DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1 1 Chitosan có nguồn gốc từ vỏ tôm, cua; phản ứng deacetyl hóa chitin tạo chitosan [15] 6 Hình 1 2 Cấu trúc của Alginate 9 Hình 1 3 Scaffold từ hydrogel dextran chuy[.]
DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Chitosan có nguồn gốc từ vỏ tơm, cua; phản ứng deacetyl hóa chitin tạo chitosan [15] Hình 1.2 Cấu trúc Alginate Hình 1.3 Scaffold từ hydrogel dextran chuyển từ dạng lỏng sang dạng gel có tác động ánh sáng hỗ trợ trình tạo mạch máu tái tạo da [34] 14 Hình 1.4 Quercetin cấu trúc Quercetin 15 Hình 1.5 Resveratrol cấu trúc Resveratrol 17 Hình 2.1 Quy trình tổng hợp hệ hydrogel CS -F127 31 Hình 2.2 Phương trình phản ứng tổng hợp NPC-F127-NPC 31 Hình 2.3 Quy trình tổng hợp NPC-F127-NPC 32 Hình 2.4 Phương trình phản ứng tổng hợp NPC-F127-OH 33 Hình 2.5 Quy trình tổng hợp NPC-F127-OH 33 Hình 2.6.Sơ đồ phản ứng trình tổng hợp Na-Alg-Cys 35 Hình 2.7 Sơ đồ tổng hợp copolymer nhạy cảm nhiệt Alg -F127 36 Hình 3.1 Kết phổ 1H-NMR NPC-F127-NPC 44 Hình 3.2 Kết phổ 1H-NMR NPC-F127-OH 45 Hình 3.3 Kết phổ FTIR NPC-F127-OH 46 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR copolymer ghép CS -F127 47 Hình 3.5 Kết phổ FTIR CS-F127 (1:15) 48 Hình 3.6 Phổ FT-IR Na-Alg, Cys Na-Alg-Cys tổng hợp sử dụng EDC/NHS/Cys 50 Hình 3.7 Phổ 1H-NMR Na-Alg-Cys dung môi D2O 51 Hình 3.8 Phổ FT-IR Alg-F127 (1:10) 52 Hình 3.9 Phổ 1HNMR Alg-F127 53 Hình 3.10 Chuyển hóa sol-gel dung dịch CS-F127 10 °C va 37 °C 54 Hình 3.11 Đồ thị thể tương quan nồng độ copolymer (%wt/v) nhiệt độ lên trình chuyển pha sol-gel 55 Hình 3.12 (A) Hình ảnh chụp tiêu chí đánh giá hình thành gel, giản đồ (B) thể mối tương quan nồng độ Alg-F127 nhiệt độ tạo gel môi trường nước 57 Hình 3.13 Đồ thị thể mối liên hệ nồng độ copolymer nhiệt độ chuyển sol-gel 59 Hình 3.14 Hàm lượng nước (%) hydrogel hấp thụ ngâm dung dịch PBS 1X (pH 7,4) thời gian 12 ngày (n=3) 62 Hình 3.15 Hàm lượng nước (%) hydrogel hấp thụ ngâm dung dịch 2mg/ml collagenase pha PBS 1X (pH 7,4) thời gian 12 ngày (n=3) 63 Hình 3.16 Hàm lượng nước (%) hydrogel hấp thụ ngâm môi trường DMEM có bổ sung 10% FBS thời gian 12 ngày (n=3) 64 Hình 3.17 Tốc độ phân rã hydrogel môi trường ngâm: PBS, collagenase DMEM (n= 3) 65 Hình 3.18 Đồ thị thể tương quan nồng độ copolymer (%) nhiệt độ mẫu CS-F127 gel (a), Alg-F127 gel (b), CS-F127-QU/RE (c); AlgF127-QU/RE (d) 69 Hình 3.19 Kết giải phóng QU từ hệ hydrogel CS-F127/Alg-F127 70 Hình 3.20 Kết giải phóng RE từ hệ hydrogel CS-F127/Alg-F127 71 Hình 3.21 Kết giải phóng RE (a) QU (b) từ hai hệ hydrogel CS-F127 Alg-F127 mang loại hoạt chất 74 Hình 3.22 Đồ thị biểu diễn % khối lượng giảm cấp sinh học theo thời gian mẫu hydrogel CS-F127/Alg-F127 mang hoạt chất RE (a), QU (b) môi trường PBS pH 7.4 80 Hình 3.23 Đồ thị biểu diễn % khối lượng giảm cấp sinh học theo thời gian mẫu hydrogel mang hoạt chất RE, QU môi trường PBS pH 7.4 (a) DMEM (b) 81 Hình 3.24 Đồ thị thể ổn định hydrogel Alg-F127 sau lưu trữ tháng (M1), tháng (M2), tháng (M3) tháng (M6) nhiệt độ bảo quản °C (a) 37 °C (b) 83 Hình 3.25 Đồ thị thể ổn định hydrogel CS-F127 sau lưu trữ tháng (M1), tháng (M2), tháng (M3) tháng (M6) nhiệt độ bảo quản °C (a) 37 °C (b) 83 Hình 3.26 Độ ổn định hoạt chất RE (a), QU (b) đánh giá sau tháng lưu trữ môi trường nước nhiệt độ phòng 37 ± 2°C ± 2°C mang CS-F127/Alg-F127 85 DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: ĐƯỜNG CHUẨN CỦA QU XÂY DỰNG BẰNG UV-VIS TRONG MÔI TRƯỜNG ETOH:PBS (1:1) 96 PHỤ LỤC 2: ĐƯỜNG CHUẨN CỦA RE XÂY DỰNG BẰNG UV-VIS TRONG MÔI TRƯỜNG DMSO:PBS (1:1) 96 PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA HOẠT CHẤT TRONG HỆ HYDROGEL 97 PL3.1 Kết đo hàm lượng hoạt chất RE hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C 97 PL3.2 Phần trăm hoạt chất RE lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C 97 PL3.3 Kết đo hàm lượng hoạt chất QU hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C 97 PL3.4 Phần trăm hoạt chất QU lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C 98 PL3.5 Kết đo hàm lượng hoạt chất RE hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C 98 PL3.6 Phần trăm hoạt chất RE lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C 98 PL3.7 Kết đo hàm lượng hoạt chất QU hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C 98 PL3.8 Phần trăm hoạt chất QU lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C 99 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ vi DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC ix MỤC LỤC I TÓM TẮT I ABSTRACT II MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1.1 TỔNG QUAN PLURONIC F127 1.1.1 Giới thiệu Pluronic F127 1.1.2 Tính chất Pluronic 1.1.3 Ứng dụng Pluronic 1.2 TỔNG QUAN VỀ CHITOSAN 1.2.1 Nguồn gốc cấu tạo chitosan 1.2.2 Tính chất 1.2.3 Ứng dụng chitosan y sinh 1.3 TỔNG QUAN VỀ ALGINATE 1.3.1 Nguồn gốc cấu tạo Alginate 1.3.2 Tính chất ứng dụng Alginate 1.3.2.1 Tính tương hợp sinh học 10 1.4 TỔNG QUAN VỀ HYDROGEL 10 1.4.1 Khái niệm hydrogel 10 1.4.2 Phân loại hydrogel thông minh 11 1.4.2.1 Hydrogel đáp ứng kích thích hóa học 11 1.4.2.2 Hydrogel đáp ứng kích thích vật lý 12 1.4.3 Tính chất hydrogel 12 1.4.3.1 Tính trương nở 12 1.4.3.2 Tính phân hủy sinh học 12 1.4.3.3 Tính tương hợp sinh học 13 1.4.4 Ứng dụng hydrogel nhạy nhiệt 13 1.4.4.1 Ứng dụng lĩnh vực tái tạo mô 13 1.4.4.2 Ứng dụng chữa lành vết thương 14 1.4.4.3 Ứng dụng mang nhả thuốc 14 1.5 TỔNG QUAN VỀ QUERCETIN VÀ RESVERATROL 15 1.5.1 Quercetin 15 1.5.1.1 Cấu trúc hóa học số tính chất lý hóa QU 15 1.5.1.2 Hoạt tính sinh học QU 16 1.5.2 Resveratrol 17 1.5.2.1 Cấu trúc hóa học số tính chất lý hóa RE 17 1.5.2.2 Hoạt tính sinh học RE 18 1.6 TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU 19 1.6.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 19 1.6.2 Tình hình nghiên cứu nước 23 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 NGUYÊN LIỆU - HÓA CHẤT VÀ PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 26 2.1.1 Nguyên liệu – hóa chất 26 2.1.2 Dụng cụ trang thiết bị 27 2.1.3 Các phương pháp phân tích 29 2.1.3.1 Đánh giá cấu trúc hệ copolymer 1H-NMR 29 2.1.3.2 Phổ hồng ngoại (FT-IR) 29 2.1.3.3 Phổ tử ngoại – khả kiến (UV-Vis) 30 2.2 TỔNG HỢP HYDROGEL NHẠY NHIỆT TRÊN CƠ SỞ CHITOSAN VÀ PLURONIC F127 30 2.2.1 Tổng hợp NPC-F127-NPC 31 2.2.2 Tổng hợp NPC-F127-OH 33 2.2.3 Tổng hợp hệ copolymer ghép chitosan-g- Pluronic F127 (CS -F127) 34 2.3 TỔNG HỢP HYDROGEL NHẠY NHIỆT TRÊN CƠ SỞ ALGINATE VÀ PLURONIC F127 34 2.3.1 Tổng hợp dẫn xuất Alginate-cystamine (Na-Alg-Cys) 34 2.3.2 Tổng hợp copolymer ghép alginate-g- Pluronic F127(Alg -F127) 35 2.4 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG ĐỘ POLYMER LÊN NHIỆT ĐỘ TẠO GEL 36 2.4.1 Khảo sát đặc tính nhạy nhiệt copolymer ghép CS -F127 36 2.4.2 Khảo sát đặc tính nhạy nhiệt copolymer ghép Alg -F127 37 2.4.3 Khảo sát thời gian giảm cấp hydrogel copolymer ghép 37 2.5 ĐIỀU CHẾ, KHẢO SÁT VÀ ĐÁNH GIÁ CÁC HỆ HYDROGEL NHẠY NHIỆT MANG, NHẢ CÁC HOẠT CHẤT SINH HỌC 38 2.5.1 Điều chế hệ hydrogel có mang loại thuốc/hoạt chất sinh học 38 2.5.1.1 Điều chế hệ hydrogel CS -F127 Alg -F127 mang QU 38 2.5.1.2 Điều chế hệ hydrogel CS -F127 Alg -F127 mang RE 39 2.5.1.3 Điều chế hệ hydrogel CS -F127 Alg -F127 mang QU RE 39 2.5.2 Xác định hàm lượng QU RE nang hóa hệ hydrogel 39 2.5.3 Kiểm tra tính nhạy nhiệt xác định điểm chuyền pha hệ hydrogel CS -F127/ Alg-F127 mang QU, RE QU + RE 39 2.5.4 Khảo sát đánh giá khả nhả hoạt chất khỏi hệ hydrogel theo thời gian 40 2.5.4.1 Khảo sát đánh giá khả nhả hoạt chất khỏi hệ hydrogel 40 2.5.4.2 Nghiên cứu động học giải phóng thuốc khỏi hệ hydrogel 41 2.5.4.3 Xác định thời gian T1/2 giải phóng nửa thuốc in vitro 42 2.5.5 Khảo sát đánh giá thời gian giảm cấp hệ hydrogel hoạt tính môi trường giả sinh học 42 2.5.6 Khảo sát đánh giá độ ổn định hoạt chất hệ hydrogel 42 CHƯƠNG 3.1 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 KẾT QUẢ TỔNG HỢP HYDROGEL NHẠY NHIỆT CS -F127 44 3.1.1 Kết tổng hợp NPC-F127-NPC 44 3.1.2 Kết tổng hợp NPC-F127-OH 45 3.1.3 Kết tổng hợp CS -F127 47 3.2 KẾT QUẢ TỔNG HỢP HYDROGEL NHẠY NHIỆT ALG -F127 49 3.2.1 Kết tổng hợp Na-Alg-Cys 49 3.2.2 Kết tổng hợp Alg -F127 51 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG ĐỘ POLYMER LÊN NHIỆT ĐỘ TẠO GEL 53 3.3.1 Kết khảo sát đặc tính nhạy nhiệt copolymer ghép CS-F127 53 3.3.2 Kết khảo sát đặc tính nhạy nhiệt copolymer ghép Alg-F127 56 3.3.3 Kết khảo sát thời gian giảm cấp hydrogel copolymer ghép 60 3.3.3.1 Kết đánh giá khả hấp thụ nước hydrogel 60 3.3.3.2 Kết đánh giá khả giảm cấp hydrogel 64 3.4 KẾT QUẢ ĐIỀU CHẾ, KHẢO SÁT VÀ ĐÁNH GIÁ CÁC HỆ HYDROGEL NHẠY NHIỆT MANG, NHẢ CÁC HOẠT CHẤT SINH HỌC 66 3.4.1 Điều chế hệ hydrogel có mang loại thuốc/hoạt chất sinh học 66 3.4.2 Kiểm tra tính nhạy nhiệt xác định điểm chuyền pha hệ hydrogel CS -F127/ Alg-F127 mang QU, RE QU + RE 68 3.4.3 Khảo sát đánh giá khả nhả hoạt chất khỏi hệ hydrogel theo thời gian 69 3.4.3.1 Kết khảo sát đánh giá khả nhả đơn hoạt chất khỏi hệ hydrogel 69 3.4.3.2 Kết khảo sát đánh giá khả nhả hoạt chất khỏi hệ hydrogel mang hoạt chất 73 3.4.3.3 Kết khảo sát đánh giá T1/2 hệ hydrogel mang hoạt chất 76 3.4.4 Khảo sát đánh giá thời gian giảm cấp hệ hydrogel hoạt tính mơi trường giả sinh học 78 3.4.5 Khảo sát đánh giá độ ổn định hoạt chất hệ hydrogel 82 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 86 4.1 KẾT LUẬN 86 4.2 KIẾN NGHỊ 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO 88 PHỤ LỤC 96 TÓM TẮT Trong nghiên cứu này, hydrogel nhạy nhiệt điều chế sở F127 ghép với chitosan/alginate kết hợp với hoạt chất QU/RE hỗ trợ điều trị dạng nano tạo màng gel thông minh đa chức có nhiều hoạt tính để phủ vết thương CS-F127 (1:15); Alg-F127 (1:10) tốt tỷ lệ ghép, cấu trúc chứng minh phổ 1HNMR phổ hồng ngoại FT-IR Các hệ trước sau mang hoạt chất có điểm tạo gel 30-35 °C điểm tan gel 50 °C Khả hấp thụ nước tốc độ phân rã hệ hydrogel phụ thuộc tuyệt đối vào nồng độ copolyme sử dụng Hiệu mang QU/RE hydrogel CS-F127/Alg-F127 đạt 98% Thời gian giữ hoạt chất T1/2 cao nhiều so với QU/RE tự Thời gian giảm cấp hệ hydrogel mang hoạt chất kéo dài 12 ngày, độ ổn định hoạt chất tháng, cho thấy khả hydrogel Alg-F127 CS-F127 mang hoạt chất thích hợp cho ứng dụng y sinh học đặc biệt điều trị vết thương I Hình 3.26 Độ ổn định hoạt chất RE (a), QU (b) đánh giá sau tháng lưu trữ mơi trường nước nhiệt độ phịng 37 ± 2°C ± 2°C mang CS-F127/Alg-F127 Điều cho thấy sau mang vào hệ hydrogel, không làm hoạt chất mà cịn tăng tính ổn định chúng lên Chứng tỏ tiềm lớn hệ hydrogel việc mang hoạt chất hỗ trợ điều trị 85 CHƯƠNG 4.1 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã tổng hợp thành công hệ hydrogel polysaccharide (chitosan, alginate) ghép Pluronic F127, CS-F127 (1:15) Alg-F127 (1:10) tốt tỷ lệ, cấu trúc chứng minh phổ 1HNMR phổ hồng ngoại FT-IR Các hệ trước sau mang hoạt chất có điểm tạo gel 30-35 °C điểm tan gel 50 °C thích hợp cho ứng dụng y sinh học Kết nghiên cứu cho thấy môi trường ngâm ( H2O, PBS, DMEM ) không ảnh hưởng đến khả hấp thụ nước tốc độ phân rã hệ hydrogel chúng phụ thuộc tuyệt đối vào nồng độ copolyme sử dụng Ở nồng độ cao (20%), tốc độ phân rã Alg-F127 nhanh, ngược lại CS-F127 chậm Hiệu mang QU/RE hydrogel CS-F127/Alg-F127 đạt 98% cho thấy ổn định hoạt chất nang hóa hydrogel Kết nhả hoạt chất QU/RE Alg-F127 ổn định CS-F127 AlgF127 giải phóng phi Fickian có lồng ghép, chi phối hai tượng khuếch tán trương nở CS-F127 khuếch tán nồng độ T1/2 in vitro hoạt chất hệ hydrogel Alg-F127/CS-F127 mang hoạt chất ngắn so với Alg-F127/CS-F127 mang hoạt chất Thời gian giảm cấp hệ hydrogel mang hoạt chất kéo dài 12 ngày, độ ổn định hoạt chất tháng, cho thấy khả ứng dụng hydrogel Alg-F127 CS-F127 mang hoạt chất ứng dụng chữa lành vết thương 86 4.2 KIẾN NGHỊ Điều chế, khảo sát đánh giá hệ hydrogel mang hoạt chất tăng sinh L-glutamic (tiền tố tổng hợp collagen), L-arginine (tham gia trình dãn mạch vết thương, kích