bước đầu xây dựng quy trình chẩn đoán khuếch đại gen her2 trong ung thư vú bằng kỹ thuật real time pcr

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ⸭⸭⸭ LÊ HỒNG PHÚC BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN KHUẾCH ĐẠI GEN HER2 TRONG UNG THƯ VÚ BẰNG KỸ THUẬT REAL TIME PCR LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ⸭⸭⸭ LÊ HỒNG PHÚC BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN KHUẾCH ĐẠI GEN HER2 TRONG UNG THƯ VÚ BẰNG KỸ THUẬT REAL TIME PCR NGÀNH : KHOA HỌC Y SINH (MÔ PHÔI) MÃ SỐ : 8720101 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.BS ĐOÀN THỊ PHƯƠNG THẢO TS.BS BÙI VÕ MINH HỒNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Tồn liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận văn Lê Hồng Phúc i MỤC LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC SƠ ĐỒ, HÌNH vii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Ung thư vú phân loại 1.1.1 Đặc điểm bệnh học ung thư vú 1.1.2 Đặc điểm mô học ung thư vú 1.1.3 Đặc điểm sinh học ung thư vú 1.1.4 Phân loại thể phân tử ung thư vú 11 1.2 Tình hình nghiên cứu khảo sát tình trạng tăng biểu HER2 tình trạng khuếch đại gen HER2 bệnh nhân ung thư vú 12 1.3 Tính cấp thiết tiến hành nghiên cứu 15 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN NGHIÊN CỨU 17 2.1 Thiết kế nghiên cứu: 17 2.2 Đối tượng nghiên cứu: 17 2.3 Quá trình thực hiện: 17 2.4 Thu nhận mẫu: 17 2.5 Các biến số nghiên cứu 18 2.6 Phương pháp thực nghiên cứu 19 2.6.1 Lai huỳnh quang chỗ (FISH) 19 2.6.2 Tách chiết DNA từ mẫu FFPE 20 2.6.3 Giải trình tự Sanger 20 2.6.4 Xây dựng quy trình Real-time PCR 21 2.7 Phương pháp xử lý số liệu 23 2.8 Y đức nghiên cứu 23 ii CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 24 3.1 Kết xây dựng quy trình Real-time PCR 24 3.1.1 Kết kiểm tra mồi PCR gen mục tiêu 24 3.1.2 Kiểm tra sản phẩm khuếch đại với trình tự gen mục tiêu: 25 3.1.3 Kết kiểm tra hiệu suất phản ứng Real-time PCR 29 3.2 Kết kỹ thuật lai huỳnh quang chỗ 30 3.3 Kết đánh giá tình trạng HER2 32 3.3.1 Tổng hợp kết HMMD, FISH Real-time PCR 32 3.3.2 So sánh Real-time PCR FISH nhóm HER2 0-1+ HER2 3+ 35 3.3.3 So sánh Real-time PCR FISH nhóm HER2 2+ 35 3.3.4 So sánh Real-time PCR FISH tất trường hợp nghiên cứu (HER2 0-1, HER2 2+ HER2 3+) 37 3.4 Tình trạng HER2 mối tương quan với biến số nghiên cứu 38 3.4.1 Phân bố nhóm tuổi nghiên cứu 38 3.4.2 Tổng hợp đặc điểm mô bệnh học trường hợp nghiên cứu 39 3.4.3 Tình trạng HER2 dương tính nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 40 3.4.4 Đặc điểm kích thước khối u, độ mô học, kết dấu ấn sinh học tình trạng HER2 41 3.4.5 Mối tương quan đặc điểm mô bệnh học, dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 43 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 45 4.1 Chuẩn hóa quy trình Real-time PCR 45 4.1.1 Sản phẩm PCR 45 4.1.2 Kết kiểm tra hiệu suất phản ứng PCR 45 4.2 Kết lai huỳnh quang chỗ 46 4.3 Độ nhạy độ đặc hiệu Real-time PCR so với FISH 47 4.3.1 Kết Real-time PCR nhóm HER2 0-1+ HER2 3+ 47 4.3.2 Kết Real-time PCR nhóm HER2 2+ 47 iii 4.3.3 Kết Real-time PCR tất trường hợp nghiên cứu 49 4.4 Đặc điểm biến số lâm sàng biến số mô bệnh học nghiên cứu 51 4.4.1 Phân bố nhóm tuổi nghiên cứu 51 4.4.2 Tổng hợp đặc điểm mô bệnh học trường hợp nghiên cứu 51 4.4.3 Tình trạng HER2 dương tính nhóm hóa mô miễn dịch HER2 52 4.4.4 Đặc điểm kích thước khối u, độ mơ học, kết dấu ấn sinh học tình trạng HER2 52 