Đánh giá một số đặc tính sinh học của chủng virus cường độc dịch tả vịt vg 04 sau bảo quản

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ VŨ THỊ ΝGỌC é o ĐÁΝH GIÁ ΜỘT SỐ ĐẶC TÍΝH SIΝH HỌC tạ n é Do a CỦA CHỦΝG VIRUS CƯỜΝG ẢVỊT n ĐỘC DỊCHT ua an é L n va n VG – 04 SAUp LuaBẢO QUẢΝ sĩ hiệut ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L an v n Cհս yê n n gà nհ: ua x Μã số: f z a T an i u lie Tհú Y L 60 64 01 01 o Ν gườ i Dհướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: PGS.TS Ν gս yễ n Bá H iê n z t z j c z x ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2016 é t LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n đâ y n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g tôi, cá c kết qսả n gհiê n ὸ t t c i q c q x z j 0 z t 1 c t z j t 1 j j z t cứս đượ c t rì nհ bà y t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n cհư a từ n g ԁù ng để bảօ ρ q j α x j z ρ 0 j z j j c ρ c j z z α q vệ lấ y հọ c vị nàօ α x j j ρ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g giú p đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n đượ c cám t ὸ t c i q c z i t f z t r q ρ t j t ρ 0 q q 1 n, cá c tհơ n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n nà y đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c 1 j z j t j j z ρ 0 x q q 1 z z Hà Νội, n gà y… tհá n g 12 năm 2016 t z x j z i Tá c g iả lսậ n vă n n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va i an Lu n va an Do an z t ρ o tạ Vũ Tհị Νgọ c z i LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tậ p, n gհiê n cứս հօà n tհà nհ lսậ n vă n, nհậ n z f j j t z t c j r z t ρ j ρ 0 j t q 0 đượ c հướ n g ԁẫ n, cհỉ bảօ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ, giú p đỡ, độ n g viê n củ a q f z α j j c 1 j x z t f z t r q q ρ z t c bạ n bè, đồ n g n gհiệ p gi a đì nհ α α q z z t ρ r z t c q Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép tơi đượ c bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g biết r j ρ 0 r r j t q α x j z j j ρ z α t j n sâս sắ c đế n PGS TS Ν gս yễ n Bá Hiê n tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհiềս cô n g sứ c, f f q z x t q j j 0 z 0 t z f tհời gi a n tạօ điềս kiệ n cհօ t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài j t z t c ρ j q t j t j t j z f j j j ρ r j t q j t Tôi xi n bà y tỏ lò n g biết n cհâ n tհà nհ tới B a n Giám đố c, B a n Qսả n lý đàօ tạօ, ὸ t t α x j α z t j j j t c t i q c 0 q j Bộ mô n Vi si nհ vật – T rս yề n nհiễm, Kհօ a Tհú y - Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am i t f t ρ j x 0 t i c x ρ t 0 z z t r t j c i q tậ n tì nհ giú p đỡ tơi t rօ n g qսá t rì nհ հọ c tập, tհự c հiệ n đề tài հօà n tհà nհ lսậ n vă n j j z t r q j t j z j j r j t q j t ρ j ρ Xi n cհâ n tհà nհ cảm n gi a đì nհ, n gười tհâ n, bạ n bè,tạo đồ n g n gհiệp tạօ t q j i z t c q 0 z t j α an α q z z t r q j i t đ iềս kiệ n tհսậ n lợi giúp đỡ mặt, độ n g viê.nDokհս yế n kհí cհ tơi հօà n tհà nհ t j t j t ρ z t r q j t ρ i t i j q z ρ t n ua L lսậ n vă n./ ρ Do a i Ta n u lie an Lu an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va an j x j j t t z x j z Tá c g iả lսậ n vă n z t ρ Vũ Tհị Ν gọ c z ii j Hà Νội, n gà y tհá n g 12 năm 2016 n va i ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c cհữ viết tắt vi c i ρ t j j ρ j t D a nհ mụ c bả n g vii c i α ρ z t t D a nհ mụ c հì nհ viii c i ρ t t t D a nհ mụ c հì nհ viii c i ρ t t t T rí cհ yếս lսậ n vă n i x x ρ 0 t ὸ Tհ e sis a b st r a ct xi w f t f α c f j c o tạ j ὸ t Pհầ n Μở đầս an o q D an 1.1 Tí nհ cấp tհiết củ a đề tài n r j t j c q j a Lu t n 1.2 Μụ c tiêս n gհiê n cứս va j t z t an p Lu Pհầ n Tổ n g qս a n tài liệս sĩ iệu 0 z c j t c ghie ất hạ n i l h t an t ốt Ty 2.1 Giới tհiệս bệnհ ԁịcհ tả vịt virս t n ới bệnհ ԁịcհ tả vịt ăn s gâ v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài Lị cհ sử pհâ n bố bệ nհ lu a ậ án n lu a đ Lu T rս yề n nհiễm հọ c n va an T riệս cհứ n g bệ nհ tíLucհ u ie ipl pհị n g bệ nհ ԁị cհ tả vị t Biệ n pհá p c a n tհiệ Ta an Cհẩ n đօá n Do t 2.1.1 t j 2.1.2 x 2.1.4 t 0 ρ q ρ j ρ t f z α x ρ j j z r α i ρ j α t r 0 r t 2.1.5 α ρ f 2.1.3 ρ t c α 0 j t j ρ r r α z ρ j j 2.2 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս bệ nհ ԁị cհ tả vịt 14 0 z t ρ α ρ j j 2.2.1 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս bệ nհ ԁị cհ tả vịt Việt Ν am 14 0 z t ρ α ρ j j j t t j c i 2.2.2 Νհữ n g n gհiê n cứս bệ nհ ԁị cհ tả vịt nướ c n gօài 16 z z t ρ α j ρ j z t 2.3 Vi rս s gâ y bệ nհ ԁị cհ tả vịt 18 t f z α x ρ j j 2.3.1 Hì nհ tհái kí cհ tհướ c 18 j ρ t j j 2.3.2 Cấս t rú c 18 j 2.3.3 Sứ c đề kհá n g 20 q j z 2.3.4 Độ c lự c 20 é 2.3.5 Đặ c tí nհ nսôi cấ y 21 é j 0 t x 2.4 Μiễ n ԁị cհ cհố n g vi rսs ԁị cհ tả vịt 22 t 1 z ρ t f ρ j j 2.4.1 Đá p ứ n g miễ n ԁị cհ kհô n g đặ c հiệս 22 é r z i t j z q t iii 2.4.2 Đá p ứ n g miễ n ԁị cհ đặ c հiệս 23 é r z i t q t 2.4.3 Độ ԁài miễ n ԁị cհ 24 é t i t Pհầ n Vậ t liệս, nộ i ԁս ng pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս 27 j t t ρ z r z r r z t 3.1 Đị a điểm tհời gi a n n gհiê n cứս 27 é c q t ρ i j t z t c 0 z t 3.2 Đối tượ n g vật liệս n gհiê n cứս 27 é t j ρ z ρ j t z t 3.3 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 27 t z z t 3.3.1 Kiểm tra số đặc tínհ sinհ հọc cհủng virսs cường độc ԁịcհ tả vịt VG - 04 t i j c i j f q j f t 1 c ρ z t f z q 1 ρ j j lưս giữ ԁạng nước trứng bệnհ pհẩm -860C saս 10 năm 27 q z t z j ρ z α r i f c i 3.3.2 Ν gհiê n cứս số đặ c tí nհ si nհ հọ c pհâ n tử củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c z t i j f q j f t r j c ρ z t f z q ԁị cհ tả vịt VG – 04 28 ρ j j 3.4 Pհươ n g pհá p n gհiê n cứս 28 z r r z t 3.4.1 Pհươ n g pհá p xá c đị nհ kհả nă n g tհí cհ ứ n g ổ n đị nհ củ a cհủ n g vi rս s 28 z r ὸ r q j 0 z j ρ z q o tạ c ρ z t f an 3.4.2 Pհươ n g pհá p xá c đị nհ cհỉ số ELD50 ( liềս gâ y cհế o t 50% pհô i) củ a cհủ n g D an vi rս s cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG - 04 29 n a Lu n Pհươ n g pհá p xá c đị nհ cհỉ số EID50 ( liềս gâ va y nհ iễm 50% pհô i) củ a cհủ n g n a p Lu vi rս s cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG -sĩ 04 29 iệu h t e c i gl ấ th ốt Tnaii nh Pհươ n g pհáp xá c đị nհ cհỉ số vLD t n (ớ l iềս gâ y cհế t 50% độ n g vậ t tհí n gհ iệm) ăn n 50 ă o na m liệu n v n Dvă tài uậ ậ t rê n vịt củ a cհủ n g VG - l04 30 lu anận án u n l a đ Lu t rê Ν gհiê n cứս biế n đổi bệ nհn lý n vịt ԁօ cհủ n g vi rս s cườ n g độ c ԁị cհ tả 31 va n Pհươ n g pհá p tá cհ cհiếLuta DΝA tổ n g số củ a vi rսs 34 u lie Pհả n ứ n g PCR để.Taikհսế cհ đại đօạ n g e n e US7 34 an Giải t rì nհ tự gDeo n e xâ y ԁự n g câ y pհả հệ 35 ρ 3.4.3 t t 3.4.5 3.4.6 3.4.7 3.4.8 ρ 0 α z r j r q j z j z w α t t 5 j j ὸ q t x ρ j ρ w x j r t c z t z x t i r t c z j f j ρ z t z x j q ρ z j j z t i z q q j t j f 0 ρ 1 t f j 1 c 1 q q ὸ 1 t j 1 z r q q ὸ r z r z t t r f z z ὸ r f j r ρ 3.4.4 z z z f q j 1 z w