Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu trong lá cây bạch đàn (eucalyptus sp ) và sản xuất thử nghiệm hương que an toàn xua đuổi muỗi

TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN LÊ THU HƢƠNG NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT TINH DẦU TRONG LÁ CÂY BẠCH ĐÀN (EUCALYPTUS SP.) VÀ SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM HƢƠNG QUE AN TỒN XUA ĐUỔI MUỖI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN ĐẠI HỌC SƢ PHẠM SINH HỌC THANH HÓA, THÁNG 05 /2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT TINH DẦU TRONG LÁ CÂY BẠCH ĐÀN (EUCALYPTUS SP.) VÀ SẢN XUẤT THỬ NGHIỆM HƢƠNG QUE AN TOÀN XUA ĐUỔI MUỖI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN ĐẠI HỌC SƢ PHẠM SINH HỌC Ngƣời thực hiện: Lê Thu Hƣơng Mã sinh viên:1463000013 Lớp: K17 – ĐHSP Sinh học Ngƣời hƣớng dẫn: TS Lê Anh Sơn THANH HÓA, THÁNG 05 /2018 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài này, trƣớc tiên tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc kính trọng đến TS Lê Anh Sơn hƣớng dẫn khoa học tận tâm, bảo từ khâu định hƣớng nghiên cứu đến phƣơng pháp tiếp cận, thực đề tài trang bị cho tri thức, kỹ cần thiết đế hoàn thành tốt đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn trân thành đến Ban Giám hiệu trƣờng Đại học Hồng đức, quý thầy cô khoa Khoa học Tự nhiên, môn Động vật, môn Thực vật tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập thực đề tài Cuối cùng, xin gửi lời tri ân đến bạn bè, đặc biệt gia đình thân u ln quan tâm, động viên sát cánh bên thời điểm khó khăn Đây nguồn sức mạnh tinh thần to lớn giúp vƣợt qua trở ngại để không ngừng vƣơn lên học tập sống Tơi xin chân thành cảm ơn! Thanh Hóa, ngày 25 tháng năm 2018 Giáo viên hƣớng dẫn Sinh viên TS Lê Anh Sơn Lê Thu Hƣơng i MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài .1 nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Mục tiêu nghiên cứu Yêu cầu nghiên cứu đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát bạch đàn 1.2 Tình hình nghiên cứu tinh dầu bạch đàn giới 1.2.1 Các hợp chất tự nhiên tinh dầu bạch đàn 1.2.2 Ứng dụng tinh dầu bạch đàn 1.3 Tình hình nghiên cứu tinh dầu bạch đàn Việt Nam 10 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 13 2.2 Vật liệu dụng cụ nghiên cứu .13 2.2.1 Vật liệu nghiên cứu 13 2.2.2 Hóa chất dụng cụ nghiên cứu .13 2.3 Nội dung nghiên cứu .14 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 14 2.4.1 Phƣơng pháp thu thập kế thừa tài liệu 14 2.4.2 Phƣơng pháp lấy mẫu thực địa 14 2.4.3 Phƣơng pháp tách chiết tinh dầu bạch đàn .15 2.4.4 Phƣơng pháp nghiên cứu lƣợng tinh dầu thích hợp sử dụng để xua đuổi muỗi .17 2.4.5 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng mùa vụ thu hái giống bạch đàn đến lƣợng tinh dầu chiết 17 2.4.5.1 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng mùa vụ thu hái bạch đàn đến lƣợng tinh dầu chiết 17 2.4.5.2 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng số giống bạch đàn đến lƣợng tinh dầu chiết 