Khảo sát khả năng đối kháng với nấm gây bệnh hại cây trồng của một số chủng nấm trichoderma sp mới phân lập

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -*** KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM GÂY BỆNH HẠI CÂY TRỒNG CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM TRICHODERMA SP MỚI PHÂN LẬP Hà Nội - 2023 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -*** KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM GÂY BỆNH HẠI CÂY TRỒNG CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM TRICHODERMA SP MỚI PHÂN LẬP Sinh viên thực : PHẠM VŨ LỆ SƢƠNG Lớp : K64CNSHA MSV : 642206 Giảng viên hƣớng dẫn : ThS TRẦN THỊ ĐÀO : PGS.TS NGUYỄN VĂN GIANG Bộ mơn : CƠNG NGHỆ VI SINH Hà Nội -2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học tơi thực thời gian từ 08/2022 – 2/2023 hướng dẫn ThS Trần Thị Đào PGS.TS Nguyễn Văn Giang, Bộ môn Công nghệ Vi sinh, Khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tất số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu ngồi nước Các tài liệu trích dẫn nêu mục tài liệu tham khảo Hà Nội, ngày 10 tháng 02 năm 2023 Sinh viên Phạm Vũ Lệ Sương i LỜI CẢM ƠN Lời xin cảm ơn Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, đội ngũ giảng viên, cán giảng dạy công tác Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Tôi vô biết ơn thầy, cô khoa Công nghệ sinh học giảng dạy, hướng dẫn tạo điều kiện để tơi hồn thành chương trình học, thực tập nghề nghiệp khố luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Văn Giang, ThS Trần Thị Đào định hướng đề tài tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cán phịng thí nghiệm Bộ mơn Cơng nghệ Vi sinh, anh chị, bạn bè phịng thí nghiệm giúp đỡ tơi nhiệt tình, đóng góp ý kiến quý báu tận tình dạy, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực tập tốt nghiệp Cuối muốn gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Bố, Mẹ, anh, chị bạn bè luôn ủng hộ, khuyến khích động viên để tơi hồn thành tốt khố luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng 02 năm 2023 Sinh viên Phạm Vũ Lệ Sương ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Danh mục từ viết tắt xi Tóm tắt xii PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nội dung nghiên cứu 1.2.1 Mục đích nghiên cứu 1.2.2 Đối tượng nghiên cứu 1.2.3 Nội dung nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung nấm Trichoderma 2.1.1 Vị trí phân loại Trichoderma 2.1.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc Trichoderma 2.1.3 Các yếu tố môi trường ảnh hưởng tới phát triển nấm Trichoderma 2.1.4 Vai trò Trichoderma tác nhân kiểm soát sinh học ( Biological Control Agent - BCA) 2.1.5 Ứng dụng Trichoderma nông nghiệp 17 2.2 Một số nấm gây bệnh phổ biến trồng 19 iii 2.2.1 Nấm Fusaium spp 19 2.2.2 Nấm Collectotrichum spp 21 2.2.3 Nấm Sclerotium rolfsii 22 2.3 Tình hình nghiên cứu nấm Trichoderma đối kháng với nấm bệnh trồng nước giới 22 2.3.1 Tình hình nghiên cứu nấm Trichoderma đối kháng với nấm bệnh trồng nước 22 2.3.2 Tình hình nghiên cứu nấm Trichoderma đối kháng với nấm bệnh trồng giới 25 PHẦN III ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu 28 3.1.1 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 28 3.1.2 Đối tượng nghiên cứu 28 3.1.3 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu 28 3.1.4 Hóa chất 28 3.2 Phương pháp nghiên cứu 29 3.2.1 Phương pháp thu thập mẫu đất 29 3.2.2 Phương pháp phân lập Trichoderma 29 3.2.3 Phương pháp khảo sát hình thái sợi nấm 30 3.2.4 Phương pháp đánh giá khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với chủng nấm gây bệnh phương pháp đồng nuôi cấy 31 3.2.5 Phương pháp đánh giá khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập nấm bệnh hợp chất hữu dễ bay 31 3.2.6 Phương pháp xác định hoạt tính sinh ezyme ngoại bào (cellulase, chitinase) 32 iv 3.2.7 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến phát triển các chủng Trichoderma sp phân lập 32 3.2.8 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 33 3.2.9 Ảnh hưởng nồng độ pH đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 33 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 Kết phân lập nấm Trichoderma 34 4.2 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Fusarium sp 37 4.2.1 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Fusarium sp phương pháp đồng nuôi cấy 37 4.2.2 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Fusarium sp hợp chất hữu dễ bay 39 4.3 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Collectotrichum sp 41 4.3.1 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Collectotrichum sp phương pháp đồng nuôi cấy 41 4.3.2 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Collectotrichum sp hợp chất hữu dễ bay 43 4.4 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Sclerotium rolfsii 45 4.4.1 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Sclerotium rolfsii phương pháp đồng nuôi cấy 45 4.4.2 Khả đối kháng chủng Trichoderma sp phân lập với nấm bệnh Sclerotium rolfsii hợp chất hữu dễ bay 47 4.5 Khả sinh enzyme ngoại bào 48 4.5.1 Khả sinh enzyme cellulase 48 v 4.5.2 Khả sinh enzyme chitinase 50 4.6 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 50 4.7 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 53 4.8 Ảnh hưởng pH môi trường nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 56 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 5.1 Kết luận 60 5.2 Kiến nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 PHỤ LỤC 80 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Địa điểm thu mẫu Bảng 4.1 Nguồn gốc chủng nấm Trichoderma phân lập 34 Bảng 4.2 Mơ tả hình thái chủng nấm Trichoderma phân lập 35 Bảng 4.3 Hoạt tính đối kháng Fusarium sp chủng Trichoderma sp đánh giá phương pháp đồng nuôi cấy 37 Bảng 4.4 Hoạt tính đối kháng Fusarium sp chủng Trichoderma sp đánh giá hợp chất hữu dễ bay 40 Bảng 4.5 Hoạt tính đối kháng Collectotrichum sp chủng Trichoderma sp đánh giá phương pháp đồng ni cấy 41 Bảng 4.6 Hoạt tính đối kháng Collectotrichum sp chủnng Trichoderma sp đánh giá hợp chất hữu dễ bay 43 Bảng 4.7 Hoạt tính đối kháng Sclerotium rolfsii chủng Trichoderma sp đánh giá phương pháp đồng nuôi cấy 45 Bảng 4.8 Hoạt tính đối kháng Sclerotium rolfsii chủng Trichoderma sp đánh giá hợp chất hữu dễ bay 47 Bảng 4.9 Khả sinh cellulase chủng Trichoderma phân lập 49 Bảng 4.10 Khả sinh chitinase chủng Trichoderma phân lập 50 Bảng 4.11 Tốc độ tăng trưởng sợi nấm (mm) chủng Trichoderma phân lập nồng độ muối khác 51 Bảng 4.12 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 54 Bảng 4.13 Ảnh hưởng pH môi trường đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 57 vii Borrás-Hidalgo O & Bravo-Almonacid F F (2019) Expression of pathogenesisrelated proteins in transplastomic tobacco plants confers resistance to filamentous pathogens under field trials Scientific reports 9(1): 1-13 24 Brotman Y., Landau U., Cuadros-Inostroza A., Takayuki T., Fernie A R., Chet I., Viterbo A & Willmitzer L (2013) Trichoderma-plant root colonization: escaping early plant defense responses and activation of the antioxidant machinery for saline stress tolerance PLoS pathogens 9(3): e1003221 25 Brotman, Y., Kapuganti, J G., & Viterbo, A (2010) Trichoderma Current Biology, 20(9), R390-R391 26 Chaverri P & Samuels G J (2003) Hypocrea/Trichoderma (ascomycota, hypocreales, hypocreaceae): species with green ascospores Centraalbureau voor Schimmelcultures Netherlands trang trang 27 Coleman J J (2016) The Fusarium solani species complex: ubiquitous pathogens of agricultural importance Molecular plant pathology 17(2): 146-158 28 Compant S., Duffy B., Nowak J., Clément C & Ait Barka E (2005) Biocontrol of plant diseases using plant growth-promoting bacteria (PGPB): principles, mechanisms of action and future prospects Appl Environ Microbiol 71: 4951-4959 29 Damodaran T., Rajan S., Muthukumar M., Gopal R., Yadav K., Kumar S., Ahmad I., Kumari N., Mishra V K & Jha S K (2020) Biological management of banana Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f sp cubense tropical race using antagonistic fungal isolate CSR-T-3 (Trichoderma reesei) Frontiers in Microbiology 11: 595845 30 De Oliveira C M., Almeida N O., Côrtes M V d C B., Júnior M L., Da Rocha M R & Ulhoa C J (2021) Biological control of Pratylenchus brachyurus with isolates of Trichoderma spp on soybean Biological Control 152: 104425 66 31 De Silva D D., Groenewald J Z., Crous P W., Ades P K., Nasruddin A., Mongkolporn O & Taylor P W (2019) Identification, prevalence and pathogenicity of Colletotrichum species causing anthracnose of Capsicum annuum in Asia IMA fungus 10(1): 1-32 32 De Zotti M., Sella L., Bolzonello A., Gabbatore L., Peggion C., Bortolotto A., Elmaghraby I., Tundo S & Favaron F (2020) Targeted amino acid substitutions in a Trichoderma peptaibol confer activity against fungal plant pathogens and protect host tissues from Botrytis cinerea infection International journal of molecular sciences 21(20): 7521 33 Dean R., Van Kan J A., Pretorius Z A., Hammond‐ Kosack K E., Di Pietro A., Spanu P D., Rudd J J., Dickman M., Kahmann R & Ellis J (2012) The Top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology Molecular plant pathology 13(4): 414-430 34 Deng J.-J., Huang W.-Q., Li Z.-W., Lu D.-L., Zhang Y & Luo X.-c (2018) Biocontrol activity of recombinant aspartic protease from Trichoderma harzianum against pathogenic fungi Enzyme and microbial technology 112: 35-42 35 Dennis C & Webster J (1971) Antagonistic properties of species-groups of Trichoderma: I Production of non-volatile antibiotics Transactions of the British Mycological Society 57(1): 25-IN3 36 Doley K & Jite P K (2012) In-Vitro efficacy of Trichoderma viride against Sclerotium rolfsii and Macrophomina phaseolina Notulae Scientia Biologicae 4(4): 39-44 37 El-Saadony M T., Saad A M., Soliman S M., Salem H M., Ahmed A I., Mahmood M., El-Tahan A M., Ebrahim A A., El-Mageed A & Negm S H (2022) Plant growth-promoting microorganisms as biocontrol agents of plant diseases: Mechanisms, challenges and future perspectives Frontiers in Plant Science 13 67 38 El_Komy M H., Saleh A A., Eranthodi A & Molan Y Y (2015) Characterization of novel Trichoderma asperellum isolates to select effective biocontrol agents against tomato Fusarium wilt The Plant Pathology Journal 31(1): 50 39 Elsherbiny E A., Amin B H., Aleem B., Kingsley K L & Bennett J W (2020) Trichoderma volatile organic compounds as a biofumigation tool against late blight pathogen Phytophthora infestans in postharvest potato tubers Journal of agricultural and food chemistry 68(31): 8163-8171 40 Freeman S., Minz D., Kolesnik I., Barbul O., Zveibil A., Maymon M., Nitzani Y., Kirshner B., Rav-David D & Bilu A (2004) Trichoderma biocontrol of Colletotrichum acutatum and Botrytis cinerea and survival in strawberry European Journal of Plant Pathology 110(4): 361-370 41 Gajera H., Domadiya R., Patel S., Kapopara M & Golakiya B (2013) Molecular mechanism of Trichoderma as bio-control agents against phytopathogen system–a review Curr Res Microbiol Biotechnol 1(4): 133-142 42 Galante Y M., De Conti A & Monteverdi R (1998) Application of Trichoderma enzymes Trichoderma And Gliocladium, Volume 2: Enzymes, Biological Control and commercial applications 2: 327 43 Gams W & Bissett J (2002) Morphology and identification of Trichoderma and Gliocladium 3-31 44 Gao J., Weng H., Zhu D., Yuan M., Guan F & Xi Y (2008) Production and characterization of cellulolytic enzymes from the thermoacidophilic fungal Aspergillus terreus M11 under solid-state cultivation of corn stover Bioresource technology 99(16): 7623-7629 45 Ghasemi S., Safaie N., Shahbazi S., Shams-Bakhsh M & Askari H (2020) The role of cell wall degrading enzymes in antagonistic traits of Trichoderma virens against Rhizoctonia solani Iranian Journal of 68 Biotechnology 18(4): 18-28 46 Ghisalberti E., Narbey M., Dewan M & Sivasithamparam K (1990) Variability among strains of Trichoderma harzianum in their ability to reduce take-all and to produce pyrones Plant and Soil 121(2): 287-291 47 Ghorbanpour A., Salimi A., Ghanbary M A T., Pirdashti H & Dehestani A (2018) The effect of Trichoderma harzianum in mitigating low temperature stress in tomato (Solanum lycopersicum L.) plants Scientia Horticulturae 230: 134-141 48 Gooday G W (1999) Aggressive and defensive roles for chitinases Exs 87: 157-169 49 Gopika K., Jagadeeshwar R., Rao V K & Vijayalakshmi K (2016) Comprehensive Management 50 Hajek A E & Eilenberg J (2018) Natural enemies: an introduction to biological control Cambridge University Press trang trang 51 Halifu, S., Deng, X., Song, X., & Song, R (2019) Effects of two Trichoderma strains on plant growth, rhizosphere soil nutrients, and fungal community of Pinus sylvestris var mongolica annual seedlings Forests, 10(9), 758 52 Hanaka A., Ozimek E., Reszczyńska E., Jaroszuk-Ściseł J & Stolarz M (2021) Plant tolerance to drought stress in the presence of supporting bacteria and fungi: An efficient strategy in horticulture Horticulturae 7(10): 390 53 Haran S., Schickler H & Chet I (1996) Molecular mechanisms of lytic enzymes involved in the biocontrol activity of Trichoderma harzianum Microbiology 142(9): 2321-2331 54 Harman G E (2000) Myths and dogmas of biocontrol changes in perceptions derived from research on Trichoderma harzinum T-22 Plant disease 84(4): 377-393 55 Harman G E., Howell C R., Viterbo A., Chet I & Lorito M (2004) 69 Trichoderma species—opportunistic, avirulent plant symbionts Nature reviews microbiology 2(1): 43-56 56 Harman G E & Kubicek C P (2002) Trichoderma and Gliocladium Volume 1: Basic biology, taxonomy and genetics CRC Press trang trang 57 Hassan O., Jeon J Y., Chang T., Shin J S., Oh N K & Lee Y S (2018) Molecular and morphological characterization of Colletotrichum species in the Colletotrichum gloeosporioides complex associated with persimmon anthracnose in South Korea Plant disease 102(5): 1015-1024 58 Héraux F M., Hallett S G., Ragothama K & Weller S C (2005) Composted chicken manure as a medium for the production and delivery of Trichoderma virens for weed control HortScience 40(5): 1394-1397 59 Hermosa M., Grondona I., Iturriaga E t., Diaz-Minguez J., Castro C., Monte E & Garcia-Acha I (2000) Molecular characterization and identification of biocontrol isolates of Trichoderma spp Applied and Environmental Microbiology 66(5): 1890-1898 60 Hermosa R., Viterbo A., Chet I & Monte E (2012) Plant-beneficial effects of Trichoderma and of its genes Microbiology 158(1): 17-25 61 Hirpara D G., Gajera H P., Hirpara H Z & Golakiya B A (2017) Antipathy of Trichoderma against Sclerotium rolfsii Sacc.: evaluation of cell wall-degrading enzymatic activities and molecular diversity analysis of antagonists Microbial Physiology 27(1): 22-28 62 Howell C (2003) Mechanisms employed by Trichoderma species in the biological control of plant diseases: the history and evolution of current concepts Plant disease 87(1): 4-10 63 Intana W., Kheawleng S & Sunpapao A (2021) Trichoderma asperellum T76-14 released volatile organic compounds against postharvest fruit rot in muskmelons (Cucumis melo) caused by Fusarium incarnatum Journal of Fungi 7(1): 46 70 64 Jackson AM, Whipps JM, Lynch JM (1991) Effects of temperature, pH and water potential on growth of four fungi with disease biocontrol potential World J Microbiol Biotechnol 7: 494-501 65 