1035 nghiên cứu thành phần hóa học từ phân đoạn phân cực của nhân trần tía (adenosma bracreosum bonati scrophulariaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y DƢỢC CẦN THƠ NGUYỄN ANH ĐÀO NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TỪ PHÂN ĐOẠN PHÂN CỰC CỦA NHÂN TRẦN TÍA (Adenosma bracteosum Bonati) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC Ts PHẠM THỊ TỐ LIÊN ThS NGUYỄN NGỌC QUỲNH Cần Thơ – 2015 LỜI CẢM ƠN Con cảm ơn ba mẹ sinh thành, nuôi khôn lớn, không quản khó khăn, vất vả để có đƣợc ngày hơm Trong trình thực đề tài em nhận đƣợc nhiều giúp đỡ, tạo điều kiện nhà trƣờng, ban chủ nhiệm khoa, đặc biệt tập thể thầy cô, anh chị môn Dƣợc liệu: cô ThS Nguyễn Ngọc Quỳnh, cô ThS Thạch Trần Minh Uyên, thầy ThS Lê Thanh Vĩnh Tuyên, cô ThS Nguyễn Thị Trang Đài, chị Nguyễn Vũ Phƣơng Lan, chị Ngô Thị Kim Hƣơng Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến ThS Nguyễn Ngọc Quỳnh cô Ts Phạm Thị Tố Liên trực tiếp hƣớng dẫn tận tình bảo cho em Em xin chân thành cảm ơn bạn nhóm làm đề tài LBM Dƣợc liệu – Thực Vật Dƣợc – Dƣợc Cổ Truyền, LBM Hóa Lý – Hóa Dƣợc, LBM Hóa phân tích – Kiểm nghiệm – Độc chất, anh lớp Dƣợc khố 35 nhiệt tình giúp đỡ, động viên khích lệ tơi suốt trình thực luận văn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tất kết luận văn trung thực, hoàn toàn riêng chƣa đƣợc công bố cơng trình Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2015 Sinh viên ký tên NGUYỄN ANH ĐÀO i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ iv DANH MỤC HÌNH v ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Vị trí phân loại 1.1.3 Mô tả thực vật 1.1.4 Phân bố sinh thái thu hái 1.1.5 Phân biệt lồi có tên gọi Nhân trần .6 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.2.1 Tinh dầu 1.2.2 Flavonoid 1.2.3 Các thành phần khác .10 1.3.TÁC DỤNG DƢỢC LÝ VÀ CÔNG DỤNG 11 1.3.1 Tính vị quy kinh 12 1.3.2 Tác dụng dƣợc lý 12 1.3.3 Công dụng .14 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 15 2.1.1 Nguyên liệu .15 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 15 2.1.3 Trang thiết bị 15 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 ii 2.2.1 Chiết xuất 16 2.2.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật tủa N1 18 2.2.3 Phân lập tinh chế 19 2.2.4 Khảo sát cấu trúc chất phân lập đƣợc .21 Chƣơng KẾT QUẢ 22 3.1 CHIẾT XUẤT 22 3.2 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TỦA N1 .22 3.3 PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT HÓA HỌC TỪ TỦA N1 23 3.3.1 Phân lập hợp chất hoá học từ tủa N1 sắc ký cột cổ điển C1 23 3.3.2 Phân lập hợp chất hoá học sắc ký cột cổ điển C2 31 3.4 KHẢO SÁT CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƢỢC 35 Chƣơng BÀN LUẬN 40 4.1 CHIẾT XUẤT 40 4.2 PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC TỦA N1 NHÂN TRẦN TÍA 40 4.3 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƢỢC 41 4.3.1 Hợp chất NB1 41 4.3.2 Hợp chất NB2 42 4.3.3 Hợp chất NB3 45 4.3.4 Hợp chất NB4 46 KẾT LUẬN 48 KIẾN NGHỊ .49 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Từ gốc Ý nghĩa Ac Acetone Dung môi aceton d Doublet Đỉnh kép DEPT Distortionless Enhancement Phổ (DEPT) by Polarization Transfer EA Ethyl acetate Dung môi ethyl acetat EtOH Ethanol Dung môi ethanol HMBC Heteronuclear Multiple Bond Phổ tƣơng quan 1H – 13C Correlation HSQC qua nhiều nối Heteronuclear Single Quantum Phổ 1H gắn 13C Correlation qua nối IR Infrared (Phổ) hồng ngoại m Multiplet Nhiều đỉnh MeOH Methanol Dung môi methanol nBA n-Butyl acetate n-Butyl acetat NMR Nuclear magnetic resonance Cộng hƣởng từ hạt nhân PE Petroleum ether Dung môi petroleum ether s Singlet Đỉnh đơn TT Thuốc thử SKLM Sắc ký lớp mỏng UV Ultra Violet Tử ngoại khả kiến VS Vanillin - Sulfuric acid Thuốc thử vanillin – sulfuric iv DANH MỤC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ Bảng Một số hợp chất tinh dầu Nhân trần tía .8 Bảng Tóm tắt phản ứng định tính thành phần hố học tủa N1 .18 Bảng 3.1 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật tủa N1 22 Bảng 3.2 Kết định tính xác định flavonoid Nhân trần tía .23 Bảng 3.3 Các hệ dung môi khảo sát cho sắc ký cột tủa N1 .24 Bảng 3.4 Kết phân đoạn từ sắc ký cột tủa N1 .25 Bảng 3.5 Các hệ dung môi khảo sát cho sắc ký cột C2 tủa M 31 Bảng 3.6 Kết phân đoạn từ sắc ký cột C2 tủa M 32 Bảng 3.8 Chuyển dịch hóa học C H tƣơng tác HMBC NB2 43 Bảng 4.1 Các nhóm chức đặc trƣng NB2 phổ IR……………………… 44 Sơ đồ Quy trình chiết xuất dƣợc liệu Nhân trần tía 17 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 A bracteosum Bonati Hình 1.2 Đặc điểm hình thái Adenosma bracteosum Bonati Hình 1.3 Hình ảnh cây, thân, cành mang hoa Nhân trần tía Hình 1.4 Adenosma caeruleum R Br Hình 1.5 Adenosma capitatum Benth Hình 1.6 Cơng thức hóa học số hợp chất tinh dầu Nhân trần tía Hình 1.7 Cơng thức hóa học số flavonoid Nhân trần tía 10 H nh Cơng thức hóa học số triterpenoid Nhân trần tía .11 Hình 3.1 Sắc ký đồ phân đoạn từ sắc ký cột C1 tủa N1 Nhân trần tía 26 Hình 3.2 Hợp chất NB1 27 Hình 3.3 Sắc ký đồ NB1 với ba hệ dung môi khác 28 Hình 3.4 Hợp chất NB2 Error! Bookmark not defined Hình 3.5 Sắc ký đồ NB2 với ba hệ dung môi khác 30 Hình 3.6 Hợp chất NB3 32 Hình 3.7 Sắc ký đồ NB3 với ba hệ dung môi khác 33 Hình 3.8 Hợp chất NB4 34 Hình 3.9 Sắc ký đồ NB4 35 Hình 3.10 Cấu trúc G2 .35 Hình 3.11 Sắc ký đồ NB1 + G2 khai triển theo chiều (1), theo chiều (2) 36 Hình 4.1 Cấu trúc hóa học tƣơng tác phổ NMR NB2……………………44 ĐẶT VẤN ĐỀ Theo tổ chức Y tế giới (WHO), viêm gan virut có ảnh hƣởng đến hàng trăm triệu ngƣời, gây bệnh gan cấp mãn tính, giết chết gần 1,5 triệu ngƣời năm, chủ yếu bệnh viêm gan B C Trong đó, uớc tính có khoảng 240 triệu ngƣời bị nhiễm viêm gan B mãn tính, khoảng 780 000 ngƣời chết năm nhiễm viêm gan siêu vi B [38] Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu số loại thuốc có tác dụng điều trị bệnh viêm gan virut B mãn tính nhƣ: Nhân trần, Bồ bồ, Cà gai leo, Mật nhân, Giảo cổ lam,…Những loại thuốc ngày đƣợc quan tâm thƣờng gây phản ứng phụ, độc hại cho ngƣời sử dụng Trong đó, Nhân trần tía (Adenosma bracteosum Bonati) dƣợc liệu đƣợc sử dụng lâu đời có nhiều nghiên cứu chứng minh hiệu việc điều trị bệnh viêm gan Nhân trần tía chƣa đƣợc khai thác sử dụng rộng rãi, nguồn nguyên liệu việc điều trị bệnh viêm gan Hiện giới chƣa có nhiều cơng trình nghiên cứu lồi Nhân trần tía Trong năm qua, trƣờng Đại học Y Dƣợc Cần Thơ có nghiên cứu thành phần hóa học nhƣ tác dụng dƣợc lý loài Do vậy, để bổ sung thêm thành phần hóa học Nhân trần tía, đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học từ phân đoạn phân cực Nhân trần tía (Adenosma bracteosum Bonati)” đƣợc thực với mục tiêu cụ thể: Phân tích sơ thành phần hóa thực vật phân đoạn phân cực Nhân trần tía Phân lập khảo sát cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc từ phân đoạn phân cực Nhân trần tía Ý nghĩa đề tài  Chiết xuất khảo sát sơ thành phần hóa học phân đoạn phân cực Nhân trần tía  Phân lập số flavonoid từ phân đoạn phân cực Nhân trần tía, xác định cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc, góp phần bổ sung thêm vào thành phần hóa học nghiên cứu Nhân trần tía đƣợc thực trƣớc