Hoàn thiện quy trình vi nhân giống trầu bà lá xẻ đột biến

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – – – – –   – – – – – KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: HỒN THIỆN QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG TRẦU BÀ LÁ XẺ ĐỘT BIẾN HÀ NỘI, 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – – – – –   – – – – – KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP HỒN THIỆN QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG TRẦU BÀ LÁ XẺ ĐỘT BIẾN Sinh viên thực : Hà Thanh Tâm Lớp : K63CNSHD Ngành : Công nghệ sinh học Giảng viên hƣớng dẫn : PGS TS Nguyễn Thanh Hải HÀ NỘI, 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tồn nội dung báo cáo khóa luận nôi dung nghiên cứu thực cá nhân dƣới hƣớng dẫn PGS TS Nguyễn Thanh Hải Các số liệu, kết quả, hình ảnh báo cáo đƣợc đƣa hoàn toàn trung thực, chƣa đƣợc sử dụng công bố cơng trình nghiên cứu khoa học trƣớc Các nhận xét phƣơng hƣớng đƣa xuất phát từ thực tiễn kinh nghiệm có Mọi nội dung đƣợc tham khảo báo cáo đƣợc trích dẫn rõ nguồn gốc, tên tác giả, tên cơng trình, thời gian… Tôi xin khẳng định trung thực lời cam đoan Tôi xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2022 Sinh viên Hà Thanh Tâm i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp ngồi nỗ lực học hỏi không ngừng thân, nhận đƣợc quan tâm, giúp đỡ nhiệt tình từ thầy giáo, nhà trƣờng, gia đình bạn bè Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện cho tơi đƣợc thực khóa luận tốt nghiệp, cảm ơn ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học thầy cô giáo môn Công nghệ sinh học Thực vật – Khoa Công nghệ sinh học quan tâm tạo điều kiện tốt suốt q trình thực tập phịng thí nghiệm mơn Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến PGS TS Nguyễn Thanh Hải, thuộc môn Công nghệ sinh học Thực vật – Khoa công nghệ sinh học – Học viện nông nghiệp Việt Nam tận tụy hƣớng dẫn chia sẻ kinh nghiệm cho tơi suốt q trình thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến anh Vũ Công Sơn dành thời gian bảo hƣớng dẫn chia sẻ kiến thức kinh nghiệm xuất phát từ thực tiễn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến gia đình, ngƣời thân bạn bè cổ vũ, động viên, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2022 Sinh viên Hà Thanh Tâm ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung chi Monstera Trầu bà xẻ đột biến (Monstera deliciosa variegata Thai constellation) 2.1.1 Sơ lƣợc chi Monstera 2.1.2 Nguồn gốc - vị trí phân bố 2.1.3 Phân loại 2.1.4 Đặc điểm thực vật 2.1.5 Đặc điểm sinh thái 10 2.1.6 Ý nghĩa Trầu bà xẻ đột biến 12 2.2 Một số nghiên cứu loại thuộc họ Ráy (Araceae) 12 2.2.1 Một số nghiên cứu giới 12 2.2.2 Một số nghiên cứu nƣớc 15 PHẦN III: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 3.1 Đối tƣợng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 17 3.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 17 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 17 iii 3.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 17 3.2 Nội dung nghiên cứu 18 3.2.1 Nội dung 1: Ảnh hƣởng môi trƣờng đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến 18 3.2.2 Nội dung 2: Giai đoạn nhân nhanh in vitro Trầu bà xẻ đột biến 18 3.2.3 Nội dung 3: Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 19 3.3 Các tiêu theo dõi 21 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 21 3.4.1 Phƣơng pháp tiến hành 21 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Nội dung 1: Ảnh hƣởng môi trƣờng đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến 23 4.2 Nội dung 2: Giai đoạn nhân nhanh in vitro Trầu bà xẻ đột biến 25 4.2.1 Ảnh hƣởng TDZ đến khả nhân nhanh chồi Trầu bà xẻ đột biến 25 4.2.2 Ảnh hƣởng nồng độ axit ascorbic đến khả nhân nhanh chồi Trầu bà xẻ đột biến 28 4.3 Nội dung 3: Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 30 4.3.1 Ảnh hƣởng IBA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến 30 4.3.2 Ảnh hƣởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến 32 4.3.3 Ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến in vitro vƣờn ƣơm 34 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 5.1 Kết luận 37 5.3 Kiến nghị 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC 39 iv DANH MỤC BẢNG Hình 2.1 Một số loài thuộc chi Monstera Hình 2.2: Cây Trầu bà xẻ đột biến Hình 2.3: Cây Trầu bà Nam Mỹ Hình 2.5: Hoa Trầu bà Hình 2.6: Quả Trầu bà đốm đột biến Hình 2.7: Rễ Trầu bà xẻ đột biến 10 Hình 3.1 Mẫu Trầu bà xẻ đột biến 17 Hình 4.1 Chồi Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy môi trƣờng khác 24 Hình 4.2 Chồi Trầu bà xẻ đột biến (sau tuần nuôi cấy) mơi trƣờng có bổ sung TDZ 27 Hình 4.3 Ảnh hƣởng nồng độ đến axit ascorbic khả nhân nhanh chồi Trầu bà xẻ đột biến sau tuần ni cấy 29 Hình 4.4 Sự hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy môi trƣờng có bổ sung IBA 31 Hình 4.5 Sự hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần ni cấy mơi trƣờng có bổ sung NAA 33 Hình 4.6 Cây Trầu bà xẻ đột biến in vitro giá thể khác 35 v DANH MỤC HÌNH Bảng 4.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng MS khác phát triển chồi Trầu bà xẻ đột biến (Monstera deliciosa variegata Thai constellation) sau tuần nuôi cấy 23 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng TDZ đến khả nhân nhanh chồi Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy 26 Bảng 4.3 Ảnh hƣởng nồng độ axit ascorbic đến khả nhân nhanh chồi Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy 29 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng IBA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy 31 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng NAA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy 33 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến in vitro 35 vi DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT BA : – Benylaminopurine CT : Cơng thức CV (%) : Sai số thí nghiệm ĐC : Đối chứng cm : Centimet g/l : gam/lit mg/l : miligam/lít pH : Power of hydrogen α-NAA : Acid α – napthalene acetic LSD (0,05) : Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 0,05 MS : Môi trƣờng Murashige acetic TDZ : Thidiazuron [1-phenyl-3-(1, 2, 3-thidiazol-5-yl) IBA : Indole – butyric acid vii TÓM TẮT Cây Trầu bà xẻ đột biến (Monstera deliciosa variegata Thai constellation) loại kiểng có hình dạng lạ mắt, chúng đƣợc du nhập vào Việt Nam năm gần Cây khỏe mạnh, có kích thƣớc đa dạng, bị sâu bệnh hại, có giá trị kinh tế cao cịn có ý nghĩa phong thủy Cây thƣờng đƣợc trồng để làm nội thất văn phòng Đề tài thực nhằm khảo sát ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng đến nhân chồi, tạo rễ hình thành điều kiện in vitro nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng phát triển Trầu bà xẻ đốm đột biến sau nhân nhanh Kết nghiên cứu cho thấy: - Môi trƣờng thích hợp với MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + 30g/l đƣờng saccarose + BA + 7g/L agar, pH = 5,8; chiều cao trung bình 3,22cm - Môi trƣờng nhân nhanh chồi tốt MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + 100 mg/l axit ascorbic + 7g/l agar + BA + 30 g/l saccarose; với số chồi trung bình 3,06 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 2,89 cm - Mơi trƣờng tạo hồn chỉnh tốt MS + 1,0 mg/l NAA + g/l agar + 30 g/l sacrose - Giá thể thích hợp ngồi vƣờn ƣơm peat moss + xơ dừa (1:1) với tỷ lệ sống 99%, số trung bình đạt 3,70 lá/cây chiều cao trung bình đạt 11,16 cm viii mục đích nghiên cứu khả tạo hoàn chỉnh chồi Trầu bà xẻ đột biến , thí nghiệm đƣợc thực môi trƣờng MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + 30g/l saccarose + BA + 7g/L agar, pH = 5,8 Môi trƣờng đƣợc bổ sung IBA với nồng độ từ 0,5 – mg/L, đƣợc theo dõi tuần Kết nghiên cứu đƣợc trình bày Bảng 4.4 Hình 4.4 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng IBA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy Công thức Nồng độ IBA(mg/L) Tỷ lệ rễ (%) Số rễ Chiều dài rễ (cm) CT1 (ĐC) CT2 0,0 0,5 100 100 2,30 3,36 5,50 6,38 CT3 CT4 CT5 1,0 1,5 