Jaroszuk-Ściseł, J., Tyśkiewicz, R., Nowak, A., Ozimek, E., Majewska, M., Hanaka, A., & Janusz, G (2019) Phytohormones (auxin, gibberellin) and ACC deaminase in vitro synthesized by the mycoparasitic Trichoderma DEMTkZ3A0 strain and changes in the level of auxin and plant resistance markers in wheat seedlings inoculated with this strain conidia International Journal of Molecular Sciences, 20(19), 4923 66 Jahan N., Sultana S., Adhikary S., Rahman S & Yasmin S (2013) Evaluation of the growth performance of Trichoderma harzianum (Rifai.) on different culture media J Agri Vet Sci 3: 44-50 67 Jayawardena R., Hyde K., Damm U., Cai L., Liu M., Li X., Zhang W., Zhao W & Yan J (2016) Notes on currently accepted species of Colletotrichum Mycosphere 7(8): 1192-1260 68 John, R P., Tyagi, R D., Prévost, D., Brar, S K., Pouleur, S., & Surampalli, R Y (2010) Mycoparasitic Trichoderma viride as a biocontrol agent against Fusarium oxysporum f sp adzuki and Pythium arrhenomanes and as a growth promoter of soybean Crop protection, 29(12), 1452-1459 69 Kachroo A & Robin G P (2013) Systemic signaling during plant defense Current Opinion in Plant Biology 16(4): 527-533 70 Kaczmarek J & Jedryczka M (2011) Characterization of two coexisting pathogen populations of Leptosphaeria spp., the cause of stem canker of brassicas Acta Agrobotanica 64(2) 71 Kale G., Rewale K., Sahane S & Magar S (2018) Isolation of Trichoderma spp from the rhizospheric soils of tomato crop grown in Marathwada region Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry 7(3): 3360-3362 72 Kator L., Hosea Z Y & Oche O D (2015) Sclerotium rolfsii: Causative 71 organism of southern blight, stem rot, white mold and sclerotia rot disease Annals of Biological Research 6(11): 78-89 73 Keller, N P., Turner, G., & Bennett, J W (2005) Fungal secondary metabolism—from biochemistry to genomics Nature Reviews Microbiology, 3(12), 937-947 74 Khan A., Singh P & Srivastava A (2018) Synthesis, nature and utility of universal iron chelator–Siderophore: A review Microbiological research 212: 103-111 75 Kumar K., Amaresan N., Bhagat S., Madhuri K & Srivastava R (2012) Isolation and characterization of Trichoderma spp for antagonistic activity against root rot and foliar pathogens Indian Journal of Microbiology 52: 137-144 76 Lahlali R., Ezrari S., Radouane N., Kenfaoui J., Esmaeel Q., El Hamss H., Belabess Z & Barka E A (2022) Biological control of plant pathogens: A global perspective Microorganisms 10(3): 596 77 Lamprecht S., Tewoldemedhin Y., Botha W & Calitz F (2011) Fusarium graminearum species complex associated with maize crowns and roots in the KwaZulu-Natal province of South Africa Plant disease 95(9): 1153-1158 78 Lei, Z H A O., & Zhang, Y Q (2015) Effects of phosphate solubilization and phytohormone production of Trichoderma asperellum Q1 on promoting cucumber growth under salt stress Journal of Integrative Agriculture, 14(8), 1588-1597 79 Limón MC, Chacón MR, Mejías R, Delgado-Jarana J, Rincón AM, et al (2004) Increased antifungal and chitinase specific activities of Trichodermaharzianum CECT 2413 by addition of a cellulose binding domain Appl Microbiol Biotechnol 64: 675-685 80 Link, H F (1809) Observationes in ordines plantarum naturales Dissertatio I Mag Ges Naturf Freunde Berlin, 3, 3-42 72 81 Lombardi N., Caira S., Troise A D., Scaloni A., Vitaglione P., Vinale F., Marra R., Salzano A M., Lorito M & Woo S L (2020) Trichoderma applications on strawberry plants modulate the physiological processes positively affecting fruit production and quality Frontiers in Microbiology 11: 1364 82 López-López, M.E., Del-Toro-Sánchez, C L., Gutiérrez-Lomelí, M., OchoaAscencio, S., Aguilar-López, J A., Robles-García, M A., & GuerreroMedina, P J.(2022) Isolation and characterization of Trichoderma spp for antagonistic activity against avocado (Persea americana Mill) fruit pathogens Horticulturae, 8(8), 714 83 Mbarga, J B., Ten Hoopen, G M., KuatÚ, J., Adiobo, A., Ngonkeu, M E L., Ambang, Z., & Begoude, B A D (2012) Trichoderma asperellum: A potential biocontrol agent for Pythium myriotylum, causal agent of cocoyam (Xanthosoma sagittifolium) root rot disease in Cameroon Crop protection, 36, 18-22 84 Miethke M (2013) Molecular strategies of microbial iron assimilation: from high-affinity complexes to cofactor assembly systems Metallomics 5(1): 15-28 85 Miftahurrohmat, A., Nurmalasari, I R., & Prihatinnigrum, A E (2021, February) In vitro evaluation of the inhibitory power of Trichoderma harzianum against pathogens that cause anthracnose in chili In Journal of physics: conference series (Vol 1764, No 1, p 012026) IOP Publishing 86 Mokhtar H & Aid D (2013) Contribution in isolation and identification of some pathogenic fungi from wheat seeds, and evaluation of antagonistic capability of Trichoderma harzianum against those isolated fungi in vitro Agric Biol JN Am 4(2): 145-154 87 Montero-Barrientos M., Hermosa R., Cardoza R E., Gutierrez S., Nicolas C & Monte E (2010) Transgenic expression of the Trichoderma harzianum 73 hsp70 gene increases Arabidopsis resistance to heat and other abiotic stresses Journal of plant physiology 167(8): 659-665 88 Montes Vergara, D E., Barboza-García, A., & Pérez-Cordero, A (2022) Antifungal and growth activity of strains of Trichoderma spp against the Avocado ―tristeza‖ disease, Phytophthora cinnamomi Egyptian Journal of Biological Pest Control, 32(1), 1-6 89 Mukherjee P K., Buensanteai N., Moran-Diez M E., Druzhinina I S & Kenerley C M (2012) Functional analysis of non-ribosomal peptide synthetases (NRPSs) in Trichoderma virens reveals a polyketide synthase (PKS)/NRPS hybrid enzyme involved in the induced systemic resistance response in maize Microbiology 158(1): 155-165 90 Mullen J 2001 Southern blight, southern stem blight, white mold The Plant Health Instructor DOI: 10.1094 PHI-I-2001-0104-01 91 Nieto-Jacobo, M F., Steyaert, J M., Salazar-Badillo, F B., Nguyen, D V., Rostás, M., Braithwaite, M., & Mendoza-Mendoza, A (2017) Environmental growth conditions of Trichoderma spp affects indole acetic acid derivatives, volatile organic compounds, and plant growth promotion Frontiers in plant science, 102 92 Nusaibah S A & Musa H (2019) Review report on the mechanism of Trichoderma spp as biological control agent of the Basal Stem Rot (BSR) disease of Elaeis guineensis Trichoderma—The Most Widely Used Fungicide, 1st ed.; Mohammad, MS, Sharif, U., Buhari, TR, Eds 79-90 93 Oda S., Isshiki K & Ohashi S (2009) Production of 6-pentyl-α-pyrone with Trichoderma atroviride and its mutant in a novel extractive liquid-surface immobilization (Ext-LSI) system Process Biochemistry 44(6): 625-630 94 Odebode A C (2006) Control of postharvest pathogens of fruits by culture filtrate from antagonistic fungi Journal of Plant Protection Research 46(1): 1-5 74 95 Oszust K., Cybulska J & Frąc M (2020) How Trichoderma genus fungi win a nutritional competition battle against soft fruit pathogens? A report on niche overlap nutritional potentiates International Journal of Molecular Sciences 21(12): 4235 96 Pavlovskaya N., Gneusheva I., Solokhina I & Ageeva N (2020) The biological activity of subspecies Trichoderma harzianum against Fusarium oxysporum, the causative agent of Fusarium wilt cucumber in vitro BIO Web of Conferences EDP Sciences 00021 97 Phoka N., Suwannarach N., Lumyong S., Ito S.