Khóa luận nghiên cứu thành phần hóa học của phân đoạn dịch chiết ethyl acetat từ cây yến bạch (chromolaena odorata l)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC DƯƠNG THỊ NGỌC ÁNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHÂN ĐOẠN DỊCH CHIẾT ETHYL ACETAT TỪ CÂY YẾN BẠCH (Chromolaena odorata L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội – 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC DƯƠNG THỊ NGỌC ÁNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHÂN ĐOẠN DỊCH CHIẾT ETHYL ACETAT TỪ CÂY YẾN BẠCH (Chromolaena odorata L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Khóa: QH.2018.Y Người hướng dẫn: PGS.TS VŨ ĐỨC LỢI ThS NGUYỄN THÚC THU HƯƠNG Hà Nội – 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI LỜI CẢM ƠN Để hồn thành tốt khóa luận này, em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới PGS.TS Vũ Đức Lợi, Phó trưởng Khoa Dược kiêm Trưởng Bộ môn Dược cổ truyền, Học Viện YDHCT Việt Nam ThS Nguyễn Thúc Thu Hương, Giảng viên Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, hai người Thầy tận tâm hướng dẫn trực tiếp, hết lòng bảo tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập, nghiên cứu để em hồn thành khố luận Bên cạnh đó, em chân thành cảm ơn ThS Lê Hồng Dương thầy cô giảng viên Bộ môn Dược liệu – Dược cổ truyền, ThS Nguyễn Xuân Tùng, Bộ môn Bào chế CNDP, Trường Đại học Y Dược, ĐHQGHN giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện cho em thực hồn thiện khóa luận Tiếp theo, em muốn gửi lời cảm ơn tới Ban Lãnh đạo Trường, thầy cô giảng viên trường giảng viên, bác sĩ thỉnh giảng, trang bị cho em kiến thức bổ ích suốt thời gian học tập, nghiên cứu trường Em xin gửi lời cảm ơn tới anh chị Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam tận tình hướng dẫn giúp đỡ em hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới tất bạn bè, gia đình người thân quen bên, giúp đỡ em suốt trình học tập làm khóa luận Trong q trình thực khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận góp ý Thầy Cơ để em hồn thiện khóa luận tốt Một lần em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu đó! Hà Nội, ngày 18 tháng năm 2023 Sinh viên Dương Thị Ngọc Ánh DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT STT Ý nghĩa Chữ viết tắt CC Sắc ký cột DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer ESI-MS Phổ khối ion hóa phun mù điện tử EtOAc Ethyl acetat EtOH Etanol MeOH Metanol Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 13 pTLC Sắc ký lớp mỏng điều chế 10 TLC Sắc ký lớp mỏng 11 v/v/v Thể tích/thể tích/thể tích H-NMR C-NMR Phổ cộng huwỏng từ hạt nhân cacbon 13 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình vẽ Tên hình vẽ Trang Hình 1.1 Một số lồi thuộc chi Chromolaena Hình 1.2 Các flavonoid phân lập từ C.hirusta C.squalida Hình 1.3 Hình vẽ mơ tả Chromolaena odorata L Hình 1.4 Hình thái (a), hoa (b), (c) hạt (d) C.odorata Hình 1.5 Các hợp chất flavonoid Hình 1.6 Các diterpenoid loại Kauren có chiết xuất C.odorata Hình 1.7 Heiss cộng phân lập axit chromomoric từ chiết xuất khô C.odorata Hình Đặc điểm hình thái C.odorata 16 Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân lập hợp chất từ yến bạch 20 Hình 3.2 Sơ đồ phân lập chất từ phân đoạn ethyl acetat 21 Hình 3.3 Cấu trúc hóa học