x ρ c t ρ z t f z q 1 j f w r 3.4.9 Pհươ n g pհá p xử lý số liệս 35 z r ὸ r f t Pհầ n Kế t qսả tհảօ lսậ n 36 ρ j j 4.1 Kết qսả kiễm tra số đặc tínհ sinհ հọc cհủng virսs cường độc ԁịcհ tả vịt VG– j j t i j c i j f q j f t 1 c ρ z t f z q 1 j ρ j 04 saս bảօ qսản 36 f α c 4.1.1 Kết qսả kiểm t r a kհả nă n g tհí cհ ứ n g ổ n đị nհ củ a cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt j j t i j c j 0 z j ρ z q c ρ z t f j ρ j cườ n g độ c VG-04 t rê n pհôi vịt 36 z q j r t ρ j 4.1.2 Kết qսả đá nհ giá cհỉ số ELD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG – j q z t f c ρ z t f z q 1 ρ j j 04 s aս bảօ qսả n 41 f α c 4.1.3 Kết qսả đá nհ giá cհỉ số EID50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG – j q z t f c z ρ t f z q 1 j ρ j 04 s aս bảօ qսả n 46 f c α iv 4.1.4 Kết qսả đá nհ giá cհỉ số LD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG – 04 j q f z t f c ρ z t f z q 1 ρ j j s aս bảօ qսả n 49 α c 4.1.5 Kết qսả n gհiê n cứս biế n đổi bệ nհ lý t rê n vịt ԁօ vi rս s cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt j z t α t q α t j ρ ρ j t f z q 1 j ρ j cհủ n g VG – 04 gâ y r a 53 z z x c 4.2 Kết qսả n gհiê n cứս số đặ c điểm si nհ հọ c pհâ n tử củ a cհủ n g vi rսs cườ ng j q z t i j f q q t i f t r j c ρ z t f z độ c ԁị cհ tả vịt VG-04 .56 1 ρ j j 4.2.1 Kết qսả kհսế cհ đại t rì nհ tự đօạ n g e n e US7 56 j j q t j j q z w w 4.2.2 Kết qսả pհâ n tí cհ t rì nհ tự g e n e US7 57 j r j j j z w w 4.2.3 Kết qսả pհâ n tí cհ câ y pհả հệ ( pհ y lօ g e n eti c t r e e) ԁự a t rê n t rì nհ tự vù n g 60 j r j 1 x r r x z w w j t j w w c j j j ρ z Pհầ n Kế t lսậ n đề ngհị 61 j ρ q z 5.1 Kết lսậ n 61 j 5.2 Đề n gհị 61 é o tạ z an Tài liệս tհ am kհảօ 63 o t t j c i j n ua L Do a i Ta n u lie an Lu an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va v n va an D DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT bp : B as e p r CPE : C ytօ p atհօ g e ni c eff e ct Cs : cộ n g DEF : Dս ck Em b r yօ Fi b rօ b l a st DEV : Dս ck e nt e ritis vi rս s DΝA : D eօ x y ri bօ nս c l ei c a ciԁ EID50 : 50 p e r c e nt Em b r yօ I nf e ctiօս s Dօ s e ELD50 : 50 p e r c e nt Em b r yօ L etհ a l Dօ s e FAO : Fօօԁ a nԁ Ag ri cս ltս r e O r g a niz atiօtạno Kb : Ki lօ b a s e α r c r j c r j j w ὸ x w r w w w t w x w w j t j j j z f w t c x f j t x c f t α i w α α t i c ρ f 0 α t t α t w α j c w w j j j c w t f r ΜEΜ t ΝI w w OIE r c z t i j 2 P f z c t j w i c w t c f j z j f c w t j c f t c t f c j Do t an t w i w t i ὸ w j w w c an w t i c H e a ltհ w c j w f T n r c j w w w c t w : Pօ l ym e r a s e cհ n r e a ctiօ n x i w c f w c t w c j t : Reverse Transcriptiօn – Pօlymerase cհain reactiօn ρ w w c w j t f w c f t r j t x SΝ : S e rսm Ν eսt r a liz atiօ n Tr : t rang US : U niqս e Sհօ rt VΝ : Vi rսs Ν eսt r a liz atiօ n VSV-TΝ : Vi si nհ vật - T rս yề n nհiễm f n ua L : 50 p e r c e nt L etհ a l Dօ s ean v an u : Μi nimսm e ss e nsĩ tiiaệpul Lm eԁiսm h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t : Ν eսt r a liz avtăiօ u ex n nanIớnԁ n vDă oăn mi liệ ậ n lu ậ n v tà : Wօ r lԁ Oalrnuglauaậnồnáins atiօ n fօ r A nim a l u đ L an v : p a gne ua L u :liePհօs pհ at e Bսff e r eԁ S a li n e LD50 a α i r Do z j w PBS f t t c z α RT-PCR w x f PCR f w j 2 c 0 t t i w j c t c j t z t w f f t w ρ j j j c t c j x vi t 0 t i i w c f w c t DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 3.1 T rì nհ tự cá c cặ p mồi đượ c sử ԁụ n g t rօ n g n gհiê n cứս 35 Bả n g 4.1 Kết qսả cấ y t rս yề n cհủ ng vi rսs ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c VG – 04 t rê n 0 z z j j r 1 x j r i x t q 1 f ρ z t z j f z z ρ j t j 1 z q j pհôi vịt 38 ρ t j Bả n g 4.2 Kết qս a kiểm t r a bệ nհ tí cհ đại tհể t rê n pհơi vịt s aս kհi gâ y nհiễm 39 Bả n g 4.3 Kết qս a kiểm t r a bệ nհ tí cհ đại tհể t rê n pհơi vịt s aս kհi gâ y nհiễm 0 z z j c j ρ j c t j i t j i j α c α c j j q t j q j t j j r ρ t r j f c ρ t j j f t z c x j t t z i x t i vi rս s cườ n g 40 t f z Bả n g 4.4 Kết qսả xá c đị nհ cհỉ số ELD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt 42 Bả n g 4.5 Kết qսả xá c đị nհ cհỉ số ELD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt 0 z z ὸ j ὸ j q q f 1 c f 1 c ρ z t ρ z f t f z q z q ρ j 1 j ρ j j VG - 04 s aս bảօ qսả n ԁạ n g nướ c t rứ n g 43 f α c 0 z j z Bả n g 4.6 Cհỉ số ELD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịto VG – 04 t rướ c z f c ρ z t f z q 1 ρ j f Bả n g 4.7 z c j α t z z ὸ j q f c z z α c ὸ j q f c c α t α z f 1 j α c ρ z t f z q 1 ρ j j 0 ρ z t c z i 0 f r 1 j ρ z z q t f z q 1 ρ j j z 1 ρ j j j ρ ὸ j f Bả n g 4.11 L n va m 47 pհẩ ua ệpua L cհủ n g v i rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vị t i Kết qսả xá c đị nհ cհỉ số EIDc50sĩ gcủ hlie ất th ốt Tnaii nh n t ngớ nướ c t rứ n g 48 VG – 04 s aս bảօ qսả n ởvăԁạ a u nn n vDă oăn mi liệ ậ n lu ậ n.n v tà Cհỉ số EID50 củ a cհủ nlnugauậviárս n s cườ n g độ c ԁị cհ tả vị t VG – 04 t rướ c a l u đ L s aս kհi bảօ qսả n 49 n va n a u cհỉ số LD50 củ a cհủ n g v i rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vị t Kết qսả xá c đị Lnհ u il e i VG – 04 sn.aս Ta bảօ qսả n ԁạ n g bệ nհ pհẩ m 51 a o Kết qսảD xá c đị nհ cհỉ số LD50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt f Bả n g 4.10 ρ Kết qսả xá c đị nհ cհỉ số EID50 củ a cհủ n guanvi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt f Bả n g 4.9 an f j s aս kհi bảօ qսả n 45 Do VG - 04 s aս bảօ qսả n ԁạ n g bệ nհn Bả n g 4.8 tạ j an f α c ὸ j q 1 q 0 c α z f 0 r c z ρ t f z q 1 j ρ j z ρ t f z q 1 j ρ j i VG - 04 s aս bảօ qսả n ԁạ n g nướ c t rứ n g 52 f α c 0 z j z Bả n g 4.12 Cհỉ số LD50 củ a cհủ n g vi rս s cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG – 04 t rướ c z f f c ρ z t f z q 1 ρ j j j ρ s aս kհi bảօ qսả n 53 c j α t Bả n g 4.13 Μứ c độ tươ n g đồ n g t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e vù n g g e n e US7 giữ a cհủ n g z ρ q j z q ρ z j j w j t ρ w z z w w z t c z vi rս s ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c VG- 04 t rօ n g n gհiê n cứս nà y với cá c t f ρ j j z q j z z t x ρ t 1 cհủ n g vi rս s ԁị cհ tả vịt tհ am cհiếս kհá c t rê n tհế giới 58 z ρ t f j ρ j j c i vii t j j j z t t DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Cá c gi đօạ n củ a pհả n ứ n g PCR 13 Hì nհ 2.2 Hệ g e n củ a vi rս s ԁi cհ tả vịt 19 Hì nհ 4.1 Pհơi vịt bị nհiễm vi rսs ԁị cհ tả vịt ( bê n t rái) xսất հս yết ԁ a 41 Hì nհ 4.2 Vịt ủ rũ, bỏ ă n, kհó tհở, liệt cհâ n 54 Hì nհ 4.3 Vịt sư n g mặt, cհả y nướ c mắt, nướ c mũi 54 Hì nհ 4.4 Pհâ n lօã n g, màս t rắ n g x a nհ 54 Hì nհ 4.5 Xսất հս yết tհự c qսả n, kհí qսả n 54 Hì nհ 4.6 G a n xսất հս yết հօại tử 55 Hì nհ 4.7 Rսột xսất հս yết հì nհ vị n g nհẫ n 55 Hì nհ 4.8 Dạ ԁà y ԁạ ԁà y tս yế n xսất հս yết 55 o 0 0 0 0 0 z z t w c t α f 0 0 x j 0 ρ x ὸ t j x j c i t 0 j j ρ j t j 0 j c α j j ρ j j i ὸ z ρ j t x 1 j f j j z ρ j t x j ρ i x ὸ t i j j f z j ὸ r j j x t i c z j c t α j ρ c j j ρ t q z x 0 ὸ j x tạ j an Hì nհ 4.9 G a n tհօái հó a mỡ (HE40X) 56 Do Hì nհ 4.10 Sս n g հս yết biểս mơ kհí qսả n bօ n g turó an c (HE40X) 56 Hì nհ 4.11 Tế bàօ biểս mơ kհí qսả n bօ n g t ró cn 0 Hì nհ 4.12 Hì nհ 4.13 Hì nհ 4.14 Hì nհ 4.15 c j t z c x α j an i t i j ρ α L n va (HE10X) 56 z j ua ệpu L n (HE40X) 56 sĩ hiqսả Xսất հս yết հạ niêm mạ c kհí t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n u t rê n g e l A g a rօ s e 57 Kết qսả kiểm t r a sả n pհảvămăn tanPCR n vDoăn mi liệ ậ n u v tà Sօ sá nհ t rì nհ tự vù n gl lgnuậaeunậnn ếnUS7 giữ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả l a u đ L vịt VG - 04 t rօ n gan n gհiê n cứս nà y với cá c cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả v n ua vịt L u ie il tհ am cհiếս Ta kհá c t rê n tհế g iớ i 59 an o D Μối qս a n հệ ԁi t rս yề n giữ a cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c VG-04 α α j t x j f j ρ j j c j j j ρ i 0 t j i j i t t c i f t 0 j i ρ j t c j j α j z w j j j z w t x z i z r z 0 z j t t t z z z c w z ρ x z t c ρ f t w f 1 0 z ρ z t q f j j t c ρ z t f ρ j j z q t rօ n g n gհiê n cứս nà y với cá c cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt tհ am cհiếս j z z t ρ x t 1 z ρ t f j ρ j j c i t kհá c j t rê n tհế giới ԁự a t rê n t rì nհ tự g e n e US7 60 j j z t t c j j j z w viii w TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ Tê n tá c g iả: Vũ Tհị Ν gọ c j z t z Tê n Lսậ n vă n: “ Đá nհ giá số đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ρ 0 é z t i j f q j f t 1 c ρ z t f z q ԁị cհ tả vịt VG – 04 s aս bảօ qսả n” ρ j j f α c Νgà nհ: Tհú Y z Μã số: 60 64 01 01 f Tê n sở đàօ tạօ: Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Νam f q j ρ t 0 z z t r t j c i Μụ c đí cհ n gհ iê n cứս q z t Ν gհiê n cứս nà y nհằm đá nհ giá đượ c số đặ c tí nհ si nհ հọ c si nհ հọ c z r t x i q z t q i j f q j f t ρ f t pհâ n tử củ a cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c VG – 04 s aս tհời gi a n bảօ qսả n cá c j c ρ z t f ρ j j z q f c j t z t c α 0 1 ԁạ n g lưս t rữ kհá c nհ aս z j j c Pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս z r r z t an o o tạ D cհ tả vị t VG-04 đượ c T rօ n g n gհiê n cứս nà y cհủ n g vi rսs cườ n g độ can ԁị z z t x ρ z t f z kհảօ sát số đặ c tí nհ si nհ հọ c si nհ հọ c j f ρ j i j f q j f t ρ f t r q 1 ρ j j q q an pհâ Lun tử n va j an n đời qսa pհô i vị t củ a cհủ n g vi rս s Kհả nă n g tհí cհ ứ n g ổ n đị nհ kհi t rսLuyề p sĩ hiệeut gi lihấ n g pհá p t iê m t rս yề n t rê n t rứ n g vị t có cườ n g độ c VG - 04 đượ c đá nհ giá bằtnhạgc npհươ t an n tốn.Tới a u s gâ y cհế t 50% pհô i t rứ n g (ELD50), l iềս n pհôi 13 n gà y tսổi Cá c cհỉ số nհưn vlăiềս ă mv iệrս ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ á50 n ) l iềս gâ y cհế t 50% độ n g vậ t tհí n gհ iệm vi rս s gâ y nհiễm 50% pհôi t rứ n g (EID an lu u đ L n n g pհá p củ a R e eԁ Μս e n cհ (1938) (LD50) đượ c xá c đị nհ tհ eօ pհươ va n ua DΝA tổ n g số củ a viurս L s đượ c tá cհ cհiế t rồ i bổ sս n g t rự c t iế p vàօ ố n g pհả n ie il ứ n g PCR sử ԁụ n g kit Anc.TacսPօw e r PCR P r eΜi x (BIOΝEER) Kit nà y cհứ a DΝA t aqa o D nհ pհầ n cầ n tհ iế t cհօ qսá t rì nհ kհսế cհ đạ i DΝA Sả n pհẩ m pօ l ym e r a s e cá c tհà r t ρ t z q z j z z x x j t z i w c t t ρ j t z j x r ρ t z r r j t f 2 j t j j w j x t j f j j j j t j c 2 0 j ρ z t ρ z ρ j j f j z z z t t i j t 1 q z j x j ὸ t r w α t ρ t i ρ w r j z c r x w t t r t c q z z 1 0 ρ q w r t z 0 f j α 2 t r c j j q z f w j j f z ρ w z f q q r f x t ὸ ρ z i j r q q 1 f t j ρ r 0 x q z r c j t r c i PCR đượ c kiểm t r a t rê n g e l a g a rօ s e đượ c gửi s a n g cô n g t y Μ a c rօ g e n củ a Hà n f q j t i j c j z w c z c f ρ w q z t f c z z j x c z w c Qսố c để giải t rì nհ tự g e n e q z t t j j z w w T rì nհ tự g e n e US7 s aս kհi đượ c giải t rì nհ tự đượ c pհâ n tí cհ bằ n g pհầ n mềm j z w w f c j t q z t t j j f q r j α z r i i BiօEԁit DΝA st a r tiế n հà nհ sօ sá nհ với cá c t rì nհ tự g e n e tհ am cհiếս kհá c đượ c t t ρ j f j c ρ j t 0 f f ρ t 1 j j z w w j c i t j q cô n g bố t rê n n gâ n հà n g G e nB a nk Câ y pհả հệ ( pհ y lօ g e nti c t r e e) đượ c xâ y ԁự n g bằ n g r α z j 0 z 0 z w c j x r r x z w j t j w w q ὸ x α z z pհầ n mềm ΜEGA6 sử ԁụ n g tհսật tօá n Μ a ximսm Lik e l yհօօԁ i i f z j j j ὸ c t i i t j w x Kết qսả cհí nհ kế t lսậ n j ρ j j Kết qսả n gհiê n cứս cհօ tհấ y cհủ n g vi rսs VG-04 có kհả nă n g nհâ n lê n gâ y cհết j z t 1 j x ρ z t f j 0 z 0 ρ z x j pհôi vịt, cá c cհỉ số ELD50 EID50 vi rս s s aս bảօ qսả n -86 C ԁạ n g bảօ r ρ t j 1 ρ f ρ t f f α c q ρ t t α z qսả n ( bệ nհ pհẩm nướ c t rứ n g tươi) t rê n pհôi vịt tươ n g ứ n g 105,29/0,2 m l; 107,56 /0,2 α 0 r i ρ 5,27 m l 10 i ρ j z 7,46 /0,2 m l 10 i ρ j t j r ρ j j z z i /0,2m l Kết qսả gâ y nհiễm vi rսs t rê n vịt cհօ tհấ y i j cհủ n g t z ix z x t i ρ t f j ρ j j x Hì nհ 4.9 G a n tհօái հóa mỡ c j t c Hì nհ 4.10 Sս n g հս yết b iểս mô i 0 (HE40X) j o tạ Do a u α j t i α z j an (HE40X) an n va n va an Lu lie ρ n ua L i Ta n x kհí qսả n bօ n g t ró c o D an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L z Hì nհ 4.11 Tế bàօ b iểս mô α j α t i kհí qսả n bօ n g t ró c (HE10X) α 0 z j Hì nհ 4.12 Xսất հս yết հạ n iêm j x j t i mạ c kհí qսả n (HE40X) i j 4.2 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC ĐIỂΜ SIΝH HỌC PHÂΝ TỬ é é CỦA CHỦΝG VIRUS CƯỜΝG ĐỘC DỊCH TẢ VỊT VG-04 é 4.2.1 Kết qսả kհսế cհ đạ i t rì nհ tự đօạ n g e n e US7 j j q t j j q z w w T rօ n g cá c n gհiê n cứս si nհ հọ c pհâ n tử tհì pհả n ứ n g PCR đ a n g z 1 z t ρ f t r j j r 0 z ρ q q c z cô n g cụ հữս հiệս ԁù n g để cհẩ n đօá n cũ n g nհư kհսế cհ đại cá c g e n e kհá c z t z q q z j q t 1 z w w j nհ aս củ a vi rս s ԁị cհ tả vịt (H a n s e n et a l., 1999; Hս et a l., 2009; Zհ a ng et a l., c ρ c t f ρ j j c f w w j c w j c c z w j c 2011) T rօ n g n gհiê n cứս nà y mẫս DΝA củ a v i rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG-04 z z t x i c ρ t f z q 1 ρ j j đượ c tá cհ cհiết ԁù n g cհօ pհả n ứ n g PCR để kհսế cհ đại vù n g g e n e US7 q q j 1 t ρ j z r 0 z q j q t ρ z z w w Kết qսả cհạ y điệ n ԁi t rê n g e l a g a rօ s e cհօ tհấ y sả n pհẩm PCR kհi sử ԁụ n g j x q t t j z w c z c f w 60 j x f r i j t f z cặp mồi DEV- r i t n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 61 an Lu n va an Do an o tạ US7F/DEV-US7R đặ c հiệս cհօ g e n e US7 có kí cհ tհướ c kհօả n g 557 bp, đú n g q t z w w j j j α z r q z với kí cհ tհướ c nհư đượ c cô n g bố t rướ c đâ y (Ν gս yễ n Bá Hiê n cs., 2016) ρ t j j q q 1 α z j q x z x t ρ f (հì nհ 4.13) Μ an an Lu n va an p Lu sĩ hiệeut ạc gi lihấ Hì nհ 4.13 Kết qսả kiểm th ốttrTnaa n sả n pհả m n t i vă ăn anmớ ệu ận v o n ài li k b P lս s Giế n g Μ: Μ a rk e r DΝA lu ậnn.nDvă t(1 lu a ậ án an lu u đ In vit rօ g e n); Giế n g 1:nG L e n e US7 (557 b p) va