2,0 100 100 100 5,30 4,36 3,36 6,92 6,13 5,92 7,6 0,51 0,6 0,059 CV% LSD Môi trƣờng nền: MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + g/l agar + 30g/l sucrose, pH = 5,7 - 5,8 Hình 4.4 Sự hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy mơi trƣờng có bổ sung IBA 31 Kết nghiên cứu thể bảng 4.4 hình 4.4 cho thấy ảnh hƣởng IBA đến khả rễ chồi - Số rễ thu đƣợc cao cấy môi trƣờng công thức (1,0 mg/l IBA), số rễ tăng lên từ 2,30 rễ từ mẫu ban đầu, dễ dài khỏe Khi thêm IBA với nồng độ cao số rễ tăng dần cao bổ sung 1,0 mg/l IBA Tuy nhiên tăng nồng độ IBA lên 1,5 mg/l 2,0 mg/l khả rễ giảm dần 4,36 rễ/cây 3,36 rễ/cây; rễ ngắn yếu hơn, dễ đứt gãy - Chiều dài rễ: Trên công thức cho chiều dài rễ dài với 6,92cm; công thức cịn lại có chiều dài rễ lần lƣợt CT1: 5,50cm; CT2: 6,38cm; CT4: 6,13cm; CT5: 5,92 cm Khi bổ sung IBA chiều dài rễ tăng dần từ 5,50 cm công thức (đối chứng) đạt giá trị tốt bổ sung 1,0 mg/l IBA, tăng tiếp nồng độ IBA chiều dài rễ lại giảm 6,13 cm - Tỷ lệ rễ tất cơng thức có bổ sung IBA đạt 100% Từ kết cho thấy môi trƣờng rễ phù hợp với môi trƣờng MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + 30g/l saccarose + 7g/L agar + 4BA, pH = 5,8 bổ sung 1,0mg/L IBA 4.3.2 Ảnh hưởng α-NAA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến α-NAA loại hormone thực vật thuộc nhóm auxin có khả kích thích hình thành mơ sẹo rễ bất định, kích thích giãn tế bào, thí nghiệm thực với mục đích nghiên cứu ảnh hƣởng dải nồng độ NAA đến khả tạo hoàn chỉnh chồi Trầu bà xẻ đột biến Tôi tiến hành thí nghiệm mơi trƣờng MS bổ sung nồng độ α-NAA lần lƣợt 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg/l Kết nghiên cứu đƣợc trình bày Bảng 4.5 Hình 4.5 32 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng NAA tới hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần nuôi cấy Công thức Nồng độ NAA Tỷ lệ rễ (%) Số rễ Chiều dài rễ CT1 (ĐC) CT2 0,0 0,5 100 100 2,63 4,86 4,50 6,53 CT3 CT4 CT5 1,0 1,5 2,0 100 100 100 6,93 5,06 3,96 7,49 6,18 6,21 3,6 0,31 0,7 0,075 CV% LSD Môi trƣờng nền: MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + g/l agar + 30g/l sucrose, pH = 5,7 - 5,8 Hình 4.5 Sự hình thành rễ Trầu bà xẻ đột biến sau tuần ni cấy mơi trƣờng có bổ sung NAA Kết trình bày bảng 4.5 hình 4.5 cho thấy: - Số rễ: Khi tăng nồng độ NAA lên đến 1,0 mg/L đạt kết cao với số rễ đạt 6,93 rễ Số rễ thấp thu đƣợc môi trƣờng công thức (đối chứng) Trên công thức khác số rễ thu đƣợc lần lƣợt CT1: 4,50; CT2: 33 6,53; CT4: 6,18; CT5: 6,21 Khi tăng dần nồng độ NAA số lƣợng rễ tăng dần đạt giá trị lớn nồng độ 1,0 NAA; tăng tiếp nồng độ NAA số rễ có giảm cịn 3,96 rễ mơi trƣờng bổ sung mg/L NAA - Chiều dài rễ: môi trƣờng thu đƣợc chiều dài rễ khác nhau.Chiều dài rễ đạt tốt công thức với chiều dài rễ 7,49cm rễ to khỏe, cứng cáp Trên công thức đối chứng chiều dãi rễ nhỏ 4,50 cm - Khi tăng nồng độ NAA từ 0,0 – 1,0 mg/l, số rễ trung bình chiều dài rễ trung bình tăng tỷ lệ thuận với nồng độ NAA Tuy nhiên, bổ sung NAA với nồng độ từ 1,5 – 2,0 mg/l tỷ lệ nghịch với số rễ chiều dài rễ Việc bổ sung nồng độ NAA cao 1,0 mg/l làm cho rễ yếu dễ bị đứt gẫy, chiều dài rễ ngắn - Tỷ lệ rễ tất công thức có bổ sung α-NAA đạt 100% Từ kết cho thấy môi trƣờng công thức cho kết tốt nhất, rễ to,khỏe Vì môi trƣờng phù hợp với môi trƣờng MS + 200mg/l NaH₂PO₄ + 30g/l saccarose + 7g/L agar + 4BA, pH = 5,8, bổ sung 1,0 mg/L NAA Kết luận, từ thí nghiệm tạo hồn chỉnh, mơi trƣờng phù hợp mồi trƣờng MS có bổ sung NAA với nồng độ mg/l đạt số rễ trung bình đạt 6,93 rễ/cây chiều dài rễ trung bình 7,49 cm 4.3.3 Ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến in vitro Giá thể ảnh hƣởng đến vƣờn ƣơm, mục đích thí nghiệm tìm giá thể phù hợp với Trầu bà xẻ đột biến 34 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến in vitro Công thức 2,53 4,13 Chiều cao (cm) 9,77 10,50 Tỷ lệ sống (%) 90 95 3,70 11,16 99 +++ 3,16 9,13 80 + Giá thể Số Peat moss Xơ dừa Peatmoss + xơ dừa (1:1) Peat moss + đá perlite (10%) Nhận xét ++ +++ CV% 8,4 