tổng hợp NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC MÁU DÂY RỐN CỘNG ĐỒNG TRONG ĐIỀU TRỊ MỘT SỐ BỆNH MÁU VÀ CƠ QUAN TẠO MÁU

BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ Y TẾ VIỆN HUYẾT HỌC – TRUYỀN MÁU TW CHƯƠNG TRÌNH “NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ TIÊN TIẾN PHỤC VỤ BẢO VỆ VÀ CHĂM SÓC SỨC KHỎE CỘNG ĐỒNG MÃ SỐ: KC.10/16-20 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC MÁU DÂY RỐN CỘNG ĐỒNG TRONG ĐIỀU TRỊ MỘT SỐ BỆNH MÁU VÀ CƠ QUAN TẠO MÁU Mã số: KC.10.05/16-20 Chủ nhiệm đề tài Cơ quan chủ trì đề tài TS Bạch Quốc Khánh ThS Lê Lâm Hà Nội – 2020 BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ Y TẾ VIỆN HUYẾT HỌC – TRUYỀN MÁU TW CHƯƠNG TRÌNH “NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG VÀ PHÁT TRIỂN CƠNG NGHỆ TIÊN TIẾN PHỤC VỤ BẢO VỆ VÀ CHĂM SÓC SỨC KHỎE CỘNG ĐỒNG MÃ SỐ: KC.10/16-20 BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC MÁU DÂY RỐN CỘNG ĐỒNG TRONG ĐIỀU TRỊ MỘT SỐ BỆNH MÁU VÀ CƠ QUAN TẠO MÁU Mã số: KC.10.05/16-20 Cơ quan chủ trì: Viện Huyết học – Truyền máu TW Chủ nhiệm đề tài: TS Bạch Quốc Khánh Hà Nội – 2020 MỤC LỤC MỤC LỤC .3 DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH .9 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ .9 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ MỞ ĐẦU .11 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU, TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG, NGỒI NƯỚC 13 1.1 SƠ LƯỢC VỀ NGUỒN TẾ BÀO GỐC MÁU DÂY RỐN 13 1.2 ĐẶC ĐIỂM CỦA DÂY RỐN, BÁNH RAU VÀ TẾ BÀO GỐC MÁU DÂY RỐN .14 1.2.1 Đặc điểm dây rốn bánh rau 14 1.2.2 Đặc điểm tế bào gốc máu dây rốn .16 1.3 TẠO NGUỒN TẾ BÀO GỐC TẠO MÁU TỪ MÁU DÂY RỐN .22 1.3.1 Thu thập máu dây rốn 22 1.3.2 Xử lý máu dây rốn 23 1.3.3 Bảo quản lưu trữ máu dây rốn 23 1.3.4 Tìm kiếm lựa chọn máu dây rốn 24 1.3.5 Các loại ngân hàng máu dây rốn 29 1.4 ỨNG DỤNG GHÉP TẾ BÀO GỐC TỪ MÁU DÂY RỐN TRONG ĐIỀU TRỊ BỆNH MÁU 30 1.4.1 Ứng dụng tế bào gốc từ máu dây rốn điều trị bệnh lơxêmi .30 1.4.2 Phác đồ điều kiện hóa 35 1.4.3 Biến chứng ghép tế bào gốc đồng loài máu dây rốn 37 1.4.4 So sánh ghép tế bào gốc từ máu dây rốn nguồn tế bào gốc khác 42 1.5 CÁC NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC VỀ TẠO NGUỒN VÀ ỨNG DỤNG TẾ BÀO GỐC TỪ MÁU DÂY RỐN .44 1.5.1 Tạo nguồn tế bào gốc tạo máu từ máu dây rốn 44 1.5.2 Ứng dụng ghép tế bào gốc tạo máu từ máu dây rốn .45 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 47 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .47 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 47 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 47 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 47 2.2.3 Địa điểm nghiên cứu 48 2.2.4 Nội dung nghiên cứu 48 2.2.5 Các thông số nghiên cứu 56 2.2.6 Vật liệu nghiên cứu 57 2.2.7 Các trang thiết bị áp dụng nghiên cứu 57 2.2.8 Các sinh phẩm hóa chất áp dụng nghiên cứu 59 2.2.9 Các tiêu chuẩn áp dụng nghiên cứu 59 2.2.10 Các kỹ thuật áp dụng nghiên cứu 68 2.2.11 Sơ đồ nghiên cứu .69 2.2.12 Phương pháp thống kê 69 2.3 ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU 70 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 71 3.1 KẾT QUẢ TẠO NGUỒN TẾ BÀO GỐC TỪ MÁU DÂY RỐN 71 3.1.1 Kết tuyển chọn sản phụ trẻ sơ sinh hiến máu dây rốn .71 3.1.2 Kết thu thập máu dây rốn cộng đồng .72 3.1.3 Kết xử lý máu dây rốn cộng đồng .73 3.1.4 Kết lưu trữ máu dây rốn cộng đồng 74 3.1.5 Kết đánh giá chất lượng máu dây rốn sau bảo quản đông lạnh .76 3.1.6 Đặc điểm HLA mẫu máu dây rốn cộng đồng 77 3.1.7 Kết tìm kiếm tế bào gốc từ máu dây rốn cộng đồng cho bệnh nhân lơxêmi có định ghép 80 3.2 KẾT QUẢ ỨNG DỤNG GHÉP TẾ BÀO GỐC ĐỒNG LOÀI TỪ MÁU DÂY RỐN CHO BỆNH NHÂN LƠXÊMI CẤP 82 3.2.1 Đặc điểm chung nhóm bệnh nhân ghép 82 3.2.2 Đặc điểm đơn vị máu dây rốn sử dụng ghép .83 3.2.3 Kết mọc mảnh ghép nhóm bệnh nhân nghiên cứu 84 3.2.4 Tỷ lệ sống nhóm bệnh nhân nghiên cứu yếu tố liên quan .87 3.2.5 Đặc điểm biến chứng sau ghép 90 3.2.6 Kết ghép lại thất bại ghép từ máu dây rốn 94 CHƯƠNG BÀN LUẬN 95 4.1 ỨNG DỤNG CÁC QUY TRÌNH TẠO NGUỒN TẾ BÀO GỐC TỪ MÁU DÂY RỐN 95 4.1.1 Tuyển chọn sản phụ trẻ sơ sinh hiến máu dây rốn 95 4.1.2 Thu thập máu dây rốn cộng đồng 96 4.1.3 Xử lý máu dây rốn cộng đồng 98 4.1.4 Lưu trữ máu dây rốn cộng đồng 101 4.1.5 Đặc điểm HLA máu dây rốn cộng đồng 103 4.1.6 Tìm kiếm máu dây rốn cộng đồng 105 4.2 ỨNG DỤNG GHÉP TẾ BÀO GỐC ĐỒNG LOÀI TỪ MÁU DÂY RỐN CHO BỆNH NHÂN LƠXÊMI CẤP 108 4.2.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 108 4.2.2 Kết mọc mảnh ghép nhóm bệnh nhân nghiên cứu yếu tố liên quan 113 4.2.3 Tỷ lệ sống nhóm bệnh nhân nghiên cứu yếu tố liên quan 118 4.2.4 Đặc điểm biến chứng sau ghép 120 4.2.5 Kết điều trị cứu vãn sau thất bại ghép từ máu dây rốn 125 CHƯƠNG V KẾT LUẬN 127 CHƯƠNG VI KIẾN NGHỊ 130 TÀI LIỆU THAM KHẢO 131 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT aGVHD Acute graft versus host disease Bệnh ghép chống chủ cấp ALL Acute lymphoblastic leukemia Lơxêmi cấp dòng lympho AML Acute myeloid leukemia Lơxêmi cấp dòng tủy ATG Antithymocyte globulin Globulin kháng tế bào tuyến ức CD Cluster of differentiation Cụm biệt hóa cGVHD Chronic graft versus host disease Bệnh ghép chống chủ mạn CHT Cùng huyết thống CMV Cytomegalovirus FISH Fluorescent in situ hybridization Lai gắn huỳnh quang chỗ G-CSF GVHD Granulocyte-colony stimulating factor Granulocyte-macrophage-colony stimulating factor Graft versus host disease Yếu tố kích thích tạo cụm bạch cầu hạt Yếu tố kích thích tạo cụm bạch cầu hạt-đại thực bào Bệnh ghép chống chủ HLA Human leukocyte antigen Kháng nguyên bạch cầu người HPC Hematopoietic progenitor cell Tế bào đầu dòng tạo máu HSC Hematopoietic stem cell Tế bào gốc tạo máu GM-CSF KHT Không huyết thống MDR Máu dây rốn NCCN NIH National Comprehensive Cancer Network National Institute of Health Mạng lưới toàn diện ung thư Quốc gia (Mỹ) Viện Sức khỏe Quốc gia (Mỹ) PCR Polymerase chain reaction Phản ứng khuếch đại chuỗi TBG TNC Tế bào gốc Total nucleated cells Tổng số tế bào có nhân DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Phân biệt ghép chống chủ cấp mạn (NIH 2005) 63 Bảng 2.2 Đánh giá mức độ ghép chống chủ cấp (Przepiorka-1994) 64 Bảng 2.3 Phân độ ghép chống chủ cấp (Przepiorka-1994) 64 Bảng 2.4 Đánh giá ghép chống chủ mạn quan 65 Bảng 2.5 Phân độ ghép chống chủ mạn (NIH-2014) 67 Bảng 2.6 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ bất đồng nhóm máu hệ ABO 67 Bảng 2.7 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ tổn thương niêm mạc miệng sau điều trị bệnh nhân ung thư .67 Bảng 3.1 Số lượng sản phụ tư vấn thu thập máu dây rốn 71 Bảng 3.2 Hình thức sinh sản phụ 71 Bảng 3.3 Nguyên nhân loại bỏ sau thu thập 72 Bảng 3.4 Một số thông số đơn vị TBG sau xử lý 73 Bảng 3.5 Hiệu suất loại bỏ thành phần trình xử lý 74 Bảng 3.6 Kết sàng lọc mẫu lưu trữ 74 Bảng 3.7 Thành phần tế bào máu túi TBG lưu trữ .75 Bảng 3.8 Tỷ lệ nhóm máu đơn vị tế bào gốc lưu trữ 75 Bảng 3.9 Đặc điểm tế bào máu đơn vị TBG máu dây rốn .76 Bảng 3.10 Kết cấy cụm sau bảo quản đông lạnh 76 Bảng 3.11 Tỷ lệ alen HLA-A mẫu nghiên cứu .77 Bảng 3.12 Tỷ lệ alen HLA-B mẫu nghiên cứu 78 Bảng 3.13 Tỷ lệ alen HLA-DR mẫu nghiên cứu .79 Bảng 3.14 Đặc điểm bệnh nhân lơxêmi cấp có định tìm kiếm máu dây rốn để ghép .80 Bảng 3.15 Số mẫu tìm kiếm tương ứng với mức hòa hợp 81 Bảng 3.16 Liều tế bào tìm kiếm tương ứng với mức hịa hợp 81 Bảng 3.17 Đặc điểm chung nhóm bệnh nhân nghiên cứu .82 Bảng 3.18 Đặc điểm chung máu dây rốn .83 Bảng 3.19 Đặc điểm phác đồ điều kiện hóa dự phịng bệnh ghép chống chủ 83 Bảng 3.20 Tỷ lệ mọc ghép thời gian hồi phục bạch cầu trung tính tiểu cầu 84 Bảng 3.21 Tỷ lệ mọc ghép hồi phục tế bào theo nhóm bệnh 85 Bảng 3.22 Mối liên quan liều tế bào gốc với .85 Bảng 3.23 Diễn biến chuyển đổi tế bào người cho/người nhận 85 Bảng 3.24 Mối liên quan việc sử dụng rATG 87 Bảng 3.25 Tỷ lệ sống lui bệnh hoàn toàn bệnh nhân theo nhóm bệnh kết thúc nghiên cứu 89 Bảng 3.26 Tỷ lệ bệnh tồn dư tối thiểu bệnh nhân theo nhóm bệnh kết thúc nghiên cứu .89 Bảng 3.27 Đặc điểm nguyên nhân tử vong sau ghép 89 Bảng 3.28 Đặc điểm biến chứng phác đồ điều kiện hóa 90 Bảng 3.29 Đặc điểm bệnh ghép chống chủ cấp bệnh nhân ghép 92 Bảng 3.30 Đặc điểm bệnh ghép chống chủ mạn bệnh nhân ghép 93 Bảng 3.31 Đặc điểm trường hợp điều trị ghép lần cứu vãn sau ghép thất bại 94 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Rau thai dây rốn chụp sau sinh 15 Hình 1.2 Tế bào gốc có máu dây rốn 15 Hình 1.3 Khả tự tái tạo biệt hóa đa dịng TBG MDR 16 Hình 1.4 Kháng nguyên bề mặt tế bào gốc tạo máu dây rốn 20 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 69 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 1.1 Kết ghép tế bào gốc tạo máu điều trị lơxêmi cấp New York sau năm theo dõi (Laughlin 2004) 32 Biểu đồ 1.2 Tỷ lệ tử vong tái phát sau ghép tế bào gốc tạo máu điều trị lơxêmi cấp Tokyo sau năm theo dõi (Satoshi 2004) .32 Biểu đồ 1.3 Tỷ lệ sống toàn bệnh nhân lơxêmi cấp dòng tủy sau ghép năm từ nguồn tế bào gốc khác (Warlick 2015) 33 Biểu đồ 1.4 Tỷ lệ tử vong tái phát sau ghép tế bào gốc tạo máu điều trị lơxêmi cấp dòng lympho sau năm theo dõi (Mark 2014) 34 Biểu đồ 1.5 Kết ghép tế bào gốc đồng loài điều trị lơxêmi cấp dùng phác đồ điều kiện hóa với busulfan+fludarabine+etoposide (Lee-2014) 36 Biểu đồ 1.6 So sánh tỷ lệ tái phát sau ghép điều trị lơxêmi cấp nguồn tế bào gốc (Ponce 2015) .39 Biểu đồ 3.1 Tỷ lệ phân bố thể tích máu dây rốn thu thập đạt tiêu chuẩn xử lý (khơng tính thể tích chống đơng) 72 Biểu đồ 3.2 Phân bố tỷ lệ tổng số tế bào có nhân sau thu thập 73 Biểu đồ 3.3 Đặc điểm khả tìm kiếm mẫu máu dây rốn 80 Biểu đồ 3.4 Đặc điểm chuyển đổi thành phần dịng tế bào nhóm bệnh nhân thất bại mọc ghép 86 Biểu đồ 3.5 Đặc điểm chuyển đổi thành phần dịng tế bào nhóm bệnh nhân có mọc ghép 87 Biểu đồ 3.6 Tỷ lệ sống tồn sống khơng biến cố theo dõi 100 ngày 88 Biểu đồ 3.7 Tỷ lệ sống toàn sống không biến cố theo dõi năm .88 Biểu đồ 3.8 Số lượng tác nhân gặp phải sau ghép 91 Biểu đồ 3.9 Các quan/bộ phận phân lập tác nhân vi khuẩn 91 Biểu đồ 3.10 Các tác nhân nhiễm trùng gặp phải sau ghép 92 Biểu đồ 4.1 Cỡ mẫu khả tìm kiếm theo tiêu chuẩn hòa hợp HLA độ phân giải cao với locus HLA-A, -B -DRB1 106 Biểu đồ 4.2 Cỡ mẫu khả tìm kiếm theo tiêu chuẩn hịa hợp HLA độ phân giải thấp với HLA-A, -B độ phân giải cao với HLA-DRB1 106 Biểu đồ 4.3 Cỡ mẫu khả tìm kiếm đơn vị máu dây rốn với locus HLA-A, -B -DR Nhật Bản 107