Báo cáo thực tập tại Viện Nghiên Cứu Cây Nguyên Liệu Giấy

Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 LỜI CẢM ƠN Trước hết xin trân thành cảm ơn ThS Phạm Đức Huy – Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy Người tận tình bảo, hướng dẫn mặt q trình nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn tới cán bộ, kỹ sư Viện Nghiên Cứu Cây Nguyên Liệu Giấy tạo điều kiện tốt cho chúng tơi q trình nghiên cứu thực nghiệm Qua đõy tụi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy cơ, cán uậ t Khoa Công Nghệ Sinh Học - Viện Đại Học Mở Hà Nội tận tình bảo, th tạo điều kiện thuận lợi cho học tập suốt năm học vừa qua, kỹ q trình thực khóa luận tốt nghiệp p Xin cảm ơn nhiệt tình giúp đỡ, trao đổi động viên bạn gh tn giấy – Phù Ninh – Phú Thọ iệ thực tập phịng nghiên cứu ni cấy mơ, Viện nghiên cứu nguyên liệu Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2012 án tố Một lần xin chân thành cảm ơn ! Đ Sinh viên Phạm Thế Phúc MỤC LỤC Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC Kí HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung bạch đàn: 1.2 Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật nhân giống trồng uậ t 1.2.1 Khái niệm chung7 th 1.2.2 Cơ sở lý thuyết công nghệ nuôi cấy mô, tế bào thực vật kỹ 1.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới q trình nhân giống ni cấy gh iệ 1.3.1 Môi trường nuôi cấy: 10 p mơ tế bào 10 1.3.2 Các chất điều hịa sinh trưởng: 13 1.3.4 Vật liệu nuôi cấy 14 1.3.5 Điều kiện vô trùng 14 án tố tn 1.3.3 Môi trường vật lý 12 Đ 1.4 Mục đích giai đoạn q trình nhân giống invitro 15 1.4.1 Mục đích: 15 1.4.2 Các giai đoạn trình nhân giống in vitro 16 1.4.2.1 Giai đoạn chuẩn bị 16 1.4.2.2 Giai đoạn cấy khởi động 16 1.4.2.3 Giai đoạn nhân nhanh 16 1.4.2.4 Tạo hoàn chỉnh (ra rễ) 17 1.4.2.5 Đưa môi trường tự nhiên 17 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 1.5 Tình hình nghiên cứu thành tựu nhân giống invitro bạch đàn cõy thõn gỗ giới Việt Nam 1.5.1 Trên giới 18 18 1.5.2 Nhân giống bạch đàn gỗ phương pháp nuôi cấy mô Việt Nam 20 CHƯƠNG 2:MỤC TIấU, ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 23 2.2 Đối tượng nghiên cứu 23 uậ t 2.2.1 Một số đặc điểm dịng PN108 23 kỹ 2.2.3 Vật liệu nuôi cấy24 iệ 24 p 2.3 Nội dung nghiên cứu24 2.4 Phương pháp nghiên cứu 23 th 2.2.2 Một số đặc điểm dịng PN47 gh 2.4.1 Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh tn trưởng IBA (Indol Butyric Acid) lên trình tạo rễ 26 tố 2.4.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng tổng hợp chất án điều hòa sinh trưởng IBA (Indol Butyric Acid) ABT1 lên q trình 26 tạo rễ dịng bạch đàn Đ 2.4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao vườn ươm 27 2.4.4 Địa điểm, điều kiện bố trí thí nghiệm 29 2.4.5 Thời gian thực tập 29 2.4.6 Bố trí thí nghiệm 29 2.4.7 Phương pháp thống kê xử lí số liệu 29 CHƯƠNG 3:KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bỡnh/cõy chiều dài rễ 32 3.2 Ảnh hưởng phối hợp IBA + ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 trung bỡnh/cõy chiều dài rễ 38 3.3 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 45 3.4 So sánh kết nghiên cứu dòng bạch đàn PN108 PN116 với dũng nghiên cứu 3.5 Thảo luận chung 48 49 CHƯƠNG 4:KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Tồn 51 t 52 53 th TÀI LIỆU THAM KHẢO uậ 4.3 Kiến nghị Đ án tố tn gh iệ p kỹ PHỤ LỤC Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ rễ ống nghiệm 26 Bảng 2.2: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến tỷ lệ rễ ống nghiệm 27 Bảng 3.1: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bình chiều dài rễ dịng PN108 PN116 33 Bảng 3.2: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều th Bảng 3.3: 