Bg thuc hanh hoa phan tich 2 6809

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN KHOA DƯỢC  BÀI GIẢNG MƠN HỌC THỰC HÀNH HĨA PHÂN TÍCH Giảng viên biên soạn: VÕ NGỌC HÂN HỨA HỮU BẰNG Đơn vị: Khoa Dược Hậu Giang – Năm 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN BÀI GIẢNG MƠN HỌC Tên mơn học: Thực hành Hóa phân tích (Tên tiếng Anh:…………………………….) Trình độ: Đại học Dược Số đơn vị học trình: 01 Giờ thực hành: 30 Thông tin Giảng viên:     Tên Giảng viên: VÕ NGỌC HÂN Đơn vị: Khoa Dược Điện thoại: E-mail: vnhan@vttu.edu.vn NỘI DUNG BÀI GIẢNG Điều kiện tiên Sinh viên học xong mơn học hóa đại cương vơ cơ, hóa hữu hóa phân tích Mục tiêu mơn học Cung cấp sở lý thuyết q trình phân tích định tính định lượng phương pháp dụng cụ, hướng dẫn tiến hành phương pháp phân tích định lượng để sinh viên vận dụng tốt làm việc lĩnh vực liên quan đến hóa phân tích - kiểm nghiệm Phương pháp giảng dạy Thực hành phịng thí nghiệm Đánh giá mơn học - Bài báo cáo, kiểm tra lớp - Thi thực hành Tài liệu tham khảo - Bộ Y tế (2012), Hóa phân tích, tập 2, NXB giáo dục - Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh (2012), Giáo trình Hóa phân tích - Đại học Y Dược Cần Thơ (2012), Giáo trình Hóa phân tích - Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh (2012), Giáo trình Thực tập Hóa phân tích - Đại học Y Dược Cần Thơ (2012), Giáo trình Thực tập Hóa phân tích Đề cương mơn học STT Tên học Số tiết Khảo sát phổ UV – Vis dung dịch kali permanganat môi trường acid Khảo sát ảnh hưởng dung môi pH đến hấp thụ benzen phenol quang phổ UV – Vis Định lượng đồng thời hai chất màu (Phương pháp quang phổ UV – Vis) 4 Định lượng nitrit (Phương pháp quang phổ UV-Vis) Tách định tính sulfonamid (Phương pháp sắc ký lớp mỏng) Định lượng Paracetamol phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Thi kết thúc học phần Tổng 30 Nội dung giảng chi tiết BÀI 1: KHẢO SÁT CÁC ĐẶC TÍNH PHỔ UV-VIS CỦA DUNG DỊCH KALIPERMANGANAT TRONG MÔI TRƯỜNG ACID Mục tiêu học tập - Ứng dụng định luật Lambert – Beer việc định lượng thành phần hoạt chất dựa vào hệ số hấp thu mol đường thẳng hồi quy - Nhận diện máy UV-VIS hai chùm tia Ứng dụng kỹ thuật quét phổ đo điểm máy UV-VIS hai chùm tia I NGUYÊN TẮC: - Dựa vào tính quét phổ để xác định λmax KMnO4/H2SO4 0,1N từ 400 – 650 nm - Đo độ hấp thu dung dịch chuẩn λmax - Từ tính toán hệ số hấp thu mol tất dung dịch λmax Áp dụng định luật Lambert – Beer để tính tốn nồng độ mẫu thử II HÓA CHẤT SỬ DỤNG - Dung dịch KMnO4 0,1N pha H2SO4 0,1N - Dung dịch H2SO4 0,1N III TIẾN HÀNH Xây dựng đường cong chuẩn: - - Pha dung dịch trung gian S1 0,01N: KMnO4 0,1N H2SO4 