Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn chủng nấm metarhizium anisopliae phòng trừ sâu bệnh hại trên xoài

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: “NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG NẤM METARHIZIUM ANISOPLIAE PHÒNG TRỪ SÂU BỆNH HẠI TRÊN XOÀI” HÀ NỘI - 2022 HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: “NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CHỦNG NẤM METARHIZIUM ANISOPLIAE PHÒNG TRỪ SÂU BỆNH HẠI TRÊN XOÀI” Sinh viên thực : Nguyễn Thị Lƣơng Mã sinh viên : 637046 Lớp : K63CNSHA Giảng viên hƣớng dẫn : TS Nguyễn Thanh Hảo ThS Nguyễn Thị Hồng Minh HÀ NỘI - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu đƣợc trình bày khóa luận trung thực, khách quan chƣa đƣợc dùng để bảo vệ để lấy học vị Đồng thời, xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận đƣợc cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận án đƣợc rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 01 tháng 03 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Lƣơng i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, trƣớc hết cho phép tơi đƣợc bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới: TS Phạm Thị Lý Thu tạo điều kiện thuận lợi nhất, đƣa cho lời động viên, quan tâm, quan sát trình thực luận án để giúp tơi hồn thiện kỹ nhƣ luận án ThS Nguyễn Thị Hồng Minh hƣớng dẫn chi tiết, tận tình kỹ thuật, đƣa nhắc nhở để đƣợc sáng tỏ Bên cạnh đó, đƣa lời khun hữu ích, giúp tơi hồn thiện kỹ phịng thí nghiệm TS Nguyễn Thanh Hảo hƣớng dẫn, giúp đỡ động viên tơi q trình làm luận án Tôi xin chân thành cảm ơn đến Ban Giám đốc Viện Di truyền Nông nghiệp, Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, thầy cô anh chị Bộ môn Công nghệ sinh học, ngƣời giảng dạy, chia sẻ kinh nghiệm giúp đỡ cho tơi q trình học tập thực luận án Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình ngƣời thân bạn bè động viên, giúp đỡ, tạo động lực cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu nhƣ trình làm luận án Hà Nội, ngày 01 Tháng 03 Năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Lƣơng ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii TÓM TẮT ix PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lƣợc chung xoài sâu bệnh hại xoài 2.2 Các biện pháp phòng trừ 2.3 Đặc điểm chung nấm Metarhizium anisopliae 2.3.1 Phân loại 2.3.2 Đặc điểm hình thái 2.3.3 Cấu tạo thành phần hóa học tế bào vi nấm 2.3.4 Khả đồng hóa nguồn cacbon, nitơ nấm Metarhizium anisopliae 2.3.5 Độc tố diệt côn trùng nấm lục cƣơng Metarhizium anisopliae 10 2.4 Cơ chế tác động nấm lên sâu bệnh đƣờng truyền bệnh 11 2.4.1 Cơ chế tác động 11 2.4.2 Con đƣờng truyền bệnh 11 2.5 Phổ ký chủ nấm lục cƣơng Metarhizium anisopliae 12 iii 2.6 Tình hình nghiên cứu sử dụng Metarhizium Thế Giới 13 2.7 Tình hình nghiên cứu sử dụng Metarhizium Việt Nam 14 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 16 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 16 3.3 Vật liệu nghiên cứu 16 3.4 Nội dung nghiên cứu 18 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.5.1 Phƣơng pháp phân lập chủng vi sinh vật ký sinh sâu bệnh hại 19 3.5.1.1 Cách phân lập 19 3.5.1.2 Làm mẫu phân lập 20 3.5.2 Phƣơng pháp khảo sát khả phân giải chitin chủng vi sinh vật.20 3.5.3 Phƣơng pháp khảo sát khả phân giải cellulose chủng vi sinh vật 22 3.5.4 Định danh chủng nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu hại kỹ thuật truyền thống 23 3.5.5 Phƣơng pháp xác định điều kiện nuôi cấy chủng nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu hại 24 3.5.5.1 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng phát triển chủng nấm xanh ký sinh Metarhizium anisopliae 25 3.5.5.