Phân lập, nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm phytopythium gây bệnh thối rễ trên cây vú sữa

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “PHÂN LẬP, NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA NẤM PHYTOPYTHIUM GÂY BỆNH THỐI RỄ TRÊN CÂY VÚ SỮA” Sinh viên thực : TRẦN THỊ PHƯƠNG THẢO Khóa : 62 Ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS NGUYỄN ĐỨC THÀNH TS ĐẶNG THỊ THANH TÂM HÀ NỘI - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực, khách quan chưa dùng bảo vệ để lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2021 Sinh viên Trần Thị Phương Thảo i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp cách thành công, xin chân thành cảm ơn tới TS Nguyễn Đức Thành tận tình hướng dẫn, bảo tỉ mỉ suốt q trình thực đề tài hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới TS Đặng Thị Thanh Tâm có phân tích tận tình giúp đỡ q trình làm khóa luận Tiếp theo tơi xin gửi cảm ơn chân thành tới thầy cô Bộ môn Công nghệ Vi sinh - Viện Di truyền Nông nghiệp tận tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để thực đề tài Tôi xin cảm ơn tới Ban Giám đốc Viện Di truyền Nông nghiệp, Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, thầy cô giáo Khoa Công nghệ sinh học trực tiếp giảng dạy kiến thức bổ ích thời gian học đại học Tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè, người thân ln bên để động viên nguồn cổ vũ lớn lao, động lực giúp tơi hồn thành luận khóa Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2021 Sinh viên Trần Thị Phương Thảo ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cây vú sữa 2.1.1 Nguồn gốc xuất xứ 2.1.2 Tình hình sản xuất vú sữa giới 2.1.3 Tình hình sản xuất vú sữa Việt Nam 2.2 Nấm Phytopythium 2.2.1 Giới thiệu chung 2.2.2 Đặc điểm hình thái 2.2.3 Triệu chứng bệnh 2.2.4 Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Phytopythium 10 2.2.5 Biện pháp phòng trừ 10 2.3 Nấm Chaetomium 11 2.3.1 Giới thiệu chung 11 2.3.2 Đặc điểm hình thái 11 2.3.3 Cơ chế đối kháng nấm Chaetomium với nấm bệnh hại trồng 12 2.3.4 Ứng dụng nấm Chaetomium phòng trừ bệnh hại Việt Nam 12 2.4 Nấm Trichoderma 13 2.4.1 Giới thiệu chung 13 2.4.2 Đặc điểm hình thái 13 iii 2.4.3 Cơ chế đối kháng nấm Trichoderma với nấm bệnh hại trồng 14 2.4.4 Ứng dụng nấm Trichoderma phòng trừ bệnh hại Việt Nam 14 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Vật liệu nghiên cứu 16 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 17 3.3 Nội dung nghiên cứu 17 3.4 Phương pháp nghiên cứu 18 3.4.1 Phương pháp phân lập, định danh nấm Phytopythium từ rễ vú sữa bị bệnh thối rễ 18 3.4.2 Phương pháp xác định đặc điểm sinh học mẫu nấm Phytopythium tuyển chọn 19 3.4.3 Phương pháp đánh giá hiệu lực phòng trừ nấm bệnh Phytopythium nấm đối kháng điều kiện in vitro 21 3.4 Phương pháp xử lí số liệu thí nghiệm 22 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Phân lập nấm Phytopythium 23 4.2 Định danh nấm Phytopythium tuyển chọn dựa vào mơ tả đặc điểm hình thái 24 4.3 Kết xác định đặc điểm sinh học mẫu nấm Phytopythium spp TGVS03 27 4.3.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy 27 4.