Bg thuc hanh hoa duoc 2 5967

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN KHOA DƯỢC - - BÀI GIẢNG THỰC HÀNH HÓA DƯỢC MÃ HP: TCDD075 Đơn vị biên soạn: KHOA DƯỢC Hậu Giang – Năm 2015 Lưu hành nội MỤC LỤC Bài 1: Kiểm nghiệm Metronidazol, quinin sulfat, mebendazol dược dụng Bài 2: Kiểm nghiệm Chloramphenicol, erythromycin kháng sinh β-lactam dược dụng Bài 3: Kiểm nghiệm Prednisolon acetat, glibenclamid dược dụng Bài 4: Nhận thức, định tính sulfamid dược dụng 10 Bài 5: Kiểm nghiệm thành phần viên nén Cotrimoxazol 12 Bài 6: Tổng hợp acetaminophen – giai đoạn 15 Bài 7: Tổng hợp acetaminophen – giai đoạn 17 BÀI KIỂM NGHIỆM METRONIDAZOL, QUININ SULFAT, MEBENDAZOL DƯỢC DỤNG Mục tiêu thực hành: Nhận thức cảm quan, thực hành phép thử định tính thuốc metronodazol, quinin sulfat mebendazol Định lượng metronidazol băng hai phương pháp Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Máy đo độ chảy; Phân cực kế; Quang phổ UV-VIS; pH met - Thuốc thử: HCl 1M 10%; H2SO4 10%; NaNO2 0,1 M M; BaCl 5%; NaOH 10%; nước Br2; amoniac đặc; 2-naphtol;; dinitrobenzen 1%/ ethanol 96%; CH3COOH khan; HClO4 0,1 M ethanol 96%; Dung dịch chì mẫu 10 ppm; dung dịch màu chuẩn pha màu mẫu VL6 (xem phụ lục) I- KIỂM NGHIỆM METRONIDAZOL Công thức: C6H9O3N3 ptl : 171,20 CH2CH2OH O2N N Me N Tính chất: Bột kết tinh màu trắng vàng, vị đắng; dễ biến màu ánh sáng Khó tan nước dung mơi hữu cơ; tan acid vơ lỗng Hố tính, định tính: Xác định nhiệt độ nóng chảy: F = 159 – 163o C Phản ứng xác định nhóm nitro thơm: Nguyên tắc: Khử hóa nhóm -NO2 H sinh thành nhóm –NH2; sản phẩm tạo thành cho phản ứng đặc trưng amin thơm I Tiến hành: - Ống nghiệm 1: Đun nồi cách thuỷ 5-10 phút hỗn hợp gồm: 10 mg metronidazol; ml nước; 0,5 ml HCl 10% viên kẽm hạt; để nguội, lọc thu dịch lọc Thêm 1-2 giọt NaNO2 0,1 M vào dịch lọc, trộn - Ống nghiệm 2: Hoà tan khoảng 0,1 g 2-naphtol vào ml NaOH 10% Nhỏ giọt dịch ống vào ống 1: Xuất màu đỏ Phản ứng màu: Hoà 10 mg chất thử vào ml NaOH 10%, đun nhẹ: Xuất màu tím đỏ, chuyển sang màu vàng thêm HCl 10% tới pH acid Thử tinh khiết: Theo DĐVN IV Độ màu sắc dung dịch: Hòa tan 1,0 g metronidazol vào vừa đủ 20 ml HCl M - Độ đục dung dịch không đục mẫu đối chiếu số II (Xem phụ lục) - Màu dung dịch không đậm màu mẫu VL6 (Xem phụ lục) Kim loại nặng: Không 20 ppm (phụ lục 9.4.8) Lấy 1,0 g metronidazol thử theo phương pháp (xem phụ lục) Dùng ml dung dịch chì mẫu 10 ppm để chuẩn bị mẫu đối chiếu Định lượng: Phương pháp quang phổ UV: Tiến hành: - D.d 1: Hòa tan 40 mg metronidazol HCl 0,1 M thành 100 ml - D.d 2: Pha loãng ml d.d HCl 0,1 M thành 100 ml Đo nhanh độ hấp thụ d.d bước sóng 277 nm Tính hàm lượng metronidazol C6H9O3N3 chế phẩm thử, lấy trị số hấp thụ riêng E (1%, cm) 277 nm 372 Chất chế phẩm thử phải đạt 99,0 - 101,0% (chất khô) Chú ý: Đo quang phổ UV với metronidazol ánh sáng đỏ; lấy kết qủa đo lần đo đầu Phương pháp mơi trường khan: Tiến hành: Hịa tan khoảng 0,15 g metronidazol vào 50 ml acid acetic khan Chuẩn độ dung dịch HClO4 0,1 M; thị đo điện ml dung dịch HClO4 0,1 M tương đương 17,12 mg chất C6H9O3N3 II- NHẬN THỨC, ĐỊNH TÍNH QUININ SULFAT, MEBENDAZOL QUININ SULFAT Công thức: (C20H24N2O2)2 H2SO4 , 2H2O ptl : 783,0 Tính chất: Bột kết tinh màu trắng đục, vị đắng; biến màu chậm để ngồi ánh sáng Tan nước nguội; tan ethanol []D20 = từ - 237o đến - 245o (2% / HCl 0,1 M) Định tính: Các phản ứng chung alcaloid Cinchona: a Phản ứng Thaleoquinin: Tiến hành: Hoà mg chất thử vào ml nước Tẩm vài giọt dịch thu lên tờ giấy lọc Đặt vết tẩm ướt lên miệng lọ nước Br2 đến màu vàng nhạt; đặt vết lên miệng lọ amoniac đặc: Màu đỏ chuyển dần sang xanh lục b Phát huỳnh quang: Pha dung dịch quinin sulfat 2% Thêm 1ml H2SO4 10% vào dung dịch quinin sulfat 2%, trộn đều; đặt ống nghiệm đèn UV 365: Huỳnh quang xanh lơ Xác định góc quay cực riêng: Hịa tan khoảng 0,500 g quinin sulfat vào HCl 0,1 M thành 250 ml Đo góc quay cực dung dịch phân cực kế Xác định góc quay cực riêng []D20 quy nồng độ dung dịch theo chế phẩm khan, theo công thức: []D20 =  / C l  = góc quay cực đo C = nồng độ (%) dung dịch quinin sulfat vừa pha đo l = Độ dài ống đo (dm) Trị số []D20 nằm khoảng từ - 237o đến - 245o Phản ứng ion sulfat SO42-: Trong ống nghiệm hòa tan khoảng 45 mg quinin sulfat vào ml HCl 10% Thêm 2-3 giọt BaCl2 5%: Xuất tủa BaSO4 màu trắng MEBENDAZOL Công thức: NH C16H13N3O3 ptl : 295,3 NH COO Me N Tính chất: O Bột kết tinh màu trắng vàng nâu, nhẹ xốp, khơng