Xây dựng mô hình gây nghiện suy giảm trí nhớ bằng morphin và khảo sát tác dụng dự phòng cải thiện các triệu chứng thiếu thuốc của cao linh chi trên chuột nhắt trắng

BO Y TE TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CAN THO ĐÈ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CÁP TRƯỜNG XÂY DỰNG MƠ HÌNH GÂY NGHIỆN, SUY GIẢM TRÍ NHỚ BẰNG MORPHIN VÀ KHẢO SÁT TÁC DỤNG DỰ PHÒNG, CAI THIEN CAC TRIEU CHUNG THIEU THUOC CUA CAO LINH CHI TREN CHUOT NHAT TRANG CHU NHIEM DE TAI: ThS DS TRAN HOANG YEN CHU TICH HOI DONG CHU NHIEM DE TAI PGS.TS Phạm Thành Suél ThS Trần Hoàng Yến (Po Cần Thơ — năm 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực với tham gia PGS.TS.DS Dương Xuân Chữ Số liệu kết thu hoàn tồn trung thực, khách quan chưa cơng bố Nếu thơng tin có sai thật, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Cần Thơ, ngày ẤDtháng Ý năm 2018 Chủ nhiệm đề tài via a Trân Hoàng Yên ~—“ ~ MỤC LỤC Lời cam đoan Mục lục PHAN TOM TAT ĐỀ TÀI PHAN TOAN VAN CONG TRINH NGHIEN CUU DANH MUC CAC CHU VIET TAT DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BẢNG 79A.) L Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU . -5252c52scstcrerierrrrrrrrrrtrrre 1.1 Đại cương morphin s+-csScscxecrkrEketrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrtir 1.2 Các chất đối kháng morphin -s s+57c+£tertkrrrrxrerrrrrrrrrrrrrvee 1.3 Hiện tượng nghiện thuốc hội chứng thiếu thuốc 1.4 Trí nhớ suy giảm trí nhớ ~xsexsrersrkrrireirrrrereiiie 12 1.5 Tổng quan nắm Linh 55 csevcrreerretsrrertrrrrrrrrrrrrrer 16 1.6 Tổng quan mơ hình thực nghiệm ecteccrreee 21 Chương ĐỒI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng, hóa chất thiết bị nghiên cứu ccxersecs 25 2.2 Phương pháp nghiên Cứu ++:2xsrstetrtertthrhrrrrirreiiirrrrir 26 2.3 Phân tích kết thống kê 75ccczcrrrrrrrrrrrrrrrrrrriem 41 Chương KÉT QUẢ NGHIÊN CỨU -©2ccccccrerretrrtrsrrrrrre 42 3.1 Khảo sát tác dụng gây nghiện morphin gây hội chứng thiếu thuốc morphin naloxon 5seeccxtsrrttrtrrrrrrriitrrireerrrie 42 3.2 Kết khảo sát tác dụng gây suy giảm trí nhớ morphin 45 Vee lít 3.3 Kết khảo sát tác dụng dự phòng nghiện hội chứng thiếu thuốc cao linh mơ hình gây nghiện morphin gây hội chứng thiếu thuốc morphin naloxon c5-c5ccstreirrrrrrrrrree 50 3.4 Kết khảo sát tác dụng cải thiện trí nhớ cao linh mơ hình gây suy giảm trí nhớ morphin c552-ccseserrrrrrrree 53 s9 Churong 8:7 v06 017 4.1 Về kết khảo sát tác dụng gây nghiện gây hội chứng thiếu thuốc morphin naloxon ©25+Scstrrrtrrrrrrrrrrrrrrrrirrrrrrtrrire 59 4.2 Về kết khảo sát tác dụng gây suy giảm trí nhớ morphin 62 4.3 Về kết khảo sát tác dụng dự phòng nghiện hội chứng thiếu thuốc cao linh mơ hình gây nghiện morphin gây hội chứng thiếu thuốc morphin naloXon - -cccccsrcserrsrx 67 4.4 Về kết khảo sát tác dụng cải thiện trí nhớ cao linh mơ hình gây suy giảm trí nhớ morphin c c-©c-ecsectrerrre 69 4080/90 438) — TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 75 PHAN TOM TAT DE TAI Đặt vấn đề Ma túy lệ thuộc vào ma túy trở thành vấn đề cần giải nhiều quốc gia thé giới, có Việt Nam Theo Báo cáo Chương trình kiểm sốt tội phạm ma túy Liên Hiệp Quốc (JNODC) năm 2012, ước tính năm 2010 giới có 230 triệu người sử dụng ma túy, 27 triệu người có vấn để nghiêm trọng 200.000 người tử vong sử dụng heroin, cocain loại ma túy khác [6l] Tại Việt Nam, Theo Cơ quan Phòng chống Ma túy Tội phạm Liên Hợp Quốc (Chương trình quốc gia Việt Nam 2012-2017) đến cuối tháng 9/2014, nước có 200.000 người nghiện ma túy có hỗ sơ quản lý [4] Morphin chất gây nghiện sử dụng lâu đời phố biến, đặc biệt dùng nhiều y học với tác dụng giảm đau mạnh sâu nội tạng Theo Văn phịng sách kiểm soát ma túy quốc gia, từ năm 1997 đến năm 2007 Mỹ, liều opioid nói chung morphin nói riêng kê đơn để giảm đau bệnh nhân tăng 402% Morphin gây độc cấp quan hơ hấp, liều mạn tính người nghiện xuất hiện tượng quen thuốc kèm theo tượng nghiện thuốc Ở người bị nghiện ma túy không tiếp tục dùng thuốc hay ngừng thuốc đột ngột xuất hội chứng thiếu thuốc, xảy khoảng 6-12 sau liều cuối, với triệu chứng run ray, vật vã, tiêu chảy, giãn đồng tử, [29] Hơn nữa, dùng