thích phát triển mạch máu vết thương) Khảo sát, đánh giá khả bám dính hệ hydrogel bề mặt da Nghiên cứu khảo sát đánh giá hoạt tính sinh học hệ hydrogel cấp độ tế bào gồm: khảo sát đánh giá tác động tăng sinh nguyên bào sợi hệ hydrogel khảo sát đánh giá khả kháng khuẩn hệ hydrogel Từ lựa chọn hệ hydrogel phù hợp cho thí nghiệm in vivo Khảo sát đánh giá hiệu chữa lành vết thương mơ hình chuột đái tháo đường 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO BVNTTW, 2018, Báo cáo Hội nghị tổng kết hoạt động dự án phòng chống đái tháo đường Quốc gia năm 2017 triển khai kế hoạch năm 2018 Dam, D.H.M., S.A Jelsma, and A.S Paller, 2018, Impaired wound healing in diabetic ulcers: accelerated healing through depletion of ganglioside Wound Healing 1: p 167-175 Hồng, N.T., 2015, Tài liệu hướng dẫn “chăm sóc bàn chân bệnh nhân đái tháo đường" Khoa nội tiết bệnh viện Bạch Mai Wu, L., et al., 2015, Dressings for treating foot ulcers in people with diabetes: an overview of systematic reviews Cochrane Database of Systematic Reviews, (7) Percival, S.L., et al., 2018, Mode of action of poloxamer‐based surfactants in wound care and efficacy on biofilms International wound journal 15(5): p 749-755 Hospodiuk, M., et al., Extrusion-based biofabrication in tissue engineering and regenerative medicine 2016, Springer International Publishing: Cham p 1-27 Truong, V.X., K.M Tsang, and J.S Forsythe, 2017, Nonswelling clickcross-linked gelatin and PEG hydrogels with tunable properties using pluronic linkers Biomacromolecules 18(3): p 757-766 Malli, S., et al., 2017, In situ forming pluronic® F127/chitosan hydrogel limits metronidazole transmucosal absorption European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 112: p 143-147 Akbar, M.U., et al., 2018, In-vivo anti-diabetic and wound healing potential of chitosan/alginate/maltodextrin/pluronic-based mixed polymeric micelles: Curcumin therapeutic potential International journal of biological macromolecules 120: p 2418-2430 10 Crespi, M.C., et al., 2018, Agarose hydrogel containing immobilized pH buffer microemulsion without increasing permselectivity Talanta 177: p 191-196 11 Shamsi, S., 2015, Development and evaluation of curcumin-loaded Pluronic F127 nanoformulation 12 Mortensen, K., 1993, PEO-PPO-PEO triblock copolymer in aqueous solution Micelle formation and crystallization Le Journal de Physique IV 3(C8): p C8-157-C8-160 88 13 Choi, J.H., et al., 2011, Self-assembled nanogel of pluronic-conjugated heparin as a versatile drug nanocarrier Macromolecular research 19(2): p 180-188 14 Khoa, N.C., 2016, Vật liệu polyme thông minh ứng dụng y sinh NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ Hà Nội 15 Dutta, P.K., J Dutta, and V Tripathi, 2004, Chitin and chitosan: Chemistry, properties and applications 16 Rodrigues, A.D., Scarless wound healing 2000: CRC Press 17 JING, S.B., et al., 1997, Effect of chitosan on renal function in patients with chronic renal failure Journal of pharmacy and pharmacology 49(7): p 721-723 18 Kean, T and M Thanou, 2010, Biodegradation, biodistribution and toxicity of chitosan Advanced drug delivery reviews 62(1): p 3-11 19 Đào Tố Quyên, N.T.L., Hà Thị Anh Đào cộng 2006, Nghiên cứu thử nghiệm PDP (chitosan) làm chất phụ gia sản xuất giò lụa, bánh Viện dinh dưỡng - Trung tâm kỹ thuật an toàn vệ sinh thực phẩm Việt Nam 20 Ahmed, S., et al., 2015, Chitosan based dressings for wound care Immunochem Immunopathol 1(2): p 1-6 21 Tran, N.Q., et al., 2011, In situ forming and rutin-releasing chitosan hydrogels as injectable dressings for dermal wound healing Biomacromolecules 12(8): p 2872-2880 22 Ahmed, S and S Ikram, 2016, Chitosan based scaffolds and their applications in wound healing Achievements in the life sciences 10(1): p 27-37 23 Ahmed, S., Alginates: Applications in the Biomedical and Food Industries 2019: John Wiley & Sons 24 Panikkar, R and D.J Brasch, 1996, Composition and block structure