Luận án đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen kras ở mức độ rna của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10mm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y Luận văn luận án 2023 === *** === TRẦN THANH HÀ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS Ở MỨC ĐỘ RNA CỦA BỆNH NHÂN POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10 MM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Hà Nội - 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y === *** === Luận văn luận án 2023 TRẦN THANH HÀ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS Ở MỨC ĐỘ RNA CỦA BỆNH NHÂN POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10 MM Chuyên ngành : Nội khoa Mã số : 9720107 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN QUANG DUẬT GS.TS NGUYỄN LĨNH TOÀN Hà Nội - 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Những kết số liệu luận án trung thực, xác, chưa cơng bố Luận văn luận án 2023 cơng trình nghiên cứu khoa học khác Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Nghiên cứu sinh Trần Thanh Hà LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban Giám đốc, Phòng Đào tạo Sau Đại học, Phòng kế hoạch tổng hợp, Bộ mơn - Khoa Nội tiêu hóa - Bệnh viện Quân y 103 - Học viện Quân y; Đảng ủy, Ban giám đốc, Phòng kế hoạch tổng hợp, Khoa Thăm dị chức năng, Trung tâm Tiêu hóa Gan mật Bệnh viện Bạch Luận văn luận án 2023 Mai Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Trung ương; Bạn bè đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi tận tình thời gian học tập nghiên cứu.  Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Quang Duật GS.TS Nguyễn Lĩnh Toàn người thầy tận tình, hết lịng học trị, trực tiếp hướng dẫn, bảo, cung cấp cho kiến thức phương pháp luận quý báu suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án.  Tôi xin trân trọng cảm ơn tập thể Trung tâm Giải phẫu bệnh - Tế bào học Bệnh viện Bạch Mai; Bộ môn - Khoa giải phẫu bệnh lý - Bệnh viện Qn y 103; Phịng Cơng nghệ Gen Di truyền tế bào - Viện nghiên cứu Y Dược học quân - Học viện Quân y tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành nghiên cứu mình.  Tơi xin chân thành cảm ơn Thầy, Cơ Bộ mơn Nội tiêu hóa Học viện Qn y Hội đồng chấm luận án cấp đóng góp nhiều ý kiến quý báu cho luận án tơi hồn thiện.  Tơi xin bày tỏ cảm ơn tới bệnh nhân thân yêu tin tưởng đồng ý tham gia, hỗ trợ hợp tác giúp tơi hồn thành nghiên cứu này.  Cuối tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình – Bố Mẹ vợ tôi, người thân bạn bè, dành cho yêu thương vô bờ hỗ trợ tối suốt trình thực đề tài này.  Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả Trần Thanh Hà MỤC LỤC Luận văn luận án 2023 LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm dịch tễ học, phân loại polyp dựa hình ảnh nội soi, mơ bệnh học chẩn đốn polyp đại trực tràng 1.1.1 Dịch tễ học 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Chẩn đoán 13 1.2 Gen KRAS, đột biến gen KRAS phương pháp xác định đột biến gen KRAS người .19 1.2.1 Gen KRAS 19 1.2.2 Đột biến gen KRAS chế sinh ung thư 23 1.2.3 Các phương pháp sinh học phân tử xác định đột biến gen KRAS 25 1.3 Đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng .37 1.3.1 