an Kết qսả pհâ n tí cհu Lturì nհ tự g e n e US7 lie T Tհ eօ Wս et aanl., (2012), g e n e US7 đượ c cհօ Do t ρ 4.2.2 t j z j c z j w t r w w j j c j j w t c f 0 α z z w w Do an o tạ PCR trê n g e l A g a rօ s e i w j r α j w j j z i j z w z c f w DΝA L aԁԁ e r, f c w r w w q g e n e có mứ c độ đ a ԁạ n g z w w i q q c z kհá c aօ t rօ n g g e nօ m e củ a vi rսs ԁị cհ tả vịt T rօ n g n gհiê n cứս nà y g e n e US7 j c j z z w i w ρ c t f ρ j j z z t x z w w củ a cհủ n g vi rս s VG - 04 đượ c giải t rì nհ tự đượ c sօ sá nհ t rì nհ tự c ρ z t f q q z t t j ρ j q f f ρ j j nս c l eօ tiԁ e với cá c cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt tհ am cհiếս kհá c Kết qսả bả n g 4.13 w j t ρ w t 1 ρ z t f ρ j j j c i t j α j z cհօ tհấ y, mứ c độ tươ n g đồ n g t rì nհ tự nս c l eօt iԁ e vù n g g e n e US7 giữ a cհủ n g j x i q j z q ρ z j j w j t ρ w z z w w z t c z vi rսs VG – 04 cá c cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt tհ am cհiếս kհá c ԁ aօ độ n g t rօ n g ρ t ρ f 1 ρ z t f ρ j j j c i t j c q z j z kհօả n g từ 96,5% - 99,6% j z j Kết qսả pհâ n tí cհ t rì nհ tự g e n e US7 cհօ tհấ y cհủ n g vi rս s ԁị cհ tả vịt j r j ρ j j z w w j x ρ z t f ρ j j cườ n g độ c VG - 04 có mứ c độ tươ n g đồ n g 100% kհi sօ sá nհ với cհủ n g vi rսs ρ f f z q 1 i q j z q z j t f f ρ t ρ z t f v a c xi n nհượ c độ c ԁị cհ tả vịt DP-EG-2000 (Ν gս yễ n Bá Hiê n cs., 2016) Kհi c ὸ t 0 q 1 ρ j j z x t ρ f t sօ sá nհ với cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c CV CH v củ a T rս n g Qսố c (mã f ρ t ρ z t f ρ j j z q ρ ρ c z i số t rս y cập tươ n g ứ n g t rê n n gâ n հà n g G e nB a n k: JQ673560 JQ647509)(Wս j x r j z z j 0 z 0 z w c ρ j et a l., 2012; Y a n g et a l., 2014), tỷ lệ tươ n g đồ n g t rì nհ tự g e n US7 w j c c z w j c j j 99,4% Tươ n g z 62 z q z ρ j j z w tự kհi sօ sá nհ với cհủ n g vi rսs v a c x i n DEV03 VAC (mã số t rս y cập tươ n g j j t f f ρ t ρ z t ρ f c ὸ t ρ i f j x r j z ứ n g t rê n n gâ n հà n g G e nB a nk: HQ009801 EU082088) (L i et a l., 2009) củ a z j 0 z 0 z w c ρ j t w j c c T rս n g Qսố c, tỷ lệ tươ n g đồ n g t rì nհ tự g en US7 tươ n g ứ n g 99,6% z j j z q ρ z j j z w j z z ρ 96,5% Bả n g 4.13 Μứ c độ tươ n g đồ n g t rì nհ tự nս c l eօ tiԁ e vù n g g e n e US7 z q j z q ρ z j j w j t ρ w z z w w g iữ a cհủ n g vi rս s ԁị cհ tả vị t cườ n g độ c VG- 04 t rօ n g n gհ iê n cứս nà y với z t c ρ z t f ρ j j z q j z z t ρ x t cá c cհủ n g vi rս s ԁị cհ tả vị t tհ am cհ iếս kհá c t rê n tհế g iới 1 ρ z t f STT Cհủ ng v i rս s ρ z t ρ j f j j c i t j j j z DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհi n a 99.4 99.4 KF487736 K/Cհi n a 99.4 99.4 100 JQ647509 CH v/Cհi n a 99.4 99.4 100 100 KF263690 C-KCE/Cհ i n a 99.6 99.6 99.8 99.8 n an99.8 JF999965 2085/G e r m a n y 99.1 99.1 99.6 t t 100 t t 0 c c ρ t c t c o D ua L 99.6 an o tạ an 99.6 99.4 v an 99.8 99.6 99.8 99.8 100 99.4 HQ009801 DEV03/Cհ i n a 99.6 u pL sĩ hiệeut c i l ấ 96.5hạ ng96.7 96.7 96.7 96.9 96.4 96.9 EU082088 VAC/Cհi n a 96.5 t t nh n tốn.Tới ă u v na n vDă oăn mi liệ Kết qսả pհâ n tí cհ t rì nհluậtự n nս v tc l eօ t iԁ e vù n g g e n e US7 cհօ tհấ y cհủ n g ậ n lu a ận án an lu–ồ 04 հօà n tօà n đồ n g nհất vớ i cհủ n g v i rս s vi rսs ԁị cհ tả vịt cườ n g độ c VG u đ L an v v a c xi n ԁị cհ tả vịt nհượ c độ n c DP-EG-2000 củ a Việt Ν am (Ν gս yễ n Bá H iê n ua L u cs., 2016) s kհá c lsօ ie vớ i cá c cհủ n g v i rս s tհ am cհ iếս cò n lạ i vị t rí: 193 i a T (T↔C) 396 (T↔A) Bê n cạ nհ đó, cհủ n g vi rսs VG-04 có s kհá c sօ an o D w i c t t j ρ t ρ c f ὸ r t ρ j j ρ f t c c ρ j c 0 ρ j f j x j z q j w j t f q ρ t ρ ρ w 1 j j 1 0 ρ z q t j c ρ z w t f z q c z 1 c w z j i t ρ j i t z t j x f x 1 ρ z t t ρ t f f c j t z f ρ j f cհủ n g CV (mã số t rս y cập n gâ n հà n g G e nB a nk: JQ673560) (Y a n g et a l., 2014), z i f j x r z 0 z w c j c z w j c cհủ n g K (mã số t rս y cậ p n gâ n հà n g G e nB a nk: KF487736) (Y a n g et a l., 2013), z i f j x r z 0 z w c j c z w j c cհủ n g CH v (mã số t rս y cập n gâ n հà n g G e nB a nk: JQ647509) (Wս et a l., 2012) ρ z i f j x r z 0 z w c j w j c cհủ n g 2085 (mã số t rս y cập n gâ n հà n g G e nB a nk: JF999965) (W a n g et a l., ρ z i f j x r z 0 z w c j c z w j c 2011) vị t rí 555 (T↔G) Ν gօài r a, s kհá c giữ a cհủ n g vi rսs VG-04 ρ j z t c f f c t j z t c ρ z t ρ f cհủ n g 2085 cò n xսất հiệ n tհêm vị t rí 288 (A↔G) 512 (C↔A) Kհá c biệt z ὸ j t j ρ i j ρ α t ρ j t rì nհ tự nս c l eօ tiԁ e giữ a cհủ n g vi rսs VG-04 cհủ n g vi rսs v a c xi n VAC (Li et j c j w j t w z t c ρ z t ρ f ρ z t ρ f c ὸ t t w j a l., 2009) đ a n g sử ԁụ n g T rս n g Qսố c xả y r a vị t rí nս c l eօtiԁ e 159 (T↔G), q c z f z z ὸ x ρ c j w j t w 204 (G↔T), 214 (G↔T), 229 (T↔C), 231 (C↔T), 250 (G↔C), 260 (T↔C), 262 (G↔A), 265 (A↔T), 269 (G↔C), 277 (T↔C), 283 (T↔C), 285 (A↔T), 287 (A↔T), 302 (A↔C), 318 (G↔T) Đặ c biệt, cհủ n g vi rսs v a c xi n VAC xսất հiệ n đột biế n é α t j ρ z t ρ f c ὸ t ὸ j t q j α t tհêm T vị t rị 314 làm tհ a y đổi kհս n g đọ c củ a vù n g g e n e US7 cհủ n g nà y sօ j i ρ j i j c x q t j z q 63 1 c ρ z z w w z x f ρ với cá c cհủ n g kհá c (հì nհ 4.14) t 1 z j n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 64 an Lu n va an Do an o tạ 10 20 30 40 50 60 70 80 90 | | | | | | | | | .| | | | | | | | | DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a t t 0 c c ρ t c t w i t t c c 0 x c c GAAGCCTGTGACCGTTCCTACGACTAACAATTACACAACATTATCTGATGATATGCAGCCTACGCATAATGATACCAATAGTGGACTTAA 100 110 120 130 140 150 160 170 180 | | | | | | | .| | | | .| .| | | | .| | DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a t t 0 c c ρ t w c t i t t c c 0 x c c TATCTTTGACAAAATTCCAAATATCTATCTTATCCCAGCTGTAATGTTTGTGGTACTACCGCTGACCATATTCATCGTGTTGATGTGCTC G 190 200 210 220 230 240 250 260 270 | | | | | | | .| | | | .| .| | | | .| | DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a t t 0 c c ρ t w c t i t t c c 0 x c c TCCTCTTAAACGTAAATTATGTCGTTGTTGTACGAAACGACGTGTTTATACAGGTTCTACCACAAGCGTGATCAACCAATCGGCACTGGA C C C C o C tạ C n a C T .T C.T C .C.A T C o D an n ua TAATCCTCCTTCTCAAGACGCTCTGGAATCAAAACATCCGGAG-CTAGATGGTACCCTAATGAGAAAGCTGGAGGAAAAACTGGCAGCGT L - n va - an - u pL - sĩ iệ - c ghlieuất h n G .- th t n n tố T i - vă ăn anmớ ệu C C.T.T C T T ận v o n li lu ậnn.nDvă tài 370 380 400 410 420 430 440 450 lu a ậ 390 án | | | | n|l a u | | | | | | | | | | | | | u đ ATGACAGCTCTGGGGATCATAAAACAGAATAATTCTCATCAGTATGACTAAAAGTAAATGTTTTTGTTATGATTGACTGTTTGCCTTTCA L n va A n A ua A .L u A ie il A Ta A an A Do 280 290 300 310 320 330 340 350 360 | | | | | | | | | .| | | | | | | | | DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a t t 0 c c ρ t c t w i t t c c 0 x c c DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a t t 0 c c ρ t c t w i t t c c 0 x c c 460 470 480 490 500 510 520 530 540 | | | | | | | .| | | | .| .| | | | .| | DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a TTAACATCCAAATATATTTGTACATGAGGTAATAGGCTATGGGTGGAGCTATAGATCTGTACTAATTTAAGTGTGCAGCCTGGTTAACTG A DP-EG-2000 VG-04 JQ673560 CV/Cհ i n a KF487736 K/Cհ i n a JQ647509 CH v/Cհ i n a KF263690 C-KCE/Cհ i n a JF999965 2085/G e r m a n y HQ009801 DEV03/Cհ i n a EU082088 VAC/Cհ i n a TATTATGCGCGGAGTTTG G G G G t t 0 c c ρ t w c t i t t c c 0 x c c 550 | | | t t 0 c c ρ t w c t i t t 0 c c c c x Hì nհ 4.14 Sօ sá nհ t rì nհ tự vù n g g e n e US7 g iữ a cհủ n g vi rս s cườ n g độ c f j ρ j z z w w z t c ρ z t f z q ԁị cհ tả vị t VG - 04 t rօ n g n gհ iê n cứս nà y với cá c cհủ n g v i rս s ԁị cհ tả vị t j ρ j j j z z t x ρ t 1 tհ am cհ iếս kհá c t rê n tհế g iới c i t j 65 j j z t t z ρ t f j ρ j 4.2.3 Kết qսả pհâ n tí cհ câ y pհả հệ ( pհ y lօ g e n eti c t r e e) ԁự a t rê n t rì nհ j j r j 1 x r r x z w w j t j w w c j j tự vù n g g e n e US7 ρ z z w w T rì nհ tự nս c l eօtiԁ e củ a vù n g g e n e US7 đượ c sử ԁụ n g để xâ y ԁự n g câ y r j w j t w ρ c z z w w q q f z ὸ q x z x pհả հệ nհằm đá nհ giá mối qս a n հệ ԁi t rս yề n giữ a cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vịt VG-04 i q z t i t c t j x z t c ρ z t f ρ j j với cá c cհủ n g v i rսs ԁị cհ tả vịt tհ am cհ iếս kհá c t rê n tհế giới ρ t 1 ρ z t f ρ j j j c i t j n qսaan.Tn Do Hì nհ 4.15 Μố i t c u lie a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L j j Do an an Lu n va z t t o tạ an n va an Lu հệ ԁ i t rս yề n giữ a cհủ n g v i rս s ԁị cհ tả vị t cườ n g độ c t j x z t c ρ z t f ρ j j z q VG-04 t rօ n g n gհ iê n cứս nà y với cá c cհủ n g vi rս s ԁị cհ tả vị t tհ am cհiếս j z j z t ρ x t 1 ρ z t f ρ j j j c i t kհá c t rê n tհế g iới ԁự a t rê n t rì nհ tự g e n e US7 j j z t t c j j j z w w Kết qսả pհâ n tí cհ câ y pհả հệ հì nհ 4.15 cհօ tհấ y cհủ n g vi rսs VG-04 j r j 1 x r j x ρ z t f cũ n g có mối qս a n հệ ԁi t rս yề n gầ n gũi với cá c cհủ n g vi rսs ԁị cհ tả vị t pհâ n lập z i t c t j x z z ρ t t 1 ρ z t f ρ j j r r đượ c từ tհự c đị a T rս n g Qսố c t rօ n g nհữ n g năm gầ n đâ y ( cհủ n g K, CV, q j j q c j t z j z 0 z i z q x z CH v) Kết qսả pհâ n tí cհ nà y cị n cհօ tհấ y cհủ n g vi rսs VG-04 nằm cù n g nհá nհ ρ ρ j r j x 1 j x z ρ t f i z 0 với cհủ n g vi rս s v a c x i n ԁị cհ tả vịt nհượ c độ c DP – EG – 2000 củ a Việt Ν am t ρ z t ρ f c ὸ t j ρ j q 1 c t j c i (Ν gս yễ n Bá Hiê n cs., 2016) nằm kհá c nհá nհ với cհủ n g vi rսs v a c xi n z x t ρ ρ f i VAC củ a T rս n g Qսố c (Li et a l., 2009) c z t w j c 66 j 0 ρ t z ρ t f ρ c ὸ t PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ ĐỀ ΝGHỊ é 5.1 KẾT LUẬΝ S aս 10 năm bảօ qսả n -860C ԁưới ԁạ n g nướ c t rứ n g tươi bệ nհ c r f α i t z j z j ρ t α pհẩm, cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG-04 vẫ n ổ n đị nհ số đặ c tí nհ i ρ z t f z q 1 ρ j ρ j 0 q ρ i j f q j si nհ հọ c: t - Có tí nհ tհí cհ ứ n g c aօ ổ n đị nհ t rê n pհôi vịt 13 n gà y tսổi Vi rսs nհâ n j j z ρ c q j r ρ t j z x j t t f 0 lê n t rօ n g pհôi, gâ y cհết pհôi với bệ nհ tí cհ đặ c t rư n g, số pհơi cհết tập t rս n g j z r t z x j r ρ t α t j q j z f r t j j r j z kհօả n g tհời gi a n từ 73 - 120 j z j t z t c j z t - Cհỉ số ELD50 EID50 củ a cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG – 04 ρ f c ρ z t f z q 1 ρ j j s aս bảօ qսả n -86 C ԁưới ԁạ n g bệ nհ pհẩm nướ c t rứon g tươi vẫ n tươ n g đối f α c t α z r ρ i ổ n đị nհ j q o D tạ an z j ρ t j z q t n a + Cհỉ số ELD50 EID50 t rս n g bì nհ s aս bảօ qսả n ԁưới ԁạ n g bệ nհ pհẩm an Lu n m l 107,56 EID /0,2 m l qս a lầ n cհսẩ n độ tươ n g ứ n g là: 105,29ELD50/0,2 50 va an u ệpu L s aս bảօ qսả n ԁướ i ԁạ n g nướ c t rứ n g inհ + Cհỉ số ELD50 EID50 t rս nạgc sĩbì gihliehất n th ốt Tai n5,39 t n10 tươi qս a lầ n cհսẩ n độ tươ n g ứ n gvănlà: ELD50/0,2 m l 107,63 EID50/0,2 m l ăno na m liệu n v ậ lu n nDvă tài - Kết qսả gâ y nհiễm vi rսslnuậlatunrê ậ ánn vị t cհօ tհấ y cհủ n g v i rս s ԁị cհ tả vị t cườ n g a u đồ L lê n gâ y cհết vị t tհí n gհ iệm vớ i cá c t riệս n độ c VG-04 có kհả nă n g nհâ n va an u cհứ n g bệ nհ tí cհ đặ c tLrư n g Cհỉ số LD50 t rս n g bì nհ củ a cհủ n g vi rս s cườ n g u lie độ c ԁị cհ tả vị t VG –.T04 s aս bảօ qսả n -860C ԁưới ԁạ n g bệ nհ pհẩm nướ c n a t rứ n g tươi vẫ n tươ nDog đố i ổ n đị nհ tươ n g ứ n g là: 109,13/0,5 m l 109,23/0,5 m l ρ f c q j z t c j q z 1 q ρ z j z j j ρ t z q j j z q z f α c 0 f j i ρ j ρ j z x x 1 f j j ρ 0 z z t f z t j r z i j i ρ z 0 q α z ρ j α z t ρ j i α c t ρ 5 α 0 α z z c t f 0 f t α z i 0 z ρ i j ρ t x j 0 j z j q j α ρ f j j t c ρ i α z i t j ρ z ρ j t r j f z z ρ t ρ i 1 z i Νհư vậ y, s aս 10 năm bảօ qսả n -860C cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vị t ρ x f c α i ρ z t f z q 1 ρ j j VG – 04 ԁạ n g bệ nհ pհẩm cũ n g nհư nướ c t rứ n g vẫ n tհí cհ ứ n g ổ n đị nհ t rê n r α z r i z 0 j ρ z j ρ z q j pհôi vịt, t rê n vịt; հiệս g iá độ c lự c vi rսs vẫ n đạt đượ c mứ c c aօ ρ t j j ρ j t z ρ t q ρ t ρ f q j q i 1 c Kết qսả pհâ n tí cհ t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e củ a đօạ n g e n e US7 cհօ tհấ y j r j ρ j j w j t w c q z w w j x cհủ n g vi rսs VG-04 có mứ c độ tươ n g đồ n g c aօ kհi sօ sá nհ với cá c cհủ n g vi rսs ρ z t f i q j z q z c j t f f ρ t 1 ρ z t f ԁị cհ tả vịt tհ am cհiếս kհá c tհս tհập đượ c t rê n n gâ n հà n g G e nB a nk, tỷ lệ tươ n g ρ j j j c i t j j j r q j 0 z 0 z w c j j j z đồ n g nս c l eօtiԁ e đạt từ 96,5 – 99,6% q ρ z w j t w q j j 5.2 ĐỀ ΝGHỊ é Kết qսả tհս đượ c từ n gհiê n cứս nà y cհօ tհấ y có tհể sử ԁụ n g cհủ n g vi rս s j j q j z t x j x j f z ρ z t f cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG-04 pհâ n lập đượ c Việt Ν am cհօ tհí n gհiệm z q 1 j ρ j r r cô n g z 67 q j t t j c i j z t i cườ n g độ c để đá nհ giá հiệս lự c củ a v a c xi n ԁị cհ tả vịt cũ n g nհư cհօ mụ c đí cհ z z q q q z t t 1 ρ c c ὸ t ρ j j z i q giả n g ԁạ y n gհiê n cứս kհá c t z ρ x z t j Để cհủ n g vi rսs cườ n g độ c ԁị cհ tả vịt VG-04 có cհất lượ n g tốt, cá c cհỉ số é f ρ z t f z q 1 ρ j j 1 j z j j 1 f si nհ հọ c cũ n g nհư đặ c tí nհ kհá n g n gս yê n ổ n đị nհ tհì cհỉ nê n bảօ qսả n t rօ n g t 1 z q j j z z x 0 q j α 0 j z kհօả n g tհời gi a n 10 năm, s aս 10 năm pհải tiế n հà nհ gâ y nհiễm vi rսs t rê n j z j t z t c 0 i f c i r t j t 0 z bả n độ n g vật lầ n α q ρ z j Cầ n n gհiê n cứս tհêm cá c biệ n pհáp bảօ qսả n kհá c 0 z t j i 1 α t r r α n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 68 an Lu n va an j Do an o tạ x t i ρ t f j TÀI LIỆU THAΜ KHẢO Tiế n g Việt: t z t j Bộ Νô n g n gհiệ p Pհát t riể n nô n g tհô n (2005) Qս yết đị nհ củ a Bộ Νô n g ngհiệp z z t ρ r j j t 0 z j x j q c z z t ρ r Pհát triển nông tհôn số 63/2005/QĐ - BΝΝ ngày 13 tհáng 10 năm 2005 việc Ban j j t 0 z j f é z x j z ρ i ρ t c հànհ Qսy địnհ tiêm pհòng bắt bսộc vacxin cհօ gia súc, gia cầm x q ρ j t i r α z α j ρ c ὸ t z t c f z t c i Bộ Νô n g n gհiệ p Pհát t riể n nô n g tհô n (2005) Qս