Giải trình tự và phân tích đặc điểm di truyền của gen rc quy định tổng hợp anthocyanin ở nếp cẩm đen ở bá thước, thanh hóa

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “GIẢI TRÌNH TỰ VÀ PHÂN TÍCH ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN CỦA GEN RC QUY ĐỊNH TỔNG HỢP ANTHOCYANIN Ở NẾP CẨM ĐEN Ở BÁ THƯỚC, THANH HÓA.” Sinh viên thực : Lê Thị Vân Anh Lớp : K62CNSHB Mã SV : 620562 Giảng viên hướng dẫn : ThS Nguyễn Quốc Trung HÀ NỘI - 2021   LỜI CAM ĐOAN   Em xin cam đoan toàn kết khóa luận hồn tồn thực tìm tịi nghiên cứu khoa học thân hướng dẫn ThS Nguyễn Quốc Trung Các số liệu kết khóa luận hồn tồn trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu Tơi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan trước hội đồng nhà trường Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên thực Lê Thị Vân Anh i   LỜI CẢM ƠN   Để hoàn thành tốt nghiệp sau trình năm rèn luyện, học tập trau dồi kiến thức xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, Ban chủ nhiệm Khoa, thầy tận tình hướng dẫn suốt q trình học tập, nghiên cứu rèn luyện Học viện Nông nghiệp Việt Nam Lời em xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến thầy giáo hướng dẫn ThS Nguyễn Quốc Trung người trực tiếp giúp đỡ, sát để em hồn thành khóa luận Thầy giúp em tích lũy nhiều kiến thức khơng để làm khóa luận mà cịn lời khun bổ ích trường Em xin bày tỏ lòng cảm ơn đến thầy cô Bộ môn Sinh học phân tử tồn thể thầy Khoa Cơng nghệ Sinh học tạo điều kiện để em hồn thành tốt khóa luận Mặc dù cố gắng để hồn thành Khóa luận tốt nghiệp cách hoàn chỉnh Tuy nhiên số hạn chế mặt kiến thức kinh nghiệm thực tế nên khơng thể tránh khỏi thiếu sót định mà thân chưa thấy Em mong có đóng góp q Thầy, Cơ giáo để khóa luận hồn chỉnh Em xin cảm ơn gia đình bạn bè sát cánh bên em suốt quãng thời gian sinh viên Em xin chân thành cảm ơn!  Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên thực Lê Thị Vân Anh ii   MỤC LỤC   LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii TÓM TẮT vii PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vai trò lúa 2.2 Ý nghĩa, đặc điểm lúa cẩm 2.3 Anthocyanin (đặc điểm, tác dụng, chế tổng hợp, gen quy đinh) 10 2.4 Vai trò, đặc điểm gen Rc 16 2.5 Các phương pháp để nghiên cứu trình tự di truyền nguồn gen lúa cẩm Việt Nam 18 PHẦN 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1 Vật liệu 21 3.2 Phương pháp nghiên cứu 21 3.2.1 Tách chiết DNA 21 3.2.2 Kĩ thuật PCR 22 3.2.3 Phân tích trình tự 24 iii   PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Nhân dịng giải trình tự 18 đoạn mồi 25 4.2 Lắp ghép thành full sequence 27 4.3 Xác định Exon/ Intron, vùng UTR gen Rc 30 4.4 So sánh trình tự xác định SNP gen Rc giống White/Red/Black giới 32 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 5.1 Kết luận 36 5.2 Kiến Nghị 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 PHỤ LỤC 39   iv   DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT     bHLH basic helix-loop-helix BC Before Century AD Anno Domini QTL Quantitative trait locus FNP Functional nucleotide polymorphism ABP Anthocyanins biosynthesis pathway DFR Dihydroflavonol‐4‐reductase PCR Polymerase chain reaction     v   DANH MỤC BẢNG   Bảng 1: Thành phần phản ứng PCR 22 Bảng 2: Nhiệt độ gắn mồi tối ưu 18 cặp mồi 23   vi   DANH MỤC HÌNH   Hình 1: Cấu trúc anthocyanidin anthocyanin 11 Hình 2: Các gốc R khác anthocyanidin 12 Hình 3: Cấu trúc hai chiều ion flavylium 13 Hình 4: Con đường trao đổi chất để tổng hợp pro-anthocyanidins anthocyanins 15 Hình 5: Các kiểu hình alen Rc 17 Hình 1: Kết lần điện di kiểm tra ADN tổng số giống Nếp cẩm đen Thanh Hóa 25 Hình 2: Ảnh điện di kiểm tra sản phẩm