Vai trò đột biến gen KRAS tiền trình biến đổi từ polyp sang ung thư đại trực tràng 37 1.3.2 Tình hình nghiên cứu đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng giới Việt Nam .39 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .43 2.1 Đối tượng nghiên cứu 43 2.1.1 Nhóm bệnh nhân polyp đại trực tràng 43 2.1.2 Nhóm bệnh nhân ung thư đại trực tràng .44 2.2 Phương pháp nghiên cứu .44 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu .44 2.2.2 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu .44 2.2.3 Địa điểm nghiên cứu 44 Luận văn luận án 2023 2.2.4 Thời gian nghiên cứu 45 2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu 45 2.3.1 Nhóm bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 45 2.3.2 Nhóm bệnh nhân ung thư ĐTT 48 2.3.3 Xét nghiệm mô bệnh học 48 2.3.4 Xét nghiệm đột biến gen KRAS mức độ RNA 49 2.4 Các tiêu nghiên cứu tiêu chuẩn chẩn đoán kèm 61 2.4.1 Chỉ tiêu lâm sàng 61 2.4.2 Chỉ tiêu polyp hình ảnh nội soi 62 2.4.3 Chỉ tiêu polyp mô bệnh học 63 2.4.4 Đánh giá kết xét nghiệm đột biến gen KRAS mức độ RNA 64 2.6 Đạo đức nghiên cứu 65 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .67 3.1 Đặc điểm số triệu chứng lâm sàng nhóm nghiên cứu .67 3.1.1 Đặc điểm tuổi 67 3.1.2 Đặc điểm giới 68 3.1.3 Đặc điểm tiền sử gia đình 68 3.1.4 Đặc điểm triệu chứng lâm sàng 69 3.2 Đặc điểm hình ảnh nội soi mơ bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 70 3.2.1 Đặc điểm hình ảnh nội soi 71 3.2.2 Đặc điểm mô bệnh học 75 3.2.3 Mối liên quan mô bệnh học với lâm sàng hình ảnh nội soi 79 3.3 Đột biến gen KRAS mức độ RNA bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 85 3.3.1 Tỷ lệ đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng 85 3.3.2 Mối liên quan đột biến gen KRAS với số hình ảnh nội soi bệnh nhân polyp đại trực tràng .88 Luận văn luận án 2023 3.3.3 Mối liên quan đột biến gen KRAS với mô bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 90 3.3.4 Mối liên quan đột biến gen KRAS với nguy ung thư đại trực tràng .92 Chương BÀN LUẬN 97 4.1 Đặc điểm lâm sàng đối tượng nghiên cứu 97 4.1.1 Đặc điểm tuổi 97 4.1.2 Đặc điểm giới tính .99 4.1.3 Đặc điểm tiền sử bệnh .100 4.1.4 Triệu chứng lâm sàng 101 4.2 Đặc điểm hình ảnh nội soi, mơ bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 103 4.2.1 Đặc điểm hình ảnh nội soi 103 4.2.2 Đặc điểm mô bệnh học 109 4.2.3 Mối liên quan mô bệnh học với đặc điểm lâm sàng nội soi polyp đại trực tràng ≥ 10mm 114 4.3 Đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước >10mm 117 4.3.1 Tỷ lệ đột biến gen KRAS mối liên quan với tuổi giới tính.119 4.3.2 Mối liên quan đột biến gen KRAS mức độ RNA với số đặc điểm hình ảnh nội soi mơ bệnh học bệnh nhân polyp đại trực tràng .124 4.3.3 Mối liên quan đột biến gen KRAS mức độ RNA với nguy ung thư đại trực tràng 129 KẾT LUẬN 132 KIẾN NGHỊ .134 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TT Phần viết tắt ARMS Phần viết đầy đủ Amplification Refractory Mutation System (Hệ thống khuyếch đại đột biến) BN Bệnh nhân CEA Carcinoembryonic antigen CA19.9 Cancer Antigen 19-9 CS Cộng DNA Deoxyribonucleic acide ddNTP dideoxynucleotid ĐTT Đại trực tràng ExBP-RT Extendable blocking probe in reverse transcription Luận