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN 55 CHƯƠNG 6: KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Tiếng Việt Tên đầy đủ HMMD Hóa mơ miễn dịch H&E nhuộm Hematoxylin Eosin UTBM Ung thư biểu mô Tiếng Anh Tên đầy đủ ASCO/CAP American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists Hiệp hội Ung thư Lâm sàng/Hiệp hội Giải phẫu bệnh Hoa Kỳ CEP17 Centromere Enumerator Probe 17 Đoạn dò vùng tâm động nhiễm sắc thể 17 Ct Cycle threshold Chu kỳ ngưỡng ddNTP Dideoxynucleotides ddPCR Droplet digital PCR PCR kỹ thuật số thực theo phương pháp tạo giọt nhũ tương FISH Flourescence in situ hybridization Lai huỳnh quang chỗ NCBI National Center for Biotechnology Information Thư viện Quốc gia Công nghệ Sinh học NST No Special Type Không phải dạng đặc biệt PCR Polymerase Chain Reaction Phản ứng chuỗi polymerase UCSC University of California Santa Cruz Thư viện tin sinh học Đại học California Santa Cruz WHO World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.2 Phân độ mô học theo hệ thống Nottingham Bảng 1.3 Thang điểm Allred đánh giá ER PR Bảng 1.4 Hướng dẫn biện luận kết hóa mơ miễn dịch HER2 Bảng 1.5 Các tiêu chuẩn kết luận HER2 dương tính theo ASCO/CAP 2018 Bảng 1.6 Các thể phân tử ung thư vú theo St Gallen 2015 12 Bảng 2.1 Trình tự đoạn mồi lấy theo tác giả Lih Hillig 22 Bảng 3.1 Kết kiểm tra tin sinh học .24 Bảng 3.2 Bảng kết Ct gen HER2, GAST EIF5B với nồng độ pha loãng tương ứng, thực mẫu BC02 29 Bảng 3.3 Kết hiệu suất phản ứng PCR gen HER2, GAST EIF5B 29 Bảng 3.4 Các trường hợp có kết HER2/CEP17 ≥ HER2/tế bào ≥ 30 Bảng 3.5 Kết HMMD, FISH, tình trạng HER2 Real-time PCR .33 Bảng 3.6 Kết Real-time PCR mẫu có HMMD HER2 0-1+ 3+ .35 Bảng 3.7 Kết Real-time PCR FISH nhóm HMMD HER2 2+ .35 Bảng 3.8 Kết Real-time PCR tình trạng khuếch đại gen HER2 tất nhóm HMMD 37 Bảng 3.9 Phân bố nhóm tuổi trường hợp ung thư vú .38 Bảng 3.10 Đặc điểm mô bệnh học trường hợp ung thư vú 39 Bảng 3.11 Phân bố trường hợp có tình trạng HER2 dương tính theo kết hóa mơ miễn dịch 40 Bảng 3.12 Bảng tổng hợp đặc điểm mô bệnh học, dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 trường hợp nghiên cứu 41 Bảng 3.13 Mối tương quan đặc điểm mô bệnh học với dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 43 Bảng 3.14 Mối tương quan dấu ấn miễn dịch tình trạng HER2 44 Bảng 4.1 Kết độ nhạy độ đặc hiệu Real-time PCR so với FISH nhóm HER2 2+, so sánh với công bố trước 48 vi Bảng 4.2 Kết độ nhay độ đặc hiệu Real-time PCR so với FISH tất nhóm HMMD (0-3+), so sánh với nghiên cứu trước 49 Bảng 4.3 Bảng so sánh tỉ lệ tình trạng HER2 dương tính phân nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 2+ .52 Bảng 4.4 Bảng so sánh kết ER, PR HER2 dương tính số nghiên cứu nước62 53 vii DANH MỤC SƠ ĐỒ, HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh minh họa độ mơ học theo Nottingham Hình 1.2 Hình ảnh nhuộm hóa mơ miễn dịch, dùng kháng thể Mib-1 xác định tình trạng Ki-67 .6 Hình 1.3 Hình minh họa kết hóa mơ miễn dịch HER2 từ đến 3+ (Dako Herceptest) .7 Hình 1.4 Bốn thụ thể ErbB với tên gọi phối tử liên quan Hình 1.5 Ba đường tín hiệu nội bào chịu tác động thụ thể ErbB: MAPK, PI3K/Akt PKC (protein kinase C) Hình 1.6 Các tác động Trastuzumab lên tế bào ung thư vú 11 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 17 Hình 3.1 Kết điện di kiểm tra nhiệt độ bắt cặp mồi 25 Hình 3.2 Kết giải trình tự gen HER2 vị trí bắt cặp probe .26 Hình 3.3 Kết giải trình tự gen GAST vị trí bắt cặp