PCR nhân dòng 18 đoạn gen Rc với 18 đoạn mồi 26 Hình 3: Bản tóm tắt đa hình ADN Rc gen 31 Hình 4: Vị trí SNP tổng hợp sau trình tự Nếp cẩm đen TH với 34 giống điển hình 33 Hình 5: Cây phát sinh lồi Nếp cẩm đen TH 34 vii   TĨM TẮT   Nếp cẩm loại vơ đặc biệt, màu sắc khơng màu đen tuyền mà giống màu tím đen, màu sắc gặp giới thực phẩm Màu tím thẫm tạo dư thừa anthocyanin mà Rc gen điều tiết quan trọng đường tích lũy proanthocyanidin lớp vỏ cám gạo gạo Một nghiên cứu giải trình tự phân tích đặc điểm di truyền gen Rc quy định tổng hợp anthocyanin cung cấp chứng để hiểu tiến hóa giống Nếp cẩm đen Thanh Hóa Trong nghiên cứu này, 18 cặp mồi sử dụng để khuyếch đại trước nhân dịng giải trình tự Gen Rc từ giống Nếp cẩm đen Thanh Hóa lắp ráp chỉnh thành công phần mềm BioEdit với 7414 bp, phát gen Rc chứa intron exon Phân tích trình tự tiết lộ đoạn 14 bp intron thứ sáu cách so sánh với 35 giống lúa điển hình giới phát 51 SNP gen Rc Tiếp theo, phân tích phát sinh lồi chúng tơi thấy Nếp cẩm đen Thanh Hóa có liên quan chặt chẽ với giống Bengkongang Indonesia Trong nghiên cứu này, trình tự đầy đủ gen Rc từ giống Nếp cẩm đen Thanh Hóa lưu trữ liệu sơ để nghiên cứu biến đổi trình tự gen với q trình hóa Việt Nam   viii   PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Gạo (Oryza Sativa) loại ngũ cốc lâu đời nhất, nguồn sản phẩm thu từ lúa mô, lương thực gần nửa dân số toàn giới, đặc biệt người dân sống miền nam miền đông Châu Á Sau lúa đem xay xát loại bỏ vỏ trấu thu hạt gạo Các hạt gạo thường có nhiều màu sắc khác nhau, chẳng hạn màu nâu, đỏ thẫm loại tiêu thụ nhiều màu trắng Gạo thường chế biến thành ăn cơm, cháo nghiền thành bột gạo để làm bánh bún có vơ số sản phẩm làm từ gạo, bao gồm bột gạo, dầu cám gạo sữa gạo…Gạo tạo chủ yếu từ carb (Carbohydrate gạo dạng tinh bột chủ yếu, 90% tổng khối lượng khô 87% tổng hàm lượng calo) người nên nạp 225 – 325g carbohydrate ngày (Thực phẩm dinh dưỡng, 2017) Trong hạt gạo có chứa nhiều chất dinh dưỡng chất đạm, tinh bột, chất xơ (gạo lức có chứa lượng chất xơ hợp lý 1,8%, gạo trắng có chứa chất xơ 0,3%) cịn cung cấp khoáng chất cần thiết cho thể với chất sắc (trong hồng cầu enzyme) kẽm (giúp chống oxh máu, phân chia tế bào) nhiều P (giúp xương, răng), K (tổng hợp protein, hoạt động enzyme) …trích (Thực phẩm dinh dưỡng, 2017) Nói giống gạo, nước thường quen thuộc với giống gạo khác Nói kích thước, gạo hạt dài phổ biến Ấn Độ Trung Đơng, gạo hạt trung bình phổ biến Việt Nam Thái Lan, cịn gạo hạt trịn phổ biến Nhật Hàn Quốc loại dùng để làm sushi Nói màu sắc ngồi gạo trắng gạo nâu (gạo lứt) phổ biến nước ta, giới cịn có gạo hạt đen gạo dại (phổ biến vùng Bắc Mỹ Canada, riêng Việt Nam hai giống gạo gọi nếp cẩm, xuất xứ từ vùng Tây Bắc) Từ xa xưa ngày nay, gạo trở thành “linh hồn” nhiều ẩm thực khác nhau, điển hình Việt Nam   AAATAACCAAACTGATGAATGGCAGAGTGCTGGTATCCAGGTATTTGCCTCTAAAAGTAGCT ACACGTTTACTATGAAATTTTGTGGCTTTTGTTCATCTTCGGATGCAGTGGCCATTATCTAA AAACTAAGAATTTCCAGACTGCAGTTTTTATCTAATTTTGTGACTTTGTACATCAGACAGTT GTGTGCATTCCTGTTGTCGATGGCGTCCTGGAAATTGGAACTACGGAAAAGGTGATTTCGTA TATTATCAGCTGACAATCTAATTATATGGGCCATATAATTAAGTATAAATCAAAATACCTCA TAATATATTATAAAGTATCTAATGTGATTATGTGAATATTGGCTATTTCAATGTAATTTGAT ATATGAAACTGATAATCCTCTGAAACTCCGTAAGGATCAAACTAATCAAAATGTATATATTT TCAAGGTGGAGGAAGATATGGGCCTGATTCAGTATGCAAGGTCATCCACATGAAGCCTACCC TCTCACAGCACTCAACATCCAACCCAGTCACCCACTGTACTCATCAGCATCCAATCCAGGTT CAGATGCAACTAGGTATCACCAGCCAAACAAAGTTTGATTATTCAGATGAGCTCAATGCAGA TGAGGAGAATGATGACACAGAAGAAGAGGGCATGTCAGGTTCAGACACTAACAACACTGACA CTGAAAGGAATTCAGGCCAGCTGCAACTTCAAATGCAAGACCAACTGAACATGGTGAGCAAT GACCACCAGACAATACCAAATAATGCAGTTTCCAGTGAGCTAATGCAGTGTGAGATGTCAGA