mùi Khó tan nước, ethanol, ether; tan nhẹ acid acetic đặc; tan aceton, cloroform; tan acid formic hỗn hợp acid formic isopropanol Định tính: Phản ứng màu: Trộn 10 mg mebendazol với ml ethanol 96%, thêm ml dung dịch dinitrobenzen 1% ethanol 96% ml dung dịch NaOH M, trộn đều: Xuất màu vàng đậm BÀI KIỂM NGHIỆM CHLORAMPHENICOL, ERYTHROMYCIN VÀ KHÁNG SINH -LACTAM DƯỢC DỤNG Mục tiêu thực hành: Cloramphenicol: Nhận vị đắng; thực cácphản ứng định tính Pha dung dịch nước định lượng quang phổ UV Nhận biết cảm quan thử định tính:Erythromycin; phản ứng màu phân biệt kháng sinh -lactam Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Đèn UV 254 365 nm; Quang phổ UV-VIS; Bình định mức 500 ml; Khay sứ nhiều lỗ; Nồi cách thủy - Thuốc thử: H2SO4 98% 15%; HCl đặc 18% (1/2); HNO3 10%; Acid acetic 1%; NaOH 10% M; NaNO2 0,1 M; AgNO3 5%; CuSO4 5%; Kẽm hạt; 2-naphtol; Bản silica gel GF254; cloroform; methanol; aceton; formol I- KIỂM NGHIỆM CLORAMPHENICOL Công thức: H NH CO CHCl2 C11H12O5N2Cl2 O2N C C CH2OH ptl : 323,13 OH H Tính chất: Bột kết tinh màu trắng trắng ánh vàng, vị đắng Độ tan: Tan nước; tan aceton, ethanol, ethylacetat Nhiệt độ chảy 149-153oC []D20 + 18,5o đến + 20,5o (ethanol) Hố tính: A Các phản ứng nitrophenyl clo hữu Nguyên tắc: Trong dung dịch, tác dụng H sinh (dùng Zn /H+), nhóm nitro chuyển thành nhóm amin thơm I; nguyên tử clo hữu chuyển sang dạng ion Cl- (vô cơ) H NH CO CHCl2 O2N C C OH H CH2OH +H H 2N R + 2Cl- Tiến hành: Trong ống nghiệm, phân tán 0,10 g cloramphenicol vào ml acid sulfuric 15% Thả viên kẽm hạt để sơi bọt khí, lắc, đến tan hết kẽm Lọc lấy dịch lọc để tiến hành phản ứng sau: Phản ứng amin thơm I: Lấy ml dịch lọc vào ống nghiệm, thêm 1- giọt NaNO2 0,1 M Thêm 0,5 ml dung dịch 2- naphtol 0,5% NaOH 10%: Xuất màu đỏ tủa đỏ Ion Cl -: Lấy 1ml dịch lọc, thêm giọt AgNO3 5%: xuất tủa màu trắng xám, tan amoniac B Phản ứng màu: (Phép thử nhanh) Tiến hành: Trộn 0,10 g chất thử vào ml NaOH 10%; đun hỗn hợp: từ từ xuất màu vàng, đậm dần thành đỏ cam, đỏ C Sắc ký lớp mỏng: - Pha tĩnh: Silica gel GF254 - Pha động: Cloroform - Methanol- Nước (90 : 10 : 1) - Dung dịch thử: 50 mg cloramphenicol thử 10 ml aceton - Dung dịch đối chiếu: 50 mg cloramphenicol chuẩn 10 ml aceton Chấm riêng biệt dung dịch thử đối chiếu lên sắc ký + Vết 1: l dung dịch thử + Vết 2: l dung dịch đối chiếu Triển khai sắc ký pha động đến chiều cao 15 cm; lấy mỏng ra, để khơ ngồi khơng khí kiểm tra đèn UV 254 nm - Nhận định kết quả: Vết sắc đồ vết trùng hợp với vết sắc đồ vết vị trí (Rf) màu sắc Thử tinh khiết: Giới hạn clorid: DĐVN IV Lấy 1,0 g chất thử trộn vào 20 ml nước 10 ml HNO3 10%; lắc phút; lọc qua giấy lọc (đã rửa nước tới hết tủa trắng với AgNO3 5%) Lấy 15 ml dịch lọc làm dung dịch thử (Xem cách thử phụ lục) Định lượng: Phương pháp quang phổ UV Nguyên tắc: Cloramphenicol có cực đại hấp thụ 278 nm với cường độ hấp thụ cao, cho phép định lượng quang phổ UV Tiến hành: - D.d.1: Trong cốc dung tích 250 ml hồ 90-100 mg chất thử vào 100 ml nước, khuấy kỹ (có thể nâng nhiệt độ lên 50oC) đến tan hết Chuyển dịch vào bình định mức dung tích 250 ml Tráng cốc pha dịch nước nhiều lần, tập trung nước tráng vào bình định mức Thêm nước tới vạch, trộn - D.d.2: Pha loãng nước ml d.d.1 thành 100 ml bình định mức - Đo độ hấp thụ d.d máy quang phổ UV 278 nm, cốc đo cm Tính hàm lượng C11H12N2O5Cl2 , lấy E(1%, 1cm) 278 nm 297 Hàm lượng chất phải đạt 98,0- 102,0% chế phẩm thử II- NHẬN THỨC, ĐỊNH TÍNH: ERYTHROMYCIN MỘT SỐ KHÁNG SINH -LACTAM ERYTHROMYCIN STEARAT Hỗn hợp erythromycin A, B C (chủ yếu erythromycin A) stearat Tổng hàm lượng erythromycin A, B, C thấp 65,0% (khan) Tính chất: Bột kết tinh màu trắng, khơng mùi, vị đắng Độ tan: Khó tan nước; tan aceton, mêthnol Các phản ứng màu: Hoà tan 10 mg chất thử vào ml HCl đặc; để yên: Xuất màu vàng Hoà tan 20 mg chất thử vào ml aceton, thêm ml HCl đặc: Phát triển màu đỏ cam  đỏ  đỏ đậm Lắc kỹ hỗn hợp với ml cloroform, để yên phân lớp: Lớp cloroform (dưới) nhuộm màu tím BENZYL PENICILLIN NATRI (KALI) Tên khác: Penicillin G natri (kali) S Ph CH CO NH Công thức: Me C16H17N2NaO4S Me N O ptl:356,40 COO Na (K) Tính chất: Bột kết tinh màu trắng gần trắng, mùi đặc trưng Độ tan: Dễ tan nước; khó tan ethanol Hố tính, định tính: Phản ứng màu phân biệt bêta-lactam: Tiến hành: Cho mg chất thử vào ống nghiệm (1,5 cm x 15 cm), làm ẩm bột thử giọt nước Thêm ml thuốc thử formaldehyd-acid sulfuric 98%, trộn Quan