Khóa luận tốt nghiệp phân lập và nghiên cứu đặc điểm sinh học của chủng xạ khuẩn có khả năng đối kháng với nấm fusarium solani và fusarium oxysporum

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM FUSARIUM SOLANI VÀ FUSARIUM OXYSPORUM” Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC ‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG XẠ KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM FUSARIUM SOLANI VÀ FUSARIUM OXYSPORUM” Sinh viên thực : Nguyễn Thị Nhung Lớp : K62 CNSHC Mã SV : 620613 Giáo viên hướng dẫn : ThS Nguyễn Thanh Huyền Bộ môn : Công nghệ vi sinh Hà Nội - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Nhung i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, chân thành cảm ơn tới cô giáo ThS Nguyễn Thanh Huyền thuộc môn Công nghệ vi sinh, khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình thực hồn thành khóa luận Xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Công nghệ sinh học tận tình giảng dạy giúp đỡ tơi để làm khóa luận tốt Cảm ơn ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện cho tơi học tập hồn thành luận văn Cuối cùng, xin cảm ơn bạn bè người thân động viên, tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình làm khóa luận Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2021 Sinh Viên Nguyễn Thị Nhung ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN I LỜI CẢM ƠN II MỤC LỤC III DANH MỤC BẢNG VI DANH MỤC HÌNH VII DANH MỤC VIẾT TẮT IX TÓM TẮT X MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu yêu cầu PHẦN I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan nấm 1.1.1 Nấm Fusarium solani 1.1.1.1 Giới thiệu nấm Fusarium solani 1.1.2 Nấm Fusarium oxysporum 1.1.2.1 Giới thiệu 1.1.2.2 Vật chủ 1.1.2.3 Cơ chế gây bệnh 1.1.2.4 Biện pháp phòng trừ 10 1.2 Tổng quan xạ khuẩn 11 1.2.1 Giới thiệu chung phân bố xạ khuẩn 11 1.2.2 Đặc điểm hình thái xạ khuẩn 11 1.2.2.3 Sinh sản xạ khuẩn 13 1.2.2.4 Cấu tạo xạ khuẩn 16 1.2.3 Phân loại xạ khuẩn 17 1.2.4 Phân loại chi Streptomyces 18 iii 1.2.5 Sinh tổng hợp chất từ xạ khuẩn 19 1.2.5.1 Khả sinh enzyme xạ khuẩn 19 1.2.5.2 Khả sinh vitamin xạ khuẩn 19 1.2.5.3 Khả sinh chất kích thích sinh trưởng thực vật 19 1.2.5.4 Khả sinh chất kháng sinh xạ khuẩn 20 1.2.5.5 Tình hình nghiên cứu xạ khuẩn 22 PHẦN II VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Vật liệu, thời gian địa điểm nghiên cứu 24 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 24 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị hóa chất nghiên cứu 24 2.1.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu 26 2.2 Nội dung nghiên cứu 27 2.3 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3.1 Phân lập xạ khuẩn 27 2.3.2 Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn với nấm Fusarium solani Fusarium oxysporum 27 2.3.4 Đánh giá đặc điểm hình thái xạ khuẩn đối kháng 28 2.3.4.1 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 28 2.3.4.2 Đặc điểm hình thái chuỗi sinh bào tử 28 2.3.5 Đánh giá đặc điểm sinh hóa xạ khuẩn đối kháng 29 2.3.5.1 Khả hình thành sắc tố Melanin 29 2.3.5.2 Khả sử dụng nguồn carbon khác 29 2.3.5.3 Khả đồng hóa nguồn Nitơ khác 30 2.3.5.4 Khả chống chịu điều kiện nuôi cấy khác 30 2.3.6 Khả sinh enzyme ngoại bào chủng xạ khuẩn tuyển chọn 31 PHẦN III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Phân lập chủng xạ khuẩn từ mẫu đất 33 3.2 Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn với nấm 35 iv 3.3 Đặc điểm sinh học chủng xạ khuẩn DC1 39 3.3.1 Đặc điểm hình thái 39 3.3.1.1 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 39 3.3.1.2 Đặc điểm hình thái chuỗi sinh bào tử, bào tử 40 3.3.2 Đặc điểm sinh hóa 42 3.3.2.1 Khả hình thành sắc tố melanin 42 3.3.2.2 Khả đồng hóa nguồn carbon 42 3.3.2.3 Khả đồng hóa nguồn nitơ 44 3.3.3 Sự sinh trưởng điều kiện môi trường nuôi cấy 45 3.3.