18 2.4.6 Phƣơng pháp sản xuất thử nghiệm hƣơng que xua đuổi muỗi 18 2.4.6.1 Sản xuất thử nghiệm hƣơng que xua đuổi muỗi 18 2.4.6.2 Thử nghiệm hiệu hƣơng que .20 2.4.7 Phƣơng phápthử nghiệm hiệu tinh dầu muỗi đèn xông tinh dầu 20 ii 2.4.8 Phƣơng pháp tính tốn số liệu 21 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Thời gian tối ƣu chiết xuất tinh dầu bạch đàn trắng (Eucalyptus camaldulensis Dehn) 22 3.2 Ảnh hƣởng mùa vụ thu hái đến lƣợng tinh dầu chiết 23 3.3 Ảnh hƣởng giống bạch đàn đến lƣợng tinh dầu chiết 25 3.4 Lƣợng tinh dầu thích hợp sử dùng để xua đuổi muỗi 26 3.5 Hiệu tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) muỗi công nghệ sản xuất hƣơng que truyền thống .28 3.6 Hiệu tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) muỗi đèn xông tinh dầu 30 3.7 Hiệu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) khô muỗi công nghệ hƣơng muỗi truyền thống 32 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC 38 iii DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU Bảng 1.1 Thành phần tinh dầu tách chiết từ bạch đàn Bảng 1.2 Hoạt tính trừ trùng tinh dầu số giống bạch đàn Bảng 3.1 Khối lƣợng thể tích tinh dầu bạch đàn trắng (Eucalyptus camaldulensis Dehn) tƣơi thu đƣợc theo thời gian chƣng 22 cất Bảng 3.2 Khối lƣợng thể tích tinh dầu bạch đàn trắng (Eucalyptus camaldulensis Dehn) tƣơi thu đƣợc thời điểm khác 24 Bảng 3.3 Khối lƣợng thể tích tinh dầu giống bạch đàn nghiên cứu Bảng 3.4 Hiệu tinh dầu bạch đàn muỗi Bảng 3.5 Hiệu hƣơng truyền thống hƣơng tẩm tinh dầu bạch đàn muỗi Bảng 3.6 Hiệu đèn xông tinh dầu bạch đàn muỗi Bảng 3.7 Khối lƣợng thể tích tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) khô Bảng 3.8 Hiệu hƣơng chứa bạch đàn khô muỗi iv 25 27 29 30 32 33 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Mẫu bạch đàn trắng (Eucalyptus camaldulensis Dehn) đƣợc thu Thanh Hóa 15 Hình 2.2 Hệ thống chƣng cất lơi nƣớc 16 Hình 2.3 Sử dụng đèn xông tinh dầu để xua đuổi muỗi 21 Hình 3.1 Muỗi bám lên thành 26 Hình 3.2.Tỉ lệ muỗi bất tỉnh với nồng độ tinh dầu khác 28 Hình 3.3 Hƣơng có tẩm tinh dầu bạch đàn trắng 28 Hình 3.4 Hiệu hƣơng muỗi đèn xông tinh dầu bạch đàn muỗi Hình 3.5 Số lƣợng muỗi bất tỉnh dùng hƣơng muỗi khoảng 180 phút thời gian gây độc v 31 34 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Muỗi nhà nhóm trùng gây hại, chúng vectơ truyền bệnh, lây lan dịch bệnh nguy hiểm cho ngƣời nhƣ sốt xuất huyết, sốt rét, sốt vàng… Việc phòng chống tác hại muỗi vấn đề cấp bách đƣợc tồn giới quan tâm; việc tìm biện pháp hữu hiệu cho phịng chống muỗi ngơi nhà thực vấn đề cấp thiết Một biện pháp đƣợc quan tâm sử dụng hợp chất thiên nhiên có khả tiêu diệt, xua đuổi muỗi nhƣng lại an toàn ngƣời Thực tế cho thấy có nhiều lồi thực vật quanh ta có chứa tinh dầu tự nhiên khắc tinh muỗi nhƣ cộng sản, bạch đàn, sã, cúc, quế tác dụng xua đuổi tiêu diệt muỗi mà cịn có nhiều tác dụng có lợi y học đƣợc sử dụng lâu đời nhiều nƣớc giới Tinh dầu bạch đàn (dầu khuynh diệp) có cơng dụng làm: Thuốc