39 uậ t bình chiều dài rễ dòng PN108 PN116 iệ Các tiêu so sánh dòng 48 Đ án tố tn gh Bảng 3.4: 45 p PN116 kỹ cao giai đoạn vườn ươm dịng PN108 Khoa Cơng Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1a: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN108 33 Biểu đồ 3.1b: Ảnh hưởng IBA đến số rễ trung bình dịng PN108 34 Biểu đồ 3.1c: Ảnh hưởng IBA đến chiều dài trung bình rễ dịng PN108 34 Biểu đồ 3.1d: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN116 36 Biểu đồ 3.1e: Ảnh hưởng IBA đến số rễ trung bình dịng PN116 36 PN116 t Ảnh hưởng IBA đến chiều dài trung bình rễ dòng 37 uậ Biểu đồ 3.1f: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến số rễ trung bình dịng 40 gh PN108 iệ p Biểu đồ3.2b: 39 kỹ PN108 th Biểu đồ 3.2a: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ dòng tn Biểu đồ 3.2c: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến chiều dài trung bình rễ 40 tố dòng PN108 án Biểu đồ 3.2d: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN108 42 Đ Biểu đồ 3.2e: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến số rễ trung bình dịng Biểu đồ 3.2f: PN116 42 Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến chiều dài trung bình dịng PN116 43 Biểu đồ 3.3a: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 46 Biểu đồ 3.3b: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến chiều cao giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 46 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC HÌNH ẢNH Ảnh 1: Chồi rễ mơi trường có bổ sung ABT sau tuần ni cấy Ảnh 2: 44 Cây vườn ươm dịng PN108, PN116 PN14 48 Ảnh 3: Q trình nuôi cấy môi trường tạo rễ chuyển 50 Đ án tố tn gh iệ p kỹ th uậ t vườn ươm Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC Kí HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT : Murashige Skoog (1962) ABT1 : Chất kích thích rễ Trung Quốc IBA : 3-Indol butyric acid TLRR : Tỷ lệ rễ Lrễ : Chiều dài trung bình rễ TLS : Tỷ lệ sống TB : Trung bình Cs : Cộng Đ án tố tn gh iệ p kỹ th uậ t MS Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong năm gần đây, kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật không ngừng phát triển thu thành tựu đáng kể Kỹ thuật đời mở hướng nghiên cứu thực vật nhanh chóng có vị trí quan trọng lĩnh vực công nghệ sinh học sản xuất cải thiện giống trồng ưu điểm bật phương pháp nhân nhanh đồng di truyền số lượng lớn cá thể thời gian ngắn, trẻ hoá gần từ hạt [10] Công nghệ nuôi cấy mô mắt xích khơng thể thiếu ngành cơng uậ t nghiệp trồng rừng suất cao vỡ nú phương tiện đắc lực giúp người th mang lại hiệu ngày cao kinh doanh rừng trồng Cây giống mơ p đặc tính di truyền q giống gốc kỹ sản xuất có quy mơ , cho suất cao, chất lượng tốt giữ iệ Hiện nay, trồng rừng sản xuất đòi hỏi phải mang lại hiệu kinh tế cho gh người làm nghề rừng, rừng trồng phải có chất lượng tốt, suất cao tn Một nhân tố định đến suất chất lượng rừng trồng, tố giống Khơng có giống với chất lượng di truyền cải thiện theo mục án tiêu kinh tế khơng thể đưa suất rừng lên cao Loài cho trồng rừng sản xuất chủ yếu Bạch đàn với nhiều dũng cú Đ nguồn gốc khác Để phục vụ cho mục đích kinh tế trồng rừng, nhiều giống cải thiện, có suất, chất lượng cao Việt Nam Cỏc dũng Bạch đàn chọn lọc đường tự nhiên (PN14, PN3d, PN21, PN24 ); Cỏc dũng bạch đàn lai nhân tạo (UC80, UE27, UE24, UE23… ) Theo đánh giá chuyên gia, so với bạch đàn trồng giống hạt giống bạch đàn sản xuất từ phương pháp ni cấy mơ có nhiều ưu điểm như: tốc độ tăng trưởng, phát triển nhanh hơn; tỷ lệ đồng cho suất gỗ cao, chu kỳ trồng rừng kinh doanh ngắn Trong trồng gieo từ hạt phải qua -10 năm khai thác rừng, rừng trồng từ ni cấy mơ cần 5-6 năm thu hồi vốn; Nhờ đó, Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 việc trồng rừng bạch đàn cõy mụ tiết kiệm kinh phí thời gian chăm sóc rừng Xuất phát từ đặc điểm nêu trên, để tạo số lượng lớn chất lượng cao phục vụ trồng rừng khảo nghiệm trồng rừng kinh tế Về lâu dài nâng cao suất, chất lượng rừng phát triển nguồn gen quý chọn lọc thử nghiệm nhân giống Bạch đàn tiến tới hồn thiện cơng nghệ nhân giống phương pháp nuôi cấy mô tế bào cần thiết Theo định 1686QD/BNN-KHCN 1773QD/BNN-KHCN nông nghiệp phát triển nông thôn đánh giá công nhận hai dòng bạch uậ t đàn urophylla PN108 PN116 ( tên đầy đủ “Dũng bạch đàn Phù Ninh số th 108” “Dũng bạch đàn Phù Ninh số 116”) đạt tiêu chuẩn Quốc gia kỹ giống tiến kỹ thuật Hiện nay, nhu cầu giống hai dòng nhằm phục vụ trồng rừng khảo nghiệm sản xuất lớn Thêm vào đó, việc iệ p nhân giống kỹ thuật ni invitro dòng chưa nghiờn gh cứu.vỡ vậy,vấn đề cấp thiết đặt cho nhà nghiên cứu phải tìm tn quy trình nhân giống tối ưu cho dũng trờn mơi trường điều kiện tố ni cấy thích hợp đóng vai trị quan trọng án Trong giai đoạn ni cấy mụ thỡ giai đoạn rễ giai đoạn quan trọng vỡ nú ảnh hưởng đến chất lượng đem trồng ngồi mơi Đ trường Từ phải nghiên cứu chọn đạt u cầu rễ cho ngồi mơi trường tự nhiên Để đạt điều này, đưa đề tài “Bước đầu nghiờn cứu ảnh hưởng số yếu tố đến trình rễ dịng bạch đàn PN108 PN116 phương pháp ni cấy mô tế bào điều kiện huấn luyện ngồi mơi trường tự nhiên” Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy đơn vị đầu ni cấy mơ tế bào lồi lâm nghiệp, nhiều lồi cõy ni cấy quy mơ cơng nghiệp, đội ngũ cán có nhiều kinh nghiệm, sở vật chất tương đối đầy đủ Đây yếu tố quan trọng để đề tài đạt tốt mục tiêu đề Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Đ án tố tn gh iệ p kỹ th uậ t SV Phạm Thế Phúc_0801 Ảnh 3: Q trình ni cấy mơi trường tạo rễ chuyển vườn ươm Khoa Công Nghệ Sinh Học 50 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 CHƯƠNG KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Qua nghiên cứu trình rễ invitro dòng bạch đàn PN108 PN116 đề tài nhận thấy trình sinh trưởng phát triển mẫu nuôi cấy chịu ảnh hưởng mạnh mẽ chất điều hịa sinh trưởng thuộc nhóm Auxin Thành phần nồng độ ảnh hưởng mạnh rõ đến hiệu tạo hoàn chỉnh Đồng thời, thời gian huấn luyện ảnh hưởng đến trình đưa ngồi mơi trường tự nhiên Từ kết nghiên cứu thu được, uậ t rút số kết luận sau: th Môi trường tốt tạo hồn chỉnh dịng là: kỹ MS/2 + 15 g/l sucrose + g/l agar + 2.0 mg/l IBA + 0.5 mg/l ABT Dòng p PN108 TLRR đạt 82,2 %, số rễ trung bình 2,85 rễ/cõy, chiều dài trung bình iệ rễ 1,29 cm Dòng PN116 TLRR đạt 81,7 %, số rễ trung bình 2,59 gh rễ/cõy, chiều dài trung bình rễ 1,16cm tn Cây trước đưa vườn ươm cần huấn luyện từ – 16 án 4.2 Tồn tố ngày Tỷ lệ sống cao cho dòng PN108 93,3%, dòng PN116 92,2% Do điều kiện thời gian có hạn kinh nghiệm kỹ thuật Đ phòng thí nghiệm kỹ viết báo cáo khoa học thân nên đề tài không tránh khỏi thiếu sót cịn hạn chế như: - Hai dịng bạch đàn PN116 PN108 trình nghiên cứu hồn thiện kỹ thuật nhân giống vơ tính phương pháp nuôi cấy mô tế bào - Mới thực nghiệm số công thức ảnh hưởng IBA ABT1 thang nồng độ rộng mà chưa tìm nồng độ tối ưu cho trình tạo rễ invitro - Chưa có bình luận sâu kết thực nghiệm đề tài đạt so với kết nghiên cứu ngồi nước Khoa Cơng Nghệ Sinh Học 51 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 4.3 Kiến nghị Để nâng cao tỷ lệ rễ rễ invitro tỷ lệ sống mầm mơ hai dịng bạch đàn PN116 PN108 cấy vườn ươm Đồng thời hạ giá thành đủ tiêu chuẩn xuất vườn cần có nghiên cứu chi tiết Đ án tố tn gh iệ p kỹ th uậ t hơn, cụ thể cho hai dịng bạch đàn Khoa Cơng Nghệ Sinh Học 52 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Andrew I, 1991 Thiết kế đơn giản cho thí nghiệm lâm nghiệp Bản