0,1N 10ml H2SO4 0,1N vđ 100ml Từ dung dịch trung gian S1 0,01N pha tiếp dung dịch chuẩn từ 1-5 sau: Cách pha Dung dịch Nồng độ KMnO4 Lấy dung dịch S1 (ml) Thêm H2SO4 0,1N vđ (ml) 0,5 x 10-3 N 2,5 50 1,0 x 10-3 N 50 1,5 x 10-3 N 7,5 50 2,0 x 10-3 N 10 50 2,5 x 10-3 N 12,5 50 Định lượng: - Chọn Method wavelength scan để quét phổ: quét phổ UV-VIS từ 400nm đến 650nm để tìm λmax - Chọn Method photometry: chỉnh chiều dài sóng λmax tìm bên - Đọc độ hấp thu (A) tương ứng với nồng độ (C) dung dịch chuẩn từ – thử nghiệm (cốc đo 1cm, dùng mẫu trắng H2SO4 0,1N) - Đọc độ hấp thu (Ax) tương ứng dung dịch thử nghiệm X mà môn pha Xây dựng đường cong chuẩn độ A theo C chương trình Excel IV.TÍNH TỐN KẾT QUẢ Xác định nồng độ X cách: - Tính hệ số hấp thu mol áp dụng cơng thức định luật Lambert – Beer - Vẽ đường thẳng hồi quy A=f(C) ngoại suy nồng độ chất cần khảo sát V CÂU HỎI Có thể định lượng KMnO4 mơi trường trung tính hay kiềm không? Tại sao? Nêu điều kiện cần đủ để chất có hấp thu UV-VIS Nếu tìm dung dịch X có nồng độ ngồi khoảng C1 – C5 không? Tại sao? Tại quét phổ từ 450nm – 650nm mà vùng khác? BÀI 2: KHẢO SÁT SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MÔI VÀ pH ĐẾN SỰ HẤP THU CỦA BENZEN VÀ PHENOL TRONG PHỔ UV-VIS Mục tiêu học tập: - Trình bày định nghĩa nhóm mang màu (chromophore), nhóm trợ màu (auxochrome), hiệu ứng dịch chuyển sang đỏ (bathochrome), hiệu ứng dịch chuyển sang xanh (hypsochrome), hiệu ứng giảm màu (hypochrome), hiệu ứng tăng màu (hyperchrome)… - Thực phép đo quang phổ tử ngoại số chất môi trường khác I NGUYÊN TẮC: Phổ điện tử đường cong trình bày biến đổi cường độ hấp thu (A) chất khảo sát theo độ dài song (λ) Dạng phổ phụ thuộc vào chất chất khảo sát, mơi trường… Ví dụ: - Phổ hấp thu UV-VIS Benzen thể dãy hấp thu định tính sau: dãy E λmax = 202 nm εM = 7000 M-1cm-1 Chuyển dịch π  π* dãy B λmax = 254 nm εM = 200 M-1cm-1 - Phổ hấp thu UV-VIS Phenol gây hiệu ứng dịch chuyển sang đỏ dịch chuyển sang xanh dãy II THUỐC THỬ: - Benzen (C6H6) - Phenol (C6H5OH) - NaOH 0,1N - Cyclohexan *Chú ý: cẩn thận pha chế Phenol (gây da) III TIẾN HÀNH: - Đánh số dung dịch cho bình định mức (BĐM) theo bảng sau tính tốn nồng độ dung dịch thu Dung dịch số 2A 3A 3B Thể tích BĐM (ml) 25 25 25 50 50 50 25 μl Benzen 25 μl Phenol 25 μl Phenol Điền đến vạch với Cyclo hexan Cyclo hexan Nước cất Cyclo hexan Nước cất NaOH 0,1N Nồng độ (mcg/ml) ? ? ? ? ? ? Thêm vào 0,5ml dd 0,5ml dd 0,5ml dd bình bình bình *Chú ý: Lấy thể tích μl: micropipet 10-100 μl 100-1000 μl - Đo phổ UV-VIS dung dịch 1, 2A, 3A, 3B khoảng bước sóng từ 200 – 400nm Sau nhận xét dịch chuyển hiệu ứng thể