of alginates from New Zealand brown seaweeds Carbohydrate Research 293(1): p 119-132 25 Saraswathi, S.J., B Babu, and R Rengasamy, 2003, Seasonal studies on the alginate and its biochemical composition I: Sargassum polycystum (Fucales), Phaeophyceae Phycological research 51(4): p 240-243 26 Pawar, S.N and K.J Edgar, 2012, Alginate derivatization: a review of chemistry, properties and applications Biomaterials 33(11): p 32793305 89 27 Guo, X., et al., 2020, Structures, properties and application of alginic acid: A review International Journal of Biological Macromolecules 28 Lee, K.Y and D.J Mooney, 2012, Alginate: properties and biomedical applications Progress in polymer science 37(1): p 106-126 29 Orive, G., et al., 2002, Biocompatibility of microcapsules for cell immobilization elaborated with different type of alginates Biomaterials 23(18): p 3825-3831 30 Qin, Y., 2004, Gel swelling properties of alginate fibers Journal of applied polymer science 91(3): p 1641-1645 31 Bahram, M., N Mohseni, and M Moghtader, An introduction to hydrogels and some recent applications, in Emerging concepts in analysis and applications of hydrogels 2016, IntechOpen 32 Janis, J.E and B Harrison, 2014, Wound healing: part I Basic science Plastic and reconstructive surgery 133(2): p 199e-207e 33 Pal, K., A Banthia, and D Majumdar, 2009, Polymeric hydrogels: characterization and biomedical applications Designed monomers and polymers 12(3): p 197-220 34 Gantwerker, E.A and D.B Hom, 2012, Skin: histology and physiology of wound healing Clinics in plastic surgery 39(1): p 85-97 35 Mehrabani, D., et al., 2015, The healing effect of curcumin on burn wounds in rat World journal of plastic surgery 4(1): p 29 36 Park, H., K Park, and W.S Shalaby, Biodegradable hydrogels for drug delivery 1993: CRC Press 37 Cody, V., 1988, Plant flavonoids in biology and medicine Progress in clinical and biological research 280 38 Baur, J.A and D.A Sinclair, 2006, Therapeutic potential of resveratrol: the in vivo evidence Nature reviews Drug discovery 5(6): p 493-506 39 Salmon, A., 1985, IARC monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risk of Chemicals to Humans British Journal of Industrial Medicine 42(3): p 214 40 Young, I and J McEneny, 2001, Lipoprotein oxidation and atherosclerosis Biochemical Society Transactions 29(2): p 358-362 41 Gambini, J., et al., 2015, Properties of resveratrol: in vitro and in vivo studies about metabolism, bioavailability, and biological effects in animal models and humans Oxidative medicine and cellular longevity 2015 90 42 Bass, T.M., et al., 2007, Effects of resveratrol on lifespan in Drosophila melanogaster and Caenorhabditis elegans Mechanisms of ageing and development 128(10): p 546-552 43 Regitz, C., et al., 2016, Resveratrol reduces amyloid-beta (Aβ 1–42)induced paralysis through targeting proteostasis in an Alzheimer model of Caenorhabditis elegans European journal of nutrition 55(2): p 741747 44 Venturini, C.D., et al., 2010, Resveratrol and red wine function as antioxidants in the nervous system without cellular proliferative effects during experimental diabetes Oxidative Medicine and Cellular Longevity 3(6): p 434-441 45 Hunt, T.J., Sustained release poloxamer containing pharmaceutical compositions 2015, Google Patents 46 Puig-Rigall, J., et al., 2018, Phase behaviour, micellar structure and linear rheology of tetrablock copolymer Tetronic 908 Journal of colloid and interface science 524: p 42-51 47 Valerón Bergh, V.J., et al., 2018, Evaluation of porphyrin loaded dry alginate foams containing poloxamer 407 and β-cyclodextrin-derivatives intended for wound treatment Pharmaceutical development and technology 23(8): p 761-770 48 Palumbo, F.P., et al., 2016, New Surfactant-based Dressing Product to Improve Wound Closure Rates of Nonhealing Wounds: A European Multicenter Study Including 1036 Patients Wounds: a compendium of clinical research and practice 28(7): p 233-240 49 Amin, N and J Doupis, 2016, Diabetic foot disease: from the evaluation of the “foot at risk” to the novel diabetic ulcer treatment modalities World journal of diabetes 7(7): p 153 50 Baur, J.A., et al., 2006, Resveratrol improves health and survival of mice on a high-calorie diet Nature 444(7117): p 337-342 51 Szkudelski, T and K Szkudelska, 2011, Anti‐diabetic effects of resveratrol Annals of the New York Academy of Sciences 1215(1): p 34-39 52 Szkudelska, K and T Szkudelski, 2010, Resveratrol, obesity and diabetes European journal of pharmacology 635(1-3): p 1-8 53 Elbe, H., et al., 2015, Amelioration of streptozotocin-induced diabetic nephropathy by melatonin, quercetin, and resveratrol in rats Human & experimental toxicology 34(1): p 100-113 91 54 Elbe, H., et al., 2015, Melatonin, quercetin and resveratrol attenuates oxidative hepatocellular injury in streptozotocin-induced diabetic rats Human & experimental toxicology 34(9): p 859-868 55 Jeyaraman, M.M., et al., 2020, Resveratrol for adults with type diabetes mellitus Cochrane Database of Systematic Reviews, (1) 56 Movahed, A., et al., 2020, Efficacy and Safety of Resveratrol in Type Diabetes Patients: A Two-Month Preliminary Exploratory Trial Nutrients 12(1): p 161 57 Athar, M., et al., 2007, Resveratrol: a review of preclinical studies for human cancer prevention Toxicology and applied pharmacology 224(3): p 274-283 58 Walle, T., et al., 2004, High absorption but very low bioavailability of oral resveratrol in humans Drug metabolism and disposition 32(12): p 1377-1382 59 Almeida, L., et al., 2009, Pharmacokinetic and safety profile of trans‐ resveratrol in a rising multiple‐dose study in healthy volunteers Molecular nutrition & food research 53(S1): p S7-S15 60 Yang, D.K and H.-S Kang, 2018, Anti-diabetic effect of cotreatment with quercetin and resveratrol in streptozotocin-induced diabetic rats Biomolecules & therapeutics 26(2): p 130 61 Edwards, J and S Stapley, 2010, Debridement of diabetic foot ulcers Cochrane Database of systematic reviews, (1) 62 Tú, N.T.N., 1997, Nghiên cứu chế tạo chitosan xây dựng tiêu chuẩn dược dụng dùng y tế Báo cáo tổng kết nghiên cứu khoa học thuộc chương trình nhà nước Tạo ngồn nguyên liệu làm thuốc chữa bệnh mã số KY - 02 - 15 - 3- Ha Noi 63 Đông, Đ.T.H.a.T.H.D., Tổng hợp vật liệu nitrophenyl pluronic sử dụng bào chế màng polymer trị bỏng Tạp chí Dược học 55(6): p 1115 64 Trinh, H.T.N., 2017, Nghiên cứu điều chế Hydrogel nhạy cảm với nhiệt độ thể từ dẫn xuất Gelatin để mang nhả chậm Curcumin ứng dụng chữa lành vết thương Đại học Trà Vinh 65 Dang, L.H., et al., 2018, Injectable nanocurcumin-formulated chitosang-pluronic hydrogel exhibiting a great potential for burn treatment Journal of healthcare engineering 2018 92 66 Lisi, S., et al., 2011, Quercetin decreases proliferation of orbital fibroblasts and their release of hyaluronic acid Journal of endocrinological investigation 34(7): p 521-527 67 Zeng, G., et al., 2013, Resveratrol-mediated reduction of collagen by inhibiting proliferation and producing apoptosis in human hypertrophic scar fibroblasts Bioscience, biotechnology, and biochemistry 77(12): p 2389-2396 68 Fujisawa, T., et al., 2012, Cysteamine suppresses invasion, metastasis and prolongs survival by inhibiting matrix metalloproteinases in a mouse model of human pancreatic cancer PLoS One 7(4): p e34437 69 Ankrum, J.A., et al., 2014, Engineering cells with intracellular agent– loaded microparticles to control cell phenotype Nature protocols 9(2): p 233 70 Thakker, K.D and W.H Chern, 2003, Development and validation of in vitro release tests for semisolid dosage forms-case study Dissolution Technologies 10(2): p 10-16 71 Shaikh, H.K., R Kshirsagar, and S Patil, 2015, Mathematical models for drug release characterization: a review World J Pharm Pharm Sci 4(4): p 324-338 72 Ahuja, N., O.P Katare, and B Singh, 2007, Studies on dissolution enhancement and mathematical modeling of drug release of a poorly water-soluble drug using water-soluble carriers European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 65(1): p 26-38 73 Mircioiu, C., et al., 2019, Mathematical modeling of release kinetics from supramolecular drug delivery systems Pharmaceutics 11(3): p 140 74 Ritschel, W., 1970, Biological half-lives of drugs Drug Intelligence & Clinical Pharmacy 4(12): p 332-347 75 Martins, A.F., et al., 2011, Characterization of polyelectrolytes complexes based on N, N, N-trimethyl chitosan/heparin prepared at different pH conditions Carbohydrate Polymers 86(3): p 1266-1272 76 Cai, Y., et al., 2016, PCL–F68–PCL/PLGA–PEG–PLGA mixed micelles mediated delivery of mitoxantrone for reversing multidrug resistant in breast cancer RSC advances 6(42): p 35318-35327 77 Yuan, H., et al., 2014, Densification treatment and properties of carbon fiber reinforced contact strip Science and Engineering of Composite Materials 21(1): p 49-58 93 78 Wang, X., et al., 2016, Different amine-functionalized poly (diphenylsubstituted acetylenes) from the same precursor Polymer Chemistry 7(33): p 5312-5321 79 Nguyen, T.B.T., et al., 2016, Green processing of thermosensitive nanocurcumin-encapsulated chitosan hydrogel towards biomedical application Green Processing and synthesis 5(6): p 511-520 80 Grigor'ev, V., K Zaitseva, and I Kosachev, 1984, Effect of cystamine (2-aminoethanethiol) on morphology of gunshot wound healing (lightoptical and electron-microscopic study) Bulletin of Experimental Biology and Medicine 98(6): p 1713-1717 81 Yan, Y., et al., 2015, Synthesis of chiral ND-322, ND-364 and ND-364 derivatives as selective inhibitors of human gelatinase Bioorganic & medicinal chemistry 23(20): p 6632-6640 82 Wan, W., et al., 2015, BMSCs laden injectable amino-diethoxypropane modified alginate-chitosan hydrogel for hyaline cartilage reconstruction Journal of Materials Chemistry B 3(9): p 1990-2005 83 Kuzmanović, M., et al., 2017, Sodium-alginate biopolymer as a template for the synthesis of nontoxic red emitting Mn 2+-doped CdS nanoparticles RSC advances 7(84): p 53422-53432 84 Salomonsen, T., et al., 2008, Chemometric prediction of alginate monomer composition: A comparative spectroscopic study using IR, Raman, NIR and NMR Carbohydrate Polymers 72(4): p 730-739 85 Gómez-Ordóđez, E and P Rupérez, 2011, FTIR-ATR spectroscopy as a tool for polysaccharide identification in edible brown and red seaweeds Food hydrocolloids 25(6): p 1514-1520 86 Ashwinkumar, N., S Maya, and R Jayakumar, 2014, Redox-responsive cystamine conjugated chitin–hyaluronic acid composite nanogels RSC Advances 4(91): p 49547-49555 87 Ferentz, A.E., T.A Keating, and G.L Verdine, 1993, Synthesis and characterization of disulfide cross-linked oligonucleotides Journal of the American Chemical Society 115(20): p 9006-9014 88 Dong, Z., et al., 2018, H2O2-responsive nanoparticle based on the supramolecular self-assemble of cyclodextrin Frontiers in pharmacology 9: p 552 89 Tian, M., et al., 2016, Long-term and oxidative-responsive alginate– deferoxamine conjugates with a low toxicity for iron overload RSC advances 6(39): p 32471-32479 94 90 Mahou, R., et al., 2015, Tuning the properties of hydrogel microspheres by adding chemical cross-linking functionality to sodium alginate Chemistry of Materials 27(12): p 4380-4389 91 Zhao, Y., et al., 2012, Synthesis and characterization of disulfidecrosslinked alginate hydrogel scaffolds Materials Science and Engineering: C 32(8): p 2153-2162 92 Domard, A., 1987, pH and cd measurements on a fully deacetylated chitosan: application to CuII—polymer interactions International Journal of Biological Macromolecules 9(2): p 98-104 93 Gierszewska, M., J Ostrowska-Czubenko, and E Chrzanowska, 2018, pH-responsive chitosan/alginate polyelectrolyte complex membranes reinforced by tripolyphosphate European Polymer Journal 101: p 282290 94 Peppas, N.A and J.J Sahlin, 1989, A simple equation for the description of solute release III Coupling of diffusion and relaxation International journal of pharmaceutics 57(2): p 169-172 95 Dian, L., et al., 2014, Enhancing oral bioavailability of quercetin using novel soluplus polymeric micelles Nanoscale research letters 9(1): p 684 96 Vijayakumar, M.R., et al., 2016, Pharmacokinetics, biodistribution, in vitro cytotoxicity and biocompatibility of Vitamin E TPGS coated trans resveratrol liposomes Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 145: p 479-491 97 Vicentini, F.T., et al., 2011, Characterization and stability study of a water-in-oil microemulsion incorporating quercetin Drug Development and Industrial Pharmacy 37(1): p 47-55 98 Novo Belchor, M., et al., 2017, Evaluation of rhamnetin as an inhibitor of the pharmacological effect of secretory phospholipase A2 Molecules 22(9): p 1441 95 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: ĐƯỜNG CHUẨN CỦA QU XÂY DỰNG BẰNG UV-VIS TRONG MÔI TRƯỜNG ETOH:PBS (1:1) PHỤ LỤC 2: ĐƯỜNG CHUẨN CỦA RE XÂY DỰNG BẰNG UV-VIS TRONG MÔI TRƯỜNG DMSO:PBS (1:1) 96 PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA HOẠT CHẤT TRONG HỆ HYDROGEL PL3.1 Kết đo hàm lượng hoạt chất RE hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C Hàm lượng hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự RE ppm µM 3,00 13,14 2,42 10,58 1,98 8,68 1,76 7,73 1,38 6,05 CS-F127 RE ppm µM 2,69 11,79 2,56 11,20 2,44 10,67 2,25 9,87 2,14 9,37 Alg-F127 RE ppm µM 2,71 11,87 2,60 11,38 2,47 10,81 2,40 10,52 2,21 9,68 PL3.2 Phần trăm hoạt chất RE lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C Phần trăm hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự RE phần trăm lại 100 80,50 66,07 58,78 46,05 CS-F127 RE phần trăm lại 100 95,05 90,54 83,74 79,49 Alg-F127 RE phần trăm lại 100 95,87 91,06 88,60 81,52 PL3.3 Kết đo hàm lượng hoạt chất QU hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C Hàm lượng hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự QU ppm µM 6,00 19,85 4,50 14,89 3,77 12,48 2,78 9,18 2,32 7,67 CS-F127 QU ppm µM 5,89 19,49 5,80 19,20 5,54 18,33 5,46 18,06 5,14 17,01 97 Alg-F127 QU ppm µM 5,92 19,59 5,62 18,61 5,37 17,77 5,26 17,42 5,02 16,60 PL3.4 Phần trăm hoạt chất QU lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện ± °C Phần trăm hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự QU phần trăm lại 100 75,00 62,88 46,25 38,62 CS-F127 QU phần trăm lại 100 98,50 94,07 92,66 87,28 Alg-F127 QU phần trăm lại 100 95,00 90,73 88,91 84,73 PL3.5 Kết đo hàm lượng hoạt chất RE hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C Hàm lượng hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự RE ppm µM 3,00 13,14 2,42 10,58 1,98 8,68 1,76 7,73 1,38 6,05 CS-F127 RE ppm µM 2,69 11,79 2,29 10,02 1,97 8,62 1,62 7,11 1,38 6,04 Alg-F127 RE ppm µM 2,71 11,87 2,38 10,43 2,02 8,86 1,77 7,75 1,45 6,35 PL3.6 Phần trăm hoạt chất RE lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C Phần trăm hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự RE phần trăm lại 100 80,50 66,07 58,78 46,05 CS-F127 RE phần trăm lại 100 85,05 73,10 60,31 51,21 Alg-F127 RE phần trăm lại 100 87,85 74,66 65,24 53,51 PL3.7 Kết đo hàm lượng hoạt chất QU hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C 98 Hàm lượng hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự QU ppm µM 6,00 19,85 0,57 1,89 0,46 1,51 0,37 1,24 0,30 1,00 CS-F127 QU ppm µM 5,89 19,49 4,80 15,88 4,10 13,58 3,63 12,02 3,06 10,12 Alg-F127 QU ppm µM 5,92 19,59 5,03 16,65 4,30 14,24 3,83 12,67 2,99 9,91 PL3.8 Phần trăm hoạt chất QU lại hệ hydrogel sau thời gian lưu trữ điều kiện 37 ± °C Phần trăm hoạt chất hệ hydrogel Mẫu ban đầu tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ tháng lưu trữ Hoạt chất tự QU phần trăm lại 100 9,50 7,60 6,23 5,05 99 CS-F127 QU phần trăm lại 100 81,50 69,68 61,67 51,93 Alg-F127 QU phần trăm lại 100 85,00 72,68 64,68 50,58