Ảnh hưởng của một số điều kiện nuôi cấy đến khả năng kháng khuẩn của chủng vi khuẩn bacillus sp b860

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -oOo - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SP B860 HÀ NỘI, 2023 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -oOo - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SP B860 Sinh viên thực : LÊ ĐÌNH TỒN Lớp : K64CNSHB Ngành : CƠNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hướng dẫn : TS HỒ TÚ CƯỜNG PGS.TS NGUYỄN XUÂN CẢNH HÀ NỘI, 2023 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khoá luận trung thực chưa sử dụng công bố Em xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khố luận cảm ơn thơng tin trích dẫn rõ nguồn gốc danh mục tài liệu tham khảo Em xin hoàn toàn chịu trách nhiệm số liệu khoá luận Hà Nội, ngày tháng 02 năm 2023 Sinh viên Lê Đình Tồn i LỜI CẢM ƠN Sau thời gian làm đề tài tốt nghiệp Bộ môn Công nghệ vi sinh, giúp đỡ dìu dắt tận tình thầy giáo, cán phịng thí nghiệm Bộ mơn, cố gắng nỗ lực học tập thân, em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học tồn thể thầy giáo truyền đạt cho em kiến thức vô bổ ích quý báu suốt thời gian học tập, rèn luyện thực khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Xuân Cảnh – giảng viên khoa Công nghệ sinh học định hướng đề tài tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em suốt trình làm khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cán phịng thí nghiệm Bộ mơn Cơng nghệ vi sinh, tồn thể anh, chị, bạn bè em thực tập nghiên cứu phịng thí nghiệm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực tập tốt nghiệp Và cuối cùng, với tất lịng kính trọng biết ơn vơ hạn, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới bố mẹ, chị gái người thân em nuôi nấng, động viên tạo động lực cho em suốt trình học tập nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng 02 năm 2023 Sinh viên Lê Đình Tồn ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nội dụng nghiên cứu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Đối tượng nghiên cứu 1.2.3 Nội dung nghiên cứu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan Bacillus 2.1.1 Đặc điểm chung Bacillus 2.1.2 Vai trò Bacillus 2.1.2.1 Đối với bảo quản thực phẩm 2.1.2.2 Đối với ngành dược phẩm 2.1.2.3 Đối với an toàn sinh học 10 2.1.2.4 Đối với chế phẩm sinh học 10 2.2 Tổng quan vi khuẩn kiểm định 11 2.2.1 Tổng quan Aeromonas hydrophila 11 2.2.2 Tổng quan Staphylococcus aureus 13 2.3 Một số hợp chất kháng khuẩn tổng hợp Bacillus 15 2.3.1 Một số hợp chất kháng khuẩn tổng hợp LAB 15 2.4 Tình hình nghiên cứu hợp chất kháng khuẩn từ Bacillus 17 2.4.1 Các nghiên cứu nước 17 iii 2.4.2 Các nghiên cứu giới 18 PHẦN III PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1 Vật liệu nghiên cứu 21 3.1.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 21 3.1.2 Đối tượng nghiên cứu 21 3.1.3 Thiết bị, hóa chất dụng cụ 21 3.1.4 Môi trường nuôi cấy chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 21 3.2 Phương pháp nghiên cứu 22 3.2.1 Phương pháp khuếch tán đĩa thạch 22 3.2.2 Ảnh hưởng nguồn carbon đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 22 3.2.3 Ảnh hưởng nguồn nitơ 23 3.2.4 Ảnh hưởng nồng độ NaCl 23 3.2.5 Ảnh hưởng pH 23 3.2.6 Ảnh hưởng nhiệt độ 24 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy 24 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Ảnh hưởng nguồn carbon đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 25 4.1.1 Ảnh hưởng nguồn carbon khác 25 4.1.2 Ảnh hưởng nồng độ glucose 26 4.2 Ảnh hưởng nguồn nitơ 27 4.2.1Ảnh hưởng nồng độ cao nấm men 27 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ peptone 28 4.3 Ảnh hưởng nồng độ NaCl 29 4.4 Ảnh hưởng pH 30 4.5 Ảnh hưởng nhiệt độ 31 4.6 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy 33 iv PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 34 5.1 Kết luận 34 5.2 Kiến nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC 41 v DANH MỤC HÌNH Hình 4.1.1 Ảnh hưởng nguồn carbon khác đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 25 Hình 4.1.2 Ảnh hưởng nồng độ glucose đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 26 Hình 4.2.1 Ảnh hưởng nồng độ cao nấm men đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 27 Hình 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ peptone đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 28 Hình 4.3 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 29 Hình 4.4 Ảnh hưởng pH đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 30 Hình 4.5 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 32 Hình 4.6 Ảnh hưởng thời gian ni cấy đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 33 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT từ đầy đủ Từ viết tắt LAB Lactic acide bacteria Spp Một số loài Cs Cộng mm Milimeter Sp Loài LB Luria Bertani NB Nutrient broth MRS De Man, Rogosa Sharpe µl Microliter S aureus Staphylococcus aureus A hydrophila Aeromonas hydrophila kDa Kilodalton vii TÓM TẮT Nghiên cứu thực với mục đích đánh giá điều kiện ni cấy ảnh hưởng đến khả kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 Aeromonas hydrophila gây bệnh tả người Staphylococcus aureus gây bệnh nhiễm trùng người Các thí nghiệm thiết kế thực điều kiện nuôi cấy khác để đánh giá khả sinh hợp chất kháng khuẩn tối ưu Bacillus spp Kết cho thấy chủng Bacillus sp B860 bắt đầu sinh kháng khuẩn vào ngày nuôi cấy thứ đạt cực đại sau ngày với điều kiện lắc 150 vịng/phút Điều kiện ni cấy thích hợp để chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 sinh hợp chất kháng khuẩn tốt nhiệt độ 37°C, pH môi trường ban đầu 6,5 với thể tích dịch cấy khoảng 30% ống trụ trịn 100ml Mơi trường dinh dưỡng thích hợp xác định bổ sung nguồn carbon glucose 2% w/v nguồn nitơ peptone 1% w/v, nguồn cao nấm men 0,5% w/v, lúc chủng vi khuẩn cho đường kính vịng kháng khuẩn 13,5mm 14mm với Aeromonas hydrophila với vi khuẩn Staphylococcus aureus 12,5 mm 14,5 mm viii 4.6 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy Ghi chú: N : Ngày Hình Ảnh hưởng thời gian ni cấy đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 Sử dụng dung dịch nuôi cấy để kiểm tra khả kháng khuẩn Bacillus sp B860 với vi sinh vật thử nghiệm A hydrophila S aureus sau 2, 4, ngày Từ kết hình 4.8 cho ta thấy thời gian ni cấy ảnh hưởng rõ rệt đến khả kháng khuẩn vi khuẩn Bacillus sp B860 Qua đo đường kính vịng kháng khuẩn cho thấy trạng thái lắc sau ngày ni cấy Bacillus sp B860 có hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất, lượng kháng khuẩn sinh nhiều đường kính vịng kháng khuẩn với A hydrophila S aureus lớn 13 ± mm 13,67 ± 0,58 mm, sau ngày nuôi cấy giữ hoạt tính 33 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết thí nghiệm trên, chủng vi khuẩn Bacillus sp B860 sinh trưởng sinh hoạt chất kháng khuẩn mạnh điều kiện nuôi cấy môi trường MRS với nồng độ nguồn carbon glucose 2%, nồng độ nguồn nitơ peptone 1% cao nấm men 0,5%, pH khoảng 6,5,thời gian ngày Để sản xuất lượng kháng khuẩn tốt nhất, thể tích dịch ni cấy phải trì khoảng 30% thể tích bình 100ml 5.2 Kiến nghị Định danh phân loại chủng Bacillus sp B860 Nghiên cứu thêm ứng dụng bảo quản thực phẩm 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Đỗ Thị Hiền (2018) Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp Bacteriocin vi khuẩn Bacillus subtilis thử nghiệm khả đối kháng chủng vibrio spp.Trường Đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm TP.HCM.Tạp chí khoa học Đại học Thủ Dầu Một Phạm Minh Tuấn*, Nguyễn Thị Hồng Phấn, Trần Anh Thư (2017).Phân lập tuyển chọn vi khuẩn sinh Bacteriocin kháng vibrio parahaemolyticus gây