tin Viện nghiên cứu lâm nghiệp số 71, 39 trang Lê Văn Chi, 1992 Cách sử dụng chất điều hoà sinh trưởng vi lượng hiệu cao Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, trang – 23 Lê Đình Khả (1999), Nghiên cứu sử dụng giống lai tự nhiên Keo tai tượng Keo tràm Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 170-172 uậ t Lê Đình Khả Nguyễn Việt Cường, (2001) Ưu lai sinh th trưởng tính chống chịu số tổ hợp lai khác loài Bạch kỹ đàn, Nhà xuất Nơng nghiệp, Hà Nội, tr 41- 43 Mai Đình Hồng, 1999 Ứng dụng công nghệ sinh học để sản xuất iệ p nguyên liệu giấy chất lượng cao Thông tin khoa học công nghệ môi gh trường tỉnh Phú Thọ tháng 9, trang 46 – 48 tn Đồn Thị Mai, Trần Hồ Quang, Ngơ Thị Minh Duyên, 1998 Kỹ tố thuật nhân giống keo lai ni cấy mơ phân sinh Tạp chí lâm án nghiệp số 7, trang 35-36 Trần Văn Minh, 1994 Nuôi cấy mô tế bào thực vật Phân viện công Đ nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh, 124 trang Trần Văn Minh cộng sự, 1998 Nhân giống trầm qua nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Tạp chí lâm nghiệp số 11, trang 44 – 45 Đồn Thanh Nga, 2003 Báo cáo hồn thiện cơng nghệ nhân giống số dòng bạch đàn Trung tâm nghiên cứu nguyên liệu giấy, 35 trang 10 Trần Thị Ngân, 2000 Nghiên cứu phản ứng cỏc dũng lan gấm (Anoectochilus formosalus) môi trường nuôi cấy in vitro Luận án thạc sĩ khoa học sinh học, Trường đại học sư phạm Hà Nội, 63 trang Khoa Công Nghệ Sinh Học 53 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 11.Vũ Ngọc Phượng cộng sự, 2002 Nhân giống in vitro tre tàu (Sinocalamus latiflorus) tre mạnh tông (Dendrocalamus asper) Tạp chí sinh học số 6, trang 59 – 64 12 Nguyễn Quang Thạch, (2000), Giáo trình sinh lý thực vật, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 13 Nguyễn Quang Thạch cộng sự, 2004 Nhân nhanh in vitro dũng lỳa bất dục đực PEI ải 64S Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn số 6, trang 836 – 838 14 Nguyễn Đức Thành, 2001 Nuôi cấy mô tế bào thực vật – Nghiên cứu uậ t ứng dụng Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, Hà Nội, 125 trang th 15 Đoàn Thị Ái Thuyền cộng sự, 2001 Nhân giống vơ tính cõy hụng kỹ – Paulowvina fortunei (seem) Hemsi phương pháp ni cấy mơ Tạp chí sinh học số 9, trang 46 – 50 iệ p 16.Nguyễn Văn Uyển, 1993 Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác gh giống trồng Nhà xuất Nông nghiệp, trang – 40 tn 17 Vũ Văn Vụ, 1994 Sinh lý học thực vật Nhà xuất Khoa học – Kỹ tố thuật, Ha Nội, trang 182 – 237 án 18 Dự án giống lâm nghiệp Việt Nam, 2001 Hội thảo quốc gia loài ưu tiên cho trồng rừng Công ty giống lâm nghiệp trung ương, báo Đ cáo số 1, trang 42 – 43 19.Dương Mộng Hùng (1993), Chọn trội nhân giống nuôi cấy mơ tế bào cho hai lồi Bạch đàn E camaldulensis E urophylla, Báo cáo đề tài, trường Đại học Lõm nghiệp, Hà Tây 20 Nguyễn Ngọc Tân cộng (1995), “Nhõn giống Keo lai nuôi cấy mô phân sinh”, Kết nghiên cứu khoa học công nghệ giai đoạn 1990- 1995, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 21 Đoàn Thị Mai cộng (2000), “Kết bước đầu nhân giống Bạch đàn lai phương pháp ni cấy mơ phân sinh”, Tạp chí Lâm nghiệp, (số10/2000), tr 46-47 Khoa Công Nghệ Sinh Học 54 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 II Tài liệu tiếng nước 22 Bhat K M and Hwanok Ma (2004), Teak growers unite, in ITTO tropical forest update, pp 3-4 23.Darus H Ahmad, 1994 Multiplication of Acacia mangium by stem cutting and tissue culture techniques Advances in tropical acacia research, p 32-34 24.Handley L, 1997 commercialization of plant tissue culture in vitro India plant cell Tissue and organ culture, Westvaco Corp, USA., p 65 – 73 25.Murashige T and Skoog F, 1962 A resied medium for rapid growth and