hãm, thuốc xông, pha chế thành dạng bào chế nhƣ siro cồn từ bạch đàn dùng để chữa ho, sát khuẩn đƣờng hô hấp, chữa bệnh nhiễm khuẩn đƣờng hô hấp, ho, hen v.v… Trong năm kháng chiến chống Mỹ, Khoa Tai - Mũi - Họng - bệnh viện Bạch Mai sử dụng tinh dầu bạch đàn chanh để chữa ho, viêm họng, sát khuẩn đƣờng hô hấp Các nghiên cứu công dụng tinh dầu bạch đàn khẳng định loại tinh dầu có hiệu cao điều trị suy giãn tĩnh mạch Nếu pha chế thêm tinh dầu chanh, hiệu trị suy giãn tĩnh mạch cao nhiều Những ngƣời bị bệnh viêm khớp, tinh dầu bạch đàn có hiệu điều trị cao, sử dụng để massage trực tiếp xông để giúp thẩm thấu dƣỡng chất nhanh Bạch đàn nhóm đƣợc gây trồng rộng rãi nƣớc ta Tuy có nhiều cơng dụng khác nhƣng chủ yếu dùng làm nguyên liệu sản xuất giấy, làm thuốc, làm đồ mộc…việc nghiên cứu cách sử dụng tinh dầu từ bạch đàn đạt hiệu cao để xua đuổi tiêu diệt muỗi gia đình hƣớng cần thiết ảo vệ sức khỏe cộng đồ Xuất phát từ yêu cầu thực tiễ ề tài: “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu bạch đàn (Eucalyptus sp.) sản xuất thử nghiệm hƣơng que an toàn xua đuổi muỗi” ọc thực tiễn đề tài ợng tinh dầu có bạch đàn ố liệu bả ợng tinh dầu bạch đàn chiết xuất đƣợc để xua đuổi tiêu diệt muỗi nhàlàm sở xuất hƣơng que an toàn nhằ ản muỗi nhà quan trọng hợp chấ dụng Mục tiêu nghiên cứu - Chiết xuất đƣợc tinh dầu bạch đàn (Eucalyptus sp.) - Sử dụng hàm lƣợng tinh dầu bạch đàn tối ƣu vàocông nghệ sản xuất hƣơng que truyền thống nhằm tạo đƣợc sản phẩm que hƣơng xua đuổi muỗi an toàn gia đình Yêu cầu nghiên cứu đề tài (1) Nghiên cứu xác đinh hàm lƣợng tinh dầu có bạch đàn; xác định đƣợc nồng độ tinh dầu bạch đàn tối ƣu để xua đuổi tiêu diệt muỗi phịng thí nghiệm (2) Nghiên cứu ảnh hƣởng mùa vụ thu hái vàgiống bạch đàn đến lƣợng tinh dầu chiết đƣợc (3) Nghiên cứu sản xuất hƣơng que xua đuổi muỗi an toàn gia đình (4) Xác định hiệu xua đuổi muỗi hƣơng que gia đình CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát bạch đàn Bạch đàn đƣợc gọi khuynh diệp, chi Eucalyptus thuộc họ Sim (Myrtaceae) Bạch đàn tên có từ lâu vùng Nghệ An, Hà Tĩnh, tên khuynh diệp mùi tinh dầu có mùi tinh dầu tràm Hiện tên bạch đàn đƣợc dùng phổ biến [2] Bạch đàn chi có số lƣợng lồi lớn, theo Lã Đình Mỡi cộng sự, bạch đàn ƣớc tính có khoảng 500 lồi, theo Dairy R.Batish cộng bạch đàn có khoảng 700 loài khác Hầu hết số loài chi đặc hữu Australia Chỉ có hai lồi phân bố tự nhiên khu vực Malesian (New Guinea, Moluccas, Sulawesi, quần đảo Lesser Sunda Philippin) Một vài lồi có biên độ sinh thái rộng, phân bố khu vực kéo dài từ miền Bắc Australia đến miền Đông Malesian Những nghiên cứu gần phát đƣợc khoảng 10 lồi có phân bố miền Nam New Guinea Ngƣời ta cho rằng, việc điều tra, nghiên cứu, khai thác thảm thực vật rừng gió mùa savan khu vực rộng lớn phía Đơng Nam vùng Đơng Nam Á chắn cịn phát thêm nhiều loài thuộc chi bạch đàn Tính đa dạng chi bạch đàn vùng ven biển New Sounth Wales miền Tây Nam Australia đƣợc đánh giá cao [5] Hiện nhiều loài đƣợc đƣa trồng vùng phân bố tự nhiên