probe 27 Hình 3.4 Kết giải trình tự gen EIF5B vị trí bắt cặp probe 28 Hình 3.5 Hình ảnh nhân tế bào trường hợp BC36 thực FISH 31 Hình 3.6 Hình ảnh nhân tế bào trường hợp BC49 thực FISH 31 Hình 3.7 Hình ảnh nhân tế bào trường hợp BC25 thực FISH 32 Hình 3.8 Hình ảnh nhân tế bào trường hợp BC32 thực FISH 32 Hình 3.9 Phân tán đồ HER2/CEP17 RHER2/GAST nhóm HER2 2+ 36 Hình 3.10 Phân tán đồ HER2/CEP17 RHER2/EIF5B nhóm HER2 2+ 36 Hình 3.11 Phân tán đồ hai biến số số HER2 trung bình tế bào RHER2/EIF5B nhóm HER2 2+ 37 50 số lượng phần HER2 3+ chiếm phần lớn nghiên cứu 40,41,45,56 Cùng sử dụng hóa chất LightCycler-HER-2/neu DNA Quantification kit tác giả Gjerdrum, tác giả Egervari thu nhận 95 mẫu ung thư vú (trong nghiên cứu 44 mẫu HER2 2+) tiến hành Real-time PCR ghi nhận độ nhạy độ đặc hiệu chung tất nhóm hóa mơ miễn dịch 82,35% 85,48% Tác giả Tvrdik công bố độ nhạy độ đặc hiểu Real-time PCR so với FISH đạt 100% sử dụng gen chứng GAST Tuy nhiên, xem lại thông tin mẫu, nghiên cứu bao gồm 11 trường hợp ung thư vú, có trường hợp HER2 2+ 41 Như vậy, nghiên cứu sử dụng gen chứng GAST, nghiên cứu chúng tơi có kết gần phù hợp với tác giả Evervari, nhiên cần phải cải thiện độ nhạy cặp gen HER2/GAST Hai nghiên cứu cịn lại có độ nhạy độ đặc hiệu cao, số trường hợp HER2 2+ q nên khơng phản ánh xác giá trị xét nghiệm Real-time PCR khảo sát khuếch đại gen HER2 Tantiwetrueangdet báo cáo độ nhạy độ đặc hiệu nghiên cứu cặp gen HER2/EIF2C1 sử dụng ddPCR so sánh với FISH 90% 85,71% Nghiên cứu có tổng cộng 31 trường hợp ung thư vú, bị khuyết thơng tin hóa mơ miễn dịch HER2 nhiều trường hợp, khảo sát trường hợp HER2 0-1+ trường hợp HER2 3+ nghiên cứu này, độ nhạy độ đặc hiệu cặp gen HER2/EIF2C1 đạt 100% Qua nghiên cứu mình, tác giả Tantiwetrueangdet cung cấp chứng hiệu việc sử dụng kỹ thuật ddPCR sử dụng gen chứng EIF2C1 cho việc khảo sát khuếch đại gen HER245 Tác giả Olsson ghi nhận độ nhạy sử dụng gen chứng APP lên đến 98% độ nhạy 83%, nghiên cứu sử dụng điểm cắt tỉ lệ HER2/APP ≥ 1,6 có khuếch đại gen HER2 Nếu dựa theo liệu công bố nghiên cứu, chọn điểm cắt HER2/APP ≥ cho kết độ nhạy đặc hiệu Real-time PCR 75% 93% 43 Tác giả Koudelakova năm 2015 sử dụng nhiều gen chứng khác GCS1, DCK, EPN2 ghép thành nhiều cặp tỉ lệ so sánh với gen HER2 Độ đặc hiệu tất gen chứng 51 cao đạt 96,3-100% Độ đặc hiệu thay đổi tỉ lệ thuận với số gen chứng phân tích, dao động từ 74,3-90,4% sử dụng gen chứng, đến cặp gen chứng có độ nhạy cao 93,2% “HER2/GCS1 + HER2/EPN2”57 Nghiên cứu không cung cấp số liệu cụ thể kết Real-time PCR phân nhóm hóa mơ miễn dịch, nhìn chung khẳng vai trò việc sử dụng nhiều gen chứng khác đánh giá tình trạng khuếch dại gen HER2 4.4 Đặc điểm biến số lâm sàng biến số mô bệnh học nghiên cứu 4.4.1 Phân bố nhóm tuổi nghiên cứu Độ tuổi trung bình tương đồng với độ tuổi trung bình mắc ung thư vú số báo cáo nước12,58,59, với ba nhóm tuổi có tỉ lệ mắc bệnh cao tăng dần từ 40 tuổi trở lên Độ tuổi trung bình mắc bệnh số nước Châu Âu Hoa Kỳ khoảng 62 tuổi, cho thấy nhóm tuổi 50 Việt Nam có nguy mắc ung thư vú cao 58,60,61 4.4.2 Tổng hợp đặc điểm mô bệnh học trường hợp nghiên cứu Các trường hợp có kích thước khối u từ 2-5 cm chiếm đa số, tương đồng với phân bố chung trường hợp ung thư vú nghiên cứu tác giả Nguyễn Phương Thảo Tiên Tác giả đồng thời ghi nhận khác biệt dân số Ý, tỉ lệ khối u có kích thước nhỏ cm chiếm gần 2/3 ca ung thư vú 58, tác giả Adedayo ghi nhận Hoa Kỳ nhóm khối u có