sát thay đổi màu thêm thuốc thử sau để vào nồi cách thuỷ sôi trong1 phút Sự thay đổi màu sắc penicillin cephalosporin bảng 10.1 Bảng 10.1 Phản ứng màu phân biệt kháng sinh -lactam Tên mẫu thử Amoxycillin trihydrat Ampicillin trihydrat Benzathin penicillin G Benzylpenicillin natrri Với TT For- sul lúc trộn Không màu Không màu Không màu Không màu Với TT For- sul Sau phút/100o C Vàng sẫm Vàng sẫm Nâu đỏ Nâu đỏ Penicillin V Cephalexin Cephaloridin Cephalothin natri Nâu đỏ Vàng nhạt Đỏ Đỏ Nâu đỏ sẫm Vàng sẫm Đỏ nâu Đỏ nâu Ghi chú: Viết tắt TT for- sul = Thuốc thử formaldehyd-acid sulfuric 96% Cách pha: Hoà 0,1 ml formaldehyd vào ml acid sulfuric 96% (đậm đặc) Kết tủa penicillin G dạng acid: Tiến hành: Hoà tan 50 mg penicillin G natri vào ml nước Thêm giọt HCl 18% (1/2) tới xuất tủa màu trắng Tiếp tục thêm acid HCl: tủa tan dần CEPHALEXIN MONOHYDRAT Công thức: S Ph CH CO NH C16H17N3O4S H2O NH H2O ptl : 365,40 N O Me COOH Tính chất: Bột kết tinh màu trắng đục, mùi đặc trưng Độ tan: Tan nhẹ nước (1 g/khoảng 100 ml nước); khó tan số dung mơi hữu cơ: ethanol, ether v.v Hóa tính, định tính: Phản ứng phân biệt kháng sinh bêta-lactam: Tiến hành với penicillin G natri; kết qủa theo bảng 10.1 Phản ứng màu: Trộn 20 mg chất thử với 2-3 giọt acid acetic 1%, thêm giọt CuSO4 1% 0,2 ml NaOH M: Xuất màu xanh (ô-lưu) BÀI KIỂM NGHIỆM PREDNISOLON ACETAT, GLIBENCLAMID DƯỢC DỤNG Mục tiêu thực hành: Định tính định lượng prednisolon acetat Nhận biết, định tính định lượng glibenclamid Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Đèn UV 254 365 nm; Khay sứ nhiều lỗ; Quang phổ UV-VIS - Thuốc thử: H2SO4 98%; NaOH 0,1 M; NaNO2 10%; iod 0,1 M; amoniac 2M; ethanol 96%; thị phenolphtalêin; cloral hydrat bột I KIỂM NGHIỆM PREDNISOLON ACETAT Công thức: O Me C23H30O6 HO 17 11 ptl : 402,48 Me OCOMe OH 21 H H H O Tính chất: Bột kết tinh màu trắng gần trắng Không tan nước; tan vừa ethanol methylen clorid []D20 = - 112 đến - 119o (1% dioxan) Định tính: Phản ứng màu huỳnh quang: Tiến hành: Trong ống nghiệm, hòa tan mg chất thử vào ml H2SO4 đậm đặc: sau phút xuất màu đỏ đậm Đặt đèn UV 365 nm: Phát huỳnh quang màu nâu-đỏ nhạt Thêm 10 ml nước vào hỗn hợp, trộn: Màu nhạt đi; huỳnh quang có màu vàng-xanh lục đèn UV 365 nm Phản ứng gốc acetat: (DĐVN IV) Tiến hành: Cho 10 mg chất thử vào ống nghiệm (180 mm  18 mm); thêm 0,15 ml acid orthophosphoric Đậy ống thử ống nghiệm nhỏ hơn, đựng nước (làm lạnh), có treo giọt dung dịch lanthanium nitrat 5% bên (ống nghiệm nhỏ) Đun cách thủy ống thử phút; bỏ ống nghiệm làm lạnh Trộn vài giọt hỗn hợp thử với 0,05 ml dung dịch iod 0,01 M lỗ khay sứ màu trắng Thêm, không trộn, 0,05 ml ammoniac M xuống đáy lỗ sứ: sau vài phút: Màu xanh lơ lớp chất lỏng đậm lên phai nhanh B- ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG CÁC HOẠT CHẤT Cân 20 viên Co-trimoxazol, tính khối lượng trung bình/viên (P g) Nghiền 10 viên cân thành bột mịn dùng làm mẫu kiểm nghiệm Định tính: Sắc ký lớp mỏng: - Pha tĩnh: Bản mỏng Silica gel G - Pha động: Cloroform - Methanol - Dimethylformamid (100 : 10 : 5) - Các mẫu sắc ký: + Dung dịch (1): Lắc lượng bột viên tương ứng 400 mg sulfamethoxazol với 20 ml methanol, lọc thu dịch lọc + Dung dịch (2): Pha dung dịch 2% từ sulfamethoxazol chuẩn / methanol + Dung dịch (3): Pha dung dịch 0,4% pha từ trimethoprim chuẩn methanol - Triển khai sắc ký: Chấm riêng biệt vết dung dịch (1), (2) (3) lên mỏng, vết l Để mỏng khơ ngồi khơng khí đặt vào bình sắc ký với hệ dung môi triển khai Khi đạt tới 4/5 chiều dài mỏng, lấy mỏng ra, để khơ ngồi khơng khí; phun thuốc thử Dragendorff (*)lỗng; soi đèn UV - Đọc kết quả: Trên sắc đồ dung dịch (1) cho vết tương ứng vị trí với vết sắc đồ dung dịch (2) (3) Định lượng: Sulfamethoxazol: Bằng phép đo nitrit (BP) - Nguyên tắc điều kiện: Như trình bày định lượng procain hydroclorid - Tiến hành: Cân xác lượng bột viên tương ứng 300 mg sulfamethoxazol (khoảng 0,4 g bột) cho vào cốc định lượng dung tích 100 ml; thêm 25 ml HCl 12%, ngâm 15 phút, khuấy; thêm g KBr 10 ml HCl 12%, khuấy tan KBr Làm lạnh nước đá đến 10-15oC Chuẩn độ dung dịch natri nitrit 0,1 M, xác định điểm kết thúc đo điện với cặp điện cực Pt- Ag/AgCl Ghi V (ml) ml NaNO2 0,1 M tương đương 25,33 mg C10H11N3O3S Lượng sulfmethoxazol (X mg) viên trung bình tính theo cơng thức: 25,33  V  P X (mg) = p Ghi chú: P = khối lượng trung bình sulfamethoxazol /viên p = khối lượng bột viên cân định lượng Trimethoprim: Bằng quang phổ UV (BP) Nguyên tắc xử lý mẫu: - Chiết trimethoprim cloroform từ bột viên kiềm hóa - Chiết trimethprrim từ dịch cloroform CH3COOH M - Pha loãng dịch chiết acid acetic đo độ hấp thụ 271 nm 13 Tiến hành: Cân xác lượng bột viên tương đương 20 mg trimethoprim (khoảng 0,16 g bột); cho vào bình gạn dung tích 150 ml có sẵn 12 ml NaOH 0,1 M; lắc nhẹ cho thấm ướt khoảng 15 phút Chiết cloroform lần: 20; 20; 20 10 ml Tập trung dịch chiết cloroform vào bình gạn thứ hai rửa lần, lần 10 ml NaOH 0,1 M Chuẩn bị dung dịch đo: D.d.1: Chiết trimethoprim từ dịch chiết cloroform acid acetic M: Tiến hành lần: 20; 20; 20 10 ml Tập trung dịch chiết acid acetic vào bình gạn thứ ba rửa 10 ml cloroform Chuyển dịch chiết acid acetic vào bình định mức dung tích 100 ml; thêm acid acetic M đến vạch, trộn D.d.2: Lấy xác 10 ml d.d.1 vào bình định mức dung tích 100 ml; thêm 10 ml acid acetic M thêm nước đến vạch, trộn Đo độ hấp thụ d.d.2 bước sóng 271 nm, cốc cm, dùng mẫu trắng dung dịch gồm 20 ml acid acetic M pha lỗng nước thành 100 ml Tính lượng C14H18N4O3 (trimethoprim) viên trung bình, lấy trị số E(1%, cm) 271 nm 204 Ghi chú: (*) Pha thuốc thử Dragendorff (Kali iodobismuthate): Dung dịch 1: Hòa tan 0,85 g bismuth nitrat base 40 ml nước 10 ml acid acetic đậm đặc Dung dịch 2: Hòa tan g kali iodid (KI) 20 ml nước Trộn đồng thể tích dung dịch dung dịch Thêm 100 ml nước 20 ml acid acetic đặc vào 10 ml hỗn hợp thu 14 BÀI TỔNG HỢP ACETAMINOPHEN Mục tiêu thực hành: Nhận biết số tính chất acetaminophen Tổng hợp acetaminophen thực nghiệm Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Máy lọc chân không, tủ sấy - Thuốc thử: H3PO4 đậm đặc; p-aminophenol; acetic anhydric; paracetamol nguyên liệu Công thức: H O HO N C CH3 Ptl: 151,17 Tính chất: Bột kết tinh màu trắng, khơng mùi, vị đắng nhẹ Khó tan nước, tan ethanol dung dịch NaOH loãng I TỔNG HỢP ACETAMINOPHEN Nguyên tắc: Phản ứng xảy theo chế SN2 tác nhân nhân nhóm amin (amin có tính nhân hydroxyl) với tác nhân điện tử C=O (trong mơi trường acid) Quy trình tổng hợp Cân khoảng 1,50 g p-aminophenol cho vào bình tam giác 125 mL (tránh tiếp xúc với da, cần đeo găng tay bảo hộ) Thêm 25 mL nước cất, thêm 20 giọt acid phosphoric đậm đặc, đậy nắp bình lắc nhẹ phân tử aminophenol tan hết Nếu thấy khó tan tiếp tục nhỏ thêm vài giọt acid phosphoric Đặt bình phản ứng vào bếp đun cách thủy nhiệt độ 60-70 oC, cẩn thận thêm mL acetic anhydric vào bình, để bếp cách thủy 15 phút Đem bình phản ứng để nguội bớt sau đặt vào chậu nước đá, dùng đũa thủy tinh cọ nhẹ vào thành bình để khơi màu Nếu sau 20 phút chưa có tinh thể xuất thêm vào tinh thể acetaminophen Để bình tam giác chậu 15 nước đá khoảng 30 phút Lọc qua phễu lọc Buchner với máy lọc chân không Rửa tinh thể với mL nước lạnh (nước cất làm lạnh) Đem sấy đến khô đến khối lượng không đổi Xác định khối lượng acetaminophen thơ II TRẢ LỜI CÂU HỎI Tính hiệu suất tổng hợp acetaminophen Tại nhóm amin có tính nhân nhóm hydroxyl? Vai trị acid H3PO4? 16 BÀI KẾT TINH LẠI VÀ ĐỊNH TÍNH ACETAMINOPHEN Mục tiêu thực hành: Tinh acetaminophen 2.Định tính acetaminophen tổng hợp so sánh với acetaminophen chuẩn Dụng cụ, thuốc thử: - Dụng cụ: Máy lọc chân không, tủ sấy, máy đo điểm chảy, bình sắc ký, mỏng - Thuốc thử: methanol, nước cất I KẾT TINH LẠI ACETAMINOPHEN Cho tồn lượng acetaminophen thơ vào cốc thủy tinh 100 mL, thêm 20 mL nước cất đun sơi Sau tinh thể tan hồn tồn lấy cốc đặt vào chậu nước đá khoảng 20 phút Lọc tinh thể phễu lọc Buchner với máy hút chân không, rửa tinh thể mL nước lạnh Đem sấy khô cân lại khối lượng acetaminophen sau tinh chế II XÁC ĐỊNH NHIỆT ĐỘ NÓNG CHẢY Cho lượng tinh thể acetaminophen vừa sấy khô acetaminophen chuẩn vào hai ống mao quản, đến độ cao khoảng 0,2 cm, đặt vào máy đo nhiệt độ nóng chảy gia nhiệt, quan sát đọc nhiệt độ tinh thể acetaminophen chuyển từ dạng rắn sang dạng lỏng (trong suốt) Nhiệt độ nóng chảy acetaminophen khoảng 169-171oC So sánh nhiệt độ nóng chảy acetaminphen chuẩn tổng hợp, từ nhận xét độ tinh khiết acetaminophen tổng hợp III SẮC KÝ LỚP MỎNG - Pha tĩnh: Bản mỏng silicagel - Pha động: methanol:nước (3:1) Tiến hành sắc ký lớp mỏng với vết chuẩn vết mẫu (acetaminophen từ tổng hợp)  Quan sát đèn UV 254 nm, so sánh vết chuẩn vết mẫu từ nhận xét độ tinh khiết acetaminophen tổng hợp Nếu vết mẫu trịn đều, khơng có vết phụ khơng có tượng kéo mẫu tinh khiết (Ví dụ hình ảnh minh họa) Trước Sau 17 Phụ lục (Ghi chú: Thay đổi so với phụ lục Th.h HD I) I XÁC ĐỊNH GIỚI HẠN MỘT SỐ TẠP CHẤT VÔ CƠ Tạp amoni: (Theo phụ lục 9.4.1 - DĐVN IV) Nguồn gốc: Tạp môi trường sinh qui trình tổng hợp thuốc Nguyên tắc: Amonac NH4+ phản ứng với kali tetraiodomercurat kiềm (thuốc thử Nessler) tạo phức chất có màu từ vàng nhạt đến nâu đậm, tùy nồng độ NH4Cl + 2K2[HgI4] + KOH =  [O=Hg2=NH2+] I- + KCl + KI + H2O t/t Nessler Phức màu vàng Cách tiến hành chung: Chọn hai ống nghiệm qui cách; làm ống thử, làm ống đối chiếu Tiến hành đồng thời hai ống - Ống thử: Hòa tan P(g) chất thử (theo qui định chuyên luận) vào 14ml nước; kiềm hóa (nếu cần) dung dịch NaOH M thêm nước vừa đủ 15 ml Thêm 0,3 ml thuốc thử Nessler, trộn đều, để yên phút - Ống đối chiếu: Cho vào ống 10 ml dung dịch mẫu amoni ppm; thêm nước tới đủ 15 ml Thêm 0,3 ml thuốc thử Nessler, trộn đều; để yên phút Sau phút, so sánh độ đậm màu ống thử với màu ống đối chiếu * Pha dung dịch mẫu ion amoni: (Theo phụ lục PL-9 - DĐVN IV) Dung dịch amoni clorid (NH4Cl) 0,0741%: Pha bình định mức dung tích 100 ml Hịa tan 0,0741 g amoni clorid (NH4Cl - TT), sấy khô 100-105o C tới khối lượng không đổi, vào 20 ml nước cốc; chuyển dịch thu vào bình định mức Tráng cốc nước, đổ dịch tráng vào bình định mức (3 lần, lần với 15 ml nước); thêm nước tới vạch mức, trộn Dung dịch mẫu amoni 100 ppm: Pha loãng nước 10 ml dung dịch amoni 0,0741% thành 25 ml Dung dịch mẫu amoni ppm: Pha loãng từ dung dịch mẫu amoni 100 ppm Pha thuốc thử Nessler: Theo phụ lục - D ĐVN IV Tạp calci (Ca++): (Theo phụ lục 9.4.3 - DĐVN IV) Nguồn gốc: Tạp môi trường sinh qui trình tổng hợp thuốc Nguyên tắc: Ion Ca++ phản ứng với ion oxalat cho kết tủa calci oxalat màu trắng, tạo đục So sánh độ đục với ống đối chiếu: Ca++ + (NH4)2C2O4   CaC2O4 + 2NH4+ Cách tiến hành chung: Chọn hai ống nghiệm qui cách: làm ống đối chiếu, làm ống thử Tiến hành đồng thời hai ống - Ống thử: Trộn ml dung dịch amoni oxalat 4% với 0,2 ml dung dịch mẫu calci 100 ppm pha ethanol 96% Sau phút, thêm hỗn hợp gồm 15 ml dung dịch thử (pha theo chuyên luận) ml acid acetic M, trộn - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử, thay 15 ml dung dich thử 10 ml dung dịch mẫu calci 10 ppm ml nước 18 Sau 15 phút so sánh độ đục ống thử với ống qui chiếu * Pha dung dịch mẫu ion calci (Ca2+): Dung dịch mẫu ion calci (Ca++) 1000 phần triệu (ppm): Pha bình định mức dung tích 250 ml Hòa tan cốc 1,0 g calci carbonat (đã sấy khô 100-105o C tới khối lượng không đổi) vào hỗn hợp gồm 80 ml nước ml acid acetic M; chuyển dịch thu vào bình định mức; tráng cốc nước, đổ dịch tráng vào bình định mức (3 lần, lần với 20 ml nước) Thêm nước tới vạch mức, trộn Dung dịch mẫu ion calci 10 ppm: Pha loãng 100 lần dung dịch mẫu ion calci 1000 ppm Dung dịch mẫu ion calci 100 ppm ethanol 96%; Pha loãng 10 lần dung dịch mẫu ion calci 1000 ppm ethanol 96% Tạp clorid (Cl-): (Theo phụ lục 9.4.5 - DĐVN IV) Nguồn gốc: Tạp môi trường sinh qui trình tổng hợp thuốc * Nguyên tắc: Ion Ag+ phản ứng với ion Cl- tạo kết tủa AgCl, gây đục dung dịch thử So sánh độ đục với dung dịch đối chiếu ion clorid: AgNO3 + Cl-   AgCl + NO3Phản ứng tiến hành môi trường acid nitric Cách tiến hành chung: Chọn ống nghiệm qui cách; ống làm ống đối chiếu, ống làm ống thử Chuẩn bị mẫu thử theo chuyên luận Tiến hành đồng thời hai ống - Ống thử: Cho vào ống nghiệm 15 ml mẫu thử lượng mẫu thử pha loãng nước tới 15 ml; thêm ml dung dịch HNO3 M ml AgNO3 2%, trộn đều, để yên phút - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử, thay 15 ml dung dịch thử hỗn hợp 10 ml dung dịch mẫu clorid ppm ml nước So sánh độ đục ống thử với ống qui chiếu theo qui định * Pha dung dịch mẫu ion clorid (Cl-): Dung dịch mẫu clorid 500 phần triệu (ppm): Hoà tan cốc 0,0824 g natri clorid (TT), sấy khô 100-105o C tới khối lượng không đổi, với 30 ml nước; chuyển dịch thu vào bình định mức dung tích 100 ml Dùng nước tráng cốc, chuyển dịch tráng vào bình định mức (3 lần, lần với 15 ml nước) Thêm nước tới vạch mức, trộn Dung dịch mẫu clorid ppm: Chỉ pha dùng Pha loãng 100 lần dung dịch mẫu clorid 500 ppm Kim loại nặng: (Theo phụ lục 9.4.8 DĐVN IV) Nguyên tắc: Nhóm tạp kim loại nặng gồm nhiều nguyên tố: Pb, Hg Trong phép thử lấy ion Pb2+ làm đại diện, chế tạo dung dịch mẫu Phản ứng Pb2+ với thuốc thử thioacetamid cho màu vàng nâu: S CH3 C Pb2+ + CH3-CS-NH2  Pb++ NH 19 Thioacetamid Cách tiến hành chung: Áp dụng cho phương pháp Chọn hai