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả sinh trưởng 45 3.3.3.2 Ảnh hưởng pH 46 3.3.3.3 Ảnh hưởng nồng độ muối 47 3.4 Khả sinh hoạt tính enzyme ngoại bào xạ khuẩn DC1 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 PHỤ LỤC 58 v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Đặc điểm hình thái chủng XK môi trường Gause I 33  Bảng 3.2 Hoạt tính kháng nấm Fusarium solani nấm Fusarium oxysporum chủng xạ khuẩn .38  Bảng 3.3 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc xạ khuẩn DC1 39  Bảng Khả sử dụng nguồn carbon khác chủng xạ khuẩn DC1 43  Bảng 3.5 Khả sử dụng nguồn nito khác xạ khuẩn DC1 45  Bảng 3.6 Khả sinh trưởng chủng xạ khuẩn DC1 pH4 đến pH 12 46  Bảng 3.7 Khả sinh trưởng chủng DC1 nồng độ muối khác 47  Bảng Hoạt tính enzyme chủng xạ khuẩn DC1Error! Bookmark not defined.  vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Nấm Fussarium solani .3  Hình 1.2 Bào tử nấm Fusarium solani .4  Hình 1.3 Bệnh thối thân cà chua nấm F solani gây 6  Hình Nấm Fusarium oxysporum 7  Hình 1.5 Bệnh héo vàng cà chua chuối nấm F oxysporum gây 8  Hình Hình thái bào tử nấm F oxysporum gây héo vàng số 9  Hình Hai kiểu khuẩn ty xạ khuẩn 13  Hình 1.8 Hình dạng chuỗi bào tử 14  Hình 1.9 Một số hình dạng bào tử xạ khuẩn 15  Hình 3.1 Các xạ khuẩn môi trường Gause I (sau ngày ni cấy) 35 Hình 3.2 Hình ảnh chủng xạ khuẩn DC1 đối kháng với nấm F solani sau ngày 36  Hình 3.3 Hình ảnh chủng xạ khuẩn DC1 đối kháng với nấm F oxysporum sau ngày 36  Hình 3.4 Hiệu lực ức chế chủng xạ khuẩn Fusarium solani sau ngày 37  Hình Hiệu lực ức chế chủng xạ khuẩn F oxysporum sau ngày 37  Hình 3.6 Hình thái khuẩn lạc chủng xạ khuẩn DC1 môi trường ISP1, ISP2, ISP3, ISP4 ISP 5, ISP 7, Gause II, Gause I SCA 39  Hình Hình thái hệ sợi (A), cuống sinh bào tử bào tử chủng xạ khuẩn DC1 (B, C) .41  Hình Chủng xạ khuẩn DC1 môi trường ISP6 sau ngày nuôi cấy 42  vii Hình 3.9 Khả sinh trưởng chủng xạ khuẩn DC1 môi trường chứa nguồn carbon khác 43  Hình 3.10 Khả sinh trưởng xạ khuẩn DC1 môi trường chứa nguồn nitơ khác 44  Hình 3.11 Khả sinh trưởng chủng xạ khuẩn DC1 30, 35, 40, 45 50oC 46  Hình 3.12 Hình khả sinh enzyme ngoại bào chủng xạ khuẩn DC1 49  viii bưởi Diễn Hà Nội tiềm sinh tổng hợp chất kháng khuẩn Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 32(1S): 327-333 12 Lê Minh Tường & Trần Thị Thu Em (2014) Khảo sát khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn hại lúa Tạp chí chun đề Nơng nghiệp, 4, 120-126 13 Lê Minh Tường & Ngô Thị Kim Ngân (2014) Phân lập đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Rhizoctonia solani kunh gây bệnh đốm vằn lúa Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, 4, 113-119 Tài liệu tiếng anh Anandan, R., Dharumadurai, D., & Manogaran, G P (2016) An introduction to actinobacteria In Actinobacteria-Basics and Biotechnological Applications Intechopen Aoki, T., O'Donnell, K., Homma, Y., & Lattanzi, A R (2003) Sudden-death syndrome of soybean is caused by two morphologically and phylogenetically distinct species within the Fusarium solani species complex—F virguliforme in North America and F tucumaniae in South America Mycologia, 95(4), 660-684 Aoki, T., O’Donnell, K., & Scandiani, M M (2005) Sudden death syndrome of soybean in South America is caused by four species of Fusarium: Fusarium brasiliense sp nov., F cuneirostrum sp nov., F tucumaniae, and F virguliforme Mycoscience, 46(3), 162-183 Basak, K., & Majumdar, S K (1973) Utilization of carbon and nitrogen sources by Streptomyces kanamyceticus for kanamycin production Antimicrobial agents and chemotherapy, 4(1), 6-10 Barreto D., S Babbitt, M Gally and B A Pérez (2003) Nectria haematococca causing root rot in olive greenhouse plants, Inta Argentina Ria