Khóa luận tốt nghiệp phân lập, nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của vi khuẩn bacillus trên đất trồng cây vú sữa tỉnh tiền giang

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “PHÂN LẬP, NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA VI KHUẨN Bacillus TRÊN ĐẤT TRỒNG CÂY VÚ SỮA TỈNH TIỀN GIANG” Sinh viên thực : Lê Thị Phương Trang Khóa : 62 Ngành : Công nghệ sinh học Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Đức Thành ThS Trần Thị Hồng Hạnh HÀ NỘI - NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực, khách quan chưa dùng bảo vệ để lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn, thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 05 tháng 10 năm 2021 Sinh viên Lê Thị Phương Trang i LỜI CẢM ƠN Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Đức Thành ThS Trần Thị Hồng Hạnh định hướng đề tài, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ động viên em trình thực đề tài hồn thành khóa luận Em xin gửi lời chân thành cảm ơn tới Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, thầy cô giáo Khoa Công nghệ sinh học trực tiếp giảng dạy trang bị kiến thức bổ ích suốt thời gian học đại học em Sau thời gian làm đề tài tốt nghiệp Bộ môn Công nghệ Vi sinh Viện Di truyền Nông nghiệp, em xin chân thành cảm ơn tập thể cán Bộ môn Công nghệ Vi sinh - Viện Di truyền Nơng nghiệp nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực đề tài khóa luận tốt nghiệp em Em xin gửi lời cảm ơn tới tất người thân, bạn bè người bên cạnh động viên giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 05 tháng 10 năm 2021 Sinh viên Lê Thị Phương Trang ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii TÓM TẮT ix PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cây vú sữa 2.1.1 Giới thiệu vú sữa 2.1.2 Giá trị vú sữa 2.1.3 Tình hình sản xuất vú sữa Việt Nam 2.1.4 Tình hình sản xuất vú sữa giới 2.2 Vi khuẩn Bacillus 2.2.1 Cơ chế vi khuẩn Bacillus 2.2.2 Phân bố, phân loại vi khuẩn Bacillus 2.2.3 Đặc điểm hình thái vi khuẩn Bacillus 2.2.4 Dinh dưỡng tăng trưởng 11 2.2.5 Đặc điểm sinh học vi khuẩn Bacillus 11 2.2.6 Ứng dụng vi khuẩn Bacillus sản xuất nông nghiệp 12 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 Đối tượng nghiên cứu 14 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 14 iii 3.3 Vật liệu nghiên cứu 14 3.4 Nội dung nghiên cứu 16 3.5 Phương pháp nghiên cứu 16 3.5.1 Phương pháp phân lập vi khuẩn 16 3.5.2 Phương pháp định danh vi khuẩn Bacillus tuyển chọn dựa vào mơ tả đặc điểm hình thái 17 3.5.3 Phương pháp xác định đặc điểm sinh học chủng vi khuẩn Bacillus tuyển chọn 20 3.5.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính chịu mặn muối NaCl hoạt tính phân giải cellulose mẫu vi khuẩn Bacillus tuyển chọn 22 3.5.5 Phương pháp xử lý số liệu 23 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 24 4.1 Phân lập, tuyển chọn mẫu vi khuẩn 24 4.2 Định danh chủng vi khuẩn Bacillus dựa vào đặc điểm hình thái 25 4.3 Ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng, phát triển chủng 27 vi khuẩn tuyển chọn 27 4.3.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 27 4.3.2 Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 29 4.3.3 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 31 4.3.4 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 33 4.3.5 Ảnh hưởng độ mặn muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 35 4.3.6 Xác định hoạt tính cellulose 37 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 Kết luận 39 iv 5.2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ 44 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Chữ viết tắt Diễn giải chữ viết tắt CFU Colony forming unit (Số đơn vị khuẩn lạc) CMA Cornmeal Agar ctv Cộng tác viên ĐBSCL Đồng