4,8 LSD 0,38 0,034 Ghi chú: (+) nhỏ, sức sống (++) kích thƣớc trung bình, dễ gãy, sức sống (+++) kích thƣớc to, thân cây, cứng cáp sức sống tốt CT1 CT2 CT3 CT4 Hình 4.6 Cây Trầu bà xẻ đột biến in vitro giá thể khác 35 Trên công thức tỷ lệ sống cao 99%, tiếp đến công thức tỷ lệ sống 95%; Công thức 1, tỷ lệ sống 90%; thấp công thức tỷ lệ sống 80% Chiều cao cao công thức 3: 11,16cm, tiếp đến công thức 2: 10,50cm; công thức chiều cao 9,77cm; thấp công thức cao 9,13cm Số thu đƣợc công thức lần lƣợt CT1:2,53 lá; CT2:4,13 lá; CT3:3,70 lá; CT4: 3,16 Sau tuần theo dõi, giá thể công thức cho kết cao cho phát triển, nhiên cần tránh cho bị côn trùng cắn để tăng tỷ lệ sống Giá thể phù hợp để phát triển: peat moss + xơ dừa tỷ lệ 1:1 36 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu thí nghiệm tiến hành, tơi rút đƣợc kết luận nhƣ sau: Mơi trƣờng thích hợp với MS + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + 30g/l đƣờng saccarose + 7g/L agar; chiều cao trung bình 3,22cm Môi trƣờng MS + 100 mg/l axit ascorbic + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + 7g/l agar + 30 g/l sacrose môi trƣờng phù hợp cho nhân nhanh chồi trầu bà xẻ đột biến với số chồi trung bình 3,06 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 2,89 cm Mơi trƣờng bổ sung TDZ khơng thích hợp cho nhân nhanh trầu bà xẻ đột biến Môi trƣờng rễ phù hợp môi trƣờng MS + 1,0 mg/l NAA + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + g/l agar + 30 g/l sacrose với số rễ trung bình đạt 6,93 rễ/cây chiều dài rễ trung bình đạt 7,49 cm Giá thể phù hợp peat moss + xơ dừa (1:1) với tỷ lệ sống 99%, số trung bình đạt 3,70 lá/cây chiều cao trung bình đạt 11,16 cm 5.2 Đề xuất quy trình nhân nhanh Môi trƣờng nhân nhanh: MS + 100 mg/l axit ascorbic + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + g/l agar + 30 g/l sucrose Sau tuần nuôi cấy Môi trƣờng rễ: MS + 1,0 mg/l NAA + 200mg/L NaH₂PO₄ + BA + g/l agar + 30 g/l sucrose Sau tuần nuôi cấy Giá thể: Peat moss + xơ dừa 37 5.3 Kiến nghị Để hồn thiện quy trình nhân giống in vitro trầu bà lụa cần hoàn thiện số nội dung sau: Nghiên cứu thêm chất điều tiết sinh trƣởng phù hợp với nhân nhanh chồi rễ trầu bà xẻ đột biến Nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống in vitro quy mô sản xuất 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Phạm Thị Thu Hằng, Nguyễn Thanh Hải, Nguyễn Thị Thùy Linh, Nguyễn Thị Thủy, Đặng Thị Thanh Tâm, Nguyễn Thị Phƣơng Thảo Nhân nhanh in vitro trầu bà cánh phƣợng (Philodendron xanadu) Tạp chí Khoa học Phát triển 2013, tập 11, số 6: 826-832 www.hua.edu.vn Trần Thị Ngọc Lan,Trần Thị Hoàn Anh Vi nhân giống hồng môn (anthurium andraeanum) qua nuôi cấy lớp mỏng tế bào Tạp chí Cơng nghệ Sinh học15(2): 319-326, 2017 Tài liệu tiếng anh Mohamed M Abass1 , H A El-Shamy , A Kamel Dawh and Sawsan S Sayed In vitro micropropagation of aglaonema commutatum schott Zagazig J Agric Res., Vol 43 No (2) 2016 Moraga, S., & Alberto, P (2003) Micropropagacion de Scindapsus sp y Syngonium sp Universidad Catolica de Valparaiso Fac De Agronomia En la Biblioteca Central del INIA M827 2003 Murashige, T (1980) Plant growth substances in commercial uses of tissue culture In “Plant Growth Substances” (F Skoog, ed) Pp: 626-434 Spinger-Verlag, Berlin and New York Lin, M., Wang, H X., Tang, Q M., Chen, B L., Du, L., Yang, S T., & Gong, J Y (2012) Tissue culture and rapid propagation technologies for Scindapsus aureus J Southern Agri, 43(10), 1447-1451 Stanly C; Bhatt A; Sulaiman B; Keng Cl 2012 Micropropagation of Homalomena pineodora Sulaiman & Boyce (Araceae): a new species from Malaysia Horticultura Brasileira 30: 39-43 Sabrina Schumacker Zanca, Gilmar Roberto Zaffari (2012) In vitro micropropagation of Monstera obliqua Miq PHỤ LỤC 39 TN1: Ảnh hƣởng môi trƣờng MS khác phát triển chồi Trầu bà xẻ đột biến in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN1 24/ 8/22 19: :PAGE VARIATE V003 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 264441 661103E-01 138.29 