hợp chất YB4 23 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học hợp chất YB5 25 Hình 3.5 Cấu trúc hóa học hợp chất YB6 26 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Bảng 1.1 Tên bảng Tên thường gọi C.odorata số quốc gia/khu vực Kiểm tra có mặt thành phần hóa học có Bảng 1.2 Bảng 1.3 chiết xuất nước cồn C.odorata Pyrrolizidin alcaloid phân lập từ chiết xuất C.odorata tỷ lệ phần trăm tổng hàm lượng Trang alcaloid Bảng 1.4 Bảng Các hợp chất phenolic flavonoid phân lập từ dịch chiết sấy khô C.odorata 10 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất YB4 chất tham khảo 22 Dữ liệu phổ 1H-NMR hợp chất YB5 chất tham Bảng khảo Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất YB6 Bảng chất tham khảo 24 25 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG - TỔNG QUAN .2 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI CHROMOLAENA .2 1.1.1 Vị trí phân loại chi Chromolaena 1.1.2 Đặc điểm thực vật, phân bố chi Chromolaena .2 1.1.3 Thành phần hóa học chi Chromolaena 1.2 TỔNG QUAN VỀ LOÀI CHROMOLAENA ODORATA L .4 1.2.1 Giới thiệu thực vật .4 1.2.2 Đặc điểm thực vật 1.2.3 Phân bố 1.2.4 Thành phần hóa học 1.2.5 Tác dụng sinh học độc tính 11 1.2.6 Công dụng theo y học cổ truyền 15 CHƯƠNG - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 16 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU: NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHÂN ĐOẠN DỊCH CHIẾT ETHYL ACETAT CỦA CÂY YẾN BẠCH 17 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .17 2.3.1 Phương pháp chiết xuất, phân lập hợp chất 17 2.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất phân lập 18 CHƯƠNG - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 19 3.1 KẾT QUẢ CHIẾT XUẤT PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT 19 3.1.1 Chiết xuất phân đoạn Yến bạch .19 3.1.2 Phân lập hợp chất .21 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT 22 3.2.1 Hợp chất YB4 .22 3.2.2 Hợp chất YB5 .24 3.2.3 Hợp chất YB6 .25 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 27 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xa xưa, ông cha ta biết sử dụng loại thảo mộc, cỏ có nguồn gốc từ thiên nhiên để chữa bệnh từ đơn giản đến bệnh nan y Cùng phát triển tiến ngành dược loại dược phẩm tổng hợp ngày đa dạng có đóng góp quan trọng việc bảo vệ sức khỏe người Với xu hướng trở với tự nhiên, bảo vệ mơi trường sản phẩm dược phẩm có nguồn gốc thiên nhiên nhiều người ưa chuộng Nhờ việc tập trung tìm kiếm, phân lập nghiên cứu sâu thành phần hóa học tác dụng sinh học cỏ thiên nhiên ngày trọng Cây Yến bạch có tên khoa học Chromolaena odorata L hay gọi với tên Cộng sản, Cỏ lào, Bớp bớp , loài thực vật nhiệt đới địa vùng Caribê Bắc Mỹ thuộc họ Cúc (Asteraceae) Yến bạch thường mọc nơi bãi hoang hay bìa rừng, sinh trưởng nhanh, khỏe phân bố khắp vùng miền nước Cây Yến bạch có vị cay, tính ấm, có tác dụng sát trùng, cầm máu, kháng viêm,… thường sử dụng loại dược liệu để cầm máu, giúp mau lành vết thương, chữa bệnh lỵ cấp tính bệnh ỉa chảy trẻ em, Yến bạch có hình dáng bên ngồi dễ nhầm lẫn với họ Cúc (Asteraceae) Tuy nhiên sản phẩm cơng trình nghiên cứu Yến bạch Việt Nam hạn chế chưa chun sâu Vì vậy, để góp phần cung cấp thêm sở tiền đề cho việc sử dụng, bảo tồn phát triển loài Yến bạch làm