Nhiều dải rừng bạch đàn đƣợc hình thành nƣớc ta; nƣớc lục địa châu Á; nƣớc nhiệt đới, cận nhiệt đới châu Phi, khu vực Địa Trung Hải miền Nam châu Âu đến khu vực Nam Trung châu Mỹ [2] Ở Việt Nam, lần bạch đàn đƣợc Brochet tìm thấy Cốc Lếu tỉnh Lào Cai vào năm 1904 (Hồng Hịe, 1996) Ngày có khoảng 20 giống bạch đàn đƣợc trồng Việt Nam bạch đàn trắng(Eucalyptus camaldulensis Dehn) đƣợc coi nhƣ lồi có giá trị kinh tế cao, đƣợc trồng rộng rãi vùng đất thấp cao, trừ đỉnh núi có độ cao 1000 mét so với mực nƣớc biển [10] 3.4 Lƣợng tinh dầu thích hợp sử dùng để xua đuổi muỗi Chúng tơi tiến hành thử nghiệm hiệu tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) muỗi, từ phút đầu tiếp xúc với hƣơng tinh dầubạch đàn muỗi có phản ứng với biểu bay loạn xạ tránh xa vị trí đặt bơng tẩm tinh dầu Sau đó, muỗi có bám vào thành đập cánh liên tục nhƣng không bay đƣợc lần lƣợt rơi xuống bất tỉnh (Hình 3.1) Hình 3.1 Muỗi bám lên thành Số liệu Bảng 3.4 cho thấy, sau 30 phút tỷ lệ số lƣợng muỗi bị bất tỉnh tinh dầu bạch đàn xuất cao, có tỷ lệ thuận với mức hàm lƣợng tinh dầu (11,11 – 62,22%) sau 120 phút số lƣợng muỗi bất tỉnh đạt hiệu cao (đạt 100% mức hàm lƣợng tinh dầu 50 μl 26,67% mức hàm lƣợng 10μl) Nhƣng sau khoảng từ 150 – 240 phút số muỗi tỉnh lại mức hàm lƣợng tinh dầu (10μl tỷ lệ số lƣợng muỗi bất tỉnh 7,78%; 40μl: 86,67%; 50 μl: 92,22%) Qua theo dõi khả hồi tỉnh sau chịu tác động tinh dầu muỗi kéo dài đến 24 (tỷ lệ muỗi bất tỉnh cao 51,11%); sau 24 muỗi không tỉnh lại chết 26 Bảng 3.4 Hiệu tinh dầu bạch đàn muỗi Thời Tỉ lệ trung bình muỗi bất tỉnh với tinh dầu (%) gian Hàm lƣợng tinh dầu (μl) (phút) 0(μl) 10(μl) 20(μl) 30(μl) 40(μl) 50(μl) 30 0,00 11,11 26,67 31,11 52,22 62,22 60 0,00 15,56 34,44 42,22 60,00 71,11 90 0,00 22,22 41,11 54,44 71,11 87,78 120 0,00 26,67 48,89 60,00 83,33 100,00 150 1,11 26,67 56,67 68,89 90,00 100,00 180 2,22 17,78 62,22 81,11 100,00 100,00 240 3,33 8,89 55,56 74,44 86,67 92,22 1440 3,33 5,56 11,11 22,22 28,89 51,11 Ghi chú: thí nghiệm lặp lại lần So sánh tác động tinh dầu đến muỗi ta thấy, lƣợng tinh dầu có ảnh hƣởng đến muỗi nhiều 50μl sau 40μl (Hình 3.2) Ở lƣợng tinh dầu 50μl sau 120 phút 100% muỗi bất tỉnh sau 240 phút bị ảnh hƣởng tinh dầu bạch đàn có đến 7,88 % số lƣợng muỗi bắt đầu tỉnh lại đến 24 51,11% muỗi chết Ở lƣợng tinh dầu 40μl phải 180 phút đạt hiệu 100% muỗi bất tỉnh cần 60 phút sau số lƣợng muỗi tỉnh lại đạt 13,33%, đến 24 có 28,89% muỗi chết 27 Tỉ lệ muỗi bất tỉnh (%) 120 100 80 0(μl) 10(μl) 60 20(μl) 30(μl) 40 40(μl) 20 50(μl) 30 60 90 120 150 180 240 1140 Thời gian (phút) Hình 3.2.Tỉ lệ muỗi bất tỉnh với nồng độ tinh dầu khác Kết cho thấy với 50μl hiệu xua đuổi muỗi cao 40μl Tuy nhiên, để giảm chi phí cho sản xuất hƣơng muỗi với lƣợng tinh dầu bạch đàn lớn ảnh hƣởng hơ hấp thần kinh [1] Do đó, để giảm thiểu tác hại mà có hiệu việc xua đuổi muỗi nên lựa chọn sử dụng lƣợng tinh dầu 40 μl 3.5 Hiệu tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) muỗi công nghệ sản xuất hƣơng que truyền