1125 nghiên cứu phân lập hợp chất hóa học từ cao nước của cây nhân trần tía (adenosma bracteosum bonati)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ TRẦN VĂN ĐỆ NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP HỢP CHẤT HÓA HỌC TỪ CAO NƯỚC CỦA CÂY NHÂN TRẦN TÍA (Adenosma bracteosum Bonati) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC ThS THẠCH TRẦN MINH UYÊN Cần Thơ – 2014 LỜI CẢM ƠN Con cảm ơn cha, cảm ơn mẹ sinh thành, nuôi khôn lớn, dù khó nhọc hy sinh cho con, để ngày hơm Trong q trình thực đề tài em nhận nhiều giúp đỡ, tạo điều kiện nhà trường, ban chủ nhiệm khoa, đặc biệt tập thể thầy cô, anh chị môn Dược Liệu: cô Nguyễn Ngọc Quỳnh, cô Thạch Trần Minh Uyên, thầy Lê Thanh Vĩnh Tuyên, cô Nguyễn Thị Trang Đài, chị Nguyễn Vũ Phương Lan, chị Ngô Thị Kim Hương Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Nguyễn Ngọc Quỳnh cô Thạch Trần Minh Uyên trực tiếp hướng dẫn tận tình bảo để em hồn thành tốt luận văn Xin chân thành cảm ơn bạn nhóm làm đề tài, em lớp Dược khố 36 nhiệt tình giúp đỡ, động viên khích lệ tơi suốt q trình thực luận văn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tất kết luận văn trung thực, hồn tồn riêng tơi chưa cơng bố cơng trình Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2014 Sinh viên ký tên TRẦN VĂN ĐỆ i MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ iv DANH MỤC HÌNH v ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Chi Adenosma 1.1.2 Lồi Nhân trần tía 1.2 TỔNG QUAN VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.2.1 Thành phần hóa học số loài thuộc chi Adenosma 1.2.2 Thành phần hóa học Nhân trần tía 1.3 TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ CÔNG DỤNG 10 1.3.1 Tác dụng sinh học công dụng số loài thuộc chi Adenosma 10 1.3.2 Tác dụng sinh học công dụng Nhân trần tía 12 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 NGUN LIỆU, DUNG MƠI, HĨA CHẤT, TRANG THIẾT BỊ 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 14 2.1.3 Trang thiết bị 14 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.2.1 Chiết xuất phân tích thành phần hố học cao nước Nhân trần tía 15 2.2.2 Phân lập, tinh chế 18 2.2.3 Kiểm tra độ tinh khiết sắc ký lớp mỏng 19 ii 2.2.4 Xác định cấu trúc 20 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 21 3.1 PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CAO NƯỚC NHÂN TRẦN TÍA 21 3.2 PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƯỢC 21 3.2.1 Chiết xuất 21 3.2.2 Phân lập 23 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 30 Chương BÀN LUẬN 35 4.1 PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CAO NƯỚC NHÂN TRẦN TÍA 35 4.2 PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƯỢC 35 4.2.1 Hợp chất A1 36 4.2.2 Hợp chất A2 41 4.2.3 Hợp chất A3 44 4.2.4 Hợp chất A4 47 KẾT LUẬN 48 KIẾN NGHỊ 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Từ gốc Ac Acetone COSY Correlated Spectroscopy d Doublet DEPT Distortionless Enhancement Ý nghĩa Đỉnh kép by Polarization Transfer EA Ethyl acetate HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation IR Infrared (Phổ) hồng ngoại m Multiplet Nhiều đỉnh MeOH Methanol MS Mass Spectroscopy nBA n-Butyl acetate NMR Nuclear magnetic resonance Phổ khối Cộng hưởng từ hạt nhân NOESY Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy PE Petroleum ether s Singlet TT Thuốc thử SKLM Sắc ký lớp mỏng UV Ultra violet Tử ngoại VS Vanillin - sulfuric acid Thuốc thử Vanillin Đỉnh đơn Sulfuric iv DANH MỤC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ Trang Bảng Tóm tắt phản ứng định tính thành phần hố học cao nước (E) 17 Bảng 3.1 Kết phân tích thành phần hóa học cao nước Nhân trần tía 21 Bảng 3.2 Kết phân đoạn sau chiết phân bố pH khác 22 Bảng 3.3 Các hệ dung môi khảo sát cho sắc ký cột C1 25 Bảng 3.4 Kết phân đoạn từ sắc ký cột C1 25 Bảng 3.5 Các hệ dung môi khảo sát cho sắc ký cột C2 28 Bảng 3.6 Kết phân đoạn từ sắc ký cột C2 28 Bảng 4.1 Các nhóm chức đặc trưng A1 phổ IR 37 Bảng 4.2 So sánh liệu phổ NMR A1 scutellarin 38 Bảng 4.3 Tóm tắt liệu phổ NMR A1 39 Bảng 4.4 So sánh liệu phổ NMR tạp ethanol đo DMSO 40 Bảng 4.5 Các nhóm chức đặc trưng A2 phổ IR 42 Bảng 4.6 So sánh liệu phổ NMR A2 piceol .42 Bảng 4.7 Các nhóm chức đặc trưng A3 phổ IR 45 Bảng 4.8 So sánh liệu phổ NMR A3 acid p-hydroxybenzoic 45 Bảng 4.9 Các nhóm chức đặc trưng A4 phổ IR 47 Sơ đồ Quy trình chiết xuất dược liệu Nhân trần tía 16 Sơ đồ Quy trình xử lý cao nước (E) Nhân trần tía 22 v DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1.1 Nhân trần, Adenosma glutinosum (L.) Druce Hình 1.2 Bồ bồ, Adenosma capitatum Benth Hình 1.3 A bracteosum Bonati .4 Hình 1.4 Đặc điểm hình thái A bracteosum Bonati .5 Hình 1.5 Cây mang hoa Nhân trần tía Hình 1.6 Cơng thức hóa học số hợp chất tinh dầu Nhân trần tía Hình 1.7 Cơng thức hóa học số flavonoid Nhân trần tía Hình 1.8 Cơng thức hóa học stigmasterol (a) acid betulinic (b) 10 Hình 3.1 Sắc ký đồ phân đoạn E2, E3 23 Hình 3.2 Sắc ký đồ A1 với ba hệ dung môi khác .24 Hình 3.3 Sắc ký đồ phân đoạn sắc ký cột C1 26 Hình 3.4 Sắc ký đồ A2 với ba hệ dung môi khác .26 Hình 3.5 Sắc ký đồ A3 với ba hệ dung môi khác .27 Hình 3.6 Sắc ký đồ phân đoạn sắc ký cột C2 29 Hình 3.7 Sắc ký đồ A4 với ba hệ dung mơi khác .30 Hình 3.8 Cấu trúc hóa học A1 .31 Hình 3.9 Cấu trúc hoá học A2 .32 Hình 3.10 Cấu trúc hố học A3 .33 Hình 3.11 Sắc ký đồ so sánh A4 D1 34 Hình 3.12 Cấu trúc hố học A4 .34 Hình 4.1 Cấu trúc hóa học tương tác phổ NMR A1 39 Hình 4.2 Cấu trúc hố học A2 .43 Hình 4.3 Con đường sinh phát nguyên piceol 43 Hình 4.4 Cấu trúc hố học A3 .46 Hình 4.5 Con đường sinh phát nguyên acid p-hydroxybenzoic 46 ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm gan virus bệnh lý điển hình gan mật gây viêm gan cấp mãn tính làm tăng nguy dẫn đến xơ gan ung thư gan [59] Theo ước tính Tổ chức Y tế giới, giới có khoảng tỷ người nhiễm virus viêm gan B 200 triệu người nhiễm virus viêm gan C Mỗi năm, viêm gan virus khiến triệu người tử vong Việt Nam quốc gia vùng Tây Thái Bình Dương phải đối mặt với đại dịch viêm gan virus với tỷ lệ người nhiễm virus cao [57] Hiện nay, theo xu hướng chung y học đại hướng thuốc có nguồn gốc tự nhiên, loại thuốc chữa bệnh gan mật xuất phát từ dược liệu quan tâm nghiên cứu Theo kinh nghiệm dân gian, số thuốc dùng điều trị bước đầu cho thấy có hiệu tốt Nhân trần tía (Adenosma bracteosum Bonati) dược liệu sử dụng lâu đời để chữa bệnh gan mật Trên thị trường có số chế phẩm đơng dược bào chế từ Nhân trần tía đa số chưa có tiêu chuẩn cụ thể Các nghiên cứu trước Nhân trần tía Việt Nam nói riêng giới nói chung, chưa có nhiều nghiên cứu thành phần hóa học, đề tài “Nghiên cứu phân lập hợp chất hóa học từ cao nước Nhân trần tía (Adenosma bracteosum Bonati)” thực với mục tiêu cụ thể: Nghiên cứu phân tích sơ thành phần hóa học cao nước Nhân trần tía Phân lập xác định cấu trúc hợp chất phân lập Ý nghĩa đề tài Từ kết khảo sát sơ thành phần hóa học cao nước Nhân trần tía, định hướng phương pháp chiết xuất, phân lập hợp chất tinh khiết giúp khẳng định thêm thành phần hố học Nhân trần tía Phân lập hợp chất hóa học từ Nhân trần tía, xác định cấu trúc hợp chất phân lập được, góp phần bổ sung thêm vào thành phần hóa học nghiên cứu Nhân trần tía thực trước Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Chi Adenosma 1.1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Adenosma Chi Adenosma cỏ mọc hàng năm hay lâu năm, thường có mùi thơm Lá đơn, mọc đối, có cuống hay khơng, có mép nhăn [7] Hoa đơn độc nách mọc thành chùm có cụm hoa dạng đầu hay Hai bắc dạng sợi nằm đài Đài có đài khơng đều, ngồi lớn có hình giáo rộng tới hình tim hay hình trứng, có hình dải hay giáo Tràng hình trụ, có mơi, mơi (ở ngồi) hình bầu dục tới trịn, ngun hay lõm; mơi (ở trong) có thùy Nhị 4, khơng thị, trội; bao phấn ô rời nhau, nhị có nhị sinh sản; vịi dạng sợi, đầu nhụy dạng đấu [7] Quả nang có hình trứng, hình nón hay bầu dục, thon hẹp nhiều đỉnh, có rãnh, mở cắt vách hay mở van; hạt nhiều, nhỏ, hình bầu dục hay hình trụ ngắn; vỏ có vân mạng [7] 1.1.1.2 Phân bố chi Adenosma Chi Adenosma có khoảng 15 lồi vùng nhiệt đới Đông Nam Á, Nam Á, Trung Quốc Australia Ở khu vực Đơng Dương: Lào có lồi, Việt Nam có lồi Campuchia có loài [27] Trong loài thuộc chi Adenosma, y học cổ truyền Việt Nam hay dùng loài: Nhân trần, Adenosma glutinosum (L.) Druce hay Adenosma caeruleum R Br phân bố tập trung nhiều tỉnh vùng núi phía Bắc như: Cao Bằng, Lạng Sơn, Bắc Cạn, Thái Nguyên, Bắc Giang, Tuyên Quang, Hà Giang, Yên Bái, Lào Cai, Lai Châu, Sơn La Hịa Bình Gần tìm thấy Quảng Nam, Quảng Ngãi, Thừa Thiên Huế [27] PL - 22 Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO A1−DMSO−COSYGP F2 − Acquisition Parameters 20140412 Date_ Time 2.49 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG cosygpqf TD 2048 SOLVENT DMSO 16 NS 16 5000.000 Hz DS SWH 2.441406 Hz FIDRES 0.2049500 sec AQ RG 812.7 100.000 DW usec DE 6.00 usec TE 300.0 K 0.00000300 sec d0 1.48689198 sec D1 0.00000400 sec d13 0.00020000 sec D16 IN0 0.00020000 sec 0.00000000 sec MCREST 1.48689198 sec MCWRK ppm ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P0 8.50 usec P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1322506 MHz ====== GRADIENT CHANNEL ===== GPNAM1 SINE.100 GPNAM2 SINE.100 GPX1 0.00 % GPX2 0.00 % GPY1 0.00 % GPY2 0.00 % GPZ1 10.00 % GPZ2 10.00 % P16 1000.00 usec F1 − Acquisition parameters ND0 256 TD 500.1323 MHz SFO1 FIDRES 19.531250 Hz SW 9.997 ppm FnMODE QF F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300040 MHz WDW SINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.40 PC 9 PL 24 Phổ COSYGP A1 ppm F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 QF SF 500.1300038 MHz WDW SINE 0.00 Hz SSB LB GB PL - 23 A1−DMSO−COSYGP 7,92 d Hz Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO 6,94 d 8,5 Hz F2 − Acquisition Parameters 20140412 Date_ Time 2.49 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG cosygpqf TD 2048 SOLVENT DMSO 16 NS 16 5000.000 Hz DS SWH 2.441406 Hz FIDRES 0.2049500 sec AQ RG 812.7 100.000 DW usec DE 6.00 usec TE 300.0 K 0.00000300 sec d0 1.48689198 sec D1 0.00000400 sec d13 0.00020000 sec D16 IN0 0.00020000 sec 0.00000000 sec MCREST 1.48689198 sec MCWRK ppm 6.8 6.9 7.0 7.1 ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P0 8.50 usec P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1322506 MHz 7.2 7.3 ====== GRADIENT CHANNEL ===== GPNAM1 SINE.100 GPNAM2 SINE.100 GPX1 0.00 % GPX2 0.00 % GPY1 0.00 % GPY2 0.00 % GPZ1 10.00 % GPZ2 10.00 % P16 1000.00 usec 7.4 7.5 F1 − Acquisition parameters ND0 256 TD 500.1323 MHz SFO1 FIDRES 19.531250 Hz SW 9.997 ppm FnMODE QF 7.6 7.7 F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300040 MHz WDW SINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.40 PC 7.8 7.9 8.0 8.0 7.9 7.8 7.7 7.6 7.5 7.4 7.3 7.2 7.1 7.0 6.9 6.8 PL 25 Phổ COSYGPex1 A1 ppm F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 QF SF 500.1300038 MHz WDW SINE 0.00 Hz SSB LB GB PL - 24 A1−DMSO−COSYGP Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO 3,37 5,16 d Hz F2 − Acquisition Parameters 20140412 Date_ Time 2.49 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG cosygpqf 2048 TD DMSO 16 SOLVENT 16 5000.000 Hz NS 2.441406 Hz DS SWH 0.2049500 sec FIDRES AQ 812.7 100.000 RG usec DW 6.00 usec DE 300.0 K 0.00000300 sec TE 1.48689198 sec d0 0.00000400 sec D1 0.00020000 sec d13 D16 0.00020000 sec IN0 0.00000000 sec 1.48689198 sec MCREST MCWRK 3,93 ppm 3.0 3.2 3.4 3.6 ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P0 8.50 usec P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1322506 MHz 3.8 4.0 ====== GRADIENT CHANNEL ===== GPNAM1 SINE.100 GPNAM2 SINE.100 GPX1 0.00 % GPX2 0.00 % GPY1 0.00 % GPY2 0.00 % GPZ1 10.00 % GPZ2 10.00 % P16 1000.00 usec 4.2 4.4 4.6 F1 − Acquisition parameters ND0 256 TD 500.1323 MHz SFO1 FIDRES 19.531250 Hz SW 9.997 ppm FnMODE QF 4.8 5.0 F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300040 MHz WDW SINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.40 PC 5.2 5.4 5.6 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 PL 26 Phổ COSYGPex2 A1 3.0 ppm F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 QF SF 500.1300038 MHz WDW SINE 0.00 Hz SSB LB GB PL - 25 Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO A1−DMSO−NOESY F2 − Acquisition Parameters 20140412 Date_ Time 4.48 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG noesyph 2048 TD DMSO 32 SOLVENT 16 7002.801 Hz NS 3.419337 Hz DS SWH 0.1463486 sec FIDRES 161.3 AQ RG 71.400 usec 6.00 DW usec DE 300.0 K 0.00006059 sec TE 1.50000000 sec d0 0.50000000 sec D1 D8 0.00014282 sec IN0 0.00000000 sec 0.75000000 sec MCREST 128 MCWRK ST1CNT ppm ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1335009 MHz F1 − Acquisition parameters ND0 236 TD 500.1335 MHz SFO1 FIDRES 29.667692 Hz SW 13.999 ppm FnMODE States−TPPI F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300057 WDW QSINE SSB 0.00 LB GB 1.00 PC F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 States−TPPI SF 500.1300478 WDW QSINE 0.00 SSB LB GB 10 11 12 13 13 12 11 10 PL 27 Phổ NOESY A1 ppm MHz Hz MHz Hz PL - 26 Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO A1−DMSO−NOESY F2 − Acquisition Date_ Time INSTRUM PROBHD PULPROG TD SOLVENT NS DS SWH FIDRES AQ RG DW DE TE d0 D1 D8 IN0 MCREST MCWRK ST1CNT ppm 3.0 3.5 4.0 4.5 Parameters 20140412 4.48 spect mm Multinucl noesyph 2048 DMSO 32 16 7002.801 Hz 3.419337 Hz 0.1463486 sec 161.3 71.400 usec 6.00 usec 300.0 K 0.00006059 sec 1.50000000 sec 0.50000000 sec 0.00014282 sec 0.00000000 sec 0.75000000 sec 128 ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1335009 MHz 5.0 F1 − Acquisition parameters ND0 236 TD 500.1335 MHz SFO1 FIDRES 29.667692 Hz SW 13.999 ppm FnMODE States−TPPI 5.5 F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300057 MHz WDW QSINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.00 PC 6.0 6.5 F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 States−TPPI SF 500.1300478 MHz WDW QSINE 0.00 Hz SSB LB GB 7.0 7.5 8.0 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 PL 28 Phổ NOESYex1 A1 3.0 ppm PL - 27 6,94 d 8,5 Hz Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO A1−DMSO−NOESY 7,92 d Hz 6,98 s 5,16 d Hz 6,81 s ppm 5.2 5.4 5.6 F2 − Acquisition Date_ Time INSTRUM PROBHD PULPROG TD SOLVENT NS DS SWH FIDRES AQ RG DW DE TE d0 D1 D8 IN0 MCREST MCWRK ST1CNT Parameters 20140412 4.48 spect mm Multinucl noesyph 2048 DMSO 32 16 7002.801 Hz 3.419337 Hz 0.1463486 sec 161.3 71.400 usec 6.00 usec 300.0 K 0.00006059 sec 1.50000000 sec 0.50000000 sec 0.00014282 sec 0.00000000 sec 0.75000000 sec 128 5.8 6.0 ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1335009 MHz 6.2 F1 − Acquisition parameters ND0 236 TD 500.1335 MHz SFO1 FIDRES 29.667692 Hz SW 13.999 ppm FnMODE States−TPPI 6.4 6.6 F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300057 MHz WDW QSINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.00 PC 6.8 7.0 7.2 F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 States−TPPI SF 500.1300478 MHz WDW QSINE 0.00 Hz SSB LB GB 7.4 7.6 7.8 8.0 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 PL 29 Phổ NOESYex2 A1 ppm PL - 28 Current Data Parameters 113QUYNH_D2 NAME EXPNO PROCNO A1−DMSO−NOESY 5,16 d Hz 3,39 F2 − Acquisition Parameters 20140412 Date_ Time 4.48 