sông Cửu Long KB King’s B Agar PDA Potato Dextrose Agar Sp Species vi DANH MỤC BẢNG Bảng Kết phân lập vi khuẩn phương pháp pha loãng đất môi trường KB 24 Bảng Tổng hợp số đặc điểm hình thái, hóa sinh mẫu phân lập TGVS01 27 Bảng Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 28 Bảng 4 Ảnh hưởng pH đến phát triển vi khuẩn Bacillus TGVS01 môi trường KB 30 Bảng Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 32 Bảng Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 34 Bảng Ảnh hưởng độ mặn muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 36 Bảng Khả phân giải cellulose chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 mơi trường có chất CMC 38 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Đặc điểm hình thái chủng vi khuẩn Bacillus amyloliquefaciens AM9 10 Hình Hình thái khuẩn lạc mẫu vi khuẩn TGVS01 25 Hình Kết đánh giá với thuốc thử Salkowski mẫu phân lập TGVS01 26 Hình Kết đánh giá với H2O2 mẫu phân lập TGVS01 26 Hình 4 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 29 Hình Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 31 Hình Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 33 Hình Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 35 Hình Ảnh hưởng độ mặn muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 37 Hình Khả phân giải cellulose chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 mơi trường có chất CMC 38 viii TÓM TẮT Với đề tài “Phân lập, nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Bacillus đất trồng vú sữa tỉnh Tiền Giang”, tiến hành phân lập từ mẫu đất trồng vú sữa tỉnh Tiền Giang, tuyển chọn định danh mẫu vi khuẩn phân lập được, sau đánh giá số đặc điểm sinh học đánh giá hoạt tính phân giải cellulose mẫu vi khuẩn Bacillus tuyển chọn Từ 03 mẫu đất trồng vú sữa tỉnh Tiền Giang có sẵn Bộ mơn Cơng nghệ vi sinh - Viện Di truyền Nông nghiệp, phương pháp phân lập môi trường KB, phân lập tuyển chọn 01 mẫu vi khuẩn Bacillus từ mẫu phân lập TGVS01 dựa vào mô tả đặc điểm hình thái, hóa sinh, tạm thời đặt tên mẫu vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 Mẫu vi khuẩn sử dụng làm nguồn đánh giá đặc điểm sinh học điều kiện in vitro, kết thí nghiệm cho thấy: vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 sinh trưởng, phát triển rõ ràng dễ quan sát môi trường King’s B, ngưỡng pH - pH 8, nguồn cacbon saccharose, nguồn nitơ cao thịt bị; có khả chịu mặn với nồng độ muối NaCl 1% có hoạt tính phân giải cellulose ix Hình Ảnh hưởng độ mặn muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 Ghi chú: a - mặt đĩa khuẩn; b - mặt đĩa khuẩn 4.3.6 Xác định hoạt tính cellulose Kết thí nghiệm cho thấy, sau ngày ủ mơi trường có chất CMC hình thành vịng phân giải cellulose Kết thí nghiệm trình bày bảng 4.8 37 Bảng Khả phân giải cellulose chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 mơi trường có chất CMC Đường kính lỗ đục (mm) Đường kính vịng phân giải protein (D – d) mm Vi khuẩn Bacillus TGVS01 6,0 16,9 ± 1,5 Đối chứng thạch trắng 6,0 0,0 ± 0,0 Công thức thí nghiệm Thang điểm đánh giá Dựa xuất vòng phân giải sau xử lý dung dịch lugol ta thấy môi trường có màu tím hồng, tạo thành vịng suốt quanh lỗ đục với kích thước 16,9 mm Cịn đĩa thạch đối chứng khơng có xuất vòng phân giải Đối chiếu với thang điểm đánh giá hệ số phân giải (D – d) = 10 - 19,5 mm cho thấy chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 có hoạt tính enzyme trung bình Như vậy, chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 có hoạt tính sinh enzyme cellulase Hình Khả phân giải cellulose chủng vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 môi trường có chất CMC 38 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận 1) Đã phân lập, tuyển chọn định danh chủng vi khuẩn Bacillus từ mẫu phân lập TGVS01 thu thập đất trồng vú sữa tỉnh Tiền Giang 2) Đánh giá số đặc điểm sinh học mẫu vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 cho thấy: - Vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 sinh trưởng phát triển rõ rệt môi trường KB, ngưỡng pH từ - thích hợp cho chủng vi khuẩn - Vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 có khả đồng hố tốt nguồn nitơ cao thịt bò nguồn cacbon saccharose 3) Đánh giá hoạt tính vi khuẩn Bacillus spp TGVS01: Vi khuẩn Bacillus TGVS01 chịu mặn với nồng độ muối NaCl 1% tốt có hoạt tính sinh enzyme cellulase với đường kính vịng phân giải cellulose 16,9 ± 1,5 mm 5.2 Kiến nghị - Đánh giá hoạt tính đối kháng với số loại nấm gây bệnh trồng khác Cần định danh đến tên loài kỹ thuật PCR - Nghiên cứu kỹ thuật nhân sinh khối vi khuẩn Bacillus spp, TGVS01 nhằm mục đích tạo chế phẩm vi sinh để ứng dụng phân bón có lợi cho đất trồng vú sữa 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO A) Tài liệu tiếng Việt Bùi Xuân Đồng, Nguyễn Huy Văn (2000), Nấm mốc phương pháp phòng chống, NXB Khoa học Kĩ Thuật Đoàn Lê Minh Hiền (2013).Tuyển chọn chủng Bacillus spp Có khả kháng nấm Fusarium sp Và Phytophthora Palmivora gây bệnh bắp (Zea maysl.), Luận văn tốt nghiệp, Trường ĐH Sư Phạm TP.HCM Đỗ Thị Thu Nga (2012), Khảo sát khả sinh tổng hợp protease số chủng Bacillus, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư Phạm TP.HCM Hoàng Nam (2021) Tiền Giang đốn bỏ vú sữa Lò Rèn sau nhiều năm bệnh, thối hóa Truy cập từ: https://vnexpress.net/don-bo-vu-sua-lo-ren-4292347.html ngày 24/08/2021 Huỳnh Thị Cẩm Tiên , Hồ Viết Thế (2019), “Phân lập định danh số chủng Bacillus spp có hoạt tính cao tầng đất mặt thu thập từ tỉnh Bình Thuận”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Thực phẩm (18) Lương Đức Phẩm (2007), chế phẩm sinh học dùng chăn nuôi nuôi trồng thủy sản, NXB Nông Nghiệp Lương Đức Phẩm (2011), Sản xuất sử dụng chế phẩm sinh học nông nghiệp, NXB Giáo dục Việt Nam Nguyễn Đức Lượng cs, Thí Nghiệm Vi Sinh Vật Học, Thí Nghiệm Cơng Nghệ Sinh học Tập 2, 2006, NXB ĐHQG TP Hồ Chí Minh Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thế Quyết, Hà Viết Cường, Đỗ Tấn Dũng, Đào Thị Thu Hằng, Phạm Thị Lý Thu, Phạm Xuân Hội (2020), đặc điểm sinh học định danh chủng vi khuẩn Bacillus altitudinis T1008 phân lập từ đất nhiễm mặn 10 Nguyễn Lân Dũng (2000), Vi sinh vật học, Nhà xuất Giáo Dục 11 Nguyễn Lân Dũng, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Thanh Hiền, Lê Đình Lương, Đồn Xn Mượu, PhạmVăn Ty (1978), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học (tập 3), NXB Khoa học Kĩ Thuật, Hà Nội 12 Nguyễn Minh Châu, Nguyễn Văn Hòa Nguyễn Thành Hiếu (2013) Bệnh thối rễ, khô cành vú sữa biện pháp quản lý tổng hợp Báo Khoa học – Đời sống, 201308 13 Nguyễn Thị Dơn, Nguyễn Thị Kiều Diễm, Cao Ngọc Điệp (2012), “Phân lập nhận diện vi khuẩn hòa tan lân kali từ mẫu vật liệu phong hóa đá hoa cương núi Sập, tỉnh An Giang”, Tạp chí Khoa học, Trường Đại học An Giang 14 Nguyễn Thị Hoàng Hải (2009), Nghiên cứu thu nhận enzyme α – amylase từ trực khuẩn cỏ khô, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư phạm TP.HCM 15 Nguyễn Thị Trần Thụy (2009), Nghiên cứu tuyển chọn chủng vi khuẩn Bacillus phân lập từ đất vườn sinh protease kiềm, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường Đh Sư phạm TP.HCM 16 Nguyễn Xuân Thành, Vũ Thị Hoàn, Nguyễn Thế Bình, Đinh Hồng Duyên (2007), Thực tập vi sinh vật chuyên ngành, Nhà xuất Nông nghiệp 40 17 Thùy Giang (2018) Tiền Giang đánh giá tình hình sản xuất, tiêu thụ, xuất trái vú sữa Đài Phát - Truyền hình Tiền Giang 18 Trần Thị Bích Quyên (2012) Nghiên cứu tuyển chọn số chủng Bacillus làm probiotic chăn nuôi, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường ĐH Sư phạm TP.HCM 19 Võ Văn Chi (2012) Từ điển Cây thuốc Việt Nam (Viết tiếng Việt), Nhà xuất Y học B) Tài liệu tiếng anh 20 A.D.Agate C.V Subramania M Vannucci (1988), UNDP/UNESCO Regional Project RAS/86/1988 Mangrove microbiology, 21 Abou-Taleb, A.A Khadiga, W.A Mashhoor, A Sohair, M.S Sharaf and H.M Hoda, (2009), “Nutritional and Environmental Factors Affecting Cellulase Production by Two Strains of Cellulolytic Bacilli”, Australian Journal of Basic and Applied Sciences 22 Ahmad M, Ahmad I, Hilger TH, Nadeem SM, Akhtar MF, Jamil M, Hussain A, Zahir ZA Preliminary study on phosphate solubilizing Bacillus subtilis strain Q3 and Paenibacillus sp strain Q6 for improving cotton growth under alkaline conditions Peer J 2018 23 Aiba S., Humphrey A.E., Millis N.F (eds.) (1973), Biochemical 2nd edn Academic Press, New York Engineering, 24 Aly, M M., Khalel, A., & Hassan, S M (2019) Isolation, identification, and characterization of a keratolytic bacterium from poultry wastes Journal Of Pharmacy And Biological Sciences, 14(5) 25 Amtul, J S., (1989) “Purification and Characterization of Microbial Cellulolytic Enzymes” Ph.D Thesis, Institute of Chemistry, University of the Punjab Lahore – 1, Pakistan 26 Anbu, S., Saranraj, P., & Padma, J (2017) Synergetic Effect of Microbially Fermented Soybean and NPK Fertilizer on Plant Growth of Grand Naine Banana Journal of Academia and Industrial Research (JAIR), 6(2), 27 27 Anitha K.K., Raja Kumar K.N., and Narasimha R.C.H - Adverse effects of chemical fertilizers and pesticides on human health and environment, Journal of Chemical and Pharmaceutical Sciences (2014) 28 Arora NK, Verma M, Prakash J, Mishra J Bioformulations for sustainable agriculture New Delhi: Springer; 2016 Regulation of biopesticides: global concerns and policies 29 Azabou, M C., Gharbi, Y., Medhioub, I., Ennouri, K., Barham, H., Tounsi, S., & Triki, M A (2020) The endophytic strain Bacillus velezensis OEE1: An efficient biocontrol agent against Verticillium wilt of olive and a potential plant growth promoting bacteria Biological Control, 142, 104168 30 Barredo J.L - Microbial enzymes and biotransformations, Humana Press Inc (2005) 31 Bulla J.A, Costilow R, Sappe E.S (1978), “Biology of Bacillus popippiae”, Adv Appl Microbiol 41 32 Danielsson J., Reva O., Meijer J - Protection of oilseed rape (Brassica napus) toward fungal athogens by strains of plant - associated Bacillus amyloliquefaciens, Microbial Ecology (2007) 33 Đoan Van Hau and Le Phuong Thao (2020) Chrysophyllum cainito: A Tropical Fruit with Multiple Health Benefits.: 7259267 34 Fan B., Carvalhais L.C., Becker A., Fedoseyenko D., Von Wirén N., Borriss R Transcriptomic profiling of Bacillus amyloliquefaciens FZB42 in response to maize root exudate, BMC Microbiology (2012) 35 Gupta R., Beg Q.K., Lorenz P - Bacterial alkaline proteases: molecular approaches and industrial applications, Applied Microbiology and Biotechnology (2002) 36 Hassan, T U., Bano, A., Naz, I., & Hussain, M (2018) Bacillus cereus: a competent plant growth promoting bacterium of saline sodic field Pak J Bot, 50(3), 1029-1037 37 Hassan, Z U., Al Thani, R., Alsafran, M., Migheli, Q., & Jaoua, S (2021) Selection of Bacillus spp with decontamination potential on multiple Fusarium mycotoxins Food Control, 127, 108119 38 Hayat R., Ali, S., Amara U., Khalid R and Ahmed, I., 2010, Soil beneficial bacteria and their role in plant growth promotion: a review, Annals of Microbiology, 60(4) 39 Hayman, D.S., 1975, Phosphorus cycling by soil microorganisms and plant roots, Soil Microbiology N Walker, ed 40 Khan M S., Zaidi A., and Wani P.A., 2007, Role of phosphate-solubilizing microorganisms in sustainable agriculture: a review Agronomy for sustainable development, 27(1) 41 Lee, A., Cheng, K C., & Liu, J R (2017) Isolation and characterization of a Bacillus amyloliquefaciens strain with zearalenone removal ability and its probiotic potential PloS one, 12(8) 42 Magdi A.M Younis, Francis F.Hezayen, Moustafa (2010), “World Applied Sciences Journal”, Microbiology and Biotechnology, 7(1), 31-37 43 Mayak S., Tirosh T and Glick B.R., 1999, Effect of wild-type and mutant plant growth-promoting rhizobacteria on the rooting of mung bean cuttings, Journal of plant growth regulation, 18(2) 44 Maheshwari D.K., 2013, Bacteria in agrobiology: disease management, Springer Science and Business Media 45 Mandels, M.; Reese, E.T (1960), “Induction of cellulase by fungi cellobiose”, J Bacteriol 46 P.D Vos, G.M Garrity, D Jones, Bergey's manual of systematic bacteriology Springer Science (2009) 47 Priest (F.G), GOODFELLOW (M), SHUTE (LA) and BERKELEY (R.C.W) (1987), “B amyloliquefaciens sp Nov nom Rev”, Int, J Syst Bacteriol 48 Rais, A., Shakeel, M., Malik, K., Hafeez, F Y., Yasmin, H., Mumtaz, S., & Hassan, M N (2018) Antagonistic Bacillus spp reduce blast incidence on rice and increase grain yield under field conditions Microbiological research, 208 42 49 Ray, A.K., Bairang I, K.S Ghosh and S.K Sen (2007), ”Optimization of fermentation conditions for cellulose production by B subtilis CY5 and B circulans TP3 is olated from fish gut”, Acta Ichthyologogica ET Piscatoria, 37 (1): 47-53 50 Shafi, J., Tian, H., & Ji, M (2017) Bacillus species as versatile weapons for plant pathogens: a review Biotechnology & Biotechnological Equipment, 31(3) 51 Tewari S, Arora NK Role of salicylic acid from Pseudomonas aeruginosa PF23EPS + in growth promotion of sunfower in saline soils infested with phytopathogen Macrophomina phaseolina Environ Sustain 2018 52 Travers, R S., Martin, P A., & Reichelderfer, C F (1987) Selective process for efficient isolation of soil Bacillus spp Applied and Environmental Microbiology, 53(6) 53 James GC, Natalia S (2002), Microbilogy – A Labaratory Manual, Nineth Edition 54 X.B Jin, et al (2012), “Isolation and identification of Bacillus altitudinis ZJ 186 from marine soil samples and itsantifungal activity against Magnaporthe oryzae”,Current Research in Bacteriology 55 Xianling J., Guobing L., Yingping G., Chenchao Z., and Zhimei M - Biological control against bacterial wilt and colonization of mulberry by an endophytic Bacillus subtilis strain, FEMS Microbiology Ecology (2008) 43 PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ 1) Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H_SNC FILE MOI TRUONG 22/ 9/** 15:32 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V003 24H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 236.056 118.028 * RESIDUAL 5.16666 861111 137.06 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 241.222 30.1528 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H_SNC FILE MOI TRUONG 22/ 9/** 15:32 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V004 48H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 662.889 331.444 * RESIDUAL 4.66668 777780 426.14 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 667.556 83.4444 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H_SNC FILE MOI TRUONG 22/ 9/** 15:32 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V005 72H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3393.72 1696.86 * RESIDUAL 6.33342 1.05557 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 3400.06 44 425.007 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MOI TRUONG 22/ 9/** 15:32 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 MEANS FOR EFFECT CT$ -CT$ NOS 24H_SNC 48H_SNC 72H_SNC KB 