phổ đồ dung dịch chứa benzene phenol dung môi khác sau: + Benzen/cyclohexan (dung dịch 1) + Phenol/cyclohexan (dung dịch 2A) + Phenol/nước ( dung dịch 3A) + Phenol/dung dịch NaOH 0,1N (dung dịch 3B) IV TRÌNH BÀY KẾT QUẢ: - Ghi nhận phổ benzene/cyclohexan từ 200 – 400nm - Ghi nhận phổ phenol từ 200 – 400nm dung môi sau: + Trong nước + Trong cyclohexan + Trong dung dịch NaOH 0,1N - Xác định bước song hấp thu cực đại (λmax) dung dịch đo, nhận xét kết V CÂU HỎI Tên công thức chất khảo sát Phổ UV-VIS dung dịch dung dịch 2A thấy có chuyển dịch gì? Giải thích? Phổ UV-VIS dung dịch 2A dung dịch 3A, 3B thấy có chuyển dịch gì? Giải thích? Cho biết λmax dung dịch 1, 2A, 3A, 3B? Cốc đo sử dụng thực tập làm vật liệu gì? Giải thích? BÀI 3: ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI HAI CHẤT MÀU BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-VIS Mục tiêu học tập - Thực việc định lượng đồng thời hai hoạt chất có màu dung dịch áp dụng định luật cộng tính mật độ quang phương pháp quang phổ UV-VIS I NGUYÊN TẮC: Có thể định lượng đồng thời hoạt chất có màu dung dịch cách xác định độ hấp thu hỗn hợp bước sóng khác nhau, nhiên chất dung dịch phải đáp ứng yêu cầu sau: - Phổ hấp thu chất chồng lên phần - Bước sóng lựa chọn định lượng phải trùng với cực đại hấp thu - Không có tương tác hóa học chất - λmax chất phân tích phải cách 20nm II HÓA CHẤT - K2Cr2O7 2.10-2M hỗn hợp acid H2SO4 H3PO4 0,7M - KMnO4 4.10-3M hỗn hợp acid H2SO4 H3PO4 0,7M - Hỗn hợp acid H2SO4 H3PO4 0,7M III TIẾN HÀNH: Pha dung dịch: - Dung dịch (1): 50ml dung dịch K2Cr2O7 2.10-3M hỗn hợp acid H2SO4 H3PO4 0,7M từ dung dịch gốc K2Cr2O7 2.10-2M pha sẵn - Dung dịch (2): 50ml dung dịch KMnO4 4.10-4M hỗn hợp acid H2SO4 H3PO4 0,7M từ dung dịch KMnO4 4.10-3M pha sẵn - Dung dịch (3): hỗn hợp đồng thể tích (1) (2) Đo quang: - Chọn chế độ quét phổ: quét phổ UV-VIS từ 400 – 650 nm dung dịch (1) (2) để tìm λmax1 dung dịch λmax2 dung dịch - Chọn chế độ đo điểm: chỉnh bước sóng λmax1 λmax2 tìm Đo độ hấp thu dung dịch 1, 2, λmax1 λmax2 - Xác định hệ số hấp thu mol , , , λmax2 theo định luật Lambert-Beer A=C.ε.l dung dịch 1, λmax1 IV.TÍNH TỐN KẾT QUẢ:  Như vậy, nồng độ chất suy từ độ hấp thu đo dựa theo định luật cộng tính mật độ quang Thật vậy, người ta có phương trình: Trong đó: - , , , : hệ số hấp thu mol chất bước sóng λmax1 λmax2, tính theo độ hấp thu dung dịch có nồng độ biết , : mật độ quang hỗn hợp (dung dịch X) đọc độ dài sóng λmax1 λmax2 - C1, C2: nồng độ chất hỗn hợp (dung dịch X)  Xác thực định luật cộng tính bước sóng cách dùng giá trị độ hấp thu hỗn hợp dung dịch thể tích Bảng 3.1 Xác thực định luật cộng tính độ hấp thu λ1 λ2 Độ hấp thu λ1 λ2 ½ A dung dịch ½ A dung dịch A hỗn hợp V CÂU HỎI Có thể định lượng chất môi trường kiềm không? Tại sao? Có thể áp dụng định luật cộng tính để áp dụng hỗn hợp thành phần? Có thể áp dụng phương pháp khác để định lượng hỗn hợp thành phần? BÀI 4: ĐỊNH LƯỢNG DUNG DỊCH NITRIT BẰNG QUANG PHỔ KẾ TỬ NGOẠI Mục tiêu học tập - Trình bày nguyên tắc phép đo vùng tử ngoại - Viết chế phản ứng Diazo hóa - Thực phản ứng Diazo hóa tính kết I NGUN TẮC: Acid Nitro tạo với acid sulfanilic diazoic hấp thu quang phổ tử ngoại Phản ứng xảy sau: II THUỐC THỬ: - Dung dịch NaNO2: 0,2 g/l (trong nước cất lần) Bảo quản tủ lạnh tối đa ngày - Dung dịch Sulfanilic 6g/l Bảo quản tủ lạnh tối đa ngày - HCl 4N III TIẾN HÀNH: Pha dung dịch: - Điều chế dung dịch chuẩn NaNO2 0,02 g/l Sulfanilic 0,6 g/l Dung dịch chuẩn NaNO2 0,02 g/l NaNO2 0,2 g/l Dung dịch chuẩn acid sulfanilic 0,6 g/l A.sulfanilic g/l 20ml Nước cất vđ 200ml 5ml Nước cất vđ 50ml Khảo sát biến đổi theo thời gian: Phải tuân theo thứ tự thuốc thử thêm vào (nếu HCl thêm vào trước A.sulfanilic phần Nitrit bị oxy hóa thành Nitrat không định lượng được) - Điều chế mẫu chứng (xem phần III, mục c, bình số 8) - Điều chế mẫu chuẩn độ: bình định mức 100ml thêm vào 10 Nước cất lần 50ml Dung dịch chuẩn độ NaNO2 0,02 g/l 20ml Acid sulfanilic 0,6 g/l 2ml - Thêm nước cất lần vào bình định mức đến khoảng 90ml tổng thể tích - Điều chỉnh quang phổ λ = 270nm (λ gần với hấp thu nhóm chức N=N) - Chuẩn bị cốc đo dày 1cm chứa mẫu chứng điều chỉnh độ hấp thu Abs = Sau đó, thêm 2ml HCl 4N vào bình định mức 100ml (Phản ứng bắt đầu khởi động từ lúc thêm HCl 4N) Điền nước cất đến vạch 100ml Lắc đều, mở máy đo lập tức, đọc độ hấp thu cốc dày 1cm - Cứ phút đọc độ hấp thu lần phút đầu tiên, phút đọc lần phản ứng bền (= độ hấp thu không đổi) - Vẽ đường cong động học giấy kẻ ô ly Suy thời gian cần thiết để phản ứng bền hoàn toàn Phổ hấp thu: Mẫu thử: Sau thực biến đổi phản ứng theo thời gian (thời gian mà độ hấp thu đạt đến tối đa), dùng mẫu chứng bên để điều chỉnh Abs = Định lượng dung dịch có nồng độ (X) Bình dd NaNO2 để định lượng (ml) X Chứng dd chuẩn độ NaNO2 0,02g/l (ml) 10 15 20 25 dd acid sulfanilic 0,6g/l (ml) 2 2 2 2 dd HCl 4N (ml) 2 2 2 2 Nước cất lần vđ (ml) 100 100 100 100 100 100 100 100 Đọc độ hấp thu λmax sau đợi thời gian tối đa để phản ứng biến đổi IV TÍNH TỐN KẾT QUẢ Vẽ đường cong chuẩn độ biểu diễn phụ thuộc độ hấp vào nồng độ Nitrit A=f(C μg/ml), suy nồng độ dung dịch X (μg/ml) 11 V CÂU HỎI Thứ tự pha chế thuốc thử bảng không theo không? Sử dụng phương pháp Time scan với mục đích gì? Ở giai đoạn