bệnh tôm.Tạp chí khoa học cơng nghệ thực phẩm Lê Thị Hải Yến Nguyễn Đức Hiền, 2016 Khảo sát đặc tính probiotic chủng vi khuẩn Bacillus subtilis phân lập tỉnh Đồng sông Cửu Long Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Nông nghiệp (Tập 2): 26-32 TIẾNG ANH K Vijayalakshmi and Suseela Rajakumar*(2010) Antimicrobial protein production by Bacillus amyloliquefaciens MBL27: An application of statistical optimization technique African Journal of Microbiology Research Vol 4(22), pp 2388-2396 Yanchun Zhang, Jingyi Zhou, Lina Pan, Zhiyong Dai, Chengguo Liu, Jiaqi Wang*, Hui Zhou (2019) Production of Bacteriocin-like Substances by Bacillus Spp.JY-1 in Soy Whey Advances in Biochemistry 2019; 7(3): 6570 Logan, N.A and De Vos, P (2009) Bacillus In Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, 2nd edn ed De Vos, P., Garrity, G.M., Jones, D., Krieg, N.R., Ludwig, W., Rainey, F.R., Schleifer, K.‐H and Whitman, W.B pp 21–128 New York: Springer Logan, N.A and Halket, G (2011) Developments in the taxonomy of the aerobic, endospore‐forming bacteria In Aerobic, Endospore‐forming Soil Bacteria ed Logan, N.A and De Vos, P pp 1–29 Berlin: Springer‐Verlag Logan, N.A., Berge, O., Bishop, A.H., Busse, H.‐J., De Vos, P., Fritze, D., Heyndrickx, M., Kämpfer, P et al (2009) Proposed minimal standards for describing new taxa of aerobic, endospore‐forming bacteria Int J Syst Evol Microbiol 59, 2114–2121 Logan, N.A., Hoffmaster, A., Shadomy, S.V and Stauffer, K (2011) Bacillus and related genera In Manual of Clinical Microbiology ed Versalovic, J., Carroll, K.C., Funke, G., Jorgensen, J.H., Landry, M.L and Warnock, D.W., 10th, edn, Vol 1, pp 381–402 Washington D C: American Society for Microbiology 35 10 Abdel-Tawwab M, Abdel-Rahman AM, Ismael NE (2008) Evaluation of commercial live bakers’ yeast, Saccharomyces cerevisiae as a growth and immunity promoter for Fry Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.) challenged in situ with Aeromonas hydrophila Aquaculture 280:185–189 11 Cipriano RC, Bullock GL, Pyle SW (1984) Aeromonas hydrophila and motile aeromonad septicemias of fish 12 Beaz-Hidalgo R, Figueras MJ (2013) Aeromonas spp whole genomes and virulence factors implicated in fish disease J Fish Dis 36:371–388 13 Janda JM, Abbott SL (2010) The genus Aeromonas: taxonomy, pathogenicity, and infection Clin Microbiol Rev 23:35–73 14 Cahill, M M (1990) Virulence factors in motile Aeromonas species J Appl Bacteriol 69, 1–16 15 Garrity, G., Staley, J T., Boone, D R., De Vos, P., Goodfellow, M., Rainey, F A., et al (2006) Bergey’s Manual® of Systematic Bacteriology: The Proteobacteria, Vol Berlin: Springer Science & Business Media 16 Grim, C J., Kozlova, E V., Ponnusamy, D., Fitts, E C., Sha, J., Kirtley, M L., et al (2014) Functional genomic characterization of virulence factors from necrotizing fasciitis-causing strains of Aeromonas hydrophila Appl Environ Microbiol 80, 4162–4183 17 Beaz-Hidalgo, R., Hossain, M J., Liles, M R., and Figueras, M J (2015) Strategies to avoid wrongly labelled genomes using as example the detected wrong taxonomic affiliation for Aeromonas genomes in the genbank database 18 Colston, S M., Fullmer, M S., Beka, L., Lamy, B., Gogarten, J P., and Graf, J (2014) Bioinformatic genome comparisons for taxonomic and phylogenetic assignments using Aeromonas as a test case 19 Huys, G., Kampfer, P., Albert, M J., Kuhn, I., Denys, R., and Swings, J (2002) Aeromonas hydrophila subsp dhakensis subsp nov., isolated from children with diarrhoea in Bangladesh, and extended description of Aeromonas hydrophila subsp hydrophila (Chester 1901) Stanier 1943 (approved lists 1980) Int J Syst Evol Microbiol 52, 705–712 20 Allan, B J., and Stevenson, R M (1981) Extracellular virulence factors of Aeromonas hydrophila in fish infections