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG noesyph TD 2048 SOLVENT DMSO 32 NS 16 7002.801 Hz DS SWH 3.419337 Hz FIDRES 0.1463486 sec AQ 161.3 RG DW 71.400 usec DE 6.00 usec 300.0 K TE 0.00006059 sec d0 1.50000000 sec D1 D8 0.50000000 sec IN0 0.00014282 sec 0.00000000 sec MCREST 0.75000000 sec MCWRK 128 ST1CNT ppm 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 ======== CHANNEL f1 ======== NUC1 1H P1 8.50 usec PL1 −4.00 dB SFO1 500.1335009 MHz 4.0 F1 − Acquisition parameters ND0 236 TD 500.1335 MHz SFO1 FIDRES 29.667692 Hz SW 13.999 ppm FnMODE States−TPPI 4.2 4.4 F2 − Processing parameters SI 1024 SF 500.1300057 MHz WDW QSINE SSB 0.00 Hz LB GB 1.00 PC 4.6 4.8 F1 − Processing parameters 1024 SI MC2 States−TPPI SF 500.1300478 MHz WDW QSINE 0.00 Hz SSB LB GB 5.0 5.2 5.4 5.6 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 PL 30 Phổ NOESYex3 A1 3.0 ppm PL - 29 0.000 −0.001 2.583 7.921 7.904 7.262 7.262 6.947 6.931 A2−CDCl3−1H Current Data Parameters NAME 113QUYNH_D4 EXPNO PROCNO F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140508 Time 18.20 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT CDCl3 NS 16 DS SWH 10000.000 FIDRES 0.152588 AQ 3.2769001 RG 143.7 DW 50.000 DE 6.00 TE 300.0 D1 1.00000000 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 H-8 H-2, ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 1H P1 8.50 PL1 −4.00 SFO1 500.1335009 H-3, 11 10 3.010 12 2.000 13 2.004 0.736 F2 − Processing paramete SI 32768 SF 500.1300124 WDW EM SSB LB 0.30 GB PC 1.00 PL 31 Phổ 1H – NMR A2 −1 ppm PL - 30 6.947 6.931 7.262 7.262 7.921 7.904 A2−CDCl3−1H H-2, Current Data Parameters 113QUYNH_D4 NAME EXPNO PROCNO F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140508 Time 18.20 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT CDCl3 NS 16 DS SWH 10000.000 FIDRES 0.152588 AQ 3.2769001 RG 143.7 DW 50.000 DE 6.00 TE 300.0 D1 1.00000000 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 H-3, ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 1H P1 8.50 PL1 −4.00 SFO1 500.1335009 F2 − Processing paramete SI 32768 SF 500.1300124 WDW EM SSB LB 0.30 GB PC 1.00 4-OH 7.9 7.8 7.7 7.6 7.5 7.4 7.3 7.2 7.1 7.0 6.9 2.000 8.0 0.736 8.1 2.004 8.2 PL 32 Phổ 1H – NMRex1 A2 6.8 ppm PL - 31 26.282 77.271 77.016 76.762 115.525 131.186 129.728 161.207 198.384 A2−CDCl3−C13CPD Current Data Parameters 113QUYNH_D4 NAME EXPNO PROCNO F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140508 Time 18.29 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zgpg30 TD 65536 SOLVENT MeOD NS 160 DS SWH 31446.541 FIDRES 0.479836 AQ 1.0420883 RG 32768 DW 15.900 DE 6.00 TE 300.0 D1 2.00000000 d11 0.03000000 DELTA 1.89999998 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 3, 2, ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 13C P1 7.40 0.00 PL1 125.7715724 SFO1 ======== CHANNEL f2 ==== CPDPRG2 waltz16 NUC2 1H PCPD2 80.00 PL2 −4.00 PL12 15.47 22.00 PL13 500.1320005 SFO2 220 200 F2 − Processing paramete SI 32768 SF 125.7577906 WDW EM SSB LB 1.00 GB 180 160 140 120 100 80 60 PL 33 Phổ 13C – NMR A2 40 20 ppm PL - 32 A2−CDCl3−C13CPD& DEPT DEPT90 3, 5- CH 210 200 190 180 170 160 150 140 130 2, - CH 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm DEPT135 – CH3 CH&CH3 CH2 210 200 190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm C13CPD - CIV - CIV 210 200 190 - CIV 180 170 160 150 140 130 120 PL 34 Phổ DEPT A2 PL - 33 2.503 2.500 2.497 3.366 6.825 6.808 7.792 7.775 A3−DMSO−1H Current Data Parameters 113QUYNH_D05 NAME EXPNO PROCNO F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140517 Time 9.05 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT DMSO NS 16 DS SWH 10000.000 FIDRES 0.152588 AQ 3.2769001 RG 161.3 DW 50.000 DE 6.00 TE 300.0 D1 1.00000000 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 H-3, H-2, ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 1H P1 8.50 PL1 −4.00 SFO1 500.1335009 F2 − Processing paramete SI 32768 SF 500.1300054 WDW EM SSB LB 0.30 GB PC 1.00 10 2.074 11 2.000 12 PL 35 Phổ 1H – NMR A3 ppm PL - 34 Current Data Parameters 113QUYNH_D05 NAME EXPNO PROCNO 6.825 6.808 7.792 7.775 A3−DMSO−1H F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140517 Time 9.05 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT DMSO NS 16 DS SWH 10000.000 FIDRES 0.152588 AQ 3.2769001 RG 161.3 DW 50.000 DE 6.00 TE 300.0 D1 1.00000000 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 1H P1 8.50 PL1 −4.00 SFO1 500.1335009 H-3, H-2, F2 − Processing paramete SI 32768 SF 500.1300054 WDW EM SSB LB 0.30 GB PC 1.00 7.8 7.6 7.4 7.2 7.0 6.8 2.074 8.0 2.000 8.2 PL 36 Phổ 1H – NMRex1 A3 6.6 ppm PL - 35 40.001 39.834 39.667 39.500 39.333 39.166 38.999 115.106 121.382 131.507 161.575 167.161 A3−DMSO−C13CPD Current Data Parameters 113QUYNH_D05 NAME EXPNO PROCNO F2 − Acquisition Paramet Date_ 20140517 Time 8.54 INSTRUM spect PROBHD mm Multinucl PULPROG zgpg30 TD 65536 SOLVENT DMSO NS 128 DS SWH 31446.541 FIDRES 0.479836 AQ 1.0420883 RG 32768 DW 15.900 DE 6.00 TE 300.0 D1 2.00000000 d11 0.03000000 DELTA 1.89999998 MCREST 0.00000000 MCWRK 0.01500000 2, ======== CHANNEL f1 ==== NUC1 13C P1 7.40 0.00 PL1 125.7715724 SFO1 3, ======== CHANNEL f2 ==== CPDPRG2 waltz16 NUC2 1H PCPD2 80.00 PL2 −4.00 PL12 15.47 22.00 PL13 500.1320005 SFO2 200 180 F2 − Processing paramete SI 32768 SF 125.7578489 WDW EM SSB LB 1.00 GB 160 140 120 100 80 60 PL 37 Phổ 13C – NMR A3 40 20 ppm TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA DƯỢC Độc lập – Tự – Hạnh phúc GIẤY XÁC NHẬN ĐÃ BỔ SUNG, SỬA CHỮA LUẬN VĂN THEO Ý KIẾN ĐÓNG GÓP CỦA HỘI ĐỒNG CHẤM LUẬN VĂN DSĐH Họ tên học viên: TRẦN VĂN ĐỆ Tên đề tài luận văn: Nghiên cứu phân lập hợp chất hố học từ cao nước Nhân trần tía (Adenosma bracteosum Bonati) Người hướng dẫn khoa học: ThS THẠCH TRẦN MINH UYÊN Luận văn bổ sung sửa chữa điểm sau: Sửa lại cách viết tài liệu tham khảo Chuyển số nội dung phần kết nghiên cứu sang phần bàn luận Thêm thông số máy đo phổ NMR chất đối chiếu Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2014 Thầy hướng dẫn Họ tên học viên Xác nhận chủ tịch Hội đồng chấm luận văn