định lượng dung dịch có nồng độ X, sau bổ sung nước cất vừa đủ phải chờ thời gian t tmax vừa xác định tiến hành đo độ hấp thu? 12 BÀI 5: TÁCH VÀ ĐỊNH TÍNH CÁC SULFONAMID (PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỚP MỎNG) Mục tiêu học tập - Trình bày nguyên tắc sắc ký lớp mỏng - Thực thao tác triển khai sắc ký lớp mỏng I NGUYÊN TẮC - SKLM phương pháp phân tích cho phép tách định tính lượng nhỏ hợp chất hữu - Việc tách sản phẩm thực dựa vào khác biệt tốc độ rửa giải dung mơi thích hợp (chất rửa giải, hệ thống dung môi, pha động) giá mang chất hấp phụ rắn (pha tĩnh) thành phần hỗn hợp II HÓA CHẤT - Các sulfonamid đối chiếu: sulfoguanidin, sulfamethoxazol, sulfanilamide, sulfaxylum - Dung môi khai triển: chloroform-methnol (3-1), ngồi cịn sử dụng hệ khai triển khác - Thuốc thử phát hiện: PDAB (Para Dimethyl Amino Benzoic) III TIẾN HÀNH Chuẩn bị vật liệu - Bản mỏng Silicagel GF254 (Merck) 3cm x 10cm - Bình khai triển SKLM - Ống đong 50ml (dùng pha hệ dung mơi chung cho nhóm), đũa khuấy - Mao quản - Giấy bão hịa bình sắc ký - Chuẩn bị bình khai triển: rửa bình, làm khơ bão hịa dung mơi khai triển bình Chiết Sulfonamid Nghiền kỹ viên sulfamid cối, chiết ethanol Lọc, cho vào becher, làm bay cách thủy Cắn dùng để chấm lên mỏng Triển khai sắc ký: - Chấm vết Sulfonamid, hỗn hợp sản phẩm biết (vết chấm trùng), Sulfonamid cần xác định (mỗi loại lấy ống mao quản khác nhau) 13 Đặt mỏng vào bình khai triển, vết phải nằm mức dung mơi bình Đậy bình lại triển khai đến mức khoảng 10cm vết chấm, lấy vạch tức khắc đường dung môi Phát - Để khơ triển khai ngồi khơng khí, sau phun thuốc thử PDAB thấy vết có màu vàng - Tính Rf vết Định danh hỗn hợp xác định tên vết chấm - IV CÂU HỎI Viết chế tạo màu Sulfonamid PDAB Slicagel dùng sắc ký lớp mỏng phải loại Silicagel gì? Thành phần? 14 BÀI 6: ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL VÀ CAFEIN TRONG CHẾ PHẨM (PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO) Mục tiêu học tập - Hiểu ý nghĩa thong số phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao - Hiểu tính đầu dị dãy diod quang (Photodiode Arry Detector, PDA), UV-VIS - Thực hành định lượng paracetamol cafein phương pháp HPLC theo Dược điển Việt Nam IV I NGUYÊN TẮC: Hỗn hợp Paracetamol Cafein dược phẩm sau chiết tách định lượng phương pháp HPLC với phận phát UV-VIS (hoặc phận phát PDA) cấu trúc hoạt chất có nối đơi lien hợp, có nhóm mang màu II ĐỐI TƯỢNG, CHẤT ĐỐI CHIẾU, HĨA CHẤT, DUNG MƠI, TRANG THIẾT BỊ - Viên nén HAPACOL EXTRA chứa 500mg Paracetamol 65mg Cafein công ty cổ phần dược Hậu Giang sản xuất - Chất đối chiếu: Paracetamol Nơi