uậ t bioassays wirh tobacco tissue cultures Physiol Plant., 15, p 473-495 th 26.Semsuntud N and Nitiwattanachai W, 1992 Tissue culture of Đ án tố tn gh iệ p kỹ Acacia auriculiformis Advances in tropical acacia research, p 39 - 41 Khoa Công Nghệ Sinh Học 55 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 PHỤ LỤC Phụ lục 2.1 Thành phần môi trường MS Đa lượng CaCl2 332.02 KH2PO4 mg/l 2.99 mM 170.00 1.25 mM KNO3 1900.00 18.79 mM MgSO4 180.54 1.50 mM NH4NO3 1650.00 20.61 mM t Vi lượng 0.11 M 0.10 M 0.10 mM 0.10 mM 5.00 M 16.900 0.10 mM 0.250 1.03 M 8.600 29.91 M 0.025 FeNaEDTA 36.700 H3BO3 6.200 uậ CuSO4 mg/l th 0.025 iệ p kỹ CoCl2.6H2O 0.830 gh KI Đ Glycine Vitamin án ZnSO4.7 H2O tố Na2MoO4.2 H2O tn MnSO4 H2O 2.00 mg/l 26.64 M Myo-Inositol 100.00 0.564 mM Nicotinic acid 0.50 4.06 M Pyridoxine HCl (vitamin B6) 0.50 2.43 M Thiamine HCl (vitamin B1) 0.10 0.30 M Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Phụ lục 3.1 Ảnh hưởng IBA đến hiệu rễ, số rễ trung bình chiều dài trung bình a Dòng PN108 Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic 2.509 2.955 Ty le re (%) So re TB (re/cay) df1 df2 4 Sig .109 075 10 10 ANOVA df Mean Square 1552.856 3.423 F 453.609 Sig .000 t 10 14 10 14 668 024 uậ So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total 27.354 000 th Ty le re (%) Sum of Squares 6211.424 34.233 6245.657 2.671 244 2.915 kỹ Ty le re (%) iệ Subset for alpha = 05 45.000 gh 3 3 14.433 p N tn Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig 53.300 59.433 1.000 1.000 1.000 1.000 76.100 1.000 So re TB (re/cay) Đ án tố Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 1.400 1.560 2.040 2.073 2.593 238 799 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Chieu dai re (cm) Duncan a,b Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig N 5244 41 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 6733 7778 1.000 7778 8700 077 119 1.1578 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 72.638 b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed b Dòng PN116 Test of Homogeneity of Variances uậ df1 df2 th 4 10 10 Sig .325 291 kỹ Ty le re (%) So re TB (re/cay) t Levene Statistic 1.329 1.438 ANOVA án tố tn So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total gh Ty le re (%) iệ p Sum of Squares 6323.697 286.120 6609.817 2.419 173 2.591 Đ Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig df 10 14 10 14 Mean Square 1580.924 28.612 F 55.254 Sig .000 605 017 34.976 000 Ty le re (%) N 3 3 13.900 Subset for alpha = 05 42.233 51.667 1.000 056 51.667 61.133 055 75.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 So re TB (re/cay) Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig Duncan a Subset for alpha = 05 1.280 1.807 1.833 2.027 2.527 1.000 078 1.000 N 3 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) 6578 7111 t 37 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 4811 8600 1.000 uậ N 294 1.000 th Duncan a,b Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig 1.0878 1.000 kỹ Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 69.958 p b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed gh iệ Phụ lục 3.2 Ảnh hưởng IBA+ABT đến hiệu rễ, số rễ trung tố a Dịng PN108 tn bình chiều dài trung bình án Test of Homogeneity of Variances Đ Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 988 4.059 df1 df2 4 10 10 Sig .457 033 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Multiple Comparisons Dependent Variable: So re TB (re/cay) Tamhane 2.0 t gh iệ * The mean difference is significant at the 05 level 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -1.088 688 -1.132 1.045 -.394 1.254 -.683 1.870 -.688 1.088 -1.125 1.439 -.341 1.601 -.677 2.263 -1.045 1.132 -1.439 1.125 -.029 976 369 904 -1.254 394 -1.601 341 -.976 029 -.468 794 -1.870 683 -2.263 677 -.904 -.369 -.794 468 uậ 1.5 Sig .960 1.000 294 230 960 977 161 171 1.000 977 060 003 294 161 060 681 230 171 003 681 th 1.0 kỹ (J) Nong ABT (mg/l) 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.5 2.0 1.0 2.0 1.0 1.5 p (I) Nong ABT (mg/l) Mean Difference (I-J) Std Error -.200 1579 -.043 1107 430 1222 593 1073 200 1579 157 1229 630 1334 793 1199 043 1107 -.157 1229 473 0715 637* 0411 -.430 1222 -.630 1334 -.473 0715 163 0662 -.593 1073 -.793 1199 -.637* 0411 -.163 0662 ANOVA tn df 10 14 10 14 Mean Square 721.504 7.405 F 97.439 Sig .000 274 009 31.359 000 Đ án So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total tố Ty le re (%) Sum of Squares 2886.017 74.047 2960.064 1.096 087 1.184 So re TB (re/cay) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 2.020 2.497 2.543 2.603 2.850 1.000 212 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le re (%) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 42.200 3 3 Subset for alpha = 05 59.433 66.667 75.567 1.000 1.000 1.000 1.000 82.233 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) N 6711 7789 90 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 9100 059 1.000 1.2889 1.000 kỹ th Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 1.000 t 1.0878 uậ Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig án tố tn gh iệ p b Dòng PN116 Đ ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 2633.151 119.267 2752.417 1.371 183 1.555 df 10 14 10 14 Mean Square 658.288 11.927 F 55.195 Sig .000 343 018 18.722 000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le re (%) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 45.000 3 3 Subset for alpha = 05 55.000 65.567 75.000 1.000 1.000 1.000 1.000 81.700 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 So re TB (re/cay) Subset for alpha = 05 1.807 1.970 2.400 2.443 2.600 170 114 N uậ t 3 3 th Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig p kỹ Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 90 90 90 90 90 án tố tn Duncan a gh iệ Chieu dai re (cm) Subset for alpha = 05 6656 6933 8800 1.0611 1.1644 635 1.000 078 Đ Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 Phụ lục 3.3: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao trung bình a Dịng PN108 Test of Homogeneity of Variances Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Levene Statistic 1.595 794 df1 df2 4 10 10 Sig .250 556 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 ANOVA Ty le song (%) Sum of Squares 4664.667 238.667 4903.333 137 180 317 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Chieu cao trung binh (cm) df 10 14 10 14 Mean Square 1166.167 23.867 F 48.862 Sig .000 034 018 1.907 186 Ty le song (%) Subset for alpha = 05 45.667 75.667 86.667 92.000 93.333 1.000 1.000 141 N uậ t 3 3 th Duncan a Thoi gian huan luyen (ngay) 16 12 Sig p kỹ Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 gh iệ b Dòng PN116 tn Test of Homogeneity of Variances Đ án tố Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Levene Statistic 2.000 2.000 df1 df2 4 10 10 Sig .171 171 ANOVA Sum of Squares 4971.600 121.333 5092.933 104 193 297 df 10 14 10 14 Mean Square 1242.900 12.133 F 102.437 Sig .000 026 019 1.345 320 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le cay song (%) Duncan a Thoi gian huan luyen (ngay) Khong huan luyen 16 ngay 12 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 44.333 72.333 88.000 92.000 92.000 1.000 1.000 209 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Đ án tố tn gh iệ p kỹ th uậ t Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội