Hoàn thiện quy trình vi nhân giống cây trầu thủy sinh (echinodorus iguazu 2009)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – – – – –   – – – – – VŨ DIỆU ÁNH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: HỒN THIỆN QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG CÂY TRẦU THỦY SINH (ECHINODORUS IGUAZU 2009) HÀ NỘI, 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – – – – –   – – – – – KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: HỒN THIỆN QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG CÂY TRẦU THỦY SINH (ECHINODORUS IGUAZU 2009) Sinh viên thực : Phạm Phƣơng Linh Lớp : K63CNSHD Ngành : Công nghệ sinh học Giảng viên hƣớng dẫn : PGS TS Nguyễn Thanh Hải HÀ NỘI, 2022 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn nội dung báo cáo khóa luận nôi dung nghiên cứu thực cá nhân dƣới hƣớng dẫn PGS TS Nguyễn Thanh Hải Các số liệu, kết quả, hình ảnh báo cáo đƣợc đƣa hoàn toàn trung thực, chƣa đƣợc sử dụng cơng bố cơng trình nghiên cứu khoa học trƣớc Các nhận xét phƣơng hƣớng đƣa xuất phát từ thực tiễn kinh nghiệm có Mọi nội dung đƣợc tham khảo báo cáo đƣợc trích dẫn rõ nguồn gốc, tên tác giả, tên cơng trình, thời gian Tơi xin khẳng định trung thực lời cam đoan Tôi xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2022 Sinh viên Phạm Phƣơng Linh i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp ngồi nỗ lực học hỏi không ngừng thân, nhận đƣợc quan tâm, giúp đỡ nhiệt tình từ thầy giáo, gia đình bạn bè Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện cho tơi đƣợc thực khóa luận tốt nghiệp, cảm ơn ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học thầy cô giáo môn Công nghệ sinh học Thực vật – Khoa Công nghệ sinh học tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành khóa luận Đặc biệt, xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Thanh Hải, thuộc Bộ môn Công nghệ sinh học Thực vật – Khoa công nghệ sinh học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam anh Vũ Công Sơn dành nhiều thời gian, tâm huyết để hƣớng dẫn chia sẻ kinh nghiệm cho tơi suốt q trình thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến toàn thể anh, chị, bạn bè thực tập, nghiên cứu phịng thí nghiệm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực tập tốt nghiệp Khóa luận khó tránh khỏi thiếu sót, khiếm khuyết, tơi mong nhận đƣợc góp ý thầy cô bạn đọc Tôi xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2022 Sinh viên Phạm Phƣơng Linh ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung chi Echinodorus Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 2.1.1 Nguồn gốc – vị trí phân bố 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật 2.1.4 Đặc điểm sinh trƣởng 2.1.5 Ý nghĩa Trầu thủy sinh 2.2 Một số nghiên cứu nhân giống invitro thủy sinh chi Echinodorus 10 2.2.1 Một số nghiên cứu nhân giống in vitro thủy sinh 10 2.2.2 Một số nghiên cứu loại thuộc chi Echinodorus 13 PHẦN III: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Đối tƣợng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 15 3.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 15 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 15 3.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 15 3.2 Nội dung nghiên cứu 16 3.2.1 Nội dung 1: Ảnh hƣởng môi trƣờng đến sinh trƣởng Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) in vitro 16 iii 3.2.2 Nội dung 2: Giai đoạn nhân nhanh in vitro Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) in vitro 16 3.2.3 Nội dung 3: Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 18 3.3 Các tiêu theo dõi 19 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 20 3.4.1 Phƣơng pháp tiến hành 20 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1 Nội dung 1: Ảnh hƣởng môi trƣờng đến sinh trƣởng Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 22 4.2 Nội dung 2: Giai đoạn nhân nhanh in vitro Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 26 4.2.1 Ảnh hƣởng BAP đến khả nhân nhanh chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 26 