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ 28 4.3.3 Ảnh hưởng pH môi trường nuôi cấy 29 4.3.4 Khả chịu muối NaCl 31 4.3.5 Ảnh hưởng của nguồn cacbon 32 4.3.6 Ảnh hưởng nguồn nitơ 33 4.4 Hiệu lực phòng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 nấm đối kháng điều kiện in vitro 34 iv 4.4.1 Hiệu lực phòng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 nấm đối kháng C globosum 34 4.4.2 Hiệu lực phòng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 nấm đối kháng T asperellum 36 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 5.1 Kết luận 38 5.2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ 42 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Chữ viết tắt Diễn giải chữ viết tắt CT Công thức CMA Corn Meal Agar C globosum Chaetomium globosum ĐBSCL Đồng sông Cửu Long PDA Potato Dextrose Agar PCA Potato Carrot Agar PSM Phytophthora/Pythium Selective Medium P helicoides Phytopythium helicoides Sp Species 10 T asperellum Trichoderma asperellum 11 WA Water Agar vi DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Kết phân lập nấm Phytopythium sử dụng mồi bẫy cánh hoa hồng 23 Bảng 4.2 Kết định danh mẫu nấm TGVS03 25 Bảng 4.3 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 27 Bảng 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 28 Bảng 4.5 Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 30 Bảng 4.6 Ảnh hưởng muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 31 Bảng 4.7 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 32 Bảng 4.8 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 33 Bảng 4.9 Hiệu lực đối kháng nấm C globosum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 35 Bảng 4.10 Hiệu lực đối kháng nấm T asperellum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA 36 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Đặc điểm hình thái nấm Phytopythium dogmae Hình 2.2 Đặc điểm hình thái nấm Phytopythium helicoides Hình 2.3 Triệu chứng bệnh thối rễ nấm P litoral gây Hình 4.1 Phân lập nấm sử dụng mồi bẫy cánh hoa hồng 24 Hình 4.2 Đặc điểm hình thái mẫu nấm Phytopythium spp TGVS03 26 Hình 4.3 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 sau ngày ni cấy 28 Hình 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 29 Hình 4.5 Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 30 Hình 4.6 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 31 Hình 4.7 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 33 Hình Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 34 Hình 4.9 Đánh giá hiệu lực đối kháng kỹ thuật đồng nuôi cấy C globosum với nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 35 Hình 4.10 Đánh giá hiệu lực đối kháng kỹ thuật đồng nuôi cấy T asperellum với nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy 37 viii TÓM TẮT Với đề tài “Phân lập, nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Phytopythium gây bệnh thối rễ vú sữa” Bằng phương pháp sử dụng mồi bẫy cánh hoa hồng chúng tơi tiến hành phân lập nấm Phytopythium, sau tiến hành khảo sát ảnh hưởng số yếu tố môi trường đến khả sinh trưởng đánh giá hiệu lực nấm đối kháng với mẫu nấm Phytopythium tuyển chọn Từ mẫu đất thu thập địa điểm khác tỉnh Tiền Giang Chúng tơi phân lập mẫu đất có nấm Phytopythium spp Dựa vào mơ tả đặc điểm hình thái, mẫu nấm TGVS03 xác định có nhiều đặc điểm giống loài nấm Phytopythium spp Mẫu nấm TGVS03 sử dụng để đánh giá hoạt tính khả sinh trưởng số điều kiện môi trường, kết cho thấy: mẫu nấm sinh trưởng, phát triển tốt môi trường PDA, nhiệt độ 25oC, pH Có khả đồng hố tốt nguồn nitơ cao thịt bò, KNO3 NaNO3, nguồn cacbon glucose, mannitol có khả chịu mặn với nồng độ muối NaCl 1-3% Đánh giá hiệu lực đối kháng mẫu nẫm đối kháng Chaetomium globosum Trichoderma asperellum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 phương pháp đồng nuôi cấy cho thấy, nấm đối kháng C globosum T asperellum có hiệu lực ức chế đường kính tản nấm Phytopythium spp TGVS03, đạt hiệu lực 51,8% 56,0% Kết định danh dựa vào phân tích đặc điểm hình thái mẫu nấm TGVS03 giống với đặc điểm nấm Phytopythium sp., tạm thời đặt tên