Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây gạo bombax malabaricum dc , họ gạo bombacaceae

BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠO TRƢỜNGĐẠIHỌCDƢỢCHÀNỘI HỒTHỊTHANH HUYỀN (BombaxmalabaricumDC., LUẬNÁNTIẾNSĨDƢỢCHỌC HÀNỘI,NĂM2014 BỘYTẾ BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠO BỘYTẾ TRƢỜNGĐẠIHỌCDƢỢCHÀNỘI HỒTHỊTHANH HUYỀN (BombaxmalabaricumDC LUẬNÁNTIẾNSĨDƢỢCHỌC CHUYÊNNGÀNH:Dƣợchọccổtruyền MÃSỐ: 62.72.04.06 Ngƣờihƣớngdẫnkhoahọc:PGS.TS.NguyễnTháiAn PGS.TS.TháiNguyễnHùngThu ) LỜICAMĐOAN TơixincamđoanLuậnánnàylàcơngtrìnhnghiêncứucủariêngtơidướisựhướngdẫn củaPGS.TS.NguyễnThái Anvà PGS.TS.TháiNguyễn HùngThu Cáckếtquảtrìnhbàytrongluậnánlàtrungthựcvàchưatừngđượccơngbốtrongbấtk ỳcơngtrìnhnàokhác Tácgiảluận án Hồ ThịThanhHuyền LỜICẢMƠN Trongq u t r ì n h t h ự c h i ệ n l u ậ n n , t ô i đ ã n h ậ n đ ợ c s ự ủ n g h ộ v t o điều kiện Đảng ủy, Ban giám hiệu Trường Đại học Dược Hà Nội Bộ mônDượcliệunơitôihọctập,nghiêncứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tớiPGS.TS Nguyễn Thái AnvàPGS.TS.T h i N g u y ễ n H ù n g T h u ,l n h ữ n g n g i T h ầ y đ ã h n g d ẫ n v truyềnđạt nhiều kinhnghiệmquýbáu nghiên cứu khoahọccho Tôi xin chân thành cảm ơn GS.TS Phạm Thanh Kỳ, PGS TS NguyễnTrọng Thông, PGS TS Phan Văn Kiệm, PGS TS Trần Huy Thái, PGS TSNguyễn Khắc Khơi, TS Phạm Thị Vân Anh góp ý cho tơi q trìnhnghiên cứuvàhồnthiệnluận án Trong q trình thực luận án, tơi nhận hợp tác nghiêncứu quan: Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện Hóa học cáchợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Bộ mơnDượclýtrườngĐạihọcYHàNội,TrungtâmKiểmnghiệmthuốc.Đồngth ời,tơicũngnhậnđượcsựđónggópqbáucủacácThầyCơgiáo,cácnhàkhoahọcthuộcnhiềulĩnhvực Nhân dịp tơi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình cácthầycô,cácanhchịem đồngnghiệptại bộmônDượcliệu,bộmônDượchọc cổtruyền vàbộm ô n T h ự c vật, phịng ban trường ln tạo điều k i ệ n tốt để hồn thành luận án.Cảm ơn học trị ln sát cánh tơitrongsuốtqtrìnhnghiên cứuvừaqua Lời sau cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới ngườibạn, người thân gia đình bố, mẹ, kịp thời động viên vàtạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Xin cảm ơn ngườichồngthân yêuđãluôngiúp đỡ,chiasẻvới tôitrong nămtháng qua Xintrântrọng cảmơntấtcả sựgiúpđỡquýbáunày HồThị ThanhHuyền MỤCLỤC LỜI CAMĐOAN ii LỜI CẢMƠN iii DANHMỤCKÝHIỆU,CHỮVIẾT TẮT vii x Ẽ xii CHƢƠNG1TỔNGQUAN .3 1.1 ĐẶCĐIỂM THỰC VẬT 1.1.1 HọGạo(BombacaceaeL.) .3 1.1.2 ChiBombaxL .4 1.1.3 BombaxmalabaricumDC.(BombaxceibaL.) 1.2 THÀNHP H Ầ N H Ó A H Ọ C C Ủ A M Ộ T S Ố L O À I T H U Ộ C C H I BombaxL .13 1.2.1 LoàiBombax ancepsPierre 13 1.2.2 LoàiBombax costatumPellegr &Vuillet 16 1.2.3 LoàiBombaxmalabaricumDC 16 1.3 TÁCDỤNGSINHHỌC VÀCÔNGDỤNG .28 1.3.1 Độc tính .28 1.3.2 Tác dụngsinhhọc .29 1.3.3 Côngdụng 35 CHƢƠNG2NGUYÊNVẬTLIỆUVÀPHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 40 2.1 NGUYÊNVẬT LIỆUNGHIÊNCỨU .40 2.1.1 Nguyên liệunghiêncứu 40 2.1.2 Độngvậtthínghiệm .41 2.1.3 Hóa chấtvàthiếtbị .41 2.1.4 Địa điểmnghiêncứu 43 2.2 PHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU .43 2.2.1 Nghiên cứuvềthựcvật 43 2.2.2 Nghiên cứuthànhphầnhóahọc 43 2.2.3 Phƣơngphápđánhgiáđộctínhcấpvàtácdụngsinhhọc .44 2.2.4 Phƣơngphápxửlýsốliệu 51 