ống nghiệm qui cách theo qui định với phép so sánh màu; làm ống thử, làm ống đối chiếu * Phương pháp Dung môi dùng phép thử nước cất Tiến hành đồng thời ống thử ống đối chiếu - Ống thử: Lấy 12 ml dung dịch thử pha theo chuyên luận; thêm ml dung dịch đệm acetat pH 3,5, trộn Thêm 1,2 ml thuốc thử thioacetamid (TT), trộn - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử, thay 12 ml dung dịch thử 10 ml dung dịch chì mẫu ppm ppm, tuỳ theo chuyên luận qui định; ml dung dịch thử Để yên phút, so sánh màu ống thử với màu ống đối chiếu trắng, ánh sáng khuyếch tán ban ngày Màu ống thử không đậm màu ống đối chiếu Ghi chú: Phép thử có giá trị ống đối chiếu có màu nâu nhạt so với ống trắng chuẩn bị từ 10 ml nước cất ml dung dịch thử * Pha dung dịch mẫu: Dung dịch chì mẫu 1000 ppm: Hịa tan 0,400 g chì (II) nitrat nước vừa đủ 250 ml Dung dịch chì mẫu 100 ppm: Pha dùng Pha loãng nước 10 lần dung dịch chì mẫu 1000 ppm Dung dịch chì mẫu ppm: Pha dùng Pha loãng nước 100 lần dung dịch chì mẫu 100 ppm Dung dịch chì mẫu ppm: Pha dùng Pha lỗng nước 50 lần dung dịch chì mẫu 100 ppm * Phương pháp Dung môi dùng phép thử dung mơi hữu thích hợp trơn lẫn với nước theo tỷ lệ qui định Cách tiến hành chung: Hòa tan P(g) chất thử theo qui định chun luận vào dung mơi hữu có trộn lẫn tỷ lệ nước tối thiểu; ví dụ 1,4-dioxan aceton có chứa 15% nước Các bước tiến hành thử miêu tả phương pháp Chuẩn bị dung dịch ion chì mẫu ppm ppm cách pha lỗng dung dịch chì mẫu 100 ppm dung môi dùng pha chế phẩm thử Ghi chú: Phép thử có giá trị ống đối chiếu có màu nâu nhạt so với ống trắng chuẩn bị dồng thời, điều kiện, gồm 10 ml dung môi pha chế phẩm thử ml dung dịch chế phẩm thử * Phương pháp (D ĐVN IV) Lấy lượng chất thử dẫn (không g) cho vào chén nung silica Thêm ml MgSO4 25% H2SO4 M; trộn đều; đun nóng cẩn thận (nếu mẫu chất lỏng bay cách thủy đến khơ).Đốt để than hóa, nhiệt độ 20 không 800o C, đốt tiếp cắn màu trắng hay xám nhạt Làm ẩm 0,2 ml H2SO4 M; bốc đốt lại; để nguội Thời gian đốt tồn khơng q Hòa cặn vào lượng ml HCl M; thêm 0,1 ml phenolphtalein; thêm giọt amoniac đậm đặc tới màu hồng Để nguội, thêm acid acetic băng tới màu hồng, thêm 0,5 ml Lọc lấy dịch, pha loãng dịch lọc thành 20 ml nước cất Lấy dịch làm dung dịch thử Lấy 12 ml dịch thử vào ống nghiệm; thêm ml đệm acetat pH 3,5; trộn Thêm 1,2 ml dung dịch thioacetamid; trộn đều, để yên phút So sánh màu ống thử với màu ống mẫu chuẩn bị đồng thời - Chuẩn bị ống mẫu: Lấy thể tích dung dịch chì mẫu 10 ppm dẫn chuyên luận cho vào chén nung silica; thêm ml MgSO4 25% H2SO4 M Tiếp tục xử lý mẫu thử; kết thúc pha loãng nước thành 20 ml Lấy ml dung dịch thử vào ống nghiệm; thêm 10 ml dung dịch mẫu xử lý trên; thêm ml dung dịch đêm acetat pH 3,5; trộn Thêm 1,2 ml thioacetamid; trộn đều, để yên phút Dung dịch làm mẫu so sánh màu với dung dịch thử * Các phương pháp 4, 6: Xem DĐ VN IV Tạp sulfat (SO42-): (Theo phụ lục 4.14 DĐVN IV) Nguồn gốc: Tạp môi trường sinh qúa trình tổng hợp thuốc Nguyên tắc: Ion SO42- phản ứng với ion Ba++ cho kết tủa BaSO4 màu trắng, tạo đục So sánh độ đục ống thử với ống đối chiếu ion sulfat: Ba++ + SO42-   BaSO4 Phản ứng dùng thuốc thử BaCl2, môi trường acid acetic Cách tiến hành chung: Chọn hai ống nghiệm qui cách; làm ống đối chiếu, làm ống thử Tiến hành thử đồng thời hai ống Chuẩn bị dung dịch thử theo dẫn chuyên luận, - Ống thử: Cho vào ống ml BaCl2 25% 1,5 ml dung dịch mẫu sulfat 10 ppm, để yên phút Cho vào 15 ml dung dịch mẫu thử (hoặc p (g) chất thử pha 15 ml nước); thêm 0,5 ml acid acetic M để yên phút - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử thay 15 ml dung dịch thử 15 ml dung dịch mẫu sulfat 10 ppm So sánh độ đục ống thử với ống đối chiếu theo qui định * Pha dung dịch mẫu ion sulfat: Dung dịch mẫu ion sulfat 1000 ppm: Pha bình điịnh mức dung tích 100 ml Hịa tan 0,184 g kali clorid (KCl-TT), sấy khô 100-105o C tới khối lượng không đổi, cốc chứa 30 ml nước Chuyển dịch thu vào bình 21 định mức; tráng cốc nước, chuyển nước tráng vào bình định mức (3 lần, lần với 15 ml nước); thêm nước tới vạch mức, trộn Dung dịch mẫu ion sulfat 10 ppm: Chỉ pha dùng Pha loãng 100 lần dung dịch mẫu ion sulfat 1000 ppm Tạp Sắt: (Theo phụ lục 9.4.13 - DĐVN IV) Nguyên tắc: Ion Fe3+ tạo màu hồng với acid mercaptoacetic amoniac: HS-CH2-COOH + FeCl3  (HS-CH2-COO)3 Fe + HCl Acid mercaptoacetic Cách tiến hành chung: Chọn hai ống Nessler; làm ống thử, làm ống đối chiếu Tiến