thuốc Việt Nam, đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học phân đoạn dịch chiết ethyl acetat từ Yến Bạch (Chromolaena odorata L.),” thực nhằm mục tiêu sau: ✓ Chiết xuất phân lập số hợp chất từ phân đoạn dịch chiết ethylacetat Yến bạch ✓ Xác định cấu trúc hợp chất CHƯƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Chromolaena 1.1.1 Vị trí phân loại chi Chromolaena Theo hệ thống phân loại thực vật APG III (2009), vị trí phân loại chi Chromolaena tóm tắt sau: Giới Thực vật (Plantae) Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Cúc (Asteridae) Bộ Cúc (Asterales) Họ Cúc (Asteraceae) Chi Chromolaena 1.1.2 Đặc điểm thực vật, phân bố chi Chromolaena 1.1.2.1 Đặc điểm thực vật Các loài thuộc chi Chromolaena thường lâu năm hay bụi, cao khoảng 20–250 cm, dạng rễ sợi Thân mọc thẳng um tùm, cành từ thưa đến dày đặc Lá mọc kiểu đối với nhiều hình dạng khác từ hình mũi mác đến hình trứng, thường có gân nhơ từ gốc Cây có cuống khơng cuống Mép có khía lõm hình thùy, bề mặt nhẵn có lơng, đơi có tuyến Cụm hoa hình đĩa, có nhiều mảng vảy Mỗi cụm có 15-40 hoa có màu trắng tím đến xanh lam, đài hình trụ Lá dài khoảng 2-7 mm, dễ rụng, hình trứng hình mác Quả khơ có hình lăng trụ, từ 3-5 gân có vảy thường có chấm tuyến Hạt có chùm lơng đầu, khơ màu nâu[1] A C.odorata B C.hirusta C C.hookeriana D C.pulchella Hình 1.1 Một số lồi thuộc chi Chromolaena 1.1.2.2 Phân bố Chi Chromolaena bao gồm 165 loài thảo mộc nhỏ, bụi phân bố chủ yếu châu Mỹ, số châu Âu, châu Á châu Phi nhiệt đới[2] 1.1.3 Thành phần hóa học chi Chromolaena Chiết xuất loài thuộc chi Chromolaena bao gồm hợp chất như: flavonoid, alkaloid, sesquiterpen, diterpen, lacton octadecanoid pyrrolizidine Taleb-Contini cộng phân lập số flavonoid từ hai loài thuộc chi Chromolaena gồm 6-hydroxyluteolin 7,3′-dimetyl ete (1), quercetin 3-metyl ete (2), quercetagetin 3,6,3′-trimetyl ete (3) (jaceidin) , quercetagetin 3,6,7,3′-tetrametyl ete (4) (crysosplenetin) quercetagetin 3,6-dimetyl ete (axillarin) (5)[3] CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN Trong trình thực nghiệm, đề tài sử dụng mẫu nghiên cứu Yến bạch (Chromolaena odorata L.) thu hái tỉnh Hải Dương Đề tài thực phương pháp chiết xuất EtOH 70% phân lập chất sắc ký cột.Đây phương pháp đơn giản, dễ thực hiện, phù hợp với quy mơ phịng thí nghiệm EtOH dung mơi chiết nhiều nhóm hoạt chất, an tồn với môi trường giá thành rẻ Cao chiết tổng sau phân tán với dung mơi có độ phân cực tăng dần: n-hexan, EtOAc để phân tách hợp chất cách thuận lợi.Kết phân lập chất từ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat Yến bạch.Dựa vào cảm quan bên ngoài, phổ khối, phổ cộng hưởng hạt nhân so sánh với liệu công bố hợp chất liên quan Ba hợp chất xác định 3,3′,4′,5,7-pentahydroxyflavon hay quercetin (YB4), daucosterol (YB5) 5-(hydroxymethyl) furan-2-carbaldehyd hay hydroxymethylfurfural (YB6) 3,3′,4′,5,7-pentahydroxyflavon hay quercetin: hợp chất thuộc nhóm flavanoid đóng vai trị quan trọng việc ngăn chặn q trình oxy hóa, giúp chữa lành vết thương thơng qua tác dụng kháng viêm[43] Ngồi ra, quercetin cịn làm giảm nguy mắc bệnh tim mạch, rối loạn chuyển hóa số loại ung thư Daucosterol: Dựa vào nghiên cứu cho thấy daucosterol có khả thúc đẩy tăng sinh tế bào gốc thần kinh (NSC), tế bào có khả