kích thước nhỏ cm chiếm đa số Ở nhóm khối u có kích thước lớn cm, tỉ lệ ghi nhận nghiên cứu 9,68%, tương đồng với số báo cáo nước với tỉ lệ khoảng 10% Xét nhóm bệnh ung thư vú nước, tỉ lệ phát khối u lớn cm chiếm tỉ lệ thấp hơn, ghi nhận 5% tất trường hợp ung thư vú58,60,61 Tỉ lệ Carcinoma ống tuyến vú tương đồng với báo cáo nước (93,2%) Ý (84,7%) Trong nghiên cứu tác giả Nguyễn Phương Thảo Tiên ghi nhận tỉ lệ nhóm mơ học độ độ chiếm phần lớn với tỉ lệ 43,2% 44,3%; nhóm dân số Ý, độ mô học chiếm đa số đến 56,6%, độ chiếm 13,6% 14,5% khác biệt mơ hình bệnh tật đặc thù hai quốc gia Trong 41 trường hợp 52 nghiên cứu, ghi nhận đến 68,29% trường hợp độ mơ học 2, ngun nhân việc lựa chọn mẫu đầu vào nhóm HER2 2+ 4.4.3 Tình trạng HER2 dương tính nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 Bảng 4.3 Bảng so sánh tỉ lệ tình trạng HER2 dương tính phân nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 2+ HER2 HER2 HER2 0-1+ 2+ 3+ 0% 19,36% 100% Press37 10% 52% 97% Thái Anh Tú13 1,12% 41,18% 92,86% Nghiên cứu 41 trường hợp nghiên cứu Nhìn chung, tỉ lệ HER2 dương tính nhóm HER2 3+ chiếm tỉ lệ cao nghiên cứu, tỉ lệ HER2 dương tính nhóm HER2 0-1+ chiếm tỉ lệ thấp Có khác biệt tỉ lệ HER2 dương tính nhóm HER2 nghiên cứu so với nghiên cứu trước Trong hai nghiên cứu trước chưa ghi nhận biến số số trung bình gen HER2 tế bào, khác biết số thay đổi tiêu chí chẩn đốn HER2 dương tính theo ASCO/CAP 2018 so với năm 2013 tỉ lệ HER2/CEP17 ≥ số HER2 trung bình tế bào < trường hợp tỉ lệ HER2/CEP17 < số HER2 trung bình tế bào ≥ 4.4.4 Đặc điểm kích thước khối u, độ mơ học, kết dấu ấn sinh học tình trạng HER2 Nghiên cứu chúng tơi ghi nhận tỉ lệ HER2 dương tính nhóm UTBM xâm nhập dạng NST 39,73%, kết chưa công bố Việt Nam Nghiên cứu ghi nhận tương quan ER với hai yếu tố kích thước khối u (p = 0,001) độ mô học khối u (p = 0,019), mối tương quan ngược, tình trạng ER dương tính tương quản với tiên lượng tốt khối u nên kích thước khối 53 u thường nhỏ độ mô học cho kết biệt hóa tốt Chúng tơi ghi nhận tương quan thuận dấu ấn phân bào Ki-67 độ mô học khối u (p = 0,002), điều lý giải tăng sinh mạnh khối u có độ mơ học cao Bảng 4.4 Bảng so sánh kết ER, PR HER2 dương tính số nghiên cứu nước62 Tỉ lệ Tác giả Tỉ lệ ER (+) Tỉ lệ PR (+) Trong 41 trường hợp 82,93% 68,29% 26,83% Lê Quốc Sử 49,7% 42,7% 29,0% Tạ Văn Tờ 59,1% 51,4% 35,1% Trần Hịa 48,7% 51,3% 29,8% Đặng Cơng Thuận 44,3% 46,3% 32,7% 49,7% 46,4% 28,8% HER2 dương tính nghiên cứu Nguyễn Sào Trung Tỉ lệ HER2 dương tính nghiên cứu tương đồng với báo cáo trước nước Tỉ lệ ER, PR nghiên cứu cao báo cáo trước, việc lựa chọn mẫu đầu vào ưu tiên số lượng nhóm HER2 2+ để khảo sát tình trạng gen HER2 Nghiên cứu 41 mẫu ung thư vú ghi nhận tương quan ER với kích thước độ mơ học thêm tương quan Ki-67 độ mô học Nghiên cứu năm 2022 tác giả Nguyễn Phương Thảo Tiên ghi nhận dân số Việt Nam tương đồng tình trạng HER2 với ba yếu tố tiên lượng: Độ mô học (p < 0,001), ER (p < 0,001) Ki-67 (p = 0,002); dân số Ý ghi nhận tương quan tình trạng HER2 với độ mơ học (p = 0,0035) tình trạng Ki-67 (p < 0,001), ngưỡng cắt Ki-67 nghiên cứu 14%58 Nghiên cứu năm 2017 tác giả Đặng Công Thuận không ghi nhận tương đồng trên, ghi nhận có tương quan mạnh giữa độ mơ học tình trạng HER2 (p = 0,015)63 Nghiên cứu 41 mẫu ung thư vú ghi nhận tương quan mạnh ER PR (p < 0,001), mối tương quan nhiều tác giả đề cập trước đây64,65 Chúng tơi 54 cịn ghi nhận thêm tương quan dấu ấn