-i., Matsui K., Arikit S & Sunpapao A (2020) Role of volatiles from the endophytic fungus Trichoderma asperelloides PSU-P1 in biocontrol potential and in promoting the plant growth of Arabidopsis thaliana Journal of Fungi 6(4): 341 98 Poosapati S., Ravulapalli P D., Tippirishetty N., Vishwanathaswamy D K & Chunduri S (2014) Selection of high temperature and salinity tolerant Trichoderma isolates with antagonistic activity against Sclerotium rolfsii SpringerPlus 3(1): 1-11 99 Poveda J., Abril-Urias P & Escobar C (2020) Biological control of plantparasitic nematodes by filamentous fungi inducers of resistance: Trichoderma, mycorrhizal and endophytic fungi Frontiers in Microbiology 11: 992 100 Qi W & Zhao L (2013) Study of the siderophore‐ producing Trichoderma asperellum Q1 on cucumber growth promotion under salt stress Journal of basic microbiology 53(4): 355-364 101 Rahimi Tamandegani, P., Marik, T., Zafari, D., Balázs, D., Vágvölgyi, C., Szekeres, A., & Kredics, L (2020) Changes in peptaibol production of Trichoderma species during in vitro antagonistic interactions with fungal plant pathogens Biomolecules, 10(5), 730 102 Refai M & El-Yazid H A (2014) Monograph on dematiaceous fungi Cairo University, Cairo 75 103 Rawat, L., Singh, Y., Shukla, N., & Kumar, J (2013) Salinity tolerant Trichoderma harzianum reinforces NaCl tolerance and reduces population dynamics of Fusarium oxysporum f sp ciceri in chickpea (Cicer arietinum L.) under salt stress conditions Archives of phytopathology and plant protection, 46(12), 1442-1467 104 Ridge G & Shew B (2014) Sclerotium rolfsii (Southern blight of vegetables and melons) Ecology 1573409: 1534025 105 Ru Z & Di W (2012) Trichoderma spp from rhizosphere soil and their antagonism against Fusarium sambucinum African Journal of Biotechnology 11(18): 4180-4186 106 Ruangwong O.-U., Wonglom P., Suwannarach N., Kumla J., Thaochan N., Chomnunti P., Pitija K & Sunpapao A (2021) Volatile organic compound from Trichoderma asperelloides TSU1: Impact on plant pathogenic fungi Journal of Fungi 7(3): 187 107 Samuels G J., Dodd S L., Gams W., Castlebury L A & Petrini O (2002) Trichoderma species associated with the green mold epidemic of commercially grown Agaricus bisporus Mycologia 94(1): 146-170 108 Stewart, A., & Hill, R (2014) Applications of Trichoderma in plant growth promotion In Biotechnology and biology of Trichoderma (pp 415428) Elsevier 109 Sánchez-Montesinos B., Santos M., Moreno-Gavíra A., Marín-Rodulfo T., Gea F J & Diánez F (2021) Biological control of fungal diseases by Trichoderma aggressivum f europaeum and its compatibility with fungicides Journal of Fungi 7(8): 598 110 Savary S., Willocquet L., Pethybridge S J., Esker P., Mcroberts N & Nelson A (2019) The global burden of pathogens and pests on major food crops Nature ecology & evolution 3(3): 430-439 111 Schirmböck M., Lorito M., Wang Y.-L., Hayes C K., Arisan-Atac I., Scala 76 F., Harman G E & Kubicek C P (1994) Parallel formation and synergism of hydrolytic enzymes and peptaibol antibiotics, molecular mechanisms involved in the antagonistic action of Trichoderma harzianum against phytopathogenic fungi Applied and Environmental Microbiology 60(12): 4364-4370 112 Scudeletti D., Crusciol C A C., Bossolani J W., Moretti L G., Momesso L., Servaz Tubana B., De Castro S G Q., De Oliveira E F & Hungria M (2021) Trichoderma asperellum inoculation as a tool for attenuating drought stress in sugarcane Frontiers in Plant Science 12: 645542 113 Segarra G., Casanova E., Avilés M & Trillas I (2010) Trichoderma asperellum strain T34 controls Fusarium wilt disease in tomato plants in soilless culture through competition for iron Microbial ecology 59(1): 141-149 114 Shi W., Tan Y., Wang S., Gardiner D M., De Saeger S., Liao Y., Wang C., Fan Y., Wang Z & Wu A (2016) Mycotoxigenic potentials of Fusarium species in various culture matrices revealed by mycotoxin profiling Toxins 9(1): 115 Shoresh M., Harman G E & Mastouri F (2010) Induced systemic resistance and plant responses to fungal biocontrol agents Annual review of phytopathology 48(1): 21-43 116 Shovan L., Bhuiyan M., Begum J & Pervez Z (2008) In vitro control of Colletotrichum dematium causing anthracnose of soybean