ÑEÀ CÖÔNG NGHIEÂN CÖÙU ỦY BAN NHÂN DÂN TP HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CÔNG TY CỔ PHẦN DƯỢC PHẨM OPC BÁO CÁO NGHIỆM THU NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ TIÊU CHUẨN HÓA SẢN PHẨM CHỨA TINH DẦU CHUẨN HÓA LÁ TRẦU (P[.]
ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CÔNG TY CỔ PHẦN DƯỢC PHẨM OPC BÁO CÁO NGHIỆM THU NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ TIÊU CHUẨN HÓA SẢN PHẨM CHỨA TINH DẦU CHUẨN HÓA LÁ TRẦU (Piper betle L.), HỖ TRỢ ĐIỀU TRỊ BỆNH TAY CHÂN MIỆNG CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI: THS DS HÀ ĐỨC CƯỜNG a TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Đặt vấn đề Cho đến nay, chưa có thuốc đặc trị điều trị bệnh TCM, điều trị triệu chứng Nguồn dược liệu Lá Trầu có sẵn nước, dễ trồng, trồng hay mọc hoang phổ biến khắp lãnh thổ Việt Nam, số quốc gia giới Thực đạo Thường trực Thành ủy TP Hồ Chí Minh thơng báo số 214TB/VPTU ngày 26/10/2012 đạo Ủy ban nhân dân TP Hồ Chí Minh cơng văn số 8812/VP-CNN ngày 06/11/2012 đăng ký đề tài nghiên cứu khoa học “Đặc trưng trị liệu tinh dầu Lá Trầu Hóc Mơn” Do đề tài nghiên cứu sản phẩm chứa tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu để góp phần hỗ trợ điều trị bệnh TCM cần thiết có ý nghĩa thực tiễn Đề tài đề tài liên quan đến Lá Trầu thực theo hợp đồng đặt hàng với Sở Khoa học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh, đề tài cịn lại sau: - Đề tài: “Xây dựng quy trình canh tác Trầu (Piper betle L., họ Hồ tiêu, Piperaceae) theo hướng hữu sinh học địa bàn Huyện Hóc mơn”, Đơn vị Chủ trì: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học TP Hồ Chí Minh, Chủ nhiệm đề tài: Ths Phan Diễm Quỳnh - Đề tài: “Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất tinh dầu Lá Trầu (Piper betle L., họ Hồ tiêu, Piperaceae) phương pháp chưng cất lôi nước quy mô pilot đạt chất lượng làm bất hoạt virus Tay Chân Miệng EV71” Đơn vị chủ trì: Viện Phát triển Cơng nghệ Đào tạo, Chủ nghiệm đề tài: Ts Huỳnh Kỳ Trân - Đề tài “Nghiên cứu tác dụng ức chế virus EV71, kháng viêm, kháng khuẩn độc tính thuốc chứa dịch chiết Lá Trầu thực nghiệm” Đơn vị chủ trì: Cơng ty Cổ phần Dược phẩm OPC, Chủ nhiệm đề tài PGS.Ts Nguyễn Phương Dung Mục tiêu tổng quát đề tài nhằm nghiên cứu cơng thức, xây dựng quy trình sản xuất tiêu chuẩn chất lượng phù hợp để sản xuất sản phẩm chứa tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu Kết sản phẩm đề tài làm sở nghiên cứu dược lý nghiên cứu lâm sàng nhằm đánh giá tính an tồn hiệu sản phẩm việc hổ trợ điều trị bệnh TCM Các câu hỏi nghiên cứu đề tài là: - Để tiện dụng cho đối tượng trẻ em, dạng bào chế dự kiến dạng siro chứa tinh dầu Tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu khơng tan nước, dùng phương pháp hịa tan đặc biệt cách sử dụng chất diện hoạt để giúp hòa tan tinh dầu Lá Trầu vào chất dẫn dung dịch đường nước - Khảo sát cơng thức quy mơ pilot, cỡ lơ lít, chọn công thức phù hợp, tỷ lệ chất diện hoạt lựa chọn siro thuốc bền vững suốt thời gian lưu hành thuốc - Sau nghiên cứu quy trình sản xuất để nâng cỡ lơ lên 400 lít, sản xuất lô dây chuyền Nhà máy OPC tiến hành thẩm định quy trình sản xuất - Sản phẩm theo dõi độ ổn định điều kiện thường phải đạt tiêu theo tiêu chuẩn chất lượng nghiên cứu, đặc biệt thành phần nhóm Phenolic 4-APCD Để trả lời câu hỏi nghiên cứu trên, mục tiêu cụ thể đề tài là: b Xây dựng công