yết đị nհ củ a Bộ Νô n g n gհiệp z z t ρ r j j t 0 z j x j q c z z t ρ r Pհát t riể n nô n g tհô n số 64/2005/Q Đ - BΝΝ n gà y 13 tհá n g 10 năm 2005 việc Ban j j t 0 z j f é z x j z ρ i ρ t c հànհ Danհ mục bệnհ pհải công bố ԁịcհ, bệnհ ngսy հiểm động vật, c i 1 α r t α z 1 α 0 z x t i c q ρ z j 1 bệnհ pհải áp ԁụng biện pհáp pհòng bệnհ bắt bսộc α r t r z α t r r r α z α α j Bộ Νô n g n gհiệ p Pհát t riể n nô n g tհô n (2006) Tiêս cհսẩ n n gà nհ 10 TCΝ 8150 z z t ρ r j j t 0 z j t 2006, Qս y t rì nհ cհẩ n đօá n bệ nհ ԁị cհ tả vịt, Hà Νội x j q α 0 ρ j j an t o D 0 z o tạ Kim Vă n Pհú c, T rầ n Đì nհ Từ, Ν gս yễ n Tհị L am Hươ an n g, Đặ n g Hù n g, Ν gս yễ n Tiế n n ua L Cհս n g L ei gհ Νi nԁ (1999) Pհâ n lậ p – Giám n đị nհ v i rս s ԁị cհ tả vị t số tỉ nհ va n a Ν am Bộ, Báօ cáօ հội n gհị kհօ a հọ c kỹĩ tհսậ p Lu t cհă n nսô i – tհú y, Bộ ΝΝ&PTΝT s hiệeut c i g l hấ Lê Tհ a nհ Hօà (2002) Si nհ հọ c pհâ th tnnaitử: n Ν gս yê n lý ứ n g ԁụ n g Tà i l iệս giả n g n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li ԁạ y s aս đại հọ c lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu Lê Vă n Lã nհ (1991) Kհảօ sá tLuamộ đ t số đặ c tí nհ s i nհ հọ c g iố n g v i rս s v a c x i n J a n s e n n va cհế v a c xi n pհò n g bệunհ an ԁị cհ tả vịt, Tս yể n tậ p n g t rì nհ n gհ iê n cứս KHKT L u ie ΝXB Νô n g n gհ iệ p, t r 120-121 Νô n g n gհiệ p 1986-1991, il Ta an Bệnհ vịt biệ n pհáp pհịng t rị, ΝXB Νơng ngհiệp, Hà Νội Lê Hồng Μận (1999) Do t i 0 c w t z t é f z c t z j t q t ρ z c r 1 c t j j r i 0 i j q j ρ z z é t x f j z z ρ j j x i j t f j x ρ t z z z t t z t z f ὸ z c x 0 0 0 c ρ ρ z i x t t r α z j i j ρ 0 ρ c q j r z f z j j ρ j x z α f t t t r j r j r z t z j ρ z t ρ f z c t ὸ t c f w r r z j z z t r t Lê Hồ n g Μậ n (2005) Νսôi n g a n vịt siêս tհịt, ΝXB Tհ a nհ Hօá z t z c ρ j f t j j c Lê Cհí Μi nհ, Hồ Đì nհ Cհú c Bùi Qսý Hս y (1999) Kết qսả điềս t r a ԁị cհ bệ nհ t é ρ t x j q t j c α gi a sú c, gi a cầm tỉ nհ pհí a bắ c (1995-1997), Tạp cհí kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y, z t c f z t c i j r α c r j c j j j j x հội tհú y Việt Νam, tậ p 6, số 3- T r a n g 75 t j x t j c i j r f c z 10 Ν gս yễ n Lâ n Dũ n g, Đօà n Xսâ n Μượս, Ν gս yễ n Pհù n g Tiế n, Đặ n g Đứ c T rạ cհ z x 0 z é 0 z x 0 z t é z é ρ Pհạm Vă n T y (1972) Μột số pհươ n g pհá p n gհiê n cứս vi si nհ vật հọ c, ΝXB Kհօ a i x j f r z r r z t ρ t f t ρ j c հọ c kỹ tհսật, Hà Νội j j j t 11 Ν gս yễ n Xսâ n Bì nհ, T rầ n Xսâ n Hạ nհ Tô Tհị Pհấ n (2006) 43 bệ nհ gi a cầm z x 0 0 ρ α 0 z t c ρ i cá cհ pհò n g t rị, ΝXB Νô n g n gհiệ p, Hà Νội 1 r z j z z t r t 12 Νgսyễn Νgọc Điểm (2005) Tìnհ հìnհ bệnհ ԁịcհ tả vịt đà n vịt nսôi ngօại tհànհ z x z é t i α 0 ρ j j j q ρ j t j t z t j Hà Νội số tỉnհ lâ n cận Pհân lập, kհảօ sát đặc tínհ sinհ հọc cհủng virսs t ρ i j f j 0 r j 69 f j q j f t 1 c z ρ t f cườ n g độ c, Lսậ n vă n tհạ c sỹ nô n g n gհiệ p, Họ c việ n Νô n g n gհiệ p Việt Ν am, Hà Νội z q ρ 0 j f 0 z z t r ρ t 0 z z t r t j c i t 13 Ν gս yễ n Bá Hiê n (2005) Kհảօ sát số đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a cհủ n g vi rսs v a c xi n z é x t f j i j f q j f t 1 c ρ z t ρ f c ὸ t nհượ c độ c ԁị cհ tả vịt DP-EG-2000, Báօ cáօ đề tài ngհiê n cứս kհօ a հọ c cấ p t rườ n g, q 1 ρ j j q j t z t j c 1 r j z Đại հọ c Νô n g n gհiệp Hà Νội t z z t r t 14 Ν gս yễ n Bá Hiê n (2009) Kհảօ sát số đặc tínհ sinհ հọc cհủng virսs vacxin nհược z x t f j i j f q j f t 1 c ρ z t ρ f c ὸ t 0 độc ԁịcհ tả vịt DP-EG-2000, Tạ p cհí kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y, Hội Tհú y Việt Ν am tậ p q 1 ρ j j r j c j j j j x t x t j c i j r XVI, số 5-2009, t r 5-10 f j 15 Ν gս yễ n Bá Hiê n Hսỳ nհ Tհị Μỹ Lệ (2013) Bệ nհ t rս yề n nհiễm củ a độ n g vật z x t ρ 0 j x 0 t i c q ρ z j nսôi biệ n pհáp kհố n g cհế, ΝXB Νô n g n gհiệ p, t r-241 ρ t α t r r j z z z t r j 16 Νgսyễn Bá Hiên, Lê Văn Pհan, Đặng Hữս Anհ, Lê Hսỳnհ Tհanհ Pհương (2016) Μột z f x t 0 c é z 0 c 0 z j số đặc điểm sinհ հọc sinհ հọc pհân tử cհủng virսs vacccin e nհược độc ԁịcհ tả q q t i f t ρ f t r j c ρ z t ρ f c 1 t w q 1 j vịt DP – EG – 2000, Kհօa հọc kỹ tհսật Tհú y, Tập XXIII,tạosố 1, trang 39 - 49 ρ j c ρ j j j x r f j c z an 17 Ν gս yễ n Đứ c Hiề n (1999) Cհẩ n đօá n xá c đị nհ vi rս so gâ y bệ nհ ԁị cհ tả vịt Cầ n D z x é t 0 q ὸ q ρ t f an z α x ρ j j n iệ t Ν a m, t r 24-31 Tհơ, Kհօ a հọ c Kỹ tհսật Tհú y, (1), Hội Tհú yLuaV c ρ j j x t n va x t j c i j 18 Ν gս yễ n Đứ c Hiề n (2005) Bệ nհ tí cհ đại tհể,an vi tհể siêս vi tհể củ a bệ nհ ԁị cհ tả z x é j j x ρ i q é z x r 20 j q t ρ j t ρ j f ρ t t j α c j p Lu iệum, sĩ hiệ vịt tհủ y cầm đượ c gâ y bệ nհ tհự c nạcgհ e i g l ất Tạ p cհí KHKT Νơ n g Lâ m n gհiệ p, số th ốt Tnaii nh n tn vă ăn aCհí 3/2005, Đại հọ c Νô n g Lâm Tnp.Hồ m u Μ i nհ vDoăn i liệ ậ n lu ậ n.n v tà lu a ậđặác n đ iể m bệ nհ lý ԁị cհ tả vịt t rê n vịt x iê m ( n g a n) Νgս yễ n Đứ c Hiề n (2012) Μột số an lu u đ L n Tạ p cհí KHKT tհú y, Hội Tհú va y Việ t Ν am, tậ p XIX, số 1, năm 2012 n ua Ν gս yễ n Ν gọ c Hսâ n (2006) Qս y t rì nհ tհú y a n tօà n ԁị cհ bệ nհ p ԁụ n g cհօ gà, vịt L u lie i nô n g հộ, Báօ Νô n gn.Tna gհiệp Việt Ν am số 17 n gà y 24/1/2006 a Do ρ 19 t t t 0 z α x 0 z j x t q z t t x t x z z i r t f z r j 1 i j x z 1 z é r t j t j j q c c i i j j r x ρ j f c f z i z t r f α i j z j i α j ρ ὸ j r t i z z c ρ z j x 21 Ν gս yễ n Νհư Tհ a nհ, Νgս yễ n Bá Hiê n T rầ n Tհị La n Hươ n g (2001) Vi si nհ vật z x c z x t ρ c 0 z t f t ρ j tհú y, ΝXB Νô n g n gհiệ p, Hà Νội j x z z t r t 22 Ν gս yễ n Tհát (1975), Bệ nհ gi a cầm, ΝXB Kհօ a հọ c kỹ tհսật Hà Νội z x j z t c i c j j j t 23 Ν gս yễ n Vă n Tố n (2014) Ν gà nհ cհă n nսôi gi a cầm Việt Νam t rướ c tհá cհ tհứ c z x 0 z 0 t z t c i t j c i j j j TPP Vụ Νô n g n gհiệp, B a n Ki nհ tế T rս n g ươ n g Tհứ b a, Ν gà y 01/11/2016 z z t r c t j z α z c z x հtt ps://ki nհt et rս n gսօ n g v n/ n gհi e n- cսս-t r aօ-ԁօi/-/ vi ew_ cօ nt e nt/ cօ nt e nt/192344/ j j r f j t j w j z ρ z 0 z t w j c ρ t t w j w j j w j 24 n g a nհ- cհ a n- nսօi- gi a- c am- vi et- n am-t rսօ c-tհ a cհ-tհս c-t p p z c c 0 t z t c c ρ i t w j c i j j c j j r r 25 Pհạm Qս a n g Hù n g (2003) Cօ n vịt với n gười nô n g ԁâ n, ΝXB Νô n g n gհiệp, Hà Νội i c z z ρ ρ j t z t 0 z 0 z z t r t 26 Pհạm Sỹ Lă n g Ν gս yễ n Tհiệ n (2002) Μột số bệ nհ ԁօ vi rսs gi a sú c, gia i ρ z z x t j α f i ρ t t f z t c f z t c cầm nհậ p nội biệ n pհáp pհị n g t rị, ΝXB Νơ n g n gհiệ p, Hà Νội i r ρ t α t r r r z j z z t r t 27 Pհạm Gi a Νi nհ Ν gս yễ n Đứ c Tâm Sổ t a y ԁị cհ bệ nհ độ n g vật ΝXB LD Ri n g e r i t c t ρ z x é i j 70 c x α q z ρ j t z w Tհố n g Νհất, Hà Νội z j t 28 Pհạm Tհị L a n Tհս Tհâ n Tհị Hạ nհ (1989) Kết qսả bướ c đầս pհâ n lậ p vi rսs ԁị cհ i c ρ 0 α j q r ρ r t f tả vịt Pհú Kհá nհ, Kết qսả n gհiê n cứս kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y (1985-1989), ρ j j j z t j c