BỘ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ BỘ QUỐC PHÒNG BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG QUÂN ĐỘI 108 BÁO CÁO TỔNG HỢP ĐỀ TÀI KHOA HỌC CÔNG NGHỆ THUỘC CHƯƠNG TRÌNH KC 10/16 20 TÊN ĐỀ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC TỰ THÂN TRON[.]
BỘ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ BỘ QUỐC PHỊNG BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG QUÂN ĐỘI 108 BÁO CÁO TỔNG HỢP ĐỀ TÀI KHOA HỌC CƠNG NGHỆ THUỘC CHƯƠNG TRÌNH KC.10/16-20 TÊN ĐỀ ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC TỰ THÂN TRONG ĐIỀU TRỊ ĐỘT QUỴ NÃO Mã số: KC.10.24/16-20 Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS NGUYỄN HOÀNG NGỌC Cơ quan chủ trì đề tài: Bệnh viện Trung ương Quân đội 108 Hà Nội - 2021 BỘ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ BỘ QUỐC PHÒNG BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG QUÂN ĐỘI 108 BÁO CÁO TỔNG HỢP ĐỀ TÀI KHOA HỌC CÔNG NGHỆ THUỘC CHƯƠNG TRÌNH KC.10/16-20 TÊN ĐỀ ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC TỰ THÂN TRONG ĐIỀU TRỊ ĐỘT QUỴ NÃO Mã số: KC.10.24/16-20 Chủ nhiệm đề tài Cơ quan chủ trì đề tài PGS.TS NGUYỄN HỒNG NGỌC Hà Nội - 2021 LỜI CẢM ƠN Để thực thành công đề tài nghiên cứu xin trân trọng cảm ơn Bộ Khoa học Công nghệ, Văn phịng chương tình KHCN trọng điểm cấp Nhà nước, Vụ Khoa học Công nghệ ngành kinh tế - kỹ thuật quan trực thuộc Bộ KH &CN cho phép tạo điều kiện thuận lợi trình hình thành ý tưởng, tổ chức thực đề tài Chúng xin trân trọng cảm ơn Thường vụ Đảng ủy- Ban Giám đốc Bệnh viện TƯQĐ 108- Viện Nghiên cứu Khoa học Y Dược lâm sàng 108, Viện, Trung tâm, Phòng, Khoa Ban Bệnh viện TƯQĐ 108 ủng hộ tạo điều kiện để đề tài thực tiến độ đề Nhóm nghiên cứu trân trọng cảm ơn Thầy Cô Hội đồng nghiệm thu có đóng góp khoa học quý báu giúp cho đề tài hoàn thiện Chủ nhiệm đề tài xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thành viên nhóm nghiên cứu, nhà khoa học ngồi bệnh viện tích cực, chủ động, sáng tạo phối hợp thực đề tài Thay mặt nhóm nghiên cứu Chủ nhiệm đề tài PGS.TS Nguyễn Hồng Ngọc DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BMP Bone morphogenic protein- protein tạo hình xương BI Bathel Index – Thang điểm đánh giá chất lượng sống Bathel BN Bệnh nhân bFGF Basic fibroblast growth factor- Nguyên bào sợi CD Cluster of differentiation- Nhóm biệt hố CTSN Computer tomography sọ não – Chụp cắt lớp vi tính sọ não CTA Computer tomography angiogram – Chụp cắt lớp vi tính động mạch não ĐLC Độ lệch chuẩn ĐM Động mạch ĐMNV Động mạch ngoại vi ĐTĐ Đái tháo đường HC Hồng cầu HCT Hematocrit – Tỷ lệ thể tích hồng cầu thể tích máu tồn phần HBG Hemoglobin – Huyết sắc tố HSC Hematopoietic stem cells- Tế bào gốc tạo máu IGF-1 Insulin-like growth factor-1 – Yếu tố tăng trưởng giống insulin iPSC Induced pluripotent stem cell- tế bào gốc vạn cảm ứng LFA-1 leukocyte function-associated antigen-1 Kháng nguyên liên kết chức bạch cầu MCV Mean corpuscular volume - Thể tích trung bình hồng cầu MCH Mean Corpuscular Hemoglobin - Lượng huyết sắc tố trung bình có hồng cầu MCHC Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration – Nồng độ huyết sắc tố trung bình thể tích máu MSC Mesenchymal stem cells- Tế bào gốc trung mơ MPV Mean pletelet volume - Thể tích trung bình tiểu cầu mRS Modifiel Rankin Scale – Thang điểm Rankin sửa đổi MRI Magnetic resonance Imaging – Chụp cộng hưởng từ MRA Magnetic resonance Angiography – Cộng hươngr từ mạch não NIHSS National Institute of Health Stroke Scale – Thang điểm đánh giá đột quỵ NC Nhóm chứng NNC Nhóm nghiên cứu NMN Nhồi máu não EGF Epidermal growth factor- Yếu tố tăng trưởng nguồn gốc nội mạc PECAM- Phân tử tiểu cầu bám dính nội mạc-1 SP Side population- quần thể tế bào phụ SVZ Subventricular zone- vùng cạnh não thất β-NGF β-Nerve growth factor- Yếu tố phát triển thần kinh bê ta PLT Platelet count - Số lượng tiểu cầu VLTL Vật lý trị liệu RBC Red blood cell – Hồng cầu RDW Red cell distribution with – Độ phân bố hồng cầu RLCH Rối loạn chuyển hoá TB Tế bào TBG Tế bào gốc TBGTX Tế bào gốc tuỷ xương THA Tăng huyết áp TIA Transient ischemic attach – Cơn thiếu máu não cục thoáng qua TM Tĩnh mạch YNTK Ý nghĩa thống kê WBC White blood cell- Bạch cầu MỤC LỤC CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đại cương đột quỵ nhồi máu não 1.1.1 Dịch tễ 1.1.2 Cơ chế tổn thương phục hồi đột quỵ nhồi máu não 1.1.3 Chẩn đoán, tiên lượng nhồi máu não .5 1.1.4 Điều trị đột quỵ nhồi máu não .6 1.2 Tế bào gốc tuỷ xương ứng dụng điều trị 1.2.1 TBG tạo máu (HSC) 10 1.2.2 Tế bào gốc trung mô (Mesenchymal stem cells-MSC) 12 1.3 Tế bào gốc điều trị nhồi máu não 16 1.3.1 Cơ chế tác động tế bào gốc phục hồi đột quỵ nhồi máu não .16 1.3.2 Ứng dụng tế bào gốc điều trị đột quỵ não động vật 18 1.3.3 Ứng dụng tế bào gốc điều trị đột quỵ nhồi máu não người 19 1.4 Tình hình nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc tạo máu Việt Nam 31 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .34 2.1 Đối tượng nghiên cứu 34 2.1.1 Bệnh nhân sàng lọc .34 2.1.2 Bệnh nhân nghiên cứu 35 2.2 Phương pháp nghiên cứu 36 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 36 2.2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 36 2.2.3 Nội dung nghiên cứu 36 2.2.4 Các kỹ thuật phương pháp tiến hành .42 2.2.5 Xử lý số liệu .63 2.2.6 Đạo đức nghiên cứu 64 2.2.7.Sơ đồ thiết kế nghiên cứu .65 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 66 3.1 Xây dựng quy trình thu gom, chiết tách, xử lý, bảo quản đánh giá chất lượng khối TBGTX tự thân 62 bệnh nhân đột quỵ nhồi máu não 66 3.1.1 Đặc điểm máu ngoại vi tủy xương BN nghiên cứu 66 3.1.2 Hiệu thu gom dịch tủy xương phương pháp chọc hút qua da 69 3.1.3 Hiệu tạo khối tế bào gốc tủy xương .73 3.2 Xây dựng định, quy trình sử dụng tế bào gốc tủy xương tự thân điều trị bệnh nhân đột quỵ nhồi máu não 75 3.2.1 Khám sàng lọc bệnh nhân đột quỵ nhồi máu não vào nhóm nghiên cứu 75 3.2.2 Đặc điểm bệnh nhân nhóm nghiên cứu (nhóm TM, ĐM, nhóm chứng) … 79 3.2.2.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng nhóm tĩnh mạch (trước điều trị) so với nhóm chứng 79 3.2.2.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nhóm động mạch (trước điều trị) so với nhóm chứng 83 3.2.2.3 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nhóm tĩnh mạch so với nhóm động mạch (trước điều trị) 87 3.3 Đánh giá kết sử dụng khối TBGTX tự thân điều trị nhồi máu não 92 3.3.1 Đánh giá kết truyền khối TBGTX tự thân điều trị nhồi máu não qua đường tĩnh mạch ngoại vi .92 3.3.1.1 Đánh giá tính an tồn liệu pháp truyền dung dịch TBG nhóm tĩnh mạch… .92 3.3.1.2 Đánh giá cải thiện lâm sàng nhóm TM so với nhóm chứng 94 3.3.2 Kết điều trị khối tế bào gốc tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não qua đường động mạch .98 3.3.2.1 Đánh giá tính an tồn liệu pháp truyền dung dịch TBG nhóm động mạch 98 3.3.2.2 Đánh giá cải thiện lâm sàng nhóm ĐM so với nhóm chứng 99 3.3.3 So sánh kết lâm sàng, cận lâm sàng nhóm TM nhóm ĐM sử dụng khối TBG tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não .103 3.3.3.1 Đánh giá tính an tồn liệu pháp truyền dung dịch TBG nhóm ĐM so với nhóm tĩnh mạch .103 3.3.3.2 So sánh kết cải thiện lâm sàng nhóm ĐM nhóm TM 105 CHƯƠNG BÀN LUẬN 109 4.1 Xây dựng quy trình phân lập, bảo quản, đánh giá chất lượng tế bào gốc tủy xương tự thân điều sử dụng điều trị bệnh nhân đột quỵ nhồi máu não .109 4.1.1 Đặc điểm máu ngoại vi tủy xương BN nghiên cứu 109 4.1.2 Hiệu thu gom dịch tủy xương phương pháp chọc hút qua da 114 4.1.3 Kết tách TBG từ dịch tủy xương phương pháp ly tâm theo Gradient tỷ trọng 119 4.2 Xây dựng định, quy trình sử dụng tế bào gốc tủy xương tự thân điều trị bệnh nhân đột quỵ nhồi máu não .122 4.2.1 Khám sàng lọc lựa chọn BN vào nhóm nghiên cứu 122 4.2.1.1 Đặc điểm chung nhóm BN khám sàng lọc 122 4.2.1.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng nhóm BN sàng lọc .123 4.2.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng nhóm bệnh nhân nghiên cứu (trước điều trị) (nhóm TM, ĐM nhóm chứng) 124 4.2.2.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng nhóm TM so với nhóm chứng .124 4.2.2.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nhóm động mạch (trước điều trị) so với nhóm chứng .127 4.2.2.3 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nhóm TM so với nhóm ĐM (trước điều trị) .129 4.3 Đánh giá kết sử dụng khối TBG tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não 129 4.3.1 Kết điều trị khối tế bào gốc tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não qua đường tĩnh mạch 129 4.3.2 Kết điều trị khối tế bào gốc tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não qua đường động mạch 137 4.3.3 So sánh kết lâm sàng, cận lâm sàng nhóm TM nhóm ĐM sử dụng khối TBG tủy xương tự thân điều trị nhồi máu não 144 CHƯƠNG KẾT LUẬN 146 PHỤ LỤC 160 Phụ lục 1: Các thang điểm lâm sàng sử dụng nghiên cứu 160 Phụ lục 2: Bệnh án nghiên cứu 160