tự tái tạo bị hạn chế[44,45] Ngoài ra, daucosterol cịn có tác động sống sót tế bào thần kinh bị thiếu oxy glucose Daucosterol phát triển loại thuốc điều trị đột quỵ thiếu máu cục bộ[46] Bên cạnh đó, Daucosterol cịn nghiên cứu có tác dụng ức chế tăng sinh tế bào ung thư, ngăn chặn phát triển tế bào ung thư tuyến tiền liệt thơng qua việc kích hoạt JNK[47,48] Như vậy, daucosterol cho thấy tiềm lớn việc phòng chữa bệnh 5-(hydroxymethyl) furan-2-carbaldehyd hay hydroxymethylfurfural:còn gọi 5-HMF thuộc nhóm hợp chất hữu gọi aryl-aldehyt chứa nhóm aldehyde gắn trực tiếp vào vịng thơm 5-HMF tìm thấy mật 27 ong, trái sấy khơ, sản phẩm có chứa caramel, nước ép táo, bia, Đây lần chất phân lập từ Yến bạch 5-HMF làm tăng lực oxy hồng cầu hình liềm phụ thuộc nồng độ tác dụng bật kết hợp với hydroxyurea 5-HMF nồng độ cao giúp ổn định tế bào hồng cầu chống lại áp lực biến dạng in vitro[49] Ngoài ra, 5-HMF chứng minh có nhiều tác dụng khác chống oxy hóa, chống dị ứng, chống viêm, chống chấn thương thiếu oxy, tác dụng chống tăng acid uric máu[50,51] Các nghiên cứu đề tài tiền đề, tạo sở cho việc nghiên cứu sâu Yến bạch, bổ sung tư liệu cho việc sử dụng loại làm thuốc lĩnh vực Dược liệu sau 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau thời gian thực nghiên cứu, đề tài khóa luận thu số kết sau: - Chiết xuất, phân lập: Đã sử dụng phương pháp chiết ngâm với dung môi EtOH 70% phương pháp sắc ký cột để chiết xuất phân lập hợp chất từ Yến bạch - Xác định cấu trúc hợp chất phân lập được: Thông qua kết phổ khối, phổ cộng hưởng hạt nhân, xác định cấu trúc hợp chất 3,3′,4′,5,7-pentahydroxyflavon hay quercetin, daucosterol 5(hydroxymethyl) furan-2-carbaldehyd hay hydroxymethylfurfural Kiến nghị - Tiếp tục triển khai phân lập hợp chất khác từ loài Yến bạch - Định lượng hàm lượng mẫu nghiên cứu - Dựa kết nghiên cứu thành phần hóa học, cần nghiên cứu đánh giá số tác dụng sinh học hợp chất phân lập từ loài Yến bạch Việt Nam 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO Hanifah Yusuf, Marhami Fahriani, Cut Murzalina Anti Proliferative and Apoptotic Effect of Soluble Ethyl Acetate Partition from Ethanol Extract of Chromolaena Odorata Linn Leaves Against Hela Cervical Cancer Cell line Asian Pac J Cancer Prev 2022: 23(1): 183-189 Kavitha Vijayaraghavan, Johanna Rajkumar, Badr Al- Sayed, et al Chromolaena odorata: A neglected weed with a wide spectrum of pharmacological activities (Review) Molecular Medicine Reports 2017;15(3):1007-1016 S H Taleb-Contini, A Kanashiro, L M Kabeya, et al Immunomodulatory Effects of Methoxylated Flavonoids from Two Chromolaena species: Structureactivity Relationships Phytotherapy research 2006; 20(7): 573-575 Genilson Silva de Jesus, A.C Micheletti, R.G.Padilha, et al Antimicrobial Potential of Essential Oils from Cerrado Plants against Multidrug−Resistant Foodborne Microorganism Molecules 2020; 25(14): 32963305 Vanita Kanase, Sana Shaikh A pharmacognostic and pharmacological review on Chromolaena odorata (Siam weed) Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research 2018;11(10): 34-38 Lê Đình Bích, Trần Văn Ơn Thực vật học Nxb Y học Hà Nội.2007;226332 Stanley Anyanwu, Imeobong J Inyang, Enosakhare A Asemota, et al Effect of ethanol extract of Chromolaena odorata on kidney