4.2.2 Ảnh hƣởng TDZ đến khả nhân nhanh chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 28 4.2.3 Ảnh hƣởng tổ hợp cytokinin auxin tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 31 4.2.4 Ảnh hƣởng hệ thống nuôi cấy khác tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 33 4.3 Nội dung 3: Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 37 4.3.1 Ảnh hƣởng IBA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 37 4.3.2 Ảnh hƣởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 39 PHẦN V: KẾT LUẬN, ĐỀ XUẤT VÀ KIẾN NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 5.3 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 PHỤ LỤC 46 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng MS khác phát triển chồi Trầu thủy sinh ( Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần nuôi cấy 22 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng BAP đến khả nhân nhanh chồi Trầu thủy sinh ( Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần nuôi cấy 26 Bảng 4.3 Ảnh hƣởng TDZ đến khả nhân nhanh chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 29 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng tổ hợp cytokinin auxin tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 31 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng hệ thống nuôi cấy khác tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 34 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng IBA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 37 Bảng 4.7 Ảnh hƣởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 39 v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cây Trầu thủy sinh Hình 2.2: Một số loài thuộc chi Echinodorus Hình 2.3: Lá Trầu thủy sinh Hình 2.4: Thân Trầu thủy sinh Hình 2.5: Hoa Trầu thủy sinh Hình 2.6: Rễ Trầu thủy sinh Hình 3.1 Mẫu Cây Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) in vitro 15 Hình 4.1 Chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) nuôi cấy môi trƣờng khác 24 Hình 4.2 Chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) (sau tuần nuôi cấy) mơi trƣờng có bổ sung BAP 27 Hình 4.3 Chồi Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) (sau tuần nuôi cấy) môi trƣờng có bổ sung TDZ 30 Hình 4.4 Ảnh hƣởng tổ hợp cytokinin auxin tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) 32 Hình 4.5 Ảnh hƣởng hệ thống nuôi cấy khác tới nhân nhanh Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần nuôi cấy 35 Hình 4.6 Sự hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần nuôi cấy môi trƣờng có bổ sung IBA 38 Hình 4.7 Sự hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần ni cấy mơi trƣờng có bổ sung α-NAA 40 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CT : Công thức CV (%) : Sai số thí nghiệm ĐC : Đối chứng cm : Centimet g/l : gam/lit mg/l : miligam/lít pH : Power of hydrogen α-NAA : Acid α – napthalene acetic LSD (0,05) : Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 0,05 MS : Môi trƣờng Murashige and Skoog IBA : Indole – butyric acid TDZ : Thidiazuron [1-phenyl-3-(1, 2, 3-thidiazol-5-yl) BAP : Benzyl – amino – purine vii TÓM TẮT Cây Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) thủy sinh đắt đỏ, chúng phát triển chậm đặc biệt chúng xử lý Nitrate Cây thấp, cao 10 12cm nhƣng rộng tới 20cm Cây phát triển rễ rộng sâu thích bón phân rễ Chúng đƣợc trồng bể cá lowtech nhƣng phát triển chậm Vẻ đẹp thực lồi thực vật có màu xanh đậm với có màu xanh lục nhạt gần nhƣ màu vàng…, giá thƣờng dao động vào khoảng 1.000.000 – 1.200.000/cây Đề tài đƣợc thực nhằm tìm mơi trƣờng nhân nhanh in vitro hệ thống nuôi cấy tối ƣu cho Trầu thủy sinh Kết nghiên cứu kết luận khóa luận: - Mơi trƣờng thích hợp với MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + 30g/l đƣờng saccarose + 7g/L agar, pH = 5,8; chiều cao trung bình 0,69 cm - Mơi trƣờng nhân nhanh chồi tốt MS + 0,5 mg/l TDZ + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose, pH = 5,8; số chồi trung bình 7,00 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 1,26 cm - Mơi trƣờng