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ môi trường đến sinh trưởng phát triển chủng nấm xanh ký sinh Metarhizium anisopliae 25 3.5.5.3 Nghiên cứu ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng phát triển của chủng nấm xanh ký sinh Metarhizium anisopliae 25 3.5.6 Kiểm tra hoạt lực ký sinh diệt trừ sâu hại chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae tuyển chọn 27 3.6 Xử lí số liệu 28 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 Phân lập tuyển chọn chủng nấm Metarhizium anisopliae 29 4.1.1 Phân lập nấm Metarhizium anisopliae có khả diệt trừ sâu bệnh hại trồng 29 iv 4.1.2 Định danh nấm Metarhizium anisopliae có khả diệt trừ sâu bệnh hại trồng phƣơng pháp truyền thống 31 4.3 Đánh giá khả khả phân giải chitin chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae 32 4.4 Đánh giá khả phân giải cellulose chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae 33 4.5 Ảnh hƣởng số yếu tố đến sinh trƣởng, phát triển nấm Metarhizium anisopliae đƣợc tuyển chọn 34 4.5.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến sinh trƣởng phát triển chủng nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu đục thân xoài 34 4.5.2 Ảnh hƣởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trƣởng phát triển chủng nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu đục thân xoài môi trƣờng PDA 36 4.5.3 Ảnh hƣởng pH môi trƣờng đến sinh trƣởng phát triển chủng nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu đục thân xồi mơi trƣờng PDA 38 4.6 Kiểm tra hoạt lực ký sinh diệt trừ sâu hại chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae tuyển chọn 40 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 5.2 Kiến nghị 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 PHỤ LỤC 46 v DANH MỤC VIẾT TẮT Giải nghĩa Chữ viết tắt WA Water Agar CMA Corn Meal Agar PDA Potato Dextrose Agar PCA Potato Carrot Agar PDB Potato Dextrose Broth Ma M anisopliae M flavoviride Metarhizium anisopliae ĐBSCL Metarhizium flavoviride Đồng Sông Cửu Long cs Cộng sp Species ĐC Đối chứng vi DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Nguồn gốc, hình thái chủng nấm Metarhizium anisopliae phân lập đƣợc 29 Bảng 4.2 Đặc điểm hình thái chủng nấm Metarhizium anisopliae 31 Bảng 4.3 Khả phân giải chitin chủng nấm xanh Ma đƣợc quan sát sau ngày nuôi cấy 32 Bảng 4.4 Khả phân giải cellulose chủng nấm xanh Ma đƣợc quan sát sau ngày nuôi cấy 33 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến sinh trƣởng, phát triển nấm M Anisopliae 35 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng điều kiện nhiệt độ đến sinh trƣởng, phát triển nấm M Anisopliae môi trƣờng PDA 37 Bảng 4.7 Ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng, phát triển nấm M Anisopliae môi trƣờng PDA .39 Bảng 4.8 Hoạt lực diệt sâu non đục thân xoài chế phẩm sinh học điều kiện phịng thí nghiệm 40 vii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Các pha phát dục sâu đục thân Plocaderus ruficornis Hình 2.2 Metarhizium anisopliae Hình 3.1 Mẫu sâu đục thân bị chết nhiễm nấm xanh Metarhizium anisopliae 18 Hình 3.2 Một số hình ảnh trình phân lập 20 Hình 3.3 Một số bƣớc kỹ thuật thu dịch enzyme để khảo sát khả phân giải chitin, cellulose Ma 23 Hình 3.4 Kỹ thuật cấy chấm điểm để khảo sát khả phân giải chitin, cellulose Ma 23 Hình 3.5 Định danh nấm phƣơng pháp truyền thống .24 Hình 3.6 Phƣơng pháp đếm mật độ bào tử 27 Hình 3.7 Một số bƣớc thí nghiệm kiểm tra hoạt lực ký sinh nấm Ma sâu .28 Hình 4.1 Kết phân lập nấm Metarhizium