Bg duoc ly 3 c4 391

NGUN LÝ CÁC MƠ HÌNH NGHIÊN CỨU DƢỢC LÝ Ex vivo Mai Thị Thanh Thƣờng CÁC LOẠI MƠ HÌNH  Thử nghiệm động vật (in vivo)  Thử nghiệm mơ đích, chỗ (in situ)  Thử nghiệm tử cung (in utero)  Thử nghiệm ống nghiệm, tế bào (in vitro)  Thử nghiệm máy tính (in silico)  Thử nghiệm giấy in (in papyro) THỬ NGHIỆM IN VIVO  Các lồi vật thí nghiệm Chuột nhắt (nhiều nhất), chuột cống, ếch, cá, khỉ, thỏ, chim, chó, mèo, ruồi… THỬ NGHIỆM IN VIVO THỬ NGHIỆM EX VIVO Ex vivo = (Latin: out of the living)  Thực nghiệm mô môi trường nhân tạo bên thể (sinh vật)  Cho phép tiến hành thực nghiệm đo thể sống  Mơ hình cho phát triển pp phẫu thuật, chẩn đốn hình ảnh  Khác với thuật ngữ in vitro  Ex vivo: mô, TB sống nuôi cấy không 24  VD: Gan: cắt nhỏ nhờ E2, tách TB gan Nếu để 24h in vitro, để không 24h ex vivo EX VIVO: THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP Công cụ sàng lọc Dƣợc lý  Theo dõi đáp ứng – nồng độ  Nghiên cứu chế tác động  Thử nghiệm tiền lâm sàng  Ứng dụng thƣờng nhất: + Tim, mạch cô lập + Ruột non, kết tràng, kết vịng + Phổi, khí – phế quản + Cơ, da  EX VIVO: THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP Lý sử dụng: - Cân nội mơ: nhiều yếu tố phức tạp Khó có kết luận khẳng định (không xác định yếu tố riêng lẽ  không khu trú) - Cơ quan phân lập: loại bớt yếu tố ảnh hưởng - Cho đáp ứng gần giống với in vivo - Mô tuần hoàn quan - Đánh giá tác động tương đối trực tiếp EX VIVO: THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP NGUYÊN LÝ CHUNG Cơ quan phần quan lấy khỏi vật vừa bị giết treo bình đựng dung dịch ngâm mô  Cơ quan cố định (gắn với thiết bị để ghi nhận chức năng)  Dung dịch ngâm cung cấp khơng khí dịng khí hòa trộn vào  Cho thuốc muốn thử tác dụng tác động lên quan phân lập  Ghi nhận lại biến đổi nồng độ/hàm lượng, thông số hoạt động quan tùy theo chức quan phân lập  EX VIVO: THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP  Dung dịch bảo quản mô phân lập Dung dịch Tyrode Dung dịch Krebs Gần đẳng trương Gần đẳng trương NaCl 136.9 mM NaCl 118.5 mM KCl 2.7 Mm KCl 4.8 Mm CaCl2 1.8 Mm CaCl2 1.9 Mm MgCl2: 1.05 Mm MgSO4: 1.05 mM NaH2PO4: 0.42 mM KH2PO4: 1.2 Mm NaHCO3: 11.9 Mm NaHCO3: 25 mM Glucose 5.6 mM Glucose 10 mM EX VIVO: THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP  Nhiệt độ: thƣờng 370C (24-37oC)  pH: thƣờng 7.4 (7.2-7.4)  Oxy: sục hỗn hợp khí 95% CO2 + 5% O2  Bơm dung dịch Krebs  Cannula (ống thông)  Máu  Thơng khí  Cơ chất THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP TIM THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP TIM  Đặt tim vào Langendorff  Truyền  Cung  Giữ qua động mạch chủ cấp oxy, dịch sinh lý nhịp tự động dùng máy kích thích      Chức mạch vành Áp lực thất trái Nhiệt độ dịch truyền Điện tim Nhịp tim      Thuốc gây co bóp tim Thuốc tác động mạch Thuốc tác động nhịp Đánh giá thời kỳ trơ Nghiên cứu sinh hóa THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP DA THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP DA  Hấp thu qua da  Nghiên cứu độc tính, dược lý da  … THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP THẬN THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP THẬN Ứng dụng: - Sự vận chuyển thuốc qua thận - Cơ chế tiết qua thận - Tƣơng tác thuốc - Độc tính thuốc thận - Ảnh hƣởng thuốc đến chức thận - Nghiên cứu thuốc ứng dụng lâm sàng THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP GAN  Gan  Truyền qua TM cửa  Đầu ra: TM gan  Cung cấp oxy, máu  Máy tim – phổi THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP GAN  Ứng dụng - Sự thải qua gan - Chuyển hóa thuốc - Chuyển hóa chất - Độc tính gan - Dƣợc động học - Thu nhận qua gan liên quan đến gắn kết thuốc với protein vận chuyển thuốc - Sự tiết mật THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP RUỘT      Ruột chuột nhắt, chuột cống Truyền qua đầu ruột non Đầu ra: phần ruột già Cung cấp O2, CO2 Cung cấp dịch THỬ NGHIỆM TRÊN CƠ QUAN PHÂN LẬP RUỘT  Ứng dụng: - Sự hấp thu thuôc - Sự vận chuyển thuốc - Ảnh hƣởng hệ vi sinh ruột - Sinh lý bệnh đƣờng ruột - Nhu động ruột - Bài tiết ruột THỬ NGHIỆM TRÊN CHẨN ĐOÁN EX VIVO RUỘT  Ruột heo  Gây tắt ruột     Cho vào hộp khoang bụng Phần ruột dẹp nằm góc trái Phần phình nằm góc phải Chụp CT scan