tạo hồn chỉnh tốt : MS + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose, pH = 5,8; số rễ trung bình đạt 10,13 rễ/mẫu chiều dài rễ trung bình 2,51 cm, tỷ lệ rễ công thức chứa IBA α-NAA đạt 100% - Hệ thống nuôi cấy tối ƣu lỏng sục khí, mơi trƣờng MS + 0,5 mg/l TDZ + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose, pH = 5,8; số chồi trung bình 12,10 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 1,35 cm viii cơng thức tốt Cơng thức 3,4 cho chiều dài rễ lần lƣợt 1,62 cm; 1.59 cm; 1,60 cm; không đáng kể Từ kết cho thấy, môi trƣờng phù hợp cho rễ Trầu thủy sinh mơi trƣờng MS có bổ sung IBA với nồng độ 0,25 mg/l 4.3.2 Ảnh hƣởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) α-NAA hợp chất gây cảm ứng rễ loại auxin tổng hợp Để nghiên cứu ảnh hƣởng α-NAA đến khả rễ chồi Trầu thủy sinh tơi tiến hành thí nghiệm mơi trƣờng MS bổ sung nồng độ α-NAA lần lƣợt 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg/l Bảng 4.7 Ảnh hƣởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) Công thức Nồng độ α-NAA Tỷ lệ rễ (%) Số rễ Chiều dài rễ (cm) CT1 (ĐC) 0,00 55 2,63 1,98 CT2 0,50 100 8,06 2,79 CT3 1,00 100 5,10 2,59 CT4 1,50 100 4,13 0,96 CT5 2,00 100 3,76 1,20 4,0 1,4 CV% LSD 0,34 0,049 Môi trƣờng nền: MS + 200 mg/l NaH2PO4 + g/l agar + 30g/l sucrose, pH = 5,8 39 Hình 4.7 Sự hình thành rễ Trầu thủy sinh (Echinodorus Iguazu 2009) sau tuần nuôi cấy mơi trƣờng có bổ sung α-NAA Từ kết đƣợc trình bày Bảng 4.7 Hình 4.7 cho thấy: Khi bổ sung α-NAA khả rễ chồi Trầu thủy sinh tăng lên cách nhanh chóng Số rễ trung bình tăng từ 2,63 rễ/cây công thức đối chứng lên 8,06 rễ/cây công thức với nồng độ 0,5 mg/l α-NAA Chiều dài rễ trung bình tăng lên đáng kể từ 1,98 cm lên đến 2,79 cm Điều chứng tỏ αNAA ảnh hƣởng lớn đến khả rễ Trầu thủy sinh Khi tăng nồng độ α-NAA từ 0,5 mg/l α-NAA đến 2,0 mg/l α-NAA số rễ trung bình giảm tỷ lệ nghịch với độ tăng nồng độ lần lƣợt 8,06; 5,10; 4,13; 3,16 rễ/cây Chiều dài rễ trung bình giảm dần tỷ lệ nghịch với độ tăng nồng độ từ 2,79 xuống 2,59; 0,96; 1,20 cm tƣơng ứng với nồng độ 1,0; 1,5; 2,0 mg/l α-NAA Công thức với nồng độ 0,5 mg/l α-NAA cho chất lƣợng rễ tốt rễ nhiều, dài khỏe Từ công thức thứ trở số rễ trung bình chiều dài rễ trung bình thấp với chất lƣợng rễ rễ ngắn yếu 40 Tỷ lệ rễ tất cơng thức có bổ sung α-NAA đạt 100% Từ kết cho thấy, môi trƣờng phù hợp cho rễ mơi trƣờng MS có bổ sung α-NAA với nồng độ 0,5 mg/l Kết luận, từ thí nghiệm tạo hồn chỉnh, mơi trƣờng phù hợp mồi trƣờng MS có bổ sung IBA với nồng độ 0,25 mg/l đạt số rễ trung bình đạt 10,13 rễ/cây chiều dài rễ trung bình 2,51 cm 41 PHẦN V: KẾT LUẬN, ĐỀ XUẤT VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu thí nghiệm tiến hành, tơi rút đƣợc kết luận nhƣ sau: Môi trƣờng MS + 200 mg/l NaH2PO4 + 0,5 mg/l TDZ + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose, pH = 5,8; môi trƣờng phù hợp cho nhân nhanh chồi Trầu thủy sinh với số chồi trung bình 7,00 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 1,26 cm Mơi trƣờng bổ sung BAP khơng thích hợp cho nhân nhanh trầu thủy sinh Môi trƣờng rễ phù hợp môi trƣờng MS + 200 mg/l NaH2PO4 + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose, pH = 5,8 với số rễ trung bình đạt 10,13 rễ/mẫu chiều dài rễ trung bình 2,51 cm Ở thí nghiệm ảnh hƣởng hệ thống nuôi cấy khác tới nhân nhanh chồi, lỏng sục khí hệ thống tối ƣu cho số chồi trung bình cao 12,10 chồi/mẫu, chiều cao trung bình đạt 1,35 cm, số trung bình 7,70 5.2 Đề xuất quy trình nhân nhanh Mơi trƣờng nhân nhanh: MS + 0,5 mg/l TDZ + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose Sau tuần nuôi cấy Môi trƣờng rễ: MS + 0,25 mg/l IBA + g/l agar + 30 g/l saccarose Hoặc Hệ thống ni cấy lỏng sục khí, MS + 0,5 mg/l TDZ + 0,25 mg/l IBA + 30 g/l saccarose 42 5.3 Kiến nghị Do thời gian nghiên cứu cịn giới hạn, để hồn thiện quy trình nhân giống in vitro trầu thủy sinh cần hoàn thiện số nội dung sau: Nghiên cứu thêm chất điều tiết sinh trƣởng phù hợp với nhân nhanh chồi rễ trầu thủy sinh Với thí nghiệm rễ thử lại nồng độ phytohoocmon thấp