Vol 32 (1): pp 49-55 Beckman, C H (1987) The nature of wilt diseases of plants APS press 11 Bywater, J (1959) Infection of peas by Fusarium solani var martii forma and the spread of the pathogen Transactions of the British Mycological Society, 42(2), 201-IN4 CABI (2004), “Crop Protection Compendium” http://www.cabi.org Christou, T., & Snyder, W C (1962) Penetration and host-parasite relationships of Fusarium solani f phaseoli in the bean plant Phytopathology, 52, 219-226 Coleman, J J (2016) The Fusarium solani species complex: ubiquitous pathogens of agricultural importance Molecular plant pathology, 17(2), 146-158 52 10 Cook R J and K F Baker (1989) The nature and practice of biological control of plant pathogens, The America Phytopathological society, St Paul, Minnesota, pp 539 11 Clarkson J D S (1978), “Pathogenicity of Fusarium spp associated with footrots of peas and beans”, Plant Pathology Vol 27(3), pp 110-117 12 Jarvis, W R., & WR, J (1978) Taxonomic status of Fusarium oxysporum causing foot and root rot of tomato 13 Daquioag, J E L., & Penuliar, G M (2021) Isolation of Actinomycetes with Cellulolytic and Antimicrobial Activities from Soils Collected from an Urban Green Space in the Philippines International journal of microbiology, 2021 14 Jarvis, W R., & WR, J (1978) Taxonomic status of Fusarium oxysporum causing foot and root rot of tomato 15 Jiang, Y., Li, Q., Chen, X., & Jiang, C (2016) Isolation and cultivation methods of Actinobacteria Actinobacteria-basics and biotechnological applications, 39-57 16 Demain, A L., & Fang, A (1995) Emerging concepts of secondary metabolism in actinomycetes Actinomycetologica, 9(2), 98-117 17 Djalali Farahani-Kofoet, R., Witzel, K., Graefe, J., Grosch, R., & Zrenner, R (2020) Species-specific impact of Fusarium infection on the root and shoot characteristics of asparagus Pathogens, 9(6), 509 18 Hafizi, R., Salleh, B., & Latiffah, Z (2013) Morphological and molecular characterization of Fusarium solani and F oxysporum associated with crown disease of oil palm Brazilian Journal of Microbiology, 44, 959-968 19 Hayat Ullah, Asad Ullah and Muhammad Waseem Khan (2020) Fermentation Optimization for Actinomycetes as a Single Cell Protein: A Comprehensive Riview Preprints 20 Harpreet Singh, Madhurama Gangwar and P.P.S Pannnu (2016) Actinomyces from rice field soild and their antagonistic activity against rice fungal phytopathogen International Journal of Advance Research, 4(3), 183-192 21 Jarvis, W R., & WR, J (1978) Taxonomic status of Fusarium oxysporum causing foot and root rot of tomato 22 Khucharoen, K., Sinma, K., & Lorrungrua, C (2013) Efficiency of actinomycetes against phytopathogenic fungus of chilli anthracnose Journal of Applied Sciences, 13(3), 472478 53 23 Keikha, N., Mousavi, S A., Bonjar, G S., Fouladi, B., & Izadi, A R (2015) In vitro antifungal activities of Actinomyces species isolated from soil samples against Trichophyton mentagrophytes Current medical mycology, 1(3), 33 24 Kolander, T M., Bienapfl, J C., Kurle, J E., & Malvick, D K (2012) Symptomatic and asymptomatic host range of Fusarium virguliforme, the causal agent of soybean sudden death syndrome Plant disease, 96(8), 1148-1153 25 Kokalis-Burelle, N., & Rodriguez-Kabana, R (1997) Root-knot nematodes Compendium of Peanut Diseases, 2nd Edition APS Press, The American Phytopathological Society, St Paul, Minnesota, 45-48 26 Li ShuXian, G L Hartman and L E Gray (1998) Chlamydospore formation, production, and nuclear status in Fusarium solani f.sp glycines soybean sudden death syndromecausing isolates Mycologia Vol 90(3) pp 414-421 27 Marinelli, A., March, G J., Rago, A., & Giuggia, J (1998) Assessment of crop loss in peanut caused by Sclerotinia sclerotiorum, S minor, and Sclerotium