Bùi trung hiếu nghiên cứu bào chế viên nén nổi diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài khóa luận tốt nghiệp dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI TRUNG HIẾU NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÙI TRUNG HIẾU MÃ SINH VIÊN: 1801229 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Thị Thanh Duyên DS Nguyễn Thanh Tùng Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp dược HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PSG TS Nguyễn Thị Thanh Duyên, người cô tận tình bảo, quan tâm, động viên cho em lời khuyên quý giá trình thực đề tài khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS Phạm Văn Hùng, người thầy dành nhiều thời gian để quan tâm, giúp đỡ, chia sẻ nhiều câu chuyện công việc sống định hướng cho em nhiều hướng đắn suốt trình thực đề tài Em xin cảm ơn DS Nguyễn Thanh Tùng, người anh đồng hành cho em nhiều lời khun bổ ích đường thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Công nghiệp Dược Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia – Trường Đại học Dược Hà Nội giúp đỡ tạo nhiều điều kiện thuận lợi để em hoàn thành khóa luận Em xin cảm ơn Ban giám hiệu, thầy cô giáo Trường Đại học Dược Hà Nội, suốt năm học đại học truyền đạt cho em kiến thức vô quý báu để em tự tin tháng ngày tới Em xin gửi lời cảm ơn đến bạn Ngơ Phước Long, Hồng Thị Lam, Đỗ Bảo Nam, Trương Huy Khôi, Đỗ Thị Hồng Hạnh – người bạn đồng hành phịng thí nghiệm Cơng nghiệp dược suốt năm qua Em xin cảm ơn chị Hoàng Thị Ánh Nhật anh chị K72 truyền đạt lại nhiều kinh nghiệm cho em năm nghiên cứu khoa học Em xin cảm ơn em Đinh Thị Thu Uyên em K74 – người em nhiệt tình giúp đỡ em q trình thực khóa luận tốt nghiệp Và cuối cùng, em xin dành biết ơn sâu sắc tới bố mẹ người thân gia đình - người ln hậu phương vững chắc, động lực tinh thần, người ủng hộ, cổ vũ em bước đường Hà Nội, ngày 05 tháng 06 năm 2023 Sinh viên Bùi Trung Hiếu MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG, BIỂU DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC CHẤT DILTIAZEM HYDROCLORID 1.1.1 Công thức hóa học 1.1.2 Tính chất vật lý, hóa học đặc tính sinh dược học 1.1.3 Độ ổn định 1.1.4 Dược động học 1.1.5 Chỉ định liều dùng 1.1.6 Một số chế phẩm chứa diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 1.2 SƠ LƯỢC VỀ THUỐC GIẢI PHÓNG KÉO DÀI 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Một số hệ thuốc giải phóng kéo dài 1.3 TỔNG QUAN VỀ HỆ KIỂM SOÁT GIẢI PHÓNG TẠI DẠ DÀY VÀ HỆ NỔI TẠI DẠ DÀY 1.3.1 Khái niệm ứng dụng hệ kiểm sốt giải phóng thuốc dày 1.3.2 Phân loại hệ kiểm soát giải phóng thuốc dày 1.3.3 Khái niệm hệ 1.3.4 Phân loại hệ 1.3.5 Một số tá dược sử dụng hệ 11 1.3.6 Ưu nhược điểm hệ 11 1.3.7 Các yếu tố ảnh hưởng đến hệ 11 1.3.8 Một số biệt dược có cấu trúc hệ 12 1.4 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ HỆ NỔI 12 1.4.1 Nghiên cứu nước 12 1.4.2 Nghiên cứu nước 14 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ 16 2.1.1 Nguyên liệu 16 2.1.2 Thiết bị 16 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 17 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.3.1 Phương pháp bào chế 17 2.3.2 Phương pháp quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa cơng thức viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 18 2.3.3 Phương pháp đánh giá 18 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu trình bày kết 23 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1 NGHIÊN CỨU TIỀN CÔNG THỨC 24 3.1.1 Xây dựng thẩm định số tiêu phương pháp định lượng dược chất viên nén diltiazem hydroclorid 24 3.1.2 Kết đánh giá số tính chất