Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 46 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
46
Dung lượng
0,96 MB
Nội dung
[...]... hóa chất tiếp tục đi vào pha khối phổ. Ở đây chúng bị ion hóa.Sau khi khối phổ, chúng sẽ tới bộ phận lọc • dựa trên khối lượng ,bộ lọc lựa chọn chỉ cho phép các hạt có khối lượng nằm trong một giới hạn nhất định đi qua • Thiết bị cảm biến có nhiệm vụ đếm số lượng các hạt có cùng khối lượng Thông tin này sau đó được chuyển đến máy tínhvà xuất ra kết quả gọi là khốiphổ • Khốiphổ là một biểu đồ phản ánh... amino acid có khối lượng khác nhau do đó khối lượng của một trình tự đủ nhỏ cũng nói lên được trình tự của nó (Giả sử Valin có khối lượng là 3, methionin là 5 thì một fragment có khối lượng là 8 sẽ có trình tự Valin – Methionin hoặc Methionin – Valin) Sự kết hợp các phươngpháp sinh học phân tử khác_ ứng dụng Khốiphổ kết hợp với sắc kí khí(Gas Chromatography Mass Spectometry) • Phươngpháp Sắc ký khí... hiệu sẽ được đưa ra dưới dạng bảng số hoặc đồ thị thích hợp Ngày nay trong phân tích khốiphổ người ta dùng các máy khốiphổ kế nguyên lý hoạt động của máy khốiphổ • Mẫu chất cần phân tích sẽ được chuyển thành trạng thái hơi, sau đó mới bắt đầu quá trình đo khốiphổ • Để đo được đặc tính của các phân tử cụ thể, máy khốiphổ sẽ chuyển chúng thành các ion,kiểm soát chuyển động của chúng bởi các điện từ... phận phân tích mà người ta chia các loại máy khốiphổ như sau: • • • • Bộ phận tích từ Bộ phận tích tứ cực Bộ phận tích theo thời gian Bộ phận tích cộng hưởng ion cyclotron Theo tính năng bộ ghi, người ta chia các máy khốiphổ thành hai loại: • Máy khốiphổ ký ghi bằng kính ảnh Tín hiệu phổ được ghi bằng kính ảnh ở dạng vạch có độ đen khác nhau • Máy khốiphổ kế: các tín hiệu của chùm ion được ghi dưới... Chromatography Mass Spectometry) • Phươngpháp Sắc ký khí kết hợp với Khối phổ( viết tắt là GC-MS hoặc GCMS) là một phươngpháp mạnh mẽ với độ nhạy cao được sử dụng trong các nghiên cứu về thành phần các chất trong không khí • Bản chất GC-MS là sự kết hợp của Sắc ký khí (Gas Chromatography) và Khối phổ (Mass Spectometry) Ngưỡng phát hiện của phương pháp này là 1 picogram (0.000000000001 gram) Cấu tạo của GC-MS... tròn, do đó các cực điện đổi chiều liên tục làm cho các mảnh polypeptide không bám được vào thành mà bay theo chiều xoắn ốc • Vận tốc bay của 1fragment phụ thuộc 2 yếu tố • điện tích (z) • khối lượng (m) • Máy khối phổ đo được thời gian, biết trước quãng đường => tính được vận tốc => xác định được chỉ số m/z của fragment • Các tín hiệu được phát hiện bởi detector và khuếch đại, cuối cùng biểu diễn trên... này sau đó được chuyển đến máy tínhvà xuất ra kết quả gọi là khốiphổ • Khốiphổ là một biểu đồ phản ánh số lượng các ion với các khối lượng khác nhau đã đi qua bộ lọc – Máy tính: Bộ phận chịu trách nhiệm tính toán các tín hiện do bộ cảm biến cung cấp và đưa ra kết quả khối phổ Công dụng – Phân tách: GC-MS có thể phân tách các hỗn hợp hóa chất phức tạp trong không khí hay trong nước Ở đây, tốc độ được... • Nhận dạng: Nếu trong mẫu có một chất lạ xuất hiện, khốiphổ có thể nhận dạng cấu trúc hóa học độc nhất của nó Cấu trúc của chất này sau đó được so sánh với một thư viện cấu trúc của các chất đã biết Nếu không tìm được chất tương ứng trong thư viện ,ta thu được một dữ liệu mới và đóng góp vào thư viện cấu trúc sau khi tiến hành thêm các biện pháp để xác định được chính xác loại hợp chất mới này •... (Mass Spectometry) Ngưỡng phát hiện của phươngpháp này là 1 picogram (0.000000000001 gram) Cấu tạo của GC-MS – Sắc ký khí (GC): phân tách hỗn hợp hóa chất thành một mạch theo từng chất tinh khiết – Khốiphổ (MS): ) xác định định tính và định lượng • A Cửa tiêm mẫu (injection port): 1 microliter dung môi chứa hỗn hợp các chất sẽ được tiêm vào hệ thống tại cửa này Mẫu sau đó được dẫn qua hệ thống bởi... dòng tia mà sau đó sẽ bị uốn cong bởi một từ trường ngoài • Các ion sau đó sẽ được thu nhận bằng đầu dò điện tử và thông tin tạo ra sẽ được phân tích và lưu trữ trong một máy vi tính Ứng dụng của máy khốiphổ trong phân tích protein • protein được tinh chế rồi cắt bằng enzyme pepsin Enzyme pepsin cắt polypeptide tại những điểm nhất định trên chuỗi (giống enzyme giới hạn ở acid nucleic) • Ta có thể dự