nấm Phytopythium spp TGVS03 ix Bảng 4.9 Hiệu lực đối kháng nấm C globosum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 mơi trường PDA Đường kính Cơng thức thí nghiệm tản nấm gây bệnh (mm) Hiệu lực ức chế (%) Đối chứng Phytopythium spp TGVS03 90,0 - Phytopythium spp TGVS03 + C globosum 43,4 51,8 Đối chứng C globosum 90,0 - Hình 4.9 Đánh giá hiệu lực đối kháng kỹ thuật đồng nuôi cấy C globosum với nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày ni cấy 35 Khi ni cấy riêng lồi nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 sinh trưởng, phát triển nhanh, vịng ngày sợi nấm bệnh phủ kín đĩa petri (90,0 mm) Khi cấy đối kháng với nấm C globosum đường kính sợi nấm phát triển chậm hơn, tốc độ tăng trưởng giảm rõ rệt Thí nghiệm đánh giá hiệu lực đối kháng mẫu nấm C globosum với nấm Phytopythium spp TGVS03 gây bệnh thối rễ vú sữa phương pháp đồng nuôi cấy cho thấy mẫu nấm có khả ức chế đường kính tản nấm Phytopythium spp TGVS03 Dựa vào bảng 4.9 cho ta thấy mẫu nấm C globosum có hiệu lực đối kháng ức chế đường kính nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 51,8% sau ngày nuôi cấy Qua kết nghiên cứu trên, nhận thấy mẫu nấm C globosum có hiệu phịng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 4.4.2 Hiệu lực phòng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 nấm đối kháng T asperellum Trong thí nghiệm này, chúng tơi áp dụng phương pháp đồng nuôi cấy để đánh giá sơ hiệu lực đối kháng mẫu nấm T asperellum với nấm Phytopythium spp TGVS03 mơi trường PDA Kết thí nghiệm trình bày bảng 4.10 Bảng 4.10 Hiệu lực đối kháng nấm T asperellum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 mơi trường PDA Đường kính Cơng thức thí nghiệm tản nấm gây bệnh (mm) Hiệu lực ức chế (%) Đối chứng Phytopythium spp TGVS03 90,0 - Phytopythium spp TGVS03 + T asperellum 39,6 56,0 Đối chứng T asperellum 90,0 - Mẫu nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 nấm đối kháng Trichoderma sp có sinh trưởng phát triển mạnh mẽ Sau đồng nuôi cấy cho thấy mẫu nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 phát triển 36 chậm Sợi nấm đối kháng T asperellum mọc nhanh lấn át nấm Phytopythium spp TGVS03 Hiệu lực ức chế mẫu nấm đối kháng T asperellum với nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 56% Hình 4.10 Đánh giá hiệu lực đối kháng kỹ thuật đồng nuôi cấy T asperellum với nấm Phytopythium spp TGVS03 môi trường PDA sau ngày nuôi cấy Qua kết thí nghiệm, chúng tơi nhận thấy mẫu nấm T asperellum có hiệu phịng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 Kết nghiên cứu liệu khoa học quan trọng, sở để tiếp tục nghiên cứu chuyên sâu việc sử dụng nấm đối kháng Trichoderma sp phòng trừ Phytopythium spp TGVS03 gây bệnh thối rễ vú sữa theo hướng hữu sinh học 37 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Trong trình: “Phân lập, nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Phytopythium gây bệnh thối rễ vú sữa ” dựa vào kết nghiên cứu, đưa số kết luận sau: 1) Đã phân lập, tuyển chọn mẫu nấm TGVS03 từ mẫu đất rễ vú sữa bị bệnh thối rế thu thập tỉnh Tiền Giang 2) Kết định danh dựa vào mô tả đặc điểm hình thái xác định nấm Phytopythium từ mẫu phân lập TGVS03, đặt tên Phytopythium spp TGVS03 Trên mơi trường PDA, mẫu nấm có màu trắng, bề mặt ni cấy dạng gợn sóng hình thành đường vân màu trắng dạng mịn, không sinh tiết sắc tố 3) Đánh giá số đặc điểm sinh học nấm Phytopythium spp TGVS03 cho thấy: - Môi trường PDA nhiệt độ 25OC ngưỡng pH 8,0 thích hợp cho sinh trưởng, phát triển nấm Phytopythium spp TGVS03 - Nấm Phytopythium spp TGVS03 có khả đồng hố tốt nguồn nitơ cao thịt bò, KNO3 NaNO3 