dược chất diltiazem hydroclorid dùng nghiên cứu 25 3.2 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG CÔNG THỨC BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI 26 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng loại polyme đến khả khả giải phóng dược chất viên 26 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng lượng polyme đến khả khả giải phóng dược chất viên 27 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng tá dược tạo khí NaHCO3 đến khả khả giải phóng dược chất viên 30 3.2.4 Khảo sát ảnh hưởng dung mơi pha tá dược dính đến khả khả giải phóng dược chất viên 32 3.2.5 Khảo sát ảnh hưởng tá dược độn đến khả khả giải phóng dược chất viên 33 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng tá dược acid citric đến khả khả giải phóng dược chất viên 35 3.2.7 Khảo sát ảnh hưởng lực gây vỡ viên đến khả khả giải phóng dược chất viên 36 3.2.8 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thời gian bảo quan đến khả khả giải phóng dược chất viên 37 3.2.9 Khảo sát ảnh hưởng thay đổi NaHCO3 KHCO3 đến khả khả giải phóng dược chất viên 38 3.2.10 Quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa cơng thức viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 40 3.2.11 Động học q trình giải phóng dược chất từ viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài bào chế theo công thức tối ưu 45 3.2.12 Đánh giá độ hòa tan viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài mơi trường pH khác 45 3.3 BÀN LUẬN 48 3.3.1 Thành phần công thức 48 3.3.2 Quy trình bào chế 48 3.3.3 Chất lượng đầu viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 49 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Phần viết đầy đủ Phần viết tắt BCS Biopharmaceutics classification system (Hệ thống phân loại BĐM sinh dược học bào chế) Bình định mức CT DCP Công thức Dicalci phosphat dihydrat DĐVN DTZ Dược điển Việt Nam Diltiazem hydroclorid ĐHT ĐK EtOH Độ hòa tan Điều kiện Ethanol FDM FT GET GPKD GRT Fused deposition modeling (Mơ hình sợi nóng chảy) Thời gian Gastric emptying times (Thời gian tháo rỗng dày) Giải phóng kéo dài Gastric residence times (Thời gian lưu dày) Hydrodynamically balanced systems (Hệ thống cân thủy HBS HEC động) Hydroxyethyl cellulose HPC HPMC IPA MgSt NaCMC PEO PVP Hydroxypropyl cellulose Hydroxypropyl methylcellulose Isopropanol Magnesi stearat Natri carboxymethyl cellulose Polythylen oxyd Polyvinyl pyrrolidon RSD STT TB Tlag USP Vđ Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) Số thứ tự Trung bình Thời gian tiền United States Pharmacopeia (Dược điển Mỹ) Vừa đủ DANH MỤC BẢNG, BIỂU Bảng 1.1 Một số chế phẩm chứa diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài thị trường [45], [46], [47], [48] Bảng 1.2 Một số nghiên cứu ứng dụng công nghệ in FDM vào bào chế hệ [41] 10 Bảng 1.3 Một số biệt dược có cấu trúc hệ [20], [26] 12 Bảng 2.1 Các nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.3 Thành phần dự kiến viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 17 Bảng 2.4 Khoảng biến thiên mục tiêu biến đầu 18 Bảng 2.5 Tương quan số Carr độ trơn chảy bột [1] 19 Bảng 2.6 Giới hạn độ hòa tan cần đạt theo yêu cầu USP 2021 [42] 21 Bảng 3.1 Kết thẩm định tính đặc hiệu 24 Bảng 3.2 Kết thẩm định tính tuyến tính 24 Bảng 3.3 Kết thẩm định độ 25 Bảng 3.4 Kết thẩm định độ lặp lại độ xác trung gian 25 Bảng 3.5 Công thức viên nén sử dụng loại polyme khác 26 Bảng 3.6 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát loại polyme (TB ± SD, n = 3) 26 Bảng 3.7 Công thức viên sử dụng lượng polyme HPMC K100M khác 28 Bảng 3.8 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát lượng polyme (TB ± SD, n = 3) 28 Bảng 3.9 Công thức viên sử dụng lượng polyme HPMC K100M khác 29 Bảng 3.10 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên công thức 8, 9, 10, 11 khảo sát lượng tá dược polyme (TB ± SD, n = 3) 29 Bảng 3.11 Công thức viên sử dụng lượng NaHCO3 khác 30 Bảng 3.12 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát lượng tá dược tạo khí (TB ± SD, n = 3) 30 Bảng 3.13 Công thức viên sử dụng dung môi pha tá dược dính khác 32 Bảng 3.14 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát loại dung mơi pha tá dược dính (TB ± SD, n = 3) 32 Bảng 3.15 Công thức viên sử dụng loại tá dược độn khác 33 Bảng 3.16 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát tá dược độn (TB ± SD, n = 3) 33 Bảng 3.17 Công thức viên sử dụng lượng acid citric khác 35 Bảng 3.18 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát tá dược acid citric (TB ± SD, n = 3) 35 Bảng 3.19 Cơng thức viên có lực gây vỡ viên khác 36 Bảng 3.20 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát lực gây vỡ viên (TB ± SD, n = 3) 36 Bảng 3.21 Công thức khảo sát nhiệt độ thời gian bảo quản viên nén 37 Bảng 3.22 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát nhiệt độ, thời gian bảo quản viên (TB ± SD, n = 3) 38 Bảng 3.23 Công thức khảo sát ảnh hưởng muối KHCO3 38 Bảng 3.24 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên khảo sát muối KHCO3 (TB ± SD, n = 3) 39 Bảng 3.25 Các biến đầu vào lựa chọn quy hoạch thực nghiệm 40 Bảng 3.26 Các công thức thiết kế quy hoạch thực nghiệm 40 Bảng 3.27 Kết giá trị thực nghiệm biến đầu 40 Bảng 3.28 Kết phương trình hồi quy tìm 41 Bảng 3.29 Giá trị biến đầu vào biến đầu có cơng thức tối ưu 43 Bảng 3.30 Kết đánh giá số tiêu chất lượng hạt viên 44 Bảng 3.31 Kết thử hòa tan công thức tối ưu 44 Bảng 3.32 Một số tiêu chất lượng đề xuất cho viên nén diltiazem hydroclorid giải phóng kéo dài 45 Bảng 3.33 Điều kiện tiến hành thí nghiệm chứng minh ưu điểm hệ 45 Bảng 3.34 Thời gian tiền nổi, thời gian mẫu viên thí nghiệm chứng minh ưu điểm hệ (TB ± SD, n = 3) 46 DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơng thức hóa học dược chất diltiazem hydroclorid Hình 1.2 Đồ thị biểu diễn độ tan diltiazem hydroclorid theo pH [35] Hình 1.3 Đồ thị biểu diễn biến thiên nồng độ dược chất máu số dạng thuốc Hình 1.4 Phân loại hệ kiểm sốt giải phóng thuốc dày [41] Hình 1.5 Nguyên lý cấu tạo viên nén lớp theo chế tạo khí Hình 1.6 Cơ chế giải phóng dược chất hệ thống cân thủy động Hình 1.7 Nguyên lý phương pháp khuếch tán dung môi bay để tạo vi cầu rỗng Hình 1.8 Một số kỹ thuật in 3D ứng dụng sản xuất dược phẩm [41] 10 Hình 3.1 Mối quan hệ giá trị độ hấp thụ nồng độ dược chất diltiazem hydroclorid 24 Hình 3.2 Hình dạng tinh thể dược chất diltiazem hydroclorid quan sát kính hiển vi quang học 26 Hình 3.3 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT1, CT2, CT3, CT4, CT5 27 Hình 3.4 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT5, CT6, CT7, CT 8, CT 28 Hình 3.5 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT 8, CT 9, CT 10, CT 11 30 Hình 3.6 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT10, CT12, CT13, CT14 31 Hình 3.7 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT13, CT15, CT16, CT17 32 Hình 3.8 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT13, CT18, CT19, CT20 34 Hình 3.9 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT 18, CT 21, CT 22 35 Hình 3.10 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT 18, CT 18.1, CT 18.2 36 Hình 3.11 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT 18 điều kiện