rolfsii in Argentina International journal of pest management, 44(4), 251-254 28 Messaoudi, O., Wink, J., & Bendahou, M (2020) Diversity of Actinobacteria Isolated from Date Palms Rhizosphere and Saline Environments: Isolation, Identification and Biological Activity Evaluation Microorganisms, 8(12), 1853 29 Nalim, F A., Samuels, G J., Wijesundera, R L., & Geiser, D M (2011) New species from the Fusarium solani species complex derived from perithecia and soil in the Old World tropics Mycologia, 103(6), 1302-1330 30 Nelson, P E., Toussoun, T A., & Cook, R J (1981) Fusarium: diseases, biology, and taxonomy Penn 31 Nolan, R D., & Cross, T H O M A S (1988) Isolation and screening of actinomycetes Actinomycetes in biotechnology, 1-32 32 O'Donnell, K., Sutton, D A., Fothergill, A., McCarthy, D., Rinaldi, M G., Brandt, M E., & Geiser, D M (2008) Molecular phylogenetic diversity, multilocus haplotype nomenclature, and in vitro antifungal resistance within the Fusarium solani species complex Journal of Clinical Microbiology, 46(8), 2477-2490 33 O'Donnell, K (2000) Molecular phylogeny of the Nectria haematococca-Fusarium solani species complex Mycologia, 92(5), 919-938 54 34 Oskay, A M., Üsame, T., & Cem, A (2004) Antibacterial activity of some actinomycetes isolated from farming soils of Turkey African journal of Biotechnology, 3(9), 441-446 35 Pridham, T G., & Gottlieb, D (1948) The utilization of carbon compounds by some Actinomycetales as an aid for species determination Journal of bacteriology, 56(1), 107-114 36 Pérez-Rojas, F., León-Quispe, J., & Galindo-Cabello, N (2015) Actinoycetes isolated from compost and antagonistic activity against potato phytopathogens (Solanum tuberosum spp andigena Hawkes) Revista mexicana de fitopatología, 33(2), 116-139 37 Postma, J., & Rattink, H (1992) Biological control of Fusarium wilt of carnation with a nonpathogenic isolate of Fusarium oxysporum Canadian Journal of Botany, 70(6), 11991205 38 Rahman, A H M M., Islam, A K M R., & Naderuzzaman, A T M (2007) Studies on the herbaceous plant species in the graveyard areas of Rajshahi city Plant Environment Development, 1(1), 57-60 39 Rahman, M A., Begum, M F., & Alam, M F (2009) Screening of Trichoderma isolates as a biological control agent against Ceratocystis paradoxa causing pineapple disease of sugarcane Mycobiology, 37(4), 277-285 40 Rahman, M., Is lam, M Z., Is lam, M., & Ul, A (2011) Antibacterial activities of Actinomycete isolates collected from soils of Rajshahi, Bangladesh Biotechnology research international, 2011 41 Romberg, M K., & Davis, R M (2007) Host range and phylogeny of Fusarium solani f sp eumartii from potato and tomato in California Plant Disease, 91(5), 585-592 42 Sarial, A K (1994) Exploitation of Hybrid Vigour In Rice (Oryza Sativa L.) (Doctoral dissertation, IARI, Division of Genetics: New Delhi) 43 Sanchez, Sergio, Adán Chávez, Angela Forero, Yolanda García-Huante, Alba Romero, Mauricio Sánchez, Diana Rocha et al "Carbon source regulation of antibiotic production The Journal of antibiotics 63, no (2010): 442-459 44 S Miyadoh, and 121 coauthors (2001) Idetification Manual of Actinomycetes Society of Actinomycetes Japan, Business Centre for Academic Societies Japan 55 45 Shirling, E T., & Gottlieb, D (1966) Methods for characterization of Streptomyces species1 International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 16(3), 313-340 Geogren Agrios (1997) Plant pathology 46 Sood G (1996) Production of chlamydospores by Fusarium in onion (Allium cepa) bulb extract Mycologia, 88(6) pp 1010-1013 47 Stahl, D J., Theuerkauf, A., Heitefuss, R., & Schäfer, W (1994) Cutinase of Nectria haematococca (Fusarium solani f sp pisi) is not required for fungal virulence or organ specificity