văn luận án 2023 (Phiên mã ngược với mẫu dị khóa kéo dài) 10 EGFR Epidermal growth factor receptor (Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì) 11 FOBT Feacal Occult Blood Test (Xét nghiệm tìm máu ẩn phân) 12 FIT Feacal Immunochemical Test (Xét nghiệm hóa miễn dịch phân) 13 KRAS Kirsten rat sarcoma virus 14 LST Laterally spreading tumor (U lan rộng sang bên) 15 MAPK Mitogen-activated protein kinase 16 MBH Mô bệnh học 17 OR Ood ratio (Tỷ suất chênh) 18 RE Restriction enzyme (Enzym cắt giới hạn) 19 RNA Ribonucleic acide TT 20 Phần viết tắt PCR Phần viết đầy đủ Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi Polymarase) 21 RFLP Restriction fragment length polymorphism Luận văn luận án 2023 (Đa hình độ dài đoạn cắt giới hạn) 22 STB Số tiêu 23 WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Tên bảng Trang Các yếu tố nguy u tuyến, polyp cưa ung thư đại Luận văn luận án 2023 trực tràng .5 2.1 Danh mục mồi sử dụng .50 2.2 Danh mục hóa chất sử dụng 51 2.3 Danh mục máy móc thiết bị sử dụng 52 2.4 Thành phần phản ứng bước phiên mã ngược làm giàu gen đích 56 2.5 Nồng độ mồi phiên mã ngược (mồi đặc hiệu đột biến mẫu dị khóa) hỗn hợp mồi RT1 RT2 5X 57 2.6 Chu trình nhiệt phiên mã ngược làm giàu gen đích .58 2.7 Thành phần phản ứng qPCR khuếch đại cDNA KRAS tổng số 59 2.8 Thành phần phản ứng qPCR khuếch đại cDNA đột biến KRAS gen quản gia GAPDH 59 2.9 Chu trình nhiệt phản ứng qPCR phân tích đột biến 60 2.10 Giá trị cut-off quy trình phát đột biến gen KRAS mức độ RNA .61 3.1 Đặc điểm tuổi nhóm bệnh nhân nghiên cứu 67 3.2 Đặc điểm giới nhóm bệnh nhân nghiên cứu 68 3.3 Đặc điểm tiền sử gia đình nhóm nghiên cứu 68 3.4 Đặc điểm số triệu chứng lâm sàng nhóm bệnh nhân nghiên cứu 69 3.5 Thời gian xuất triệu chứng 70 3.6 Đặc điểm vị trí polyp 71 3.7 Đặc điểm hình dạng bề mặt polyp 72 57 Einspahr J.G., Martinez M.E., Jiang R., et al (2006) Associations of Ki-ras proto-oncogen mutation and p53 gen overexpression in sporadic colorectal adenomas with demographic and clinicopathologic characteristics Cancer Epidemiol Biomarkers Prev., 15(8): 1443–1450 Luận văn luận án 2023 58 Petrosino J.F., Highlander S., Luna R.A., et al (2009) Metagenomic Pyrosequencing and Microbial Identification Clinical Chemistry, 55(5): 856–866 59 Jung S.J., Park J.H., Hwang I., et al (2013) Different TERT Expression between colorectal adenoma and serrated polyp Medicina, 56: 463 60 Roberts R.J Belfort M., Bestor T., et al (2003), A nomenclature for restriction enzymes, DNA methyltransferases, homing endonucleases and their gens Nucleic Acids Research, 31(7): 1805-1812 61 Levidou G., Saetta A., Gigelou F., et al (2012) ERK/pERK expression and B-raf mutations in colon adenocarcinomas: correlation with clinicopathological Oncology, 10:47 characteristics World Journal of Surgical 62 Mastutik G., Rahniayu A., Rahaju A.S., et al (2016) The mutation status of KRAS gen codon 12 and 13 in colorectal adenocarcinoma Indonesian Journal of Clinical Pathology and Medical Laboratory, 23(1): 12–17 63 Faleel  F.D.M.,  De Zoysa M.I.M., Lokuhetti M.D.S., et al (2016) Modified mismatch polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism detected mutations in codon 12 and 13 of exon of