Thí nghiệm hệ thống thử nghiệm với hệ thống nuôi cấy lỏng lắc Nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống in vitro quy mô sản xuất 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Hoàng Thị Kim Hồng,Trần Nguyễn Minh Hiếu, Phan Thế Nhật Minh ,Nguyễn Hoàng Anh Thƣ, Nguyễn Thị Quỳnh Trang Nghiên cứu nhân giống in vitro sen trắng huế từ hạt Tạp chí Khoa học Lạc Hồng Số đặc biệt (11/2017), tr.132-137 Nguyễn Thị Điệp, Kha Nữ Tú Uyên, Vƣơng Thị Hồng Loan, Nguyễn Thị Hồng Tú, Phạm Đình Dũng Nghiên cứu quy trình nhân giống in vitrocây diệp tài hồng đỏ (ludwigia repensrubin) diệp tài hồng táo (ludwigia natans) Tạp chí Khoa học ĐHSP TPHCM Số 3(81) năm 2016 Tài liệu tiếng Anh C Dissanay Ake, M Hettiarachichi, and M C M IQBAL Sustainable use of Cryptocoryne wendtii and Echinodorus cordifolius in the aquaculture industry of Sri Lanka by micropropagation Sri Lanka J Aquat.Sci 12 (2007): 89-101.Sk Moquammel Haque, Biswajit Ghosh A submerged culture system for rapid micropropagation of the commercially important aquarium plant, „Amazon sword‟ (Echinodorus „Indian Red‟) In Vitro Cellular & Developmental Biology - Plant volume 55, pages81–87 (2019) Michael E Kane, Edward F Gilman, Matthew A Jenks vàThomas J Sheehan Micropropagation of the Aquatic Plant Cryptocoryne lucens HORTSCIENCE 25(6):687-689 1990 M Micheli, A De Gasperis, F Prosperi, A Standardi Micropropagation of three species of aquatic plants Agr Med Vol xxx, xxx-xxx (2006) Meryem Ozturk1 , Khalid Mahmood Khawar2 , Hasan Huseyin Atar1, Cengiz Sancak2 and Sebahattin Özcan2 In Vitro Micropropagation of the 44 aquarium plant Ludwigia repens AsPac J Mol Biol ia Pacific Journal of M Biotechnol., Vol olecular Biology and Biotechnology, 12 (1&2), 2004 Murashige, T (1980) Plant growth substances in commercial uses of tissue culture In “Plant Growth Substances” (F Skoog, ed) Pp: 626-434 SpingerVerlag, Berlin and New York Samuli Lehtonen and Leena Myllys Cladistic analysis of Echinodorus (Alismataceae): simultaneous analysis of molecular and morphological data Cladistics 24 (2008) 218–239 45 PHỤ LỤC TN1: Ảnh hƣởng môi trƣờng MS khác phát triển chồi Trầu Echinodorus Iguazu in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE VARIATE V003 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 294744 736859E-01 66.49 0.000 * RESIDUAL 10 110827E-01 110827E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 305826 218447E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE VARIATE V004 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7.73733 1.93433 78.42 0.000 * RESIDUAL 10 246668 246668E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.98400 570286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE VARIATE V005 SORE SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 23.8800 5.97000 199.00 0.000 * RESIDUAL 10 300002 300002E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 24.1800 1.72714 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE VARIATE V006 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 719560 179890 267.17 0.000 * RESIDUAL 10 673329E-02 673329E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 726293 518781E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CHIEUCAO 0.345333 0.357000 0.596667 0.696667 0.413333 SOLA 3.43333 4.50000 4.63333 5.66667 4.86667 SORE 10.1667 10.1000 13.2667 11.5000 9.96667 CDR 0.970000 0.963333 0.980000 1.53000 1.19333 SE(N= 3) 0.192204E-01 0.906767E-01 0.100000 0.149814E-01 5%LSD 10DF 0.605640E-01 0.285725 0.315104 0.472070E-01 - 46 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 6/ 9/22 22:32 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CHIEUCAO SOLA SORE CDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 0.48180 15 4.6200 15 11.000 15 1.1273 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.14780 0.33291E-01 6.9 0.0000 0.75517 0.15706 3.4 0.0000 1.3142 0.17321 1.6 0.0000 0.22777 0.25949E-01 2.3 0.0000 47 | | | | TN2: Ảnh hƣởng BAP tới nhân nhanh Trầu Echinodorus Iguazu