thống Từ nghiên cứu trên, lựa chọn hàm lƣợng 40μl tinh dầu vào sản xuất cho que hƣơng muỗi (Hình 3.3) Thời gian cháy trung bình que hƣơng 60 phút Hình 3.3 Hƣơng có tẩm tinh dầu bạch đàn trắng 28 Sau thử nghiệm hiệu hƣơng truyền thống hƣơng muỗi có tẩm tinh dầu bạch đàn thu đƣợc kết Bảng 3.5 Bảng 3.5 Hiệu hƣơng truyền thống hƣơng tẩm tinh dầu bạch đàn muỗi Hƣơng truyền thống Thời gian (phút) Số lƣợng muỗi bất tỉnh trung bình (con) Hƣơng chứa tinh dầu bạch đàn Tỉ lệ muỗi Số lƣợng muỗi bất tỉnh bất tỉnh trung (%) bình (con) Tỉ lệ muỗi bất tỉnh (%) 30 0,00 0,00 17,67 58,89 60 0,00 0,00 19,67 65,56 90 0,00 0,00 22,33 74,44 120 0,33 1,11 25,67 85,56 150 0,67 2,22 27,67 92,22 180 1,33 4,44 30,00 100,00 240 1,67 5,56 28,00 93,33 11,67 38,89 1440 1,67 5,56 Ghi chú: thí nghiệm lặp lại lần Qua bảng số liệu 3.5 cho thấy hƣơng truyền thống (khơng có tẩm tinh dầu bạch đàn) có tác động đến muỗi Sau 1440 phút số lƣợng muỗi chết có 5,56%, số muỗi chết hƣơng truyền thống tác động khói hƣơng chết tự nhiên Đối với que hƣơng muỗi sau đốt có hiệu phút đầu Cụ thể, thời gian 30 phút tỉ lệ muỗi bất tỉnh ngộ độc tinh dầu bạch đàn que hƣơng đạt cao 58,89%, sau 60 phút que hƣơng tắt tỷ lệ đạt 65,56% Đặc biệt, tỉ lệ muỗi bất tỉnh tiếp tục gia tăng que hƣơng cháy hết đạt cực đại sau 180 phút, nhƣ tinh dầu bạch đàn gây độc cho muỗi từ phút đầu hiệu lực sau Trong thời gian 180 phút 100% số lƣợng muỗi tham gia thí nghiệm bị bất tỉnh sau khoảng 240 29 phút có tới 6,67% số lƣợng muỗi bắt đầu tỉnh lại Đến 24 xác định đƣợc lƣợng muỗi chết 38,89% Nhƣ tinh dầu bạch đàn trắng tác động gây độc ức chế khả hoạt động muỗi nhà khoảng thời gian định, khả gây chết thấp, cần phải nghiên cứu sâu đến muỗi tỉnh lại cịn có khả hút máu sinh sản hay không? Nhƣ vậy, tinh dầu bạch đàn trắng hợp chất tự nhiên có khả gây độc ức chế khả hoạt động muỗi nhà Đây dƣợc liệu quí bảo vệ điều trị bệnh y học Cổ truyền đồng thời chất độc muỗi nhà 3.6 Hiệu tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) muỗi đèn xông tinh dầu Theo lý thuyết, hƣơng muỗi đốt lƣợng tinh dầu nhờ tác động nhiệt độ cao làm cho khả bay đƣợc điều tiết tốt hơn, đảm bảo khuếch tán tinh dầu khơng khí Vì cần làm rõ hiệu đuổi muỗi tinh dầu bạch đàn hƣơng muỗi cao nhờ khuyếch tán tốt tinh dầu hay có ảnh hƣởng nhiệt độ que hƣơng tạo nên? Khi sử dụng lƣợng tinh dầu bạch đàn lƣợng tẩm que hƣơng (40μl) pha với 100ml nƣớc ấm khoảng 600C mẫu đối chứng không sử dụng tinh dầu cho vào đèn xông thu đƣợc kết Bảng 3.6 Bảng 3.6 Hiệu đèn xông tinh dầu bạch đàn muỗi Đèn xông không sử dụng tinh Đèn xông tinh dầu bạch đàn dầu Thời gian Số lƣợng muỗi Tỉ lệ muỗi Số lƣợng muỗi bất Tỉ lệ muỗi (phút) bất tỉnh trung bất tỉnh tỉnh trung bình bất tỉnh bình (con) (%) (con) (%) 30 0,00 0,00 16,33 54,44 60 0,00 0,00 18,67 62,22 90 0,00 0,00 23,67 78,89 120 0,00 0,00 26,67 88,89 150 0,67 2,22 29,67 98,89 180 1,33 4,44 30,00 100,00 240 1,67 5,56 27,67 92,22 1440 2,00 6,67 11,33 37,78 Ghi chú: thí nghiệm lặp lại lần 30 Qua bảng số liệu 3.6 cho thấy