and intestine of healthy albino rat Integrative Medicine Research 2017; 6(3): 292-299 Chudamani Joshi, Jan De Leeuw, Andel, et al Indirect remote sensing of a cryptic forest understorey invasive species Forest Ecology and Management 2006;225(1-3): 0-256 King RM, Robinson H Chromolaena odorata (Linnaeus) Phytolgia Flora of North America 1970; 21: 544-545 10 E H Heiss, Trần Thị Vân Anh, Kristin Zimmermann, et al Identification of chromomoric acid CI as an Nrf2 activator in Chromolaena odorata Journal of Natural Products 2014;77(3): 503-508 11 Akinmoladun AC, Ibukun EO, Don-Ologe IA Phytochemicals constituents and antioxidant properties of extracts from the leaves of Chromolaena odorata Scientific Research and Essays 2007; 2(6): 191-194 12 G N Anyasor, A.Daniel Aina, Matthew Olushola, et al Phytochemical constituents, proximate analysis, antioxidants, anti-bacterial and wound healing properties of leaf extracts of Chromolaena odorata Annals of Biological Research 2011; 2: 441-451 13 N Pisutthanan, B Liawruangrath, A Baramee, et al Constituents of the essential oil from aerial parts of Chromolaena odorata from Thailand Natural Product Research 2006; 20(6): 636- 640 14 Supakanya Kumkarnjana, Rutt Suttisri, Ubonthip Nimmannit, et al Flavonoids kaempferide and 4,20-dihydroxy-40,50,60-trimethoxychalcone inhibit mitotic clonal expansion and induce apoptosis during the early phase of adipogenesis in 3T3-L1 cells Journal of Integrative Medicine 2019; 17(4): 288295 15 Trần Mạnh Hùng, Tô Đào Cường, Nguyễn Hải Đăng, et al Flavonoid Glycosides from Chromolaena odorata Leaves and Their in Vitro Cytotoxic Activity Pharmaceutical Society of Japan 2014; 59(1): 129-131 16 P Wafo, et al Kaurane-type diterpenoids from Chromoleana odorata, their X-ray diffraction studies and potent α-glucosidase inhibition of 16-kauren-19oic acid Fitoterapia 2011; 82(4): 642-646 17 M T Yakubu Effect of a 60-day oral gavage of a crude alkaloid extract from Chromolaena odorata leaves on hormonal and spermatogenic indices of male rats J Androl 2012; 33(6): 1199-1207 18 T T Phan, et al Phenolic compounds of Chromolaena odorata protect cultured skin cells from oxidative damage: implication for cutaneous wound healing Biol Pharm Bull 2001; 24(12): 1373-1379 19 Đoàn Thành Luân, Nguyễn Đăng Huy, Bùi Hoàng Minh,et al Nghiên cứu thành phần hóa học phân đoạn chloroform từ Cỏ lào (Chromolaena odorata L., Asteraceae) Tạp chí Khoa học Công nghệ số 10 Đại học Nguyễn Tất Thành 2020; 20(1): 33-35 20 Ngô Quốc Luân, Nguyễn Ngọc Hạnh Nguyễn Ngọc Châu Phân lập nhận danh cấu trúc chalcone từ dịch chiết ethyl acetate Cỏ lào Tạp chí Khoa học Đại học Cần Thơ 2007; 16 21 Ngô Quốc Luân, Nguyễn Ngọc Hạnh, Nguyễn Ngọc Châu Phân lập nhận danh cấu trúc hai flavonol từ dịch chiết ethyl acetate Cỏ lào eupatorium odoratum L Tạp chí Khoa học Đại học Cần Thơ 2011; 250 22 Tăng Thị Mỹ Uyên, Vũ Đức Lợi, Nguyễn Thúc Thu Hương (2022) Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Yến bạch ( Chromolaena odorata L.) Trung tâm thư viện tri thức - Đại học Quốc Gia Hà Nội 2022; 33-36 23 V B Owoyele, J O Adediji, A O Soladoye Anti-inflammatory activity of aqueous leaf extract of Chromolaena odorata Inflammopharmacology 2018; 13(5-6): 479-484 24 H Pandith, et al Effect of Siam