in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN2 24/ 8/22 4:33 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 21.6427 5.41067 213.58 0.000 * RESIDUAL 10 253333 253333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 21.8960 1.56400 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN2 24/ 8/22 4:33 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.35063 337657 175.25 0.000 * RESIDUAL 10 192669E-01 192669E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.36989 978495E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN2 24/ 8/22 4:33 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 9.73733 2.43433 40.13 0.000 * RESIDUAL 10 606668 606668E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 10.3440 738857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2 24/ 8/22 4:33 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS HESONHAN CHIEUCAO SOLA 1.00000 0.446667 3.66667 2.66667 1.34333 5.96667 3 2.73333 0.880000 4.83333 3.70000 0.896667 4.70000 4.60000 0.646667 3.93333 SE(N= 3) 0.918936E-01 0.253422E-01 0.142205 5%LSD 10DF 0.289560 0.798543E-01 0.448093 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2 24/ 8/22 4:33 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.9400 15 0.84267 15 4.6200 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2506 0.15916 5.4 0.0000 0.31281 0.43894E-01 5.2 0.0000 0.85957 0.24631 5.3 0.0000 48 | | | | TN3: Ảnh hƣởng TDZ tới nhân nhanh Trầu Echinodorus Iguazu in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN3 24/ 8/22 20:11 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 67.7160 16.9290 470.25 0.000 * RESIDUAL 10 360000 360000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 68.0760 4.86257 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN3 24/ 8/22 20:11 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 954973 238743 179.96 0.000 * RESIDUAL 10 132668E-01 132668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 968240 691600E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN3 24/ 8/22 20:11 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 14.9773 3.74433 85.10 0.000 * RESIDUAL 10 440001 440001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 15.4173 1.10124 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3 24/ 8/22 20:11 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HESONHAN 1.10000 5.33333 6.33333 4.10000 2.83333 CHIEUCAO 0.436667 1.20667 0.873333 0.730000 0.693333 SOLA 3.96667 6.96667 5.10000 4.80000 4.73333 SE(N= 3) 0.109545 0.210292E-01 0.121106 5%LSD 10DF 0.345179 0.662637E-01 0.381610 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3 24/ 8/22 20:11 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.1400 15 0.78800 15 5.1133 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.2051 0.18974 4.5 0.0000 0.26298 0.36424E-01 4.6 0.0000 1.0494 0.20976 4.1 0.0000 49 | | | | TN4: Ảnh hƣởng tổ hợp cytokinin auxin tới nhân nhanh Trầu Echinodorus Iguazu in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN4 6/ 9/22 18:23 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 16.3533 4.08833 22.71 0.000 * RESIDUAL 10 1.80000 180000 * TOTAL (CORRECTED) 14 18.1533 1.29667 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN4 6/ 9/22 18:23 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 399160 997900E-01 146.75 0.000 * RESIDUAL 10 680004E-02 680004E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 405960 289971E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN4 6/ 9/22 18:23 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.28667 821667 9.48 0.002 * RESIDUAL 10 866667 866667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.15333 296667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 6/ 9/22 18:23 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HESONHAN 6.23333 7.00000 6.83333 4.80000 4.46667 CHIEUCAO 1.17667 1.26667 1.20667 0.910000 0.870000 SOLA 5.13333 5.23333 5.16667 4.63333 4.00000 SE(N= 3) 0.244949 0.150555E-01 0.169967 5%LSD 10DF 0.771843 0.474404E-01 0.535573 