sử dụng đèn xơng khơng có tinh dầu có tác động đến muỗi, sử dụng đèn xơng tinh dầu có hiệu với muỗi phút đầu Cụ thể, thời gian 30 phút tỉ lệ muỗi bất tỉnh ngộ độc tinh dầu bạch đàn đạt cao 54,44%, sau 180 phút đèn xông tinh dầuđạt tỷ lệ cao (đạt 100%) Sau 240 phút tỉ lệ muỗi hồi tỉnh 7,78% cao so với hƣơng muỗi 1,11%, sau 1440 phút tỉ lệ muỗi hồi tỉnh 62,22% cao so với hƣơng muỗi 1,11% So sánh hiệu sử dụng đèn xông tinh dầu bạch đàn xua đuổi muỗi nhà đƣa tinh dầu bạch đàn vào hƣơng que (hƣơng muỗi) có chứa tinh dầu bạch đàn hàm lƣợng tinh dầu (40μl) thấy hiệu gây bất tỉnh hƣơng muỗi có chứa tinh dầu bạch đàn cao Nhƣ vậy, tinh dầu bạch đàn có tác dụng gây độc cho muỗi cao, nhƣng có tác nhân nhiệt độ tỉ lệ gây chết cho muỗi cao (Hình 3.4) Tỉ lệ muỗi bất tỉnh (%) 120 100 80 Đèn xông tinh dầu 60 Hương muỗi 40 20 30 60 90 120 150 180 240 1440 Thời gian (phút) Hình 3.4 Hiệu hƣơng muỗi đèn xông tinh dầu bạch đàn muỗi Lý giải cho khác biệt hiệu sử dụng đèn xông tinh dầu bạch đàn hƣơng muỗi đốt lƣợng tinh dầu nhờ tác động nhiệt độ cao làm cho khả bay đƣợc điều tiết tốt hơn, đảm bảo khuếch tán tinh dầu khơng khí 31 Việc sử dụng hƣơng muỗi khơng có tác dụng xua đuổi muỗi mà cịn có tác dụng kháng khuẩn, giúp thƣ giãn tinh thần …đồng thời dể sử dụng thuận tiện gia đình 3.7 Hiệu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) khô muỗi công nghệ hƣơng muỗi truyền thống Đối với mẫu làm khơ sau cân 500g tƣơi đƣợc khoảng 275g khơ Sử dụng mẫu khô chƣng cất lôi tinh dầu thu đƣợc kết Bảng 3.7 Bảng 3.7 Khối lƣợng thể tích tinh dầu bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) khơ Khối lƣợng tinh Lần thí nghiệm dầu (gam) Thể tích Tỷ lệ tinh dầu tinh dầu (μl) khô (%) 0,9704 1250 0,3529 0,9665 1245 0,3515 0,9626 1240 0,3500 Trung bình chung 0,9665 1245 0,3515 Ghi chú: Khối lượng mẫu lần thí nghiệm 275g, thời gian chiết thời gian thu mẫu ngày 29/01/2018 Qua kết thu đƣợc Bảng 3.7 ta thấy hiệu suất thu hồi tinh dầu bạch đàn khô với khối lƣợng 275g tƣơng đƣơng với 500g tƣơi đạt giá trị cao 1245µl, chiếm 0,3515 % khối lƣợng so với nguyên liệu So sánh với lƣợng tinh dầu thu đƣợc từ việc chƣng cất tinh dầu tƣơi với điều kiện chứng cất tinh dầu thu đƣợc khô thấp 0,6235g (39,21% so với tinh dầu thu đƣợc tƣơi) Do đó, thấy bạch đàn khơ bị giảm đáng kể tinh dầu Tuy nhiên, lƣợng tinh dầu khô số lƣợng lớn Đối với việc sản xuất hƣơng chứa tinh dầu bạch đàn để diệt muỗi sử dụng trực tiếp bạch đàn khô xay nhuyễn thay sử dụng tinh dầu bạch đàn 32 vừa phức tạp, vừa tốn thời gian Từ nghiên cứu trên, lựa chọn 9g bột bạch đàn khô (40μl tinh dầu) bạch đàn trắng vào sản xuất cho que hƣơng để xua đuổi muỗi khung Thời gian cháy trung bình que hƣơng 70 phút Sau thử nghiệm thu đƣợc kết Bảng 3.8 Bảng 3.8 Hiệu hƣơng chứa bạch đàn khô muỗi Thời gian Số lƣợng muỗi bất tỉnh trung (phút) bình (con) 30 17,67 58,89 60 19,00 63,33 90 22,67 75,56 120 25,33 84,44 150 28,00 93,33 180 30,00 100,00 240 28,33 94,44 1440 12,00 40,00 Tỉ lệ muỗi bất tỉnh (%) Qua bảng 3.8 cho thấy với