weed extract and its bioactive component scutellarein tetramethyl ether on anti-inflammatory activity through NF-κB pathway J Ethnopharmacol 2013; 147(2): 434-441 25 Chung Jae Yong, et al Coronavirus Therapeutic Agent Comprising Zanthoxylum piperitum Leaf Extract as Active Ingredient PCT Patent Application Publication WO2021230667A1 2021 26 T T Hanh, et al Anti-inflammatory effects of fatty acids isolated from Chromolaena odorata Asian Pac J Trop Med 2011; 4(10): 760-763 27 A S Amid, O A Makinde, F J Akinrinmade Effects of Melatonin and Flavonoid-Rich Fractions of Chromolaena odorata on the Alteration of Proinflammatory Cytokines and Nitric Oxide Induced by Aflatoxin B1 in the Gastric Mucosa of Wistar Rats J Interferon Cytokine Res 2020; 40(4): 182-187 28 Nisit Pisutthanan, John B Bremner, Boonsom Liawruangrath Chemical Constituents and Biological Activities of Chromolaena odorata.2005 29 Matawali A, Lee PC, How SE, Jualang AG Biological activities of Chromolena odorata (L.) King and Robinson (Asteraceae) collected from Sabah, Malaysia as protein phosphatase type-1 inhibitor The Journal of Phytopharmacology 2019; 8(1): 01-04 30 Chinwe Sylvanus Alisi, Onyeze Nitric oxide scavenging ability of ethyl acetate fraction of methanolic leaf extracts of Chromolaena odorata (Linn.) African Journal of Biochemistry Research 2008; 2(7): 145-150 31 T T Phan, et al An aqueous extract of the leaves of Chromolaena odorata (formerly Eupatorium odoratum) (Eupolin) inhibits hydrated collagen lattice contraction by normal human dermal fibroblasts J Altern Complement Med 1998; 2(3): 335-343 32 T T Phan, M A Hughes, G W Cherry Enhanced proliferation of fibroblasts and endothelial cells treated with an extract of the leaves of Chromolaena odorata (Eupolin), an herbal remedy for treating wounds Plast Reconstr Surg 1998; 101(3): 756-65 33 Varma N G Yajarla, et al Anti-inflammatory and Anti-proliferative Properties of Chromolaena odorata Leaf Extracts in Normal and Skin-Cancer Cell Lines Journal of Herbs, Spices & Medicinal Plants 2014; 20(4): 359-371 34 H Pandith, et al Hemostatic and Wound Healing Properties of Chromolaena odorata Leaf Extract ISRN Dermatol 2013; 1-8 35 S Umukoro, R.B Ashorobi Evaluation of the Anti-inflammatory and Membrane-Stabilizing Effects of Eupatorium odoratum International Journal of Pharmacology 2006; 2(5): 509-512 36 O I Omotuyi, et al Flavonoid-rich extract of Chromolaena odorata modulate circulating GLP-1 in Wistar rats: computational evaluation of TGR5 involvement Biotech 2018; 8(2): 124 37 S Kumkarnjana, Rutt Suttisri, Ubonthip Nimmannit, et al Antiadipogenic effect of flavonoids from Chromolaena odorata leaves in 3T3-L1 adipocytes J Integr Med 2018; 16(6): 427-434 38 Thaddée Boudjeko, Rosette Megnekou, Alice Louise Woguia, et al Antioxidant and immunomodulatory properties of polysaccharides from Allanblackia floribunda Oliv stem bark and Chromolaena odorata (L.) King and H.E Robins leaves BMC Research Notes 2015; 8(1) 39 Nguyễn Thanh Hồng Các phương pháp phổ hóa học hữu Khoa học Kỹ thuật Hà Nội 2007; 320-360 40 Hao Liu, Yan Mou, Jianglin Zhao, et al Flavonoids from Halostachys caspica and their antimicrobial and antioxidant activities Molecules 2010; 15(11): 7933-7945 41 Zhanwu Sheng, Haofu