0.000 * RESIDUAL 10 478064E-02 478064E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 269222 192301E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN1 24/ 8/22 19: :PAGE VARIATE V004 HESONHAN SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6.92267 1.73067 52.98 0.000 * RESIDUAL 10 326668 326668E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.24933 517810 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN1 24/ 8/22 19: :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 31.7667 7.94167 410.78 0.000 * RESIDUAL 10 193333 193333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 31.9600 2.28286 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 24/ 8/22 19: :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CHIEUCAO 2.93833 2.81733 2.97333 3.22000 3.04333 HESONHAN 1.83333 1.13333 1.46667 2.13333 1.80000 SOLA 1.53333 2.26667 2.36667 2.86667 2.86667 SE(N= 3) 0.126236E-01 0.104350 0.802773E-01 5%LSD 10DF 0.397773E-01 0.328811 0.252957 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 24/ 8/22 19: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CHIEUCAO HESONHAN SOLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.9985 15 1.8733 15 3.6000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.13867 0.21865E-01 0.7 0.0000 0.71959 0.18074 8.6 0.0000 1.5109 0.13904 3.9 0.0000 | | | | TN2: Ảnh hƣởng TDZ tới nhân nhanh Trầu bà xẻ đột biến in vitro 40 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN2 24/ 8/22 22:27 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7.47333 1.49467 67.26 0.000 * RESIDUAL 12 266667 222222E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 7.74000 455294 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN2 24/ 8/22 22:27 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 5.47289 1.09458 458.19 0.000 * RESIDUAL 12 286669E-01 238891E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.50156 323621 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN2 24/ 8/22 22:27 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.29833 259667 12.63 0.000 * RESIDUAL 12 246667 205556E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 1.54500 908824E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2 24/ 8/22 22:27 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 HESONHAN 2.80000 1.26667 2.00000 2.03333 1.93333 1.56667 CHIEUCAO 2.81333 1.91333 1.99667 3.01000 2.79000 1.93333 SOLA 1.70000 1.50000 1.43333 1.26667 1.23333 1.16667 SE(N= 3) 0.860663E-01 0.282188E-01 0.827759E-01 5%LSD 12DF 0.265200 0.869518E-01 0.255061 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2 24/ 8/22 22:27 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 1.8000 18 2.1728 18 1.6167 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.67475 0.14907 8.3 0.0000 0.56888 0.48876E-01 2.2 0.0000 0.30147 0.14337 8.9 0.0002 41 | | | | TN3: Ảnh hƣởng nồng độ axit ascorbic tới nhân nhanh Trầu bà xẻ đột biến in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE HESONHAN FILE TN4 25/ 8/22 0:28 :PAGE VARIATE V003 HESONHAN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 13.5644 2.71289 90.43 0.000 * RESIDUAL 12 359999 299999E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 13.9244 819085 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN4 25/ 8/22 0:28 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 5.56289 1.11258 ****** 0.000 * RESIDUAL 12 380068E-02 316724E-03 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.56669 327453 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN4 25/ 8/22 0:28 :PAGE VARIATE V005 SOLA SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6.26278 1.25256 86.72 0.000 * RESIDUAL 12 173333 144444E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 6.43611 378595 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 25/ 8/22 0:28 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 HESONHAN 2.73333 2.86667 3.06667 2.30000 2.10000 1.20000 CHIEUCAO 2.43667 3.09000 2.89333 2.68000 2.61333 2.01000 