K- ras gen in colorectal cancer patients and its association with liver metastases: Data from a South Asian country J Cancer Res Ther, 12(4):1272-1277 64 Newton C.R., Graham A., Heptinstall L.E., et al (1989) Analysis of any point mutation in DNA The amplification refractory mutation system (ARMS) Nucleic Acids Res, 7(17): 2503-16 65 Thelwell N., Millington S., Solinas A., et al (2000) Mode of action Luận văn luận án 2023 and application of Scorpion primers to mutation detection Nucleic Acids Res, 19(28): 3752-61 66 Bando H., Yoshino T., Tsuchihara K., et al (2011) KRAS mutations detected by the amplification refractory mutation system-Scorpion assays strongly correlate with therapeutic effect of cetuximab Br J Cancer, 105 (3), 403-406 67 Franklin W.A., Haney J., Sugita M., et al (2010) KRAS mutation: comparison of testing methods and tissue sampling techniques in colon cancer J Mol Diagn, 1(12): 43-50 68 Krol L.C., Hart N.A.T, Methorst N., et al (2012) Concordance in KRAS and BRAF mutations in endoscopic biopsy samples and resection specimens of colorectal adenocarcinoma Eur J Cancer, 7(48): 1108-15 69 Tatsumi K., Mitani Y., Watanabe J., et al (2008) Rapid Screening Assay for KRAS Mutations by the Modified Smart Amplification Process Journal of Molecular Diagnostics, 10(6): 520-526 70 Nollau P., Wagenr C (1997) Methods for detection of point mutations: performance and quality assessment IFCC Scientific Division, Committee on Molecular Biology Techniques Clin Chem, 43(7): 1114-1128 71 Frayling I.M (2002) Methods of molecular analysis: mutation detection in solid tumours Mol Pathol, 55(2): 73-79 72 Simi L., Pratesi N., Vignoli M., et al (2008) High-resolution melting analysis for rapid detection of KRAS, BRAF, and PIK3CA gen mutations in colorectal cancer Am J Clin Pathol, 130(2): 247-253 73 Clayton S.J., Scott F.M., Walker J., et al (2000) K-ras point mutation detection in lung cancer: comparison of two approaches to somatic mutation detection using ARMS allele-specific amplification Clin Chem, 46(12): 1929-1938 Luận văn luận án 2023 74 Ho T.H (2015), Development of amplification-based technologies for enrichment of nucleic acids with difficult sequences or low-abundance point mutations Academic dissertation, Faculty of Medicine, University of Helsinki, Finland 75 Chen X., Sullivan P.F (2003) Single nucleotide polymorphism genotyping: biochemistry, protocol, cost and throughput Pharmacogenomics Journal, 3(2): 77-96 76 Kim S., Misra A (2007) SNP genotyping: Technologies and biomedical applications Annual Review of Biomedical Engineering, 9: 289-320 77 Markham N.R., Zuker M (2005) DINAMelt web server for nucleic acid melting prediction Nucleic Acids Res, 33(Web Server issue): W577-581 78 Morlan J., Baker J., Sinicropi D., et al (2009) Mutation Detection by Real-Time PCR: A Simple, Robust and Highly Selective Method PLoS ONE 4(2): e4584 79 Wang H., Jiang J., Mostert B., et al (2013) Allele-specific, nonextendable primer blocker PCR (AS-NEPB-PCR) for DNA mutation detection in cancer J Mol Diagn, 15(1): 62-69 80 Watkins N.E., Kennelly W.J., Tsay M.J et al (2011) Thermodynamic contributions of single internal rA·dA, rC·dC, rG·dG and rU·dT mismatches