anisopliae ký sinh sâu .30 Hình 4.2 Hai chủng nấm Metarhizium anisopliae AS2 BNX1 phân lập đƣợc sau ngày ngày nuôi cấy 30 Hình 4.3 Hình thái khuẩn lạc, chùm bào tử bào tử chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae 32 Hình 4.4 Kết thí nghiệm đánh giá khả sinh enzyme chitinase chủng nấm Ma 33 Hình 4.5 Kết thí nghiệm đánh giá khả sinh enzyme cellulase chủng nấm Ma 34 Hình 4.6 Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến đƣờng kính tản nấm M Anisopliae sau 3, ngày .36 Hình 4.7 Ảnh hƣởng nhiệt độ ni cấy đến đƣờng kính tản nấm M Anisopliae sau 3, ngày 38 Hình 4.8 Ảnh hƣởng pH mơi trƣờng đến đƣờng kính tản nấm M Anisopliae sau 3, ngày 39 Hình 4.9 Kết kiểm tra hoạt lực diệt trừ sâu hại Ma .41 viii PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Trong trình nghiên cứu: “Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn chủng nấm Metarhizium anisopliae phòng trừ sâu bệnh hại xồi” dựa vào kết nghiên cứu, chúng tơi đƣa số kết luận sau: Đã phân lập tuyển chọn đƣợc chủng giống nấm Metarhizium anisopliae có nguồn gốc từ sâu đục thân xoài thu vùng trồng xoài tỉnh Bến Tre Hai chủng nấm AS2 thuộc lồi Metarhizium anisopliae dạng bào tử nhỏ BNX1 thuộc loài Metarhizium anisopliae dạng bào tử lớn Trong đó, đƣờng kính tản nấm, tốc độ sinh trƣởng, mật độ bào tử AS2 cao so với BNX1 Hai chủng nấm Metarhizium anisopliae AS2 BNX1 có khả sinh enzyme cellulase, enzyme chitinase làm phân hủy thành tế bào sâu giúp tăng hiệu lực diệt trừ sâu, đồng thời giúp đất tơi xốp, thực vật phát triển tốt Trong đó, chủng AS2 chủng có khả sinh enzyme phân giải cao BNX1 Tìm đƣợc ngƣỡng điều kiện thuận lợi cho trình sinh trƣởng phát triển nấm Metarhizium anisopliae Cụ thể, mơi trƣờng ni cấy thích hợp PDA, ngƣỡng nhiệt độ phù hợp 25oC-30oC, khoảng pH thuận lợi từ pH6pH7 Kiểm tra xác định đƣợc hoạt lực ký sinh diệt sâu hai chủng nấm Metarhizium anisopliae AS2 BNX1 cho hiệu cao, khoảng 70%-82% Trong đó, hoạt lực chủng AS2 cao so với hoạt lực BNX1 5.2 Kiến nghị Từ kết nghiên cứu thu đƣợc, thấy đƣợc mức độ khả quan đề tài tƣơng lai, đề nghị tiếp tục nghiên cứu nhân nuôi sản xuất chế phẩm sinh học có nguồn gốc từ chủng nấm Metarhizium anisopliae để phòng trừ sâu bệnh hại trồng 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO A)Tiếng Việt Bùi Chí Bửu & Nguyễn Thị Lang (1999) Di truyền phân tử - Những nguyên tắc chọn giống trồng Nhà xuất Nông nghiệp TP Hồ Chí Minh 195 – 236 Hồ Huỳnh Thùy Dƣơng (1998) Sinh học phân tử Nhà xuất giáo dục Nguyễn Thị Bích Lập (2005) Khảo sát số đặc điểm sinh trƣởng, phát triển vá khả gây bệnh nấm Metarrhizium anisopliae (METCH.) SOROKIN ký sinh côn trùng gây hại Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Nơng học Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh 11-12 Nguyễn Xuân Niệm (2003) Hiệu lực phòng trừ bọ cánh cứng hại dừa (Brontispa spp.) chế phẩm sinh học tỉnh Kiên Giang Thông tin khoa học Công nghệ Môi trƣờng Kiên Giang Khuất Bửu Thanh (2003) Cơ sở di truyền phân tử kỹ thuật gene NXB khoa học kỹ thuật 138 – 147 Phan Thị Thùy, Đồng Thị Thanh, Nguyễn Thị Bắc, Trần Thanh Tháp, Hồng Cơng Điền & Nguyễn Đậu Tồn (1991-1995) Nghiên cứu cơng nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm nấm Beauveria Metarhizium để phòng trừ số sâu hại trồng Tuyển tập cơng trình nghiên cứu Bảo vệ thực vật 1990-1995 Viện bảo vệ thực vật Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội 189 – 201 Nguyễn Ngọc Tú & Nguyễn Cửu Thị Hƣơng Giang (1997) Bảo vệ trồng chế phẩm từ vi nấm Nhà xuất Nông nghiệp TP Hồ Chí Minh 158 Trần Văn Hai, Phạm Kim Sơn & Trịnh Thị Xuân (2009) Khảo sát đặc tính sinh học sùng đất Lepidiota cochinchinae Brenske hại rễ đậu phộng & bắp hiệu lực số chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae Sorokin, nấm trắng Beauveria bassiana Vuillemin dịch hại Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ 11:63–70 Chu Thanh Bình, Nguyễn Phƣơng Nhuệ, Hồ Tuyên & Bùi Thị Việt Hà (2019) Tinh xác định hoạt tính chitinase từ nấm diệt tuyến trùng Paecilomyces sp VNU journal of Science: Natural Sciences and Technology 35(1):1-7 43 10 Đỗ Thị Thanh Dung, Lê Thanh Bình, Đỗ Thị Hồng Thịnh & Võ Đình Quang (2018) Phân lập tuyển chọn số chủng vi nấm có khả kí sinh tiêu diệt ấu trùng ve sầu gây hại cà phê Tạp chí khoa học Tự nhiên Cơng nghệ 5(6): 139-148 B) Tiếng Anh 11 Sahu, K R & Sharma D (2008) Management of cashew stem and root borer, Plocaederus ferrugineus L by microbial and plant products J Biopesticides 1(2): 121-123 12 Upadhyay, S.K., Chaudhary B & Sapkota B (2013) Integrated management of mango stem borer (Batocera rufomaculata Dejan) in Nepal Global Journal of Biology, Agriculture and Health Sciences 2: 132-135 13 Vasanthi, P & Raviprasad T N (2013) Biology and morphometrics of cashew stem and root borers (CSRB) Plocaederus ferrugenius and Plocaederus obesus (Coleoptera: Cerambycidae) reared on cashew bark International Journal of Scientific and Research Publications 3(1): 1-7 14 Amiri, B., Ibrahim L & Butt T.M (2009) Antifeedent properties of destruxins and their potential use with the entomogenous fungus Metarhizium anisopliae for improved control of crucifer pests Biocontrol Science and Technology 9: 487– 498 15 Bruns, T D., Vilgalys R., Barns S M., Gonzalez D., Hibbett D S., Lane D J., Simo L., Stickel S., Szaro T M., Weisburg W G., & Sogin M L (1992) Evolutionary relationships within the fungi: analyses of small subunit ribosomal DNA sequences Appl Environ Microbiol 61:681-689 16 Chilton, N.B., Hoste, H., Newton, L.A., Beveridge I & Gasser R.B (1998) Common secondary structures for the second internal transcribed spacer pre-rRNA of two subfamilies of trichostrongylid nematodes Int J Parasitol 28: 1765–1773 17 Colette A Côté & Brenda A Peculis (2001) Role of the ITS2-proximal stem and evidence for indirect recognition of processing sites in pre-rRNA processing in yeast Nucleic Acids Research 29(10): 2106-2116 18 Gams, W & Nirenberg H I (1989) A contribution to the generic definition of Fusarium Mycotaxon 35: 407-416 44 19 Guarro Josep, Gené Josepa & Stchigel Alberto M (1999) Developments in fungal taxonomy Clinical Microbiology Reviews 12(3): 454-500 20 Gutell R R (1994) Collection of small subunit (16 S- and 16 S-like) ribosomal RNA structures Nucleic Acids Research 22(17): 3502-3507 21 Mar, T.T., & Lumyong, S (2012) Evaluation of effective entomopathogenic fungi to fruit fly pupa, Bactrocera spp and their antimicrobial activity Chiang Mai J Sci 39(3): 464-477 22 Sookar, P., Bhagwant S & Ouna E.A (2008) Isolation of entomopathogenic fungi from the soil and their pathogenicity to two fruit fly species (Diptera: Tephritidae) Journal of Applied Entomology 132: 778-788 23 Sookar, P., Bhagwant S., & Allymamod M.N (2014) Effect of Metarhizium anisopliae on the fertility and fecundity of two species of fruit flies and horizontal transmission of mycotic infection Journal of Insect Science 14(100): 5-9 24 Barnett, H L & Hunter, B.B (1972) Illustrated Genera of Imperfect Fungi 3rd Edition, Burgess Publishing Co., Minneapolis, 241 45 PHỤ LỤC BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHMTAS2 4/ 3/22 12:56 :PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den