AGTGGTAAGAGATGGCTGCTCAAATAATATTTTAGAGGATGAAATCCAAATGCTGATGGATT GCCAAAACAGTAATTGTCAGTTAAATTTGCAAGGGCCAGATGAGCCTTGTCACTCTTGGCAT TTTCTCTGCGAGGAGTTACAAAATGATTACCAGCCAGGTATTACATTTGAGAAGATAATCCT TCAAAAGCACCCTTGTTCCATCCCTTCTCATTTGTACTCTTCACACAAGCACTGCCATTTTT TTTCTTTTTTGCATACATCCTCAATTCTTGCATTTCTTTTCCATATATTTGATACAACTGTC TCCATTTCCCTTCTGTCACAGCTACTGAAGATCAAGTGGCATCACCTGAAAATACCCATTAC CCAAAAACACTCATGACAATCCTACATTACAACACGCTGCGACAGCAAGAGATGAACATCAA GAACTACTTGCCAGTTTCAGAGAAATCATCATTCTCCAGATGGACTACTCCTGAAGGAAGTG ATGACAACAAGACCATGATCAGTCCAGGCACCACACAGAGAATGCTCAAGAGCATCCTGATG ATTGTTCCCAGTAGTCACTGCAGTTACAGGGGAGCAGAAACACCTGAATCAAGGGGCGGGAA AGGCGCAAGTGGATGCCATCCAAGGTGATTTCAGTGCCAACCATGTGCTGAAAGAGAGGAGA AGAAGAGAGAAGCTCAATGAGAAGTTCATAATTCTGCGATCTTTGGTACCTTTCATGACAAA GGTAATTAAGTACTCCCTCTATTTCTATAAAGCCGTATTTGACTAGTTATCTTATTTAGAAA GTATGTGCAAATATGTAAAATATAAGTCATACTTAAAGAACTTTTAATGTTATTAAATAATA AGTCACACCAAAAATAAAACATATATATTTTTAATAAGATAAATGATTAAATGTATATATAA AAATTAATAGCGTCACATATTTTAAAATAGAGGGGTATTTAAGTACCCACAGGATCATCAAA ATTCAGTTATCTTTTCTTAAGCCTCTAACGAACATTGGAAGATCCTCATTAGGGGGCAGAAT CAATTTAGGGTTCACTATTTCGGTATGCAAAATATGTTTTACCGGGCATCCGATTTTTAAAA AATTCAGAATGAAGAAAATTGAATCTTTTTTATGGATTTGAATAAATCTTGATAAATTCGAA AAAATTTCCGAACTTTTGGCCAGAAGTGAATCCTACCCGTATCCACCGGTAATAAACCTAAA TTTTTGGGAGTAATGAATTAATGTTATATATAATCCATGAATTATATAGTTCCAAACTACTC CGTAACAAATTTTCAGGAGTAGTGAAATTAATATTATTACAATCTCAGAAAAAAATGGCAGA AACAATTAATCTGTTTTCAATTATTAATTAATTTGTTTTTGTGTCCAGATGGACAAGGCGTC GATACTAGGCGACACGATCGAGTACGTGAAGCAGCTAAGGAACCGCATACAAGAGCTCGAGT CGTCGTCGTCGTCGTCACGAGCAGCCGCCCGGGCGCCATCGGCGGCGGCCGCCGGGAGGCGG AGGAAGAGATCCGCCGCCGCCGCCACTGCCACGGCGGCGGAAGGGATGAGCAGCAGCAATGG CCGCAATGGCGGCGAGGCGGCGGAGGTGGTGCAGGTTCTTTACGGTTATTATATAAGAAAGT TCACATATATAAATCATGATAATTACCTTTTAGAAAATTCAAACAAAGAATCGATATATATA GTTCTATCTATGCATCATTTTCCTAAATCACGATAATTACCTCAAGCTTGATAAAATGGCAT TACATTACTATTATTATTACTAGAGTTTTTTCACTTCCCTGATCTAACCAATTTGCCACGAT GGTTAGATATATAGATGGTTCTAATTAATCTAATGTTAATGTACTCCACATATATGATATAT GTACATACATATCTAGTTTTAACATTTGCAAATGAATTGCAATCAGAATATATATATGCATG 29   CAGCACAGGTGCTTGATTGCAATTATATGATTATTACTCTCTCACATATTGATATGGTAAAT TTGTATATATTTGTGGCATGCATTCATGCACGAAGCTAGATTAATTATTAATTAATTCAGGG TGATATCGATGAGGAGGAGAGGACGAGATGGATGGCCCTCTTCACCTGAGCGATGCTGCTCC TCCTCCTCCCCTTCACCTGCGCCAACCAATTCACCCACACAAAAACACACAAAAAAGATTCA GTTATTTTCAGTTCAAAGATTCAGTTAATTTGTACATAATTTAGGCGAAACGAACGTACGAG CAGATCGAAAAGAAGGACATGAGCAAAGAAAAAGG Lắp ráp trình tự giống Nếp cẩm đen TH với chuỗi tham chiếu Oryza sativa với số gia nhập CP018163.1 Sự tương đồng trình tự Nếp cẩm đen TH trình tự tham chiếu quan sát 99,1% 4.3 Xác định Exon/ Intron, vùng UTR gen Rc    So sánh gen hoàn chỉnh Nếp cẩm đen TH (7414bp) với giống điển hình giới, sử dụng phần mềm BioEdit trình tự 35 giống lúa Để điều tra đa dạng xung quanh đoạn 14 bp Rc, dựa vào nghiên cứu (Sweeney, tác giả khác, 2007) chúng tơi sử dụng 35 trình tự từ 22 loại gạo trắng giống đỏ giống gạo nâu đại diện cho india, aus, nhiệt đới, quần thể japonica ơn đới trình tự gen Nếp cẩm đen TH hồn chỉnh Một tóm tắt đa hình ADN Rc gen đưa (Hình 2) Chúng tơi thấy đoạn 14bp mô tả trước dẫn đến bệnh vỏ cám gạo trắng gạo 95,5 % (21/22) Đột đột biến thứ hai dẫn đến bệnh vỏ cám gạo trắng 4,5 % (1/22) số giống lúa khảo sát xác định cho thấy phát sinh japonica (DQ902352.1) Rc-s tìm thấy (vỏ cám gạo trắng) điều hòa ánh sáng màu đỏ màu hổ phách vỏ cám gạo thể chuyển đổi C → A exon Rc gen dẫn đến codon dừng sớm làm cắt ngắn protein trước vùng bHLH dựa vào phân tích (Sweeney, tác giả khác, 2007) Mặc dù đáng ngạc nhiên phiên cắt ngắn protein bHLH tạo vỏ cám gạo màu trắng (DQ902352.1) Đột biến chức gen Rc, protein điều hòa đường tổng hợp proanthocyanidi ngăn cản phát triển lớp vỏ cám gạo sắc