13.3333 17.6667 21.1667 PDA 20.5000 29.0000 54.1667 CMA 8.00000 8.00000 8.00000 0.535758 0.509176 0.593175 1.85327 1.76132 2.05189 SE(N= 3) 5%LSD 6DF ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MOI TRUONG 22/ 9/** 15:32 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | 24H_SNC 13.944 5.4912 0.92796 6.7 0.0000 48H_SNC 18.222 9.1348 0.88192 4.8 0.0000 72H_SNC 27.778 20.616 1.0274 3.7 0.0000 2) Ảnh hưởng pH đến phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 môi trường KB BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H_SNC FILE PH 24/ 9/** 15:35 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V003 24H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 83.5800 41.7900 * RESIDUAL 940004 156667 266.74 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 84.5200 10.5650 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H_SNC FILE PH 24/ 9/** 15:35 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 45 VARIATE V004 48H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 156.660 78.3300 * RESIDUAL 840018 140003 559.49 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 157.500 19.6875 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H_SNC FILE PH 24/ 9/** 15:35 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V005 72H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 321.087 160.543 * RESIDUAL 333361 555602E-01 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 321.420 40.1775 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PH 24/ 9/** 15:35 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 MEANS FOR EFFECT CT$ -CT$ NOS 24H_SNC 48H_SNC 72H_SNC pH 8.00000 8.00000 8.00000 pH 14.2000 16.8000 20.3000 pH 14.7000 16.9000 21.1333 SE(N= 3) 0.228522 0.216027 0.136088 5%LSD 6DF 0.790495 0.747272 0.470752 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PH 24/ 9/** 15:35 PAGE Anh huong pH den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) NO OBS DEVIATION BASED ON BASED ON C OF V |CT$ % | | | | | TOTAL SS RESID SS 24H_SNC 12.300 3.2504 0.39581 3.2 0.0000 48H_SNC 13.900 4.4371 0.37417 2.7 0.0000 46 | 72H_SNC 16.600 6.3386 0.23571 1.4 0.0000 3) Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 môi trường KB BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H_SNC FILE cacbon 22/ 9/** 15:57 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V003 24H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 62.0625 20.6875 * RESIDUAL 12.0000 1.50000 13.79 0.002 * TOTAL (CORRECTED) 11 74.0625 6.73295 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H_SNC FILE cacbon 22/ 9/** 15:57 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V004 48H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 112.417 37.4722 * RESIDUAL 18.0000 2.25000 16.65 0.001 * TOTAL (CORRECTED) 11 130.417 11.8561 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H_SNC FILE cacbon 22/ 9/** 15:57 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V005 72H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 247.583 82.5278 * RESIDUAL 43.8333 5.47917 15.06 0.001 * TOTAL (CORRECTED) 11 291.417 47 26.4924 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MUOI 22/ 9/** 15:57 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 24H_SNC 48H_SNC 72H_SNC Manitol 10.8333 14.8333 17.6667 Saccharose 17.0000 23.0000 30.0000 Mat ri duong 12.3333 17.1667 21.6667 Glucose SE(N= 3) 5%LSD 8DF 13.3333 16.6667 21.0000 0.707107 0.866026 1.35144 2.30580 2.82402 4.40691 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE cacbon 22/ 9/** 15:57 PAGE Anh huong nguon cacbon den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | 24H_SNC 12 13.375 2.5948 1.2247 9.2 0.0018 48H_SNC 12 17.917 3.4433 1.5000 8.4 0.0010 72H_SNC 12 22.583 5.1471 