nam AS2 VARIATE V003 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3.03000 1.01000 404.00 0.000 NL 285000 142500 57.00 0.000 * RESIDUAL 149999E-01 249998E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.33000 302727 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHMTAS2 4/ 3/22 12:56 :PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den nam AS2 VARIATE V004 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3.48917 1.16306 NL 151667 758333E-01 * RESIDUAL 283336E-01 472227E-02 246.29 0.000 16.06 0.004 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.66917 333561 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHMTAS2 4/ 3/22 12:56 :PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den nam AS2 VARIATE V005 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3.21000 1.07000 NL 126667 633333E-01 * RESIDUAL 199997E-01 333329E-02 321.00 0.000 19.00 0.003 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.35667 305152 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE AHMTAS2 4/ 3/22 12:56 :PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den nam AS2 MEANS FOR EFFECT CT$ 46 CT$ NOS NGAY NGAY NGAY CMA 3.23333 5.53333 7.63333 Czapek 3.40000 5.80000 8.03333 PDA 4.53333 6.96667 8.96667 PCA 3.83333 6.13333 8.63333 SE(N= 3) 0.288674E-01 0.396748E-01 0.333331E-01 5%LSD 6DF 0.998570E-01 0.137241 0.115305 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS NGAY NGAY NGAY 3.72500 6.10000 8.30000 3.95000 6.25000 8.45000 3.57500 5.97500 8.20000 SE(N= 4) 0.249999E-01 0.343594E-01 0.288673E-01 5%LSD 6DF 0.864787E-01 0.118855 0.998567E-01 - 47 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE AHMTAS2 4/ 3/22 12:56 :PAGE Anh huong moi truong nuoi cay den nam AS2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) NO OBS DEVIATION BASED ON BASED ON TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % |NL | | | | | | | | NGAY 12 3.7500 0.55021 0.50000E-01 1.3 0.0000 0.0003 NGAY 12 6.1083 0.57755 0.68719E-01 1.1 0.0000 0.0045 NGAY 12 8.3167 0.55241 0.57735E-01 0.7 0.0000 0.0030 48 | BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHNDAS2 4/ 3/22 13: :PAGE anh huong cua nhiet den sinh truong nam AS2 VARIATE V003 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 5.33583 NL 349999E-01 175000E-01 1.77861 * RESIDUAL 116669E-01 194449E-02 914.70 0.000 9.00 0.016 * TOTAL (CORRECTED) 11 5.38250 489318 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHNDAS2 4/ 3/22 13: :PAGE anh huong cua nhiet den sinh truong nam AS2 VARIATE V004 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 5.73667 1.91222 NL 449999E-01 225000E-01 * RESIDUAL 833300E-02 138883E-02 ****** 0.000 16.20 0.004 * TOTAL (CORRECTED) 11 5.79000 526364 - BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHNDAS2 4/ 3/22 13: :PAGE anh huong cua nhiet den sinh truong nam AS2 VARIATE V005 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 1.77583 591944 NL 816667E-01 408333E-01 * RESIDUAL 116669E-01 194448E-02 304.42 0.000 21.00 0.002 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.86917 169924 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE AHNDAS2 49 4/ 3/22 13: :PAGE anh huong cua nhiet den sinh truong nam AS2 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS NGAY NGAY NGAY T1 4.03333 5.90000 9.03333 T2 4.86667 6.93333 9.03333 T3 3.53333 5.50000 8.60000 T4 3.06667 5.06667 8.10000 SE(N= 3) 0.254590E-01 0.215161E-01 0.254590E-01 5%LSD 6DF 0.880668E-01 0.744278E-01 0.880666E-01 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS NGAY NGAY NGAY 3.85000 5.85000 8.67500 3.95000 