Đang tải... (xem toàn văn)
Untitled Studocu is not sponsored or endorsed by any college or university Ppnckh đâsd Chủ nghĩa xã hội khoa học (Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh) Studocu is not sponsored or endorsed by any coll[.]
lOMoARcPSD|17160101 Ppnckh - đâsd Chủ nghĩa xã hội khoa học (Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh) Studocu is not sponsored or endorsed by any college or university Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN THỊ HỒNG HUỆ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO N-BUTANOL VÀ CAO NƯỚC CỦA RỄ CỦ BẠCH CHỈ NAM (Millettiae pulchrae Kurz Fabaceae) ĐỀ CƯƠNG NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2023 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN THỊ HỒNG HUỆ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO N-BUTANOL VÀ CAO NƯỚC CỦA RỄ CỦ BẠCH CHỈ NAM (Millettiae pulchrae Kurz Fabaceae) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Giảng viên hướng dẫn: TS MÃ CHÍ THÀNH Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2023 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA DƯỢC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT .5 DANH MỤC BẢNG .6 DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .10 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 10 2.1.2 Trang thiết bị nghiên cứu 10 2.1.3 Dung mơi, hóa chất .11 2.2 Phương pháp nghiên cứu .11 2.2.1 Phân lập thành phần phân đoạn cao n-butanol, cao nước kỹ thuật sắc ký 11 2.2.2 Tinh chế chất tinh khiết thu từ phân đoạn cao n-butanol, cao nước 12 2.2.3 Kiểm tra tinh khiết hợp chất phân lập phương pháp thích hợp 12 2.2.4 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập 12 CHƯƠNG KẾ HOẠCH THỰC HIỆN 13 3.1 NƠI THỰC HIỆN .13 3.2 KẾ HOẠCH THỰC HIỆN 13 3.3 KINH PHÍ 13 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 TÀI LIỆU THAM KHẢO .14 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu, chữ viết tắt UV-Vis HSQC HMBC MS NMR DMSO Chữ nguyên Ultraviolet - Visible Heteronuclear Single Quantum Correlation Heteronuclear Multiple Bond Correlation Mass Spectroscopy Nuclear Magnetic Resonance Dimethyl sulfoxyde Ý nghĩa Tử ngoại - khả kiến Phổ khối lượng Cộng hưởng từ hạt nhân Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 DANH MỤC BẢNG Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 ĐẶT VẤN ĐỀ Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU - Nêu rõ mục tiêu nội dung nghiên cứu Các vấn đề, khái niệm liên quan Tổng quan tình hình nghiên cứu nước ngồi Tổng quan tình hình nghiên cứu nước Các vấn đề tồn cần giải Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Nguyên liệu thực nghiên cứu cao n-butanol cao nước rễ củ Bạch nam (Radix Millettia pulchrae Kurz) chiết xuất từ đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học hướng tác dụng chống oxy hóa rễ củ Bạch nam” tác giả Đinh Thị Bách (Luận văn thạc sĩ dược học) năm 2020 Rễ củ Bạch nam (Radix Millettia pulchrae Kurz) 15,0 kg (tươi) thu mua An Giang vào tháng 11 năm 2018 Rễ củ Bạch nam thái phiến mỏng phơi khô (6,0 kg), xay nhỏ đến độ mịn cần thiết Sau đó, dược liệu chiết ngấm kiệt với cồn 96 % Cao cồn dược chiết phân bố lỏng-lỏng với dung mơi có độ phân cực tăng dần, thu cao phân đoạn: cao n-hexan (50 g), cao ethyl acetat (17,6 g), cao n-butanol (10 g), cao nước (900 g) Đề tài sử dụng cao n-butanol cao nước để tiếp tục phân tích 2.1.2 Trang thiết bị nghiên cứu Các trang thiết bị nghiên cứu trình bày bảng 2.1 Bảng 2.1 Trang thiết bị nghiên cứu STT 10 11 12 Trang thiết bị Máy xay dược liệu (Philip) Tủ sấy UML-500 (Memmert, model ULM-500, 2005 Cân phân tích số lẻ CP-2250 Sartorius độ nhạy 0,01mg Đèn UV 254 365 nm (Vilber Lourmat CN-15-LC) Cột sắc kí lỏng: Cột Phenomenex Gemini C18 (150 x 4,6 mm; µm), tiền cột Phenomenex Gemini C18 Bếp cách thủy Memmert WB-14 Bồn siêu âm Sonorex- Super RK 1028 H Cân điện tử Sartorious độ nhạy 0,01 g Tủ sấy chân không Gallentkamp Máy cô quay Buchii lít-210S Máy quay Buchii Rotavapor R-220 kèm sinh hàn tự động Haake K-20 Các dụng cụ thường quy khác phịng thí nghiệm 10 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) Xuất xứ Trung Quốc Đức Anh Nhật lOMoARcPSD|17160101 2.1.3 Dung mơi, hóa chất Các dung mơi hóa chất sử dụng q trình thực đề tài thể bảng 2.2 Bảng 2.2 Các hóa chất, dung mơi, thuốc thử Hóa chất, dung môi, thuốc thử Methanol Acetonitril Acid formic n-hexan Dicloromethan Cloroform Ethyl acetat Methanol n-Butanol Acid acetic Silica gel hạt trung bình (40 – 63 m) Silica gel hạt mịn (15 – 40 m) Vanillin sulfuric Sắt (III) clorid SKLM dùng Silica gel F254 cỡ hạt 40-63 µm tráng sẵn nhôm Độ tinh khiết TK HPLC TK HPLC TK HPLC TK HPLC TKPT TKPT TKPT TKPT TKPT TKPT Xuất xứ J.T.Baker (Mỹ) Merck (Đức) J.T.Baker (Mỹ) Schaular (Tây Ban Nha) Schaular (Tây Ban Nha) Chemsol (Việt Nam) Schaular (Tây Ban Nha) Schaular (Tây Ban Nha) Schaular (Tây Ban Nha) Schaular (Tây Ban Nha) Merck (Đức) Merck (Đức) Merck (Đức) TKPT: Tinh khiết phân tích TK HPLC: Tinh khiết dùng cho HPLC 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phân lập thành phần phân đoạn cao n-butanol, cao nước kỹ thuật sắc ký Các phân đoạn n-butanol, cao nước rễ củ Bạch nam phân tách thành phân đoạn đơn giản Sau tiếp tục sử dụng sắc ký cột cổ điển sắc ký cột rây phân tử để phân tách phân đoạn thu hợp chất tinh khiết -Sắc ký cột cổ điển: sử dụng pha tĩnh hạt silicagel cỡ hạt trung bình (40 – 63 µm) silicagel cỡ hạt mịn (15 – 40 µm) -Sắc ký rây phân tử (Sephadex LH-20) tách hỗn hợp chất có kích thước phân tử khác rõ 11 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 2.2.2 Tinh chế chất tinh khiết thu từ phân đoạn cao n-butanol, cao nước Tinh chế chất tinh khiết thu từ phân đoạn cao n-butanol, cao nước kỹ thuật sắc ký thích hợp sắc ký cột pha đảo, sắc ký lớp mỏng điều chế phương pháp HPLC điều chế Ngoài cịn sử dụng phương pháp kết tinh lại dung mơi thích hợp dựa vào thay đổi tính tan dung mơi khác để tinh chế chất tinh khiết 2.2.3 Kiểm tra tinh khiết hợp chất phân lập phương pháp thích hợp Các chất phân lập kiểm tra độ tinh khiết phương pháp SKLM với hệ dung mơi có độ phân cực khác Phát vết cách quan sát đèn UV 254 nm, UV 365 nm, nhúng thuốc thử VS UV 365 nm sau nhúng thuốc thử Chất xem tinh khiết sắc ký lớp mỏng hệ dung môi cho vết gọn sắc ký đồ 2.2.4 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập Các chất tinh khiết phân lập phân đoạn cao n-butanol, cao nước xác định cấu trúc dựa liệu phổ MS phổ NMR kết hợp so sánh với liệu tài liệu tham khảo - So sánh với chất tinh khiết phân lập từ đề tài trước dựa vào SKLM -Phổ MS đo chế độ ion âm (ESI- ) hay ion dương (ESI+) đo máy LC-MS Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Thành phố Hồ Chí Minh máy Waters G2-XS Qtof Bộ môn Dược liệu - Khoa Dược, Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh -Phổ NMR đo với kỹ thuật 1-D, 2-D (1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC, COSY) máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân Brüker 600 MHz phịng NMR – Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Hà Nội CHƯƠNG KẾ HOẠCH THỰC HIỆN 3.1 NƠI THỰC HIỆN Bộ môn Dược Liệu, Khoa Dược, Đại Học Y Dược TP Hồ Chí Minh (địa 41-43 Đinh Tiên Hồng, P Bến Nghé, Quận 1, TP Hồ Chí Minh 12 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 3.2 KẾ HOẠCH THỰC HIỆN STT Công việc 1/11/2022 3.3 KINH PHÍ 13 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) lOMoARcPSD|17160101 TÀI LIỆU THAM KHẢO 14 Downloaded by Free Games Android (vuchinhhp1@gmail.com) ... CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHI? ?N CỨU - N? ?u rõ mục tiêu n? ??i dung nghi? ?n cứu Các v? ?n đề, khái niệm li? ?n quan Tổng quan tình hình nghi? ?n cứu n? ?ớc ngồi Tổng quan tình hình nghi? ?n cứu n? ?ớc Các v? ?n đề... MINH NGUY? ?N THỊ HỒNG HUỆ NGHI? ?N CỨU THÀNH PH? ?N HÓA HỌC CAO N- BUTANOL VÀ CAO N? ?ỚC CỦA RỄ CỦ BẠCH CHỈ NAM (Millettiae pulchrae Kurz Fabaceae) KHÓA LU? ?N TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Giảng vi? ?n hướng... nghi? ?n cứu Nguy? ?n liệu thực nghi? ?n cứu cao n- butanol cao n? ?ớc rễ củ Bạch nam (Radix Millettia pulchrae Kurz) chiết xuất từ đề tài ? ?Nghi? ?n cứu thành ph? ?n hóa học hướng tác dụng chống oxy hóa rễ củ Bạch