Nguồn cacbon glucose mannitol - Nấm Phytopythium spp TGVS03 cịn có khả chịu mặn tốt với nồng độ muối NaCl 1% 4) Nấm đối kháng C globosum T asperellum có hiệu phịng trừ nấm bệnh Phytopythium spp TGVS03 điều kiện in vitro: - Hiệu lực ức chế nấm đối kháng C globosum với nấm Phytopythium spp TGVS03 51,8% - Hiệu lực ức chế nấm đối kháng T asperellum với nấm Phytopythium spp TGVS03 56,0% 38 5.2 Kiến nghị Cần nghiên cứu thêm thí nghiệm nhà lưới để đánh giá thực tế khả phòng trừ nấm gây bệnh thối rễ Phytopythium spp TGVS03 loại nấm đối kháng Từ nghiên cứu loại chế phẩm sinh học phòng trừ bệnh thối rễ gây hại vú sữa 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu Tiếng Việt Duy Hưng (2019) Đồng sông Cửu Long: Sản xuất xuất ăn trái bền vững Truy cập từ http://consosukien.vn/dong-bang-song-cuu-long-san-xuat-va-xuatkhau-cay-an-trai-ben-vung.htm ngày 26/7/2021 Cổng thông tin điện tử tỉnh Tiền Giang (2019) Điểm nét số vùng đặc sản giúp nông dân làm giàu Truy cập từ http://tiengiang.gov.vn/chi-tiet-tin?/-iem-net-mot-sovung-cay-ac-san-giup-nong-dan-lam-giau/19501123 ngày 26/07/2021 Nguyễn Minh Châu, Nguyễn Văn Hịa & Nguyễn Thành Hiếu (2013) Bệnh thối rễ, khơ cành vú sữa biện pháp quản lý tổng hợp Truy cập từ http://www.baoapbac.vn/khoahoc-doi-song/201308/benh-thoi-re-kho-canh-vu-sua-va-bien-phap-quan-ly-tong-hop328759/ ngày 24/08/2021 Mai Tâm (2016) Biện pháp phòng trừ sâu bệnh hại Vú Sữa Nông nghiệp nhanh Truy cập từ https://nongnghiepnhanh.com/bien-phap-phong-tru-sau-benh-hai-cay-vusua-139.html ngày 31/08/2021 Võ Thị Thu Oanh & Lưu Từ Đoan Trang (2017) Đánh giá khả đối kháng số dòng Trichoderma Phytopythium helicoides điều kiện phịng thí nghiệm Tạp chí KHKT Nơng Lâm nghiệp (5): 1-8 Phạm Quang Thu (2016) Điều tra thành phần loài nấm gây bệnh thối rễ thuộc họ Pythiaceae gây hại keo tai tượng keo lai tỉnh miền bắc Việt Nam Tạp chí khoa học lâm nghiệp (1): 4251-4256 Tổ chức kỉ lục Việt Nam (2012) Việt Nam nước giới xuất trái vú sữa Truy cập từ http://kyluc.vn/tin-tuc/ky-luc-the-gioi/viet-nam-la-nuoc-duy-nhattren-the-gioi-xuat-khau-trai-vu-sua ngày 25/07/2021 Minh Trí (2018) Trái vú sữa Tiền Giang trước hội vàng Báo ảnh Dân tộc Miền núi Truy cập từ https://dantocmiennui.vn/trai-vu-sua-tien-giang-truoc-co-hoivang/173918.html ngày 23/8/2021 Hoàng Văn Thơi, Lê Thanh Quang, Nguyễn Khắc Điệu, Vũ Văn Định, Đặng Như Quỳnh & Ngơ Văn Bình (2017) Xác định ngun nhân gây chết rừng phi lao (Casuarian equisetifolia J.R et G Fors) Ven biển Xã Đông Hải, Huyện Duyên Hải, Tỉnh Trà Vinh Tạp chí khoa học lâm nghiệp (8): 52-59 10 Lê Thị Ánh Hồng, Nguyễn Thanh Hà, Nguyễn Thế Quyết & Nguyễn Thị Hằng Phương (2005) Nghiên cứu ứng dụng nấm Chaetomium sản xuất chế phẩm vi sinh bảo vệ thực vật phòng chống bệnh nấm hại 52 11 Dương Hoa Xơ (2005) Vai trị nấm đối kháng Trichoderma kiểm soát sinh vật Truy cập từ http://www.sonongnghiep.hochiminhcity.gov.vn/tintuc/Lists/Posts/Post.aspx?List=f73c ebc3%2D9669%2D400e%2Db5fd%2D9e63a89949f0&ID=1594 ngày 24/08/2021 12 Hồ Đình Hải (2013) Nấm đối kháng Trichoderma Truy cập https://sites.google.com/site/trambvtvhuyenvinhhung/phong-tru-sinh-hoc/nam-doikhang- 40 từ trichoderma?tmpl=%2Fsystem%2Fapp%2Ftemplates%2Fprint%2F&showPrintDialog= ngày 26/08/2020 13 Hồ Thị Nhung (2019) Ứng dụng chế phẩm sinh học từ nấm đối kháng Trichoderma phòng trừ bệnh hại trồng Truy cập từ http://viennntn.vinhuni.edu.vn/nghiencuu-khoa-hoc/seo/ung-dung-che-pham-sinh-hoc-tu-nam-doi-khang-trichoderma-trongphong-tru-benh-hai-cay-trong-90307 ngày 20/8/2021 14 Nguyễn Thế Quyết, Nguyễn Đức Thành, Trịnh Quốc Bình, Bùi Thị Lan Hương, Nguyễn Đức Huy & Phạm Xuân Hội (2018) XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA LOÀI Chaetomium spp.VỚI NẤM Neoscytalidium dimidiatum GÂY BỆNH ĐỐM NÂU THANH LONG Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam 96(11): 111-115 B Tài liệu Tiếng Anh 15 Loquias V L (2019) Prodution guide for Caimito Accessed http://bpi.da.gov.ph/bpi/images/Production_guide/pdf/PRODUCTION%20GUIDE%20 FOR%20Starapple.pdf 24/08/2021 16 de Cock A W A M., Lodhi A.M., T.L Rintoul T.L , Bala K., Robideau G.P., Gloria Abad Z., Coffey M.D , Shahzad S & C.A L (2015) Phytopythium: molecular phylogeny and systematics Persoonia: Molecular Phylogeny and Evolution of Fungi 34: 25-39 17 Tkaczyk M (2020) Phytopythium: origin, differences and meaning in modern plant pathology Folia Forestalia Polonica 62(3): 227-232 18 de Cock A W A M & Lévesque C A (2004) New species of Pythium and Phytophthora Studies in Mycology 50: 481–487 19 Bennett R M., Nam B., Dedeles G R & Thines M (2017) Phytopythium leanoi sp nov and Phytopythium dogmae sp nov., Phytopythium species associated with mangrove leaf litter from the Philippines Acta Mycologica 52(2) 20 Marin M V., Seijo T., Mertely J & Peres N A (2019) First report of crown rot caused by Phytopythium helicoides on strawberry in the Americas Plant Disease 103(10): 2696-2696 21 Chen X R., Liu B B , Xing Y P., Cheng B P., Liu M L & Xu J Y (2016) Identification and characterization of Phytopythium helicoides causing stem rot of Shatangju mandarin seedlings in China European journal of plant pathology 146(4): 715-727 22 Boari A D J., Cunha E M , Quadros A F F., Barreto R W & Fernandes V (2018) First report of Phytopythium sp causing storage root rot and foliage blight of cassava in Brazil Plant Disease 102(5): 1042-1042 23 Yang X., Richardson P A., Olson H A & Hong C X (2013) Root and stem rot of begonia caused by Phytopythium helicoides in Virginia Plant Disease 97(10): 13851385 24 Wang K X., Xie Y L., Yuan G Q., Li Q Q & Lin W (2015) First report of root and collar rot caused by Phytopythium helicoides on kiwifruit (Actinidia chinensis) Plant Disease 99(5): 725-725 41 25 Thao LD, Hien LT, Liem NV, Thanh HM, Khanh TN, Binh VTP, Trang TTT, Anh PT & Tu TT (2020) First report of Phytopythium vexans causing root rot disease on durian in Vietnam New Disease Reports 41: 26 Soytong K & Quimio T H (1989) Antagonism of Chaetomium globosum to the rice blast pathogen Agriculture and Natural Resources 23(2): 198-203 27 Ruppavalli M V., Muthamilan M., Nakkeeran S & Subramanian K S (2019) Phenotypic and molecular characterization of Chaetomium globosum (Gustav Kunze) from different microhabitats of Tamil Nadu International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences 8(6): 1496-1506 28 Liu D & Paterson R M (2011) Molecular detection of human fungal pathogens CRC Press 389-391 29 Soytong K., Kanokmedhakul S., Kukongviriyapa V & Isobe M (2001) Application of Chaetomium species (Ketomium) as a new broad spectrum biological fungicide for plant disease control Fungal Divers 7: 1-15 30 Kanokmedhakul S., Kanokmedhakul K., Nasomjai P , Louangsysouphanh S., Soytong K., Isobe M., Kongsaeree P , Prabpai S & Suksamran A (2006) Antifungal azaphilones from Chaetomium cupreum CC3003 Joural of Natural Products 69: 891895 31 Intaparn P., Noireung P., Maumoon R., Poti T., Wongwan T , McGovern R J & ToAnun C (2020) First record of Phytopythium sp causing root and stem rot on Catharanthus roseus in Thailand Plant Pathology & Quarantine 10(1): 10-20 42 PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ 1) Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE M TRUONG 29/ 8/** 17:54 PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6149.06 2049.69 480.30 0.000 * RESIDUAL 34.1403 4.26754 * TOTAL (CORRECTED) 11 6183.20 562.109 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE M TRUONG 29/ 8/** 17:54 PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 12777.4 4259.13 ****** 0.000 * RESIDUAL 8.22105 1.02763 * TOTAL (CORRECTED) 11 12785.6 1162.33 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6_NSC FILE M TRUONG 29/ 8/** 17:54 PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V005 6_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 13074.1 4358.03 ****** 0.000 * RESIDUAL 7.86779 983474 * TOTAL (CORRECTED) 11 13082.0 1189.27 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE M TRUONG 29/ 8/** 17:54 PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ PDA PCA PSM CMA SE(N= 3) NOS 3 3 2_NSC 67.0000 31.5000 55.0000 8.00000 4_NSC 90.0000 70.3000 90.0000 10.4000 6_NSC 90.0000 80.5000 90.0000 11.1333 1.19269 0.585272 0.572560 43 5%LSD 8DF 3.88925 1.90851 1.86706 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE M TRUONG 29/ 8/** 17:54 PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 2_NSC 4_NSC 6_NSC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 40.375 12 65.175 12 67.908 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 23.709 2.0658 5.1 0.0000 34.093 1.0137 1.6 0.0000 34.486 0.99170 1.5 0.0000 | | | | 2) Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE NHIET DO 29/ 8/** 18: PAGE Anh huong nhiet den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4587.38 2293.69 490.11 0.000 * RESIDUAL 28.0795 4.67991 * TOTAL (CORRECTED) 4615.46 576.933 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE NHIET DO 29/ 8/** 18: PAGE Anh huong nhiet den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 711.180 355.590 264.71 0.000 * RESIDUAL 8.06002 1.34334 * TOTAL (CORRECTED) 719.240 89.9050 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHIET DO 29/ 8/** 18: PAGE Anh huong nhiet den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 25ºC 30ºC 35ºC NOS 3 2_NSC 76.2000 68.7000 25.0000 4_NSC 90.0000 85.5000 69.3000 SE(N= 3) 1.24899 0.669163 5%LSD 6DF 4.32045 2.31474 - 44 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHIET DO 29/ 8/** 18: PAGE Anh huong nhiet den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 2_NSC 4_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 56.633 81.600 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 24.019 2.1633 3.8 0.0000 9.4818 1.1590 1.4 0.0000 | | | | 3) Ảnh hưởng pH đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE P H 29/ 8/** 18:13 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.50000 1.75000 4.17 0.000 * RESIDUAL 2.52000 420000 * TOTAL (CORRECTED) 6.02000 752500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE P H 29/ 8/** 18:13 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 343.500 171.750 525.75 0.000 * RESIDUAL 1.96006 326676 * TOTAL (CORRECTED) 345.460 43.1825 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE P H 29/ 8/** 18:13 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ pH4 pH6 pH8 NOS 3 DF 2_NSC 24.0000 25.0000 25.5000 4_NSC 75.5000 79.0000 90.0000 SE(N= 3) 0.374166 0.329988 5%LSD 6DF 1.29430 1.14148 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE P H 29/ 8/** 18:13 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 45 VARIATE 2_NSC 4_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 24.833 81.500 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.86747 0.64807 2.6 0.0732 6.5713 0.57156 0.7 0.0000 | | | | 4) Ảnh hưởng nồng