by fungicides, plant extracts and Trichoderma harzianum Int J Sustain Crop Prod 3(3): 10-17 117 Smolińska U., Kowalska B & Oskiera M (2007) The effectivity of strains in the protection of cucumber and lettuce against Journal of Fruit and Ornamental Plant Research 67(1): 81-93 118 Sood M., Kapoor D., Kumar V., Sheteiwy M S., Ramakrishnan M., Landi 77 M., Araniti F & Sharma A (2020) Trichoderma: The ―secrets‖ of a multitalented biocontrol agent Plants 9(6): 762 119 Srivastava M P., Gupta S & Sharm Y (2018) Detection of siderophore production from different cultural variables by CAS-agar plate assay Asian J Pharm Pharmacol 4: 66-69 120 Than P P., Prihastuti H., Phoulivong S., Taylor P W & Hyde K D (2008) Chilli anthracnose disease caused by Colletotrichum species Journal of Zhejiang University Science B 9: 764-778 121 Thangavelu R., Palaniswami A & Velazhahan R (2004) Mass production of Trichoderma harzianum for managing Fusarium wilt of banana Agriculture, ecosystems & environment 103(1): 259-263 122 Trushina N., Levin M., Mukherjee P K & Horwitz B A (2013) PacC and pH–dependent transcriptome of the mycotrophic fungus Trichoderma virens BMC genomics 14: 1-21 123 Tripathi, R., Keswani, C., & Tewari, R (2021) Trichoderma koningii enhances tolerance against thermal stress by regulating ROS metabolism in tomato (Solanum lycopersicum L.) plants Journal of Plant Interactions, 16(1), 116-125 124 Tyśkiewicz R., Nowak A., Ozimek E & Jaroszuk-Ściseł J (2022) Trichoderma: The current status of its application in agriculture for the biocontrol of fungal phytopathogens and stimulation of plant growth International Journal of Molecular Sciences 23(4): 2329 125 Verma H., Kumar D., Kumar V., Kumari M., Singh S K., Sharma V K., Droby S., Santoyo G., White J F & Kumar A (2021) The potential application of endophytes in management of stress from drought and salinity in crop plants Microorganisms 9(8): 1729 126 Waller J M., Lenné J M & Waller S J (2002) Plant pathologist's pocketbook CABI Pub trang trang 127 Wang W., De Silva D D., Moslemi A., Edwards J., Ades P K., Crous P 78 W & Taylor P W (2021) Colletotrichum species causing anthracnose of citrus in Australia Journal of Fungi 7(1): 47 128 Wonglom P., Daengsuwan W., Ito S.-i & Sunpapao A (2019) Biological control of Sclerotium fruit rot of snake fruit and stem rot of lettuce by Trichoderma sp T76-12/2 and the mechanisms involved Physiological and Molecular Plant Pathology 107: 1-7 129 Wonglom P., Ito S.-i & Sunpapao A (2020) Volatile organic compounds emitted from endophytic fungus Trichoderma asperellum T1 mediate antifungal activity, defense response and promote plant growth in lettuce (Lactuca sativa) Fungal Ecology 43: 100867 130 Zhao L., Wang Y & Kong S (2020) Effects of Trichoderma asperellum and its siderophores on endogenous auxin in Arabidopsis thaliana under iron-deficiency stress International Microbiology 23(4): 501-509 131 Zhou J., Wang Y.-H., Chu J., Zhuang Y.-P., Zhang S.-L & Yin P (2008) Identification and purification of the main components of cellulases from a mutant strain of Trichoderma viride T 100-14 Bioresource technology 99(15): 6826-6833 79 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập Đƣờng kính tản nấm (mm) 100 80 Ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 60 40 Ngày 20 Ngày PDA MPDA CA WA PDA MPDA CA WA PDA MPDA CA WA PDA MPDA CA WA PDA MPDA CA WA Ngày Tr.1 Tr.2 Tr.3 Tr.4 Chủng nấm/ môi trường nuôi cấy Tr.5 Phụ lục 2: Ảnh hƣởng pH môi trƣờng đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập Đƣờng kính tản nấm (mm) 90 Ảnh hƣởng pH môi trƣờng đến phát triển chủng Trichoderma sp phân lập 80 70 60 50 40 30 Ngày 20 Ngày 10 Ngày pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH pH 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 Tr.1 Tr.2 Tr.3 Tr.4 Chủng nấm / pH môi trƣờng 80 Tr.5