Điều chế và thiết lập tạp chất đối chiếu a và c của meloxicam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÕ MINH THẮNG ĐIỀU CHẾ VÀ THIẾT LẬP TẠP CHẤT ĐỐI CHIẾU A VÀ C CỦA MELOXICAM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÕ MINH THẮNG ĐIỀU CHẾ VÀ THIẾT LẬP TẠP CHẤT ĐỐI CHIẾU A VÀ C CỦA MELOXICAM NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS TS NGUYỄN ĐỨC TUẤN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả Võ Minh Thắng Luận văn Thạc sĩ – Khóa: 2019 – 2021 Ngành: Kiểm nghiệm Thuốc Độc chất – Mã số: 8720210 ĐIỀU CHẾ VÀ THIẾT LẬP TẠP CHẤT ĐỐI CHIẾU A VÀ C CỦA MELOXICAM Võ Minh Thắng Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Đức Tuấn Từ khoá: Tạp chất meloxicam, ethyl 4-hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine3-carboxylate 1,1-dioxide, (Z)-N-methyl meloxicam, N-[(2Z)-3,5-dimethylthiazol2(3H)-ylidene]-4-hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxamide 1,1dioxide Mở đầu: Tạp A tạp C có nguồn gốc từ trình tổng hợp meloxicam Trong chuyên luận nguyên liệu thành phẩm meloxicam dược điển Việt Nam V dược điển tham chiếu có quy định kiểm tra tạp A tạp C Trong danh mục chất chuẩn quốc gia chưa có tạp A tạp C chuẩn Cho đến nay, chưa có nghiên cứu nước cơng bố quy trình điều chế tạp A tạp C meloxicam Đối tượng phương pháp Đối tượng nghiên cứu: Tạp A tạp C meloxicam Phương pháp nghiên cứu: Tạp A điều chế từ ethyl 4-hydroxy-2-methyl-2H1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-dioxide phương pháp kết tinh với ethanol Tạp C tổng hợp phản ứng SN2 meloxicam methyl iodid môi trường dimethyl sulfoxid/kali hydroxyd tinh chế phương pháp kết tinh dimethylformamid Các sản phẩm điều chế xác định cấu trúc kỹ thuật phổ nghiệm, định lượng HPLC-PDA thiết lập chất đối chiếu Sau cùng, sử dụng hai tạp chất thiết lập chất đối chiếu để kiểm tra tạp A tạp C số nguyên liệu chế phẩm meloxicam thị trường theo BP 2020 Kết quả: Tạp A tinh chế với hiệu suất 87% (1,90 g) Tạp C tổng hợp tinh chế với hiệu suất toàn quy trình 67% (1,75 g) Hai sản phẩm điều chế có hàm lượng 99% tính ngun trạng, đủ điều kiện thiết lập chất đối chiếu Kết kiểm tra tạp A tạp C số nguyên liệu chế phẩm meloxicam thị trường cho thấy hàm lượng tạp A C nằm giới hạn cho phép Kết luận: Tạp A tạp C meloxicam điều chế thiết lập chất đối chiếu sử dụng kiểm tra tạp chất meloxicam i Master’s Thesis – Academic course: 2019-2021 Specialty: Drug Quality Control and Toxicology – Code: 8720210 PREPARATION AND STANDARDIZATION OF MELOXICAM IMPURITIES A AND C Vo Minh Thang Supervisor: Prof Dr Nguyen Duc Tuan Keywords: Meloxicam impurity, ethyl 4-hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine3-carboxylate 1,1-dioxide, (Z)-N-methyl meloxicam, N-[(2Z)-3,5-dimethylthiazol2(3H)-ylidene]-4-hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxamide 1,1dioxide Introduction: Meloxicam impurities A and C are process-related impurities The Vietnamese V and reference Pharmacopoeias require testing these impurities in meloxicam drug substance and drug products However, the reference standards of impurities A and C are not in the national list of reference standards There have been no published local studies on chemical synthesis of impurities A and C so far Materials and methods Object of the study: Meloxicam impurities A and C Methods: Impurity A was purified from ethyl 4-hydroxy-2-methyl-2H-1,2benzothiazine-3-carboxylate 1,1-dioxide by recrystallization with ethanol Impurity C was synthesized from meloxicam by SN2 reaction with iodomethane in dimethyl sulfoxide/potassium hydroxide, then purified by recrystallization with dimethylformamide The products were structurally determined by spectroscopic techniques, assayed by HPLC-PDA, and established as reference substance Finally, impurities A and C in meloxicam raw materials and corresponding pharmaceuticals were tested by HPLC method referenced by BP 2020, using these established reference standards Results: Impurity A was purified with yield of 87% (1.90 g) Impurity C was synthesized and purified with total yield of 67% (1.75g) The assay of both products were over 99% on the basis and conformed to establish reference standard Impurities A and C were tested in several meloxicam raw materials and available corresponding pharmaceuticals and the results showed that the concentration of these impurities was below the acceptance limit Conclusion: Meloxicam impurities A and C were successfully prepared and established as the reference standards for related compound test of meloxicam MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH x MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN .3 1.1 Tổng quan meloxicam .3 1.2 Tổng quan tạp A meloxicam 11 1.3 Tổng quan tạp C meloxicam 13 1.4 Kiểm nghiệm tạp A tạp C nguyên liệu chế phẩm meloxicam theo Dược điển Việt Nam Dược điển tham chiếu 14 1.5 Chất chuẩn đối chiếu 19 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .25 2.