Ki-67 tình trạng HER2 thực theo hướng dẫn ASCO/CAP 2018 (p = 0.008), nghiên cứu bệnh nhân ung thư vú nước ghi nhận tương quan Ki-67 tình trạng HER258,59 Sự tương quan chưa đề cập nhiều số lượng mẫu HER2 nghiên cứu hạn chế tác giả tập trung đánh giá dấu chung cho tất phân nhóm hóa mô miễn dịch HER2 Nghiên cứu đồng thời ghi nhận hai tương đồng chưa công bố Việt Nam ER với Ki-67 (p = 0,048) ER với tình trạng HER2 (p = 0,047) 55 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN Nghiên cứu bước đầu thành công xây dựng quy trình Real-time PCR đánh giá đồng thời ba gen HER2, GAST EIF5B, qua đánh giá số lượng gen HER2 cung cấp thông tin tình hình HER2 dương tính trường hợp ung thư vú Trong nghiên cứu này, bước đầu thành công việc đánh giá số lượng gen HER2 dựa vào gen chứng GAST nằm nhiễm sắc thể số 17 Độ nhạy độ đặc hiệu kết Real-time PCR cặp gen HER2/GAST so với kỹ thuật FISH tất trường hợp nghiên cứu 73% 87% Tuy nhiên, độ nhạy độ đặc hiệu cặp gen phân nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 2+ đạt 50% 84% Từ cho thấy với số lượng mẫu hạn chế nghiên cứu, cần thực thêm số nghiên cứu với cỡ mẫu lớn nhằm đánh giá tính xác kỹ thuật Real-time PCR Kết Real-time PCR cặp gen HER2/EIF5B có độ nhạy khơng cao trường hợp bao gồm mẫu HER2 3+ (50%), mẫu HER2 2+ (25%) tổng số mẫu nên nhóm nghiên cứu (37,5%) mặc độ đặc hiệu trường hợp tương đối cao với kết 100%, 92% 94,4% Từ kết cho thấy cặp mồi Real-time PCR gen EIF5B chưa phù hợp cho nghiên cứu so sánh kỹ thuật Real-time PCR FISH Vì vậy, nhóm nghiên cứu cần thực thêm nhiều nghiên cứu, bổ sung gen chứng khác để cải tiến quy trình trước đưa kỹ thuật Real-time PCR vào bối cảnh lâm sàng ung thư vú 56 CHƯƠNG 6: KIẾN NGHỊ Cần tiến hành thêm nghiên cứu sử dụng Real-time PCR dòng tế bào ung thư vú biết đặc điểm gen nhằm đưa giá trị tham chiếu phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng sau Cần tiến hành thêm nhiều nghiên cứu sử dụng Real-time PCR với cặp gen HER2/GAST để đưa đánh giá xác vai trị cặp gen HER2/GAST khảo sát tình trạng khuếch đại gen HER2 Cần nghiên cứu thêm nhiều gen chứng khác nằm nhiễm sắc thể số 17 để khảo sát xác số gen HER2 theo tiêu chuẩn ASCO/CAP 2018 có tiêu chí số lượng gen HER2 tế bào ≥ kết luận tình trạng HER2 dương tính nhóm hóa mơ miễn dịch HER2 2+ TÀI LIỆU THAM KHẢO Siegel R, Miller, K., and Jemal, A Cancer statistics, 2020 CA: A Cancer journal for Clinicians 2020;70(1):7-30 World Health Organization GLOBOCAN 2020, World 2020; WHO Globocan 2020, Vietnam 2020; Trieu PD, Mello-Thoms C, Brennan PC Female breast cancer in Vietnam: a comparison across Asian specific regions Cancer Biol Med Sep 2015;12(3):238-45 doi:10.7497/j.issn.2095-3941.2015.0034 Roses AD Pharmacogenetics and drug development: the path to safer and more effective drugs Nature Reviews Genetics 2004;5:645-656 Ménard S Biologic and therapeutic role of HER2 in cancer Oncogene 2003;22:pages6570–6578 Slamon DJ Use of Chemotherapy plus a Monoclonal Antibody against HER2 for Metastatic Breast Cancer That Overexpresses HER2 N Engl J Med 2001;344:783-792 King CR KM, Aaronson SA, Amplification of a novel v-erbB-related gene in a human mammary carcinoma Science 1985;229(4717):974-976 Wolff AC Human Epidermal Growth Factor Receptor Testing in Breast Cancer Journal of Clinical Oncology and Archives of Pathology & Laboratory Medicine 2018;142:13641382 10 Đoàn Thị Phương Thảo HTNH, Phan Đặng Anh Thư, Nguyễn Thị Hồng Nguyệt, Lý Thanh Thiện, Đặng Hoàng Minh, So sánh phương pháp hóa mơ miễm dịch lai chỗ huỳnh quang đánh giá HER2 ung thư vú Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh 2011;15(4):174-181 11 Đoàn Thị Phương Thảo Đánh giá HER2 ung thư vú phương pháp lai chỗ gắn bạc Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh 2013;17(3):76-82 12 Đặng Công Thuận LTL, Nguyễn Trần Bảo Song, Phan Thị Thu Thủy, Trần Nam Đông, Lê Thị Thu Thảo, Ngơ Cao Sách, Trần Thị Hồng Liên, Võ Thị Hồng Vân, Nghiên cứu tình trạng HER2 mối liên quan với số yếu tố tiên lượng ung thư biểu mơ tuyến vú xâm nhập Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế Tháng 8/2018 2018;8(4):13-22 doi:10.34071/jmp.2018.4.2 13 Thái Anh Tú Đánh giá hóa mơ miễn dịch lai huỳnh quang chỗ xác định trình trạng HER2 ung thư vú xếp dãy mơ Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh 2010;14(4):712-719 14 Lakhani SR WHO Classification of Tumours of the Breast International Agency for Research on Cancer 2012; 15 Elston CW, Ellis IO Pathological prognostic factors in breast cancer I The value of histological grade in breast cancer: experience from a large study with long-term followup Histopathology Nov 1991;19(5):403-410 doi:10.1111/j.1365-2559.1991.tb00229.x 16 Rakha EA, El-Sayed ME, Lee AH, et al Prognostic significance of Nottingham histologic grade in invasive breast carcinoma Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology Jul 2008;26(19):3153-3158 doi:10.1200/jco.2007.15.5986 17 Rakha EA, Reis-Filho JS, Baehner F, et al Breast cancer prognostic classification in the molecular era: the role of histological grade Breast Cancer Research 2010/07/30 2010;12(4):207 doi:10.1186/bcr2607 18 Donegan W.L SJS Donegan W.L SJS, eds Cancer of the breast Elsevier Science,; 2002 19 Allred DC BM, Daniel CO, et al Immunocytochemical analysis of esstrogen receptors in human breast carcinomas Evaluation of 130 cases and review of the literature regarding concordance with biochemical assay and clinical relevance Arch Surg 1990;125(1):107113 doi:10.1001/archsurg.1990.01410130113018 20 Urruticoechea A, Smith IE, Dowsett M Proliferation marker Ki-67 in early breast cancer Journal of clinical oncology : official journal of the American Society of Clinical Oncology Oct 2005;23(28):7212-7220 doi:10.1200/jco.2005.07.501 21 van Dierendonck JH, Keijzer R, van de Velde CJ, Cornelisse CJ Nuclear distribution of the Ki-67 antigen during the cell cycle: comparison with growth fraction in human breast cancer cells Cancer research Jun 1989;49(11):2999-3006 22 Zhang H ErbB receptors: from oncogenes to targeted cancer therapies J Clin Invest 2007;117(8):2051 - 2058 23 Yarden Y S Untangling the ErbB signalling network Nat Rev Mol Cell Biol 2001;2:127 - 137 24 Roy V Beyond Trastuzumab: Small Molecule Tyrosine Kinase Inhibitors in HER-2– Positive Breast Cancer The Oncologist 2009;14:1061 - 1069 25 Iqbal N Human Epidermal Growth Factor Receptor (HER2) in Cancers: Overexpression and Therapeutic Implications Molecular Biology International 2014;2014:852748 doi:doi:10.1155/2014/852748 26 Rubin The basic biology of HER2 Annals of Oncology 2001;12 27 Harari Molecular mechanisms underlying ErbB2/HER2 action in breast cancer Oncogene 2000;19(53):6102 - 6114 28 Sorkin Endocytosis and intracellular trafficking of ErbBs Exp Cell Res 2009;315(4):683 - 696 29 Bunz F Bunz F, eds Principles of Cancer Genetics Springer; 2016 30 Joensuu H, Kellokumpu-Lehtinen P-L, Bono P, et al Adjuvant Docetaxel or Vinorelbine with or without Trastuzumab for Breast Cancer New England Journal of Medicine 2006;354(8):809-820 doi:10.1056/NEJMoa053028 31 Romond EH, Perez EA, Bryant J, et al Trastuzumab plus Adjuvant Chemotherapy for Operable HER2-Positive Breast Cancer New England Journal of Medicine 2005;353(16):1673-1684 doi:10.1056/NEJMoa052122 32 Piccart-Gebhart MJ, Procter M, Leyland-Jones B, et al Trastuzumab after Adjuvant Chemotherapy in HER2-Positive Breast Cancer New England Journal of Medicine 2005;353(16):1659-1672 doi:10.1056/NEJMoa052306 33 Hudis CA Trastuzumab — Mechanism of Action and Use in Clinical Practice New England Journal of Medicine 2007;357(1):39-51 doi:10.1056/NEJMra043186 34 Capelan M, Pugliano L, E DA, al e Pertuzumab: new hope for patients with HER2positive breast cancer Annals of Oncology 2013/02/01/ 2013;24(2):273-282 doi:https://doi.org/10.1093/annonc/mds328 35 Coates Tailoring therapies—improving the management of early breast cancer: St Gallen International Expert Consensus on the Primary Therapy of Early Breast Cancer 2015 Annals of Oncology 2015;26:1533 - 1546 36 Bộ Y tế Hướng dẫn chẩn đoán điều trị ung thư vú 17/07/2020 2020; 37 Press MF HER-2 Gene Amplification, HER-2 and Epidermal Growth Factor Receptor mRNA and Protein Expression, and Lapatinib Efficacy in Women with Metastatic Breast Cancer Clin Cancer Res 2008;14:7861-7870 38 Wolff AC American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guideline recommendations for human epidermal growth factor receptor testing in breast cancer Arch Pathol Lab Med 2007;131:18-43 39 Wolff AC Recommendations for human epidermal growth factor receptor testing in breast cancer: American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists clinical practice guideline update J Clin Oncol 2013;31:3997-4013 40 Gjerdrum LM Real-time quantitative PCR of microdissected paraffin-embedded breast carcinoma: an alternative method for HER-2/neu analysis J Mol Diagn 2004;6:42-51 41 Tvrdík Comparison of the IHC, FISH, SISH and qPCR methods for the molecular diagnosis of breast cancer Molecular Medicine Reports 2012;6(2):439-443 42 Shandiz FH Fluorescent in Situ Hybridization and Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction to Evaluate HER-2/neu Status in Breast Cancer Iran J Pathol 2017;12(1):67-73 43 Olsson Methods for evaluating HER2 status in breast cancer: comparison of IHC, FISH, and real-time PCR analysis of formalin-fixed paraffin embedded tissue Pathology and Laboratory Medicine International 2013;2013(5) 44 Sahlberg KK The HER2 amplicon includes several genes required for the growth and survival of HER2 positive breast cancer cells Molecular Oncology 2013;7:392-401 45 Tantiwetrueangdet A Droplet digital PCR using HER2/EIF2C1 ratio for detection of HER2 amplification in breast cancer tissues Medical Oncology 2018;35(12):149 doi:doi:10.1007/s12032-018-1210-8 46 Đồn Thị Phương Thảo Đánh giá tình trạng HER2 bệnh nhân ung thư vú phương pháp lai chỗ gắn huỳnh quang (FISH): Kỹ thuật giải thích kết Tạp chí Y học TPHCM NĂM 2009;13(3):24-32 47 Chariyalertsak S HER-2/neu amplification determined by real-time quantitative PCR and its association with clinical outcome of breast cancer in Thailand Asian Pac J Cancer Prev 2011;12:1703-1706 48 Hillig T Assessing HER2 amplification by IHC, FISH, and real-time polymerase chain