que hƣơng sau đốt có hiệu phút đầu.Trong thời gian 30 phút tỉ lệ muỗi bất tỉnh ngộ độc tinh dầu bạch đàn que hƣơng đạt cao 58,89%, sau 60 phút tỷ lệ đạt lớn 63,33% Đặc biệt, tỉ lệ muỗi bất tỉnh tiếp tục gia tăng que hƣơng cháy hết đạt cực đại sau 180 phút, nhƣ tinh dầu bạch đàn gây độc cho muỗi từ phút đầu hiệu lực sau Trong thời gian 100% số lƣợng muỗi tham gia thí nghiệm bị bất tỉnh (Hình 3.5) sau khoảng có tới 5,56% số lƣợng muỗi bắt đầu tỉnh lại Đến 24 xác định đƣợc lƣợng muỗi chết 40,00% Nhƣ tinh dầu bạch đàn trắng tác động gây độc ức chế khả hoạt động muỗi nhà khoảng thời gian định, khả gây chết thấp 33 Hình 3.5 Số lƣợng muỗi bất tỉnh dùng hƣơng muỗi khoảng 180 phút thời gian gây độc Qua cho thấy, để tăng hiệu kinh tế sản xuất hƣơng muỗi nên sử dụng phƣơng pháp nghiền trực tiếp bạch đàn khô với khối lƣợng 9g khô bạch đàn/que hƣơng 34 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Lá bạch đàn trắng (E Camaldulensis Dehn) đƣợc chiết xuất tinh dầu phƣơng pháp chƣng cất lôi nƣớc liên tục kể từ nƣớc sôi, lƣợng tinh dầu thu đƣợc cực đại chiếm 0,3260% khối lƣợng tƣơi Mùa vụ thu hái giống bạch đàn ảnh hƣởng tới hàm lƣợng tinh dầu chiết đƣợc Cụ thể, mẫu bạch đàn thu vào mùa xn, mùa thu, mùa đơng có tỷ lệ tinh dầu thu đƣợc tƣơng ứng 0,3320%; 0,3260%; 0,3180% khối lƣợng tƣơi Giống bạch đàn chanh (E citriodora) cho khối lƣợng tinh dầu lớn đạt 0,6520%, bạch đàn trắng (E camaldulensis Dehn) đạt 0,3320% giống bạch đàn liễu (Eu exserta) đạt 0,2678 % Que hƣơng có chứa 40μl lƣợng tinh dầu 9g khô bạch đàn trắng mang hiệu cao việc xua đuổi muỗi nhà từ phút sau đốt có hiệu lực xua đuổi muỗi kéo dài đến 240 phút, gây chết từ 37,78 – 40,00% số lƣợng muỗi thí nghiệm KIẾN NGHỊ Cần nghiên cứu sâu liều lƣợng hợp lý để xua đuổi muỗi khơng gian rộng tăng lợi ích tinh dầu bạch đàn cho sức khỏe ngƣời 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Xuân Dũng, Nguyễn Thái Hằng, Đỗ Chung Võ (1994), “Một số kết nghiên cứu hóa học tinh dầu bạch đàn Eucalyptusn Camaldulensis Dehn”, Tạp chí Y dƣợc,(4), 11-13 Đỗ Tất Lợi (2001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Văn Minh (2010), “Các phương pháp sản xuất tinh dầu”, Bản tin khoa học công nghệ, Viện nghiên cứu dầu có dầu, (1), 23-30 Lã Đình Mỡi (2002), Tài nguyên thực vật có tinh dầu Việt Nam, tập II,Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Dairy R Batish, Harminder pal Singh, Ravinder Kumar Kohli, Shalinder Kaur (2008), calyptus essential oil as a natural pesticide”, Forest Ecology and Management, (256), bb2166-2174 Boland, D.J., Brophy, J.J., and A.P.N House, Eucalyptus Leaf Oils, 1991, p6 ISBN 0-909605-69-6 H P Singh, D R Batish , N Setia R K Kohli (2005), “Herbicidal activity of volatile oils from Eucalyptus citriodora against Parthenium hysterophorus”, Annals of Applied Biology, (146, issue 1), 89-94 Lee, Antifungal Activity of Five Plant Essential Oils as Fumigant Against Postharvest and Soilborne Plant Pathogenic Fungi (2007), The Plant Pathology Journal, (23, issue 2), 