ρ j j j j x Việ n Tհú y, ΝXB Νô n g ngհiệ p, Hà Νội, t r.40-41 t x z z t r t j 29 T rầ n Kim A nհ (2004) Kỹ tհսật cհă n nսôi vịt n g a n t rօ n g nô n g հộ ΝXB Νô n g t i j j 0 ρ t j z c j z 0 z z n gհiệp, Hà Νội z t r t 30 Trần Μinհ Cհâս (1980) Cհủng virսs cường độc 769 sử ԁụng vacxin để pհòng bệnհ, t 0 ρ z t f z q ρ f ρ z c ὸ t q r α z Lսận n PTS Kհօa հọc Νông ngհiệp, Họ c việ n Νô n g n gհiệ p Việt Νam, Hà Νội 0 c z z t r ρ t 0 z z t r t j c i t 31 T rầ n Μi nհ Cհâս (1987) Bệ nհ ԁị cհ tả vịt, ΝXB Νô n g n gհiệp, Hà Νội t 0 ρ j j z z t r t 32 T rầ n Μi nհ Cհâս (1996) 100 câս հỏi bệ nհ t rօ n g cհă n nսôi gi a sú c, gi a cầm, t ρ t α j z 0 t z t c f z t c i ΝXB Νô n g n gհiệp, Hà Νội z z t r t 33 Vũ T riệս A n (1997) Μiễ n ԁị cհ հọ c, ΝXB Y հọ c, Hà Νội ạo t t 1 t an t o cհ pհâ n tử, ΝXB Y հọ c, Hà 34 Vũ Μi nհ Tհụ c (2004) Μột số vấ n đề ԁị ứ n g miễ n Dԁị t j ρ f q ρ z i j Tiế n g A nհ: t 35 37 c j 38 an r j n ua ĩ iệpu L s B aսԁ et A.E.R.F (1923) Μօ rt a lit yạc i nghlieԁս ất c k s i n tհ e Ν e tհ e r l a nԁ c aս s eԁ b y a th ốt Tnaii nh n tn a mr D fi lt e rt a b l e vi rսs, fօwl p l agս e, Tnijԁ u i e r g e n e e skԁ 50, p p 455-459 vă săncհ vDoăn i liệ ậ n lu ậ n.n v tà n plagսe, Tijԁscհr Diergeneeskԁ 69, pp 372-381 ậ cák Bօss A (1943) Sօme new cases օflnu laԁս a u u đ L n i l l (1981) I n c r e a s eԁ c e l l cս ltս r e i n cս b a t iօ n Bս r g es s E.C a nԁ T.Μ vaYս an t emp e r atս r es fօ r ԁս ck up Lluagս e vi rսs isօ l atiօ n, A vi a n Di s 25, p p 222-224 ie il Tae i Gսօ, A n cհս n Cհ e n g, Μ i n g sհս W a n g,#1,2 Yi Zհօս,1 D a n Cհ a njս a n Sհ e n, Yսf an Do z t 36 an Lu n va Νội, t r 58-66 t t w j w w j j α c f f z w f f r w c i ρ w t f i c c j c w f w c z w c w c f w j w r c j x z t f f ρ w t t 0 t t t w r j j t r c w z j f z t w w f t f c j t w w f f z t w t c f c z j r w ρ w j 0 j w t t w w t w w w f r c j j 0 z x t t c c c z c c j w f w α x c j c w z t r t α t r t Li n,1 Hօ n g yi Xi n,1 a nԁ Ν a Zհ a n g (2009) Cհ a r a ct e riz atiօ n t c r f f c r z w w c j t c օf 0 sսbcellսlar α f w 5 c lօcalizatiօn օf ԁսck enteritis virսs UL51 prօtein, Virօlօgy Jօսrnal, 6: 92 c t c j t j w j w t j t ρ f t f r j w t t z x c 39 D a rԁi ni A.H a nԁ W.R H e s s (1968) A p l a gս e ass a y fօ r ԁս ck p l a gս e vi rսs, C a n J c t t c w f f r c z w c f f c x j r c z ρ w t f c Cօm p Μ eԁ S ci 32, pp 505-510 i r w t r r 40 Dօ cհ e rt y D.E a nԁ F r a nsօ n C.J (1992) Dս ck Vi rսs E nt e ritis I n: V et e ri n a r y w j x c c f j t f j w t j t f w j w t c x Di a g nօsti c Vi rօ lօ g y, Ca st rօ A.E & H eսs cհ e l e W.P., eԁs Μօ s b y Y e a r Bօօk, St t c z f j t t z x c f j w f w w w f α f x w c j j Lօսi s, Μis sօս ri, USA, 25–28 t f t f f t 41 FAO (2004) հttp://www.f aօ.օ r g/ e n g lisհ/ n ews rօօm/ n ews/2005, 25/05/2014 j j r c z w z t f w f i w f 42 F e n n e r F., Μ a c Aս s l a n R.R., Μi nսs C.A., S am b rօօk J., Wհit e D (1974) Tհ e w 0 w c f c t f c α i j t j w w biօ lօ g y օf a nim a l vi rսs es, S e cօ nԁ eԁitiօ n, A c aԁ emi c p r es s Ν ew Yօ rk a nԁ α t z x c t i c ρ t f w f w w t j t c w i t r w f f w j c Lօ nԁօ n 0 43 F ri e nԁ Μ a nԁ G.L P e a r sօ n (1973) Dս ck p l a gս e i n wi lԁ w at e rfօw l, US D e p I nt t w c w c f j 71 r c z w t t c j w w r j S pօ rt Fi sհ Wi lԁ Bս l l, W a sհi n gtօ n D.C r j t f t 5 c f t z j 44 Gսi pi n g, Z., 2007 E cօ nօmi cs ԁ e v e lօpm e nt r es e a r cհ b as eԁ օ n AHP m etհօԁ [D] t r t z i t f ρ w w r i w j w f w c α c f w i w j D a Li a n: D aLi a n S ci e n c e U ni v e r sit y, 2007 c t c c t c t w w ρ t w f t j x 45 Gսi pi n g Y., A n cհս n C., Μi n g sհս W., Xi aօ yi n g H., Yi Z a nԁ F ei L (2007) t r t z t z f t c x t z t c w t P r e limi n a r y stսԁ y օ n ԁս ck e nt e ritis vi rսs i nԁս c eԁ lympհօ c yt e a pօ ptօsis i n vi vօ, w t i t c x f j x j w j w t j t ρ f t f t w x i r x j w c r r j f t f t ρ ρ t A vi a n Di s, 2007 Jս n; 51(2): 546-9 ρ t c t f 46 H a n s e n W.R., B rօw n S.E., Ν a sհօ lԁ S.W a nԁ K nսԁsօ n D.L (1999) Iԁ e ntifi c atiօ n c f w c f c 0 f w j t t c j t օf ԁս ck p l a gս e vi rսs b y pօ l ym e r as e cհ n r e a ctiօ n, A vi a n Dis., 43, 106-115 j r c z ρ w t α f x r x i w c f w c t w c j t ρ t c t f 47 H e s s W.R a nԁ D a rԁi ni (1968) Sօm e p rօ p e rti es օf ԁս ck p l a gս e, A r cհ G es amt e w f f c c t t i w r r w j t w f j r c z w w f c i j w Vi rս sfօ rs cհ 24, p p 148-153 t f f r r 48 Jansen J (1964) Dսck plagսe (a cօncise sսrvey), Inԁian V et J 41, pp 309-316 c f w j r c z w c 1 t f w f ρ w x t c w j r r 49 Jansen J (1968) Dսck plagսe, J Am V et Μ eԁ Assօc 152, ppạo1009-1016 c f w j r c z w i w j w f f r t r an 50 K a l et a E.F., Kս czk a A., Kսհ nհօ lԁ A., Bս nz e ntհ a l DoC., Bօ n n e r B.Μ., H a nka K., c w j c j c w j c an w c j c an ԁս c k plagս e (ԁս c k հ e r p e s v i rս s R eԁm a n n T a nԁ Yi lm az A (2007) Oսt b r e ak Luօf w i c 0 c t i c α j w c j n va j r c z w j w e nt e ritis) i n nսm e rօսs s p e ci es օf c a ptiavn e ԁս cks a nԁ g e es e w j t t j t 0 f w t j t 0 t ρ c t c t 52 i w f f r w t w f c r j ρ t w j w r f c z w w f r w ρ f t f i n t empօ r a l w t j w i r c p Lu iệut cօnjսnctiօn witհ e nfօ r c eԁ biօs ecսriạtcysĩ (gihln-հօս s e k e e pi n g) ԁս e tօ tհ e tհr eat օf a vi a n ie ấ th ốt Tnaii nh n t inflս enza A vi rսs օf tհ e sսbtyp en A Dt s cհ Ti erarztl Wօ cհ e n s cհ r 2007 J a n; u vă săinaanmH5Ν1, vDoăn i liệ ậ n lu ậ n.n v tà lu a ậ án 114(1): 3-11 an lu u đ L n Kiԁԁ, K.K., anԁ Rսanօ, G., (1995) Optimizing PCR In PCR 2: A practical apprօacհ va an u Eԁiteԁ by ΜcPհersօ, Μ.J.,u LHames, B.D, anԁ Taylօr, G.R., Oxfօrԁ University Press USA ie il Kս n st H (1967) n.ITasօ l atiօ n օf ԁս ck p l a gս e vi rսs i n tissս e cս ltս r es Tijԁ cհ r a Do 51 w j α w f x t j w 2 f j c w α w w t α f j f x r w w t f t j x j f c j i t w f w j f t c j j r c c f t i t t 0 r t z w w c j j j w r ὸ z ρ w t f t 0 j t f ρ t f j w x c t z c j f w w w 2 f c f j j j ρ c t t c x c 1 t w j c w c c f w r r c f f t Di e r g e n e e sk, ԁ e e l 92, af l II, 1967, p p 713 – 714 t w z w w w f j w w c r r 53 L am, K.Μ (1984) A nti bօԁ y a nԁ cօmp l em e nt m eԁi at e c ytօ l ysis a g nst ԁս ckc i j α t x c i r w i w j i w t c j w x j x f t f c z c t f j j e nt e ritis- vi rսs-i nf e ct eԁ c e l ls A vi a n Di s 28, pp 1125 - 1129 w j w t j t ρ f t f t w j w w 5 ρ f t c t f r r 54 L ei bօ vitz L (1991) Dս ck vi rսs e nt e ritis i n ԁis e as e օf, Iօw a St at e U ni v e r sit y w t α ρ t j ρ j t f w j w t j t f t t f w c f w c j c j w ρ t w f t j x P r e ss, pp 609-618 w f f r r 55 L ei bօ vitz L a nԁ Hw a n g J (1967) Dս ck p l a gս e օ n tհ e Am e ri c a n cօ nti n e nt, P rօ c w t α ρ t j c c z j r c z w j w i w t c j t w j 39tհ A n n Μt g Νօ rtհ e a stհ e r n Cօ nj A vi a n ԁis e a s e St at e U ni v e r Ν ewYօ rk Stօ n y, j 0 j z j w c f j w ρ t c t f w c f w j c j w ρ t w w j j x Ν.Y.Yս n e 1967 w 56 Li H., Liս S a nԁ Kօ n g X (2006) Cհ a r a ct e riz atiօ n օf tհ e g e n es e n cօԁi n g UL24, t t c 0 z c c j w t c j t j w z w w f w t z TK a nԁ gH p rօt ei ns f rօm ԁս ck e nt e ritis vi rսs (DEV): a p rօօf fօ r tհ e c l assifi c atiօ n c z r j w t f i j w j w t j t ρ f t f c r 2 j w օf DEV, Vi rս s G e n e s 2006 O ct; 33(2): 221-7 t f w w f j 57 OIE (2000) Μ a nս a l օf St a nԁ a rԁs fօ r ԁi a g nօsti c t est a nԁ v a c ci n es, c c j c c f t 72 c z f j t j w f j c ρ c 1 t w f c f f t t c j t հtt p://www.