on pea Molecular plant-microbe interactions, 7(6), 713-725 48 Tiwari, K B., Shrestha, U T., & Agrawal, V P Nitrogen Assimilation in Actinomycetes 49 Van Der Sand, S T., Spadari, C., Antunes, T C., Teixeira, R., Minotto, E., & Fuentefria, A M (2013) Antifungal activity of actinobacteria against fungus isolates of clinical importance Revista brasileira de biociencias, 11(4) 50 Vijayabharathi, R., Kumari, B R., Sathya, A., Srinivas, V., Abhishek, R., Sharma, H C., & Gopalakrishnan, S (2014) Biological activity of entomopathogenic actinomycetes against lepidopteran insects (Noctuidae: Lepidoptera) Canadian Journal of Plant Science, 94(4), 759769 51 Widodo L, Tati Budiarti (2009) Suppression of Fusarium root rot and southern blight on peanut by soil solarization J ISSAAS 15 pp 118-125 Zaman N, S Ahmed (2012) Survey of root rot of groundnut in rainfed areas of Punjab, Pakistan Afr J Biotech 11 pp 4791-4794 52 Zitnick-Anderson, K., Oladzadabbasabadi, A., Jain, S., Modderman, C., Osorno, J M., McClean, P E., & Pasche, J S (2020) Sources of resistance to Fusarium solani and associated genomic regions in common bean diversity panels Frontiers in Genetics, 11, 475 53 Zhang, N., O'Donnell, K., Sutton, D A., Nalim, F A., Summerbell, R C., Padhye, A A., & Geiser, D M (2006) Members of the Fusarium solani species complex that cause infections in both humans and plants are common in the environment Journal of Clinical Microbiology, 44(6), 2186-2190 56 57 PHỤ LỤC Phụ lục Các thí nghiệm đánh giá hoạt tính kháng nấm Fusarium solani nấm Fusarium oxysporum chủng xạ khuẩn sau ngày cấy nấm DC1 DC2 DC3 DC4 Các thử nghiệm đánh giá hoạt tính kháng nấm Fusarium solani chủng xạ khuẩn sau ngày cấy nấm 58 DC1 DC6 DC1 DC2 DC5 DC7 DC2 DC4 59 DC7 DC8 DC9 Các thử nghiệm đánh giá hoạt tính kháng nấm F oxysporum chủng xạ khuẩn sau ngày cấy nấm 60 Phụ lục Khả đồng hóa nguồn carbon chủng xạ khuẩn DC1 sau ngày nuôi cấy Dextrin L-Rhamnose D-xylose Maltose Lactose Mannitol D-Galactose D-sobitol 61 Phụ lục Khả đồng hóa nguồn nitơ chủng xạ khuẩn DC1 sau ngày nuôi cấy Peptone (NH4)2SO4 Ure Meat extract KNO3 62 Phụ lục Ảnh hưởng pH tới khả sinh trưởng chủng xạ khuẩn DC1 sau ngày nuôi cấy pH pH5 pH6 pH pH pH pH 10 pH 11 pH 12 63 Phụ lục Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl tới khả sinh trưởng chủng xạ khuẩn DC1 sau ngày nuôi cấy 1% 4% 2% 3% 5% 7% 9% 64 Phụ lục Đặc điểm hình thái chủng xạ khuẩn DC1 môi trường ISP 1, ISP 2, ISP 3, ISP4, ISP 5, ISP 7, Gause I, Gause II, SCA sau ngày nuôi cấy ISP ISP ISP ISP ISP ISP Gause II SCA Gause I HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT SINH VIÊN LÀM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Nguyễn Thị Nhung Lớp: K62CNSHC Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Tên đề tài Khóa luận tốt nghiệp: Phân lập nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với nấm Fusarium solani Fussarium oxysporum Thời gian địa điểm thực tập: Thời gian thực tập: Từ tháng đến tháng năm 2021 Địa điểm thực tập: Tại môn Công nghệ vi sinh khoa Công nghệ sinh học Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ý KIẾN NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Tinh thần, thái độ học tập thực Khóa luận tốt nghiệp: Sinh viên có thái độ làm việc nghiêm túc, có cố gằng hồn thành nội dung nghiên cứu, chấp hành nội quy, quy định sở thực tập Mức độ hoàn thành Khóa luận tốt nghiệp giao:  Hồn thành tốt: x  Hoàn thành:  Chưa hoàn thành: Năng lực sáng tạo nghiên cứu viết Khóa luận tốt nghiệp:  Sinh viên trung thực nghiên cứu khoa học  Sinh viên cố gắng viết thành cơng khóa luận tốt nghiệp Kết luận:  Sinh viên đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: x  Sinh viên khơng đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2021 Giáo viên hướng dẫn