SOLA 1.58000 3.06000 3.10000 2.50000 2.66667 1.70000 SE(N= 3) 0.999998E-01 0.102749E-01 0.693889E-01 5%LSD 12DF 0.308133 0.316606E-01 0.213811 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 25/ 8/22 0:28 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HESONHAN CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 2.5444 18 2.6206 18 2.3722 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.90503 0.17320 6.8 0.0000 0.57223 0.17797E-01 0.7 0.0000 0.61530 0.12019 5.1 0.0000 42 | | | | TN4: Ảnh hƣởng IBA tới việc tạo Trầu bà xẻ đột biến in vitro hoàn chỉnh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE TN6 25/ 8/22 3:31 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 15.5360 3.88400 48.55 0.000 * RESIDUAL 10 800001 800001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 16.3360 1.16686 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN6 25/ 8/22 3:31 :PAGE VARIATE V004 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 16.5594 4.13984 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 108000E-01 108000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 16.5702 1.18358 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 25/ 8/22 3:31 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SORE 2.30000 3.36667 5.30000 4.36667 3.36667 CDR 5.50000 6.38667 6.92667 6.13000 5.92667 SE(N= 3) 0.163299 0.189736E-01 5%LSD 10DF 0.514562 0.597866E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 25/ 8/22 3:31 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.7400 15 5.5740 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0802 0.28284 7.6 0.0000 1.0879 0.32863E-01 0.6 0.0000 43 | | | | TN5: Ảnh hƣởng NAA tới việc tạo Trầu bà xẻ đột biến in vitro hoàn chỉnh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE TN7 25/ 8/22 3:37 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 29.8760 7.46900 254.62 0.000 * RESIDUAL 10 293334 293334E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 30.1693 2.15495 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE TN7 25/ 8/22 3:37 :PAGE VARIATE V004 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 14.0080 3.50199 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 170004E-01 170004E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.0250 1.00178 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 25/ 8/22 3:37 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SORE 2.63333 4.86667 6.93333 5.06667 3.96667 CDR 4.50333 6.53000 7.49667 6.18000 6.21333 SE(N= 3) 0.988827E-01 0.238050E-01 5%LSD 10DF 0.311583 0.750105E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 25/ 8/22 3:37 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.6933 15 6.1787 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4680 0.17127 3.6 0.0000 1.0009 0.41232E-01 0.7 0.0000 44 | | | | TN6: Ảnh hƣởng giá thể đến sinh trƣởng Trầu bà xẻ đột biến in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE TN7 5/ 9/22 19:48 :PAGE VARIATE V003 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 4.29667 1.43222 33.70 0.000 * RESIDUAL 340000 425000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.63667 421515 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN7 5/ 9/22 19:48 :PAGE VARIATE V004 CHIEUCAO SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6.96082 2.32027 ****** 0.000 * RESIDUAL 266736E-02 333419E-03 * TOTAL (CORRECTED) 11 6.96349 633045 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN7 5/ 9/22 19:48 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SOLA 2.53333 4.13333 3.70000 3.16667 CHIEUCAO 9.77000 10.5000 11.1600 9.13333 SE(N= 3) 0.119024 0.105423E-01 5%LSD 8DF 0.388125 0.343773E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN7 5/ 9/22 19:48 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOLA CHIEUCAO GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 3.3833 12 10.141 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.64924 0.20616 6.1 0.0001 0.79564 0.18260E-01 0.2 0.0000 45 | | | |