5.92500 8.80000 3.82500 5.77500 8.60000 SE(N= 4) 0.220482E-01 0.186335E-01 0.220481E-01 5%LSD 6DF 0.762681E-01 0.644563E-01 0.762679E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE AHNDAS2 4/ 3/22 13: :PAGE anh huong cua nhiet den sinh truong nam AS2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % |NL | | | | | | | | NGAY 12 3.8750 0.69951 0.44096E-01 1.1 0.0000 0.0162 NGAY 12 5.8500 0.72551 0.37267E-01 0.6 0.0000 0.0044 NGAY 12 8.6917 0.41222 0.44096E-01 0.5 0.0000 0.0024 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHPHAS2 | 4/ 3/22 13:26 :PAGE anh huong cua pH moi truong den STPT nam AS2 VARIATE V003 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES 50 F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 12.7307 3.18267 NL 413334E-01 206667E-01 * RESIDUAL 253334E-01 316668E-02 ****** 0.000 6.53 0.021 * TOTAL (CORRECTED) 14 12.7973 914095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHPHAS2 4/ 3/22 13:26 :PAGE anh huong cua pH moi truong den STPT nam AS2 VARIATE V004 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 20.9293 NL 999998E-01 499999E-01 5.23233 * RESIDUAL 266662E-01 333327E-02 ****** 0.000 15.00 0.002 * TOTAL (CORRECTED) 14 21.0560 1.50400 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAY FILE AHPHAS2 4/ 3/22 13:26 :PAGE anh huong cua pH moi truong den STPT nam AS2 VARIATE V005 NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 28.6493 NL 933338E-02 466669E-02 7.16233 * RESIDUAL 106644E-01 133305E-02 ****** 0.000 3.50 0.080 * TOTAL (CORRECTED) 14 28.6693 2.04781 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE AHPHAS2 4/ 3/22 13:26 :PAGE anh huong cua pH moi truong den STPT nam AS2 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS NGAY NGAY 3.93333 NGAY pH 2.03333 5.23333 pH 2.83333 4.16667 6.03333 pH 3.50000 5.46667 8.00000 pH 4.73333 7.03333 9.00000 pH 2.63333 4.10000 6.26667 SE(N= 3) 0.324894E-01 0.333330E-01 0.210796E-01 5%LSD 8DF 0.105945 0.108696 0.687384E-01 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS NGAY NGAY 51 NGAY 3.12000 4.94000 6.90000 3.22000 5.04000 6.94000 3.10000 4.84000 6.88000 SE(N= 5) 0.251662E-01 0.258196E-01 0.163282E-01 5%LSD 8DF 0.820643E-01 0.841952E-01 0.532445E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE AHPHAS2 4/ 3/22 13:26 :PAGE anh huong cua pH moi truong den STPT nam AS2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS NGAY 15 3.1467 0.95608 NGAY 15 4.9400 NGAY 15 6.9067 BALANCED ANOVA FOR VARIATE C OF V |CT$ % |NL | | | | | | | | | 0.56273E-01 1.8 0.0000 0.0210 1.2264 0.57734E-01 1.2 0.0000 0.0022 1.4310 0.36511E-01 0.5 0.0000 0.0803 NGàY FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh VARIATE V003 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 94.8889 47.4444 170.80 0.001 NL 222222 111111 0.40 0.696 * RESIDUAL 1.11111 277777 * TOTAL (CORRECTED) 96.2222 12.0278 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGàY FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh VARIATE V004 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 242.667 121.333 364.00 0.000 3.00 0.160 NL 2.00000 1.00000 * RESIDUAL 1.33334 333335 * TOTAL (CORRECTED) 246.000 52 30.7500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGàY FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh VARIATE V005 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 420.222 210.111 222.47 0.000 1.53 0.322 NL 2.88889 1.44444 * RESIDUAL 3.77778 944446 * TOTAL (CORRECTED) 426.889 53.3611 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 10 NGàY FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh VARIATE V006 10 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 660.667 330.333 283.14 0.000 NL * RESIDUAL 4.66667 2.33333 2.00 0.250 4.66670 1.16668 * TOTAL (CORRECTED) 670.000 83.7500 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS ĐC BNX1 AS2 NGàY 0.000000 NGàY NGàY 10 NGàY 1.33333 3.66667 5.33333 5.66667 8.66667 15.0000 22.6667 7.66667 14.0000 20.0000 25.6667 SE(N= 3) 0.304290 0.333334 0.561084 0.623612 5%LSD 4DF 1.19275 1.30660 2.19933 2.44442 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS NGàY NGàY NGàY 10 NGàY 4.33333 7.66667 12.3333 16.0000 4.33333 7.66667 12.6667 17.6667 3 4.66667 8.66667 13.6667 17.3333 SE(N= 3) 0.304290 0.333334 0.561084 0.623612 5%LSD 4DF 1.19275 1.30660 2.19933 2.44442 53 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNSC 4/ 3/22 13:35 :PAGE thi nghiem danh gia ty le sau chet sau nhiem nam ky sinh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % |NL | | | | | | | | NGàY 4.4444 3.4681 0.52705 8.9 0.0006 0.6963 NGàY 8.0000 5.5453 0.57735 7.2 0.0003 0.1601 NGàY 12.889 7.3049 0.97183 7.5 0.0005 0.3215 10 NGàY 17.000 9.1515 1.0801 6.4 0.0004 0.2501 54 | BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGàY FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai sau nhiem nam xanh ky sinh VARIATE V003 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 94.8889 47.4444 427.00 0.000 NL * RESIDUAL 888889 444444 4.00 0.112 444443 111111 * TOTAL (CORRECTED) 96.2222 12.0278 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGàY FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai sau nhiem nam xanh ky sinh VARIATE V004 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 242.667 121.333 727.99 0.000 NL 2.66667 1.33333 8.00 0.042 * RESIDUAL 666673 166668 * TOTAL (CORRECTED) 246.000 30.7500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGàY FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai sau nhiem nam xanh ky sinh VARIATE V005 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 424.667 212.333 ****** 0.000 NL 8.66667 4.33333 26.00 0.007 * RESIDUAL 666659 166665 * TOTAL (CORRECTED) 434.000 54.2500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 10 NGàY FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai nhiem nam xanh ky sinh VARIATE V006 10 NGàY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES 55 F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 660.667 330.333 283.14 0.000 2.00 0.250 NL 4.66667 2.33333 * RESIDUAL 4.66670 1.16668 * TOTAL (CORRECTED) 670.000 83.7500 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai nhiem nam xanh ky sinh MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS NGàY NGàY NGàY 10 NGàY ĐC 30.0000 28.6667 26.3333 BNX1 24.3333 21.3333 14.6667 24.6667 7.33333 AS2 22.3333 16.0000 10.0000 4.33333 SE(N= 3) 0.192450 0.235703 0.235701 0.623612 5%LSD 4DF 0.754362 0.923906 0.923897 2.44442 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS NGàY NGàY NGàY 10 NGàY 25.3333 22.0000 17.3333 13.3333 26.0000 22.6667 18.0000 13.6667 3 25.3333 21.3333 15.6667 12.0000 SE(N= 3) 0.192450 0.235703 0.235701 0.623612 5%LSD 4DF 0.754362 0.923906 0.923897 2.44442 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNSS 4/ 3/22 13:45 :PAGE So sau sot lai nhiem nam xanh ky sinh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) NO OBS DEVIATION BASED ON BASED ON C OF V |CT$ % |NL | | | | | | | TOTAL SS RESID SS NGàY 25.556 3.4681 0.33333 1.3 0.0003 0.1116 NGàY 22.000 5.5453 0.40825 1.9 0.0002 0.0416 NGàY 17.000 7.3655 0.40825 2.4 0.0001 0.0068 10 NGàY 13.000 9.1515 1.0801 8.3 0.0004 0.2501 56 | |