thức Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng Xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất Nhà máy OPC Triển khai sản xuất Nhà máy OPC thẩm định quy trình sản xuất Theo dõi độ ổn định sản phẩm Đối tượng nghiên cứu: Nguyên liệu tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu Viện phát triển công nghệ đào tạo TP Hồ Chí Minh cung cấp, với tá dược bao bì sẵn có Cơng ty OPC Việc nghiên cứu pilot sản xuất thử tiến hành Nhà máy OPC Phương pháp nghiên cứu: - Xây dựng công thức: Dựa kinh nghiệm bào chế Siro thuốc chứa hoạt chất tinh dầu Công ty OPC, tiến hành xây dựng công thức, pha chế quy mơ Pilot (cỡ lơ lít) khảo sát tỷ lệ chất diện hoạt phù hợp (đánh giá tiêu: độ nhớt, tỷ trọng dịch thuốc, pH, độ bền dịch thuốc, độ phân tán hàm lượng Phenolic (Chavibetol, Chavibetol acetat 4-APCD)) Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho sản phẩm: Xây dựng tiêu tính chất, thể tích, tỷ trọng 200C, giới hạn Natri benzoat, giới hạn nhiễm khuẩn Riêng tiêu định tính định lượng hàm lượng Phenolic (Chavibetol, Chavibetol acetat 4-APCD) 4-APCD GC/MS hợp tác với Công ty Sắc ký Hải Đăng thực - Xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất Nhà máy OPC: Dựa vào đặc điểm thiết bị Công ty OPC để nâng cấp từ cỡ mẫu Pilot lít lên cỡ lơ sản xuất thử 400 lít, khảo sát điều chỉnh thơng số quy trình sản xuất cho phù hợp - Triển khai sản xuất Nhà máy OPC thẩm định quy trình sản xuất: Triển khai sản xuất lô 001NC, 002NC, 003NC Xưởng sản xuất (cỡ lơ 400 lít) để thẩm định quy trình sản xuất Các thơng số quy trình sản xuất phải đạt u cầu có tính lặp lại - Theo dõi độ ổn định sản phẩm: Sản phẩm lô 001NC, 002NC 003NC theo dõi độ ổn định điều kiện thường Kết kiểm nghiệm mẫu sau sản xuất, sau tháng, sau tháng, sau tháng, sau 12 tháng, sau 18 tháng sau 24 tháng phải đạt tất tiêu theo tiêu chuẩn chất lượng nghiên cứu Kết quả: Công thức phù hợp Tiêu chuẩn chất lượng Quy trình cơng nghệ sản xuất Kết triển khai sản xuất lô kết thẩm định quy trình sản xuất Kết theo dõi độ ổn định sản phẩm Kết luận: Nhóm đề tài hoàn thành nội dung đề tài Từ khóa: Tay – chân – miệng, Lá Trầu, EV71, Siro thuốc c RESEARCH ABSTRACT Introduction: Up till now, there has not been any specialized drug treating Hand Foot and Mouth disease, only those treating symptoms The herbal sources of Betle leaf is nationally available, easy to cultivate, planted or wildly grown throughout Vietnam and some other countries in the world At the behest of Steering Board of Ho Chi Minh City People’s Committee, according to Report No 214-TB/VPTU dated on October 26th, 2012 and that of Ho Chi Minh City People’s Committee, according to Official Correspondence No 8812/VP-CNN dated on November 6th, 2012 on the registration for Science Research Thesis named “Typical therapeutic features of essential oil extracted from Betle leaf cultivated in Hocmon District” Therefore, it is really crucial and practically meaningful to carry out a Research Thesis on a pharmaceutical product containing standardized essential oil extracted from Betle leaf, in an effort to supportively treat Hand Foot and Mouth disease The thesis is one of four dissertations related to Betle leaf conducted based on the contract for goods with Ho Chi Minh City Department of Science and Technology, the left theses are as follow: Thesis: “Building the cultivating process for Piper betle L., Piperaceae following the organic