Can J Microbiol 27, 1114– 1122 21 Dong J., Zhang L., Liu Y., Xu N., Zhou S., Yang Y., Yang Q & Ai X (2021) Luteolin decreases the pathogenicity of Aeromonas hydrophila via inhibiting the activity of aerolysin Virulence 12(1): 165-176 22 Zacharof M & Lovitt R (2012) Bacteriocins produced by lactic acid bacteria a review article Apcbee Procedia 2: 50-56 36 23 Cleveland J, Montville TJ, Nes IF & Chikindas ML (2001) Bacteriocins: safe, natural antimicrobials for food preservation Int J Food Microbiol 71: 1–20 24 Alisky, J., Iczkowski, K., Rapoport, A., & Troitsky, N (1998) Bacteriophages show promise as antimicrobial agents Journal of Infection, 36, 5-15 25 Barton, M D., & Hart, W S (2001) Public health risks: antibiotic resistance e Review.Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 14, 414-422 26 Levin, B R., Antia, R., Berliner, E., Bloland, P., Bonhoeffer, S., & Cohen, M (1998) Resistance to antimicrobial chemotherapy: a prescription for research and action American Journal of the Medical Sciences, 315, 87-94 27 Knowles, D J C (1997) New strategies for antibacterial drug design Trends in Microbiology, 5, 379-383 28 Van Houten, M A., Luinge, K., Laseur, M., & Kimpen, J L (1998) Antibiotic utilisation for hospitalised paediatric patients International Journal of Antimicrobial Agents,10, 161-164 29 Wester, C W., Durairaj, L., Evans, A T., Schwartz, D N., Husain, S., & Martinez, E (2002) Antibiotic resistance e a survey of physician perceptions Archives of Internal Medicine, 162, 2210-2216 30 Mcmanus, P S., Stockwell, V O., Sundin, G W., & Jones, A L (2002) Antibiotic use in plant agriculture Annual Review of Phytopathology, 40, 443-465 31 Sherley, M., Gordon, D M., & Collignon, P J (2000) Variations in antibiotic resistance profile in Enterobacteriaceae isolated from wild Australian mammals Environmental Microbiology, 2, 620-631 32 Macfarlane, G T., & Cummings, J H (2002) Probiotics, infection and immunity Current Opinion in Infectious Diseases, 15, 501-506 33 Joerger, R D (2003) Alternatives to antibiotics: bacteriocins, antimicrobial peptides and bacteriophages Poultry Science, 82, 640-647 34 Twomey, D., Ross, R P., Ryan, M., Meaney, B., & Hill, C (2002) Lantibiotics produced by lactic acid bacteria: structure, function and applications Antonie Van Leeuwenhoek, 82, 165-185 35 Lien, S., & Lowman, H B (2003) Therapeutic peptides Trends in Biotechnology, 21,556-562 36 Duquesne, S., Destoumieux-Garzón, D., Peduzzi, J., & Rebuffat, S (2007) Microcins, gene-encoded antibacterial peptides from enterobacteria Natural Product Reports, 24, 708-734 37 37 Pons, A M., Lanneluc, I., Cottenceau, G., & Sable, S (2002) New developments in non-post translationally modified microcins Biochimie, 84, 531-537 38 Fernández, L., Delgado, S., Herrero, H., Maldonado, A., & Rodríguez, J M (2008) The bacteriocin nisin, as effective agent for the treatment of Staphylococcal mastitis during lactation Journal of Human Lactation, 24, 311-316 39 da Silva-Malheiros, P., Daroit, D J., da Silveira, N P., & Brandelli, A (2010) Effect of nanovesicle-encapsulated nisin on growth of Listeria monocytogenes in milk Food Microbiology, 27, 175-178 40 Naghmouchi, K., Le Lay, C., Baah, J., & Drider, D (2012) Antibiotic and antimicrobial peptide combinations: synergistic inhibition of Pseudomonas fluorescens and antibiotic-resistant variants Research in Microbiology 41 Ishibashi, N., & Yamazaki, S (2001) Probiotics and safety American Journal of Clinical Nutrition, 73, 465-470 42 Gallemore, G H., Mohon, R T., & Ferguson, D A (1995) Lactobacillus fermentum endocarditis involving a native mitral valve Journal of the Tennessee Medical Association, 88, 306-308 43 Brahimi, M., Mathern, P., Fascia, P., Afchain, J M., & Lucht, F (2008) Two cases of Lactobacillus rhamnosus