bảo quản khác 38 Hình 3.12 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT18, CT23 39 Hình 3.13 Hình biểu diễn mối quan hệ biến đầu Y4 biến đầu vào 41 Hình 3.14 Miền giá trị biến đầu vào để biến đầu đạt yêu cầu 42 Hình 3.15 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên môi trường pH 46 Website 45 Cổng Thông tin điện tử Bộ Y tế (2023), https://moh.gov.vn/, (truy cập gần 46 lúc 8h00 ngày 05/06/2023) Cục quản lý dược (2023), Ngân hàng liệu ngành dược https://drugbank.vn/timkiem?search=diltiazem&entity=hoatChat&page=1&size=12, (truy cập gần lúc 8h00 ngày 05/06/2023) 47 EMC (2023), https://www.medicines.org.uk/emc/search?q=diltiazem, (truy cập gần lúc 8h00 ngày 05/06/2023) 48 Trang Thông tin điện tử Thư viện y học quốc gia Hoa Kỳ (2023), https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/drugInfo.cfm?setid=fe790439-85d44cd8-a385-149ea3442a38, (truy cập gần lúc 8h00 ngày 05/06/2023) PHỤ LỤC Phụ lục PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT DILTIAZEM HYDROCLORID BẰNG QUANG PHỔ HẤP THỤ TỬ NGOẠI Phụ lục KẾT QUẢ THỬ HỊA TAN TRONG NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG CƠNG THỨC BÀO CHẾ VIÊN NÉN HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI Phụ lục MỘT SỐ KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ KHÁC PL1 NỔI DILTIAZEM Phụ lục PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT DILTIAZEM HYDROCLORID BẰNG QUANG PHỔ HẤP THỤ TỬ NGOẠI ➢ Tính đặc hiệu Chuẩn bị mẫu: Mẫu tá dược (P): Các tá dược với tỷ lệ lớn dự định khảo sát (nếu tá dược tan hồn tồn dung mơi pha mẫu) Mẫu chuẩn (S): Pha loãng chất chuẩn đến nồng độ phần định lượng Mẫu thử (T): Bao gồm dược chất tá dược với tỷ lệ lớn dự định khảo sát Mẫu trắng (B): Dung môi pha mẫu Tiến hành: Đo giá trị độ hấp thụ mẫu P, T, S bước sóng 236nm với mẫu trắng B Đánh giá ảnh hưởng tá dược đến độ hấp thụ: Tá dược đánh giá không làm ảnh hưởng đến độ hấp thụ dược chất “Hàm lượng” (giá trị độ hấp thụ) dung dịch P không 2,0 % so với dung dịch T Các dung dịch dùng để thẩm định tính đặc hiệu Mẫu chuẩn gốc: Cân lượng DTZ xác khoảng 60mg chuyển vào BĐM 50mL, thêm khoảng 30mL methanol, siêu âm 30 phút Thêm methanol vừa đủ, lắc đều, đem ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch trong, thu mẫu chuẩn gốc Mẫu chuẩn (S): Hút xác 1,0ml mẫu chuẩn gốc cho vào BĐM 100ml, thêm nước tinh khiết vừa đủ, lắc Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch trong, thu mẫu chuẩn (S) Mẫu tá dược gốc: Cân tá dược công thức với tỷ lệ khảo sát cao chuyển vào BĐM 50mL, thêm khoảng 30mL methanol, siêu âm 30 phút để thành phần tan hết phân tán Thêm methanol đến đủ thể tích, lắc đều, đem ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch thu mẫu tá dược gốc Mẫu tá dược (P): Hút xác 1,0 mL mẫu tá dược gốc cho vào BĐM 100 mL, thêm nước tinh khiết vừa đủ, lắc Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch trong, thu mẫu tá dược P Mẫu thử (T): Hút xác 1,0 mL mẫu dược chất gốc 1,0 mL mẫu tá dược gốc cho vào BĐM 100 mL, thêm nước tinh khiết vừa đủ, lắc Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch trong, thu mẫu thử T (nồng độ xác khoảng 12 µg/mL) Mẫu trắng (B): Hút xác 1,0 mL methanol cho vào BĐM 100 mL Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch trong, thu mẫu trắng PL2 ➢ Tính tuyến tính Pha dãy dung dịch chuẩn diltiazem hydroclorid: 12,5%, 25%, 50%, 80%, 100%, 120% 150% nồng độ định lượng dung mơi pha mẫu (Tương ứng với 1,5;3;6;9,6;12;14,4;16 µg/mL) Đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng 236nm, mẫu trắng dung mơi pha mẫu Xây dựng mơ hình tuyến tính biểu diễn mối tương quan