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 6/ 9/22 18:23 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 5.8667 15 1.0860 15 4.8333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.1387 0.42426 7.2 0.0001 0.17029 0.26077E-01 2.4 0.0000 0.54467 0.29439 6.1 0.0021 50 | | | | TN5: Ảnh hƣởng hệ thống nuôi cấy khác tới nhân nhanh Trầu Echinodorus Iguazu in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN5 5/ 9/22 19:19 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 12.6158 4.20528 51.49 0.000 * RESIDUAL 653334 816667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 13.2692 1.20629 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 5/ 9/22 19:19 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 339333E-01 113111E-01 0.37 0.782 * RESIDUAL 247667 309583E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 281600 256000E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN5 5/ 9/22 19:19 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8.72333 2.90778 11.22 0.003 * RESIDUAL 2.07333 259167 * TOTAL (CORRECTED) 11 10.7967 981515 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 5/ 9/22 19:19 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HESONHAN 6.30000 7.26667 12.10000 6.36667 CHIEUCAO 1.20667 1.29667 1.35333 1.26333 SOLA 6.33333 7.03333 7.70000 5.40000 SE(N= 3) 0.164992 0.101585 0.293920 5%LSD 8DF 0.538021 0.331257 0.958443 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 5/ 9/22 19:19 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 6.7583 12 1.2800 12 6.6167 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0983 0.28577 4.2 0.0000 0.16000 0.17595 13.7 0.7817 0.99071 0.50908 7.7 0.0034 51 | | | | TN6: Ảnh hƣởng IBA tới việc tạo Trầu Echinodorus Iguazu in vitro hoàn chỉnh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE TN6 24/ 8/22 20:38 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 125.484 31.3710 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 293351 293351E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 125.777 8.98410 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN6 24/ 8/22 20:38 :PAGE VARIATE V004 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.78657 946643 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 820032E-02 820032E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.79477 271055 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 24/ 8/22 20:38 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SORE 2.66667 10.1333 9.03333 6.96667 6.63333 CDR 0.973333 2.51000 1.62000 1.59333 1.60000 SE(N= 3) 0.988856E-01 0.165331E-01 5%LSD 10DF 0.311592 0.520964E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 24/ 8/22 20:38 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 7.0867 15 1.6147 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.9973 0.17127 2.4 0.0000 0.52063 0.28636E-01 1.8 0.0000 52 | | | | TN7: Ảnh hƣởng NAA tới việc tạo Trầu Echinodorus Iguazu 2009 in vitro hoàn chỉnh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE TN7 26/ 8/22 3:55 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 50.8493 12.7123 346.70 0.000 * RESIDUAL 10 366670 366670E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 51.2160 3.65829 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN7 26/ 8/22 3:55 :PAGE VARIATE V004 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7.94177 1.98544 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 726669E-02 726669E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.94904 567789 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 26/ 8/22 3:55 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SORE 2.63333 8.06667 5.10000 4.13333 3.76667 CDR 1.98000 2.79667 2.59333 0.966667 1.20333 SE(N= 3) 0.110555 0.155635E-01 5%LSD 10DF 0.348362 0.490412E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 26/ 8/22 3:55 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.7400 15 1.9080 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.9127 0.19149 4.0 0.0000 0.75352 0.26957E-01 1.4 0.0000 53 | | | |