hành đồng thời hai ống - Ống thử: Lấy 10 ml dung dịch thử vào ống thử, thêm ml dung dịch acid citric 20% 0,1 ml acid mercaptoacetic, trộn Kiềm hóa amoniac 10M thêm nước thành 20 ml, trôn đều, để yên phút - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử, thay 10 ml dung dịch thử 10 ml dung dịch mẫu sắt ppm So sánh màu (hồng) ống thử với màu ống đối chiếu trắng, ánh sáng khuyếch tán ban ngày Màu ống thử không đậm màu ống đối chiếu * Pha dung dịch mẫu sắt: Dung dịch mẫu sắt 200 ppm: Hòa tan 0,863 g sắt (III) amoni sulfat nước chứa 25 ml H2SO4 M; thêm nước vừa đủ 500 ml Dung dịch mẫu sắt 20 ppm: Pha dùng Pha loãng 10 lần nước dung dịch mẫu sắt 200 ppm Dung dịch mẫu sắt ppm: Pha dùng Pha loãng 20 lần nước dung dịch mẫu sắt 20 ppm Arsenic: (Theo phụ lục 9.4.2 - DĐVN IV) * Phương pháp A Nguyên tắc: Khí hydrogen sinh khử As3+ thành khí asin AsH3 (hydroarsenid); khí bay lên gặp muối Hg(II) tạo hỗn hợp màu vàng đến vàng nâu: Zn + 2HCl  2H + ZnCl2 AsO33- + 9H   AsH3 + 3H2O (AsO33- = ion arsenid) AsH3 + HgBr2  Hỗn hợp màu nâu Nếu có As5+, dùng Sn2+ (SnCl2) I - (KI) khử As3+ : AsO43- + Sn2+  AsO33- + Sn4+ AsO43- + 2I - + 2H+  AsO33- + I2 + H2O (AsO43- = ion arsenat) Đề phịng trường hợp mẫu thử có S 2-, tạo khí H2S bay lên khí AsH3, gặp Hg++ cho kết tủa màu nâu đen HgS, làm sai lạc kết thử arsen; 22 đường luồng khí AsH3 đặt nút bơng tẩm chì acetat mỏng, chì acetat giữ khí H2S để khí AsH3 qua Dụng cụ thử arsen: Xem hình vẽ Cấu trúc dụng cụ thử arsen gồm: (1) Bình phản ứng tạo khí asin AsH3: Bình nón nút mài dung tích cỡ 100 ml (2) Nút đón khí tạo màu: Ống dẫn khí dài khoảng 200 mm, đường kính mm; đầu ống có đĩa kẹp miếng giấy lọc tẩm HgBr2 đón khí asin; bơng tẩm chì acetat đặt trước miếng giấy tẩm HgBr2 Nút đón khí phải có cổ mài nhám khớp với cổ bình nón Cách tiến hành chung: Dùng hai dụng cụ: thử, đối chiếu - Chuẩn bị trước nút đón khí: Đặt nút bơng tẩm chì acetat (khoảng 50-60 mg bơng) xốp, trước miếng giấy tẩm HgBr2; kẹp giấy tẩm HgBr2 vào đĩa kẹp - Bình phản ứng thử: Cân P(g) chất thử (hoặc thể tích dung dịch thử) theo qui định chun luận; hịa tan pha lỗng nước thành vào 25 ml Thêm 15 ml HCl đậm đặc; ml dung dịch KI 16,6%; 0,1 ml dung dịch SnCl2 4%; trộn để yên 15 phút - Bình phản ứng đối chiếu: Tiến hành tương tự bình phản ứng mẫu thử, thay mẫu thử ml dung dịch mẫu arsen ppm, pha loãng nước thành 25 ml Để yên 15 phút Thêm đồng thời vào bình g kẽm khơng có arsen; đậy bình nút đón khí asin chuẩn bị trước; ngâm bình vào nước, trì nhiệt độ cho khí H giải phóng Sau tháo nút đón khí lấy miếng giấy tẩm HgBr2 So sánh đậm độ vết màu hai miếng giấy thử đối chiếu Yêu cầu: Màu miếng giấy thử (nếu có) khơng đậm màu miếng giấy đối chiếu Ghi chú: Chuẩn bị Zn khơng có As Ngâm kẽm vào dung dịch HCl 10% đến mặt hạt kẽm sáng; vớt ra, rửa nước ngâm nước * Pha dung dịch mẫu arsen: Dung dịch mẫu arsen 1000 ppm: Hòa tan 0,330 g arsen trioxyd ml dung dịch NaOH M; thêm nước vừa đủ 250 ml Dung dịch mẫu arsen 10 ppm: Pha dùng Pha loãng nước 100 lần dung dịch mẫu arsen 1000 ppm Dung dịch mẫu arsen ppm: Pha dùng Pha loãng nước 10 lần dung dịch mẫu arsen 10 ppm Bộ thử arsen: A : Bình phản ứng B : ống dẫn khí (asin, H, H2S) C : Vị trí đặt mẩu giấy tẩm HgBr2 23 * Phương pháp B: Nguyên tắc: Dùng natri hypophosphit NaH2PO2 để khử As3+ thành arsen nguyên tố màu nâu: NaH2PO2 + 2AsO33- + 3HCl  2As + 3H3PO4 + 3NaCl Cũng dùng KI để chuyển As5+ As3+ Cách tiến hành chung: Chọn hai ống nghiệm theo qui định: ống thử ống đối chiếu Tiến hành đồng thời ống - Ống thử: Cân P(g) chất thử theo qui định chuyên luận, cho vào ống có sẵn ml HCl đậm đặc mg KI Thêm ml natri hypophosphit (TT) - Ống đối chiếu: Tiến hành tương tự ống thử, thay chất thử 0,5 ml dung dịch arsen mẫu 10 ppm Đun cách thủy óng 15 phút, lắc nhẹ Lấy ra, so sánh đậm độ màu ống u cầu: Màu nâu ống thử (nếu có) khơng đậm màu ống đối chiếu II XÁC ĐỊNH ĐỘ TRONG DUNG DỊCH (Phụ lục 9.2- DĐVN IV) (p PL-172) Cách thử: Việc so sánh tiến hành ống nghiệm giống thủy tinh trung tính, khơng màu, đáy Đường kính 15-25 mm Bề dày lớp dịch thử đối chiếu 40 mm Sau chuẩn bị hỗn dịch đối chiếu phút đem so sánh với dung dịch thử Quan sát so sánh: Nhìn theo trục ống nghiệm, màu đen, ánh sáng khuyêchs tán ban ngày ánh sáng khuyêchs tán phải phù hợp để phân biệt hỗn dịch đối chiếu I với nước cất với hỗn dịch đối chiếu II Cách đánh giá kết quả: Một chất lỏng coi tương đương với độ nước cất độ dung môi dùng pha mẫu