in RNA/DNA duplexes Nucleic Acids Research, 39(5): 1894-1902 81 Zhou L., Wang Y and Wittwer C.T (2011) Rare allele enrichment and detection by allele-specific PCR, competitive probe blocking, and melting analysis Biotechniques, 50(5): 311-318 82 Kim E.C., Lance P (1997) Colorectal polyps and their relationship to Luận văn luận án 2023 cancer Gastroenterol Clin North Am, 26(1): 1-17 83 Huang D., Sun W., Zhou Y., et al (2018) Mutations of key driver gens in colorectal cancer progression and metastasis Cancer Metastasis Rev, 37: 173-187 84 Hardiman K (2018) Update on sporadic colorectal cancer gentics Clin Colon Rectal Surg, 31: 147–152 85 Hasbullah H.H., Marahaini Musa M (2021) Gen therapy targeting p53 and KRAS for colorectal cancer treatment: A Myth or the Way Forward? Int J Mol Sci., 22: 11941 86 Barry E.L.R., Baron J.A., Grau M., et al (2006) K-ras mutation in incident sporadic adenomas Cancer, 106(5): 1036-1040 87 Yamane L.S., Scapulatempo-Neto C., Alvarenga L., et al (2014) KRAS and BRAF mutations and MSI status in precursor lesions of colorectal cancer detected by colonoscopy Oncology Reports, 32: 1419-1426 88 Velho S., Moutinho C., Cirnes L., et al (2008), BRAF, KRAS and PIK3CA mutations in colorectal serrated polyps and cancer: Primary or secondary gentic events in colorectal carcinogensis?, BMC Cancer, 8: 255 89 Lorentzen J.A., Grzyb K., Paula M., et al (2016), Oncogen Mutations in Colorectal Polyps Identified in the Norwegian Colorectal Cancer Prevention (NORCCAP) Screening Study Clinical Medicine Insights: Pathology, 9: 19–28 90 Yi C., Huang Y., Yu X., et al (2016), Clinicopathologic distribution of KRAS and BRAF mutations in a Chinese population with colorectal cancer precursor lesions Oncotarget, 7(13): 17265-17274 91 Juarez M., Egoavil C , Rodriguez-Soler M., et al (2017) KRAS and Luận văn luận án 2023 BRAF somatic mutations in colonic polyps and the risk of metachronous neoplasia PLoS ONE, 12(9): e0184937 92 Lê Văn Thiệu (2012) Nghiên cứu đột biến gen KRAS mối liên quan đột biến gen KRAS với số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh ung thư đại trực tràng Luận án Tiến sỹ y học, Học viện Quân y 93 Bùi Ánh Tuyết (2016) Nghiên cứu số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tình trạng đột biến gen KRAS ung thư đại trực tràng Bệnh viện K Luận án Tiến sỹ y học, Trường Đại học y Hà Nội 94 Nguyễn Kiến Dụ (2017) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen KRAS, BRAF bệnh nhân ung thư đại trực tràng Luận án Tiến sỹ y học, Trường Đại học y Hà Nội 95 Nguyễn Minh Hà (2014) Xác định đột biến gen EGFR gen KRAS định tính đáp ứng thuốc điều trị bệnh ung thư phổi không tế bào nhỏ Luận án Tiến sỹ y học, Trường Đại học Y Hà Nội 96 Nguyễn Thị Chín, Nguyễn Văn Quân (2013) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, hình ảnh nội soi mơ bệnh học bệnh polyp đại trực tràng Bệnh viện Việt Tiệp Hải Phòng Y học thực hành, 899: 31- 36 97 Bùi Nhuận Quý, Nguyễn Thúy Oanh (2013) Khảo sát mối liên quan lâm sàng, nội soi giải phẫu bệnh polyp đại trực tràng Y học TP Hồ Chí Minh, 17(6): 19-24 98 Nguyễn Cơng Long, Hồng Văn Chương, Nguyễn Hoài Nam CS (2022) Đặc điểm lâm sàng nội soi tổn thương polyp đại trực tràng phát