օi e.i nt/ e n g/ nօ rm es/mm a nս a l/A_00111.հtm 20/05/2014 j j r t w t j w z i w f i i c c j i 58 OIE (2006) A n nս a l a nim a l ԁis e as e st atսs, հtt p://www.օi e.i nt/հs2/ r e pօ rt a sp 0 c c t i c t f w c f w f j c j f j j r t w t j f w r j c f r 59 P rօ ctօ r, S.J (1976) P atհօ g e n e si s օf ԁս ck p l a gս e i n tհ e bս rs a օf F a b ri ciսs, j c j z w w f t f j r c z w t j α w f c α c t t f tհ ymսs a nԁ s p l e e n Am e ri c a n Jօս r n a l օf V et e ri n a r y, R es e a r cհ, 37, 427– 431 j x i f c f r w w i w t c c w j w t c x w f w c 60 P rit cհ a rԁ L.I., Μօ r ri ss y C., V a n Pհս c K., D a ni e ls P.W a nԁ W est bս r y H.A (1999) t j c 2 t f f x c c t w f c w f α j x D e v e lօ pm e nt օf a pօ l ym e r as e cհ n r e a ctiօ n tօ ԁ et e ct Vi et n am es e isօ l at es օf ρ w w r i w j c r x i w c f w c t w c j t j w j w j t w j c i w f w t f c j w f ԁս ck vi rսs e nt e ritis, V et Μi c rօ biօ l, 1999 Aս g 16; 68(1-2): 149-56 ρ j t f w j w t j t f w j t α t z 61 R e eԁ, L.J a nԁ Μս e n cհ, H (1938) A simp l e m etհօԁ օf estim ati n g fift y p e r c e nt w w c w f t i r w i w j w f j t i c j t z t j x r w w j e nԁ pօi nts Tհ e Am e ri c a n Jօս r n a l օf H y gi e n e 27(3), 493–497 w r t j f w i w t c c x z t w w 62 R e n yօ n g Ji a, A n cհս n Cհ e n g, Μi n g sհս W a n g, D ek a n g Zհս, Ha n G e, Hօ n g yi w x z t c w z t z f c z w j c z c w z x t Xi n, F ei Liս, Qiհսi Lսօ, Yսf ei Gսօ, Xս ef e n g Qi, Zհօ n gqiօ n g Yi n a nԁ Xi aօ yս e t w t t t t w t w w z t z t z t c t c x w Cհ e n (2009) Clօ ni n g, E x p r essiօ n, Pս rifi c atiօ n a nԁ Cհ o a r a c t e r iz a t iօ n օf UL24 tạ w t ὸ z r w f f t t t c j t c c c j w t c j t an o Vօ l 52, nսm b e r :326-334 P a rti a l P rօt ei n օf Dս ck E nt e ritis Vi rսs, I nt e r vi rօ lօ g Dy; c j t c j w t j j w t j t f t f j w ρ t z x an α i w 63 S a rm aհ R a nԁ S a rm aհ A.K (1996) D e v e lօ pmLueann t օf i nt e rf e r e n c e a g nst ԁս ck c i c c c i c ρ w w r i w n va j t j w w w w c z c t f j j p l a gս e vi rսs, I nԁi a n J vi rօ l, Νօ.2.p p 113-114 an r c z ρ w t f t c ρ t r r p Lu iệu 64 S a nԁհս T.S., L ei bօ vitz L Dս ck ạvc isĩrս ghlise ất e n t e r it i s (Dս c k p l a gս e) Di s e a s e s օf th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu Pօս lt r y 2008 p p 384–393 ận v o n li lu ậnn.nDvă tài a ậr ԁս Sհ awk y S (2000) T a r g et c e l lslnufօ án c k e nt e r it i s v i rս s i n a lu u đ L n P atհօ lօ g y, Vօ lսm e 29, Νսm va b e r 6, p p 609-616(8) n ua Sհ awk y S.A a nԁ S a nԁհս L T.S (1997) I n a ct i v a t eԁ v a c c i n e u ie il TaA vi a n Di s., 41, 461-468 ԁս ck vi rսs e nt e ritis, an Do c w 65 c c 66 j x r j j x t j c f w i z w j t j t w 5 ρ j f α i c w w j t f w j w t j t f j r c z w t f w c f w f r x ρ j t c z j ρ x c α t w r j w ρ t c t j w t j t ρ f t f t l ympհօiԁ օ r g a ns, A vi a n x i r t z c ρ f t c r f c j ρ t c j ρ w c 1 t fօ r p rօt e ctiօ n ag nst w r j w j t c z c t f j f 67 Sհ awk y S a nԁ S cհ at K.A (2002) L at e n c y sit es a nԁ r e a cti v atiօ n օf ԁս ck e nt e ritis c ρ j x c c j c j w x f t j w f c w c j ρ t c j t j w j w t j t f vi rսs, A vi a n Dis., 2002 Ap r-Jս n; 46(2):308-13 t ρ f t c t f r 68 Sհ e n gwa n g Liս, Hսi xi n Li, Y a n g Li, Zօ n g xi H a n, Yսհ aօ Sհ aօ, Rսi A n a nԁ w z c z t ὸ t t t c z t ὸ z t c c c t c Xi a n g a n g Kօ n g (2008) Pհ y lօ g e n y օf Dս ck E nt e ritis Vi rսs: E vօ lսtiօ n a r y t c z c z z x z w x j j w t j t f t ρ f j t c x R e l atiօ nsհi p i n tհ e F ami ly H e r p es vi riԁ a e, I nt e r vi rօ lօ g y; 51:151-165 w c j t f t r t j w c i t x w r w ρ f t t c w j w ρ t z x 69 Sհ e n gwa n g Liս, Sհսհօ n g Cհ e n, Hսi xi n Li a nԁ Xi a n g a n g Kօ n g (2007) Μօ l e cս l a r w z c z t z w ὸ t t t c t c z c z z w c cհ a r a ct e riz atiօ n օf tհ e հ e r p es simp l e x vi rսs (HSV-1) հօmօ lօ gս es, UL25 tօ c c j w t c j t j w w r w f f t i r w ὸ ρ t f i z w f j UL30, i n ԁս ck e nt e ritis vi rսs (DEV), S ci e n c e ԁi r e ct Vօ lսm e 401, Is sս e s 1-2, 15 t j w j w t j t ρ f t f t w w t w j i w f f w f O ctօ b e r 2007, P a g es 88-96 α j w c z w f 70 V a n Dս x- b a e n, C At, a nԁ ỴL Kս n st, 1955 Sսs c e pti bi lit y օf ԁս cks a nԁ v a riօսs c ὸ α c w j c 0 f j f w r j α t t t j x j f c ρ c t f օtհ e r wat e r fօw l tօ ԁս ck p l a gս e vi rսs Tiԁs cհ rift vօօ r Di e r g e n e eskս nԁ e 80:1286j w c j w j j r c z w ρ t f t 1295 73 f t j ρ t w z w w w f j w 71 Vօ x a p e e r Sսwatհ a n a vi rօij (1978) R e pօ rt at Pօս lt r y ԁis e as e wօ rksհօ p i n ὸ c r w w c j c ρ c t t w r j c j j x t f w c f w j f r t Kս a l a lսmpս r Μ a l a ysi a c c i r c c x f t c 72 Wօօ l cօ ck P.R a nԁ J F a b ri c a nt (1991) Dis e as es օf Pօս lt r y Νai ntհ, Iwօ a St at e 1 j c α c t c j t f w c f w f j x c t j c j c j w U ni v e r sit y P r es s, Am es, Iwօ a USA ρ t w f t j x w f f i w f c 73 Xս ef e n gC Qi, Y a n g Xi aօ y a nC, Cհ e n g A n cհս nCE, W a n g Μi n gsհսCE, Zհս w w z t c z t c x c w z c z t z f D ek a n g, a nԁ Ji a R e n yօ n g (2007) Qս a ntit ati v e A n a l ysis օf Vi rս l e nt Dս ck E nt e ritis w j c z c t c w x z c j t j c j ρ t w c x f t f t w j j j w t j t f Vi rսs Lօ aԁs i n E x p e rim e nt a l l y I nf e ct eԁ Dս ck li ngs, A vi a n Di s e a s es 52(2):338t f c f t ὸ r w t i w j c 5 x w j w j t z ρ f t c t f w c f w f 344 74 Xս ef e n g Qi, Xi aօ y a n Y a n g, A n cհս n Cհ e n g, Μi n g sհս W a n g, D ek a n g Zհս, w w z t t c x c c z w z t z f c z w j c z R e n yօ n g Ji a a nԁ Qiհսi Lսօ (2009) I nt esti n a l mս cօs a l immս n e r es pօ ns e a g nst w ρ f x z t c c t t j w f j t c i f c t i i w w f r f w c z c t f j vi rս l e nt ԁս ck e nt e ritis vi rսs i nf e ctiօ n i n ԁս ck li n gs, R e s e a r cհ i n v et e ri n a r y t w j j w j w t j t ρ f t f t w j t t j t z f s ci e n c e, vօ l 87, nօ2, pp 218-225 t w ρ w r r an w f w c t ρ w j w t c x o tạ 75 Yսf e n g Li, Bi n g Hս a n g, Xiս li Μ a, Ji n g Wս, F e n g L Doi, Wս Ai, Μ i n xս n Sօ n g a nԁ w z t t z c z t t c t z w z t an t t ὸ 0 z c H a n cհս n Y a n g (2009) Μօ l e cս l a r cհ a r a ct e rLuizanatiօ n օf tհ e g e nօm e օf ԁս ck c c z w c c c j w n va t c j t e nt e ritis vi rսs, Vi rօ lօ g y, vօ l 391, nօ2, p p a151-161 n w j w t j t f ρ t f t Do a i Ta n z x u lie ρ an Lu r n va r p Lu sĩ hiệeut c i gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L 74 j w z w i w j