thử Nếu chất lỏng đục khơng đục hỗn dịch đối chiếu I Chuẩn bị hỗn dịch đối chiếu: a Dung dịch hydrazin sulfat: Hòa tan 1,0 g hydrazin sulfat (TT) nước; thêm nước đủ 100 ml Để yên 4-6 b Dung dịch hexamethylentetramin: Hòa tan 2,5 g hexamethylentetramin 25,0 ml nước bình nón có nút mài, dung tích 100 ml c Hỗn dịch đục gốc: Pha bình thủy tinh chất lượng tốt, không khuyết tật bề mặt Hòa lẫn 25 ml d.d hydrazin sulfat với 25 ml d.d hexamethylentetramin; lắc trộn kỹ để yên 24 Thời hạn sử dụng: Trong vòng tháng Cần lắc kỹ trược dùng d Chuẩn đục: Chuẩn bị trước dùng; dùng 24 24 Pha loãng 15 ml hỗn dịch đục gốc nước thành 1000 ml e Chuẩn bị hỗn dịch đối chiếu: Chuẩn bị trước dùng Các hỗn dịch đối chiếu độ đục từ I tới IV chuẩn bị theo bảng 9.2 Bảng 9.2 Mẫu hỗn dịch đối chiếu độ đục (pha 100 ml) Mẫu đục Chuẩn đục (ml) Nước (ml) I 5,0 95,0 II 10,0 90,0 III 30,0 70,0 IV 50,0 50,0 III XÁC ĐỊNH MÀU SẮC DUNG DỊCH (Phụ lục 9.3 - DĐVN IV) (p PL-172) Việc xác định màu sắc dung dịch phạm vi màu nâu-vàng-đỏ tiến hành hai phương pháp đây, tùy theo chuyên luận Một dung dịch coi không màu giống nước cất, hay dung mơi dùng pha dung dịch đó, màu khơng đậm dung dịch màu đối chiếu No Phương pháp I - Ống nghiệm dùng cho phép thử thủy tinh trung tính, khơng màu, suốt giống hệt nhau: Đường kính ngồi 12 mm để so sánh 2,0 ml dung dịch thử với 2,0 ml nước cất, dung môi dung dịch màu đối chiếu (Bảng 9.3.2a tới 9.3.2e), theo chuyên luận - Quan sát so sánh màu theo chiều ngang ống nghiệm, ánh sáng khuyếch tán, màu trắng Phương pháp II - Dùng ống nghiệm thủy tinh trung tính, khơng màu, đáy bằng, suốt giống hệt nhau; đường kính 15  25 mm - Thể tích mẫu thử mẫu màu đối chiếu ống tạo bề dày 40 mm - Quan sát so sánh màu theo trục ống nghiệm, ánh sáng khuyếch tán, màu trắng PHA CÁC DUNG DỊCH GỐC: Các dung dịch gốc màu vàng, đỏ, xanh chuẩn bị theo phụ lục 9.3 (Xem DĐVN IV, trang PL-173) Dung mơi A: 25 ml HCl bốc khói hòa vào 975 ml nước Dung dịch gốc màu vàng: Hịa tan 46 g FeCl3 ,6H2O vào dung mơi A đủ 1000 ml Chuẩn độ lại, điều chỉnh dung môi A để d d 45 mg FeCl3 ,6H2O/1 ml Bảo quản tránh ánh sáng Chuẩn độ: Cho vào bình nón dung tích 250 ml có nút mài: 10 ml dung dịch gốc màu vàng; 15 ml nước; ml HCl bốc khói g KI Đậy nút bình nón, trộn đều, để n 15 phút chỗ tối Thêm vào bình nón 100 ml nước Chuẩn độ Iod giải phóng d.d natri thiosulfat 0,1 N; thị 0,5 ml hồ tinh bột (cho vào gần cuối chuẩn độ) 25 ml natri thiosulfat 0,1 N tương đương 27,03 mg FeCl3 ,6H2O Dung dịch gốc màu đỏ: Hòa tan 60 g CoCl2 ,6H2O dung môi A cho đủ 1000 ml Chuẩn độ lại, chỉnh dung mơi A để có d d 59,50 mg CoCl2 ,6H2O / ml Chuẩn độ: Cho vào bình nón dung tích 250 ml có nút mài: ml dung dịch gốc màu đỏ; ml nước oxy già 10 V 10 ml NaOH 30% Đun sôi nhẹ 10 phút; để nguội thêm 60 ml H2SO4 M g KI Đậy bình nón, lắc nhẹ cho tan Chuẩn độ Iod giải phóng d.d natri thiosulfat 0,1 N; thị 0,5 ml hồ tinh bột (cho vào gần cuối chuẩn độ) Dịch định lượng chuyển sang màu hồng kết thúc ml natri thiosulfat 0,1 N tương đương 23,79 mg CoCl2 ,6H2O Dung dịch gốc màu xanh: Hòa tan 63 g CuSO4 ,5H2O dung môi A cho đủ 1000 ml Chuẩn độ chỉnh dung mơi A để có d.d 62,4 g CuSO4 ,5H2O/1 ml Chuẩn độ: Cho vào bình nón dung tích 250 ml có nút mài: 10 ml dung dịch gốc màu xanh; 50 ml nước; 12 ml acid acetic M g KI Chuẩn độ Iod giải phóng d.d natri thiosulfat 0,1 N; thị 0,5 ml hồ tinh bột (cho vào gần cuối chuẩn độ) Kết thúc định lượng dịch chuyển sang màu nâu nhạt ml natri thiosulfat 0,1 N tương đương 24,97 mg CuSO4 ,5H2O PHA CÁC DUNG DỊCH MÀU CHUẨN: (DĐVN IV) Dùng d.d gốc để pha d.d màu chuẩn Bảng 9.3.1 Bảng 9.3.1 Các dung dịch màu chuẩn Dung dịch màu chuẩn Dung dịch gốc (ml) màu vàng màu đỏ màu xanh N (nâu) 30 30 24 VN (vàng-nâu) 24 10 V (vàng) 24 VL (vàng-lục) 96 2 Đ (đỏ) 10 20 HCl 1% (kl/kl) (ml) 16 62 70 70 PHA DUNG DỊCH MÀU ĐỐI CHIẾU: (DĐVN IV) Bảng 9.3.2 b Dung dịch màu đối chiếu VN D.d màu đối chiếu D.d màu chuẩn N (ml) D.d HCl 1% (ml) VN1 100,0 0,0 VN2 75,0 25,0 VN3 50,0 50,0 VN4 25,0 75,0 VN5 12,5 87,5 26 VN6 VN7 5,0 2,5 95,0 97,5 Bảng 9.3.2 c Dung dịch màu đối chiếu V D.d màu đối chiếu D.d màu chuẩn V (ml) D.d HCl 1% (ml) V1 100,0 0,0 V2 75,0 25,0 V3 50,0 50,0 V4 25,0 75,0 V5 12,5 87,5 V6 5,0 95,0 V7 2,5 97,5 Bảng 9.3.2 d Dung dịch màu mẫu VL D.d màu đối chiếu D.d màu chuẩn VL D.d HCl 1% (ml) (ml) VL1 25,0 75,0 VL2 15,0 85,0 VL3 8,5 91,5 VL4 5,0 95,0 VL5 3,0 97,0 VL6 1,5 98,5 VL7 0,75 99,25 HẾT 27