infection and panctreatitis Médecine et Maladies Infectieuses, 38, 29-31 44 Taneja, N., Rani, P., Emmanuel, R., Khudaier, B Y., Sharma, S K., Tewari, R., et al (2005) Nosocomial urinary tract infection due to Leuconostoc mesenteroides at a tertiary care centre in north india Indian Journal of Medical Research, 122, 178-179 45 Songisepp, E., Hütt, P., Rätsep, M., Shkut, E., Kõljalg, S., Truusalu, K., et al (2012) Safety of a probiotic cheese containing Lactobacillus plantarum Tensia according to a variety of health indices in different age groups Journal of Dairy Science, 95, 5495-5509 46 Cunningham-Rundles, S., Ahrne, S., Bengmark, S., Johann-Liang, R., Marshall, F., Metakis, L., et al (2000) Probiotics and immune response American Journal of Gastroenterology, 95, 22-25 47 H D Paik, S S Bae, S H Park & J G Pan (1997) Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology volume 19, pages 294–298 48 D Bizani and A Brandell (2002) Characterization of a bacteriocin produced by a newly isolated Bacillus sp Strain A Journal of Applied Microbiology, 93, 512–519 49 N SHARMA et al (2009) Purification of Bacteriocin by Bacillus subtilis R75, Food Technol Biotechnol 49 (2) 169–176 38 50 Ansari A, Afsheen A, Nadir Naveed S, Samina I, Sha AQ (2014) Bacteriocin (BAC-IB17): Screening, isolation and production from Bacillus subtilis KIBGE IB-17 Pak J Pharm Sci 2012; 25 51 Priyabrata Pattnaik, Sunita Grover, Virender Kumar Batish (2005) Effect of environmental factors on production of lichenin, a chromosomally encoded bacteriocin-like compound produced by Bacillus licheniformis 26L-10/3RA Microbiological Research Volume 160, Issue 2, 25 April 2005, Pages 213218 52 Rowaida Khalil, Yasser Elbahloul, Fatima Djadouni Sanaa Omar(2009) Isolation and Partial Characterization of a Bacteriocin Produced by a Newly Isolated Bacillus megaterium 19 Strain Pakistan Journal of Nutrition (3): 242-250 53 Riley MA &Wertz JE (2002a) Bacteriocin diversity: ecological and evolutionary perspectives Biochimie 84: 357–364 54 Jack RW, Tagg JR & Ray B (1995) Bacteriocins of Gram-positive bacteria Microbiol Rev 59: 171–200 55 Cascales E, Buchanan SK, Duche D, Kleanthous C, Lloubès R, Postle K, Riley M, Slatin S & Cavard D (2007) Colicin biology Microbiol Mol Biol R 71: 158–229 56 O’Sullivan L, Ross RP & Hill C (2002) Potential of bacteriocinproducing lactic acid bacteria for improvements in food safety and quality Biochimie 84: 593–604 57 Chatterjee C, Paul M, Xie L & van der Donk WA (2005) Biosynthesis and mode of action of lantibiotics Chem Rev 105: 633–684 58 Willey JM & van der Donk WA (2007) Lantibiotics: peptides of diverse structure and function Annu Rev Microbiol 61: 477–501 59 Bierbaum G & Sahl H-G (2009) Lantibiotics: mode of action, biosynthesis and bioengineering Curr Pharm Biotechno 10: 2–18 60 Drider D, Fimland G, Héchard Y, McMullen LM & Prévost H (2006) The continuing story of Class IIa bacteriocins Microbiol Mol Biol R 70: 564– 582 61 Klaenhammer TR (1993) Genetics of bacteriocins produced by lactic acid bacteria FEMS Microbiol Rev 12: 39–86 62 Nes IF, Yoon S-S & Diep DB (2007) Ribosomally synthesiszed antimicrobial peptides (bacteriocins) in lactic acid bacteria: a review Food Sci Biotechnol 16: 675–690 63 Şanlıbaba P & Gỹỗer Y (2015) Antimicrobial activity of lactic acid bacteria J Int Sci Publ 3: 451-457 39 64 Kleerebezemab M., Hols P & Hugenholtz J (2000) Lactic acid bacteria as a cell factory: rerouting of carbon metabolism in Lactococcus lactis by metaboli engineering Enzyme and microbial technology 26(9-10): 840848 65 Papagianni M (2012) Metabolic engineering of lactic acid bacteria for the production of industrially important compounds Computational and Structural Biotechnology Journal 3(4): e201210003 66 Ammor S., Tauveron G., Dufour E & Chevallier