Dai, Siyi Pan, Hui Wang, Yingying Hu and Weihong Ma, Isolation and Characterization of an α-glucosidase inhibitor from Musa spp (Baxijiao) flowers Molecules 2014; 19(7): 10563-10573 42 Khalil AT, et al Chemical constituents from the Hydrangea chi- nensis, Arch Pharm.Res.2003;26(1):15-20 43 Devi Anggraini Putri, S Fatmawati A New Flavanone as a Potent Antioxidant Isolated from Chromolaena odorata L Leaves Evid Based Complement Alternat Med 2019; 1-12 44 Lihua Jiang, Nian-yun Yang, Xiao-lin Yuan, et al Daucosterol promotes the proliferation of neural stem cells The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 2014; 140: 90-99 45 Ji, Z.-H., Xu, Z.-Q., Zhao, H., & Yu, X.-Y Neuroprotective effect and mechanism of daucosterol palmitate in ameliorating learning and memory impairment in a rat model of Alzheimer’s disease Steroids 2017;119: 31-35 46 Li-hua Jiang, Xiao-lin Yuan, X., Nian-yun Yang, et al Daucosterol protects neurons against oxygen–glucose deprivation/reperfusion-mediated injury by activating IGF1 signaling pathway The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 2015;152: 45-52 47 Ping Gao., Xiaopeng Huang, Tingting Liao,et al Daucosterol induces autophagic-dependent apoptosis in prostate cancer via JNK activation BioScience Trends 2019 ;13(2):160-167 48 Bing Han, Pu Jiang, Wuyang Liu , et al Role of Daucosterol Linoleate on Breast Cancer: Studies on Apoptosis and Metastasis Journal of Agricultural and Food Chemistry 2018; 66(24): 6031-6041 49 Mendelsohn L G., Pedoeim L., Van Beers E J., et al Effect of Aes-103 anti-sickling agent on oxygen affinity and stability of red blood cells from patients with sickle cell anemia Blood Journal 2018; 120(21): 85 50 Parida Yamada, Mai Nemoto, Hideyuki Shigemori, et al Isolation of 5(hydroxymethyl) furfural from Lycium chinense and its inhibitory effect on the chemical mediator release by basophilic cells Planta Medica 2011; 77(05): 434440 51 Ling Zhao, Jianping Chen, Jianyu Su, et al In vitro antioxidant and antiproliferative activities of 5- hydroxymethylfurfural Journal of Agricultural and Food Chemistry 2013; 61(44): 10604-10611 PHỤ LỤC Phụ Lục 1: Phiếu Giám Định Tên Khoa Học Phụ Lục 2: Dữ Liệu Phổ Của Hợp Chất YB4 Cấu trúc hóa học hợp chất YB4 Phụ lục 2.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) hợp chất YB4 Phụ lục 2.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6) hợp chất YB4 Phụ lục 2.3 Phổ ESI-MS hợp chất YB4 Phụ lục 2.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) hợp chất YB4 Phụ lục 2.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6) hợp chất YB4 Phụ lục 2.3 Phổ ESI-MS hợp chất YB4 Phụ Lục 3: Dữ Liệu Phổ Của Hợp Chất YB5 Cấu trúc hóa học hợp chất YB5 Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, CD3OD & CDCl3) hợp chất YB5 Phụ Lục 4: Dữ Liệu Phổ Của Hợp Chất YB6 Cấu trúc hóa học hợp chất YB6 Phụ lục 4.1 Phổ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) hợp chất YB6 Phụ lục 4.2 Phổ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) hợp chất YB6 Phụ lục 4.3 Phổ ESI-MS hợp chất YB6 Phụ lục 4.1 Phổ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) hợp chất YB6 Phụ lục 4.2 Phổ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) hợp chất YB6 Phụ lục 4.3 Phổ ESI-MS hợp chất YB6