịch, hướng tới việc đăng ký sử dụng tại Việt Nam sau khi có kết quả nghiên cứu tích cực.
Luận án Y tế cộng đồng
Thử nghiệm lâm sàng và vắc xin IVACFLU-A/H5N1
1.3.1 Thử nghiệm lâm sàng vắc xin
Nghiên cứu tiền lâm sàng
Nhận dạng Độc tính trên tế bào
An toàn trên động vật
Duy ệt h ồ sơ chuy ển sa ng t h ử lâ m sà ng
Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng trên người
An toàn, liều phù hợp, dược lực học, dược động học Giai đoạn 2:
An toàn, liều tối ưu, hiệu quả điều trị, dự phòng
Hiệu quả, an toàn, phác đồ dùng, điều kiện tốt nhất
Cơ qu an qu ản lý c ấp phé p
Nghiên cứu sau cấp phép
Hiệu quả khi mở rộng đối tượng, thay đổi phác đồ, hiệu quả kinh tế, cộng đồng, xã hội,…
Hình 1.3 Tóm tắt qui trình phát triển một loại thuốc mới [2]
Dịch cúm gia cầm tại Việt Nam đang diễn biến phức tạp, với nguy cơ bùng phát dịch cúm rất cao Trước đây, Việt Nam phải nhập khẩu vắc xin cúm mùa từ nước ngoài Tuy nhiên, việc tự sản xuất vắc xin cúm trong nước hiện nay giúp Việt Nam chủ động và kịp thời hơn trong công tác phòng chống các đại dịch cúm trong tương lai, giảm thiểu sự phụ thuộc vào nguồn cung từ nước ngoài.
Nghiên cứu sản xuất vắc xin cúm trong nước đã thành công, góp phần giảm giá thành vắc xin và tăng cường khả năng tiếp cận cho nhiều người hơn Việc này không chỉ nâng cao sức khỏe cộng đồng mà còn giảm sự phụ thuộc vào vắc xin nhập khẩu.
Nghiên cứu quy trình sản xuất vắc xin cúm là rất quan trọng trong việc phòng chống dịch bệnh và ngăn chặn lây lan trong cộng đồng Phát triển vắc xin đòi hỏi phải trải qua nhiều giai đoạn thử nghiệm lâm sàng độc lập kéo dài nhiều năm Trước khi tiến hành thử nghiệm lâm sàng, các sản phẩm vắc xin phải trải qua nghiên cứu tiền lâm sàng Sau khi hoàn tất các giai đoạn 1, 2 và 3 với kết quả thành công, nhà sản xuất sẽ nộp hồ sơ xin cấp phép từ cơ quan quản lý để đưa vắc xin vào sử dụng hoặc xuất khẩu Giai đoạn 4 diễn ra sau khi vắc xin đã được cấp phép lưu hành.
IVACFLU-A/H5N1 là vắc xin phòng bệnh cúm do virus A/H5N1, sử dụng chủng NIBRG-14 từ A/Vietnam/1194/2004 do Viện NIBSC (Vương quốc Anh) cung cấp Vắc xin này là dạng toàn hạt virus tinh khiết, được bất hoạt bằng formalin và hấp phụ với hydroxit nhôm, không chứa chất bảo quản Hydroxit nhôm đã được sử dụng an toàn trong sản xuất vắc xin trên toàn thế giới trong khoảng 60 năm, và IVAC có nhiều kinh nghiệm trong việc sử dụng tá chất này để sản xuất các loại vắc xin khác.
Vào năm 1990, nghiên cứu cho thấy chất hydroxit nhôm có khả năng nâng cao hiệu quả miễn dịch của vắc xin ở những người được tiêm theo phác đồ phù hợp.
Luận án Y tế cộng đồng
Vắc xin IVACFLU-A/H5N1 do Viện Vắc xin và Sinh phẩm Y tế (IVAC) sản xuất theo công nghệ nuôi cấy trên trứng gà có phôi, đạt tiêu chuẩn WHO-GMP với quy mô 10.000 liều mỗi mẻ Đây là kết quả của quá trình nghiên cứu và lao động lâu dài của IVAC Từ năm 2005, IVAC đã bắt đầu một đề tài nghiên cứu nhằm tiếp cận công nghệ sản xuất vắc xin cúm A/H5N1, và vào năm 2006, Bộ Khoa học và Công nghệ giao cho IVAC thực hiện đề tài nghiên cứu quy trình sản xuất vắc xin cúm A/H5N1 bất hoạt cho người Với sự hỗ trợ từ các tổ chức quốc tế như WHO và PATH, IVAC đã thành công trong việc nghiên cứu và nâng quy mô sản xuất vắc xin.
Vắc xin cúm IVACFLU-A/H5N1 chứa 30mcg HA trong 1 liều tiêm 0,5ml và đã qua giai đoạn nghiên cứu tiền lâm sàng Kết quả cho thấy vắc xin dung nạp tốt trên thỏ với 3 liều tiêm bắp cách nhau 14 ngày Trên chuột nhắt, vắc xin với liều kháng nguyên ≥ 0,75mcg HA tạo sự chuyển đổi huyết thanh trung bình nhân tăng ≥ 4 lần so với máu nền Trên chồn sương, hai liều vắc xin 15mcg HA cách nhau 21 ngày tạo miễn dịch bảo vệ chống lại chủng cúm A/H5N1 Vắc xin đã được kiểm định chất lượng tại IVAC và NICVB, bao gồm nghiên cứu độc tính, tính sinh miễn dịch và hiệu lực bảo vệ Kết quả cho thấy vắc xin đáp ứng yêu cầu chất lượng để đề xuất Bộ Y tế cho phép nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng trên người tình nguyện.
Luận án Y tế cộng đồng
Vắc xin cúm A/H5N1 do IVAC phát triển đã được thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 1 trên 75 đối tượng tại Trung tâm Y tế huyện Bến Lức, Long An vào năm 2014 Kết quả cho thấy vắc xin này đạt yêu cầu về an toàn và sinh miễn dịch với hai liều 7,5mcg (liều thấp) và 15mcg (liều cao).
- Không có SAE xuất hiện trong nghiên cứu, bao gồm cả SAE được xác định là có liên quan hoặc không liên quan đến vắc xin
- Không có biến cố tức thì (trong vòng 60 phút) sau tiêm được báo cáo lại từ nhóm vắc xin cũng như giả dược
- Không có đối tượng nghiên cứu nào rút khỏi nghiên cứu vì có biến cố bất lợi (AE)
- Tất cả các biến cố tại chỗ trong dự kiến sau mũi 1 và mũi 2 của cả hai liều vắc xin được báo cáo là nhẹ
Nhóm tiêm vắc xin liều cao có tỷ lệ biến cố toàn thân nặng hơn một chút sau hai liều so với nhóm tiêm vắc xin liều thấp và nhóm giả dược.
Tỷ lệ phần trăm đối tượng nghiên cứu báo cáo các tác dụng phụ không mong muốn là tương đương giữa các nhóm tiêm sản phẩm nghiên cứu, với 39% ở nhóm vắc xin liều thấp, 38% ở nhóm vắc xin liều cao và 33% ở nhóm giả dược.
Hầu hết các tác dụng phụ ngoài dự kiến được báo cáo đều có mức độ từ nhẹ đến trung bình Chỉ có một tác dụng phụ nặng, cụ thể là gãy xương đòn, được xác định là không liên quan đến vắc xin và xảy ra trong nhóm tiêm vắc xin với liều 7,5mcg.
Luận án Y tế cộng đồng
Các tác dụng phụ ngoài dự kiến có liên quan đến vắc xin bao gồm buồn nôn nhẹ, tăng bilirubin ở mức trung bình, tăng alanine aminotransferase trung bình, cùng với triệu chứng hoa mắt và chóng mặt nhẹ.
Kết quả thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 1 của vắc xin cúm IVACFLU-A/H5N1 tại Việt Nam cho thấy đáp ứng miễn dịch rõ rệt sau mỗi liều tiêm (7,5mcg và 15mcg), với tất cả đối tượng nghiên cứu có huyết thanh âm tính trước khi tiêm Tỷ lệ người tham gia đạt hiệu giá kháng thể HAI ≥1:40 tăng lên đáng kể sau mỗi liều, cùng với tỷ lệ có hiệu giá kháng thể HAI tăng ≥4 lần Giá trị GMT và GMTR cho hiệu giá kháng thể HAI cũng được ghi nhận vào ngày 21 sau mỗi mũi tiêm Đối với kháng thể trung hòa huyết thanh, nghiên cứu cho thấy tỷ lệ đối tượng có hiệu giá ≥1:40 và các chỉ số GMT, GMTR tương ứng cũng tăng cao sau tiêm.
Trong nghiên cứu về kháng thể ức chế ngưng kết hồng cầu (HAI), có 22,6% đối tượng tiêm vắc xin liều thấp và 28,1% đối tượng tiêm liều cao đạt hiệu giá kháng thể HAI ≥1:40 sau mũi 1 Sau mũi 2, tỷ lệ này tăng lên 41,9% và 56,3% tương ứng Không có đối tượng nào trong nhóm giả dược đạt hiệu giá kháng thể HAI ≥1:40 Sự khác biệt về tỷ lệ đáp ứng giữa nhóm tiêm vắc xin và nhóm giả dược là đáng kể, với các giá trị 95% CI cho thấy hiệu quả rõ rệt sau cả hai mũi tiêm.
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Phương pháp nghiên cứu
Nghiên cứu này là một thử nghiệm lâm sàng Giai đoạn 2 và 3, được thiết kế mù kép, ngẫu nhiên và có đối chứng giả dược, nhằm đánh giá tính an toàn và khả năng sinh miễn dịch của vắc xin cúm A/H5N1 bất hoạt (IVACFLU-A/H5N1) do IVAC sản xuất, thực hiện trên người trưởng thành khỏe mạnh tại Việt Nam.
2.2.1 Cỡ mẫu và phương pháp chọn mẫu Đây là nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 2 và 3 và cỡ mẫu cho nghiên cứu này được chọn để phân tích chủ yếu về tính sinh miễn dịch và phân tích tính an toàn vắc xin phòng cúm IVACFLU-A/H5N1 Do đó cỡ mẫu tuân thủ theo Hướng dẫn thử nghiệm lâm sàng vắc xin của Bộ Y tế [2] Căn cứ Thông tư số 03/2012/TT-BYT ngày 02/02/2012 của Bộ Y tế: Giai đoạn 2 cỡ mẫu tối thiểu là 200 đối tượng, giai đoạn 3 cỡ mẫu tối thiểu là 500 đối tượng Cỡ mẫu này cũng tương tự như quy định của WHO và các nước
Thực tế nghiên cứu đã tuyển chọn được 200 đối tượng cho giai đoạn 2
Trong nghiên cứu, có tổng cộng 630 đối tượng tham gia ở giai đoạn 3, bao gồm 525 người trong nhóm tiêm vắc xin và 105 người trong nhóm nhận giả dược Tổng số đối tượng nghiên cứu cho cả hai giai đoạn là 625, với 100 người tham gia ở giai đoạn 2.
525 cho Giai đoạn 3) được nhận vắc xin nghiên cứu với liều được chọn là 15mcg
Các đối tượng được chọn vào nghiên cứu theo thứ tự đến chấp thuận tham gia và được khám sàng lọc đủ tiêu chuẩn tham gia nghiên cứu Trong
Trong luận án Y tế cộng đồng giai đoạn 2, đối tượng nghiên cứu được phân ngẫu nhiên theo tỷ lệ 1:1 giữa giả dược và vắc xin IVACFLU-A/H5N1 liều 15mcg Ở giai đoạn 3, tỷ lệ phân ngẫu nhiên là 5:1, trong đó có 5 đối tượng nhận vắc xin IVACFLU-A/H5N1 liều 15mcg và 1 đối tượng nhận giả dược.
Cách tính tuổi và phân tầng nhóm tuổi trong nghiên cứu được thực hiện vào ngày ký phiếu chấp thuận tham gia, với hai nhóm tuổi chính là 18-40 và 41-60 Tuổi được xác định dựa trên ngày sinh ghi trong giấy chứng minh nhân dân hoặc căn cước công dân, và được tính theo tuổi tròn Cụ thể, người 18 tuổi là người đã qua sinh nhật lần thứ 18, trong khi người 60 tuổi là người chưa đến sinh nhật lần thứ 61 Phương pháp này được áp dụng phổ biến trong các thử nghiệm lâm sàng vắc xin trên toàn cầu.
Quy trình phân bổ đối tượng nghiên cứu vào nhóm nghiên cứu được thực hiện thông qua thử nghiệm mù kép, ngẫu nhiên có đối chứng Trong giai đoạn 2, các đối tượng được chia thành hai nhóm với tỷ lệ 1:1, gồm nhóm vắc xin IVACFLU-A/H5N1 liều 15mcg và nhóm giả dược Giai đoạn 3 tiếp tục phân chia đối tượng thành hai nhóm, trong đó một nhóm nhận vắc xin IVACFLU-A/H5N1 liều 15mcg và nhóm còn lại nhận giả dược theo tỷ lệ 5:1 Mỗi đối tượng sẽ được cấp một mã số sàng tuyển duy nhất bởi nghiên cứu viên sau khi ký giấy chấp thuận tham gia.
Nghiên cứu viên có trách nhiệm lưu giữ và cập nhật sổ sàng tuyển cho nghiên cứu, trong đó ghi chép các thông tin cơ bản như họ tên, ngày sàng tuyển, giới tính, và ngày sinh của đối tượng nghiên cứu Sổ này cũng xác định xem đối tượng có đạt tiêu chuẩn để được chọn vào nghiên cứu hay không.
Luận án Y tế cộng đồng cần xác định rõ đối tượng nghiên cứu và thời gian lựa chọn Nếu một đối tượng không được chọn, cần phải nêu rõ lý do không được phân bổ ngẫu nhiên Mỗi mã số đối tượng nghiên cứu chỉ được cấp một lần và không được sử dụng lại Trong trường hợp cần bổ sung đối tượng nghiên cứu để thay thế cho một đối tượng đã được phân ngẫu nhiên nhưng không tiêm sản phẩm, nhà tài trợ cần xem xét kỹ lưỡng trước khi đưa ra quyết định.
Quy trình phân khối ngẫu nhiên hoán vị được áp dụng để tạo danh sách ngẫu nhiên cho giai đoạn 2 và 3 của nghiên cứu Việc phân ngẫu nhiên được thực hiện theo tầng, dựa trên tỉnh và nhóm tuổi (18-40 tuổi và 41-60 tuổi) Kích cỡ của khối ngẫu nhiên cho mỗi giai đoạn nghiên cứu được xác định dựa trên số nhóm và số lượng đối tượng dự kiến được chọn tại mỗi tỉnh.
Quy trình làm mù trong nghiên cứu của IVAC bao gồm việc sử dụng danh sách phân mã ngẫu nhiên để dán nhãn vắc xin và giả dược, sau đó niêm phong ngay lập tức Niêm phong chỉ được mở khi dữ liệu thử nghiệm lâm sàng đã hoàn tất và được khóa Trong trường hợp mở mã, nghiên cứu viên phải báo cáo bằng văn bản cho nhà tài trợ và Hội đồng Đạo đức giám sát nghiên cứu.
Lọ vắc xin IVACFLU-A/H5N1 và giả dược được thiết kế với hình thức bên ngoài tương tự nhau để đảm bảo tính mù sản phẩm Vắc xin có chứa tá chất hydroxit nhôm, trong khi giả dược là dung dịch muối đệm phosphate (PBS), dẫn đến sự khác biệt nhỏ về màu sắc Để giải quyết vấn đề này, IVAC đã áp dụng nhãn làm mù với kích thước tương tự, chỉ chứa mã sản phẩm nghiên cứu, được dán đè lên nhãn gốc của cả hai loại lọ.
Luận án Y tế cộng đồng này được thực hiện tại IVAC với quy trình đảm bảo mù kép cho cán bộ tiêm và đối tượng nghiên cứu Một cán bộ tiêm chủng khác được đào tạo để rút sản phẩm nghiên cứu từ lọ có mã số, thực hiện trong khu vực kín Sau khi lấy sản phẩm vào bơm tiêm, cán bộ này dán nhãn để đảm bảo tính mù trước khi giao cho cán bộ tiêm Quy trình thực hành chuẩn đã được ban hành để đảm bảo việc thực hiện đúng nguyên tắc mù kép Cán bộ phụ trách lấy sản phẩm sẽ không tham gia vào việc đánh giá biến cố sau tiêm của các đối tượng nghiên cứu.
Mã số của sản phẩm nghiên cứu tiêm cho từng đối tượng được ghi chép chi tiết trong sổ báo cáo từng trường hợp (CRF), giúp phân biệt và theo dõi từng cá nhân trong quá trình nghiên cứu.
Danh sách phân ngẫu nhiên chứa mã số đối tượng nghiên cứu, mã sản phẩm và loại sản phẩm nghiên cứu được bảo quản an toàn bởi cán bộ không tham gia trực tiếp vào thử nghiệm lâm sàng Danh sách này thường không được mở hoặc liên kết với cơ sở dữ liệu thử nghiệm cho đến khi mọi dữ liệu được khóa Các nghiên cứu viên không có thông tin về danh sách phân ngẫu nhiên trong suốt quá trình thử nghiệm Trong trường hợp đối tượng nghiên cứu gặp biến cố bất lợi nghiêm trọng có thể liên quan đến sản phẩm nghiên cứu, việc mở mã và thông báo sản phẩm được sử dụng có thể được thực hiện cho nghiên cứu viên.
Kỹ thuật và phương pháp thu thập thông tin
2.3.1 Công cụ thu thập thông tin
Các thông tin lên quan đến nghiên cứu được thu thập và ghi chép trên các biểu mẫu của nghiên cứu:
Bộ phiếu thu thập số liệu (CRF) là tài liệu quan trọng, chứa đựng đầy đủ thông tin cần thiết cho từng đối tượng nghiên cứu trong quá trình thống kê và phân tích dữ liệu Thông tin này sẽ được thu thập bởi nghiên cứu viên hoặc người được chỉ định, bao gồm các yếu tố như tên, tuổi, ngày sinh, tình trạng sức khỏe, mã số quản lý, và mã số vắc xin tiêm Ngoài ra, bộ phiếu cũng ghi nhận ngày và giờ tiêm vắc xin, các phản ứng sau tiêm (nếu có), cùng với kết quả đáp ứng miễn dịch.
Phiếu theo dõi hàng ngày là công cụ quan trọng để ghi lại các phản ứng và hiện tượng sức khỏe sau mỗi mũi tiêm Người dùng cần thực hiện việc ghi chép này trong vòng 7 ngày, giúp theo dõi tình trạng sức khỏe một cách hiệu quả.
2.3.2 Thu thập và kiểm tra số liệu
Sau khi thực hiện sàng lọc, thăm khám hoặc tiêm vắc xin, nghiên cứu viên cần ghi chép đầy đủ thông tin vào các mục yêu cầu trong CRF cho từng đối tượng tham gia.
Sau khi tiêm vắc xin hoặc giả dược, đối tượng sẽ được yêu cầu ở lại để theo dõi ít nhất 30 phút Trong thời gian này, nghiên cứu viên sẽ kiểm tra xem đối tượng có bất kỳ phản ứng nào đối với mũi tiêm hay không.
Luận án Y tế cộng đồng hướng dẫn cách theo dõi sức khỏe và ghi Phiếu theo dõi hàng ngày cho ĐTNC Sau khi tiêm, ĐTNC cần ghi chép lại các phản ứng sức khỏe trong vòng 7 ngày và nộp phiếu theo dõi tại lần thăm khám tiếp theo Bảy ngày sau tiêm, ĐTNC sẽ quay lại điểm tiêm để kiểm tra sức khỏe, bao gồm đo nhiệt độ, mạch, huyết áp, và khám sức khỏe nếu có triệu chứng Nghiên cứu viên và ĐTNC sẽ cùng rà soát phiếu theo dõi hàng ngày để đảm bảo thông tin được ghi chép chính xác.
Trước, trong và sau khi nhập dữ liệu từ CRF và Phiếu theo dõi hàng ngày, cán bộ của tổ chức hợp đồng nghiên cứu (CRO) tiến hành kiểm tra và quản lý dữ liệu nghiên cứu để đảm bảo chất lượng tại địa điểm nghiên cứu Quá trình này bao gồm rà soát CRF, Phiếu theo dõi hàng ngày và so sánh với tài liệu gốc Đối với dữ liệu đã nhập vào hệ thống, một hệ thống kiểm tra tự động về tính hợp lệ của dữ liệu được áp dụng cho cơ sở dữ liệu Báo cáo về các thiếu sót và sai lệch dữ liệu được chuyển tiếp đến các điều phối viên và giám sát viên nghiên cứu để kịp thời giải quyết.
Cơ sở dữ liệu nghiên cứu được cập nhật dựa trên báo cáo truy vấn đã được xử lý, đồng thời thực hiện xem xét thủ công theo kế hoạch quản lý dữ liệu đã được thiết lập Tất cả các thay đổi trong cơ sở dữ liệu nghiên cứu đều được ghi chép cẩn thận.
Tất cả thông tin và dữ liệu định danh của đối tượng nghiên cứu được mã hóa bằng mã số duy nhất, giữ nguyên trong suốt quá trình nghiên cứu, từ thu thập đến xử lý và phân tích dữ liệu.
Dữ liệu được thu thập từ các CRF và phiếu theo dõi hàng ngày, sau đó được nhập vào phần mềm kết nối trực tuyến với máy chủ dựa trên công nghệ hiện đại.
Luận án Y tế cộng đồng webbase Số liệu được xuất ra quản lý và phân tích bằng SAS (Statistical Analysis Systems).
Phương pháp xử lý số liệu
- Phân tích số liệu bằng phần mềm S.A.S
- Số liệu trình bày dưới dạng bảng qua tần số, tỷ lệ phần trăm và khoảng tin cậy 95%
- Kiểm định Chi bình phương, Fisher để kiểm tra sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nhóm Giá trị p