and biologic directions in Hocmon District” Directive Organization: Biological Technology Center of Ho Chi Minh City, Chairman of thesis: Quynh Phan Diem MA Thesis: “Research for building the manufacturing process of essential oil extracted from Betle leaf (Piper betle L., Piperaceae) with the distillation method in pilot scale so that the essential oil conforms to the quality that can inactivate the Hand Foot and Mouth virus EV71” Directive Organization: Institute of Technology Development and Education, Chairman of thesis: Tran Huynh Ky PhD Thesis: “Research on experimental antiviral EV71, anti-inflammatory, anti-bacterial effects and toxicity of the pharmaceutical product containing the essential oil extracted from Betle leaf” Directive Organization: OPC Pharmaceutical Joint-Stock Company, Chairman of thesis: Dung Nguyen Phuong, Asc.Prof.PhD The general objects of this thesis is to find out the adequate formula, build up the suitable product manufacturing process and decent quality standard in order to make a product containing standardized essential oil extracted from Betle leaf The achievement of the thesis will pave the way to Pharmacological and Clinical researches for evaluating the safety and effectiveness of the product in supportively treating Hand Foot and Mouth disease Some research questions of this thesis: - To be convenient for use in children, we are going to choose the syrup preparation Standardized essential oil extracted from Betle leaf is soluble in water; thus, it is possible to use a surfactant to support the solubility of the essential oil into the solvent – the solution of sugar in water d - Examine formula in Pilot scale with the lot size of liters, choose the suitable formula, the concentration of the surfactant for the stability of the syrup during the drug’s shelf life - Afterwards, research to build up the manufacturing process to scale up to the lot size of 400 liters, manufacture lots in the manufacturing chain of OPC Pharmaceutical Manufacturing Plant and carry out the validation of the manufacturing process - The product, after being tested the stability at real-life condition, has to comply with all the specifications in the product standard, especially the two ingredients, Phenolic groups and 4Allylpyrocatechol diacetate In order to answer questions above, we have to accomplish such specific targets as follow: Build up an appropriate formula Build up a decent Product Standard Build up the Technological manufacturing process at OPC Pharmaceutical manufacturing plant Carry out the production at OPC Pharmaceutical Manufacturing Plant and the validation of manufacturing process Investigate the stability of the product Research subjects: The material, standardized essential oil extracted from Betle leaf, is supplied by Technology Developing Institute of Ho Chi Minh City, along with excipients and packages available at OPC Pharmaceutical Joint-Stock Company The research duty in Pilot scale and trial production are conducted at OPC Pharmaceutical Manufacturing Plant Research methods: - The building of formula: based on the experiences of producing medicated syrups containing essential oil of OPC, build up an appropriate formula, prepare the syrup in Pilot scale (with the lot size of liters) and examine the suitable concentration of the surfactant (evaluated through such specifications as: viscosity, density of the product fluid, pH, stability of the product fluid, deviation of phenolic content) - The building of product quality standard: build up such specifications as Appearance, Volume, Density at 200C, Sodium benzoate limitation and Microbes limitation The testing method for the two specifications left, Identification and Assay of Phenolic groups and 4allylpyrocatechol diacetate, are carried out by Hai Dang Chromatography Company with the method of Gas Chromatography/ Mass Spectrophotometry - The building of technological manufacturing process at OPC Pharmaceutical Manufacturing Plant: based on characteristics of the machinery at OPC Pharmaceutical Joint-Stock Company, scale up the lot size from liters to 400 liters, examine and modify the parameters in the manufacturing process to the greatest extent - Carry out the manufacturing process at OPC Pharmaceutical manufacturing plant and the validation of manufacturing process: produce lots, 001NC, 002NC and 003NC, at the manufacturing plant, with the lot size of 400 liters, for the validation of manufacturing e process The parameters of the manufacturing process have to conform to anticipated requirements and are repetitive - The investigation of product stability: the finished products of the lots 001NC, 002NC, 003NC are tested the real-time stability The tested results of the products right after the production and months, months, months, 12 months, 18 months, 24 months afterwards have to comply with all the specifications of the product standard which was researched Results: A suitable formula A decent product standard Technological manufacturing process and The result of the manufacturing process for lots and the report of validation for the manufacturing process The stability testing report of the product Conclusion: The research group has accomplished all the contents of the thesis Key words: Hand Foot and Mouth, Betle leaf, EV71, medicated syrup f MỤC LỤC TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Trang a Danh sách chữ viết tắt Trang h Danh sách hình Trang i Danh sách bảng Trang i Danh sách sơ đồ Trang i Danh sách phụ lục Trang i PHẦN MỞ ĐẦU Trang j CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Trang 1.1- Bệnh TCM Trang 1.1.1- Bệnh TCM Trang 1.1.2- Điều trị Trang 1.1.3- Phòng bệnh Trang 1.2- Dược liệu Lá Trầu Trang 1.2.1- Vùng trồng Trang 1.2.2- Thành phần hóa học Trang 1.2.3- Tác dụng dược lý Trang 1.3- Dạng bào chế Trang 1.4- Hoạt chất tá dược sử dụng Trang 1.4.1- Tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu Trang 1.4.2- Chất diện hoạt X Trang 1.4.3- Caramen Trang CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Trang 2.1- Đối tượng Trang 2.1.1- Nguyên liệu Trang 2.1.2- Trang thiết bị Trang 2.2- Phương pháp nghiên cứu Trang 10 2.2.1- Xây dựng công thức Trang 10 2.2.1.1- Cơng thức (lơ lít) Trang 10 2.2.1.2- Danh mục thiết bị dùng nghiên cứu lơ lít Trang 11 2.2.1.3- Phương pháp pha chế lơ lít Trang 11 2.2.1.4- Thiết kế thí nghiệm Trang 11 2.2.2- Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng Trang 13 2.2.3- Xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất Nhà máy OPC Trang 14 2.2.4- Thẩm định quy trình sản xuất Trang 14 g 2.2.4.1- Triển khai sản xuất Nhà máy OPC Trang 14 2.2.4.2- Thẩm định quy trình sản xuất Trang 14 2.2.5- Theo dõi độ ổn định sản phẩm Trang 14 2.2.5.1- Phương tiện Trang 14 2.2.5.2- Phương