cung cấp Cafein Viện Kiểm Nghiệm Thuốc TPHCM Số lô Nước (%) 0,32 0,16 Hàm lượng tính chế phẩm khan (%) 99,53 100,11 Bảo quản - - 5oC, tránh ánh sáng Hóa chất, dung mơi:  Acid acetic bang đạt tiêu chuẩn phân tích (Merck, Đức)  Methanol đạt tiêu chuẩn dùng cho HPLC (Merck, Đức)  Nước cất đạt tiêu chuẩn dùng cho HPLC (độ dẫn điện 18MΏ) Trang thiết bị: 15     Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao Hitachi Chromaster L-5000 (Nhật) Cột sắc ký: Cột pha đảo RP18 Màng lọc Sartorius RC – Vliesverstaerkt 0,45μm (Sartorius, Đức) Hệ thống lọc pha động áp suất giảm III TIẾN HÀNH Chuẩn bị pha động: Sử dụng ống đong pha 500ml pha động gồm nước-methanol-acid acetic bang (40-36-4), trộn đều, lọc áp suất giảm qua màng lọc 0,45μm Khử khí pha động siêu âm 10 phút Chuẩn bị mẫu đối chiếu mẫu thử: - Chuẩn bị dung dịch đối chiếu gốc: (Bình 1) (Bộ mơn pha) + Cân xác khoảng 100mg Paracetamol đối chiếu 13 mg Cafein đối chiếu vào bình định mức 50ml (bình 1) Thêm khoảng 35ml methanol, lắc ký, sau đem siêu âm Điền methanol đến vạch Dung dịch thu có nồng độ Paracetamol 2000 μg/ml nồng độ Cafein 260 μg/ml - Chuẩn bị dung dịch mẫu đối chiếu để bơm vào máy: (Bình 2) + Hút 2ml dung dịch cho vào bình định mức 20ml (bình 2) Điền pha động đến vạch, lắc kỹ Lọc qua màng lọc milipore 0,45μm Dung dịch mẫu đối chiếu bơm vào máy có nồng độ paracetamol 200 μg/ml nồng độ Cafein 26 μg/ml - Chuẩn bị dung dịch mẹ mẫu thử: + Cân 20 viên nén Tính khối lượng trung bình viên Nghiền trộn 20 viên cối chày thu hỗn hợp bột mịn đồng Cân xác khoảng lượng bột 1/5 khối lượng trung bình viên nén, cho vào bình định mức 50ml (bình 3), hịa tan với methanol cách lắc kỹ siêu âm 10 phút Điền methanol đến vạch Lắc + Mẫu thử bình có nồng độ Paracetamol xấp xỉ 2000 μg/ml methanol nồng độ Cafein xấp xỉ 260 μg/ml methanol - Chuẩn bị dung dịch mẫu thử để bơm vào máy: (bình 4) + Lọc bình qua giấy Bỏ khoảng 10-20ml dịch lọc đầu Lấy xác 2ml dịch lọc pha lỗng bình định mức 20ml (bình 4) với pha động Lọc qua màng lọc milipore 0,45μm Mẫu thử bình có nồng độ paracetamol 200 μg/ml nồng độ Cafein xấp xỉ 26 μg/ml - Hệ thống điều kiện sắc ký + Máy sắc ký lỏng hiệu cao Hitachi Chromaster L-5000 (Nhật) + Pha động: nước – methanol – acid acetic băng (40:36:4) + Phenomenex Lunar RP C18 250 x 4,6 mm, μm 16 - + Bước sóng phát hiện: 273 nm + Tốc độ dịng: 1ml/phút + Thể tích tiêm mẫu: 20μl Tiến hành sắc ký, đánh giá thông số sắc ký + Lần lượt bơm dung dịch mẫu đối chiếu mẫu thử Mỗi mẫu lần + Ghi lại thông số sắc ký thời gian lưu, diện tích đỉnh, chiều cao đỉnh, hệ số dung lượng, hệ số chọn lọc, số đĩa lý thuyết, độ phân giải, hệ số bất đối dung dịch mẫu đối chiếu mẫu thử + Xử lý thống kê giá trị thu được: Giá trị trung bình: Độ lệch chuẩn (Standard deviation, SD): Độ lệch chuẩn tương đối (Relative standard deviation, RSD) Yêu cầu: RSD thông số dung dịch mẫu đối chiếu mẫu thử phải nhỏ 2%  Với PDA detector: xác định yếu tố sau đây: + Sắc ký đồ chiều Paracetamol Cafein + Sắc ký đồ chiều Paracetamol Cafein + Phổ UV tương ứng peak Paracetamol peak Cafein + Sắc ký đồ ứng với λ max cực đại Paracetamol Cafein  Một số lưu ý: + Tất dung dịch trước đưa vào hệ thống sắc ký phải lọc qua màng lọc 0,45 μm + Pha động phải khử siêu âm trước tiến hành sắc ký + Trước tiến hành phân tích mẫu cần phải cân hệ thống 30 phút pha động Giữa lần tiêm mẫu nên rửa kim methanol + Sau phân tích xong phải rửa cột nước cất dùng cho HPLC 60’ sau methanol 30’, tốc độ dòng 1ml/phút + Cột sắc ký nên bảo quản hỗn hợp dung môi methanol:nước (60:40) Acetonitril:nước (9:1) IV.TÍNH KẾT QUẢ: Hàm lượng (mg) hoạt chất viên tính theo cơng thức sau: 17 Với ST : diện tích đỉnh hoạt chất dung dịch mẫu thử SC: diện tích đỉnh hoạt chất dung dịch mẫu chuẩn P : khối lượng trung bình viên (mg) M : khối lượng bột thuốc cân (mg) C : nồng độ hoạt chất dung dịch mẫu chuẩn (μg/ml) V CÂU HỎI Kiểu rửa giải pha động thực tập thuộc loại đẳng dịng (isocratic) hay gradient? Dung mơi sử dụng để triển khai HPLC thuộc loại gì? Có sử dụng dung môi để chiết xuất không? Nước cất sử dụng HPLC bảo quản vài tuần sử dụng không? Cần ý thông số thực HPLC? 18 Họ tên SV: 1/…………………………… 2/…………………………… 3/…………………………… Tiểu nhóm:………………… Nhóm:……………………… Lớp:……………………… BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH MƠN: HĨA PHÂN TÍCH TÊN BÀI: ……………………………….……… … ……………………………….……… … (Nộp cuối buổi thực hành) Chuẩn bị dụng cụ, thiết bị (liệt kê dụng cụ, thiết bị, ghi rõ thể tích dụng cụ có, ghi rõ tên model thiết bị có) Chuẩn bị hóa chất (liệt kê hóa chất, ghi rõ nồng độ có) Kết (ghi rõ cơng thức cách tính tốn) 19 Trả lời câu hỏi/ tập 20 Kế hoạch giảng dạy học tập cụ thể Số buổi Nội dung giảng dạy sinh viên Khảo sát phổ UV – Vis dung dịch kali permanganat môi trường acid Khảo sát ảnh hưởng dung môi pH đến hấp thụ benzen phenol quang phổ UV – Vis Định lượng đồng thời hai chất màu (Phương pháp quang phổ UV – Vis) Định lượng nitrit (Phương pháp quang phổ UV-Vis) Tách định tính sulfonamid (Phương pháp sắc ký lớp mỏng) Định lượng Paracetamol phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Nội dung học tập Thi kết thúc học phần Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Sinh viên đọc trước học, thực hành phịng thí nghiệm, viết báo cáo Số tiết 4 4 4 21