I (2006) Antibacterial activity of lactic acid bacteria against spoilage and pathogenic bacteria isolated from the same meat small-scale facility: 1—Screening and characterization of the antibacterial compounds Food control 17(6): 454461 67 Al-Omari A W., Matter I R & Almola A H (2022) An overview of Bacteriocins Samarra Journal of Pure and Applied Science 4(2): 58-72 68 Oscáriz J C & Pisabarro A G (2001) Classification and mode of action of membrane-active bacteriocins produced by gram-positive bacteria International Microbiology 4: 13-19 69 Cotter P D., Ross R P & Hill C (2013) Bacteriocins-a viable alternative to antibiotics? Nature Reviews Microbiology 11(2): 95-105 70 Ng Z J., Zarin M A., Lee C K & Tan J S (2020) Application of bacteriocins in food preservation and infectious disease treatment for humans and livestock: A review RSC advances 10(64): 38937-38964 71 Varish Ahmad, Azhar Kamal, Khurshid and Mohd sajid Khan*(2014) Protease characteristics of bacteriocin producing Lysinibacilli, isolated from fruits and vegetable waste Bioinformation 2014; 10(1): 13–18 40 PHỤ LỤC Phụ lục Ảnh hưởng thành phần môi trường đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860  Các nguồn carbon khác 2%  Glucose 1%, 2%, 3%, 4% 41  Cao nấm men 1%, 2%, 3%, 4%  Pepton 1%, 2%, 3%, 4% 42  NaCl 1%, 2%, 3%, 4% Phụ lục Ảnh hưởng số điều kiện ngoại cảnh đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860  pH 43  Nhiệt độ  Thời gian nuôi cấy 44 Phụ lục Ảnh hưởng thành phần môi trường đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp B860  Các nguồn carbon khác Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Nguồn Cacbon Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus Glucose 14.33 ± 0.58 12.67 ± 0.58 Fructose 8.67 ± 0.58 7.33 ± 0.58 Sacarose 11.00 ± 1.00 9.67 ± 0.58 Lactose 12.33 ± 0.58 10.67 ± 0.58  Glucose 1%, 2%, 3%, 4% Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Tỷ lệ glucose Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus Glucose 1% 0.00 0.00 Glucose 2% 13.67 ± 0.58 12.67 ± 0.58 Glucose 3% 12.00 ± 0.00 11.33± 0.58 Glucose 4% 11.33 ± 0.58 11.67 ± 0.58  Cao nấm men (yeast extract) 1%, 2%, 3%, 4% Tỷ lệ cao nấm men Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Staphylococcus Aeromonas hydrophila aureus ĐC 16.33 ± 0.58 16.00 ± 1.00 east extract 1% 8.33 ± 0.58 15.67 ± 0.58 yeast extract 2% 6.33 ± 0.58 9.33 ± 0.58 yeast extract 3% 8.67 ± 0.58 7.33 ± 0.58 yeast extract 4% 15.33 ± 0.58 11.33 ± 0.58 45  Pepton 1%, 2%, 3%, 4% Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus Peptone 1% 14.00 ± 1.00 14.67 ± 0.58 Peptone 2% 13.67 ± 0.58 13.00 ± 1.00 Peptone 3% 12.67 ± 0.58 13.33 ± 0.58 Peptone 4% 12.33 ± 0.58 12.67 ± 0.58 Tỷ lệ peptone  NaCl 1%, 2%, 3%, 4% Tỷ lệ NaCl Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus ĐC 14.67 ± 0.58 13.33 ± 0.58 NaCl 1% 12.67 ± 0.58 9.33 ± 0.58 NaCl 2% 12.00 ± 1.00 9.67 ± 0.58 NaCl 3% 12.33 ± 0.58 10.33 ± 0.58 NaCl 4% 12.67 ± 0.58 11.67 ± 0.58 46 Phụ lục Ảnh hưởng số điều kiện ngoại cảnh đến hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn Bacillus sp.B860  pH Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) pH Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus 4.5 0.00 0.00 5.5 0.00 0.00 6.5 13.67 ± 0.58 12.67 ± 0.58 7.5 12.33 ± 0.58 12.67 ± 0.58 8.5 10.33 ± 0.58 10.67 ± 0.58 9.5 0.00 0.00  Nhiệt độ Nhiệt độ Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Aeromonas hydrophila Staphylococcus aureus 25C 14.33 ± 0.58 13.67 ± 0.58 C 15.00 ± 1.00 14.67 ± 0.58 35C 12.67 ± 0.58 12.33 ± 0.58 C 00.00 00.00  Thời gian ni cấy Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Staphylococcus Thời gian Aeromonas hydrophila aureus ngày 13.00 ± 1.00 13.67 ± 0.58 ngày 10.67 ± 0.58 8.67 ± 0.58 ngày 12.67 ± 0.58 8.33 ± 0.58 ngày 7.33 ± 0.58 7.67 ± 0.58 47