dựa theo nghiên cứu (Sweeney, tác giả khác, 2006) Dựa vào báo (Sweeney, tác giả khác, 2006) (Furukawa, 30   tác giả khác, 2007) (Sweeney, tác giả khác, 2007) phân tích gen cách kĩ chúng tơi nhận thấy lúa Nếp cẩm đen TH có đột biết đoạn 14 đoạn base đặc điểm gen rc dẫn đến tổng hợp proanthocyanidin sắc tố tương ứng vỏ cám gạo trắng (Furukawa, tác giả khác, 2007) Tuy nhiên giống Nếp cẩm đen Thanh hóa thu hoạch có màu đen Nên kế hoạch tới em nghiên cứu chức gen Rc tổng hợp anthocyanin ảnh hưởng môi trường đến hàm lượng anthocyanin trình trồng Nếp cẩm đen TH Hình 3: Bản tóm tắt đa hình ADN Rc gen 31     Chúng xác định vỏ cám gạo đỏ khơng có đoạn 14 nu (trong locus Rc) dựa vào tóm tắt đa hình AND Rc gen đưa (Hình 3) Mơ hình gen Rc vẽ phần mềm GSDS2.0 Có intron (đường màu đen) exon (hộp màu vàng) mơ hình gen Rc giống lúa Nếp cẩm đen Thanh Hóa UTR vùng khơng dịch mã (hộp màu xanh) 4.4 So sánh trình tự xác định SNP gen Rc giống White/Red/Black giới Dựa vào phần mềm bioEdit Sequence Alignment chúng tơi trình tự so sánh Nếp cẩm đen TH với 34 mẫu (White/Red/Brown giới) Xác định 51 SNP gen Rc 32       Hình 4: Vị trí SNP tổng hợp sau trình tự Nếp cẩm đen TH với 34 giống điển hình Chúng tơi so sánh trình tự giống Nếp cẩm đen TH với 35 mẫu (Hình 4), số lượng SNP giống khác Tác dụng đột biến SNP phát đóng góp vào tích tụ pro-anthocyanin Nếp cẩm đen TH, cần phân tích thêm trình tự axit amin phân tích chức protein phân biệt rõ ràng tổ tiên nguồn gen Hơn nữa, xác định SNP không ảnh hưởng đến màu sắc vỏ lụa gạo Để phân loại nhóm haplotypes chúng tơi dùng 35 trình tự trỉnh chỉnh sửa Bioedit kết trước, lưu file dạng Phylip4 Và sử dụng phần mềm DNASp6 để mở liệu có ta xác định giống Nếp cẩm đen TH thuộc nhóm haplotype 16 (Hình 4) 35 trình tự DNA sử dụng dễ dàng với phần mềm Mega X, chương trình giúp xây dựng phát sinh lồi (Hình 5) Trong 33   nút đại diện cho đơn vị phân loại, nút chi nhánh tương ứng với kết thúc gen Với nút tương ứng bên để suy nút nội đại diện cho tổ tiên chung   Hình 5: Cây phát sinh loài Nếp cẩm đen TH Cây phát sinh lồi (Hình 4) xác định Ncẩm đen TH kết gần với nhóm Oryza sativa indica nhóm Oryza sativa japonica 34   Do đó, giống Nếp cẩm đen TH có nguồn gốc từ Nam Á Đông Nam Á cịn tiết lộ cho chúng tơi nguồn gốc mối quan hệ di truyền với giống Nếp cẩm đen Thanh Hóa gần Bengkongang Indonesia 35   PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Chúng tơi nghiên cứu biến đổi trình tự gen Rc quy định anthocyanmin Nếp cẩm đen Thanh Hóa q trình hóa Việt Nam.  Tối ưu nhiệt độ gắn mồi để nhân dòng đoạn gen Rc giải trình tự phương pháp Sanger Giải trình tự thành cơng lắp ráp đoạn gen Rc Nếp cẩm đen TH gồm 7417 bp Xác định mơ hình gen gồm Exon Intron Phân tích xác định đột biết xóa 14 bp exon 6, phát đa hình 51 SNP thuộc nhóm haplotype 16 giống Nếp cẩm đen TH Chúng bước đầu xác định quan hệ di truyền giống lúa Nếp cẩm đen TH gần Bengkongang Indonesia 5.2 Kiến Nghị Cần nghiên cứu thêm chức gen Rc tổng hợp anthocyanin ảnh hưởng môi trường đến hàm lượng anthocyanin trình trồng Nếp cẩm đen TH 36   TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bùi Huy Đáp (1980) Các giống lúa Việt Nam Hà Nội: Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Nghĩa, T., Sửu, T D., Tường, L K., Huy, L Q., Chi, V L., Tùng, V V., & Huệ, H T (2011) Tài nguyên thực vật Việt Nam Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam Nhựt, P T., Phát, Đ T., Hiền, T T., Đức, L T., Thịnh, P V., Phúc, T B., & Cang, M H (2019) Đánh giá hàm lượng anthocyanins hoạt tính kháng oxi hóa cao chiết từ loại rau củ, hoa Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số Quỳnh, Đ T., Hiền, N T., Thu, V T., & Quang, T V (2016) ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN NGUỒN GEN LÚA NẾP ĐỊA PHƯƠNG DỰA TRÊN KIỂU HÌNH VÀ CHỈ THỊ PHÂN TỬ Tạp chí KHNơng nghiệp Việt Nam 2016, 14(4), 527-538 Tươi, N T., Cường, P V., & Hoan, N V (2014) PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA CÁC MẪU GIỐNG LÚA CẨM BẰNG CHỈ THỊ SSR Tạp chí Khoa học Phát triển 2014, 12(4), 485-494 Tài liệu nước A.Dixon, & De-YuXieRichard (2005) Proanthocyanidin biosynthesis – still more questions than answers (Vol 66) Civáň, P., & Brown, T A (2017) Origin of rice (Oryza sativa L.) domestication genes Genetic Resources and Crop Evolution, 64, 1125–1132 Cui, Y., Song, B K., Li, L.-F., Li, Y.-L., Huang, Z., Caicedo, A L., Olsen, K M (2016) Little White Lies: Pericarp Color Provides Insights into the Origins and Evolution of Southeast Asian Weedy Rice Genetics, 6(12), 4105–4114 Furukawa, T., Maekawa, M., Oki, T., Suda, I., Iida, S., Shimada, H., Kadowaki, K.i (2007) The Rc and Rd genes are involved in proanthocyanidin synthesis in rice pericarp the plant journal, 49(1), 91-102 HyunJung, K., Janelle, J., Namrata, S., Anthony, G., J, D J., Wricha, T., R., M R (2016) Population Dynamics Among six Major Groups of the Oryza rufipogon Species Complex, Wild Relative of Cultivated Asian Rice Rice Kato, S., & Ishikawa, J (1921) On the inheritance of the pigment of red rice (Vol 1) Kim, W.-J., Adeva, C., Lee, H.-S., Jeon, Y.-A., Shim, K.-C., & Ahn, S.-N (2020) Genetic Analysis of Anthocyanin Pigmentation in Sterile Lemma and Apiculus in Rice 8, 378-388 Nagao, S., Takahashi, M., & Miyamoto, T (1957) Genetic studies on rice plant, XXI Biochemical studies on red rice pigmentation (Vol 32) Jap J Genet Nagao, S; Takahashi, M (1947) Ein Beitrag zu einer genotypschen Analyze der Farbeigenschaaries der Spelze und der anderen Pflanzenteile bei der Reispflanze (Vol 1) Jap J Genet 37   10 Singh, N., Singh, B., Rai, V., Sidhu, S., & Singh, A K (2017) Evolutionary Insights Based on SNP Haplotypes of Red Pericarp, Grain Size and Starch Synthase Genes in Wild and Cultivated Rice ORIGINAL RESEARCH article 11 Singh, Nisha, Singh, alwant, Rai, Vandna, K, A K (2017) Evolutionary Insights Based on SNP Haplotypes of Red Pericarp, Grain Size and Starch Synthase Genes in Wild and Cultivated Rice Plant Sci 12 Sweeney, M T., Thomson, M J., Cho, Y G., Park, Y J., Williamson, S H., Bustamante, C D., & McCouch, S R (2007) Global Dissemination of a Single Mutation Conferring White Pericarp in Rice PLoSGenet, 3(8), e133 13 Sweeney, T, M., Thomson, J, M., Pfeil, E, B., & McCouch, S (2006) Caught RedHanded: Rc Encodes a Basic Helix-Loop-Helix Protein Conditioning Red Pericarp in Rice The Plant Cell, 18(2), 283–294 14 Xiao-yan, L., Sheng, Q., Xiao-ling, S., Kun, C., Yi-na, S., Zhi-hua, S., & Wei-min, D (2014) Allele Types of Rc Gene of Weedy Rice from Jiangsu Province, Rice Science, 21(5), 252−261 Tài liệu Internet Hirst, K K (2019) The Origins and History of Rice in China and Beyond (Thoughtco) Retrieved 1, 2021, from https://www.thoughtco.com/origins-history-of-rice-in-china170639 The Natural History Of Rice (2021) Retrieved 7/ 1/, 2021, from https://www.encyclopedia.com/: https://www.encyclopedia.com/ Thực phẩm dinh dưỡng (2017) Retrieved 7/ 1/, 2021, from caroty.com: http://caroty.com/gao-thanh-phan-dinh-duong-va-nhung-loi-ich-doi-voi-suc-khoe/ University, N Y (2011, 3) Rice's origins point to China, genome researchers conclude New York University Retrieved 7/ 1/, 2021, from https://www.sciencedaily.com/releases/2011/05/110502151357.htm vai trò lương thực đời sống nhân loại (2020) Retrieved 7/ 1/, 2021, from giongvietthanhth.com: http://giongvietthanhth.com/vai-tro-cua-luong-thuc-doivoi-doi-song-cua-nhan-loai/     38   PHỤ LỤC MỒI TRÌNH TỰ AF1 GGGATGCTACTAGCTCCTCACTCACTCGCCTTTACTTATCGATCTCGATCAT CCACGAGCTAGCTAGCAGTGCTCGCCATGGCCGGCGGCGAGGCGCATGC GGCGCTGCAGGCGGTGGCGCAGAGCCTCCGGTGGACCTACAGCCTCCTC TGGCAGCTCTGCCCCCACCAAGGGTACCTACCCTACCTACCTACGACACG ATGCACAGTGTTCATCCATGGCCGGCCATGGCGGATCGTCGTCGTTGTCG ATGATCATCGAAGGAAGCTAGAGGATATGGCTCAATACTTTGATAATATATA TACTGATCTCTCCGTACAACAAAAATATAAAAATTCTAGCTAGTATCGAATGA GACATATGCTATGCTAGTACTACGAATCTAAAAAGATGTACATATTTTGATTC GTATTATTAGGATATATCACGAGTTTTTATATTTTGAGACGGATGTAATAATT CTGAATTTAGTTGTGATCGCATGGCATGCAGGAGCTCGCTGGTGTGGGGG GAGGGGCACTACAACTTTGGCGCACGTCAAGACGCGGAAGTATATTGTCAT GGTGGAGCG 571bp AF2 TTCGAATGAGACATATGCTATGCTAGTACTACGAATCTAAAAAGATGTACAT ATTTTGATTCGTATTATTAGGATATATCACGAGTTTTTATATTTTGAGACGGA TGTAATAATTCTGAATTTAGTTGTGATCGCATGGCATGCAGGAGCTCGCTG GTGTGGGGGGAGGGGCACTACAACGGCGCCGTCAAGACGCGGAAGTCGA CGGTGATGCAGCCGCCGCCGGCGGAGGAGGAGGACGACGCCGACCACG CGGCGCGCCACCGGAGCCGGCAGCTGAGGGAGCTCTACGACTGGCTGCA GCAGGCCGGGGAGAACTCCAGCGGCGGCGTGCAGACGTCGTCGACGACG GCGAGCCGGCGGCCGGGGGCGGCTCTGTCGCCGGAGGACCTGACGGAG ACGGAGTGGTTCTTCCTCATGTCGGCATCCTACTCCTTCCCTCCCGGCATC GGGTATATAATAAAAAATATAGATATAAATATTTAAGCATGCATGCATAAATT AAACCACACTTCTTGTTACTGTTTCTTGGGCAAAA 538bp AF3 GCGGCGTGCAGACGTTCGTCGACGACGGCGTAGCCGGCGGCCGGGGGC GGCTCTGTCGCCGGAGGACCTGACGGAGACGGAGTGGTTCTTCCTCATGT CGGCATCCTACTCCTTCCCTCCCGGCATCGGGTATATAATAAAAAATATAGA TATAAATATTTAAGCATGCATGCATAAATTAAACCACACTTCTTGTTACGTGT TCTTGGCAAAATGATGAACAATTACCACTAATTAATTGGAGCCAGAAACCCT AAAGATTTACCCACCTGGTTAATTAATCGGTGTGTTGATCCACGCATGCATG CATGCAGAAAATCAAGATCAGGATAGCTCCTTTTCTTTTGCAGGTTAATTAG CTAGATCTTCACGTATAATTAGCTAGCTAGATTTTAAAATATAATTTATTCAAT TTGATTTATGATTTTTATTTTTTATTTCAAATAGATACAACTGTATACAAAATT TTATTTTGGTACATACCTCCGATCCAACTACATCAGAGGTAAAAAAAAAATTA AACCGTTGGAATTGATTAGAACAAGATCGTGCGGCCAGTCCTAAGGCTCCC CAAAA 567bp AF4 GTTGCTGATCTTCCGTATAATTAGCTAGCTAGATTTTAAATATAATTTATTCA ATTTGATTTATGATTTTTATTTTTTATTTCAAATAGATACAACTGTATACAAAA TTTTATTTTGGTACATACCTCCGATCCAACTACATCAGAGGTAAAAAAAAAAT TAAACCGTTGGAATTGATTAGAACAAGATCGTGCGGTCAAATTATATCATAA CTAACTTTTCTGATTCTCTAAAGCATAGAGATGTATATATACATCGTATTATT AGGCTCTATATTTCCTGATTAACACTAGATGCATATATAATTTTGATAGTCAA 581bp 39 SỐ Nu   AATATACTTTTGATAGGCTCTAAAGAAAAACTTAATAACATGTACTCCCTCCA TATACTTTTGATAGTCATATTTCATCTTGACACACAGATCAAGTATAAGTAAT TCTACTTATCATCCATTTAAACACGCTACTAGTTATTCCTCATAAACAAGCGA TTCATTAATATTTACATTTCTCGATGCTTGTGTAGCCAATATTGTGTGGAAGA ATGGAATGTCATTAAGAGGATAGGTTGTTGGATTGAAAATATACCAAAGAA AF5 AAGGAGTCTTAAGAGGATAGGTTGTTGGATTGAAATATGCCTATCAAAAATA AATTTTTAGATTTGAAAATATGCCTATCAAAAGTAGATGGAGGGAGTATTAAT TAATGTGAATTTCCAATCCTACTGTTGTGATATTAGGCTTTGTACCTTCTTGT CCAGGAGGTATATATATGGCTCTTTTAAGGATGGGAGAAAATATCATCTTTA ATACAACTATATATGGCTTTTGTTTGATAAATACAACTTTTATTTTGTATGAAT ACAAATATATTGATAAATATCCACCATTATAATCCTAACCCATTAGGATCATA TGGTGTATATTTTTTTAACTATTTGTTTTTTATAAATTAATATTAAGAGATCAC AATAAAAATATAGTATTATGAAAGTACTCTTAACAACATATCCAATGATAAAA TTATTATTATTACAAAATATAGTGGTCAAATTGTATAGAATTCAATAGCCTGA TTTTATGACGTCAAGTAAATTAAATAAAGAATGAAGGTAGTGCTAGAGTGAT CAAAA 534bp AF6 ATAAAGATGAAGGTAGTGCTAGAGTGATCAACAATATCTCTCCTAAAATATG TCCTATAAGTTTTACTCCATAAATCCAAGGGTCAAAAGTTGTTGGGTTATTTT TTTAGATAATAACATACTACCCCTTTTCAAAATGTATGATTCTATTGACTTTTT GCACAACATTTAACCATTTGTCATATTAAAAATTAGTATAAACATCTAAAAAT ATAAGTTACAATTATATTTTATTTGATGATAAAACAACTCACAACAAAATAAAT AATATTTATATAATCTTTTTGGAATAAAACGAATGATCAAACATTATTCAAAAA GTCAATGGTATAGTACGTTTTGAAATTGATAGACTATGAGAGCAAAATTTTG AGATAACATGGAAAATTATCCTCTTAGACATTGCACTGTGTAATAATTAATAA TAATGAATGAAAGGCTAAGACTTTTCTTCCACCTTATATAAGTGGTTGAATAT ATAGCAATCACATCATTACATGATTTTGTAACCAACCGTCTCTATAGCTCCG AATACAGTGCAATA 544bp AF7 AATGGTGAATATAGCAATCACATCATTACATGGATTTTGTAACCAACCGTCT CTATAGCTCCGATACAGTGCTAGTTTCACATCGTAATAATTAAAGAGTATAA TAATAAATCGAGGTGTACTTCTCATCGATGAAGTGATGTGCCGCTTAGCTAA ATTAAACTCGTATGCGAAAAATCAGTATATGTCCGGTTAATTTCTAAGAGAG AGATTGAGAGAGAATAATTGCGCCCCTCCAAATCCCCCTCTTGGACGTTAG GGAGCTATATAGACGGTATTGCTAAGTGCGATGTGTACATAACGTACCTGT CGTAGGAACATTTCTCATCCAAATTAAGTAGTAATGCATGGCATGAAATCCA TTTTTGTATTTTGCATGGCAAAGAATGACAACAAGGAATACACTAGCTAGCC CTGCCCTTTTTCAATTTAATTTAACATCAAACTTAGTTATTGTATTTCTTTTGT CAGAATAGCATGGCATTGCAAAATAC 494bp AF8 AAATAATTAATTAGTGTATTTTACTAGTCTTACAAAAGTATCAAGAGAGACAA CTAATTATAGTTGGGAGACACCAAACTTGTTTTTAATAATGACAATTAAAACC CTACCTCTACATCCAACATAGACGTACATAGTCCGAAGGCGCCAAATATTTG TACATTTAGCTACCAGATTTCAGTACGAGTTCTCACATTATAATTTTGATTTT TTTATTTTTTTTATAAACAATCTGGTACCCTTTTATGTCTGGAAGGAAAAAAA AAATCTAAATTGCAACATTTTAGTCGGTGAGAATGGTACTCTGTCCTAGCTA CTTTCTACACATGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGCCTTTAATTGCCCT TGCCCATGCATCTTTCTTTGCACACATGT 396bp AF9 GTGCTTTTCCAATTGTCATGAGGAGAGAACTTGTTAAGTTGCACACATGTGT 489bp 40   GCTTTGCATGTCTTCAGGTTACCTGGAAGGGCATTTGCAAGGAGAGGCCAT GTATGGCTCACTGGAGCAAATGAAGTTGACAGCAAAGTATTCCTAAGAGCA ATTCTTGCCAAGGTTCAGCCATCACCTTCTCTTACCTATTTTTCACTCTGAAT GCCAACAGTGCTTTGCACATTGTAGTCTGTTTGCAGACTGCAAATGATGAC CATAATCAGATCAGAAAATAAAATAATATTATATACTTTTTGAGCCAGCTAGC AAGAATATGTAACAATAATTCTCCTTTTTTTTTCTTGTTCTTTTCCCTGATGTG GTGCATAACAAATAACCAAACTGATGAATGGCAGAGTGCTGGTATCCAGGT ATTTGCCTCTAAAAGTAGCTACACGTTTACTATGAAATTTTGTGGCTTTTGTT CATCTTTGAAAGGCAGTGGA AF10 CGAGGCACCTGCAAGGGTAGATGTTCTTGGAACCATATACTTGCCAATGAAA 484bp GTAGCTACCCGATTACTATGAAATTTTGTGGCTATTGTTCATCTTCGGATGCA GTGGCCATTATCTAAAAACTAAGAATTTCCAGACTGCAGTTTTTATCTAATTTT GTGACTTTGTACATCAGACAGTTGTGTGCATTCCTGTTGTCGATGGCGTCCT GGAAATTGGAACTACGGAAAAGGTGATTTCGTATATTATCAGCTGACAATCTA ATTATATGGGCCATATAATTAAGTATAAATCAAAATACCTCATAATATATTATA AAGTATCTAATGTGATTATGTGAATATTGGCTATTTCAATGTAATTTGATATAT GAAACTGATAATCCTCTGAAACTCCGTAAGGATCAAACTAATCAAAATGTATA TATTTTCAAGGTGGAGGAAGATATGGGCCTGATTCAGTATGCAAGGGGCTTT TCAAGAA AF11 AATTTGGTATCACTGGTCATCCACATGAAGCCTACCCTCTCACAGCACTCAA CATCCAACCCAGTCACCCACTGTACTCATCAGCATCCAATCCAGGTTCAGA TGCAACTAGGTATCACCAGCCAAACAAAGTTTGATTATTCAGATGAGCTCAA TGCAGATGAGGAGAATGATGACACAGAAGAAGAGGGCATGTCAGGTTCAG ACACTAACAACACTGACACTGAAAGGAATTCAGGCCAGCTGCAACTTCAAA TGCAAGACCAACTGAACATGGTGAGCAATGACCACCAGACAATACCAAATA ATGCAGTTTCCAGTGAGCTAATGCAGTGTGAGATGTCAGAAGTGGTAAGAG ATGGCTGCTCAAATAATATTTTAGAGGATGAAATCCAAATGCTGATGGATTG CCAAAACAGTAATTGTCAGTTAAATTTGCAAGGGCCAGATGAGCCTTGTCA CTCTTGGCATTTTCTCTGCGAGGAGTTACAAAATGATTACCAGCCAGGTATT ACATTTGAGAAGATAATCCTTCAAAAGCACCCTTGTTCCATCCCTTCTCATT CTGACTCATACCCATAA 582bp AF12 TGGTTGGCACTGAAATCACCTGCCTTGTCCCTCTTGGCATTTTCTCTGCGA GGAGTTACAAAATGATTACCAGCCAGGTATTACATTTGAGAAGATAATCCTT CAAAAGCACCCTTGTTCCAAAAATATATATTTGTACTCTTCACACAAGCACT GCCATTTTTTTTCTTTTTTGCATACATCCTCAATTCTTGCATTTCTTTTCCATA TATTTGATACAACTGTCTCCATTTCCCTTCTGTCACAGCTACTGAAGATCAA GTGGCATCACCTGAAAATACCCATTACCCAAAAACACTCATGACAATCCTAC ATTACAACACGCTGCGACAGCAAGAGATGAACATCAAGAACTACTTGCCAG TTTCAGAGAAATCATCATTCTCCAGATGGACTACTCCTGAAGGAAGTGATGA CAACAAGACCATGATCAGTCCAGGCACCACACAGAGAATGCTCAAGAGCAT CCTGATGATTGTTCCCAGTAGTCACTGCAGTTACAGGGGAGCAGAAACACC TGAATCAAGGGGCGGAAAGGCGCAAGACCCC 549bp AF13 GAGATGTTCCAGTAGTCACTGCAGTTACAGGGGAGCAGAAACACCTGAATC AAGGGGCGGGAAAGGCGCAAGTGGATGCCATCCAAGGTGATTTCAGTGCC AACCATGTGCTGAAAGAGAGGAGAAGAAGAGAGAAGCTCAATGAGAAGTTC ATAATTCTGCGATCTTTGGTACCTTTCATGACAAAGGTAATTAAGTACTCCC 499bp 41   TCTATTTCTATAAAGCCGTATTTGACTAGTTATCTTATTTAGAAAGTATGTGC AAATATGTAAAATATAAGTCATACTTAAAGAACTTTTAATGTTATTAAATAATA AGTCACACCAAAAATAAAACATATATATTTTTAATAAGATAAATGATTAAATG TATATATAAAAATTAATAGCGTCACATATTTTAAAATAGAGGGGTATTTAAGT ACCCACAGGATCATCAAAATTCAGTTATCTTTTCTTAAGCCTCTAACGAACA TTGGAAGATCCTCACTAATGGGCAGCATGA AF14 CAACTATTCACAAATTTGTCGTTGCGGCCGGGTCGACCAGGCGTCCATCCT CGGCGACACGATGGAGTACGTGAAGCAGCTAAGGAACCGCATCCACGAGG TCGAGTTGTCGTCGTCGTCGTCACGCGCAGCCGCCCGGGCGCCATCGGC GGCGGCCGCCGGGAGGCGGAGGAAGAGATCCGCCGCCGCCGCCACTGC CACGGCGGCGGAAGGGATGAGCAGCAGCAATGGCCGCAATGGCGGCGAG GCGGCGGAGGTGGTGCAGGTGTCCATCATCGAGAGCGACGCGCTGCTGG AGCTCCGGTGCGGTTGCGGCGGCGGCGGCGGCGGTGTGGTGCTGCTCCG GGTGATGCAGGCGATGCAGGAGCTCCAGCTGGAGGTCACCGCCGTCCAG GCCTCGTGCGCCGGTGGCGAGCTGCTCGCCGAGCTGCGCGCCAAGGTCG TCGTTATGATCCTGATCTGCATGAAAATGCAAATGCAAAGCAANCAATT 492bp AF15 TTGCGACAGCAAGAGATGAACATCAAGAACTACTTGCCAGTTTCAGAGAAA TCATCATTCTCCAGATGGACTACTCCTGAAGGAAGTGATGACAACAAGACC ATGATCAGTCCAGGCACCACACAGAGAATGCTCAAGAGCATCCTGATGATT GTTCCCAGTAGTCACTGCAGTTACAGGGGAGCAGAAACACCTGAATCAAGG GGCGGGAAAGGCGCAAGTGGATGCCATCCAAGGTGATTTCAGTGCCAACC ATGTGCTGAAAGAGAGGAGAAGAAGAGAGAAGCTCAATGAGAAGTTCATAA TTCTGCGATCTTTGGTACCTTTCATGACAAAGGTAATTAAGTACTCCCTCTA TTTCTATAAAGCCGTATTTGACTAGTTATCTTATTTAGAAAGTATGTGCAAAT ATGTAAAATATAAGTCATACTTAAAGAACTTTTAATGTTATTAAATAATAAGTC ACACCAAAAATAAAACATATATATTTTTAATAAGATAAATGATTAAATGTATAT ATAAAAATTAATAGCGTCACATATTTTAAAATAGAGGGGTATTTAAGTACCCA CAGGATCATCAAAATTCAGTTATCTTTTCTTAAGCCTCTAACGAACTATGGA AAGGACTCATTAGGGGGCAGAATCAATTTAGGGTTCACTATTTCGGTATGC AAAATATGTTTTACCGGGCATCCGATTTTTAAAAAATTCAGAATGAAGAAAAT TGAATCTTTTTTATGGATTTGAATAAATCTTGATNATTCGAGATTG 773bp AF16 AAGATAGTCTCCCTCTATTTCTATAAAGCCGTATTTGACTAGTTATCTTATTT AGAAAGTATGTGCAAATATGTAAAATATAAGTCATACTTAAAGAACTTTTAAT GTTATTAAATAATAAGTCACACCAAAAATAAAACATATATATTTTTAATAAGAT AAATGATTAAATGTATATATAAAAATTAATAGCGTCACATATTTTAAAATAGA GGGGTATTTAAGTACCCACAGGATCATCAAAATTCAGTTATCTTTTCTTAAG CCTCTAACGAACATTGGAAGATCCTCACTAATGGCAGCATGAATCTAGGGT TCACTATTTCGGAATGCAAAATATGTTTTACCGGGCATCCGATTTTTAAAAAA TTCAGAATGAAGAAAATTGAATCTTTTTTATGGATTTGAATAAATCTTGATAA ATTCGAAAAAATTTCCGAACTTTTGGCCAGAAGTGAATCCTACCCGTATCCA CCGGTAATAAACCTAAATTTTTGGGAGTAATGAATTAATGTTATATATAATCC ATGAATTATATAGTTCCAAACTACTCCGTAACAAATTTTCAGGAGTAGTGAA ATTAATATTATTACAATCTCAGAAAAAAATGGCAGAAACAATTAATCTGTTTT CAATTATTAATTAATTTGTTTTTGTGTCCAGATGGACAAGGCGTCGATACTA GGCGACACGATCGAGTACGTGAAGCAGCTAAGGAACCGCATACAAGAGCT CGAGTCGTCGTCGTCGTCGTCACGAGCAGCCGCCCGGGCGCCATCGGCG GCGGCCGCCGGGAGGCGGAGGAAGAGATCCGCCGCCGCCGCCACTGCC 901bp 42   ACGGCGGCGGAAGGGATGAGCAGCAGCAATGGCCGCAATGGCGGCGAGG CGGCGGAGGTGGTGCAGGTTC AF17 GCCGTCGTCGTCGTCACGAGCAGCCGCCCGGGCGCCATCGGCGGCGGCC CCGGGAGGCGGAGGAAGAGATCCGCCGCCGCCGCCACTGCCACGGCGGC GAAGGGATGAGCAGCAGCAATGGCCGCAATGGCGGCGAGGCGGCGGAGG GGTGCAGGTGTCCATCATCGAGAGCGACGCGCTGCTGGAGCTCCGGTGCG TTGCGGCGGCGGCGGCGGCGGTGTGGTGCTGCTCCGGGTGATGCAGGCG TGCAGGAGCTCCAGCTGGAGGTCACCGCCGTCCAGGCCTCGTGCGCCGGT GCGAGCTGCTCGCCGAGCTGCGCGCCAAGGTCGTCGTTATGATCCTGATCT CATGAAAATGCAAATGCAAATGCAAATGCAGAATTAAGCTTTCATTCTTGCTC TCTGAATTCTGAATTTATATATTCACCCTTCTTTCGATCTGCTCGTACGTTCGT TCGCCTAAATTATGTACAAATTAACTGAATCTTTGAACTGAAAATAACTGAATC TTTTTGTGTGTTTTTGTGTGGGTGAATTGGTTGGCGCAGGTGAAGGGGAGGA GAGGAGCAGCATCGCTCAGGTGAAGAGGGCCATCCATCTCGTCCTCTCCTC TCATCGATATCACCCCTGAAA 644bp AF18 CTTTACGGTTATTATATAAGAAAGTTCACATATATAAATCATGATAATTACCT TTTAGAAAATTCAAACAAAGAATCGATATATATAGTTCTATCTATGCATCATT TTCCTAAATCACGATAATTACCTCAAGCTTGATAAAATGGCATTACATTACTA TTATTATTACTAGAGTTTTTTCACTTCCCTGATCTAACCAATTTGCCACGATG GTTAGATATATAGATGGTTCTAATTAATCTAATGTTAATGTACTCCACATATA TGATATATGTACATACATATCTAGTTTTAACATTTGCAAATGAATTGCAATCA GAATATATATATGCATGCAGCACAGGTGCTTGATTGCAATTATATGATTATTA CTCTCTCACATATTGATATGGTAAATTTGTATATATTTGTGGCATGCATTCAT GCACGAAGCTAGATTAATTATTAATTAATTCAGGGTGATATCGATGAGGAGG AGAGGACGAGATGGATGGCCCTCTTCACCTGAGCGATGCTGCTCCTCCTC CTCCCCTTCACCTGCGCCAACCAATTCACCCACACAAAAACACACAAAAAA GATTCAGTTATTTTCAGTTCAAAGATTCAGTTAATTTGTACATAATTTAGGCG AAACGAACGTACGAGCAGATCGAAAAGAAGGACATGAGCAAAGAAAAAGG G 681bp Phụ lục 1: Kết sau giải trình tự 18 đoạn gen Rc 43