Trung tâm nội soi tiêu hóa - gan mật, Bệnh viện Bạch Mai Tạp chí Y học Việt Nam, 514 (2): 53- 58 99 Albasri A., Yosef H., Hussaint A., et al (2014) Profile of colorectal polyps: a Retrospective study from King Fahad Hospital, Madinah, Luận văn luận án 2023 Saudi Arabia Asian Pac J Cancer Prev, 15(6): 2669-2673 100.Yadav R., Ganesh P., Shanmuganathan S., et al (2019) Profile of Colonic polyps in tertiary care center in South India Int J Adv Res, 7(10): 1238-1242 101.Tamannna K., Effat N., Wei R.J., et al (2016) Histological profile and risk factor analysis of colonic polyp: distal villous type is common predictor of high grade cytological dysplasia Gastroenterol Hepatol Open Access, 4(1): 28-31 102.Võ Hồng Minh Công (2015) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học, biểu lộ protein P53, Ki67, Her-2/Neu ung thư polyp đại trực tràng lớn 10mm Luận án Tiến sĩ y học, Học viện Quân y 103.Vũ Văn Khiên, Trịnh Tuấn Dũng, Nguyễn Khắc Tấn CS (2016) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học hiệu cắt polyp đại trực tràng kích thước 2cm qua nội soi Tạp chí y học Việt Nam, 2: 158-163 104.Diamond S.J., Enestvedt B.K., Jiang Z., et al (2011) Adenoma detection rate increases with each decade of life after 50 years of age Gastrointest Endosc, 74(1): 135–40 105.Maltzman T., Knoll K., Martinez M.E., et al (2001) Ki-ras protooncogen mutation in sporadic adenomas: Relationship to histologic and clinical characteristics Gastroenterrology, 121: 302-309 106.McCashland T.M., Brand R., Lyden E., et al (2001) Gender differences in colorectal polyps and tumors Am J Gastroenterol, 96(3): 882-886 107.Pan J., Cen L., Xu L., et al (2020) Prevalence and risk factors for Luận văn luận án 2023 colorectal polyps in a Chinese population: a retrospective study Scientific Report, 10: 6974 108.Nguyễn Duy Thắng (2013) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học polyp đại trực tràng Bệnh viện Nơng Nghiệp Y học TP Hồ Chí Minh, 17(3): 85-89 109.Basnet D., Makaju R., Gurung R.B., et al (2021) Colorectal polyps: A histopathological study in tertiary care center Nepalese Med Journal, 4: 414-418 110.Jeong Y.H, Kim K.O, Park C.S., et al (2016) Risk Factors of Advanced Adenoma in Small and Diminutive Colorectal Polyp J Korean Med Sci, 31(9), 1426-1430 111.Hassan C, Pickhardt P.J, Kim D.H., et al (2010) Systematic review: distribution of advanced neoplasia according to polyp size at screening colonoscopy Aliment Pharmacol Ther, 31(2), 210-217 112.Murakami R., Tsukuma H., Kanamori S., et al (1990) Natural history of colorectal polyps and the effect of polypectomy on occurrence of subsequnet cancer Int J Cancer, 46(2): 159-164 113.Al-Enezi S.A., Alsurayei S.A., Ismail A.E., et al (2010) Adenomatous colorectal polyps in patients referred for colonoscopy in a regional hospital in Kuwait Saudi J Gastroenterol, 16: 188-93 114.Long X., Li X., Ma L., et al (2015) Clinical and endoscopicpathological characteristics of colorectal polyps: an analysis of 1,234 cases Int J Clin Exp Med., 8(10): 19367–19373 115.Mannea U., Chandrakumar S., Katkooria V.R., et al (2010) Development and progression of colorectal neoplasia Cancer Biomark, 9(1‐6): 235–265 S., Lieberman Recommendations