97-102 Liu Yu-Qing1 and et (2010), “Toxicity of β-Caryophyllene from Vitex negundo (Lamiales: Verbenaceae) to Aphis gossypii Glover (Homoptera: Aphididae) and its action mechanism”, CNKI journal 10 National institute of materia medica Hanoi – Vietnam (2001), Selected medicinal plants in Vietnam, Vol I, Science and technology publishing house, Hanoi 11 Yang Y.C., Choi H C., (2004), “Ovicidal and adulticidal activity of 36 Eucalyptus globulus leaf oil terpenoids against Pediculus humanus capitis”, Agric Food Chem, (52), 2507-2511 12 https://xemtailieu.com/ la-cay-bach-dan-bang-phuong-phap-chung-cat-loicuon-hoi-nuoc- 13 http://cayhoacanh.com/cay-go-bach-dan/ 14 http : //www.tinhdaugiangthoa.com/2015/10/tac-dung-cua-tinh-dau-khuynh -diep-bach.html 37 PHỤ LỤC Bảng Hiệu tinh dầu bạch đàn muỗi qua lần thí nghiệm Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 0(μl) 0 0 2 Lần Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) 10(μl) 20(μl) 30(μl) 40(μl) 10 15 10 12 18 13 16 21 15 18 25 18 20 27 19 24 30 18 23 27 10 50(μl) 18 20 26 30 30 30 29 15 0(μl) 0 0 0 0 Lần Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) 10(μl) 20(μl) 30(μl) 40(μl) 9 16 10 13 19 12 16 20 15 17 24 16 19 26 18 23 30 15 22 26 50(μl) 19 21 28 30 30 30 28 16 0(μl) 0 0 1 1 Lần Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) 10(μl) 20(μl) 30(μl) 40(μl) 16 11 13 17 12 17 23 14 19 26 17 23 28 19 26 30 17 22 25 7 50(μl) 19 23 25 30 30 30 26 15 38 Bảng Hiệu hƣơng truyền thống (khơng có tẩm tinh dầu) muỗi Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 lần 0 0 1 2 Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) lần lần 0 0 0 1 2 TBT 0,00 0,00 0,00 0,33 0,67 1,33 1,67 1,67 Tỷ lệ (%) 0,00 0,00 0,00 1,11 2,22 4,44 5,56 5,56 Bảng Hiệu hƣơng có tẩm tinh dầu bạch đàn muỗi Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 lần 17 19 22 26 28 30 28 11 Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) lần lần 18 18 20 20 23 22 26 25 29 26 30 30 29 27 12 12 TBT 17,67 19,67 22,33 25,67 27,67 30,00 28,00 11,67 Tỷ lệ (%) 58,89 65,56 74,44 85,56 92,22 100,00 93,33 38,89 Bảng Hiệu đèn xông tinh dầu bạch đàn muỗi Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 lần 16 18 22 27 30 30 29 11 Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) lần lần 17 16 19 19 23 26 27 26 30 29 30 30 27 27 11 12 39 TBT 16,33 18,67 23,67 26,67 29,67 30,00 27,67 11,33 Tỷ lệ (%) 54,44 62,22 78,89 88,89 98,89 100,00 92,22 37,78 Bảng Hiệu mẫu đối chứng dùng đèn xông không sử dụng tinh dầu muỗi Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) lần lần lần 0 0 0 0 0 0 1 1 2 2 TBT 0,00 0,00 0,00 0,00 0,67 1,33 1,67 2,00 Tỷ lệ (%) 0,00 0,00 0,00 0,00 2,22 4,44 5,56 6,67 Bảng Hiệu hƣơng chứa bạch đàn muỗi Thời gian (phút) 30 60 90 120 150 180 240 1440 Số lƣợng muỗi bất tỉnh (con) lần lần lần 17 18 18 18 20 19 22 24 22 25 25 26 27 28 29 30 30 30 29 28 28 12 13 11 40 TBT 17,67 19,00 22,67 25,33 28,00 30,00 28,33 12,00 Tỷ lệ (%) 58,89 63,33 75,56 84,44 93,33 100,00 94,44 40,00