reaction analysis (real-time PCR) following LCM in formalin-fixed paraffin embedded tissue from 40 women with ovarian cancer APMIS 2012;120(12):1000 - 1007 49 Brunelli M, Nottegar A, Bogina G, et al Monosomy of chromosome 17 in breast cancer during interpretation of HER2 gene amplifcation Am J Cancer Res 2015;5(7):2212-2221 50 Vranic S Assessment of HER2 Gene Status in Breast Carcinomas With Polysomy of Chromosome 17 Cancer Biol Med 2011;117(1):48-53 doi:doi:10.1002/cncr.25580 51 Lih C-J Certified DNA Reference Materials to Compare HER2 Gene Amplification Measurements Using Next-Generation Sequencing Methods The Journal of Molecular Diagnostics 2016;5:753-761 doi:doi:10.1016/j.jmoldx.2016.05.008 52 Pfaffl MW Relative Quantification eds Pfaffl MW Real-time PCR 1st Taylor & Francis Group; 2006 53 David G Hicks SCL Carcinomas David G Hicks SCL, eds Diagnostic pathology Breast Elsevier; 2016 54 Bio-Rad Laboratories Real-Time PCR Applications Guide 2006 55 Wang Y, Tsang JYS, Cui Y, et al Robust and accurate digital measurement for HER2 amplification in HER2 equivocal breast cancer diagnosis Scientific Reports 2017/07/28 2017;7(1):6752 doi:10.1038/s41598-017-07176-x 56 Egervari K An alternative and reliable real-time quantitative PCR method to determine HER2/neu amplification in breast cancer Appl Immunohistochem Mol Morphol 2009;17(1533-4058 (Electronic))(3):247-254 57 Koudelakova V Evaluation of HER2 Gene Status in Breast Cancer Samples with Indeterminate Fluorescence in Situ Hybridization by Quantitative Real-Time PCR The Journal of Molecular Diagnostics 2015;17(1943-7811 (Electronic))(4):446-455 58 Nguyen TTP Comparative Study on Clinicopathological Characteristics of Breast Cancer in Vietnam and Italy 2022-09-20 2022;49(9):204 doi:10.31083/j.ceog4909204 59 Dang TC Correlation between HER2 Expression and Clinicopathological Features of Breast Cancer: A Cross- Sectional Study in Vietnam Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 2020;21(4):1135-1142 doi:10.31557/apjcp.2020.21.4.1135 60 Spitale A, Mazzola P, Soldini D, Mazzucchelli L, Bordoni A Breast cancer classification according to immunohistochemical markers: clinicopathologic features and short-term survival analysis in a population-based study from the South of Switzerland Annals of Oncology 2009/04/01/ 2009;20(4):628-635 doi:https://doi.org/10.1093/annonc/mdn675 61 Onitilo AA, Engel Jm Fau - Greenlee RT, Greenlee Rt Fau - Mukesh BN, Mukesh BN Breast cancer subtypes based on ER/PR and Her2 expression: comparison of clinicopathologic features and survival (1554-6179) 62 Đặng Cơng Thuận Hóa mơ miễn dịch ung thư vú Tạp chí Phụ Sản 2012;10(3):7483 63 Đặng Công Thuận, Phan Thị Thu Thủy, Trần Nam Đông, Ngô Cao Sách, Võ Thị Hồng Vân Nghiên cứu mối liên quan số yếu tố tiên lượng kinh điển với tình trạng thụ thể nội tiết, Ki-67 HER2 ung thư vú xâm nhập Tạp chí Y Dược học 2017;7(1):70-76 64 Nguyễn Phúc Duy Quang Nghiên cứu bộc lộ thụ thể ER, PR, HER2 nồng đọ CA153 ung thư biểu mô tuyến vú xâm nhập Luận án Thạc sĩ Y học Đại Học Y Dược Huế; 2012 65 Đặng Công Thuận Ứng dụng số Nottingham số yếu tố khác phân nhóm tiên lượng ung thư biểu mơ tuyến vú xâm nhập Luận án Tiến sĩ Y học Đại học Y dược Huế; 2008 PHỤ LỤC PHIẾU THU THẬP DỮ LIỆU Họ tên bệnh nhân (viết tắt): Mã số block: Năm sinh: Tuổi: Mã số đề tài: CHẨN ĐOÁN LÂM SÀNG: KẾT QUẢ GIẢI PHẪU BỆNH: Đại thể: Vi thể: Hóa mơ miễn dịch: ER : PR : HER2 : Ki67 :