morphin lâu dài bệnh nhân bị suy giảm trí nhớ [30], [70], người bệnh trở nên trầm cảm mắt tập trung [2] Tù kỉ XX, giới có nhiều mơ hình thực nghiệm gây nghiện động vật để giải thích cho chế lệ thuộc thuốc morphin, mơ hình CPP (Conditioned place preference: vị trí ưa thích có điều kiện) phổ biến [31] Bên cạnh đó, có nhiều nghiên cứu tác dụng gây suy giảm trí nhớ khả học hỏi, khám phá morphin gây mơ vi hình thử nghiệm trí nhớ chuột trắng hay chuột cống trắng [35], [40], [41], [73] Nhờ mơ hình thử nghiệm động vật mà nhà khoa học đánh giá cụ thể hệ thông đặc tính dược lý dự đốn sơ hiệu lực thuốc cai nghiện người Ndm Linh chi - Ganoderma lucidum (Leyss ex Er.) Karst - dược liệu quý sử dụng lâu đời với nhiều tác dụng dược lý trị suy nhược thần kinh [72], bệnh tim mạch [28], chống oxy hóa [45], [56], bảo vệ gan [17], kháng ung thư [13], [71], tăng cường miễn dịch [71], Gần đây, số nghiên cứu chứng minh cao chiết toàn phần từ nấm Linh có khả bảo vệ não chống lại suy giảm trí nhớ j-amyloid gây chuột nhat trắng tổn thương hoạt động trí streptozocin gay chuột cống qua mơ hình thử trí nhớ khơng gian hiệu bảo vệ hệ GABAergic [21], [23], [54], [72] Tuy nhién, hign trén giới Việt Nam chưa có nghiên cứu tác dụng Linh nghiện hội chứng thiếu thuốc thuốc gây nghiện, đặc biệt morphin gây động vật, nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ cao linh chi mơ hình gây suy giảm trí nhớ morphin hạn chế Xuất phát từ thực tế trên, chúng tơi tiến hành nghiên cứu “Xây dựng mơ hình gây nghiện, suy giảm trí nhớ morphin khảo sát tác dụng dự phòng, cải thiện triệu chứng thiểu thuốc cao linh chuột trắng” Động vật thí nghiệm Chuét nhat trang duc ching Swiss albino, khée manh, giống đực, 5-6 tuần tuổi, cân nặng 20-25 gam, Viện Pasteur TP Hồ Chí Minh cung cấp Chuột nuôi ổn định tuần trước tiến hành thí nghiệm với chu trình 12 sáng tối (7-19 giờ) Điều kiện ánh sáng 100 + lux, nhiệt độ 27 + 1°%C tiêng ôn hạn chê tơi đa t~ Hóa chất thứ nghiệm Morphin hydroclorid; Cao linh chỉ; Nalrexon hydroclorid; Naloxon hydroclorid Galantamin Thiết bị thí nghiệm Thiết bị đo Conditioned place preference (CPP); thiết bị đánh giá hoạt tính vận động tự nhiên (mơ hình Open Field); mơ hình mê cung chữ Y; Mơ hình nhận điện vật thể; mơ hình mê cung nước; cân kỹ thuật; cân phân tích Phương pháp nghiên cứu Tác dụng gây nghiện morphin dự phòng nghiện cao linh khảo sát qua mơ hình CPP Đánh giá tác dụng cao linh dự phòng hội chứng thiếu thuốc morphin thông qua biểu hiện: nhảy lên, run chân, tăng phản xạ ngửi, đánh bò cạp giảm trọng lượng thể chuột Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ cao linh mơ hình gây suy giảm trí nhớ morphin qua thử nghiệm mê cung chữ Y, nhận diện vật thể mê cung nước Kết quả: Morphin 10-30 mg/kg, tiêm phúc mạc cách ngày 14 ngày gây nghiện gây suy giảm trí nhớ chuột trắng Morphin 20-100 mg/kg, tiêm phúc mạc lan/ngay x va naloxon mg/kg, tiêm phúc mạc gây hội chứng thiếu thuốc chuột thử nghiệm Cao linh uống với liều 200-400 mg/kg làm giảm số CPP, cải thiện suy giảm trí nhớ tương đương galantamin 10 mg/kg chưa làm giảm biểu hội chứng cai thuốc Kết luận: Cao linh đường uống liều 200 mg/kg 400 mg/kg cho hiệu cải thiện tình trạng nghiện morphin chưa dự phịng hội chứng thiếu thuốc Cao linh cải thiện suy giảm trí nhớ khơng gian ngắn hạn, trí nhớ hình ảnh, trí nhớ đài hạn morphin gây vit DANH MUC CAC CHU VIET TAT Chir viét tit Từ viết tắt Ý nghĩa CPP Conditioned place preference Vị trí ưa thích có điều kiện PI Preference index VTA Ventral tegmental area ; Chi sé wa thich/ Chỉ số khám phá vật thé Vùng chỏm não DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo morphin -c -+-cesrrserrrrerree sieekeeerireeereet ecc co< che Hình 1.2 Nắm Linh chi Ganoderma ÏuClMIH Hình 1.3 Cấu trúc mơ hình CPP thơng dụng .- - - cv 22 Hình 2.1 Bố trí thí nghiệm khảo sát tác dụng gây nghiện morphin 27 Hình 2.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát tác dụng gây hội chứng thiếu thuốc morphin naloXon .-.-. 22-+-+++t+xxrttrrrtttrrrtrrrrrrtrterriirriiirriier 29 Hình 2.3 Bố trí thí nghiệm khảo sát tác dụng gây suy giảm trí nhớ TnOTBÌT .-