độ muối đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 18:27 PAGE Anh huong nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 864.500 432.250 444.08 0.000 * RESIDUAL 5.84019 973364 * TOTAL (CORRECTED) 870.340 108.793 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 18:27 PAGE Anh huong nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 13118.0 6559.00 ****** 0.000 * RESIDUAL 2.93914 489857 * TOTAL (CORRECTED) 13120.9 1640.12 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MUOI 29/ 8/** 18:27 PAGE Anh huong nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NaCl 1% NaCl 3% NaCl 5% NOS 3 2_NSC 22.5000 18.5000 0.000000 4_NSC 90.0000 67.0000 0.000000 SE(N= 3) 0.569609 0.404086 5%LSD 6DF 1.97037 1.39780 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MUOI 29/ 8/** 18:27 PAGE Anh huong nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 46 VARIATE 2_NSC 4_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 13.667 52.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.430 0.98659 7.2 0.0000 40.498 0.69990 1.3 0.0000 | | | | 5) Ảnh hưởng nguồn cacbon nuôi cấy đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE CACBON 29/ 8/** 18:31 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 51.7500 17.2500 15.44 0.001 * RESIDUAL 8.94002 1.11750 * TOTAL (CORRECTED) 11 60.6900 5.51727 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE CACBON 29/ 8/** 18:31 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 81.5626 27.1875 12.63 0.002 * RESIDUAL 17.2200 2.15250 * TOTAL (CORRECTED) 11 98.7826 8.98023 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CACBON 29/ 8/** 18:31 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Glucose Mannitol Saccharose Mat ri duong NOS 3 3 2_NSC 35.5000 35.0000 32.0000 30.5000 4_NSC 74.5000 73.0000 71.5000 67.5000 SE(N= 3) 0.610328 0.847054 5%LSD 8DF 1.99022 2.76216 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CACBON 29/ 8/** 18:31 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 47 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 2_NSC 4_NSC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 33.250 12 71.625 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.3489 1.0571 3.2 0.0013 2.9967 1.4671 2.0 0.0024 | | | | 6) Ảnh hưởng nguồn nito đến nấm Phytopythium spp TGVS03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSC FILE NITO 29/ 8/** 18:36 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V003 2_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2049.00 683.000 318.04 0.000 * RESIDUAL 17.1801 2.14751 * TOTAL (CORRECTED) 11 2066.18 187.835 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSC FILE NITO 29/ 8/** 18:36 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 VARIATE V004 4_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3422.25 1140.75 415.19 0.000 * RESIDUAL 21.9804 2.74755 * TOTAL (CORRECTED) 11 3444.23 313.112 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NITO 29/ 8/** 18:36 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Cao thit bo NaNO3 KNO3 (NH4)2SO4 NOS 3 3 2_NSC 53.0000 49.0000 51.0000 21.0000 4_NSC 90.0000 90.0000 90.0000 51.0000 SE(N= 3) 0.846071 0.957001 5%LSD 8DF 2.75895 3.12068 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NITO 29/ 8/** 18:36 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Phytopythium spp TGVS03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 48 VARIATE 2_NSC 4_NSC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 43.500 12 80.250 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.705 1.4654 3.4 0.0000 17.695 1.6576 2.1 0.0000 49 | | | |