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.2 Nguyên vật liệu 25 2.3 Phương pháp nghiên cứu 26 Chương KẾT QUẢ .41 3.1 Tinh chế tạp A meloxicam 41 3.2 Tổng hợp tinh chế tạp C meloxicam 46 3.3 Xây dựng quy trình định lượng tạp A, tạp C phương pháp sắc ký lỏng 61 3.4 Đánh giá tạp A tạp C 68 3.5 Thiết lập chất đối chiếu tạp A tạp C 69 3.6 Kiểm tra tạp A tạp C meloxicam nguyên liệu thành phẩm meloxicam 77 Chương BÀN LUẬN 79 4.1 Điều chế tạp A 79 4.2 Tổng hợp tinh chế tạp C .80 4.3 Quy trình định lượng tạp A tạp C 82 4.4 Thiết lập chất đối chiếu tạp A tạp C 83 4.5 Kiểm tra tạp A tạp C nguyên liệu chế phẩm meloxicam .84 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 85 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ACN ANOVA BP BPCRS DĐVN DMF DMSO EDQM EP EPCRS ESI FDA HPLC ICRS IR ISO LC LD50 MS NOESY PDA PTN RSD Từ nguyên Acetonitrile Analysis of variance British Pharmacopoeia British Pharmacopoeia chemical reference substances Dược điển Việt Nam Dimethyl formamide Dimethyl sulfoxide European Directorate for the Quality of Medicines European Pharmacopoeia European Pharmacopoeia chemical reference standards Electrospray ionisation Food and Drug Administration High Performance Liquid Chromatography International chemical reference standard Infrared International Organization for Standardization Liquid Chromatography Lethal dose 50 Mass Spectrometry Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy Photo diode array Phịng thí nghiệm Relative Standard Deviation Tiếng Việt Phân tích phương sai Dược điển Anh Chuẩn đối chiếu hóa học Dược điển Anh Ủy ban Châu Âu chất lượng thuốc Dược điển Châu Âu Chuẩn đối chiếu hóa học Dược điển Châu Âu Ion hóa tia điện Cơ quản lý Thực phẩm Dược phẩm Sắc ký lỏng hiệu cao Chất chuẩn đối chiếu hóa học quốc tế Hồng ngoại Tổ chức Quốc tế Tiêu chuẩn hóa Sắc ký lỏng Liều gây chết 50% nhóm động vật thử nghiệm Khối phổ Phổ NOESY Đầu dò dãy diod quang Độ lệch chuẩn tương đối i Chữ viết tắt SKLM TB USP USPRS UV UV - Vis WHO Từ nguyên Sắc ký lớp mỏng Trung bình United States Pharmacopoeia United States Pharmacopeia Reference Substances Ultraviolet Ultraviolet – Visible World Health Organization Tiếng Việt Dược điển Mỹ Chất đối chiếu Dược điển Mỹ Tử ngoại Tử ngoại – khả kiến Tổ chức Y tế giới ii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Định tính meloxicam nguyên liệu Bảng 1.2 Các đỉnh đặc trưng phổ IR meloxicam Bảng 1.3 Định lượng meloxicam thành phẩm viên nén Bảng 1.4 Các tạp chất liên quan meloxicam đề cập Dược điển .9 Bảng 2.1 Hóa chất dung mơi dùng nghiên cứu 25 Bảng 2.2 Trang thiết bị dùng nghiên cứu .26 Bảng 2.3 Nồng độ dung dịch chuẩn tạp A tạp C 32 Bảng 3.1 Các đỉnh đặc trưng phổ IR sản phẩm tinh chế A .44 Bảng 3.2 Kết khảo sát thời gian phản ứng tổng hợp tạp C .47 Bảng 3.3 Kết khảo sát tỷ lệ mol meloxicam kali hydroxyd 48 Bảng 3.4 Kết khảo sát tỷ lệ mol meloxicam methyl iodid 49 Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại quy trình tổng hợp tạp C 50 Bảng 3.6 Các đỉnh đặc trưng phổ IR sản phẩm tinh chế C .54 Bảng 3.7 Dữ liệu phổ NMR sản phẩm tinh chế C tạp C chuẩn 59 Bảng 3.8 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống (n=6) 63 Bảng 3.9 Kết khảo sát khoảng tuyến tính tạp A tạp C 65 Bảng 3.10 Phân tích tính tuyến tính quy trình định lượng tạp A tạp C 65 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ lặp lại .65 Bảng 3.12 Kết khảo sát độ xác trung gian 66 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ quy trình định lượng tạp A 67 Bảng 3.14 Kết khảo sát độ quy trình định lượng tạp C .67 Bảng 3.15 Kết đo nhiệt độ nóng chảy tạp A tạp C .68 Bảng 3.16 Kết xác định độ ẩm tạp A tạp C 68 Bảng 3.17 Kết xác định tạp chất liên quan tạp A tạp C 68 Bảng 3.18 Các tiêu đánh giá tạp A tạp C 69 Bảng 3.19 Đánh giá đồng lọ tạp A 70 Bảng 3.20 Phân tích ANOVA yếu tố đánh giá đồng lọ tạp A 70 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Dữ liệu sắc ký đồ mẫu thành phẩm PL - 92 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 93 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 94 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 95 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 96 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 97 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 98 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 11 Phiếu phân tích tạp A chuẩn, tạp C chuẩn, meloxicam đối chiếu, meloxicam nguyên liệu PL - 99 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 100 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 101 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 102 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 103 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL - 104 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn