Nghiên cứu thành phần hóa học cao metanol của cây tắc kè đá (drynaria bonii)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HUỲNH THỊ MỸ NƯƠNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO METANOL CỦA CÂY TẮC KÈ ĐÁ (DRYNARIA BONII) Chun ngành: Cơng nghệ hóa học Mã số: LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 07 năm 2014 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA – ĐHQG - HCM Cán hướng dẫn khoa học : TS LÊ TIẾN DŨNG Cán chấm nhận xét1 : Cán chấm nhận xét2 : Luận văn thạc sĩ bảo vệ trường Đại Học Bách Khoa, ĐHQG Tp HCM ngày…… tháng……năm 2014 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trưởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếucó) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƯỞNG KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập -Tự do-Hạnh phúc TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA NHIỆM VỤLUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên:Huỳnh Thị Mỹ Nương MSHV: 12050157 Ngày,tháng,năm sinh:01/12/1988 Nơ isinh:Phú Vang – TT Huế Chuyên ngành:Hóa Hữu Cơ Mã số : I TÊN ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO METANOL CỦA CÂY TẮC KÈ ĐÁ (DRYNARIA BONII)” II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Điều chế cao tổng cao phân đoạn - Thử nghiệm hoạ ttính kích thích nguyên bào xương cao tổng cao phân đoạn - Phân lập xác định cấu trúc chất - Tổng kết viết luận văn III NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: IV NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: V CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: TS LÊ TIẾN DŨNG Tp HCM, ngày……tháng …… năm 20… CÁN BỘ HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) (Họtênvàchữký) TRƯỞNG KHOA….……… (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN - - Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến: Thầy, TS Lê Tiến Dũng, Viện Công nghệ Hóa học Thầy tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi động viên tơi hồn thành tốt luận văn TS Mai Đình Trị, NCS Phan Nhật Minh - Phịng chất có hoạt tính sinh học - Viện Cơng nghệ Hóa học, tận tình giúp đỡ đóng góp nhiều ý kiến q báu cho luận văn Xin gửi lời cảm ơn đến thầy Đặng Vũ Lương – Phòng Cộng hưởng từ - Viện Hóa học ghi phổ, giúp tơi hồn thành tốt luận văn Tôi xin cảm ơn Thầy, Cô sở đào tạo tận tình giảng dạy thời gian theo học Xin cảm ơn gia đình, bạn bè đồng nghiệp bên cạnh động viên tạo điều kiện cho tơi tồn tâm học tập nghiên cứu Chân thành cảm ơn! HUỲNH THỊ MỸ NƯƠNG HuỳnhThịMỹNương MỤC LỤC - -MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN .2 1.1 Vài nét chi Drynaria 1.2 Mô tả Tắc kè đá .2 1.3 Vùng phân bố, thu hái xử lý 1.4 Thành phần hóa học .4 1.5 Những nghiên cứu dược tính .19 CHƯƠNG 22 THỰC NGHIỆM 22 2.1 Hóachất, thiếtbị .22 2.2 Phươngphápnghiêncứu 22 2.3 Thựcnghiệm 24 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Xác định cấu trúc hợp chất DBM I 31 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất DBM II 34 3.3 Xác định cấu trúc hợp chất DBM IV .38 3.4 Xác định cấu trúc hợp chất DBM IX .40 3.5 Xác định cấu trúc hợp chất DBM X 43 3.6 Kết thử hoạt tính kích thích tăng sinh tế bào 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .48 TÀI LIỆU THAM KHẢO .50 HuỳnhThịMỹNương DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT - - ESI-MS 1H-NMR 13 C-NMR DEPT Electrospray ionization Mass Spectrum Khốiphổ-Ion hóaphunmùđiệntử Proton (1) Nuclear Magnetic Phổcộnghưởngtừhạtnhâncủa Resonance proton (1) Carbon (13) Nuclear Magnetic Phổcộnghưởngtừhạtnhâncủacacbon Resonance (13) Distortionless Enhancement by PolarrizationTranfer Phổ DEPT Heteronuclear Single Quantum Phổtươngtácdịhạtnhân Correlation liênkết Heteronuclear Multiple Bond Phổtươngtácdịhạtnhân Coherence nhiềuliênkết s Singlet Mũiđơn brs Broad Mũirộng d Doublet Mũiđôi t Triplet Mũiba dd Doublet of doublet Mũiđôiđôi dd q Doublet of quartet Mũiđôibốn ddd Doublet of doublet of doublet Mũiđơiđơiđơi m Multiplet Mũiđa  Chemical shift Độchuyểndịchhóahọc J Coupling constant Hằngsốghép HSQC HMBC HuỳnhThịMỹNương qua qua Rp-18 Reversed Phase-18 HuỳnhThịMỹNương Phađảo C-18 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU - - Cl Chloroform H n-Hexan EtOAc Ethyl acetate MeOH Methanol EtOH Ethanol DMSO Dimthylsulfoxide MHz Mega Hertz Hz Hertz Ppm Par per million SKLM Sắckýlớpmỏng SKC Sắckýcột DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ - - Sơ đồ 2.1 Quy trình điều chế cao thơ 25 Sơ đồ 2.2 Phân lập chất 30 HuỳnhThịMỹNương DANH MỤC CÁC BẢNG - -Bảng 2.1 Kết sắc ký cột cao MeOH 26 Bảng 2.2 Kết sắc ký cột phân đoạn B2 26 Bảng 2.3 Quá trình phân lập DBM I 27 Bảng 2.4 Kết sắc ký cột phân đoạn B4 27 Bảng 2.5 Quá trình phân lập DBM II, DBM IX, DBM X 28 Bảng 2.6 Q trình sắc kí cột phân đoạn B5 28 Bảng 2.7 Quá trình phân lập DBM IV 29 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR DBM II với linocaffein 33 Bảng 3.2 Số liệu phổ DBM II 37 Bảng 3.3 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR DBM với 1-Deoxy-D-erythritol 39 Bảng3.4 Bảng liệu phổ 1H-MNR, 13C-MNR DBM IX 42 Bảng 3.5 Bảng liệu phổ 1H-MNR, 13C-MNR DBM X 44 Bảng 3.4 Kết thử nghiệm hoạt tính tăng sinh tế bào cao 47 HuỳnhThịMỹNương DANH MỤC CÁC HÌNH - Hình 1.1 Cây Tắc kè đá Hình 1.2 Lá bất thụ Hình 1.3 Lá hữu thụ Hình 3.1 Hợp chất DBM I: caffeic acid-4-O-β-D-glucopyranoside 32 Hình 3.2Tươngquan HMBCtronghợpchất DBM I……………………… 33 Hình3.3 Hợpchất DBM II………………………………………………….34 Hình3.4 Tươngquan HMBC giữanhómethoxyvới carbon anomer………35 Hình 3.5Tươngquan HMBC giữanhóm 1,3-dihydroxypropan-2-oxidanyl vớiđường glucose… ……………………………………………………………36 Hình 3.6Hợpchất DBM IV………………………………………………….38 Hình 3.7Hợpchất DBM IV………………………………………………… 39 Hình 3.8: Tươngquan HMBC củahợpchất IX………………………………40 Hình 3.9Hợpchất DBM X……………………………………………………42 Hình 3.10Tươngquan HMB DBM X………………………….… 43 HuỳnhThịMỹNương 37 drybonioside Bảng 3.2 : Số liệu phổ DBM II H, ppm (J, Hz) Vị trí MeOD, 500 MHz C,ppm MeOD, 125 MHz 4,27 (1H, d, 8,0 Hz) 3,18 (1H, dd, 8,0 9,0 Hz) 75,0 3,36 (1H, dd, 8,0 9,0 Hz) 78,1 3,30 (1H, dd; 8,0 9,0 Hz) 71,6 3,28 (1H, m) 77,9 1’ 2’ 1’’ 2’’ 3’’ 1’’’ 2’’’ 3’’’ 3,89 (1H, dd, 2.0 7,0 Hz; H-6a) 3.69 (1H, m; H-6b)] 3,98 (1H, m) 3,62 (1H, m) 1,24 (3H, t, 7.0 Hz) 3,54 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,60 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,66 (m) 3,54 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,60 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,54 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,60 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,66 (m) 3,54 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 3,60 (dd; 11,0Hz 5,0Hz) 104,1 62,7 66,1 15,4 64,4 73,8 64,4 64,4 73,8 64,4 3.3 Xác định cấu trúc hợp chấtDBM IV Hợp chất DBM IV thu dạng dầu, không màu Phổ 1H-NMR (phụ lục 3.1 3.2) cho tín hiệu cộng hưởng ứng với Huỳnh Thị Mỹ Nương 38 HO HO OH Hình 3.6 Hợp chất DBMIV diện proton H [3,77 (1H; dq; 4,5 6,5 Hz); 3,66 (1H; dd; 4,5 11,5 Hz); 3,55 (1H; dd; 6,5 11 Hz); 3,41 (1H; ddd; 4; 4,5 Hz); 1,20 (3H; d; 6,5 Hz)] Phổ 13C-NMR (phụ lục 3.3 3.4) kết hợp với kỹ thuật DEPT (phụ lục 3.5 3.6) HSQC (phụ lục 3.7 3.8) cho mũi cộng hưởng ứng với diện carbon Bao gồm có carbon methyl C [19,38], carbon bậc hai mang oxy C[76,94; 68,92] carbon bậc mang oxy C [64,45] Qua việc phân tích liệu phổ nghiệm nêu kết hợp với tài liệu tham khảo[26], (trình bày Bảng 3.5) chúng tơi xác định hợp chất DBM IV 1Deoxy-D-erythritol Bảng 3.3: Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR DBM IV với 1-Deoxy-Derythritol 1-Deoxy-D-erythritol DBM IV (MeOD) Vị trí (pyridine-d 5) DEPT δH ppm (J, Hz) −CH3 >CH− >CH− 1,20 (3H; d; 6,5) 3,77 (1H; dq; 4,5; 6,5) 3,41 (1H; ddd; 4; 4,5; 9) C ppm 19,38 68,92 76,94 3,55 (1H; dd; 6,5; −CH2− 11) 3,66 (1H; dd; 4,5; 11,5) δH ppm (J, Hz) 1,65 (3H; d; 6,5) 4,37 (1H; dq; 6,5; 6,5) 4,17 (1H; ddd; 4,5; 6,5; 6,5) C ppm 20,34 69,43 77,17 4,29 (1H; dd; 6,5; 64,45 11) 4,38 (1H; dd; 4,5; 65,13 11) Huỳnh Thị Mỹ Nương 39 3.4 Xác định cấu trúc hợp chất DBM IX Hình 3.7 Hợp chất DBM IV Hợp chất DBM IX thu có dạng bột, màu trắng ngà Phổ 1H NMR (CDCl3+MeOD) xuất tín hiệu vịng benzene lần vị trí 1,2,4 δH [6,95 (1H, d, 8.0 Hz; H-5); 6,44 (1H, dd, 2.0 8.5 Hz; H-6) 6.46 (1H, d, 2.0 Hz; H-8), vịng benzene lần vị trí 1,4 δH [7,25 (2H, d, 8,5 Hz; H-2’ H-6’) 6,85 (2H, d, 8,5 Hz; H-3’ H-5’)], proton oxymethine δH 4,92 (1H, dd, 2.0 10.0 Hz; H-2) hai nhóm methylen δH [2,06 (2H, m; H2-3)] [δH 2,70 (1H, m; H-4a) 2,87 (1H, m; H-4b)] nhóm metoxy δH 3,71 (3H, s) Phổ 13 C NMR kết hợp kỹ thuật DEPT cho thấy DBM IX có 16 carbon phân loại thành carbon methoxi δC 55,0 (C-11), carbon olefin methine [δC 129,7 (C-5); 107.0 (C-6); 101,3 (C-8); 127,3 (C-2’ C-6’); 115,1 (C-3’ C-5’); carbon sp2 bậc ba mang oxy [δ C 158,6 (C-7); 155,6 (C-9) 156,1 (C-4’)], hai carnon bậc bốn olefin [δC 113,9 (C-10) 132,6 (C-1’)], carbon sp3 oxymethine δC 77,6 hai carbon sp3 methylen [δC 29,5 (C-3) 24,2 (C-4)] Như ngồi carbon nhóm methoxi, khung sườn DBM IX có 15 carbon, số có 12 carbon sp2 carbon sp3 cho thấy cấu trúc DBM IX phải flavan Vòng benzene 1,4 hẳn phải vòng B khung flavan Trên phổ HMBC, hai proton δH 7,25 6,85 cho tương quan qua lại lẫn Huỳnh Thị Mỹ Nương 40 tương quan với carbon bậc ba mang oxi δC 156,1 khẳng định C4’ Phổ HMBC không thấy tương quan C-4’ với proto methoxi chứng tỏ C-4 mang nhóm hydroxyl Dựa vào ảnh hưởng nhóm hydroxyl C-4’, độ dịch chuyển hóa học H-2’/H-6’ 7,25 ppm H-3’/H-5’ 6,85 ppm Proton oxymethine δH 4,92 (1H, dd, 2.0 10.0 Hz) hẳn phải H-2 Trên phổ HMBC H-2 lại cho tương quan mạnh với carbon δC 24,2 tương quan yếu với với carbon δC 29,5 xác nhận hai carbon C-4 C-3 Dựa phổ HSQC, proton H-3 H-4 có độ dịch chuyển hóa học δH [2,06 (2H, m;H-3)] [δH 2,70 (1H, m; H-4a) 2,87 (1H, m; H-4b)] Phổ HMBC xuất tương quan H-4 với carbon olefin bậc bốn δC 113,9; carbon bậc ba olefin δC 129,7 carbon bậc ba mang oxi δC 155,6 chứng tỏ ba carbon C-10; C-5 C-9 Proton H-5 lại cho tương quan HMBC mạnh với carbon sp mang oxi δC 158,6 C-7, đồng thời tín hiệu proton methoxi tương quan với C-7 phổ HMBC xác nhận nhóm methoxi gắn vào C-7 Từ phân tích nêu trên, hợp chất DBM IX xác định 4’-hydroxy-7methoxyflavan Hình 3.8: Tương quan HMBC hợp chất IX Huỳnh Thị Mỹ Nương 41 Bảng 3.4 liệu phổ 1H-MNR, 13C-MNR DBM IX Vị trí H, ppm (J, Hz) C, ppm MeOH, 500 Hz) MeOH, 125 Hz 4,92 (1H, dd, 2,0 10,0 Hz) 2,06 (2H, m) 2,7 (1H, m, H-4a) 2,87 (1H, m, H-4b) 6,95 (1H, d, 8,0 Hz) 6,44 (1H, dd, 2,0 8,5 Hz) 77,6 29,5 24,2 129,7 10,0 15,6 6,46 (1H, d, 2,0 Hz) 101,3 155,6 10 113,9 11 55,0 1’ 132,6 2’ 7,25 (2H, d, 8,5 Hz) 127,3 3’ 6,85 (2H, d, 8,5Hz) 115,1 4’ 156,1 5’ 6,85 (2H, d, 8.5Hz) 115,1 6’ 7,25 (2H, d, 8,5 Hz) 127,3 3.5 Xác định cấu trúc hợp chất DBM X Hợp chất DBM X thu có dạng bột, màu trắng ngà Phổ 1H NMR (CDCl3) xuất tín hiệu vịng benzene lần vị trí 1,2,4 δH [6,97 (1H, d, 8,0 Hz; H-5); 6,48 (1H, dd, 2,0 8,5 Hz; H-6) 6,46 (1H, d, 2,0 Hz; H-8), vịng benzene lần vị trí 1,4 δH [7,29 (2H, d, 8,5 Hz; H-2’ H-6’) 6,85 (2H, d, 8,5 Hz; H-3’ H-5’)], proton oxymethine δH 4,95 (1H, dd, 2,0 Huỳnh Thị Mỹ Nương 42 ''8 O 7'' 3'' 1'' 5'' O H 2' 1' 11 H3CO O 10 5' H H Hình 3.9 Hợp chất DBM X 10,0 Hz; H-2) hai nhóm methylen δH [2,05 (1H, m; H-3a) 2,15 (1H, m; H-3b) ] [δH 2,72 (1H, m; H-4a) 2,91 (1H, m; H-4b)] , nhóm metoxy δH 3,75 (3H, s, H-11), vòng benzene lần vị trí 1,4 δH [7,95 (2H, d, 8,5 Hz; H-3’’ H-5’’) 6,85 (2H, d, 8,5 Hz; H-2’’ H-6’’)] nhóm metoxi δH 3,89 (3H, s, H-8’’) Phổ 13 C NMR kết hợp kỹ thuật DEPT cho thấy DBM IX có 24 carbon phân loại thành carbon methoxi [δC 55,3 (C-11) 52,0 (C-8’’)], 11 carbon olefin methine [δC 129,9 (C-5); 107,4 (C-6); 101,6 (C-8); 127,6 (C-2’ C-6’); 115,3 (C3’ C-5’); 115,2 (C-2’’ C-6’’); 131,9 (C-3’’ C-5’’)]; carbon sp2 bậc ba mang oxy [δC 158,9 (C-7); 155,8 (C-9) 155,4 (C-4’); 160,1 (C-1’’)], ba carbon bậc bốn olefin [δC 114,0 (C-10) 133,8 (C-1’); 122,3 (C-4’’)], carbon sp3 oxymethine δC 77,7 hai carbon sp3 methylen [δC 29,8 (C-3) 24,5 (C-4)] carbon carboxyl δC 167,3 (C -7’’) Phân tích phổ DBM X cho thấy kết phổ gần giống với phổ DBM IX.Điều chứng tỏ DBM X hợp chất flavan Điểm khác biệt DBM X có thêm vịng benzene lần vị trí 1,4; nhóm metoxi Huỳnh Thị Mỹ Nương 43 carbon carboxyl Phổ HMBC cho thấy proton metoxi δH 3,89 (3H, s, H-8’’) cho tương quan với carbon carboxyl δC 167,3 xác nhận nhóm methoxi gắn vào nhóm carboxyl Ngồi tín hiệu mang hai proton δH 7,95 (2H, d, 8,5 Hz) cho tương quan HMBC với carbon carboxyl carbon bậc ba mang oxi δC 160,1 khẳng định C-1’’ tín hiệu proton H-3’’ H-5’’ Như tín hiệu mang proton cịn lại δH 6,85 (2H, d, 8,5 Hz) phải H-2’’ H-6’’ Trên phổ HMBC, proton H2’’/H6’’ cho tương quan với carbon bậc δC 122,3 hẳn phải C-4’’ Tương quan HMBC qua bốn nối H-3’/H-5’ với C-1’’ H-2’’/H6’’ với C-4’ khẳng định vòng benzene lần vị trí 1,4 thứ hai gắn vào khung flavan C-4’ qua liên kết eter Để khẳng định them lien kết vòng B D, phổ ESI-MS (phụ lục 5.6) xuất đỉnh ion giả [M+Na]+m/z 413,4 phù hợp với công thức cộng DBM X C24H22O5 Từ phân tích nêu trên, DBM X xác định 4’-O-(4-carboxylmethyl1-phenyl)-7-methoxyflavan Theo tra cứu Scifinder hợp chất đặt tên drynaether A Hình 3.10 Tương quan HMBC vòng D DBM X Huỳnh Thị Mỹ Nương 44 Bảng 3.5: Bảng liệu phổ 1H-MNR, 13C-MNR DBM X Vị trí H, ppm (J, Hz) CDCl3, 500 MHz 4,95 (1H, dd, 2,0 10,0 Hz) 2,05 (1H,m, H-3a) C, ppm CDCl3, 125 MHz 77,7 29,8 2,15 (1H, m, H-3b) 2,72 (1H, m, H-4a) 24,5 2,91 (1H, m, H-4b) 6,97 (1H, d, 8.0 Hz) 129,9 6,48 (1H, dd, 2,0 8,5 Hz) 107,4 158,9 6,46 ( 1H, d, 2,0 Hz) 101,6 155,8 10 114,0 11 3,75 (3H, s) 1’ 55,3 133,8 2’ 7,29 (2H, d, 8,5 Hz) 127,6 3’ 6,85 (2H, d, 8,5 Hz) 115,3 4’ 155,4 5’ 6,85 (2H, d, 8,5 Hz) 115,3 6’ 7,29 (2H, d, 8,5 Hz) 127,6 1’’ 160,1 2’’ 6,85 (2H, d, 8,5 Hz) 115,2 3’’ 7,95 (2H, d, 8,5 Hz) 131,9 4’’ 122,3 5’’ 7,95 (2H, d, 8,5 Hz) 131,9 6’’ 6,85 (2H, d, 8,5 Hz) 115,2 7’’ 8’’ 167,3 3.89 (3H,s) 52,0 Huỳnh Thị Mỹ Nương 45 3.6 Kết thử hoạt tính kích thích tăng sinh tế bào Phương pháp thử nghiệm hoạt tính chống lỗng xương xác định thơng qua chế kích thích phát triển tế bào tạo xương MG63 nêu mục 2.2.3 Thử nghiệm tiến hành đại học Ajou - Hàn Quốc Các cao chiết pha nồng độ 0,01-100 µg/ml ủ với dòng tế bào MG63, theo dõi phát triển tế bào sau 24 Kết thử nghiệm trình bày bảng 3.4 Qua thử nghiệm hoạt tính tăng sinh tế bào cho thấy: - Các cao có khả tăng sinh tế bào cao cồn tổng với nồng độ 0.01(g/ml) có tỉ lệ tăng sinh tế bào 5.016%, cao hexane 0.01(g/ml) có tỉ lệ tăng sinh tế bào 9.310% cao methanol 0.01(g/ml) có tỉ lệ tăng sinh tế bào 6.164% - Các cao khơng có khả tăng sinh tế bào cao ethyl acetat cao chloroform Kết thử hoạt tính góp phần giải thích việc sử dụng tắc kè đá để điều trị bệnh xương khớp, phịng ngừa lỗng xương dân gian Huỳnh Thị Mỹ Nương 46 Bảng 3.4 Kết thử nghiệm hoạt tính tăng sinh tế bào cao Cao chiết Nồng độ (g/ml) 100.00 Cồn Hexan Ethyl acetat Chloroform Methanol Kết (%) -4.901 10.00 -5.001 1.00 5.344 0.10 5.061 0.01 5.016 100.00 -1.459 10.00 -4.285 1.00 -8.871 0.10 -4.219 0.01 9.310 100.00 -48.798 10.00 -6.384 1.00 -11.562 0.10 -8.253 0.01 -9.412 100.00 -43.513 10.00 -11.379 1.00 -22.479 0.10 -5.972 0.01 -6.269 100.00 -0.731 10.00 -19.798 1.00 -16.887 0.10 -13.015 0.01 6.164 Huỳnh Thị Mỹ Nương 47 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ - - 4.1 Kết luận Trong đề tài này, khảo sát thành phần hóa học cao methanol thu từ Tắc kè đá (Drynaria bonii H Christ) vốn chưa nghiên cứu Việt Nam giới Bằng kỹ thuật SKC silica gel pha thường SKC Sephadex LH-20 kết hợp với SKLM cô lập hợp chất Dựa vào kết phổ 1D, 2D NMR MS cấu trúc hợp chất xác định làEthyl 6- glycerylglucopyranoside (DBM II), caffeic acid 4-O-β-D glucopyranoside (linocaffein, DBM I), 1-Deoxy-D-erythritol (DBM IV), 4’-hydroxy-7- methoxyflavan (DBM IX) 4’-O-(4-carboxylmethyl-1-phenyl)-7-methoxyflavan (DBM X) Trong số chất phân lập được, có chất theo tra cứu Scifinder DBM II DBM X Kết thử nghiệm hoạt tính kết cho thấy cao ethanol ban đầu, methanol hexane có hoạt tính tăng sinh tế bào xương MG63 4.2 Kiến nghị Tiếp tục cô lập nhận danh hợp chất cao methanol cao hexane trích ly từ Tắc kè đá Tiếp tục khảo sát thành phần hóa học loài thực vật khác thuộc chi Drynaria chưa nghiên cứu Việt Nam như: Drynaria quercifolia, Drynaria propinqua, Thử nghiệm dược tính hợp chất phân lập việc điều trị bệnh Huỳnh Thị Mỹ Nương 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Janssen, T., Schneider, H Exploring the evolution of humus collecting leaves in drynarioid ferns (Polypodiaceae, polypodiidae) based on phylogenetic evidence Plant systematics and evolution 252,2005, pp 175-197 [2] Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt Nam NXB trẻ tập 1, 1999, pp 82 [3] Đỗ Tất Lợi, Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học, 2004, pp 491-493 [4] Liu Songqing, Xiao Zhuoyin, Feng Ruit, A flavonol glycoside from Drynaria propinqua, Phytochemistry, 1994, Vol 35, pp.1595-1596 [5] Mingfu Wang, Hiroe Kikuzaki, Katalin Csiszar, Charles D Boyd, Alika Maunakea, Sheri F T Fong, Geetha Ghai, Robert T Rosen, Nobuji Nakatani, Chi-Tang Ho, Novel trisaccharide fatty acid ester identified from the fruits of Morinda citrifolia (Noni), J Agric Food Chem., 1999, 47, pp 4880-4882 [6] Chang EJ et al, Proliferative effects of flavan-3-ols and propelargonidins from rhizomes of Drynaria fortunei on MCF-7 and osteblastic cells, Arch Pharm Res, 2003, Vol 26, 620-630 [7] Wu XA et al, Isolation and indentification of chemical compounds from Drynaria fortunei, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 2005, Vol 30, 443-444 [8] Li F et al, Stimulative activity of Drynaria fortunei (Kunze) J Sm extracts and two of its flavonoids on the proliferation of osteoblastic like cells”,Pharmazie, 2006, Vol 26, 962-965 [9] Xin-Luan Wang, Nai-Li Wang, Yan Zhang, Hao Gao, Wai-Pin Pang,…,Effects of eleven flavonoids from the osteoprotective fraction of Drynaria fortunei (Kunze) J Sm on osteoblastic proliferation using an osteoblast-like cell line, Chem Pharm Bull, 2008, Vol 56, 46-51 [10] Liang Yong-hong, Ye Min, Zhang Ling-zhi, Li Hui-fang, Han Jian, WangBaorong, De-an Guo, “Two new phenolic acids from Drynariae rhizome,” Acta Pharm Sin, 2010; 45(7), pp 874-878 [11] Phạm Thị Nhật Trinh Nghiên cứu thành phần hóa học thử nghiệm hoạt tính sinh học hai lồi thực vật thuộc chi Ráng (Drynaria) họ Dương xỉ Huỳnh Thị Mỹ Nương 49 (Polipodiaceae Luận án tiến sĩ hóa học Viện Khoa học Công nghệ Thành phố Hồ Chí Minh, 2013, pp 61 – 116 [12] Trần Đức, Cây thuốc Việt Nam, Nxb Nông Nghiệp Hà Nội, 2007 [13] Âu Anh Khâm, Những thuốc gia truyền chữa bệnh cho lứa tuổi, NXB Y học, 2008,pp 469-470 [14] Nguyễn Trần Giáng Hương cộng sự, “Nghiên cứu tác dụng chống viêm Cốt toái bổ (Drynaria fortunei) động vật thực nghiệm”, Tạp chí nghiên cứu Y học, 2003 [15] N Ramesh, MB Viswanathana, A Saraswathy, K Balakrishnac, P Brindha, Phytochemical and antimicrobial studies on Drynaria quercifolia, Fitoterapia, 2001, 72, 934-936 [16] Li F et al, Stimulative activity of Drynaria fortunei (Kunze) J Sm extracts and two of its flavonoids on the proliferation of osteoblastic like cells”,Pharmazie, 2006, Vol 26, 962-965 [17] Ji-Cheon Jeong et al, Stimulative effects of Drynariae Rhizoma extracts on the proliferation and differentiation of osteoblastic MC3T3-E1 Cells, Journal of Ethnopharmacology,2005, Vol 96, 489-495 [18] Chang EJ et al, Proliferative effects of flavan-3-ols and propelargonidins from rhizomes of Drynaria fortunei on MCF-7 and osteblastic cells, Arch Pharm Res, 2003, Vol 26, 620-630 [19] Guo-Chung Dong, Hueih Min Chen, Chun-Hsu Yao (2007) A novel bone substitute composite composed of tricalcium phosphate, gelatin and Drynaria fortunei herbal extract Biomedical Materials Research Part A 84A(1): 167 – 177 [20] Mian Long, Dan Qiu, Fangrong Li, Francis Johnson and Benjamin Luft, “Flavonoid of Drynaria fortunei Protects Against Acute Renal Failure,” Phytother.Res., 2005;19, pp 422-427 [21] Ricky W.K Wong and A Bakr M Rabie, “Sytemic Effect of Crude Extract from Rhizome of Drynaria fortunei on Bone Formation in Mice,” Phytother Res., 2006; 20, pp 313-315 Huỳnh Thị Mỹ Nương 50 [22] Nguyễn Kim Phi Phụng Phương pháp cô lập hợp chất hữu NXB đại học quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, 2007 [23] Jun Sun, Fengyu Song, Weiping Zhang, Brent E Sexton, L Jack Windsor, “Effects of alendronate on human osteoblast-like MG63 cells and matrix metalloproteinases,” Archives of oral biology, 2012; 57, pp 728-736 [24] Yong-hong Liang et al, A new chiratane type triterpenoid from the rhizomes of Drynaria fortunei, Fitoterapia, 2010 [25] Xin–Luan–Wang, Wang Naili, Gao Hao, ZhangGe, Qin Ling, Wong MS, Yao Xinsheng, “Phenylpropanoid and flavonoids from osteoprotective fraction of Drynaria fortune,” Natural Product Research, 2010; 24, pp 1206-1213 [26] Toru Ishikawa, Yukiko Sega and Junichi Kitajima Water-Soluble Constituents of Ajowan Vol 49, No 7, 2001, pp 840-844 Huỳnh Thị Mỹ Nương LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: HUỲNH THỊ MỸ NƯƠNG Ngày sinh: 01/12/1988 Nơi sinh: Tỉnh TT HUẾ Địa liên lạc: 2/3 - Tăng Nhơn Phú - Phường Phước Long B - Quận HCM QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO Từ năm 2007 - 2011: học đại học trường Đại học Sư Phạm Từ năm 2012 đến nay: học cao học trường Đại học Bách Khoa Thành Phố Hồ Chí Minh Q TRÌNH CƠNG TÁC Tháng 07/2011 - nay: - Làm việc công ty liên doanh BiO-Pharmarchemie - Quận 9- HCM - Đi học trường Đại học Bách Khoa Thành phố Hồ Chí Minh thực luận văn phòng Hợp Chất Thiên Nhiên - Viện Khoa học Công nghệ ... Huế Chuyên ngành :Hóa Hữu Cơ Mã số : I TÊN ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO METANOL CỦA CÂY TẮC KÈ ĐÁ (DRYNARIA BONII)? ?? II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Điều chế cao tổng cao phân đoạn -... 1.4 Thành phần hóa học 1.4.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước Ở ngồi nước, chưa có cơng trình nghiên cứu Drynaria bonii, chúng tơi giới thiệu thành phần hóa học số loài thuộc chi Drynaria nghiên cứu. .. dùng nghiên cứu Mẫu nguyên liệu giám định tên khoa học TS Lưu Hồng Trường, Viện Sinh thái học miền nam 2.3.2Điều chế cao thô từ thân rễ tắc kè đá Thân rễ Tắc kè đá phơi khô, sấy nghiền nhỏ thành