độ hấp thụ (A) nồng độ dung dịch C: Y= ax+b Hệ số tương quan (R2) phản ánh độ tuyến tính phương pháp Mơ hình tuyến tính coi phù hợp hệ số tương quan (R2) ≥ 0,996 Cách pha dung dịch để xác định tính tuyến tính: Dung dịch C0 (nồng độ 120µg/mL): cân xác 60,0mg DTZ cho vào BĐM 50ml Thêm 30ml MeOH Siêu âm 30 phút Bổ sung MeOH (hoặc nước cất) đến vạch Ly tâm tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút gạn lấy dịch Hút xác 10mL dịch cho vào BĐM 100mL, định mức vừa đủ nước cất Lọc qua giấy lọc (bỏ 15 – 20mL dịch lọc đầu) thu dung dịch có nồng độ xác khoảng 120µg/mL Dung dịch C1 (nồng độ 12µg/mL): hút xác 10mL dung dịch Co cho vào BĐM 100mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C2 (nồng độ 9,6µg/mL): hút xác 2mL dung dịch Co cho vào BĐM 25mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C3 (nồng độ 6µg/mL): hút xác 5mL dung dịch Co cho vào BĐM 100mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C4 (nồng độ 3µg/mL): hút xác 10mL dung dịch C3 cho vào BĐM 20mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C5 (nồng độ 1,5µg/mL): hút xác 10mL dung dịch C4 cho vào BĐM 20mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C6 (nồng độ 14,4µg/mL): hút xác 3mL dung dịch Co cho vào BĐM 25mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc Dung dịch C7 (nồng độ 16 µg/mL): hút xác 3mL dung dịch Co cho vào BĐM 20mL Định mức vừa đủ nước cất, lắc ➢ Độ Chuẩn bị loại mẫu tự tạo có hàm lượng dược chất xác khoảng 75,0%; 100,0%; 125,0% (ký hiệu T1, T2, T3) so với hàm lượng dược chất công thức bào chế (90mg; 120mg; 150mg) Pha lỗng dung mơi pha mẫu đến nồng độ dược chất thích hợp (nằm khoảng tuyến tính xây dựng), định lượng dược chất mẫu, xác định tỷ lệ thu hồi Với loại mẫu, định lượng lặp lại lần Yêu cầu: Phương pháp đánh giá đạt độ tỷ lệ thu hồi trung bình nồng độ phải nằm khoảng 98,0 – 102,0 % độ lệch chuẩn tương đối (RSD) không PL3 2,0% ➢ Độ lặp lại Định lượng dược chất mẫu T2, thực lặp lại lần liên tiếp, xác định độ lệch chuẩn tương đối Yêu cầu: Phương pháp đánh giá đạt độ lặp lại độ lệch chuẩn tương đối (RSD) không 2,0 % ➢ Độ xác trung gian Thực phương pháp phần đánh giá độ lặp lại, thực ngày khác Xác định độ lệch chuẩn tương đối so sánh giá trị kết trung bình Yêu cầu: Phương pháp đánh giá đạt độ xác trung gian độ lệch chuẩn tương đối ngày (RSD) không 2,0 % Các dung dịch dùng để thẩm định độ đúng, độ lặp lại độ xác trung gian Cân lượng diltiazem hydroclorid xác khoảng 90,0 mg, 120,0 mg, 150,0 mg (tương ứng với mẫu thử T1, T2, T3) chuyển vào BĐM 100 mL Cân tá dược cơng thức, tá dược xác khoảng 60,0 mg chuyển vào BĐM 50 mL trên, thêm khoảng 30 mL methanol, siêu âm 30 phút để thành phần hịa tan hồn tồn phân tán Thêm methanol đến vừa đủ thể tích, lắc đều, ly tâm 25 mL dịch với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch Hút xác 1,0 mL dịch cho vào BĐM 100 mL, thêm nước tinh khiết đến vạch, lắc Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút 15 phút, gạn lấy dịch thu dung dịch thử T1, T2, T3 có nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng μg/mL, 12 μg/mL, 15 μg/mL PL4 Phụ lục KẾT QUẢ THỬ ĐỘ HÒA TAN TRONG NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG CÔNG THỨC BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI Bảng PL1 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng từ khảo sát loại polyme (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 99,95 ± 100,02 ± 11,32 ± 8,95 ± 8,74 ± 0,12 0,04 0,72 0,75 0,40 19,00 ± 16,89 ± 16,02 ± 1,23 1,57 1,07 33,26 ± 30,91 ± 28,15 ± 0,31 0,38 0,82 44,85 ± 40,65 ± 35,43 ± 2,16 0,32 1,46 56,92 ± 52,37 ± 48,21 ± 1,11 1,46 3,39 71,40 ± 67,22 ± 60,92 ± 12 1,18 1,38 1,88 98,12 ± 98,11 ± 97,33 ± 30 0,98 1,34 2,52 Bảng PL2 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng khảo sát lượng polyme (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT CT CT CT 10,25 ± 1,21 10,10 ± 0,76 9,32 ± 0,91 9,79 ± 0,45 17,75 ± 0,88 16, 95 ± 1,67 15,43 ± 1,83 16,31 ± 0,04 29,62 ± 1,27 27,56 ± 2,01 25,34 ± 0,17 25,37 ± 0,21 38,57 ± 0,14 37,34 ± 1,45 32,62 ± 0,74 34,44 ± 0,85 51,76 ± 0,67 50,44 ± 0,24 44,22 ± 0,53 45,48 ± 1,00 12 64,23 ± 0,16 64,66 ± 1,54 54,11 ± 1,02 55,28 ± 0,16 30 98,96 ± 1,59 97,78 ± 1,29 91.33 ± 1,25 93,41 ± 2,09 Bảng PL3 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức 8, 9, 10, 11 khảo sát lượng polyme (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT CT CT 10 CT 11 9,32 ± 0,91 9,79 ± 0,45 8,64 ± 0,39 8,06 ± 0,00 15,43 ± 1,83 16,31 ± 0,04 14,60 ± 0,14 12,98 ± 0,32 25,34 ± 0,17 25,37 ± 0,21 23,83 ± 0,38 22,29 ± 1,26 32,62 ± 0,74 34,44 ± 0,85 31,17 ± 0,02 31,74 ± 0,29 44,22 ± 0,53 45,48 ± 1,00 43,57 ± 0,32 41,59 ± 1,54 12 54,11 ± 1,02 55,28 ± 0,16 55,14 ± 0,57 55,10 ± 0,23 30 91.33 ± 1,25 93,41 ± 2,09 94,78 ± 0,17 90,48 ± 0,20 PL5 Bảng PL4 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng công thức khảo sát lượng tá dược tạo khí (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT10 CT12 CT13 CT14 12 30 8,64 ± 0,39 14,60 ± 0,14 23,83 ± 0,38 31,17 ± 0,02 43,57 ± 0,32 55,14 ± 0,57 94,78 ± 0,17 12,28 ± 1,09 18,51 ± 1,14 27,36 ± 1,28 34,26 ± 0,35 46,40 ± 0,35 56,85 ± 0,72 93,27 ± 2,78 7,01 ± 0,77 12,96 ± 0,45 22,86 ± 1,29 31,29 ± 3,01 43,75 ± 0,11 52,75 ± 0,60 93,95 ± 2,25 5,53 ± 1,71 12,76 ± 0,64 22,94 ± 0,97 30,45 ± 0,11 41,96 ± 0,58 51,60 ± 1,45 93,53 ± 2,53 Bảng PL5 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát loại dung mơi pha tá dược dính (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT13 CT15 CT16 CT17 12 30 7,01 ± 0,77 12,96 ± 0,45 22,86 ± 1,29 31,29 ± 3,01 43,75 ± 0,11 52,75 ± 0,60 93,95 ± 2,25 6,58 ± 0,57 11,54 ± 1,58 21,02 ± 2,19 29,43 ± 1,98 43,12 ± 0,24 49,77 ± 1,72 88,82 ± 0,81 7,12 ± 0,39 11,72 ± 1,23 20,82 ± 0,75 29,15 ± 0,97 40,25 ± 0,07 50,25 ± 0,13 90,94 ± 1,26 6,68 ± 1,01 12,03 ± 0,52 22,94 ± 0,02 30,06 ± 1,16 42,75 ± 2,36 51, 87 ± 1,04 90,63 ± 1,63 Bảng PL6 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát tá dược độn (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT13 CT18 CT19 CT20 7,01 ± 0,77 5,52 ± 0,03 7,20 ± 1,07 4,47 ± 0,11 12,96 ± 0,45 11,23 ± 0,87 12,59 ± 0,11 10,65 ± 0,23 22,86 ± 1,29 20,77 ± 1,39 23,33 ± 1,78 18,37 ± 0,17 31,29 ± 3,01 27,54 ± 1,67 33,93 ± 3,12 27,52 ± 0,30 43,75 ± 0,11 36,06 ± 1,92 44,26 ± 1,15 37,87 ± 0,47 12 52,75 ± 0,60 44,04 ± 2,10 53,17 ± 0,46 46,60 ± 0,07 30 93,95 ± 2,25 88,75 ± 2,67 91,03 ± 2,94 90,68 ± 3,59 Bảng PL7 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát tá dược acid citric (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT18 CT21 CT22 5,52 ± 0,03 8,27 ± 0,14 11,50 ± 0,59 11,23 ± 0,87 12,17 ± 0,06 15,71 ± 0,68 20,77 ± 1,39 22,14 ± 0,41 22,81 ± 0,87 27,54 ± 1,67 28,65 ± 0,35 29,07 ± 1,07 36,06 ± 1,92 37,35 ± 0,19 39,79 ± 0,55 PL6 12 30 44,04 ± 2,10 88,75 ± 2,67 47,04 ± 1,74 93,76 ± 4,47 50,94 ± 1,24 94,46 ± 2,28 Bảng PL8 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát lực gây vỡ viên (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT18 CT18.1 CT18.2 5,52 ± 0,03 5,31 ± 0,49 5,16 ± 0,27 11,23 ± 0,87 10,36 ± 0,01 9,49 ± 0,14 20,77 ± 1,39 22,27 ± 0,23 19,96 ± 0,31 27,54 ± 1,67 31,56 ± 2,47 26,12 ± 0,05 36,06 ± 1,92 41,49 ± 1,46 35,96 ± 1,00 12 44,04 ± 2,10 48,44 ± 1,65 44,74 ± 1,05 30 88,75 ± 2,67 92,60 ± 0,70 94,53 ± 0,93 Bảng PL9 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát nhiệt độ, thời gian bảo quản viên (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) ĐK ĐK ĐK ĐK 5,14 ± 0,47 5,22 ± 0,12 5,37 ± 0,98 5,11 ± 0,25 9,16 ± 0,89 9,33 ± 0,49 9,20 ± 0,04 9,81 ± 0,36 17,96 ± 1,08 18,65 ± 1,40 17,68 ± 0,67 18,62 ± 0,69 27,05 ± 1,31 26,21 ± 0,35 26,87 ± 1,05 26,87 ± 1,27 34,73 ± 0,96 35,61 ± 2,29 35,36 ± 0,87 36,26 ± 0,17 12 43,68 ± 0,56 44,94 ± 0,58 43,84 ± 0,70 44,65 ± 0,14 30 86,76 ± 1,87 87,87 ± 2,01 87,23 ± 1,95 89,26 ± 1,89 Bảng PL10 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát muối KHCO3 (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) CT18 CT23 5,52 ± 0,03 4,53 ± 0,21 11,23 ± 0,87 8,36 ± 0,78 20,77 ± 1,39 15,74 ± 1,74 27,54 ± 1,67 24,19 ± 0,96 36,06 ± 1,92 34,23 ± 1,01 12 44,04 ± 2,10 45,97 ± 0,02 30 88,75 ± 2,67 88,44 ± 1,56 Bảng PL11 Tỷ lệ (%) DTZ giải phóng khảo sát chứng minh ưu điểm viên nén diltiazem hydroclorid (TB ± SD) Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) Thời điểm (giờ) ĐK ĐK ĐK 4,22 ± 0,59 3,74 ± 0,31 2,69 ± 0,20 8,45 ± 0,42 7,56 ± 0,32 4,82 ± 0,79 14,38 ± 0,73 10,25 ± 0,53 7,80 ± 1,39 PL7 12 30 22,72 ± 0,45 32,86 ± 1,42 45,79 ± 2,97 92,00 ± 1,18 10,33 ± 0,63 17,61 ± 0,77 26,46 ± 2,10 58,28 ± 2,25 PL8 11,98 ± 1,49 19,70 ± 2,07 27,85 ± 0,53 59,23 ± 0,53 Phụ lục MỘT SỐ KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ KHÁC PL 3.1 KÉT QUẢ NGHIÊN CỨU MƠ HÌNH ĐỘNG HỌC GIẢI PHĨNG DILTIAZEM HYDROCLORID TỪ MẪU VIÊN CƠNG THỨC TỐI ƯU Bảng PL12 Sự phù hợp mơ hình động học q trình giải phóng dược chất thực nghiệm từ mẫu viên cơng thức tối ưu Mơ hình R2hc AIC Bậc 0,9834 39,3166 Bậc 0,8898 54,4462 Higuchi 0,8666 55,9719 Korsmeyer-Peppas 0,9937 32,2887 Hixson-Crowell 0,9721 43,4627 Hopfenberg 0,9911 35,0829 Baker-Lonsdale 0,3239 68,9551 Weibull 0,9645 46,6988 CT tối ưu 100 Observed Predicted Fraction dissolved (%) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 10 15 20 Time (h) 25 30 35 Hình PL1 Đường cong giải phóng theo mơ hình Kormeyer-Peppas theo dự đốn DDsolver 1.0 PL 3.2 MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG THÍ NGHIỆM CHỨNG MINH ƯU ĐIỂM CỦA HỆ NỔI PL 3.2.1 Hình ảnh mẫu viên ĐK tiến hành chuyển mơi trường thử hịa tan Nhận xét: Khi tiến hành thay đổi mơi trường thử hịa tan, mẫu viên TN có xu hướng trương nở chút so với viên nén ban đầu PL9 Hình PL2 Hình ảnh mẫu viên ĐK tiến hành chuyển môi trường thử hịa tan PL 3.2.2 Hình ảnh mẫu viên sau tiến hành thử độ hòa tan Mẫu viên CT tối ưu Mẫu viên CT tối ưu Mẫu viên CT tối ưu ĐK ĐK ĐK Hình PL3 Hình ảnh mẫu viên CT tối ưu sau q trình thử độ hịa tan thí nghiệm chứng minh ưu điểm hệ Nhận xét: Sau trình thử độ hịa tan, nhận thấy mẫu viên TN có kích thước nhỏ hẳn so với mẫu viên TN TN Lý dược chất bị hòa tan nhiều ăn cốt viên bị ăn mòn nhiều thử điều kiện pH 6,8 Mặt khác, mặt mẫu viên CT chưa bị thấm ướt PL 3.2.3 Hình ảnh mặt cắt mẫu viên sau tiến hành thử độ hịa tan Hình PL4 Hình ảnh mặt cắt mẫu viên sau tiến hành thử độ hòa tan PL10 Nhận xét: Lõi viên mẫu viên TN TN cịn khơ, chứng minh mơi trường thử hòa tan chưa thấm sâu vào viên Lõi viên mẫu viên TN thấm ướt gần hết PL 3.3 QUÁ TRÌNH NỔI IN VITRO CỦA VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID Hình PL5 Quá trình in vitro mẫu viên cơng thức 18 PL 3.4 HÌNH ẢNH VIÊN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID SAU KHI THỬ HỊA TAN 30 GIỜ Hình PL6 Hình ảnh mẫu viên CT 18 sau thử hòa tan 30 PL11 Nhận xét: Sau thời gian 30 thử hòa tan, viên nén diltiazem lớp cốt dày dược chất giải phóng gần hết (hầu hết mẫu viên thời điểm 30 giờ, dược chất DTZ giải phóng 90%) Viên trương nở có kích thước to so với viên ban đầu Những hình ảnh dự đốn dược chất diltiazem hydroclorid giải phóng theo chế khuếch tán PL 3.5 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG KHI KẾT HỢP POLYME HPMC K100M VỚI PEO Sau tiến hành đánh giá ảnh hưởng NaHCO3 đến khả giải phóng dược chất viên, nhận thấy thời điểm 12 giờ, dược chất giải phóng gần với cận so với yêu cầu dược điển Vì vậy, tiến hành khảo sát ảnh hưởng kết hợp polyme HPMC K100M với POLYOX™ WSR-303, giữ nguyên lượng polyme sử dụng viên 467,00 mg Khảo sát mức POLYOX™ WSR-303 2%, 3%, 5% 10% so với khối lượng viên Bảng PL13 Công thức viên sử dụng loại tá dược độn khác CT PL1 CT PL2 CT PL3 CT PL4 Lượng PEO sử dụng 20 30 50 100 (mg/ viên) Chú thích: Mỗi cơng thức có thành phần cố định: diltiazem hydroclorid (120,0 mg), NaHCO3 (250,0 mg) PVP K30 (20,0 mg), Lactose (98,0 mg), EtOH 96% (Vđ, mL), MgSt (16,0 mg), Talc (16, 0mg), Aerosil (13,0 mg), tổng khối lượng viên: 1000,0 mg Dập viên chày cối 21,5 x 10,5 mm, viên hình caplet Tiến hành bào chế viên nén theo quy trình mục 2.3.1 đánh giá độ hịa tan viên nén mơi trường HCl pH 1,2 theo quy trình mục 2.3.3.3 Kết thu được trình bày bảng PL14 hình PL7 Bảng PL14 Thời gian tiền nổi, thời gian tỷ lệ (%) DTZ giải phóng cơng thức khảo sát PEO (TB ± SD) Kết Các tiêu khảo sát CT PL1 CT PL2 CT PL3 CT PL4 Thời gian tiền (giây) Thời gian (giờ) Thời điểm (giờ) 12 30 19 ± 18 ± 17 ± 16 ± >30 >30 >30 >30 Tỷ lệ phần trăm GPDC thời điểm (%) (n=3) 4,13 ± 0,23 7,84 ± 0,77 16,80 ± 0,23 25,76 ± 1,31 40,43 ± 0,43 56,63 ± 0,55 98,68 ± 2,04 6,45 ± 0,45 11,78 ± 1,87 21,20 ± 1,48 28,44 ± 0,95 41,87 ± 2,42 55,96 ± 0,10 97,99 ± 1,67 PL12 4,72 ± 0,56 9,81 ± 0,68 20,17 ± 1,34 30,40 ± 2,01 44,79 ± 1,39 56,51 ± 0,98 99,03 ± 1,24 4,54 ± 0,55 9,10 ± 0,02 17,06 ± 1,24 24,59 ± 0, 78 39,81 ± 1,28 55,16 ± 0,01 97,68 ± 2.06 100 TỶ LỀ DTZ GIẢI PHÓNG (%) 90 80 70 60 PEO 2% 50 PEO 3% 40 PEO 5% 30 PEO 10% 20 Giới hạn 10 Giới hạn 0 12 15 18 THỜI GIAN (GIỜ) 21 24 27 30 Hình PL7 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT PL1, CT PL2, CT PL3, CT PL4 Nhận xét: Mẫu viên CT có thời gian tiền tốt thời gian ổn định 30 Về khả giải phóng dược chất, từ thả viên đến thời điểm giờ, nhìn chung PEO có tác dụng kìm hãm khả giải phóng dược chất Có thể giải thích PEO loại polyme có khả trương nở mạnh, lớp gel hình thành sớm hơn, kiểm sốt giải phóng đầu tốt Tuy nhiên, thời điểm 12 giờ, mẫu viên CT giải phóng > 55% (khơng đạt u cầu dược điển Mỹ) Nguyên nhân PEO tan tốt nước, sau trương nở thời điểm đầu đến thời điểm 12 giờ, PEO khơng cịn phát huy tác dụng làm bền lớp gel HPMC K100M tạo thành nên DTZ giải phóng nhiều thời điểm đầu PL 3.6 HÌNH ẢNH MẪU VIÊN KÍCH THƯỚC KHÁC NHAU ĐÃ BÀO CHẾ 21,5 x 10,5 mm 19 x 11 mm Ø12 Hình PL8 Hình ảnh mẫu viên kích thước khác bào chế PL13 PL 3.7 KẾT QUẢ QUY HOẠCH THỰC NGHIỆM VÀ TỐI ƯU HĨA CƠNG THỨC VIÊN NÉN NỔI DILTIAZEM HYDROCLORID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI Bảng PL15 Các hệ số phương trình hồi quy tìm Phương trình Các hệ số phương trình hồi quy P1 P3 P4 P5 B1 101,066 0,620 -0,982* -1,381 B2 -46,717 -1,366 -0,129 -0,440 -19,927 -0,148 -0,430* 0,422 B3 21,453 -1,797 -3,196* -1,718 B11 -40,207 3,898 2,707* -0,285 B22 B33 15,512 0,773 0,466 -0,498 B12 -13,043 -0,766 -1,334* -1,964 B13 -67,360 -3,231 -0,560* 0,066 B23 -21,316 -0,250 -0,959* 0,281 B0 414,177* 1,000* 45,913* 87,889* Ghi chú: * Các hệ số có ý nghĩa thống kê (p < 0,05), B0 số; Bij hệ số biến Xi.Yj Hình PL9 Hình biểu diễn mối quan hệ biến đầu vào đến biến đầu quy hoạch thực nghiệm PL14