for D., Anderson Follow-Up J.C., After et al (2020),  Colonoscopy and Luận văn luận án 2023 116.Gupta Polypectomy: A Consensus Update by the US Multi-Society Task Force on Colorectal Cancer Gastrointestinal Endoscopy, 91(3): 463‐ 485 117.Morris R.G., Curtis L.J., Romanowski P., et al (1996) Ki-ras mutations in adenomas: a characteristic of cancer-bearing colorectal mucosa J Pathol 180(4): 357–63 118.Yang S., Farraye F.A., Mack C., et al (2004) BRAF and KRAS mutations in hyperplastic polyps and serrated adenomas of the colorectum: Relationship to histology and CpG island methylation status Am J Surg Pathol, 28: 1452–1459 119.Nusko G., Sachse R., Mansmann U., et al (1997) K-RAS-2 gen mutations as predictors of metachronous colorectal adenomas Scand J Gastroenterol, 32: 1035–1041 120.McLellan E.A., Owen R.A., Stepniewska L.A., et al (1993) High frequency of K-ras mutations in sporadic colorectal adenomas Gut, 34: 392–396 121.Burmer G.C., Loeb L.A (1989) Mutations in the KRAS2 oncogen during progressive stages of human colon carcinoma Proc Natl Acad Sci., 86: 2403–2407 122.Vogelstein B., Fearon E.R., Hamilton S.R., et al (1988) Gentic alteration during colorectal-tumor development N Engl J Med, 319: 525–532 123.Ando M., Maruyama M., Takemura K., et al (1991) Higher frequency of point mutations in the c-K-ras gen in human colorectal adenomas with severe atypia than in carcinomas Jpn J Cancer Res, 82: 245–249 Luận văn luận án 2023 124.Yadamsuren E.A., Nagy S., Pajor L., et al (2012) Characteristics of advanced- and non advanced sporadic polypoid colorectal adenomas: correlation to KRAS mutations Pathol Oncol Res, 18: 1077–84 125.Sadough A., Afshari M., Rosstami F., et al (2020) A Systematic review and meta-analysis on the prevalence of KRAS gen mutation in samples of colorectal cancer WCRJ, 7: e1522 126.Hyuna Sung, PhD 127.1 128.; Jacques Ferlay, MSc, ME 129.2 130.; Rebecca L Siegel BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU “NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS BẰNG PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG MẪU RNA TRONG POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10MM” Số nghiên cứu:…………… Họ tên: Địa chỉ: Ngày khám bệnh: Ngày soi: Luận văn luận án 2023 HÀNH CHÍNH Tuổi: Đặc điểm lâm sàng 1.1 Tiền sử A Bản thân: Có polyp đại trực tràng trước đó: Có Giới: SĐT: Nam Nữ Khơng Có polyp nơi khác trước đó: Có Khơng Cụ thể vị trí polyp:………………………………………………………… B Gia đình: Gia đình có người polyp đại trực tràng: Có Khơng Cụ thể người mắc:………………………………………………………… Gia đình có người ung thư đại trực tràng: Có Khơng Cụ thể người mắc:………………………………………………………… 1.2 Triệu chứng lâm sang - Đau bụng: Có - Phân táo: Có - Phân lỏng: - Phân nhày máu: - Phân táo, lỏng xen kẽ: Có - Mệt mỏi: Có Khơng - Sụt cân: Có Khơng - Khơng triệu chứng: Có Khơng Có Có Khơng Khơng Khơng Khơng Khơng 1.3 Thời gian xuất triệu chứng: < tháng - < 12 tháng 1-< năm > năm Kết nội soi đại tràng Vị trí polyp Đại tràng xuống Đại tràng sigma Trực tràng Chỉ 01 polyp Số lượng 1-4 polyp >4 polyp Kết sinh thiết: 3.1 Polyp u tuyến - Tuyến ống Kích thước polyp Luận văn luận án 2023 Manh tràng Đại tràng lên Đại tràng góc gan Đại tràng ngang Đại tràng góc lách Bề mặt polyp Xung huyết Lt Bình thường Có cuống Bán cuống Không cuống Cuống polyp Tuyến nhú 10 - < 20mm 20 - < 30mm ≥ 30mm Nhẵn Sùi Tuyến ống nhú - Mức đổ loạn sản polyp: Thấp Vừa 3.2 Polyp không u Polyp thiếu niên Polyp viêm Cao Polyp tăng sản Hamartomatous Kết đột biến gen KRAS - Đột biến gen KRAS: - Vị trí đột biến: Có Khơng Ngày…… tháng…… năm 20… Nghiên cứu sinh BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU “NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS BẰNG PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG MẪU RNA TRONG POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10MM” (PHẦN BỆNH NHÂN UNG THƯ) HÀNH CHÍNH Họ tên: Địa chỉ: Ngày vào viện: Luận văn luận án 2023 Số nghiên cứu:…………… Tuổi: Giới: SĐT: Ngày viện: Đặc điểm lâm sàng 1.1 Tiền sử A Bản thân: Có polyp đại trực tràng trước đó: Có Nam Nữ Số lưu trữ: Khơng Có bệnh mạn tính: Có Khơng Cụ thể bệnh mạn tính:………………………………………………………… B Gia đình: Gia đình có người polyp đại trực tràng: Có Khơng Cụ thể người mắc:………………………………………………………… Gia đình có người ung thư đại trực tràng: Có Không Cụ thể người mắc:………………………………………………………… 1.2 Triệu chứng lâm sàng - Đau bụng: Có - Phân táo: Có - Phân lỏng: - Phân nhày mũi: - Phân có máu: Có Khơng - Mệt mỏi: Có Khơng - Sụt cân: Có Khơng - Khơng triệu chứng: Có Khơng Có Có Khơng Không Không Không 1.3 Thời gian xuất triệu chứng: < tháng - < 12 tháng 1-< năm > năm Kết xét nghiêm máu HST:………………(g/L) Luận văn luận án 2023 2.1 Công thức máu Hồng cầu:………… (T/L) 2.2 Xét nghiệm marker CEA:………….(ng/mL) CA19.9:……… (ng/mL) CA72.4:………….(ng/mL) Kết nội soi đại tràng Manh tràng Đại tràng lên Đại tràng góc gan Đại tràng ngang Vị trí u Đại tràng góc lách Đại tràng xuống Đại tràng sigma Trực tràng Hậu mơn Chiếm < ¼ chu vi Kích Chiếm 1/4 - 1/2 chu vi thước u Chiếm 1/2 - 3/4 chu vi Chiếm > ¾ chu vi Thể sùi Hình Thể thâm nhiễm ảnh đại Thể loét thể u Thể sùi loét Thể nhẫn Điều trị phẫu thuật: Phương pháp phẫu thuật: Triệt □ nhẹ □ Manh tràng Đại tràng lên Đại tràng góc gan Khơng Hạch Có quanh u Số lượng hạch Đại tràng ngang Vị trí u Giảm Thể sùi Đại tràng góc lách Hình ảnh Thể thâm nhiễm Đại tràng xuống đại thể u Thể loét Đại tràng sigma Thể sùi loét Trực tràng Thể nhẫn Chiếm < ¼ chu vi Dưới niêm mạc Kích thước Chiếm 1/4 - 1/2 chu vi Xâm lấn Lớp u Chiếm 1/2 - 3/4 chu vi u Lớp mạc Chiếm > ¾ chu vi Quá mạc Giải phẫu bệnh sau mổ: Số tiêu bản: Kết mô bệnh học: Ung thư biểu mô tuyến (Adenocarcinoma) Luận văn luận án 2023 Ung thư biểu mô tuyến chế nhày (Mucinous adenocarcinoma) Ung thư biểu mô tế bào nhẫn (Signet-ring cell carcinoma) Ung thư biểu mô tế bào nhỏ (Small cell carcinoma) Ung thư biểu mô tuyến vẩy (Adenosquamous carcinoma) Ung thư biểu mô tế bào vẩy (Squamous cell carcinoma) Ung thư biểu mô tủy (Medulary carcinoma) Ung thư biểu mô khơng biệt hóa (undifferentiated carcinoma) Mức độ biệt hóa tế bào: Biệt hóa cao □ Biệt hóa vừa □ Mức độ xâm lấn u Di hạch: Có □ Biệt hóa thấp □ Khơng □ Đánh giá giai đoạn: T N M Giai đoạn theo TNM: Giai đoạn □ Giai đoạn I □ Giai đoạn III □ Giai đoạn IV □ Giai đoạn II □ Kết xét nghiệm đột biến gen KRAS Khơng đột biến Vị trí đột biến: □ Có đột biến □ Ngày…… tháng…… năm 20… Nghiên cứu sinh Luận văn luận án 2023