pháp Trang 14 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Trang 15 3.1- Kết xây dựng công thức Trang 15 3.2- Kết xây dựng tiêu chuẩn chất lượng Trang 18 3.2.1- Kết giai đoạn Trang 18 3.2.2- Kết giai đoạn Trang 22 3.3- Kết xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất Nhà máy OPC Trang 27 3.3.1- Công thức lô Trang 27 3.3.2- Danh mục thiết bị Trang 27 3.3.3- Mơ tả q trình sản xuất Trang 27 3.3.4- Sơ đồ quy trình sản xuất Trang 29 3.3.5- Kiểm sốt bước trung gian thơng số sản phẩm Trang 30 3.4- Triển khai sản xuất Nhà máy OPC thẩm định quy trình sản xuất Trang 31 3.4.1- Triển khai sản xuất Trang 31 3.4.2- Thẩm định quy trình sản xuất Trang 33 3.4.2.1- Đề cương thẩm định quy trình sản xuất Trang 33 3.4.2.2- Kết thẩm định quy trình sản xuất Trang 37 3.5- Kết theo dõi độ ổn định sản phẩm Trang 41 3.5.1- Đề cương theo dõi độ ổn định sản phẩm Trang 41 3.5.2- Kết theo dõi độ ổn định sản phầm Trang 45 BÀN LUẬN Trang 50 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Trang 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trang 54 h DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT 4-APCD : 4-Allyl Pyrochatechol Diacetat Công ty OPC : Công ty Cổ phần Dược phẩm OPC Công ty sắc ký Hải đăng : Công ty Dịch vụ KHCN Sắc ký Hải Đăng CT : Công thức EV71 : Enterovirus 71 GC/MS : Gas Chromatography/Mass Spectrometry GPs : Bao gồm GMP (Good Manufacturing Practice), GSP (Good Storage Practice) GLP (Good Laboratory Practice), Hàm lượng Phenolic : Gồm Chavibetol, Chavibetol acetat 4-Allyl Pyrochatechol Diacetat HPLC : High Performance Liquid Chromatography Nhà máy OPC : Nhà máy Dược phẩm OPC Bình Dương đạt tiêu chuẩn GPs Phịng Kiểm nghiệm Cơng ty OPC : Phịng Kiểm nghiệm đạt tiêu chuẩn GLP, Cơng ty Cổ phần Dược phẩm OPC RSD : Relative Standard Deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) TCCS : Tiêu chuẩn sở TCM : Tay – Chân – Miệng i DANH SÁCH HÌNH Số TÊN HÌNH TRANG Hình 2.1- Nồi cánh khuấy 200 lít CYH - VN Trang 09 Hình 2.2- Thùng inox cánh khuấy 2500 lít CYH - VN Trang 09 Hình 2.3- Hệ thống chiết chai tự động CYH – VN Trang 10 Hình 3.1- Hình sản phẩm sản xuất Nhà máy OPC Trang 32 Hình 3.2- Hình Nhà máy Dược phẩm OPC Bình Dương Trang 32 DANH SÁCH BẢNG Số TÊN BẢNG TRANG Bảng 2.1 Thiết bị dùng nghiên cứu lơ Lít Trang 07 Bảng 2.2 Thiết bị dùng nghiên cứu lô 400 Lít Trang 08 Bảng 2.3 Các tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm đánh giá Trang 15 Bảng 3.1 Công thức Trang 15 Bảng 3.2 Thành phần công thức khảo sát Trang 16 Bảng 3.3 Kết thăm dị cơng thức Trang 16 Bảng 3.4 Công thức dịch thuốc chọn Trang 18 Bảng 3.5 Cơng thức pha chế lơ 400 lít Trang 27 DANH SÁCH SƠ ĐỒ Số Sơ đồ 3.1 TÊN SƠ ĐỒ Sơ đồ quy trình sản xuất TRANG Trang 29 DANH SÁCH PHỤ LỤC Số Phụ lục TÊN PHỤ LỤC Kết xây dựng quy trình phân tích hồ sơ thẩm định phương TRANG Trang 056 pháp định lượng hàm lượng Phenolic (Chavibetol, Chavibetol acetat 4-APCD) thành phần 4-APCD sản phẩm Công ty Sắc ký Hải Đăng Phụ lục Tiêu chuẩn sản phẩm hồ sơ thẩm định tiêu chuẩn Trang 151 Phụ lục Tiêu chuẩn nhà sản xuất độ ổn định tinh dầu chuẩn hóa Lá Trầu Trang 171 Phụ lục Tiêu chuẩn Caramen Trang 188 Phụ lục Phiếu kiểm nghiệm độ ổn định sản phẩm lô 001NC Trang 191 Phụ lục Phiếu kiểm nghiệm độ ổn định sản phẩm lô 002NC Trang 206 Phụ lục Phiếu kiểm nghiệm độ ổn định sản phẩm lô 003NC Trang 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236