2.3408 10.4 0.0014 4) Ảnh hưởng nguồn nito đến phát triển vi khuẩn Bacillus spp TGVS01 môi trường KB BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H_SNC FILE NITO 24/ 9/** 15:41 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V003 24H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 4.56333 1.52111 * RESIDUAL 2.29333 286667 5.31 0.02 * TOTAL (CORRECTED) 11 6.85667 623333 - 48 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H_SNC FILE NITO 24/ 9/** 15:41 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V004 48H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 9.07000 3.02333 * RESIDUAL 2.88667 360833 8.38 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 11.9567 1.08697 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H_SNC FILE NITO 24/ 9/** 15:41 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 VARIATE V005 72H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 96.6600 32.2200 * RESIDUAL 2.88000 360000 89.50 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 99.5400 9.04909 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NITO 24/ 9/** 15:41 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 24H_SNC 48H_SNC 72H_SNC cao thit bo 14.2000 18.5000 23.7333 NaNO3 15.2333 17.3000 21.2333 KNO3 13.5000 17.0000 17.5000 (NH4)2SO4 14.3333 16.0667 16.7333 0.309121 0.346811 0.346410 1.00801 1.13092 1.12961 SE(N= 3) 5%LSD 8DF ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NITO 24/ 9/** 15:41 PAGE Anh huong nguon nito den su sinh truong, phat trien vi khuan Bacillus spp TGVS01 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION 49 C OF V |CT$ | (N= 12) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS % | | | | | 24H_SNC 12 14.317 0.78951 0.53541 3.7 0.0266 48H_SNC 12 17.217 1.0426 0.60069 3.5 0.0079 72H_SNC 12 19.800 3.0082 0.60000 3.0 0.0000 5) Ảnh hưởng nồng độ muối đến sinh trưởng, phát triển vi khuẩn bacillus spp TGVS01 môi trường KB BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H_SNC FILE MUOI 21/ 9/** 17:17 PAGE anh huong cua nong muoi den sinh truong, phat trien vi khuan bacillus VARIATE V003 24H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 9.26889 4.63444 * RESIDUAL 3.30667 551111 8.41 0.019 * TOTAL (CORRECTED) 12.5756 1.57194 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H_SNC FILE MUOI 21/ 9/** 17:17 PAGE anh huong cua nong muoi den sinh truong, phat trien vi khuan bacillus VARIATE V004 48H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 199.376 99.6878 * RESIDUAL 393348 655579E-01 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 199.769 24.9711 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H_SNC FILE MUOI 21/ 9/** 17:17 PAGE anh huong cua nong muoi den sinh truong, phat trien vi khuan bacillus VARIATE V005 72H_SNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 330.082 165.041 * RESIDUAL 506693 844488E-01 ****** 0.000 - 50 * TOTAL (CORRECTED) 330.589 41.3236 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MUOI 21/ 9/** 17:17 PAGE anh huong cua nong muoi den sinh truong, phat trien vi khuan bacillus MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 24H_SNC 48H_SNC 72H_SNC 1% NaCl 24.3000 34.8000 40.7000 3% NaCl 22.3333 26.7333 30.1333 5% NaCl 22.0000 23.6333 26.4000 0.428607 0.147826 0.167778 1.48262 0.511355 0.580372 SE(N= 3) 5%LSD 6DF ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MUOI 21/ 9/** 17:17 PAGE anh huong cua nong muoi den sinh truong, phat trien vi khuan bacillus F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) NO OBS DEVIATION BASED ON BASED ON C OF V |CT$ % | | | | | TOTAL SS RESID SS 24H_SNC 22.878 1.2538 0.74237 3.2 0.0188 48H_SNC 28.389 4.9971 0.25604 0.9 0.0000 72H_SNC 32.411 6.4283 0.29060 0.9 0.0000 51 |