CHƢƠNG3KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 53 3.1 NGHIÊNCỨUVỀTHỰCVẬT 53 3.1.1 Mơtảđặcđiểmhìnhtháithựcvậtvàgiámđịnhtênkhoahọccây Gạo 53 3.1.2 Đặcđiểmvihọcvà cấu tạogiải phẫu .55 3.2 NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHÓAHỌC 58 3.2.1 Địnhtínhcácnhómchấtthƣờngcótrongdƣợcliệu 58 3.2.2 Chiết xuấtvàphânlậpcáchợpchấttừlá vàvỏthâncâyGạo 60 3.2.3 Nhận dạngcáchợp chấtphânlậptừcác bộphậncủa câyGạo 64 3.2.4 Xâydựngphƣơngphápxácđịnhhàmlƣợngmộtsốhợpchấtcótrong câyGạo 94 3.3 ĐÁNHGIÁĐỘCTÍNHCẤPVÀ THỬ TÁCDỤNGSINHHỌC .104 3.3.1 Đánhgiáđộctínhcấpcủacaonƣớcvỏthân,lávàhoacâyGạo 104 3.3.2 Tácdụnggiảmđau .107 3.3.3 Tácdụng chốngviêmcấp 109 3.3.4 Tácdụng chống viêmmạn 112 3.3.5 Tácdụng cầmmáu quađánh giáthời gian chảymáu,đông máu 113 3.3.6 Tácdụngbảovệganvàchốngoxyhóa 115 CHƢƠNG4BÀNLUẬN .121 4.1 VỀTHỰCVẬT 121 4.2 VỀTHÀNHPHẦNHÓAHỌC 123 4.2.1 Vềkết quảđịnh tính 124 4.2.2 Vềkết quảphân lậpcáchợpchất 124 4.2.3 Vềkếtquảxácđịnhhàmlƣợngmộtsốhợpchất .129 4.3 VỀĐỘC TÍNH VÀTÁCDỤNGSINHHỌC 132 4.3.1 Độctính 133 4.3.3 Vềtácdụngchốngviêm 136 4.3.4 Vềtácdụngcầmmáu 140 4.3.5 Vềtácdụngbảovệganvà chốngoxyhóa 142 KẾTLUẬNVÀKIẾNNGHỊ .146 CÁCCƠNGTRÌNH ĐÃCƠNG BỐLIÊNQUANĐẾNLUẬNÁNTIẾNSĨDƢỢCHỌC TÀILIỆUTHAMKHẢO DANHMỤC CÁCPHỤLỤCCỦALUẬNÁN DANHMỤC KÝHIỆU,CHỮVIẾT TẮT Độdịchchuyển hóahọc H-NMR 13 C-NMR Protonnuclearmagneticresonance–Phổcộnghƣởngtừproton Carbon(13)nuclearmagneticresonance–Phổcộnghƣởngtừ hạtnhân13C AGC Apigenin7-O D-glucuronopyranosid ALAT Alaninaminotransfera APG AngiospermPhylogenyGroup As Ánhsáng AST Ánhsángthƣờng ASAT Aspartataminotransfera BBL Cắntoàn phầnchiếtxuấttừlácâyGạo BBL-H Cắnphânđoạnn-hexan chiết xuấttừlácâyGạo BBL-C Cắnphânđoạn cloroformchiếtxuấttừlá câyGạo BBL-E Cắnphânđoạnethyl acetat chiếtxuất từlácâyGạo BBL-W CắnphânđoạnnƣớcchiếtxuấttừlácâyGạo BBV Cắn toàn phần chiếtxuấttừvỏ thân câyGạo BBV-H Cắnphânđoạnn-hexan chiếtxuất từvỏthâncâyGạo BBV-C Cắnphânđoạn cloroformchiếtxuấttừvỏthân câyGạo BBV-E (VGE) Cắnphânđoạnethyl acetat chiếtxuất từvỏthân câyGạo BBV-W CắnphânđoạnnƣớcchiếtxuấttừvỏthâncâyGạo B Bombax BHA Butylhydroxylanisol CTCP Cơngtycổ phần CTHH Cơngthứchóa học CTPT Cơngthứcphântử CTSK Chƣơngtrìnhsắcký d Doublet–đỉnhđơi dd Doubletofdoublet dl Dƣợcliệu DĐVN DƣợcđiểnViệtNam DEPT DistortionlessEnhancementbyPolarizationTransfer DMSO Dimethylsulfosid DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ESI-MS ElectronSprayIonizationMassSpectrometry EtOAc Ethylacetat GSH Glutathion Glc Glucose HCNKST Hồngcầunhiễmkísinhtrùng HG HoacâyGạo HMBC HeteronuclearMultipleBondCorrelation HSQC HeteronuclearSingleQuantumCoherence IC50 Nồngđộứcchế50%(Haftmaximalinhibitoryconcentration) IR Phổhồngngoại(InfraredSpectroscopy) LD50 Liềugâychết50%(Lethal Dose,50%) LG LácâyGạo LOD: Giớihạnpháthiện(LimitofDetection) LOQ: Giớihạnđịnhlƣợng(LimitofQualification) m Multiplet m/z Tỷlệ sốkhối/điệntích ion MDA Malonyldialdehyd Mp Điểmnóngchảy MS Massspectrometry–Phổkhối NAPQI N-acetylparabenzoquinon-imin NMR NuclearMagneticResonance p page PAR Paracetamol PG Prostaglandin s Singlet-đỉnhđơn SKC Sắcký cột SKC-RP Sắcký cột phađảo SKLM Sắckýlớp mỏng s.c Tiêmdƣớida t Triplet-đỉnhba TLTK Tàiliệuthamkhảo TT Thuốcthử TW Trungƣơng UV254nm Ultraviolet–Ánhsángtửngoại UV365nm Ultraviolet-Ánhsángtửngoại(bƣớc365nm) VG Vỏ thâncâyGạo WHO WorldHealthOrganization-TổchứcYtếthếgiới